CN103931495A - 一种铁皮石斛组培繁育方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种铁皮石斛组培繁育方法，属于植物培育技术领域。提供了一种在人工控制条件下，对铁皮石斛种苗进行组培快速繁育，并在大棚内创造一个仿自然环境对铁皮石斛种苗进行驯化炼苗的组培繁育方法，建立了一套铁皮石斛组培繁育与人工丰产栽培标准化生产技术，实现铁皮石斛的快速繁育，从而满足铁皮石斛的市场需求。

Description

一种铁皮石斛组培繁育方法

技术领域

本发明涉及一种铁皮石斛组培繁育方法，属于植物培育技术领域。

背景技术

铁皮石斛是一种传统名贵中药，应用历史悠久，其具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、润喉明目、延年益寿的功效，市场需求很大，但是，野生铁皮石斛繁殖力低，供不应求。本发明是为满足铁皮石斛的市场需求，提供一种在人工控制条件下，对铁皮石斛种苗进行组培快速繁育，并在大棚内创造一个仿自然环境对铁皮石斛种苗进行驯化炼苗的组培繁育方法，建立一套铁皮石斛组培繁育与人工丰产栽培标准化生产技术。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种铁皮石斛组培繁育方法，以满足铁皮石斛市场的需求。

本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种铁皮石斛组培繁育方法，其特征在于：包括以下步骤：

1、外植体选取：采摘铁皮石斛外植体应避开霉雨季节与酷暑天气，繁育的材料取从尖端往下20厘米的嫩茎；

2、外植体消毒：取品质好、长得壮实的新鲜铁皮石斛，剪嫩端，去掉叶子；再用刀片切成长3-5厘米的小节，放入加有肥皂水的无菌水里浸泡1小时；然后，剥掉茎杆上的薄皮，上超净工作台，放到升汞里消毒20分钟；最后，用镊子把其从升汞里夹出，放到浓度为70％的酒精里浸泡10分钟；

3、外植体接种：把经过消毒的铁皮石斛外植体反复用无菌水冲洗；再用消毒好的镊子夹铁皮石斛茎部的中部，插放在MS+NAA0.2+BA2的培养基中，每瓶插3-4根；

4、培养：接种好以后，放入培养室培养，光照时间10-14小时，光照强度为3000LX，室内温度控制在24℃；

5、增殖培养：铁皮石斛外植体培养14-16天后出新芽，新芽长到1.5-2.5厘米时切下；再接到MS+BA5+NAA2的培养基中做增殖培养，从而得到原球茎；利用原球茎大量做增殖培养，得出一代母本苗；

6、生根培养：在MS+NAA（0.2-0.5）+土豆汁20％+活性炭10％的生根培养基中加入抗污杀菌剂200倍液，明显减少感染率，使感染率控制在﹤5%；

7、炼苗：

7A、选苗：从培养室挑选出苗高3到8厘米、茎粗在0.2厘米以上、肉质茎达3-4个节间、单株叶片数在5片以上、2厘米长的根达5-6条的瓶苗，放到大棚瓶内炼苗10天；

7B、洗苗：大棚瓶内炼苗10天后，开盖，用镊子把苗夹出，用清水彻底洗净根系上残留的培养基，除去黄叶片；清洗分为粗洗、细洗与精洗；

7C、消毒：精洗好的苗用多菌灵200倍液浸泡1分钟，捞出晾干备栽；

7D、炼苗基质：选用直径小于10毫米的松树的树皮平铺在苗床上，厚度为10-15公分，用多菌灵100倍液彻底浇透；

7E、种植：消毒好的苗晾干至根系发白变软即可；种在湿度为45%-55%的基质上；植株间距为5厘米；铁皮石斛苗不宜深栽，基质盖住根系就好，如果栽深了会影响基部新芽萌发；在栽苗过程中做好大棚的遮阳；刚种的苗一周内不宜浇水；

8、大棚管理：

保持棚内温度为18-28℃，空气湿度为80%；一周后，给新种的苗喷雾浇水；15天后，铁皮石斛苗基部开始萌发新芽，进行追肥；45天后，移栽到大棚基质上；夏天高温天气，大棚天窗全部打开，同时利用棚内喷淋系统降温，并且做好遮阳措施，浇水次数也会增加，夏天一般在早上8点开始浇水10点半结束，晚上还要补水，每周灌根一次；防治青虫与蜗牛，及霜霉病、斑腐病等病害的发生。

