CN103917876B - 用于预测未接受他汀药物治疗的冠状动脉疾病患者的心血管后果的脂质组学生物标志 - Google Patents
用于预测未接受他汀药物治疗的冠状动脉疾病患者的心血管后果的脂质组学生物标志 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103917876B CN103917876B CN201280054323.8A CN201280054323A CN103917876B CN 103917876 B CN103917876 B CN 103917876B CN 201280054323 A CN201280054323 A CN 201280054323A CN 103917876 B CN103917876 B CN 103917876B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lipid
- cer
- lipids
- control
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2570/00—Omics, e.g. proteomics, glycomics or lipidomics; Methods of analysis focusing on the entire complement of classes of biological molecules or subsets thereof, i.e. focusing on proteomes, glycomes or lipidomes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/04—Endocrine or metabolic disorders
- G01N2800/042—Disorders of carbohydrate metabolism, e.g. diabetes, glucose metabolism
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/32—Cardiovascular disorders
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/32—Cardiovascular disorders
- G01N2800/324—Coronary artery diseases, e.g. angina pectoris, myocardial infarction
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/70—Mechanisms involved in disease identification
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明特别提供一种方法及其应用,所述方法通过检测生物样品中的脂质浓度或脂质比率并将其与对照进行比较来预测诸如AMI或CVD死亡等严重的CVD并发症,本发明还鉴定出了特异性脂质标志,所述脂质标志在预测这些CVD并发症时比目前采用的临床标志具有更高的特异性和灵敏度。本发明还提供了抗所述脂质的抗体及其在预测、诊断、预防和/或治疗CVD并发症中的应用。本发明还涉及用于预测和/或诊断CVD并发症的包含脂质和/或其抗体的试剂盒。
Description
技术领域
本发明涉及利用脂质水平来预测和预防严重的心血管疾病相关的致命性并发症的方法和应用。本发明因此提供了一种用来鉴定和治疗高风险冠状动脉疾病患者的手段。这些方法包括分析生物样品的脂质水平并将其与对照进行比较。
背景技术
在全世界范围内,心血管疾病(CVD)是死亡率和发病率的最主要的原因之一,且患病率一直在增加。CVD用来对影响人体的心脏、心脏瓣膜、血液和脉管系统的多种病况进行分类。这些病况之一是冠状动脉疾病(CAD)。他汀药物是供有较高风险患心血管并发症的人使用的一类降胆固醇药。他汀药物被广泛使用,仅在美国就有近2千万接受过他汀药物治疗的患者,而且,据计算,在美国约有5千万患者会获益于他汀药物治疗。然而,虽然进行了他汀药物治疗,但CVD患者仍有风险发展严重的CVD并发症。在早期有目的的开始对CVD相关的致命并发症(例如急性心肌梗死(AMI)和死亡)采取预防措施将非常有益,并且能够有较大机会降低CVD患者的死亡率和发病率。出于此目的,必须准确地鉴定出有风险发展CVD并发症的个体。然而,传统的风险评估未能识别出较大比例的高风险患者,而是将很大比例的个体归类为中度风险,从而使患者管理不可靠。因此,非常需要使对高风险CVD的风险评估进一步精细化的其他方案。出于此目的,本发明人已评估了新的脂质组学(lipiodmic)生物标志作为CVD患者的致命心血管疾病事件的预后工具的作用。
他汀药物是为了防止CVD患者出现动脉粥样硬化结果而广泛使用的药物,因此,很大比例的中年人群正在接受他汀药物治疗。他汀药物确实高效地降低LDL-胆固醇以及循环系统中的许多其他脂质。所以,他汀药物治疗显著地影响许多潜在的脂质组学标志的血浆浓度,因此,分开研究接受他汀药物治疗和未接受他汀药物治疗的受试对象的脂质组学标志非常重要。已知在临床实践中,在接受他汀药物治疗的患者中常规的脂质生物标志(例如LDL-胆固醇)并不能提供信息,但是,尽管接受了他汀药物治疗,这些患者仍可能具有较大的患CVD并发症的剩余风险。本发明针对的是在进行风险评估时未接受他汀药物治疗的受试对象。本发明的一个创新性方面在于,发明人对2型糖尿病(DM2)患者的风险标志进行了单独研究。DM2在人体中引起多种代谢改变,因此,DM2也可影响脂质组学生物标志的血浆水平。此外,非DM2患者和DM2患者中的CVD风险脂质可能并不相同,所以,如果分开研究这些受试对象组,则可以潜在地大大提高预后准确性。
血浆或血清总胆固醇浓度、LDL-胆固醇浓度或HDL-胆固醇浓度已被用作CVD/CAD风险预测的金标准生物标志。然而,很多冠状动脉疾病(CAD)或急性心肌梗死(AMI)患者的LDL-C水平在推荐范围内,这表明需要对剩余风险采取额外诊断测量。之前的大规模群体研究表明,这些测量值与CAD风险和CAD终点(例如AMI或心血管性死亡)有关。因此,到目前为止预防性治疗方案一直致力于降低LDL-C浓度(主要通过他汀药物治疗实现),且最近还尝试了升高HDL-C(例如,通过CETP抑制剂实现)。另一方面,还已观察到,一半的AMI患者实际上确实具有正常的LDL胆固醇水平,而且在经他汀药物治疗的患者中,尽管LDL-C有所减少,但仍有很大的剩余风险。此外,最近的出版文献已证明,作为LDL颗粒上主要表面蛋白的载脂蛋白B(apoB)的血浆水平与LDL-C的血浆水平(所述颗粒中胆固醇的量)相关,并且认为其各自为正风险因素。作为HDL颗粒上主要表面蛋白的载脂蛋白A1的血浆水平与HDL-C的血浆水平(所述颗粒中胆固醇的量)也彼此相关,并且认为其各自为负风险因素。重要的是,对于给定的正常apoB,已观察到更低的LDL-C与更高的AMI风险相关,这支持了以下观点:平均而言,每个颗粒中胆固醇含量低的LDL颗粒(小而致密的LDL颗粒)特别危险。因此,看上去可能的是,LDL-C与LDL颗粒所携带的更危险的分子直接相关,而LDL-C仅是间接的风险度量。因此,寻找与危险的(即,致命的)心血管疾病事件直接关联的分子(例如,某些脂质物种(lipid species))非常重要。
脂质代谢物失衡是血脂异常和随后的动脉粥样硬化(其最严重的表现形式是易损的动脉粥样硬化斑块)的可能原因。动脉粥样硬化斑块是包含大量脂质的复杂的分子形成物。然而,除富含脂质的斑块或LDL胆固醇以外,还有其他因素使得脂质成为CVD研究中引人注目的一类分子。脂质受到严密调控,这使得在所研究的有机体的当前状态下脂质组学数据具有鲁棒性且富含信息。此外,脂质是生物学系统的终点之一,与预报因子相比,其更多地是真正的结果。将脂质组学数据与适合的生物数据库临床资料组合在一起为生物标志的发掘提供了良好机遇。另外,脂质组学能够用作药物开发和正在兴起的治疗诊断学中的功效和安全性的计量工具。脂质组学生物标志是CVD领域中真正的伴随诊断的首要候选指标,并且还为改进的转译医学提供了很多契机。
据认为,将脂质运载至损伤形成部位的斑块组成部分和脂蛋白组分现在可以用脂质组学研究来解析,所述研究将脂质的结构和组成与功能关联起来,并由此与疾病发病机制关联起来。人体中的脂质媒介物数量巨大。它们的鉴定和定量测定因质谱法和脂质生物化学的进步而变得便捷,质谱法和脂质生物化学能够对属于若干个脂质类别的数百种分子脂质物种(总称为脂质组(lipidome))同时进行高通量的鉴定和定量测定(Ejsing CS等,Global analysis of the yeast lipidome by quantitative shotgun massspectrometry.Proc Natl Acad Sci U S A2009,106:2136-2141;Stahlman M等,High-throughput shotgun lipidomics by quadrupole time-of-flight massspectrometry.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci2009;Hiukka A等,ApoCIII-enriched LDL in type2diabetes displays altered lipid composition,increased susceptibility for sphingomyelinase,and increased binding tobiglycan.Diabetes2009,58:2018-2026;Linden D等,Liver-directed overexpressionof mitochondrial glycerol-3-phosphate acyltransferase results in hepaticsteatosis,increased triacylglycerol secretion and reduced fatty acidoxidation.FASEB J2006,20:434-443.)。脂质组学研究鉴定脂质的细胞分布,并描述其生化机制、相互作用和动力学。重要的是,脂质组学使脂质组的确切化学组成得到了定量(HanX,Gross RW:Global analyses of cellular lipidomes directly from crude extractsof biological samples by ESI mass spectrometry:a bridge to lipidomics.J LipidRes2003,44:1071-1079)。
由于脂质组学兼具高的灵敏度和选择性,如今甚至能够对最小的样品量进行分析。目前,本领域中的脂质数据整体以总组成(sum composition)的格式呈现脂质,例如,磷脂酰胆碱(PC)34:1(Brugger B等,Quantitative analysis of biological membranelipids at the low picomole level by nano-electrospray ionization tandem massspectrometry.Proc Natl Acad Sci U S A1997,94:2339-2344),其中分子脂质和所连接的脂肪酸尾则不确定。对分子脂质物种(例如PC16:0/18:1)的鉴定(Ekroos K等,Chartingmolecular composition of phosphatidylcholines by fatty acid scanning and iontrap MS3fragmentation.J Lipid Res2003,44:2181-2192)是高级脂质组学的主要特征,其产生高度解析的分子脂质物种而不是相加的脂肪酸信息。例如,揭示了脂肪酸的类型以及其连接到甘油骨架以形成特定PC分子的位置的信息。虽然存在诸如与气相色谱组合的薄层色谱等常规技术,但是这些技术不仅要求明显更大的样品量和费力的样品制备,而且并不能得到分子脂质物种。尽管存在能够表征脂质实体的多重质谱技术,但就绝对浓度或接近绝对浓度而言,这些技术大部分仍不能产生可靠的高品质的定量数据。在本发明的背景下,基于电喷射离子化质谱的脂质组学是优选的技术,且能够使用鸟枪脂质组学和靶向脂质组学来进行分子脂质组的穷举解密和精确定量。当设置在正确的环境中时,鸟枪脂质组学和靶向脂质组学的优越品质和特异性将符合严格的管理标准,例如良好的实验室实践准则(GLP)。使用这些技术,可以甚至以高通量形式对最多2000种分子脂质进行定量。
脂质组学是用于根据患者的分子脂质特征信息(profile)来区分患者的工具。脂质组学能够实现个体化用药和诊断,这将便于完成使正确的个体在正确的时间以正确的剂量接受正确的药物的任务。已进行了采用由脂质、蛋白和亲水性分子等组成的分析物的若干项工作,以满足个体化用药的需要。近来,已使用了非基于假设的代谢物组学筛选来鉴定新颖的CVD生物标志。
例如,WO2004/038381公开了一种以代谢物组学手段帮助诊断对受试对象的疾病状态或预测受试对象是否易患疾病状态的方法,其中,获得了受试对象的小分子特征信息并与标准物小分子特征信息进行比较。
WO2008/148857公开了一种通过从患者血样中分离出HDL组分和亚组分来评估患者的心血管疾病(包括动脉粥样硬化)风险的方法。待测量的HDL组分或亚组分的成分是鞘氨醇-1-磷酸(S1P)、鞘磷脂(SM)和载脂蛋白A-I(apoA-1)。
WO2008/11943进一步公开了用于检测冠状动脉疾病的标志,其能够指示患者具有罹患或发展冠状动脉疾病的风险。这些包括15种“首选”分子,即:C18:3胆固醇酯,C32:1磷脂酰胆碱,丙氨酸,脂质(主要为VLDL),赖氨酸,十六酸,C36:2磷脂酰胆碱,甲酸盐(或酯),C32:2磷脂酰胆碱,C18:2(亚油酸),胆固醇,C18:2溶血磷脂酰胆碱,C36:3磷脂酰胆碱,C34:4磷脂酰胆碱,和C34:3磷脂酰胆碱。
此外,US2007/0099242描述了一种确定受试对象是否患有心血管疾病或具有发展心血管疾病的风险的方法。该方法包括确定生物样品或其HDL亚组分中的生物标志的量相对于对照样品的变化,其中,所述生物标志是载脂蛋白C-IV("ApoC-IV")、对氧磷酶1("PON-1")、补体因子3("C3")、载脂蛋白A-IV("ApoA-IV")、载脂蛋白E("ApoE")、载脂蛋白LI("ApoL1")、补体因子C4("C4")、补体因子C4B1("C4B1")、组蛋白H2A、载脂蛋白C-II("ApoC-II")、载脂蛋白M("ApoM")、玻连蛋白、触珠蛋白相关蛋白和簇连蛋白中的至少一种。该文献还公开了一种检测一种或多种粥样硬化病变的存在的方法,其中,检测了生物样品或其HDL亚组分中的生物标志的量相对于对照样品的变化,且其中,所述生物标志选自PON-1、C3、C4、ApoE、ApoM和C4B1。该文献中提及的所有生物标志都是蛋白生物标志或脂蛋白生物标志。
WO2011/063470比较了冠脉疾病(稳定)患者和急性冠脉综合征(ACS)患者(具有急性胸痛、ECG变化和肌钙蛋白I增加)的脂质特征信息。该比较结果揭示出与肌钙蛋白I和ACS的临床标志相关的脂质标志,表明这些脂质可以用作急性心肌缺血的生物标志。然而,在急性心血管事件背景下,肌钙蛋白I看上去是比脂质特征信息更优异的标志(Meikle等,Plasma lipidomic analysis of stable and unstable coronary arterydisease.Arterioscler Thromb Vasc Biol.2011年11月;31(11):2723-32.),这些发现并不能预测患者的后果,也不能预测急性心肌缺血或心血管性死亡的长期风险。
从之前的工作并不能外推得到脂质分析一定会产生可预测与CVD/CAD相关的致命后果的CVD生物标志。仍然需要可用于从整体普遍患有CVD/CAD或有患CVD/CAD风险的患者中鉴定出特定的风险患者群的特定标志。
本发明通过对确定的分子脂质物种进行绝对定量或接近绝对定量代替对多种分析物进行信息收集而鉴定出了高风险CVD的生物标志。重要的是,很多已有的候选生物标志是多种因子的复合指纹,而本文中的脂质组学方法显示出的值已经处于单一物质或其比率的水平。本申请公开了相对于现有技术有所改进的脂质测定方法,因为该方法考虑了影响脂质代谢的因素,例如降脂治疗(例如他汀药物)和糖尿病。因此,本申请提供了新型的个体化预测标志。
发明内容
本发明提供用于预测和预防未接受他汀药物治疗的CVD/CAD患者的严重的CVD/CAD相关并发症(包括AMI、卒中和死亡)的新颖脂质组学标志。这些标志因此提供了一种用来鉴定和治疗高风险冠状动脉疾病患者的手段。具体而言,已发现本文所提供的脂质分子、脂质-脂质浓度比和脂质-临床浓度比当在来自CAD患者的样品中显示出增加的或降低的水平(视具体情况而定)时是本发明的方法和应用中的有效的脂质组学标志。与目前预测CVD/CAD后果的临床使用的标志相比,这些灵敏的特异性的标志经特定测试显示出优越的诊断价值和预后价值。实际上,目前可用的生物标志(例如LDL-C或HDL-C)在预测CAD患者的CVD死亡风险时仅具有非常有限的价值或没有价值。因此,相对于目前用来诊断和/或预测CVD和CVD并发症的其他标志(包括LDL-C、总血浆/血清胆固醇以及载脂蛋白B和A1),本发明具有显著的优势。所以,本文提供的脂质组学标志使得可以对发展主要CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险进行更好的诊断或评估。
根据本发明,本文特别公开了用于确定未接受他汀药物治疗的CVD患者发展CVD并发症的风险、或用于确定所述患者的CVD风险(包括死亡、心肌梗死(MI)、心绞痛、短暂性脑缺血发作(TIA)和卒中)的示警征兆的方法。
本发明的方法通常包括以下步骤:a)提供来自CAD受试对象的生物样品;b)确定所述样品的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者相应特征信息(即,确定关于本发明的脂质组学标志的信息);和c)将所确定的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者所述相应特征信息与对照中的对应的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者相应特征信息进行比较。
