CN103923066A - 多靶点抗肿瘤化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种式I所示的多靶点抗肿瘤化合物或其药用盐，尤其涉及CDK4/CDK6、PI3K-AKT-mTOR和Hedgehog的多靶点抗肿瘤化合物，还提供其制备方法和在抗肿瘤药物中的应用。研究显示本发明化合物具有显著的抗肿瘤活性，其中X、R1、R2和R基团的定义与说明书中相同。

Description

多靶点抗肿瘤化合物及其制备方法和应用
技术领域
本领域属于医药技术和有机合成领域，具体涉及一种多靶点抗肿瘤化合物或其药用盐及其制备方法和用途。
背景技术
肿瘤的发生与发展是一个多因素作用、多基因参与的复杂的生物学过程，本质是细胞信号转导通路的失调导致的细胞无限增生。单一药物单一靶点的治疗方法往往存在着疗效不佳、毒副作用大和容易出现耐药性的问题。目前，临床治疗中经常采用多种不同作用机制的药物联合治疗，以克服上述的问题。根据这一临床经验，科学家已经设计并合成了许多具有多靶点作用机制的小分子药物，药理实验证明，这种思路是可行的。
Akt激酶，也被称为蛋白激酶B(PKB)，对细胞的存活、代谢、增殖和生长起着至关重要的作用。蛋白激酶B/Akt酶是一组丝氨酸/苏氨酸激酶，在多种人类肿瘤中过表达，被认为是作为癌症治疗的潜在靶点，表征最为充分的PI3K脂质产物是信号转导途径中PI3K下游的57KD的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt(Hemmings，B.A.(1997)Science275：628；Hay N.(2005)Cancer Cell8：179-183)。超活化的Akt激酶是人类恶性肿瘤中发现的一种最常见的分子。在约40％的乳腺癌和卵巢癌和大于50％的前列腺癌中观察到Aktl活性的增加。
周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase4/6，CDK4/6)是一类丝/苏氨酸激酶，与细胞周期素D(cyclinD)结合，调节细胞由G1期向s期转换。在很多肿瘤中，都存在“cyclinD-CDK4/6-INK4-Rb通路”异常。这条通路的改变，加速TG1期进程，使得肿瘤细胞增殖加快而获得生存优势，对它的干预成为一种治疗策略，CDK4/6因此成为抗肿瘤的靶点之一。
Hedgehog(Hh)信号通路通过引导细胞分化和增殖而在胚胎图案形成和成人组织维持中起着重要作用。Hh结合于十二次(twelve-pass)跨膜蛋白质Ptch(Ptch1和Ptch2)上，因此减轻Smoothened(Smo)的Ptch媒介的抑制作用。Smo的活化触发一系列的细胞内事件，这些事件在Gli转录因子(Gli1、Gli2和Gli3)的稳定化上和在Gli依赖性基因(这些基因会引起细胞增殖、细胞存活、血管生成和侵入)的表达上达到顶点。基于以下发现，Hh信号吸引了广泛的注意力：Shh信号的异常活化导致各种肿瘤例如胰腺癌、成神经管细胞瘤、皮肤基底细胞癌、小细胞肺癌和前列腺癌的形成。在现有技术中已经报道了几种Hh拮抗剂，如留族的生物碱化合物IP-609、氨基脯氨酸化合物CUR61414和2,4-二取代的噻唑化合物KK18。WO2005033288公开了某些被断定为hedgehog拮抗剂的1，4-二取代的2，3-二氮杂萘化合物。类似地，WO2008110611公开了与病理学的诊疗有关的某些1，4二取代的2，3-二氮杂萘化合物，其中病理学的诊疗与hedgehog通路有关。
发明内容
基于多靶点作用的思路，并结合本发明人对抗肿瘤药物的大量的研究实验，我们提出了新的设计思路：将CDK4/CDK6、PI3K-AKT-mTOR和Hedgehog通路等抑制剂的母体结构通过合适的连接臂结合，以寻找涉及CDK4/CDK6、PI3K-AKT-mTOR和Hedgehog的多靶点抗肿瘤化合物。
本发明的目的是提供一种如通式I所示的一类多靶点抗肿瘤化合物。
本发明的另一个的是提供上述化合物在抗肿瘤药物制备中的应用。
本发明的目的可以通过以下措施达到：
一类式I所示的化合物，或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物；
