CN103923127A - 一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途 - Google Patents
一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103923127A CN103923127A CN201410161185.4A CN201410161185A CN103923127A CN 103923127 A CN103923127 A CN 103923127A CN 201410161185 A CN201410161185 A CN 201410161185A CN 103923127 A CN103923127 A CN 103923127A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phenyl
- ferrocene
- preparation
- chloro
- ethanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Abstract
本发明公开了一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途，其中二茂铁吡唑酰胺类衍生物的结构由以下通式（1）表示：其中R选自-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-(CH2)3Cl、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、异丙烯基、苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-硝基苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基或苯乙基。本发明二茂铁吡唑酰胺类衍生物可用于制备抗肝癌药物或抗胃癌药物。本发明的二茂铁吡唑酰胺类衍生物对人肝癌细胞株和人胃癌细胞株有明显的抑制生长作用，因此可以用于制备抗肿瘤的药物。
Description
一、技术领域
本发明涉及一种二茂铁类衍生物，具体地说是一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途。
二、背景技术
二茂铁(Ferrocene)又名二环戊二烯合铁，具有独特的夹心型结构，二价铁离子被夹在两个平面环之间互为交错构型。1951年，Kealy和Pauson等首先合成二茂铁，随着研究的深入，二茂铁类衍生物在生物学、医学、微生物学等方面得到广泛应用，这是由它们结构和性质的特殊性决定的。二茂铁衍生物具有较好的亲油性，可以和细胞里的DNA、RNA和酶等各种物质发生作用，易于通过细胞膜，可用为治疗一些疾病的药物。二茂铁衍生物具有很好的氧化还原可逆性，在一些酶的作用下，能够参与体内一些新陈代谢作用。二茂铁衍生物具有较好的稳定性、较低的毒性、基团的可修饰性。另外，二茂铁衍生物因二茂铁的夹心型结构而具有一定的厚度，因而二茂铁衍生物与一些酶的活性中心接触受到了阻碍，具有较强的选择性。特别是含杂环骨架二茂铁化合物具有高效低毒的药理活性，在生物和医药方面有着诸多的应用。
三、发明内容
本发明旨在提供一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途，所要解决的技术问题是通过分子设计在二茂铁的结构上引入药效官能团从而增强其抗癌活性。
本发明遴选出吡唑酰胺类化合物将其引入到二茂铁的结构上。
本发明解决技术问题采用如下技术方案：
本发明二茂铁吡唑酰胺类衍生物，其特征在于其结构由以下通式（1）表示：
其中R选自-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-(CH2)3Cl、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、异丙烯基、苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-硝基苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基或苯乙基。优选基团为R=4-甲基苯基。
本发明二茂铁吡唑酰胺类衍生物的制备方法，其特征在于按以下步骤操作：
a、室温下向乙醇中加入钠和乙酰基二茂铁，室温反应3h，然后缓慢加入三氟乙酸乙酯，回流反应6h；反应结束后，反应液冷却，蒸去溶剂，剩余物倒入冰水中，加盐酸溶液调pH至5-6，有固体析出，过滤，干燥，柱层析（洗脱液按体积比为乙酸乙酯:石油醚=1:4）得中间体I。所述乙酰基二茂铁、钠和三氟乙酸乙酯的摩尔比为1:2:1.5；乙醇的用量为每毫摩尔乙酰基二茂铁1.5-2ml乙醇。
本步骤的反应过程如下：
b、将中间体I溶于乙醇中，再向其中缓慢滴加水合肼，室温反应5h；反应结束后蒸去溶剂，剩余物用甲醇和水混合溶剂（体积比甲醇：水=1：3）重结晶，即得中间体II；所述中间体I和水合肼的摩尔比为1:1.5，乙醇的用量为每毫摩尔乙酰基二茂铁1.5-2ml乙醇。
本步骤的反应过程如下：
c、将中间体II溶于乙腈中，再向其中依次加入三乙胺和酰氯，回流反应8-12小时；反应结束后蒸去溶剂，剩余物用乙酸乙酯溶解，加水萃取2-3次，合并有机相旋蒸，最后柱层析（洗脱液体积比乙酸乙酯：石油醚=1:5）分离得目标产物。所述中间体II、三乙胺和酰氯的摩尔比为1:1.2:1.5，乙腈的用量为每毫摩尔乙酰基二茂铁1.5-2ml乙醇。