如上所述,在受试对象样品和对照(或对照样品)之间所要比较的脂质组学标志可以是本文所描述和要求保护的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比中的一项或多项或者其组合(即相应特征信息)。在这点上,对照或对照样品使得可以建立脂质组学标志基线或起点。
本发明的脂质组学标志使得可以预测和预防致命的CVD并发症。这将促进更早的干预,更少的症状发展和痛苦,以及下降的与CVD相关的发病率/死亡率。因此,本文所描述和要求保护的脂质组学标志使得可以为有风险发展主要CVD并发症的患者进行药物干预的个体定制。
换言之,本发明公开了用于预测未接受他汀药物治疗的CVD患者的CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的诊断性和/或预测性脂质标志及脂质-脂质或脂质-临床浓度比。本发明使用脂质浓度、脂质-脂质和/或脂质-临床浓度比的测量值来确定所述受试对象发展CVD并发症(例如AMI和/或CVD死亡)的风险。受试对象可以之前已患有心血管疾病事件(例如心绞痛、心肌梗死或卒中)。
因此,在本发明的一方面,提供了一种确定未接受他汀药物治疗的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险增大,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/20:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/22:0)/Cer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)(表3);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/PC16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/Cer(d18:1/24:1),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)(表3)。
在一个特定实施方式中,与对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/PC16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)(表3)。
在另一个替代性实施方式中,本发明涉及一种确定未接受他汀药物治疗的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险增大,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:GlcCer(d18:1/16:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),和PC16:0/18:2/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表3);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L)和PC18:0/22:6/超敏C反应蛋白(mg/L)(表3)。
为了实现本发明的目的,且特别针对脂质-临床浓度比,载脂蛋白A-I测量也可以是载脂蛋白A-II测量。
在本发明的另一方面,提供了一种确定未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如急性心肌梗死(AMI)和/或CVD死亡)的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的浓度表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险增大,其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:CE19:1oxCE682.6,GlcCer(d18:1/16:0),SM(d18:1/18:1),CE20:4,LacCer(d18:1/16:0),Cer18:1/16:0,SM18:1/16:0,和CE16:0(表4a、6和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC18:0/22:6,SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),PC16:0/22:6,SM18:1/24:0,和LPC16:0(表4a、6和8)。
在一个特定实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:CE19:1(oxCE682.6),CE20:4,Cer18:1/16:0,和SM18:1/16:0(表4a、6和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC18:0/22:6,SM18:1/24:0,和LPC16:0(表4a、6和8)。
在一个优选实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:GlcCer(d18:1/16:0),CE20:4,LacCer(d18:1/16:0),Cer18:1/16:0,SM18:1/16:0,和CE16:0(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC16:0/22:6,SM18:1/24:0,和LPC16:0(表8)。
在一个特别优选的实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:CE20:4,Cer18:1/16:0,和SM18:1/16:0(表8);且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:SM18:1/24:0和LPC16:0(表8)。
在替代性实施方式中,本发明涉及一种确定未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI和/或CVD死亡)的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险增大,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,CE16:0/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/22:0)/PC18:0/22:6,CE18:2/PC18:0/22:6,CE18:1/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,CE20:4/PC18:0/22:6,CE22:6/PC18:0/22:6,PC16:0/16:0/PC16:0/22:6,CE16:0/PC16:0/22:6,CE18:2/PC16:0/22:6,Gb3(d18:1/24:0)/PC16:0/22:6,CE18:1/PC16:0/22:6,CE20:4/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/22:0),CE16:0/Cer(d18:1/24:0),SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),和SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)(表4b);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/GlcCer(d18:1/18:0),Cer(d18:1/24:0)/GlcCer(d18:1/16:0),PC16:0/22:6/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC16:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:0),PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH),和PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:1)(表4b)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC16:0/22:6,CE16:0/PC18:0/22:6,CE18:2/PC18:0/22:6,和Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0)(表6);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)和PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:1)(表6)。
在又一替代性实施方式中,本发明涉及一种确定未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI和/或CVD死亡)的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险增大,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),CE19:1oxCE682.6/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/20:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),和Cer(d18:1/16:0)/载脂蛋白B(mg/dL)(表4c);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:LacCer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),CE17:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),GlcCer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),Gb3(d18:1/22:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/20:3/载脂蛋白B(mg/dL),PC16:0/16:1/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL),PC18:1/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/18:2/超敏C反应蛋白(mg/L),Cer(d18:1/24:1)/超敏C反应蛋白(mg/L),Cer(d18:1/22:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/22:6/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/18:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/20:3/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/载脂蛋白B(mg/dL),PC18:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL),SM(d18:1/23:0)(d18:1/22:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),LPC16:0/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/22:6/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/22:6/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),和PC16:0/18:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表4c)。
在一个特定实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比选自:CE19:1oxCE682.6/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/20:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),和GlcCer(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表4c)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表6);
且/或与所述对照相比减少的一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:0/22:6/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),和PC18:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL)(表6)。
在本发明的另一方面,提供了一种确定未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如急性心肌梗死(AMI)和/或CVD死亡)的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的浓度表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险增大,其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/24:1),Gb3(d18:1/16:0),GlcCer18:1/16:0,LacCer18:1/16:0,和PC16:0/22:6(表5a、7和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE20:4,CE18:0,CE14:0,CE22:6,CE18:3,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表5a、7和8)。
在一个特定实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/24:1),Gb3(d18:1/16:0),GlcCer18:1/16:0,和LacCer18:1/16:0(表5a、7和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE20:4,CE22:6,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表5a、7和8)。
在一个优选实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb318:1/16:0,GlcCer18:1/16:0,LacCer18:1/16:0,和PC16:0/22:6(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:CE14:0,CE22:6,CE18:3,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表8)。
在一个特别优选的实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb318:1/16:0,GlcCer18:1/16:0,和LacCer18:1/16:0(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:CE22:6,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表8)。