其中X代表为O或S原子；
R选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、氰基、硝基；
R1和R2分别独立地选自取代或非取代的芳基、杂芳基或其中基团中的M或W分别独立地选自芳基或杂芳基。
在一种方案中，R1和R2分别独立地选自取代的杂芳基或其中基团中的M环或W环分别独立地选自含氮杂芳基。
在一种方案中，R1代表同时M环或W环分别代表含氮杂芳基，R2代表含氮杂芳基。
在一种方案中，R1和R2的取代基分别独立地选自卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、氰基、硝基。
进一步，本发明还提供通式I化合物的制备方法，但不仅限于以下描述的方法。所有的原料都是根据符合通式规律的目标分子的基团特征，并通过这些路线中的方案、有机化学领域普通技术人员熟知的方法制备的或者直接购买的。式I的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物的制备包括以下步骤：
当X代表O原子，反应路线如下所示，其中R1、R2和R的定义如说明书上文所述。
根据目标分子的结构特征，选择化合物d，溶解在有机溶剂例如是甲苯中，低于0℃的低温下滴加至三光气的有机溶液中，滴加完毕后升温回流反应，得到化合物e；然后与化合物c在有机溶剂中加热至50℃～90℃反应得到化合物f，将化合物f在醇的碱溶液中脱甲基保护基，得到化合物g，然后与氯甲酸乙酯在有机碱的作用下反应，进一步与BOC-肼反应得到化合物h，脱掉boc保护基，得到化合物i，然后与TsOH反应，得到化合物i的对甲苯磺酸盐；将化合物R2CN溶解在甲醇或乙醇等有机溶剂中，加入甲醇钠常温反应，进一步与化合物i的对甲苯磺酸盐反应得到化合物k。
当式I化合物中X代表为S原子时，可以将化合物k溶解在有机溶剂例如甲苯中，在劳森试剂的作用下，反应制得。
当R1和R2分别独立地选自取代或非取代的时，化合物c的制备方法如下所示，其中M或W环的定义同说明书上文相同：
将化合物a和化合物b溶解在有机溶剂例如二氧六环中，在钯催化剂和无机碱作用下进行偶联反应得到化合物c。所述的钯催化剂选自四三苯基磷钯、钯碳、N-杂碳烯钯络合物、氯化钯或其配体、醋酸钯或其配体中的一种或几种，优选四三苯基磷钯；所述的无机碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化钾中的一种或几种，优选碳酸钠或碳酸钾。
下面给出了本发明的化合物的举例性的、非限制性的具体实例：
或其盐、水合物、溶剂化物。
本发明进一步提供了式I所述多靶点抗肿瘤化合物的药物组合物，其中含有治疗有效量的所述化合物或其药用盐，以及一种或多种药学上可接受的载体，可将化合物本身或其药用盐与可药用赋形剂、稀释剂等的混合物以片剂、胶囊、颗粒剂、散剂或糖浆剂的形式口服给药或以注射剂的形式非口服给药。该药物组合物优选含有重量比为0.1％-99.5％的本发明的多靶点抗肿瘤化合物或其药用盐作为活性成分，更优选含有重量比为0.5％-99.5％的活性成分。上述制剂可通过常规制药方法制备。
除非另有说明，下列用在权利要求书和说明书中的术语有如下含义。
“烷基”表示1-20个碳原子的饱和的脂烃基，包括直链和支链基团(本申请书中提到的数字范围，例如“1-20”，是指该基团，此时为烷基，可以含1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等，直至包括20个碳原子)。本发明中的烷基包含“亚烷基”。含1—4个碳原子的烷基称为低级烷基。当低级烷基没有取代基时，称其为未取代的低级烷基。更优选的是，烷基是有1-10个碳原子的中等大小的烷基，例如甲基、乙基、亚乙基、丙基、亚丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、亚丁基、叔丁基、戊基等。最好是，烷基为有1-4个碳原子的低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、亚丁基、异丁基或叔丁基等。烷基可以是取代的或未取代的。
“卤素”表示氟、氯、溴或碘，优选为氟、氯或溴。