所述酰氯的结构通式为：其中R选自-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-(CH2)3Cl、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、异丙烯基、苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-硝基苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基或苯乙基。
本步骤的反应过程如下：
本发明二茂铁吡唑酰胺类衍生物可用于制备抗肝癌药物或抗胃癌药物。
本发明的二茂铁吡唑酰胺类衍生物对人肝癌细胞株（Smmc7721）和人胃癌细胞株（SGC7901）有明显的抑制生长作用，因此可以用于制备抗肿瘤的药物。
四、附图说明
图1是本发明二茂铁吡唑酰胺类衍生物对Smmc7721细胞株的生长抑制率。
图2是本发明二茂铁吡唑酰胺类衍生物对SGC7901细胞株的生长抑制率。
由图1和图2可以看出，浓度为10μg/mL的二茂铁吡唑酰胺类衍生物对Smmc7721和SGC7901两种肿瘤细胞株的生长抑制率在15%至50%之间，其中化合物4o(R=-Ph-4-CH3)的活性最好，其次是化合物4h(R=-Ph)。另外，R为脂肪族取代基的化合物(4a-g)活性低于R为苯环类取代基的化合物(4h-q)活性。
五、具体实施方式
通过以下实施例进一步详细说明本发明，但应注意本发明的范围并不受这些实施例的任何限制。
实施例1：1-乙酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4a)的制备
a、取一个250ml单口瓶，先加入150ml乙醇和5g钠，再加入乙酰基二茂铁22.8g(0.1mol)，室温搅拌反应3h，随后加入三氟乙酸乙酯23g(0.15mol)，76℃回流反应6h；反应结束后，反应液冷却，蒸去溶剂，剩余物倒入冰水中，加盐酸溶液调pH值至5-6，有固体析出，过滤，干燥，柱层析（乙酸乙酯:石油醚=1:4）得中间体Ⅰ—5-(1,2,3-三氟甲基-2,4-二酮)二茂铁。产物为红色固体，产率83.25%。
b、取一个50ml单口瓶，先加入中间体I6.52g(0.02mol)，用20ml乙醇溶解，再缓慢滴加水合肼1.5g(0.03mol)，室温反应5h；反应结束后蒸去溶剂，剩余物用甲醇和水混合溶剂（体积比甲醇：水=1：3）重结晶，得中间体II—5-三氟甲基-3-二茂铁基吡唑。产物为黄色固体，产率70.36%。
c、取一个50ml单口瓶，加入中间体II3.20g(0.01mol)，用15ml乙腈溶解，再加入三乙胺1.21g(0.012mol)和乙酰氯0.94g(0.012mol)，80℃回流反应10h；反应结束后蒸去溶剂，剩余物用乙酸乙酯溶解，加水萃取两次，有机相旋蒸，柱层析（洗脱液体积比乙酸乙酯：石油醚=1:5）分离得目标产物1-乙酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率61.34%,m.p.129-131℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:2.73(s,3H),4.11(s,5H),4.39(s,2H),4.72(s,2H),6.87(s,1H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:66.5,69.5,69.8,97.5,101.2,106.8,109.8,139.6,143.3,159.8.Anal.Calc.for C16H11F3FeN2O:C,53.36;H,3.08;N,7.78%.Found:C,53.28;H,3.07;N,7.79%.
IR(KBr):v/cm-12926,1603,1507,1407,1370,1259,1129,987,814.
实施例2：1-丙酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4b)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以丙酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-丙酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率59.68%，m.p.71-72℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:1.24(t,J=7.2Hz,3H),3.42(m,2H),4.15(s,5H),4.65(s,2H),4.38(s,2H),6.71(s,1H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:8.3,29.3,67.2,69.2,69.7,69.9,70.9,73.7,108.3,147.3,173.6.Anal.Calc.for C17H13F3FeN2O:C,54.57;H,3.50;N,7.49%.Found:C,54.64;H,3.49;N,7.48%.
IR(KBr):v/cm-12926,2883,1764,1505,1412,1361,1265,1189,938,818.