在替代性实施方式中,本发明涉及一种确定未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI和/或CVD死亡)的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险增大,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/24:1)/PC O-16:0/20:4-烷基,Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/22:0),和Gb3(d18:1/22:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH)(表5b);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:0/PC18:0/18:2,PC18:0/18:2/PE18:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PE18:0/18:2,CE18:0/CE18:1,CE18:2/Gb3(d18:1/16:0),CE16:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:0/PC16:0/22:6,CE14:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:0/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),CE18:3/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE18:0/PC16:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:3/PC16:0/18:1,PC18:0/20:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE14:0/PC16:0/16:0,CE17:1/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC18:0/20:3/PE18:0/18:2,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),CE18:0/Cer(d18:1/16:0),CE18:0/Cer(d18:1/24:1),CE18:0/PC16:0/16:0,CE18:0/PC18:1/18:1,CE18:0/PC16:0/18:1,CE20:4/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/PE18:0/18:2,CE20:4/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:0/Cer(d18:1/26:1),CE18:3/Gb3(d18:1/22:0),CE14:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PC O-16:0/18:1-烷基,CE20:4/Gb3(d18:1/18:0),CE18:3/Gb3(d18:1/24:1),CE14:0/Gb3(d18:1/24:1),CE20:5/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/18:0),CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表5b)。
在一个特定实施方式中,与对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:0/PC18:0/18:2,PC18:0/18:2/PE18:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PE18:0/18:2,CE18:0/CE18:1,CE18:2/Gb3(d18:1/16:0),CE16:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:0/PC16:0/22:6,CE14:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:0/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),CE18:3/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE18:0/PC16:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PCO-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:3/PC16:0/18:1,PC18:0/20:3/PCO-16:0/18:1-烷基,CE14:0/PC16:0/16:0,CE17:1/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC18:0/20:3/PE18:0/18:2,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),CE18:0/Cer(d18:1/24:1),CE18:0/PC16:0/16:0,CE18:0/PC18:1/18:1,CE18:0/PC16:0/18:1,CE20:4/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/PE18:0/18:2,CE20:4/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:0/Cer(d18:1/26:1),CE18:3/Gb3(d18:1/22:0),CE14:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PC O-16:0/18:1-烷基,CE20:4/Gb3(d18:1/18:0),CE18:3/Gb3(d18:1/24:1),CE14:0/Gb3(d18:1/24:1),CE20:5/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/18:0),CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表5b)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),和Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0)(表7);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:3/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:3/PCO-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表7)。
在又一替代性实施方式中,本发明涉及一种确定未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI和/或CVD死亡)的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险增大,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:1/18:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/22:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),CE17:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC16:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-18:0/18:2-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/24:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC17:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),CE15:0/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-16:0/18:2-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/载脂蛋白B(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/载脂蛋白A-I(mg/dL),PCO-16:0/18:1-烷基/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/载脂蛋白B(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC16:0/16:0/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/18:2/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/16:0/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/载脂蛋白B(mg/dL),和SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表5c);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:CE14:0/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)和CE14:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表5c)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:1/18:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),和LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL)(表7);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-临床浓度比是:CE14:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表7)。
在另一方面,本发明涉及一种评估对未接受他汀药物治疗的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述治疗有效,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/20:0)/Cer(d18:1/24:0),SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),和Cer(d18:1/22:0)/Cer(d18:1/24:0)(表3);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/PC16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/Cer(d18:1/24:1),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)(表3)。
在一个特定实施方式中,与对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/PC16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)(表3)。
在另一替代性实施方式中,本发明涉及一种评估对未接受他汀药物治疗的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述治疗有效,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:GlcCer(d18:1/16:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),和PC16:0/18:2/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表3);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L)和PC18:0/22:6/超敏C反应蛋白(mg/L)(表3)。
为了实现本发明的目的,且特别针对脂质-临床浓度比,载脂蛋白A-I测量也可以是载脂蛋白A-II测量。
在另一方面,本发明涉及一种评估对未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的浓度表明所述治疗有效,其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:CE19:1oxCE682.6,GlcCer(d18:1/16:0),SM(d18:1/18:1),CE20:4,LacCer(d18:1/16:0),Cer18:1/16:0,SM18:1/16:0,和CE16:0(表4a、6和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC18:0/22:6,SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),PC16:0/22:6,SM18:1/24:0,和LPC16:0(表4a、6和8)。
在一个特定实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:CE19:1(oxCE682.6),CE20:4,Cer18:1/16:0,和SM18:1/16:0(表4a、6和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC18:0/22:6和SM18:1/24:0和LPC16:0(表4a、6和8)。
在一个优选实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:GlcCer(d18:1/16:0),CE20:4,LacCer(d18:1/16:0),Cer18:1/16:0,SM18:1/16:0,和CE16:0(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC16:0/22:6,SM18:1/24:0,和LPC16:0(表8)。
在一个特别优选的实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:CE20:4,Cer18:1/16:0,和SM18:1/16:0(表8);且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:SM18:1/24:0和LPC16:0(表8)。
在一个替代性实施方式中,本发明涉及一种评估对未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述治疗有效,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,CE16:0/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/22:0)/PC18:0/22:6,CE18:2/PC18:0/22:6,CE18:1/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,CE20:4/PC18:0/22:6,CE22:6/PC18:0/22:6,PC16:0/16:0/PC16:0/22:6,CE16:0/PC16:0/22:6,CE18:2/PC16:0/22:6,Gb3(d18:1/24:0)/PC16:0/22:6,CE18:1/PC16:0/22:6,CE20:4/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/22:0),CE16:0/Cer(d18:1/24:0),SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),和SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)(表4b);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/GlcCer(d18:1/18:0),Cer(d18:1/24:0)/GlcCer(d18:1/16:0),PC16:0/22:6/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC16:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:0),PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH),和PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:1)(表4b)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC16:0/22:6,CE16:0/PC18:0/22:6,CE18:2/PC18:0/22:6,和Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0)(表6);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)和PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:1)(表6)。