“硝基”表示-NO2基团。
“卤代烷基”表示烷基，优选如上所定义的低级烷基，它被一个或多个相同或不同的卤原子取代，例如-CH2Cl、-CF3、-CCl3、-CH2CF3、-CH2CCl3等。
“烷氧基”表示-O-(未取代的烷基)和-O-(未取代的环烷基)。代表性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。
“芳基”表示6至12个碳原子的全碳单环或稠合多环基团，具有完全共轭的π电子系统。芳基的非限制性实例有苯基、萘基和蒽基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环。芳基可以是取代的或未取代的。当被取代时，取代基优选为一个或多个，更优选为一个、两个或三个，进而更优选为一个或两个，独立地选自由低级烷基、三卤烷基、卤素、羟基、低级烷氧基、巯基、(低级烷基)硫基、氰基、酰基、硫代酰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、硝基、N-磺酰氨基、S-磺酰氨基。
“杂芳基”表示5至12个环原子的单环或稠合环基团，含有一个、两个、三个或四个选自N、O或S的环杂原子，其余环原子是C，另外具有完全共轭的π电子系统。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环。杂芳基可以是取代的或未取代的。当被取代时，取代基优选为一个或多个，更为优选为一个、两个或三个，进而更为优选一个或两个。未取代的杂芳基地非限制性实例有吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、吡唑、嘧啶、喹啉、异喹啉、嘌呤、四唑、三嗪和咔唑。
“药学上可接受的盐”表示保留母体化合物的生物有效性和性质的那些盐。这类盐包括：
(1)与酸成盐，通过母体化合物的游离碱与无机酸或有机酸的反应而得，无机酸例如(但不限于)盐酸、氢溴酸、硝酸、磷酸、偏磷酸、硫酸、亚硫酸和高氯酸等，有机酸例如(但不限于)乙酸、丙酸、丙烯酸、草酸、(D)或(L)苹果酸、富马酸、马来酸、羟基苯甲酸、γ-羟基丁酸、甲氧基苯甲酸、邻苯二甲酸、甲磺酸、乙磺酸、萘-1-磺酸、萘-2-磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、扁桃酸、琥珀酸或丙二酸等。
“药用组合物”指的是在此描述的一种或多种化合物或者它们的药学上可接受的盐和前药与其它的化学成分，例如药学上可接受的载体和赋形剂的混合物。药用组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。
“药学上可接受的载体”指的是对有机体不引起明显的刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的载体或稀释剂。
“赋形剂”指的是加入到药用组合物中以进一步便利于给予化合物的惰性物质。赋形剂的实例包括(不局限于)碳酸钙、磷酸钙、多种糖类和多种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。
本发明还提供了所述化合物或其药用盐在抗肿瘤方面的应用，研究显示其具有显著的抗肿瘤活性。初步作用机制研究结果表明：该类化合物既对CDK4/CDK6、PI3K-AKT-mTOR和Hedgehog均有抑制活性，在多靶点抗肿瘤的药物领域具有较好的应用前景。
具体实施方式
以下实施例进一步描述本发明，但是，这些实施例仅是用于说明本发明，而不是对本发明范围的限制。
实施例1化合物I-1的制备
反应路线
1.1中间体4的制备：
实验过程：称取16.6g化合物2与14g化合物3混合加入250mL圆底烧瓶中，用约150mL1，4-二氧六环溶解，加入5.7g四(三苯基膦)钯，41.4g碳酸钾和60mL水，氮气保护，80℃加热搅拌约4h，TLC检测(PE∶EA＝3∶1)原料基本反应完全，将反应液倒入约2L水中，用750mL*3EA萃取后合并有机相，有机相用饱和食盐水洗涤两次后无水硫酸钠干燥，浓缩得到化合物4粗品，用PE∶EA＝1∶1混合溶剂约150mL重结晶得到较纯产物约10.6g，呈类白色固体，HPLC含量约97％，收率60％。MS：[M+H]+＝173.1。