实施例3：1-丁酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4c)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以丁酰氯代替乙酰氯，得到目标产
物1-丁酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率56.34%，m.p.141-142℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:1.03(t,J=7.2Hz,3H),1.77(h,J=7.2Hz,2H),3.16(d,J=7.2Hz,2H),4.15(s,5H),4.38(s,2H),4.65(s,2H),6.71(s,1H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:13.5,17.7,37.5,67.2,69.2,69.6,69.9,70.9,73.7,108.2,147.1,172.7.Anal.Calc.for C18H15F3FeN2O:C,
55.70;H,3.90;N,7.22%.Found:C,55.63;H,3.91;N,7.21%.
IR(KBr):v/cm-12926,2870,1758,1535,1400,1363,1258,1158,950,824.
实施例4：1-(4-氯)丁酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4d)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以4-氯丁酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-(4-氯)丁酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率53.46%，m.p.120-122℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:2.27(p,J=6.6Hz,2H),3.37(t,J=7.2Hz,2H),3.72(t,J=6Hz,2H),4.14(s,5H),4.43(s,2H),4.76(s,2H),6.87(s,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:26.8,32.0,34.0,44.1,55.2,60.6,64.1,70.1,96.7,111.9,154.0,163.2.Anal.Calc.for C18H14ClF3FeN2O:C,51.16;H,3.34;N,6.63%.Found:C,51.03;H,3.35;N,6.61%.
IR(KBr):v/cm-12912,2850,1755,1531,1392,1360,1317,1158,954,823.
实施例5：1-戊酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4e)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以正戊酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-戊酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率52.74%，m.p.71-72℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:0.98(t,J=7.2Hz,3H),1.47(qd,J=7.8Hz,7.2Hz,2H),1.78(dd,J=7.8Hz,7.2Hz,2H),3.16(t,J=7.2Hz,2H),4.10(s,5H),4.38(s,2H),4.72(s,2H),6.87(s,1H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:13.8,22.1,26.2,34.5,67.2,69.6,69.7,70.9,74.8,96.6,111.5,153.5,171.2.Anal.Calc.for C19H17F3FeN2O:C,56.74;H,4.26;N,6.97%.Found:C,56.64;H,4.27;N,6.94%.
IR(KBr):v/cm-12925,2870,1757,1535,1399,1320,1285,1158,950,825.
实施例6：1-特戊酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4f)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以特戊酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-特戊酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率45.30%，m.p.110-112℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:1.54(s,9H)4.16(s,5H),4.44(s,2H),4.80(s,2H),6.78(s,1H).13CNMR(150MHz,CDCl3)δ:27.7,29.6,42.1,47.5,55.8,57.1,70.2,110.5,120.0,152.6,165.5.Anal.Calc.for C19H17F3FeN2O:C,56.74;H,4.26;N,6.97%.Found:C,56.86;H,4.25;N,6.95%.
IR(KBr):v/cm-12925,1733,1533,1400,1318,1286,1149,929,817.
实施例7：1-丙烯酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4g)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以丙烯酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-丙烯酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率40.98%，m.p.103-105℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.12(s,5H),4.40(s,2H),4.74(s,2H),6.11(d,J=16.8Hz,1H),6.78(m,1H),6.91(s,1H),7.77(d,J=16.8Hz,1H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:67.3,69.6,74.6,96.6,111.4,118.5,128.0,131.9,133.3,153.8.Anal.Calc.for C17H11F3FeN2O:C,54.87;H,2.98;N,7.53%.Found:C,54.76;H,2.99;N,7.52%.
IR(KBr):v/cm-12926,1746,1532,1406,1318,1259,1157,987,814.
实施例8：1-苯甲酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4h)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以苯甲酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-苯甲酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率49.67%，m.p.178-180℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.11(s,5H),4.39(s,2H),4.79(s,2H),7.58(t,J=7.8Hz,2H),7.65(s,1H),7.71(t,J=7.2Hz,1H),7.96(d,J=7.8Hz,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:66.5,69.5,69.6,69.8,96.6,100.6,110.1,111.5,116.4,117.3,126.3,144.1,166.8.Anal.Calc.forC21H13F3FeN2O:C,59.74;H,3.10;N,6.64%.Found:C,59.65;H,3.09;N,6.66%.
IR(KBr):v/cm-12924,1705,1533,1395,1321,1299,1142,903,817.