在另一个替代性实施方式中,提供了一种评估对未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述治疗有效,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),CE19:1oxCE682.6/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/20:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),和Cer(d18:1/16:0)/载脂蛋白B(mg/dL)(表4c);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:LacCer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),CE17:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),GlcCer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),Gb3(d18:1/22:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/20:3/载脂蛋白B(mg/dL),PC16:0/16:1/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL),PC18:1/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/18:2/超敏C反应蛋白(mg/L),Cer(d18:1/24:1)/超敏C反应蛋白(mg/L),Cer(d18:1/22:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/22:6/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/18:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/20:3/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/载脂蛋白B(mg/dL),PC18:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL),SM(d18:1/23:0)(d18:1/22:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),LPC16:0/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/22:6/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/22:6/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),和PC16:0/18:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表4c)。
在一个特定实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比选自:CE19:1oxCE682.6/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/20:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),和GlcCer(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表4c)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比是:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表6);
且/或与所述对照相比减少的一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:0/22:6/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),和PC18:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL)(表6)。
在另一方面,本发明涉及一种评估对未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的浓度表明所述治疗有效,其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/24:1),Gb3(d18:1/16:0),GlcCer18:1/16:0,LacCer18:1/16:0,和PC16:0/22:6(表5a、7和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE20:4,CE18:0,CE14:0,CE22:6,CE18:3,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表5a、7和8)。
在一个特定实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/24:1),Gb3(d18:1/16:0),GlcCer18:1/16:0,和LacCer18:1/16:0(表5a、7和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE20:4,CE22:6,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表5a、7和8)。
在一个优选实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb318:1/16:0,GlcCer18:1/16:0,LacCer18:1/16:0,和PC16:0/22:6(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:CE14:0,CE22:6,CE18:3,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表8)。
在一个特别优选的实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb318:1/16:0,GlcCer18:1/16:0,和LacCer18:1/16:0(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:CE22:6,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表8)。
在一个替代性实施方式中,本发明涉及一种评估对未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述治疗有效,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/24:1)/PCO-16:0/20:4-烷基,Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/22:0),和Gb3(d18:1/22:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH)(表5b);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:0/PC18:0/18:2,PC18:0/18:2/PE18:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PE18:0/18:2,CE18:0/CE18:1,CE18:2/Gb3(d18:1/16:0),CE16:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:0/PC16:0/22:6,CE14:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:0/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),CE18:3/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE18:0/PC16:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:3/PC16:0/18:1,PC18:0/20:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE14:0/PC16:0/16:0,CE17:1/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC18:0/20:3/PE18:0/18:2,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),CE18:0/Cer(d18:1/16:0),CE18:0/Cer(d18:1/24:1),CE18:0/PC16:0/16:0,CE18:0/PC18:1/18:1,CE18:0/PC16:0/18:1,CE20:4/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/PE18:0/18:2,CE20:4/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:0/Cer(d18:1/26:1),CE18:3/Gb3(d18:1/22:0),CE14:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PC O-16:0/18:1-烷基,CE20:4/Gb3(d18:1/18:0),CE18:3/Gb3(d18:1/24:1),CE14:0/Gb3(d18:1/24:1),CE20:5/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/18:0),CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表5b)。
在一个特定实施方式中,与对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:0/PC18:0/18:2,PC18:0/18:2/PE18:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PE18:0/18:2,CE18:0/CE18:1,CE18:2/Gb3(d18:1/16:0),CE16:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:0/PC16:0/22:6,CE14:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:0/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),CE18:3/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE18:0/PC16:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PCO-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:3/PC16:0/18:1,PC18:0/20:3/PCO-16:0/18:1-烷基,CE14:0/PC16:0/16:0,CE17:1/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC18:0/20:3/PE18:0/18:2,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),CE18:0/Cer(d18:1/24:1),CE18:0/PC16:0/16:0,CE18:0/PC18:1/18:1,CE18:0/PC16:0/18:1,CE20:4/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/PE18:0/18:2,CE20:4/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:0/Cer(d18:1/26:1),CE18:3/Gb3(d18:1/22:0),CE14:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PC O-16:0/18:1-烷基,CE20:4/Gb3(d18:1/18:0),CE18:3/Gb3(d18:1/24:1),CE14:0/Gb3(d18:1/24:1),CE20:5/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/18:0),CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表5b)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),和Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0)(表7);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:3/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:3/PCO-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表7)。
在另一个替代性实施方式中,提供了一种评估对未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述治疗有效,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:1/18:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/22:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),CE17:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC16:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-18:0/18:2-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/24:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC17:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),CE15:0/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-16:0/18:2-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/载脂蛋白B(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/载脂蛋白A-I(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/载脂蛋白B(mg/dL),PCO-16:0/18:1-烷基/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC16:0/16:0/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/18:2/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/16:0/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/载脂蛋白B(mg/dL),和SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表5c);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:CE14:0/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)和CE14:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表5c)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:1/18:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),和LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL)(表7);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-临床浓度比是:CE14:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表7)。
在另一方面,本发明涉及一种为未接受他汀药物治疗的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/20:0)/Cer(d18:1/24:0),SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),和Cer(d18:1/22:0)/Cer(d18:1/24:0)(表3);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/PC16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/Cer(d18:1/24:1),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)(表3)。