有益效果：本发明提供了一种在人工控制条件下，对铁皮石斛种苗进行组培快速繁育，并在大棚内创造一个仿自然环境对铁皮石斛种苗进行驯化炼苗的组培繁育方法，建立了一套铁皮石斛组培繁育与人工丰产栽培标准化生产技术，实现铁皮石斛的快速繁育，从而满足铁皮石斛的市场需求。

具体实施方式

以下参考具体实施方式，对本发明做进一步的说明。

本发明所述的铁皮石斛组培繁育方法，包括以下步骤：

1、外植体选取：采摘铁皮石斛外植体应避开霉雨季节与酷暑天气，繁育的材料取从尖端往下20厘米的嫩茎；

2、外植体消毒：取品质好、长得壮实的新鲜铁皮石斛，剪嫩端，去掉叶子；再用刀片切成长3-5厘米的小节，放入加有肥皂水的无菌水里浸泡1小时；然后，剥掉茎杆上的薄皮，上超净工作台，放到升汞里消毒20分钟；最后，用镊子把其从升汞里夹出，放到浓度为70％的酒精里浸泡10分钟；

3、外植体接种：把经过消毒的铁皮石斛外植体反复用无菌水冲洗；再用消毒好的镊子夹铁皮石斛茎部的中部，插放在MS+NAA0.2+BA2的培养基中，每瓶插3-4根；

4、培养：接种好以后，放入培养室培养，光照时间10-14小时，光照强度为3000LX，室内温度控制在24℃；

5、增殖培养：铁皮石斛外植体培养14-16天后出新芽，新芽长到1.5-2.5厘米时切下；再接到MS+BA5+NAA2的培养基中做增殖培养，从而得到原球茎；利用原球茎大量做增殖培养，得出一代母本苗；

6、生根培养：在MS+NAA（0.2-0.5）+土豆汁20％+活性炭10％的生根培养基中加入抗污杀菌剂200倍液，明显减少感染率，使感染率控制在﹤5%；

7、炼苗：

7A、选苗：从培养室挑选出苗高3到8厘米、茎粗在0.2厘米以上、肉质茎达3-4个节间、单株叶片数在5片以上、2厘米长的根达5-6条的瓶苗，放到大棚瓶内炼苗10天；

7B、洗苗：大棚瓶内炼苗10天后，开盖，用镊子把苗夹出，用清水彻底洗净根系上残留的培养基，除去黄叶片；清洗分为粗洗、细洗与精洗；

7C、消毒：精洗好的苗用多菌灵200倍液浸泡1分钟，捞出晾干备栽；

7D、炼苗基质：选用直径小于10毫米的松树的树皮平铺在苗床上，厚度为10-15公分，用多菌灵100倍液彻底浇透；

7E、种植：消毒好的苗晾干至根系发白变软即可；种在湿度为45%-55%的基质上；植株间距为5厘米；铁皮石斛苗不宜深栽，基质盖住根系就好，如果栽深了会影响基部新芽萌发；在栽苗过程中做好大棚的遮阳；刚种的苗一周内不宜浇水；

8、大棚管理：

保持棚内温度为18-28℃，空气湿度为80%；一周后，给新种的苗喷雾浇水；15天后，铁皮石斛苗基部开始萌发新芽，进行追肥；45天后，移栽到大棚基质上（所述大棚基质选十年以上、直径小于20mm的松树的树皮，根据粗细度的需要，将老松树皮打碎即可，基质内需添加20％经处理后的农家肥）；夏天高温天气，大棚天窗全部打开，同时利用棚内喷淋系统降温，并且做好遮阳措施，浇水次数也会增加，夏天一般在早上8点开始浇水10点半结束，晚上还要补水，每周灌根一次；防治青虫与蜗牛，及霜霉病、斑腐病等病害的发生。

本发明所述铁皮石斛组培繁育方法对铁皮石斛进行繁育的主要技术指标如下：

（1）铁皮石斛组培繁育中种苗的感染率控制在5%以内

表1   种苗感染率统计表

（2）组培规格苗达到98%以上：组培规格瓶苗，苗高达3-8厘米以上，茎粗在0.2厘米以上，肉质茎达3-4个节间，单株叶片数达5片以上，2厘米长以上的根达5-6条；