实施例9：1-(2-氯苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4i)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以2-氯苯甲酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-(2-氯苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率40.23%，m.p.136-138℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.08(s,5H),4.33(s,2H),4.62(s,2H),6.95(s,1H),7.41(td,J=7.2Hz,2.4Hz,1H),7.49(m,2H),7.57(d,J=7.2Hz,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:29.7,67.4,69.7,69.8,96.7,109.9,112.1,126.5,129.7,130.1,132.0,132.3,133.4,154.5,156.8.Anal.Calc.for C21H12ClF3FeN2O:C,55.24;H,2.65;N,6.13%.Found:C,55.11;H,2.66;N,6.11%.
IR(KBr):v/cm-13097,1727,1534,1392,1321,1308,1142,907,821.
实施例10：1-(3-氯苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4j)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以3-氯苯甲酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-(3-氯苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率42.53%，m.p.78-80℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.13(s,5H),4.40(s,2H),4.72(s,2H),6.98(s,1H),7.46(t,J=7.8Hz,1H),7.62(d,J=7.8Hz,1H),7.98(d,J=8.4Hz,1H),8.11(s,1H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:30.0,67.4,69.7,70.0,96.6,111.7,129.3,129.9,132.0,133.2,133.8,134.0,154.3,163.8,166.1.Anal.Calc.for C21H12ClF3FeN2O:C,55.24;H,2.65;N,6.13%.Found:C,55.17;H,2.64;N,6.11%.
IR(KBr):v/cm-12926,1723,1532,1406,1321,1261,1157,987,815.
实施例11：1-(4-氯苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4k)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以4-氯苯甲酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-(4-氯苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率44.52%，m.p.
116-118℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.12(s,5H),4.39(s,2H),4.71(s,2H),6.98(s,1H),7.50(d,J=8.4Hz,2H),8.07(d,J=9.0Hz,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:29.7,67.3,69.7,70.0,96.9,
107.2,111.6,128.4,129.7,133.3,139.9,154.2,165.0.Anal.Calc.for C21H12ClF3FeN2O:C,55.24;
H,2.65;N,6.13%.Found:C,55.30;H,2.64;N,6.11%.
IR(KBr):v/cm?12924,1726,1537,1405,1321,1295,1150,902,826.
实施例12：1-(4-氟苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4l)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以4-氟苯甲酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-(4-氟苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率50.11%，m.p.
138-140℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.15(s,5H),4.43(s,2H),4.75(s,2H),6.96(s,1H),7.19(t,J=8.4
Hz,2H),8.17(td,J=3.0Hz,6.9Hz,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:29.7,30.7,44.8,61.6,
70.2,96.9,109.7,112.0,115.2,134.8,139.9,154.1,164.1.Anal.Calc.for C21H12F4FeN2O:C,57.30;H,2.75;N,6.36%.Found:C,57.16;H,2.76;N,6.33%.
IR(KBr):v/cm?12924,1726,1600,1406,1320,1292,1161,904,829.
实施例13：1-(4-硝基苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4m)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以4-硝基苯甲酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-(4-硝基苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率47.92%，m.p.132-135℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.11(s,5H),4.41(s,2H),4.69(s,2H),7.02(s,1H),8.23(d,J=9.0Hz,2H),8.36(d,J=8.4Hz,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:19.2,30.5,67.3,69.0,70.1,96.6,112.4,123.0,128.8,132.6,155.1,163.6.Anal.Calc.for C21H12F3FeN3O3:C,53.99;H,2.59;N,8.99%.Found:C,53.84;H,2.60;N,8.97%.
IR(KBr):v/cm-12925,1727,1521,1398,1320,1300,1147,908,847.
实施例14：1-(4-溴苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4n)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以4-溴苯甲酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-(4-溴苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率46.29%，m.p.147-149℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.15(s,5H),4.43(s,2H),4.75(s,2H),6.96(s,1H),7.67(d,J=8.4Hz,2H),7.99(d,J=8.4Hz,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:67.6,70.0,70.3,96.6,111.7,128.6,130.2,131.3,131.7,133.2,133.4,154.2,164.4.Anal.Calc.for C21H12BrF3FeN2O:C,50.34;H,2.41;N,5.59%.Found:C,50.41;H,2.40;N,5.58%.
IR(KBr):v/cm-12924,1722,1534,1398,1321,1295,1150,901,824.