在一个特定实施方式中,与对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/PC16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)(表3)。
在另一替代性实施方式中,本发明涉及一种为未接受他汀药物治疗的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:GlcCer(d18:1/16:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),和PC16:0/18:2/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表3);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L)和PC18:0/22:6/超敏C反应蛋白(mg/L)(表3)。
为了实现本发明的目的,且特别针对脂质-临床浓度比,载脂蛋白A-I测量也可以是载脂蛋白A-II测量。
在另一方面,本发明涉及一种为未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度;其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的浓度表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:CE19:1(oxCE682.6),GlcCer(d18:1/16:0),SM(d18:1/18:1),CE20:4,LacCer(d18:1/16:0),Cer18:1/16:0,SM18:1/16:0,和CE16:0(表4a、6和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC18:0/22:6,SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),PC16:0/22:6,SM18:1/24:0,和LPC16:0(表4a、6和8)。
在一个特定实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:CE19:1(oxCE682.6),CE20:4,Cer18:1/16:0,和SM18:1/16:0(表4a、6和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC18:0/22:6,SM18:1/24:0,和LPC16:0(表4a、6和8)。
在一个优选实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:GlcCer(d18:1/16:0),CE20:4,LacCer(d18:1/16:0),Cer18:1/16:0,SM18:1/16:0,和CE16:0(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC16:0/22:6,SM18:1/24:0,和LPC16:0(表8)。
在一个特别优选的实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:CE20:4,Cer18:1/16:0,和SM18:1/16:0(表8);且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:SM18:1/24:0和LPC16:0(表8)。
在一个替代性实施方式中,本发明涉及一种为未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,CE16:0/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/22:0)/PC18:0/22:6,CE18:2/PC18:0/22:6,CE18:1/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,CE20:4/PC18:0/22:6,CE22:6/PC18:0/22:6,PC16:0/16:0/PC16:0/22:6,CE16:0/PC16:0/22:6,CE18:2/PC16:0/22:6,Gb3(d18:1/24:0)/PC16:0/22:6,CE18:1/PC16:0/22:6,CE20:4/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/22:0),CE16:0/Cer(d18:1/24:0),SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH),和SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)(表4b);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/GlcCer(d18:1/18:0),Cer(d18:1/24:0)/GlcCer(d18:1/16:0),PC16:0/22:6/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC16:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH),PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:0),PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH),和PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:1)(表4b)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC16:0/22:6,CE16:0/PC18:0/22:6,CE18:2/PC18:0/22:6,和Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0)(表6);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:PC18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)和PC18:0/22:6/SM(d18:1/18:1)(表6)。
在另一个替代性实施方式中,本发明涉及一种为未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),CE19:1oxCE682.6/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/20:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),和Cer(d18:1/16:0)/载脂蛋白B(mg/dL)(表4c);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:LacCer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),CE17:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),GlcCer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),Gb3(d18:1/22:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/20:3/载脂蛋白B(mg/dL),PC16:0/16:1/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL),PC18:1/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/18:2/超敏C反应蛋白(mg/L),Cer(d18:1/24:1)/超敏C反应蛋白(mg/L),Cer(d18:1/22:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/22:6/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/18:0)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/20:3/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/载脂蛋白B(mg/dL),PC18:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL),SM(d18:1/23:0)(d18:1/22:1-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/18:1/超敏C反应蛋白(mg/L),LPC16:0/超敏C反应蛋白(mg/L),PC16:0/22:6/超敏C反应蛋白(mg/L),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/超敏C反应蛋白(mg/L),PC18:0/22:6/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),和PC16:0/18:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表4c)。
在一个特定实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比选自:CE19:1(oxCE682.6)/载脂蛋白A-I(mg/dL),GlcCer(d18:1/18:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),GlcCer(d18:1/20:0)/载脂蛋白A-I(mg/dL),和GlcCer(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表4c)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比是:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表6);
且/或与所述对照相比减少的一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:0/22:6/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC18:0/22:6/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),和PC18:0/22:6/载脂蛋白B(mg/dL)(表6)。
在另一方面,本发明涉及一种为未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度;其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的浓度表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/24:1),Gb3(d18:1/16:0),GlcCer18:1/16:0,LacCer18:1/16:0,和PC16:0/22:6(表5a、7和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE20:4,CE18:0,CE14:0,CE22:6,CE18:3,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表5a、7和8)。
在一个特定实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/24:1),Gb3(d18:1/16:0),GlcCer18:1/16:0,和LacCer18:1/16:0(表5a、7和8);
且其中,与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE20:4,CE22:6,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表5a、7和8)。
在一个优选实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb318:1/16:0,GlcCer18:1/16:0,LacCer18:1/16:0,和PC16:0/22:6(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:CE14:0,CE22:6,CE18:3,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表8)。
在一个特别优选的实施方式中,与对照相比浓度增加的一种或多种脂质选自:Gb318:1/16:0,GlcCer18:1/16:0,和LacCer18:1/16:0(表8);
且与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:CE22:6,GlcCer18:1/18:0,和SM18:1/24:0(表8)。
在一个替代性实施方式中,本发明涉及一种为未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-脂质浓度比表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/24:1)/PC O-16:0/20:4-烷基,Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/22:0),和Gb3(d18:1/22:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH)(表5b);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:0/PC18:0/18:2,PC18:0/18:2/PE18:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PE18:0/18:2,CE18:0/CE18:1,CE18:2/Gb3(d18:1/16:0),CE16:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:0/PC16:0/22:6,CE14:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:0/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),CE18:3/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE18:0/PC16:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:3/PC16:0/18:1,PC18:0/20:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE14:0/PC16:0/16:0,CE17:1/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC18:0/20:3/PE18:0/18:2,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),CE18:0/Cer(d18:1/16:0),CE18:0/Cer(d18:1/24:1),CE18:0/PC16:0/16:0,CE18:0/PC18:1/18:1,CE18:0/PC16:0/18:1,CE20:4/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/PE18:0/18:2,CE20:4/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:0/Cer(d18:1/26:1),CE18:3/Gb3(d18:1/22:0),CE14:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PC O-16:0/18:1-烷基,CE20:4/Gb3(d18:1/18:0),CE18:3/Gb3(d18:1/24:1),CE14:0/Gb3(d18:1/24:1),CE20:5/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/18:0),CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表5b)。