1.2中间体6的制备：
实验过程：将20g三光气溶于50mL甲苯，冰盐浴冷却，将16.5g化合物5用60mL甲苯溶解后缓慢滴加到反应液中，滴加完毕后回流6h，冷却至室温，通氮气3h排除大部分残余的光气，蒸除溶剂，得到约20g化合物6粗品，直接用于下一步反应。
1.3中间体7的制备：
实验过程：将1.91g中间体6与1.0ep化合物4用30ml的四氢呋喃溶解，加热到70℃反应2.0h，TLC检测，原料反应完全，减压浓缩，经过纯化得到得2.8g化合物7。
MS：[M+H]+＝378.2
1.4中间体8的制备：
实验过程：将12g氢氧化钠用250ml甲醇溶解后加入2.5g化合物7，升温至40℃加热搅拌约6h，TLC检测基本反应完全，滴加稀盐酸调节pH至5～6，过滤，直接浓缩干用于下一步反应。
1.5中间体9的制备：
实验过程：将0.05mmol化合物8溶于150mL二氯甲烷中，加入0.1mol三乙胺，氮气置换，-10℃下搅拌，密封条件下滴入0.15mmol氯甲酸乙酯，滴加完毕后搅拌1h，溶液呈浅黄色浑浊，将0.05mmolBOC-肼用40mL二氯甲烷溶解后加入反应液中，加毕后室温搅拌过夜，TLC检测原料反应完全，补加100mL二氯甲烷溶清，饱和食盐水洗涤两次后无水硫酸钠干燥浓缩得到1.78g浅黄色固体，直接用于下一步反应。
1.6化合物I-1的制备：
实验过程：将3.5mmol化合物9与11.0mmolTsOH混合，加入250mLEA溶解，25℃加热搅拌过夜，溶液略浑浊，逐渐有白色固体生成，抽滤，滤饼用EA洗涤三次，旋干；将4.0mmol4-氰基吡啶溶于200mL乙醇中，加入5.0mmol甲醇钠，25℃加热搅拌3h，加入化合物9的对甲苯磺酸盐，升温至95℃加热回流约6h，溶液呈微黄色浑浊，TLC检测原料基本反应完全后停止反应，倒入800mL纯水中，析出白色固体，抽滤，滤饼用乙醇的水溶液(体积比1∶4)洗涤，减压干燥得到约0.86g化合物I-1，HPLC检测含量可达到98％。
MS：[M+H]+＝450.2。
1H-NMR：δ：8.71～8.01(m，5H)，7.70～6.85(m，9H)，3.68(s，2H)。
实施例2：化合物I-26的制备
化学反应式：
实验过程：
将0.5g化合物I-1用10.0ml甲苯溶解，再将2.0ep的劳森试剂加入，回流反应3.0h，TLC检测，原料完全反应，减压浓缩，经过柱层析纯化，得到0.32g化合物I-26。
MS：[M+H]+＝466.2
1H-NMR：δ：8.80～8.05(m，5H)，7.75～6.75(m，9H)，3.70(s，2H)。
实施例3～26的制备参照说明书上文的工艺路线，化合物的制备过程与实施例1和实施例2的方法类似。下表1给出了各实施例的实验目标产物的测试数据。
实施例3～26列表
药理活性测试：
药理试验证明，本发明的化合物均具有优异的抗肿瘤活性。因此本发明化合物可用于制备治疗肿瘤疾病的药物。下面是本发明部分化合物的药效学试验及结果。化合物的结构式见实施例。
一、采用MTT法评价化合物I-1～I-20对多株人肿瘤细胞的生长抑制作用
方法：处于生长对数期的细胞(人非小细胞肺癌细胞株A549、NCI-H460、人前列腺癌细胞株PC-3、人结肠癌细胞株HT-29、HCT-116以及人肝癌细胞株SMMC-7721)以1.5×104浓度种于96孔板中。细胞培养24h贴壁后吸去原来的培养基。试验分为空白对照组、药物处理组。空白组更换含10％胎牛血清的1640培养基；药物处理组更换含浓度为100μM，50μM，10μM，1μM，0.1μM，0.01μM，0.001μM，0.0001μM和0.00001μM待测化合物的培养基。培养96h后，加入浓度5mg/mL的MTT，继续放于CO2培养箱培养4h，然后沿着培养液上部吸去100μL上清，加入100μL DMSO，暗处放置10min，利用酶标仪(Sunrise公司产品)测定吸光值(波长570nm)，并根据吸光值计算细胞存活情况，每个处理设6个重复孔。细胞存活率(％)＝ΔOD药物处理/ΔOD空白对照×100。