实施例15：1-(4-甲基苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4o)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以4-甲基苯甲酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-(4-甲基苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率53.07%，m.p.139-141℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:2.50(s,3H),4.15(s,5H),4.41(s,2H),4.74(s,2H),6.94(s,1H),7.32(d,J=7.8Hz,2H),8.01(d,J=8.4Hz,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:21.7,36.8,53.6,70.1,96.6,111.2,128.8,132.1,144.4,148.2,153.5,165.2,178.4.Anal.Calc.for C22H15F3FeN2O:C,60.58;H,3.47;N,6.42%.Found:C,60.48;H,3.46;N,6.44%.
IR(KBr):v/cm-12921,1712,1534,1401,1320,1295,1148,904,826.
实施例16：1-(4-甲氧基苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4p)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以4-甲氧基苯甲酰氯代替乙酰氯，
得到目标产物1-(4-甲氧基苯甲酰基)-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率46.95%，m.p.123-125℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:3.90(s,3H),4.13(s,5H),4.37(s,2H),4.63(s,2H),6.76(s,1H),6.99(d,J=9.0Hz,2H),7.98(d,J=9.0Hz,2H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:19.1,30.5,55.6,70.0,96.6,106.3,113.9,123.4,128.8,130.8,134.4,147.8,164.5,166.3.Anal.Calc.forC22H15F3FeN2O2:C,58.43;H,3.34;N,6.19%.Found:C,58.33;H,3.33;N,6.18%.
IR(KBr):v/cm-12923,1698,1599,1510,1414,1250,1171,917,844.
实施例17：1-苯乙酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑(4q)的制备
本实施例的制备方法同实施例1，不同的是步骤c中以苯乙酰氯代替乙酰氯，得到目标产物1-苯乙酰基-3-三氟甲基-5-二茂铁基吡唑。红棕色固体，产率52.64%，m.p.132-135℃。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:4.09(s,5H),4.40(t,J=1.8Hz,2H),4.47(s,2H),4.75(t,J=1.8Hz,2H),6.87(s,1H),7.28(t,J=7.8Hz,1H),7.35(t,J=7.8Hz,2H),7.41(d,J=7.8Hz,2H).13CNMR(150MHz,CDCl3)δ:41.5,67.2,69.6,69.8,74.4,96.6,110.9,127.3,128.6,129.8,133.1,158.8,168.8.Anal.Calc.for C22H15F3FeN2O:C,60.58;H,3.47;N,6.42%.Found:C,60.51;H,3.48;N,6.40%.
IR(KBr):v/cm-12921,2851,1737,1536,1363,1321,1300,1147,990,822.
实施例18：本发明二茂铁吡唑酰胺类衍生物的体外抗肿瘤活性研究
采用MTT[3-(4,5)-双甲基-2-噻唑-(2,5)-苯基溴化四氮唑蓝]法来测定二茂铁吡唑酰胺类衍生物对人肝癌细胞株（Smmc7721）和人胃癌细胞株（SGC7901）的抗增殖活性。
（1）RPMI-1640培养液的配制：取四季青胎牛血清于56℃的恒温水浴锅中灭活30min。然后取50mL灭活的胎牛血清通过孔径为0.22μm微孔滤膜过滤加入到450mL RPMI-1640培养基中，4℃冰箱保存。另外，取50mL配制好的培养液于小号无菌培养瓶中，旋紧瓶盖，于37℃，5%的二氧化碳培养箱中培养观察2天，没有出现异常情况，可用于细胞培养。
（2）MTT溶液的配制：称取0.5g MTT固体，溶解于100mL PBS溶液中，再用0.22μm微孔滤膜过滤，分装，短期内不使用的MTT溶液-20℃冰箱保存。
（3）实验药液的配制：先将测试样品用DMSO溶解配成1mg/mL的储备液，储备液保存于-20℃冰箱中备用。然后取储备液加无血清的培养液稀释至10μg/mL作为样品初筛浓度。另外，取储备液加无血清的培养液稀释成3个浓度梯度用作样品复筛。其中DMSO在培养液中的浓度不宜过大，加药后的每孔细胞悬液中DMSO的终浓度一般不超过0.05%-0.1%。