在一个特定实施方式中,与对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:0/PC18:0/18:2,PC18:0/18:2/PE18:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PE18:0/18:2,CE18:0/CE18:1,CE18:2/Gb3(d18:1/16:0),CE16:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:0/PC16:0/22:6,CE14:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:0/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH),CE18:3/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE18:0/PC16:0/18:2,Cer(d18:1/24:0)/PCO-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/24:0),CE18:3/PC16:0/18:1,PC18:0/20:3/PCO-16:0/18:1-烷基,CE14:0/PC16:0/16:0,CE17:1/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),PC18:0/20:3/PE18:0/18:2,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),CE18:0/Cer(d18:1/24:1),CE18:0/PC16:0/16:0,CE18:0/PC18:1/18:1,CE18:0/PC16:0/18:1,CE20:4/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/PE18:0/18:2,CE20:4/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:0/Cer(d18:1/26:1),CE18:3/Gb3(d18:1/22:0),CE14:0/Gb3(d18:1/16:0),CE18:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:3/Gb3(d18:1/16:0),CE14:0/PC O-16:0/18:1-烷基,CE20:4/Gb3(d18:1/18:0),CE18:3/Gb3(d18:1/24:1),CE14:0/Gb3(d18:1/24:1),CE20:5/PC O-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/18:0),CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表5b)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),和Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0)(表7);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE18:3/PC16:0/18:1,CE18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE14:0/PE18:0/18:2,CE18:3/PCO-16:0/18:1-烷基,CE18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE18:0/Gb3(d18:1/24:1)(表7)。
在另一个替代性实施方式中,本发明涉及一种为未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗的方法,所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:1/18:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/22:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),CE17:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC16:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-18:0/18:2-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),LacCer(d18:1/24:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC17:0/18:2/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),CE15:0/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),PC O-16:0/18:2-烷基/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/载脂蛋白B(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/载脂蛋白A-I(mg/dL),PCO-16:0/18:1-烷基/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:1)/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/24:0)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/载脂蛋白B(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC16:0/16:0/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白B(mg/dL),PC O-16:0/18:1-烷基/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH)/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/22:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/甘油三酯(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/18:2/LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL),PC16:0/16:0/总胆固醇(EDTA)(mg/dL),PE18:0/18:2/载脂蛋白B(mg/dL),和SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH)/总胆固醇(EDTA)(mg/dL)(表5c);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:CE14:0/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)和CE14:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表5c)。
在一个优选实施方式中,与对照相比增加的一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC18:1/18:1/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL),和LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL)(表7);
且与所述对照相比减少的一种或多种脂质-临床浓度比是:CE14:0/超敏C反应蛋白(mg/L)(表7)。
根据本文所描述和要求保护的本发明的所有方面和实施方式,通常使用测定来确定脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比。
在将按照本文所描述和要求保护的方法来评估治疗有效性或选择适合的治疗的本发明的一个实施方式中,所述治疗是脂质调节(lipid modifying)治疗。
本发明还涵盖了对来自受试对象的样品中的脂质浓度、脂质-脂质浓度比和/或脂质-临床浓度比的分析,其中所述受试对象之前已经用一种或多种他汀药物和/或任何其他HMG-CoA还原酶抑制剂治疗过。
为实现本发明的目的,可以确定表3~8中的至少一种脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者其组合,从而评估所述患者是否有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)、评估对受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的治疗的有效性、或为受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)选择适合的治疗。然而,在此方面,还可以确定表3~8中的至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种或至少8种脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者其组合,这可以是有利的。如果确定了多于一种脂质组学标志且将其用于评价,可以有利的是,对特定的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者其组合给予比上述评价、评估或选择中的其他标志更高的权重。
在本发明的背景下,CVD的特征通常为冠状动脉疾病、外周动脉疾病、卒中和/或CVD死亡。对于按照本发明分析了其样品的受试对象,其CVD可以是动脉粥样硬化所诱导的。通常,本发明实施了涉及到有发展CVD的风险且具有动脉粥样硬化的受试对象的方法。作为另一选择,本发明实施了涉及到有发展CVD的风险且不具有动脉粥样硬化的受试对象的方法。
在另一个实施方式中,本发明的方法还包括确定受试对象的样品中的总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白B(ApoB)和/或载脂蛋白C-III的血清或血浆水平。在本发明的一个实施方式中,受试对象不具有:血清或血浆水平增加的总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白C-III或载脂蛋白B(ApoB)中的一种或多种,或血清水平减少的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。
根据本文所描述和要求保护的所有方面和实施方式,来自受试对象的样品和对照样品均优选为血液样品、更优选为血浆样品,或还优选为血清样品。其还可以是尿或者组织或者血液、血浆、血清、尿或组织的组分,例如脂蛋白组分。可以制备血液样品,并可以用本领域技术人员公知的技术从所述血液样品中分离出血浆或血清或其组分。作为另一选择,来自受试对象的样品和对照样品还可以是组织样品,例如动脉组织(例如颈动脉组织)或动脉斑物质(例如颈动脉斑物质)。
从患者样品和(适用时)对应的对照样品收集关于脂质组学标志的信息(即,脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者其组合(即相应特征信息))可以用多种化学分析技术和高分辨率分析技术来进行。适合的分析技术包括但不限于质谱测定法和核磁共振谱测定法。可以使用能够解析单个脂质或脂质类别并提供其结构信息的任何高分辨率技术来收集关于所讨论的脂质组学标志的信息(例如,来自生物样品的脂质特征信息)。在本发明的方法中,脂质的水平用下述方法来确定:质谱测定法,核磁共振谱法,荧光光谱法或双极性干扰测定法,诸如HPLC、UHPLC或UPLC等高效分离方法,和/或诸如ELISA等免疫测定。根据替代性或进一步的实施方式,可以通过将分析物与能够特异性地结合该分析物的结合性部分组合来检测和/或定量样品中的该分析物。所述结合性部分可以包括例如配体-受体对(即能够具有特异性结合相互作用的分子对)中的成员。所述结合性部分还可以包括例如特异性结合对(例如抗体-抗原、酶-底物、核酸类配体、其他蛋白配体或本领域中已知的其他特异性结合对)中的成员。在优选实施方式中,用质谱测定法(MS)来收集脂质组学特征信息,其中,MS装置可以与直接注入方法和高效分离方法(例如HPLC、UHPLC或UPLC)联合。在将所收集的脂质特征信息与对照进行比较时,使用所收集的脂质组学特征信息中的单个的脂质或脂质类别的量。
用质谱测定法(MS)收集关于脂质组学标志的信息是本发明的优选实施方式之一。MS装置可以与直接样品注入方法(例如自动纳米流离子源设备)或与高效分离方法(例如高效液相色谱(HPLC)、超高压液相色谱(UHPLC)或超效液相色谱(UPLC))联合。
本发明的方法可以用来确定所述患者发展CVD并发症的风险,特别是严重的CVD并发症,例如死亡和心肌梗死(MI),包括急性心肌梗死(AMI)。
在本发明的一个实施方式中,提供了一种用于治疗或预防有需要的受试对象的CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的方法。所述方法包括施用治疗有效剂量的能够调节表3~8中所述的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比中的一项或多项的药物,其中,所述剂量使得所述受试对象的样品中的所述一种或多种脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比与对照(例如对照样品)中的相应的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比相比没有显著差异。在优选实施方式中,所述药物是他汀药物或其他HMG-CoA还原酶抑制剂。在此方面,特别优选的他汀药物为阿托伐他汀(atorvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、氟伐他汀XL(fluvastatin XL)、洛伐他汀(lovastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)、罗舒伐他汀(rosuvastatin)或辛伐他汀(simvastatin)。在另一优选实施方式中,所述药物是:尼克酸(烟酸);胆固醇吸收抑制剂,例如依泽替米贝(ezetimibe)或SCH-48461;胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂,例如托塞曲匹(torcetrapib)、安塞曲匹(anacetrapib)或JTT-705;胆汁酸多价螯合剂,例如考来维仑(colesevelam)、考来烯胺(cholestyramine)或考来替泊(colestipol);或贝特类物质(fibrate),例如非诺贝特(fenofibrate)、吉非贝齐(gemfibrozil)、氯贝丁酯(clofibrate)或苯扎贝特(bezafibrate)。作为另一选择,所述药物还可以是植物固醇(phytosterol)或PCSK9抑制剂。
本发明的另一部分是本文所述的脂质,例如来自表3、4、5、6、7或8中任一个的脂质,所述脂质用于对有风险发展CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的受试对象进行预防或治疗。所述脂质可以作为饮食补充剂或药物来服用。同样还涵盖了对应的治疗方法。同样,本发明还涵盖一种调节剂,所述调节剂用于调节有风险发展CVD和/或一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的受试对象中的本文所述和/或所要求保护的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比(例如表3~8中的那些)。同样还涵盖了对应的治疗方法。在另一个实施方式中,所述调节剂是小分子、反义RNA、小干扰RNA(siRNA)或天然的或经修饰的脂质。
作为另一选择,所述调节剂影响酶的活性、功能或浓度,其中所述酶催化产生或降解表3~8中的任一种脂质的反应。类似的是,本发明涉及通过使用或施用调节剂来为有风险发展CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的受试对象进行预防或治疗,其中,所述调节剂影响酶的活性、功能或浓度,其中所述酶催化产生或降解表3~8中的任一种脂质的反应。
在本发明的一个实施方式中,将抗表3~8中的任一种脂质的抗体用于预测一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)。在本发明的另一个实施方式中,所述抗体可以用于预防或治疗受试对象的一种或多种上述并发症。
本发明的任何方法、药物、脂质、调节剂或抗体都可以用于有风险发展或已患有一种或多种CVD并发症(例如急性心肌梗死)和/或有心血管疾病死亡风险的受试对象。在本发明的目的中,CVD并发症包括严重的CVD并发症,特别是死亡。
本发明还涵盖一种试剂盒,所述试剂盒用于预测CVD和/或一种或多种CVD并发症,或所述试剂盒用于执行本文所描述和/或所要求保护的方法或应用,其中,所述试剂盒包含试剂和参照化合物。所述参照化合物可以是以下(a)~(f)中的一项或多项,但不限于此:(a)选自表3~8中的脂质的脂质标准物;(b)一种或多种对照标志(例如,脂质,优选是与本文所描述和/或所要求保护的任何脂质组学标志对应的脂质,或其他脂质(例如,总PC),或其他分子(例如,蛋白));(c)阳性对照和/或阴性对照;(d)内参标准物和/或外参标准物;(e)校准线对照;(f)能够与表3~8中任一种脂质结合的抗体或其他结合性部分。所述试剂是可用于执行所述方法或应用的溶液、溶剂和/或缓冲剂。
在本发明的一个实施方式中,提供了一种试剂盒,所述试剂盒用于预测CVD和/或一种或多种CVD并发症、或用于执行本发明的方法,其中,所述试剂盒包含(a)选自表3~8中的脂质的脂质标准物和可选的选自以下(b)~(g)的一种或多种其他参照化合物:(b)一种或多种对照标志(例如,脂质,优选是与本文所描述和/或所要求保护的任何脂质组学标志对应的脂质,或其他脂质(例如,总PC),或其他分子(例如,蛋白));(c)阳性对照和/或阴性对照;(d)内参标准物和/或外参标准物,其可以是或不是经化学修饰的、带标签的或在人体中非内源性存在的分子;(e)校准线对照;(f)能够与表3~8中任一种脂质结合的试剂(可选地为抗体);和(g)用于执行所述方法或应用的试剂。