结果：二十种化合物对多种人肿瘤细胞株的生长均具有一定的抑制作用，其中化合物I-1、I-2、I-5、I-6、I-9和I-10具有十分显著的抑制作用。采用sigmaplot10.0软件分别计算这二十种化合物抑制多种人肿瘤细胞株细胞生长的IC50值(见表1)
表1二十种化合物对多种人肿瘤细胞株的IC50值
二、用AlphaScreen技术测定测试化合物抑制重组mTOR磷酸化的能力
方法：将包含mTOR的氨基酸残基1362-2549的mTOR C-端截头(EMBL登记号L34075)作为FLAG-标记融合物稳定地表达在HEK293细胞中。使HEK293FLAG-标记的mTOR稳定细胞系常规保持于37℃，5％CO2中，直至70-90％融合在Dulbecco′s改良Eagle′s生长培养基内，该培养基含有10％热灭活胎牛血清(Sigma)，1％L-谷氨酰胺(Gibco)和2mg/ml新霉素(InvitrogenLimited)。在哺乳动物HEK293细胞系中表达后，用标准纯化技术，用FLAG抗原决定基标签纯化表达的蛋白。将测试化合物制备为10mMDMSO贮备液，按照需要稀释在水中，得到一系列终测定浓度。将每种化合物稀释液的等分试样(2pl)置于Greiner384孔低容量(LV)白色聚苯乙烯板的孔内。在室温下将重组纯化mTOR酶、lpM生物素化肽底物、ATP和缓冲液[含有Tris-HClpH7.4缓冲液(50mM)、EGTA(0.1mM)、牛血清白蛋白(0.5mg/ml)、DTT(1.25mM)和氯化锰(10mM)]的30pl混合物搅拌90分钟。用5％DMSO代替测试化合物，得到产生对应于最大酶活性的最大信号的对照孔。加入EDTA(83mM)代替测试化合物，得到产生对应于酶完全抑制的最小信号的对照孔。在室温下将这些测定液培养2小时。加入EDTA(50mM)、牛血清白蛋白(BSA；0.5mg/ml)和Tris-HCl pH7.4缓冲液(50mM)[含有p70S6激酶1A5单克隆抗体(Cell Signalling Technology)]的10pl混合物终止各反应，加入AlphaScreen抗生蛋白链菌素供体和蛋白A受体珠(200ng；Perkin Elmer)，将测定板在室温下避光放置约20小时。用PackardEnvision仪读取680nm处激光激发产生的信号。作为mTOR介导的磷酸化结果，原位形成磷酸化生物素肽，与AlphaScreen抗生蛋白链菌素供体珠相关的磷酸化生物素肽与p70S6激酶1A5单克隆抗体形成复合物，该抗体与Alphascreen蛋白A受体珠相关。经680nm的激光激发，供体珠：受体珠复合物产生可测定的信号。因此，mTOR激酶活性的存在产生测定信号。在存在mTOR激酶抑制剂时，信号强度减弱。对于指定测试化合物的mTOR酶抑制，以IC50值表示。
结果：所有测试化合物中，对mTOR的IC50值小于1nM的化合物为：I-1、I-2、I-5、I-6、I-9和I-10；对mTOR的IC50值小于100nM的化合物为：I-3、I-4、I-7、I-8、和I-11，对mTOR的IC50值小于1000nM的化合物为：I-12、I-13、I-14、I-15、I-16、I-17、I-18、I-19和I-10。
三、CDK4/CDK6细胞周期蛋白酶活性测定
方法：使用TR-FRET、以384孔形式进行了用于监测CDK4/细胞周期蛋白D1催化的pRb在Ser780部位磷酸化的测定。反应以30μL体积进行，该体积含有在测定缓冲液(50mMHEPES-Na,pH7.5；5mM MgCl2UmM DTT.0.02％吐温-20和0.05％BSA)中的0.3nM CDK4/细胞周期蛋白D1、150nM生物素-pRb(773-924)、3μMATP和1.3％DMSO(或在DMSO中的化合物)。最后加入3μM ATP以引发反应。于22℃孵育60分钟后，将反应物用10μL240mMEDTA-Na(pH8.0)淬灭。加入40μL检测溶液使信号显示，该检测溶液含有在检测缓冲液(50mM HEPES-Na，pH7.5；60mMMEDTA-Na，pH8.0；0.05％BSA和0.1％Triton X-100)中的40nM SA-APC，143ng/mL抗-磷酸-pRb(S780)抗体和1nM Eu_W1024抗-兔IgG抗体。在暗处孵育60分钟后，在Envision(Perkin Elmer2102-0010)上对板进行读数。通过杆状病毒感染，在Sf21细胞中表达了人CDK4/细胞周期蛋白D1。可以使用在CDK4/细胞周期蛋白D1酶测定中概述的通用方法进行CDK6/细胞周期蛋白D3酶活性测定。CDK6/细胞周期蛋白D3酶复合物可以购自商业来源(CarnaBiosciences，目录号04-107)。