（4）人肝癌细胞株Smmc7721的培养：为贴壁生长细胞，常规培养于RPMI-1640培养液内（含10%小牛血清），置37℃、5%CO2培养箱中培养，每隔3-4天传代一次。传代时先弃去原培养液，再用PBS缓冲液洗涤；然后用0.5%胰蛋白酶消化1min左右，加入少量新鲜培养液终止消化；吹打，使贴壁细胞从培养瓶壁上脱落下来；移取适量至新鲜培养瓶中，再补充新鲜培养液至原体积（培养液体积约为培养瓶容量的1/10）。
（5）人胃癌细胞株SGC7901的培养：为贴壁生长细胞，常规培养于RPMI-1640培养液内（含10%小牛血清），置37℃、5%CO2培养箱中培养，每隔3-4天传代一次。传代时先弃去原培养液，再用PBS缓冲液洗涤；然后用0.5%胰蛋白酶消化1min左右，加入少量新鲜培养液终止消化；吹打，使贴壁细胞从培养瓶壁上脱落下来；移取适量至新鲜培养瓶中，再补充新鲜培养液至原体积（培养液体积约为培养瓶容量的1/10）。
（6）细胞孵育：取对数生长期的两种肿瘤细胞，调细胞悬液浓度为1×104个ml-1。在96孔培养板中每孔加细胞悬液100μl，置37℃，5%CO2培养箱中培养24h。培养24h后，分别按设计加入药液。
（7）样品初筛：首先将配成初筛浓度的样品分别加入到各个孔中，每个浓度设3个平行孔。实验分为药物试验组（分别加入不同浓度的测试药）、对照组（只加培养液和细胞，不加测试药）和空白组（只加培养液，不加细胞和测试药）。将加药后的96孔板置于37℃，5%CO2培养箱中培养48h。
（8）样品复筛：根据初筛结果，从中选择7个活性较好的样品用于复筛。将配好浓度梯度的样品分别加入到各个孔中，每个浓度设3个平行孔。实验分为药物试验组（分别加入不同浓度的测试药）、对照组（只加培养液和细胞，不加测试药）和空白组（只加培养液，不加细胞和测试药），以5-氟尿嘧啶作为阳性对照。将加药后的96孔板置于37℃，5%CO2培养箱中培养48h。
（9）存活细胞的测定：在培养了48h后的96孔板中，每孔加MTT溶液40μl。在37℃放置4h后，移去上清液。每孔加150μl DMSO，振荡10min，使formazan结晶溶解。最后，利用自动酶标仪在578nm波长处检测各孔的光密度（OD值）。
（10）肿瘤细胞的生长抑制率和IC50值的计算：
①生长抑制率=(1－存活率)×100%
=[1－(OD实验－OD空白)/(OD对照－OD空白)]×100%
其中，OD实验表示测试药物组的平均光密度，OD对照表示对照组的平均光密度，OD空白表示空白组的平均光密度。
②改良寇式法：lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)。
其中Xm：lg最大剂量，I：lg(最大剂量/相临剂量)，P：阳性反应率之和，Pm：最大阳性反应率，Pn：最小阳性反应率。
（11）初步构效关系分析与讨论
通过MTT法，我们测定了17个新型二茂铁吡唑酰胺类衍生物对人肝癌Smmc7721细胞株和人胃癌SGC7901细胞株的抗增殖活性，活性结果见图1，图2。
由图1和图2可以看出，浓度为10μg/mL的二茂铁吡唑酰胺类衍生物对Smmc7721和SGC7901两种肿瘤细胞株的生长抑制率在15%至50%之间，其中化合物4o(R=-Ph-4-CH3)的活性最好，其次是化合物4h(R=-Ph)。另外，R为脂肪族取代基的化合物(4a-g)活性低于R为苯环类取代基的化合物(4h-q)活性。
比较化合物4h-q对两种肿瘤细胞的生长抑制率，我们可以看出在苯环的对位上引入甲基后，化合物的抑制活性增强；而引入氟、氯、溴、硝基四种吸电子基团后，化合物的抑制活性减弱。苯环上氯原子的取代位置对抑制活性的影响大小是：2-Cl>3-Cl>4-Cl，这说明苯环上卤素邻位取代有利于提高化合物对肿瘤细胞的抗增殖活性。
表1本发明所列二茂铁吡唑酰胺类衍生物的对肿瘤细胞的抑制IC50值(μg/mL)
由表1可以看出，复筛所选的7个化合物对人肝癌Smmc7721和胃癌SGC7901细胞株的抗增殖活性均强于阳性对照5-氟尿嘧啶。其中化合物4o的活性最高，它对这两种肿瘤细胞的IC50值分别为10.01和9.84μg/mL。
Claims (6)
1.一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物，其特征在于其结构由以下通式（1）表示：
其中R选自-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-(CH2)3Cl、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、异丙烯基、苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-硝基苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基或苯乙基。
2.一种权利要求1所述的二茂铁吡唑酰胺类衍生物的制备方法，其特征在于按以下步骤操作：
a、室温下向乙醇中加入钠和乙酰基二茂铁，室温反应3h，然后加入三氟乙酸乙酯，回流反应6h；反应结束后，反应液冷却，蒸去溶剂，剩余物倒入冰水中，调pH至5-6，有固体析出，过滤，干燥，柱层析分离得中间体I；所述乙酰基二茂铁、钠和三氟乙酸乙酯的摩尔比为1:2:1.5；
b、将中间体I溶于乙醇中，再向其中滴加水合肼，室温反应5h；反应结束后蒸去溶剂，剩余物用甲醇和水混合溶剂重结晶，即得中间体II；所述中间体I和水合肼的摩尔比为1:1.5；
c、将中间体II溶于乙腈中，再向其中依次加入三乙胺和酰氯，回流反应8-12小时；反应结束后蒸去溶剂，剩余物用乙酸乙酯溶解，加水萃取2-3次，合并有机相旋蒸，最后柱层析分离得目标产物；所述中间体II、三乙胺和酰氯的摩尔比为1:1.2:1.5；