本发明的优选试剂盒包含例如上文列出的组成部分的以下组合:(a)和(b),以及可选的(g);(a)和(c),以及可选的(g);(a)和(d),以及可选的(g);(a)和(e),以及可选的(g);(a)和(f),以及可选的(g);(a)、(b)和(c),以及可选的(g);(a)、(c)和(d),以及可选的(g);(a)、(d)和(e),以及可选的(g);或者(a)、(e)和(f),以及可选的(g)。
在一个优选实施方式中,所要求保护的试剂盒中的一种或多种对照标志是在临床环境中经常测量的分子。例如,优选以下实施方式:其中,一种或多种所述对照标志是CK。
优选的是,所述试剂盒用于预测CVD并发症,其中,来自受试对象的样品中的脂质浓度、脂质比率或其脂质组合使用质谱法来确定。在质谱分析前,可以对所述样品进行纯化和/或其他的样品预处理步骤。纯化步骤可以是但不限于色谱,例如,高效液相色谱(HPLC)和/或超高效液相色谱(UHPLC)。样品预处理步骤可以是但不限于固相萃取(SPE)、衍生化、液-液萃取和/或脂蛋白分级分离。所述质谱法确定可以通过串联式质谱来进行。
如上所述,出于本发明的目的,对照样品可以从一直保持没有任何主要CVD并发症的CAD患者或CAD患者群获得,例如通过将来自所述群体的大量样品混合获得。如果使用CAD患者群,则将来自群体的若干种脂质特征信息组合,并通过该组合产生脂质组学标志。将来自受试对象的样品中的单个脂质或脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比的水平或量与对照中的脂质或脂质比率的水平或量进行比较,从而确定所述受试对象的一种或多种CVD并发症(例如AMI或CVD死亡)的风险。
在一个实施方式中,对照是来自一位或多位CAD患者的样品,其中,对照样品来自没有主要CVD事件史且未接受他汀药物治疗的CAD患者或CAD患者群。未接受他汀药物治疗的对照CAD患者可以具有或不具有2型糖尿病。其也可以是代表来自无主要CVD事件史的未接受他汀药物治疗的CAD患者群的样品组合的样品。作为另一选择,所述对照可以是有关本发明的脂质组学标志的数据集,例如,从无主要CVD事件史的未接受他汀药物治疗的CAD患者采集的样品或从无主要CVD事件史的未接受他汀药物治疗的CAD患者群体采集的样品组合中的本发明的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比的脂质组学标记物有关信息。所述信息可以(因此对应的数据集也可以)已经预先确定、计算得到或外推得到,或可以尚未确定、计算得到或外推得到,或还可以从文献中获得。
作为另一选择,对照是来自一位或多位CAD患者的样品,其中,对照样品来自没有主要CVD事件史且正在接受他汀药物治疗的CAD患者或CAD患者群。正在接受他汀药物治疗的对照CAD患者可以具有或不具有2型糖尿病。其也可以是代表来自无主要CVD事件史的正在接受他汀药物治疗的CAD患者群的样品组合的样品。作为另一选择,所述对照可以是有关本发明的脂质组学标志的数据集,例如,从无主要CVD事件史的正在接受他汀药物治疗的CAD患者采集的样品中或从无主要CVD事件史的正在接受他汀药物治疗的CAD患者群体采集的样品组合中的本发明的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比的有关信息。所述信息可以(因此对应的数据集也可以)已经预先确定、计算得到或外推得到,或可以尚未确定、计算得到或外推得到,或还可以从文献中获得。
优选的是,对照样品是血液、血浆、血清、尿或组织,或其脂蛋白组分。
在另一方面,本发明涉及用于治疗有风险发展一种或多种CVD并发症(例如急性心肌梗死(AMI)和/或CVD死亡)的受试对象的他汀药物或降脂药,其中,在使用本文所描述和/或所要求保护的方法、药物、脂质、调节剂、试剂盒或应用中的任一种时,会将所述受试对象鉴定为有风险发展一种或多种CVD并发症。类似地,本发明涉及一种用他汀药物或降脂药来治疗有风险发展一种或多种CVD并发症的受试对象的方法,其中,在使用本文所描述和/或所要求保护的方法、药物、脂质、调节剂、试剂盒或应用中的任一种时,会将所述受试对象鉴定为有风险发展一种或多种CVD并发症。
在另一实施方式中,本发明涉及用于治疗有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI和/或CVD死亡)的受试对象的他汀药物或降脂药,其中,实际上已经用本文所描述和/或所要求保护的方法、药物、脂质、调节剂、试剂盒或应用中的任一种将所述受试对象鉴定为有风险发展一种或多种CVD并发症。类似地,本发明涉及一种用他汀药物或降脂药来治疗有风险发展一种或多种CVD并发症的受试对象的方法,其中,实际上已经用本文所描述和/或所要求保护的方法、药物、脂质、调节剂、试剂盒或应用中的任一种将所述受试对象鉴定为有风险发展一种或多种CVD并发症。
在又一方面,本发明涉及用于治疗有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI和/或CVD死亡)的受试对象的他汀药物或降脂药,其中,在使用本文所描述和/或所要求保护的方法、药物、脂质、调节剂、试剂盒或应用中的任一种时,会将所述受试对象鉴定为没有风险发展或未患有一种或多种CVD并发症。类似地,本发明涉及一种用他汀药物或降脂药来治疗有风险发展一种或多种CVD并发症的受试对象的方法,其中,在使用本文所描述和/或所要求保护的方法、药物、脂质、调节剂、试剂盒或应用中的任一种时,会将所述受试对象鉴定为没有风险发展一种或多种CVD并发症。
在另一实施方式中,本发明涉及用于治疗有风险发展一种或多种CVD并发症(例如AMI和/或CVD死亡)的受试对象的他汀药物或降脂药,其中,实际上已经用本文所描述和/或所要求保护的方法、药物、脂质、调节剂、试剂盒或应用中的任一种将所述受试对象鉴定为没有风险发展或未遭受他汀药物引发的肌肉毒性。类似地,本发明涉及一种用他汀药物或降脂药来治疗有风险发展一种或多种CVD并发症的受试对象的方法,其中,实际上已经用本文所描述和/或所要求保护的方法、药物、脂质、调节剂、试剂盒或应用中的任一种将所述受试对象鉴定为没有风险发展一种或多种CVD并发症。
在本文的本发明中,已经为在随访期(3年)间未显示出致命后果的在册CAD患者和在随访期间死于因心血管疾病事件的高风险CAD患者测量并定量了脂质生物标志浓度。因此本发明使得能够准确地使用基于脂质的生物标志来鉴定高风险CVD/CAD患者。通过进行仔细的患者选择,使准确性增加了一级,这是因为控制可能影响脂质浓度读数的因素非常重要。与上文描述的之前的工作不同,本发明人使用了singular technology装置上的特定靶向平台来特别针对脂质物种进行分析。
本文所呈现的发明性教导的背景下的技术及其应用方式因以下标准而与本领域的类似工作迥然有别。在样品制备中,样品受到严格的控制和相同的处理,以避免潜在的可能来自不当操作的人为因素。在本发明中,在冰上小心缓慢地解冻样品,随后直接进行用户定制的自动脂质提取,其在脂质操作中具有目前最高的精度,从而使潜在的误差最小化。另外,严格控制样品的冷冻-解冻循环,因为这可以对脂质稳定性产生巨大影响。自动脂质提取基于Folch及其合作者的方法(Folch J等,A simple method for the isolation andpurification of total lipids from animal tissues.J Biol Chem1957,226(1):497-509),该方法使用氯仿和甲醇。在需要以最佳的回收率提取从极性到非极性的大范围脂质类别从而防止脂质物种损失时,上述方法是优选的。脂质类别特定的非内源脂质在适用时被用作内参标准物,以在鉴定(使假阳性最少化)和定量测定所监测的分子脂质物种时获得最高精度。以此方式,以当前的技术所能够取得的最高精度确定了内源分子脂质的绝对量或半绝对量。以分子脂质水平监视了内源脂质和相应的标准物。以此方式,不仅使假阳性鉴定结果最少化,而且可以对分子脂质进行精确地鉴定和定量。使用新型的品质控制系统来严格控制分析品质。其主要通过多个内参标准物(IS)、外参标准物(ES)、IS/ES比和设备对照样品来控制。通过严格控制这些要素,容易将技术和生物学异常值鉴定出并排除在进一步的分析之外。为了在灵敏度、选择性和定量方面获得最佳精度,对每种分子脂质使用了不同的靶向平台。一些脂质通过使用高效液相色谱(HPLC)或超高效液相色谱(UHPLC)并组合基于质谱的多重反应监测(MRM)而得到了最佳分析,而另一些脂质则通过直接注入并组合基于质谱的前体离子扫描和中性丢失扫描技术而得到最佳分析。
具体实施方式
定义:
冠状血管疾病/心血管疾病(CVD)具有其在本领域的通常意义,且用来对影响人体的心脏、心脏瓣膜、血液和脉管系统的多种病况(包括CAD)进行分类。在本发明中,术语CVD和CAD可以互换使用。出于本发明的目的,在一个实施方式中,CVD/CAD患者不包括急性冠脉综合征(ACS)患者。在一个替代性实施方式中,ACS包括在CVD/CAD中。本发明所述的心血管疾病包括内皮功能障碍、冠状动脉疾病、心绞痛、心肌梗死、动脉粥样硬化、充血性心力衰竭、高血压、脑血管疾病、卒中、短暂性缺血发作、深静脉血栓形成、外周动脉疾病、心肌病、心律不齐、主动脉狭窄和动脉瘤。此类疾病经常涉及动脉粥样硬化。在本发明的优选实施方式中,心血管疾病是与动脉粥样硬化相关的心血管疾病。
CAD为冠状动脉疾病,AMI为急性心肌梗死,ACS为急性冠脉综合征,CAC为冠状动脉钙化,RCT为逆向胆固醇运输,LDL为低密度脂蛋白,HDL为高密度脂蛋白,LDL-C为低密度脂蛋白胆固醇,HDL-C为高密度脂蛋白胆固醇,ApoA为载脂蛋白A,ApoB为载脂蛋白B,ApoC为载脂蛋白C,MS为质谱测定法,HPLC为高效液相色谱,UHPLC为超高效液相色谱,UPLC为超效液相色谱。
本文所用的“受试对象”包括所有哺乳动物,包括但不限于人,以及非人灵长类动物、犬、猫、马、绵羊、山羊、牛、兔、猪和啮齿类动物。特别优选的“受试对象”是人。
“样品”的定义为从受试对象或受试对象的组或群体获得的任何生物样品。出于本发明的目的,所述生物样品可以是全血、血清、血浆或血液组分;例如,脂蛋白组分。其还可以是组织样品。然而,在优选实施方式中,所述生物样品是血浆或血清。采集患者的血液样品属于常规临床实践。可以为了例如测量患者的胆固醇水平来采集血液样品。可以用本领域技术人员公知的技术来制备所采集的血液样品并分离出血浆或血清。静脉血液样品可以使用针和BD塑料管或Plus塑料管(BDSSTTM管包含喷涂的二氧化硅和用于血清分离的聚合物凝胶)来从患者中采集。可以通过在室温下以1300RCF离心10分钟来分离出血清,并将其储存在-80℃的小塑料试管中。可以用本领域中公知的方法通过沉淀、超速离心、色谱或凝胶过滤来分离出脂蛋白组分。
出于本发明的目的,根据以下命名法来命名来自脂质组学分析的脂质:CE为胆固醇酯,Cer为神经酰胺,DAG为二酰甘油,PC O为醚连接的PC,Gb3为球形三酰基神经酰胺(globotriaosylceramide),GlcCer为半乳糖基神经酰胺和葡萄糖基神经酰胺,LacCer为乳糖基神经酰胺,LPC为溶血磷脂酰胆碱,PC为磷脂酰胆碱,PE为磷脂酰乙醇胺,PI为磷脂酰肌醇,SM为鞘磷脂。
命名法X:Y表示:X为分子的脂肪酸部分中的碳原子总数,Y为分子的脂肪酸部分中的双键总数。
命名法A/B表示:对于DAG和PC的分子,A和B为与分子的甘油骨架连接的脂肪酸部分的类型。
命名法(dC/A)表示:对于Cer、Gb、GlcCer、LacCer和SM的分子,C为带有通过酰胺连接的脂肪酸部分A的长链基的类型。
根据本发明,对未接受他汀药物治疗的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症的治疗不包括用他汀药物进行的治疗。例如,所述治疗可以是用以下物质进行的治疗:尼克酸(烟酸);胆固醇吸收抑制剂,例如依泽替米贝或SCH-48461;胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂,例如托塞曲匹、安塞曲匹或JTT-705;胆汁酸多价螯合剂,例如考来维仑、考来烯胺和考来替泊;贝特类物质,例如非诺贝特、吉非贝齐、氯贝丁酯和苯扎贝特;植物固醇;或PCSK9抑制剂。
本文所用的表述“与对照样品相比”应理解为包括以下实施方式:其中,实际上针对所关注的脂质组学标志来分析对照样品,即,针对根据本发明的各种方面和实施方式在本文中特别描述和/或要求保护的一种或多种脂质的浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者其组合。然而,应了解的是,上述表述还包括以下实施方式:其中,关于所述对照样品中的所述脂质组学标志的对应信息仅从文献中取得,或者已经预先确定、计算得到或外推得到,或者还未确定、计算得到或外推得到。
本文所用的术语“抗体”包括显示出与所述脂质的特异性结合的单克隆抗体与多克隆抗体、完整抗体、抗体片段和抗体亚片段。因此,适合的“抗体”可以是任何类别的完整免疫球蛋白(例如IgG、IgM、IgA、IgD、IgE、具有双重或多重抗原或表位特异性的嵌合抗体或杂交抗体)或片段(例如F(ab')2、Fab'、Fab等,包括杂交片段),且还包括任何免疫球蛋白或通过结合特异性抗原以形成复合物而具有类似抗体的行为的任何天然的、合成的或遗传改造的蛋白。术语“抗体”涵盖了抗体的抗原结合片段(例如单链抗体、Fab片段、F(ab’)2、Fd片段、Fv片段、dAb(单(可变)域抗体)或纳体(nanobody))以及完整的抗体。例如,Fab分子可以在经遗传转化的宿主(如大肠杆菌)中表达和组装。因此λ载体系统可以用来表达Fab'群,其潜在多样性等于或超过前驱抗体。参见Huse WD等,Science1989,246:1275-81。此类Fab'包含在“抗体”的定义中。给定的分子(包括抗体片段或亚片段)模仿抗体行为并特异性地结合特定抗原的能力可以用本领域已知的结合测定来确定,例如,使用所关注的抗原作为结合配对物来确定。
抗本发明的脂质的抗体可以用本领域技术人员公知的方法来制备。例如,可以用脂质和佐剂来使小鼠免疫化。以两周为间隔对小鼠实施3次免疫化,并每隔一周进行测试采血以获得血清抗体效价,随后从小鼠采集并汇集脾细胞。将脾细胞制备成3个等分部分,这些等分部分或者立即用于融合实验,或者储存在液氮中供今后融合使用。
随后按照Stewart和Fuller,J.Immunol.Methods1989,123:45-53中的程序进行融合实验。在包被有所述脂质的96孔ELISA平板上,用酶联免疫吸附测定(ELISA)对具有正在生长的杂交细胞的孔中的上清液进行单克隆抗体(MAb)分泌者筛选。通过有限稀释来克隆ELISA阳性培养物,通常在2个连续的克隆实验后从单集落建立得到杂交瘤。
实施例
实施例1
材料和方法
本研究是LURIC研究的子项,LURIC研究是针对心血管疾病流行病学的大规模前瞻性研究。LURIC数据库包含了超过3000位患者的临床信息,其中包括基线冠状血管造影、临床使用的生物标志数据和例如随访期(3年)间的CVD死亡率数据。在此生物标志研究中,本发明人将在随访期间死于CVD的未接受他汀药物治疗的CAD病例(n=123)和具有稳定CAD的未接受他汀药物治疗的患者(n=96)进行了比较。将在血管造影中动脉粥样硬化水平显著但在随访期间无CVD相关死亡的受试对象用作对照;而病例组在血管造影中自基线起就类似地具有显著的动脉粥样硬化,此外,他们在随访期间因急性心血管事件而死亡。对无糖尿病的病例(n=55)和对照(n=46)以及有糖尿病的病例(n=68)和对照(n=50)分开进行了统计学分析。这两组的临床特征描述于表1和表2中。
表1.未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象的背景特征
临床特征 | 对照(n=46) | 病例(n=55) |
DM2患者 | 0 | 0 |
高血压患者 | 27(58.7%) | 32(58.2%) |
吸烟者(仍在吸烟或在取样前戒烟不满3年) | 13(28.3%) | 17(30.9%) |
他汀药物使用者 | 0 | 0 |
年龄 | 66.9 | 67.6 |
载脂蛋白A-I(mg/dL) | 134.0 | 125.2 |
载脂蛋白B(mg/dL) | 104.0 | 106.8 |
BMI | 27.2 | 26.3 |
HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL) | 41.3 | 38.2 |
LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL) | 121.8 | 124.8 |
脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL) | 22.8 | 26.4 |
超敏C反应蛋白(mg/L) | 7.4 | 17.2 |
总胆固醇(EDTA)(mg/dL) | 194.8 | 195.5 |
甘油三酯(EDTA)(mg/dL) | 138.0 | 145.6 |
表2.未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象的背景特征
临床特征 | 对照(n=50) | 病例(n=68) |
DM2患者 | 50(100%) | 68(100%) |
高血压患者 | 35(70%) | 41(60.4%) |
吸烟者(仍在吸烟或在取样前戒烟不满3年) | 18(36%) | 21(30.9%) |
他汀药物使用者 | 0 | 0 |
年龄 | 65.1 | 69.0 |
载脂蛋白A-I(mg/dL) | 124.0 | 116.9 |
载脂蛋白B(mg/dL) | 115.5 | 106.7 |
bmi | 27.8 | 28.0 |
HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL) | 35.2 | 34.1 |
LDL胆固醇(EDTA)(mg/dL) | 126.0 | 114.4 |
脂蛋白(a)(EDTA)(mg/dL) | 32.0 | 15.6 |
超敏C反应蛋白(mg/L) | 5.3 | 11.5 |
总胆固醇(EDTA)(mg/dL) | 205.6 | 189.9 |
甘油三酯(EDTA)(mg/dL) | 194.4 | 183.3 |