每批次随机取10瓶培养苗，每瓶随机取10株规格苗测量苗高、茎粗、肉质茎节间数、单株叶片数、2cm以上根数等指标，连续取5批次苗。测量结果如下：

表2   规格苗指标

（3）大棚育苗移栽1000平方米，成活率达到90%以上

表3    育苗移栽成活率统计

日  期	总数（瓶）	单株数（株）	死亡数（株）	成活数（株）	成活率（％）
						2013年5月	8600	387000	30500	356500	92.2
2013年7月	7500	337500	22830	314670	93.3
						2013年8月	8700	391500	28770	362730	92.7
2013年9月	12000	540000	29850	510150	94.5
						2013年10月	8200	369000	19450	349550	94.8

本发明的经济指标：

（1）课题实施年产梵净山铁皮石斛组培苗4.5万瓶，种苗单价20元/瓶，年产值90万元，利润9万元。

表4 培养组培苗瓶数

（2）示范基地建设：课题实施960平方米大棚仿自然人工示范栽培试验，驯化组培苗7.5万丛。

谢桥基地：移栽移动苗床13个，每个苗床长28米，宽1.7米，共计618.8平方米；和平基地移栽移动苗床7个，每个苗床长25米，宽1.8米，共计315平方米；共计栽植933.8平方米。

炼苗栽培10cm×10cm，共栽植93380丛。

Claims (1)

1. 一种铁皮石斛组培繁育方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）外植体选取：采摘铁皮石斛外植体应避开霉雨季节与酷暑天气，繁育的材料取从尖端往下20厘米的嫩茎；

（2）外植体消毒：取品质好、长得壮实的新鲜铁皮石斛，剪嫩端，去掉叶子；再用刀片切成长3-5厘米的小节，放入加有肥皂水的无菌水里浸泡1小时；然后，剥掉茎杆上的薄皮，上超净工作台，放到升汞里消毒20分钟；最后，用镊子把其从升汞里夹出，放到浓度为70％的酒精里浸泡10分钟；

（3）外植体接种：把经过消毒的铁皮石斛外植体反复用无菌水冲洗；再用消毒好的镊子夹铁皮石斛茎部的中部，插放在MS+NAA0.2+BA2的培养基中，每瓶插3-4根；

（4）培养：接种好以后，放入培养室培养，光照时间10-14小时，光照强度为3000LX，室内温度控制在24℃；

（5）增殖培养：铁皮石斛外植体培养14-16天后出新芽，新芽长到1.5-2.5厘米时切下；再接到MS+BA5+NAA2的培养基中做增殖培养，从而得到原球茎；利用原球茎大量做增殖培养，得出一代母本苗；

（6）生根培养：在MS+NAA（0.2-0.5）+土豆汁20％+活性炭10％的生根培养基中加入抗污杀菌剂200倍液，明显减少感染率，使感染率控制在﹤5%；

（7）炼苗：

（7A）选苗：从培养室挑选出苗高3到8厘米、茎粗在0.2厘米以上、肉质茎达3-4个节间、单株叶片数在5片以上、2厘米长的根达5-6条的瓶苗，放到大棚瓶内炼苗10天；

（7B）洗苗：大棚瓶内炼苗10天后，开盖，用镊子把苗夹出，用清水彻底洗净根系上残留的培养基，除去黄叶片；清洗分为粗洗、细洗与精洗；

（7C）消毒：精洗好的苗用多菌灵200倍液浸泡1分钟，捞出晾干备栽；

（7D）炼苗基质：选用直径小于10毫米的松树的树皮平铺在苗床上，厚度为10-15公分，用多菌灵100倍液彻底浇透；

（7E）种植：消毒好的苗晾干至根系发白变软即可；种在湿度为45%-55%的基质上；植株间距为5厘米；铁皮石斛苗不宜深栽，基质盖住根系就好，如果栽深了会影响基部新芽萌发；在栽苗过程中做好大棚的遮阳；刚种的苗一周内不宜浇水；

（8）大棚管理：

保持棚内温度为18-28℃，空气湿度为80%；一周后，给新种的苗喷雾浇水；15天后，铁皮石斛苗基部开始萌发新芽，进行追肥；45天后，移栽到大棚基质上；夏天高温天气，大棚天窗全部打开，同时利用棚内喷淋系统降温，并且做好遮阳措施，浇水次数也会增加，夏天一般在早上8点开始浇水10点半结束，晚上还要补水，每周灌根一次；防治青虫与蜗牛，及霜霉病、斑腐病等病害的发生。