所述酰氯的结构通式为：其中R选自-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-(CH2)3Cl、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、异丙烯基、苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-硝基苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基或苯乙基。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤a中乙醇的用量为每毫摩尔乙酰基二茂铁1.5-2ml乙醇。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤b中乙醇的用量为每毫摩尔乙酰基二茂铁1.5-2ml乙醇。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤c中乙腈的用量为每毫摩尔乙酰基二茂铁1.5-2ml乙醇。
6.一种权利要求1所述的二茂铁吡唑酰胺类衍生物的用途，其特征在于：在制备抗肝癌药物或抗胃癌药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410161185.4A CN103923127B (zh) | 2014-04-21 | 2014-04-21 | 一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410161185.4A CN103923127B (zh) | 2014-04-21 | 2014-04-21 | 一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103923127A true CN103923127A (zh) | 2014-07-16 |
| CN103923127B CN103923127B (zh) | 2016-06-29 |
Family
ID=51141542
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410161185.4A Active CN103923127B (zh) | 2014-04-21 | 2014-04-21 | 一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103923127B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106905380A (zh) * | 2017-03-07 | 2017-06-30 | 合肥工业大学 | 一种含有嘧啶环的二茂铁酰胺类衍生物及其制备方法和用途 |
| CN110698519A (zh) * | 2018-07-10 | 2020-01-17 | 南京大学 | 一类含no供体的二茂铁－吡唑衍生物的设计、合成及其生物活性评价 |
| KR20200115587A (ko) * | 2018-02-28 | 2020-10-07 | 후지필름 가부시키가이샤 | 수지 조성물, 광학 필터, 화상 표시 장치, 고체 촬상 소자, 및 화합물 |
| CN112870189A (zh) * | 2021-02-04 | 2021-06-01 | 华侨大学 | 2-酰基-1-二甲氨基甲基二茂铁衍生物在制备靶向性治疗肝细胞癌的药物中的应用 |
-
2014
- 2014-04-21 CN CN201410161185.4A patent/CN103923127B/zh active Active
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| QIONG ZHANG ET AL.: "Synthesis, crystal structure, electrochemistry and in situ FTIR spectroelectrochemistry of a bisferrocene pyrazole derivative", 《DALTON TRANS.》, 1 March 2011 (2011-03-01), pages 3510 - 3516 * |
| 孙美兰: "二茂铁吡唑羧酸金属配合物的合成、晶体结构及生物活性", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》, 15 April 2012 (2012-04-15), pages 014 - 205 * |
| 朱万仁等: "新型2,6-双（3,5-二取代吡唑基-1-羰基）吡啶的合成", 《有机化学》, vol. 24, no. 3, 31 December 2004 (2004-12-31), pages 346 - 349 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106905380A (zh) * | 2017-03-07 | 2017-06-30 | 合肥工业大学 | 一种含有嘧啶环的二茂铁酰胺类衍生物及其制备方法和用途 |
| KR20200115587A (ko) * | 2018-02-28 | 2020-10-07 | 후지필름 가부시키가이샤 | 수지 조성물, 광학 필터, 화상 표시 장치, 고체 촬상 소자, 및 화합물 |
| KR102441851B1 (ko) | 2018-02-28 | 2022-09-14 | 후지필름 가부시키가이샤 | 수지 조성물, 광학 필터, 화상 표시 장치, 고체 촬상 소자, 및 화합물 |