结果：CDK4/CDK6细胞周期蛋白酶活性测定见表2所示。
表2二十种化合物对CDK4/CDK6细胞周期蛋白酶的IC50值
四、Hedghog信号传导通路Gli-luciferrase基因试验
方法：取对数生长期的ShhlightII细胞，接种于96孔板，30,000cells/孔/100uL，37℃，5％CO2生长两天，使细胞达到最大生长密度。细胞诱导与给药：将于96孔板生长两天的细胞从培养箱取出，吸去旧的培养基，加入含诱导剂(A∶S＝1∶1，各10uM，2倍终浓度)的细胞诱导培养基，100uL/孔。然后，加入含有不同浓度待测样品的细胞诱导培养基(2倍待测终浓度)，100uL/孔。将给药完毕的96孔板置于37℃，含5％CO2的培养箱，孵育40h。
基因检测：实验开始前，将96孔板，及试剂盒平衡至室温。吸去含诱导剂及待测药物的培养基，加入室温平衡的细胞诱导培养基50ul/孔。然后按照说明书，加入Dual-Glo Lucifirase试剂，50ul/孔。将96孔板置于微孔板振荡器，室温10min。根据TecanIF200说明，测定荧光素酶报告基因。测定完成后，加入新配好的Dual-Glo Stop&Glo试剂，50ul/孔。将96孔板置于微孔板振荡器，室温10min后，测定海肾荧光素酶报告基因。根据试剂盒说明书计算抑制率，origin8软件对数拟合得到待测化合物的IC50值。IC50越低，表示待测化合物活性越高。
结果：从表3中可以看出，本发明的化合物对于Hedgehog信号传导途径可表现出非常好的体外抑制能力，从而可用于与Hedgehog信号传导途径异常激活有关的癌症的治疗。
表3二十种化合物对Hedgehog信号传导通路的抑制作用

Claims (7)

1.式I结构所示的化合物及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物：
其中，X代表为O或S原子；
R选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、氰基或硝基；
R1和R2分别独立地选自取代或非取代的芳基、杂芳基或其中基团中的M或W分别独立地选自芳基或杂芳基。
2.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物，其特征在于式I中R1和R2分别独立地选自取代的杂芳基或其中基团中的M环或W环分别独立地选自含氮杂芳基。
3.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物，其特征在于R1代表同时M环或W环分别代表含氮杂芳基，R2代表含氮杂芳基。
4.如权利要求1～3任意一项所述的化合物及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物，其特征在于R1和R2的取代基分别独立地选自卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、氰基、硝基和氨基。
5.根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物，其特征在于化合物选自：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物。
6.一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的游离形式或可药用盐形式的权利要求1至5中任意一项所定义的化合物作为活性成分；一种或多种药用载体物质和/或稀释剂。
7.权利要求6的药物组合物，在涉及CDK4/CDK6、PI3K-AKT-mTOR和Hedgehog的多靶点抗肿瘤药物中的应用。
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