| CN110698519A (zh) * | 2018-07-10 | 2020-01-17 | 南京大学 | 一类含no供体的二茂铁－吡唑衍生物的设计、合成及其生物活性评价 |
| CN112870189A (zh) * | 2021-02-04 | 2021-06-01 | 华侨大学 | 2-酰基-1-二甲氨基甲基二茂铁衍生物在制备靶向性治疗肝细胞癌的药物中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103923127B (zh) | 2016-06-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhu et al. | Design, synthesis, and evaluation of chalcone analogues incorporate α, β-Unsaturated ketone functionality as anti-lung cancer agents via evoking ROS to induce pyroptosis | |
| CN103923127A (zh) | 一种二茂铁吡唑酰胺类衍生物、其制备方法及其用途 | |
| EP2558087A1 (en) | AMIDO COMPOUNDS AS RORyt MODULATORS AND USES THEREOF | |
| CN104010501A (zh) | 含src同源区2蛋白酪胺酸磷酸酶-1增效剂及其治疗方法 | |
| CN107501257A (zh) | 二氢嘧啶‑三氮唑类衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN104558093A (zh) | C21甾体皂苷苷元衍生物、其制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN108947996A (zh) | 二氢嘧啶-磺酰胺类衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN107827776A (zh) | 具有抗肿瘤活性的酰腙类化合物、制备方法及其应用 | |
| CN104230905A (zh) | 一类含苯并二噁烷骨架的二氢吡唑磺胺衍生物的合成及在抗癌药物中的应用 | |
| CN108299255A (zh) | 组蛋白去乙酰化酶8选择性抑制剂及其制备方法和应用 | |
| CN109021015B (zh) | 二氢嘧啶-磷酰胺类衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN105949124A (zh) | 一种吡唑啉衍生物及其应用 | |
| CN103159674A (zh) | 2-苯烷酰胺类化合物及其制备方法、药物组合物和用途 | |
| CN104945388A (zh) | 4-(3-(3-(4-氯香豆素)-酰腙)-5-苯基-吡唑)苯磺酰胺类衍生物的制备方法及在抗癌药物中的应用 | |
| CN107973807A (zh) | 一种三唑并苯并噻唑衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN106905380A (zh) | 一种含有嘧啶环的二茂铁酰胺类衍生物及其制备方法和用途 | |
| CN103588758A (zh) | 一类含1,4-苯并二噁烷骨架的硝基咪唑衍生物的合成、制备及其在抗癌药物中的应用 | |
| CN108033913A (zh) | 一种二氢吡唑啉衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN105523961B (zh) | 一类含肉桂酰腙骨架的多甲氧基的抗肿瘤化合物的设计、合成及生物活性评价 | |
| CN102675205A (zh) | 一种吡唑肟醚类化合物及其制备与在抗癌治疗中的应用 | |
| CN105037265A (zh) | 一类含查尔酮骨架的喹啉酮衍生物的制备方法及在抗癌药物中的应用 | |
| CN111423374B (zh) | 一种二氢吡唑磺酰胺类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN111825608A (zh) | 四氢喹啉类与四氢异喹啉类化合物及其用途 | |
| CN104447705A (zh) | 一类含1-吲哚乙酸-5-硝基咪唑衍生物的合成及其生物活性评价 | |
| CN106674150A (zh) | 具有抗肿瘤活性的达沙替尼衍生物及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20220527 Address after: 230001 floor 6, block B, blue diamond Shangjie, No. 335, Suixi Road, Bozhou road street, Luyang District, Hefei City, Anhui Province Patentee after: Hefei Luyang Technology Innovation Group Co.,Ltd. Address before: Tunxi road in Baohe District of Hefei city of Anhui Province, No. 193 230009 Patentee before: Hefei University of Technology |