病例的定义:所有病例都在冠状血管造影中具有显著的动脉疾病(≥20%狭窄),且他们在随访期间全部因CVD而死亡。因此,这些CVD患者具有增加的CVD后果风险。大部分(75%)病例是非ACS患者。
对照的定义:所有对照都在冠状血管造影中具有显著的动脉疾病(≥20%狭窄),但他们在随访期间未因CVD而死亡。对照受试对象在基线评估之前没有任何MI或卒中史。因此,可以认为这些患者是CVD后果风险低的CAD患者。
实施例2
分析方法
质谱测定法达成的脂质组学
使用了直接注入并联用串联型质谱测定法(即,鸟枪脂质组学)和两个液相色谱串联型质谱测定(LC-MS/MS)方法(即,神经酰胺与脑苷脂脂质组学和神经节苷脂质组学)来分析人血清、血浆和颈动脉斑块中的分子脂质物种,从而鉴定出针对冠状动脉疾病(CVD)的脂质生物标志。所用的方法特别针对以下物质的定量进行了优化:胆固醇酯(CE),磷脂酰胆碱(PC),溶血磷脂酰胆碱(LPC)及其他溶血磷脂(LPL),醚连接的磷脂酰胆碱(PC O)及其他醚连接的磷脂(PL O),磷脂酰丝氨酸(PS),磷脂酰乙醇胺(PE),磷脂酰甘油(PG),磷脂酰肌醇(PI),磷脂酸(PA),二酰甘油(DAG),神经酰胺(Cer),葡萄糖基神经酰胺(GlcCer),球形三酰基神经酰胺(Gb3),和乳糖基神经酰胺(LacCer)。
以下物质根据所述方法来使用。HPLC或LC-MS级的氯仿、甲醇、水、乙腈、甲酸、甲醇、异丙醇、乙酸铵、乙酸、氯化钾和丁基羟基甲苯(BHT)购自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO,USA)。
HPLC柱(Acquity BEH C18,2.1×50mm id.1.7μm)购自Waters(Milford,MA,USA)。HPLC前置柱(Widepore C184×2.0mm)购自Phenomenex(Torrance,CA,USA)。所有用于萃取的实验室器具都是耐氯仿的。抗浮质过滤吸液头(Molecular BioProducts)和2ml安全锁Eppendorf管、96孔twin.tec PCR平板及Pierce-it-lite热密封箔购自VWRInternational(West Chester,PA,USA)。CO-RE过滤吸液头和96孔2ml Whatman Uniplate购自HamiltonRobotics(Bonaduz,Switzerland)。合成脂质标准物购自Avanti Polar Lipids(Alabaster,AL,USA)和Matreya(Pleasant Gap,PA,USA)。
根据以下操作规程,在氯仿:甲醇中萃取脂质。将已知量的非内源性合成内参标准物掺入样品中,以进行数据归一化和内源脂质定量。将萃取后掺入的非内源性合成外参标准物用于品质控制。标准物的储备液通过以下方法制备:将适量称取的每种标准物溶解在氯仿:甲醇(2:1,v:v)中,以达到500μM的最终浓度。制作包含每种标准物储备液的内参标准物混合物,并用于脂质萃取。
使每个萃取批次的样品和品质控制用样品在冰上融解。使用冷盒在冰上称取颈动脉斑块样品,并在冰冷的70%甲醇水溶液中进行均质。使Mixer Mill301Teflon转接器保持在-20℃。用Mixer Mill301(Retch GmbH,Germany)以15~25Hz均质2~15分钟。
使用Hamilton MICROLAB STAR系统(Hamilton Robotics,Switzerland),以自动化方式进行人样品的脂质萃取。将充分混合的样品等分添加到含有冰冷甲醇和0.1%BHT的96孔2ml Whatman Uniplate中。将5μl血清和血浆以及30μl颈动脉斑块用于鸟枪脂质组学和神经酰胺与脑苷脂脂质组学;将100μl血清和血浆以及200μl颈动脉斑块用于神经节苷脂脂质组学。在萃取操作规程的每个步骤之后都充分混合样品。添加适当体积的内参标准物混合物和氯仿,并在神经节苷脂脂质组学的情况下添加甲醇和水,从而在室温下进行萃取。在鸟枪脂质组学和神经酰胺与脑苷脂脂质组学中,通过添加20mM乙酸并在500x g下离心平板5分钟来促进有机相的分离。将有机相转移至新的96孔2ml Whatman Uniplate中。通过添加适当体积的氯仿并随后离心来清洗剩余的含水相。将两个有机相合并,并在N2下蒸发至干燥。随后将脂质萃取物重新溶解在氯仿:甲醇(1:2,v:v)中,并添加合成的外参标准物。
在鸟枪脂质组学中,在配备有自动纳米流离子源(NanoMate HD,AdvionBiosciences)的混合三重四级杆/线性离子阱质谱仪(QTRAP5500,AB Sciex)上分析了脂质萃取物。该设备在正离子模式和负离子模式下运行。在正离子模式下,将喷射电压设为1.0kV~1.4kV;在负离子模式下,设为-1.0kV~-1.4kV。使用了0.3psi~0.8psi的气压,并将界面加热器设为60℃。使用合成标准物,为每个脂质类别优化了碰撞能量(CE)和去簇电压(DP)。在使用200Da/s的扫描速度的单位解析模式下操作质谱仪。使用由及其合作者描述的多前体离子扫描(MPIS)和中性丢失扫描(NLS)(M等,High-throughput shotgun lipidomics by quadrupole time-of-flight massspectrometry.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci2009),在正离子模式和负离子模式下分析了分子脂质。
在神经酰胺与脑苷脂脂质组学中,按下述方式进行了高效液相色谱(HPLC)分析。色谱装置由CTC HTC PAL自动采样器(CTC Analytics AG,Switzerland)、Rheos AllegroUHPLC泵(Flux Instruments AG,Switzerland)、外部柱加热器(设为60℃用于神经酰胺与脑苷脂脂质组学;设为45℃用于神经节苷脂脂质组学)和带有串联的前置柱的Acquity BEHC18柱组成。以500μl/分钟的流速,将萃取的样品(每种10μl)注入前置柱中,随后进入分析柱中,并传递至质谱仪。在神经酰胺与脑苷脂脂质组学中,使用了梯度来进行脂质分析物的分离,其中,溶剂A包含含有0.1%甲酸和10mM乙酸铵的HPLC级水,溶剂B为包含0.1%甲酸和10mM乙酸铵的乙腈:异丙醇(4:3,v:v)。以下述方式来构建梯度:0分钟—65%B;2分钟—65%B;2.5分钟—75%B;17.5分钟—100%B;22.5分钟—100%B;22.6分钟—65%B;25分钟—65%B。
用HPLC-MS/MS分析了脂质萃取物。在配备有Turbo VTM离子源(4000QTRAP,ABSciex)的混合三重四级杆/线性离子阱质谱仪上进行了MS分析。该设备在正离子模式和负离子模式下运行。对于神经酰胺与脑苷脂脂质组学,将离子源电压设为5500V;对于神经节苷脂脂质组学,将离子源电压设为-4500V;并将源温度设为400℃。使用合成标准物,为每个脂质类别优化了碰撞能量(CE)和去簇电压(DP)。每次扫描所使用的采样时间为20秒。使用多重反应监测(MRM)扫描模式,该模式基于Sullards及其合作者的描述(Sullards MC等,Structure-specific,quantitative methods for analysis of sphingolipids byliquid chromatography-tandem mass spectrometry:"inside-out"sphingolipidomics.Methods Enzymol2007)。
以下述方式来进行数据处理。首先,通过使用内源标准物并在适用时用信息关联采集(IDA)实验来确定保留时间(在LC模式下)并鉴定每个峰。根据所检测到的峰和保留时间(在LC模式下),以自动化方式处理原始数据。施加严格的截断阈值,从而将背景干扰与实际的脂质峰分开。控制每个样品,且仅在满足严格接受标准时接受样品。将所检测到的峰的峰面积数(cps)转化为对应的脂质名称列表。将脂质归一化至其相应的内参标准物和样品体积或组织重量,以获得其浓度。
在脂质组学分析中,使用了若干种品质控制物。在进行样品分析前,获得了采用合成或分离的标准物的校准线。基于应用选择了合成标准物,其具有与内源脂质或所关注的分析物相似的性质。校准线由覆盖了预期的定量范围的最少五个标准点构成。该校准线中包含了在不用标准物时萃取的样品和在不用基质时萃取的标准物。
该校准线用来确定所监测的每个脂质类别的动态定量范围,例如,线性定量极限。由于所用的内参标准物的行为方式与内源脂质相同,所以将其用于定量内源脂质物种。校准线基于用于定量内源脂质的相同的内参标准物。
在为获得脂质而萃取的每个样品中,确定了合成内参标准物(IS)与相应的萃取后掺入的外参标准物(ES)的比率。将内参标准物与外参标准物的峰面积(cps)比(IS/ES)用于计算覆盖所有样品的变动系数(CV)。IS/ES比使得能够计算脂质萃取回收率。
在每次运行的开始、中间和结束时都包含了设备对照物(IC)。所分析的IC样品是萃取出的参照血浆样品和标准物集,用来监测设备的性能,即,测定内和测定间的变动。
对于每个平台,施加严格的截断阈值,从而将背景干扰与实际的脂质峰分开。控制每个样品,且仅在满足严格接受标准时接受样品。将所检测到的峰的质量和计数转化为对应的脂质名称列表。将脂质归一化至其相应的内参标准物和样品体积,以获得其浓度。
统计学分析
对照组和病例组之间的脂质浓度百分比变化按如下方法计算:
100×(病例组的平均[C]-对照组的平均[C])/对照组的平均[C]
基于标准t检验的p值来判定统计学显著性。
此外,使用了ROC曲线来找到将最佳病例与对照分开的脂质分子和浓度截断阈值。按照正确鉴定的病例数除以总病例数来计算选择性。按照正确鉴定的对照数除以总对照数来计算特异性。针对每种脂质浓度、脂质-脂质比和脂质-临床浓度比都计算了选择性和特异性。
实施例3
伦理
LURIC研究得到了"Landes?rztekammer Rheinland-Pfalz"的伦理审查委员会(Mainz,Germany)的许可。每个参与者都提供了书面签署的知情同意书。
结果
在该LURIC研究子项中,包括LDL-胆固醇和HDL-胆固醇浓度在内的传统生物标志在两组中实际相同,因此在本研究中不能预测严重的CVD/CAD相关并发症,包括AMI、卒中和CVD死亡。
多个脂质组学标志看上去是严重的CVD/CAD相关并发症的重要预测指标(表3~表8)。对总共162种分子脂质进行了定量。基于每个类别的排在前50位的候选指标(如果存在),选择了显著的预测指标。这些生物标志候选指标根据以下标准来选择:t检验p值≤0.05或灵敏度≥60%且特异性≥60%。在传统临床化学中,只有载脂蛋白A1和总胆固醇达到了统计学显著性(p值低于0.05),但在对照和病例之间的%变化小于10%,其他临床值则未显示出任何统计学显著性。新型脂质组学生物标志的预测价值在将其水平表达为独特的脂质-脂质浓度比或脂质-临床比(例如LDL-C或HDL-C)时增加。
此外,为了证实提高的诊断潜力,拟合了Logistic回归模型来发现可以将病例和对照彼此区分开的不同的脂质组合。将脂质设为可能的解释变量,并使用具有不同的进入显著性水平和停留显著性水平的逐步方法来选择模型。具有最佳诊断潜力的标志列于表8中。
详细的分子脂质分析的重要性
最近采用了质谱驱动的脂质分析方法,这使得可以以分析临床同组人群所需的高通量和品质将复杂的脂质组学解析至其分子脂质物种水平。这些方法的高灵敏度和选择性使得对微小样品量进行脂质组学范围的分析变得可行。目前的技术能够鉴定出具有不同的总组成的脂质(即磷脂酰胆碱(PC)34:1),但更重要的是鉴定分子脂质物种(例如PC16:0/18:1)。在后一种分析中,获得了关于脂肪酸的类型以及其连接到甘油骨架以形成特定PC分子的位置的信息。
Shinzawa-Itoh及合作者的奠基性工作通过高度完善的实验显示出:细胞色素c氧化酶的氧转移机制需要特定的磷脂酰甘油分子脂质,该磷脂酰甘油分子脂质在甘油骨架上的sn-1位和sn-2位分别具有棕榈酸酯和异油酸酯(Shinzawa-Itoh K,Aoyama H,MuramotoK等,Structures and physiological roles of13integral lipids of bovine heartcytochrome c oxidase.EMBO J2007,26:1713-1725)。与其他研究一致,这毫无疑问地表明脂质结构是生物学效应的必需决定因素。因此,分子脂质组学对于生物标志的发掘而言至关重要。图1通过对LURIC子项中的两种PC和LacCer分子在预测CVD死亡率方面的生物标志价值进行比较而阐明了分子脂质数据的重要性。这些数据揭示出,LacCer(d18:1/20:0)是显著的CVD预测指标,而LacCer(d18:1/18:16:0)却具有较低的生物标志潜力。此外,两种PC分子PC(18:0/20:4)和PC(18:0/16:0)对CVD并发症的效果甚至相反。因此,始终有必要鉴定并定量所关注的脂质类别中的所有脂质物种,包括但不限于胆固醇酯、不同的磷脂类别、神经酰胺、脑苷脂(乳糖基神经酰胺、葡萄糖基神经酰胺、球形三酰基神经酰胺)。
表3.针对未接受他汀药物治疗的CVD患者的显著标志(脂质-脂质浓度比和脂质-临床浓度比)。呈现了脂质名称、p值、%变化、AUC、灵敏度和特异性。
表4.针对未接受他汀药物治疗且未患有糖尿病的CVD患者的显著标志。呈现了脂质名称、p值、%变化、AUC、灵敏度和特异性值。表4a示出了显著的脂质标志,表4b示出了脂质-脂质浓度比标志,表4c示出了脂质-临床浓度比标志。
4a)针对未接受他汀药物治疗且未患有糖尿病的CVD患者的显著的脂质标志。
4b)针对未接受他汀药物治疗且未患有糖尿病的CVD患者的显著的脂质-脂质浓度比标志。
4c)针对未接受他汀药物治疗且未患有糖尿病的CVD患者的显著的脂质-临床浓度比标志。
表5.针对未接受他汀药物治疗且患有糖尿病的CVD患者的显著标志。呈现了标志名称、p值、百分比变化、AUC、灵敏度和特异性。表5a示出了显著的脂质标志,表5b示出了显著的脂质-脂质浓度比标志,表5c示出了显著的脂质-临床浓度比标志。
5a)针对未接受他汀药物治疗且患有糖尿病的CVD患者的显著的脂质标志。
5b)针对未接受他汀药物治疗且患有糖尿病的CVD患者的显著的脂质-脂质浓度比标志。
5c)针对未接受他汀药物治疗且患有糖尿病的CVD患者的显著的脂质-临床浓度比标志。
表6.来自未接受他汀药物治疗且未患有糖尿病的CVD患者的优选实施方式的标志。
表7.来自未接受他汀药物治疗且患有糖尿病的CVD患者的优选实施方式的标志。
本发明的优选脂质分子按如下条件进行选择:a)其可能具有生物学意义,b)其优选属于行为相似的脂质家族,c)其以有意义且可测量的浓度表达,d)其具有非常显著的p值或良好的AUC值(>0.65),且多数情况下%变化也很明显(>20%),和e)其在不同的检验中看上去都是显著的。
表8.用Logistic回归模型产生的脂质标志。
证实了脂质组学分析可高效地鉴定出用于CVD并发症的新型血浆生物标志。
分子脂质与分子脂质之比可以是细胞脂质代谢(包括例如脂质代谢途径中的酶活性)的重要指示指标。因此,与仅用分子脂质的绝对血浆浓度相比,这些比率可以提供更多的信息。由于健康个体和动脉粥样硬化患者之间的总体上的绝对分子脂质血浆浓度差看似在30%~70%之间,所以计算并使用不同的比率来代替仅绝对浓度可以是合理的。由于脂蛋白颗粒(例如LDL、HDL和VLDL)充当血流中多数脂质的运载者,因此将分子脂质浓度与脂蛋白数据关联起来是适合的。因此,计算了分子脂质与HDL-胆固醇、LDL-胆固醇、载脂蛋白A-I和载脂蛋白B的比率。事实上,作为CVD患者的疾病生物标志,不同分子脂质之间的多种浓度比优于绝对血浆浓度。
由于所检测的脂质在脂蛋白颗粒(LDL、VLDL和HDL)中运载,从对所有血清/血浆样品的本研究的结果看,显而易见的是,对应的脂蛋白组分浓度将改进分子脂质的预测潜力。
到目前为止,降脂药的效率测量一直基于LDL-C和HDL-C测定。由于本发明人已在此观察到了在预测高风险CVD并发症的发展方面比这些经典分析物更具潜力的生物标志,未来的药物效率特征信息采集应当基于与严重CVD相关并发症风险具有更直接的联系的新的灵敏的特异性生物标志,而不是LDL-C。
本领域的技术人员将知晓或仅使用惯用实验手段就能够确定本文在实施例和整个专利说明书正文中所述的具体实施方式的多种等价实施方式。认为此类等价实施方式在本发明的范围内并被权利要求所覆盖。
Claims (32)
1.以下试剂(a)或(b)在制备用于确定未接受他汀药物治疗的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症的制剂和/或试剂盒中的应用:
a试剂(a)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品的脂质-脂质浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/20:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/22:0)/Cer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,和SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/Cer(d18:1/24:1),Cer(d18:1/24:0)/PC 16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH);
b.试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品的脂质-临床浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:GlcCer(d18:1/16:0)/总胆固醇,Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I,Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I,Gb3(d18:1/16:0)/HDL胆固醇,和PC 16:0/18:2/总胆固醇;
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白和PC 18:0/22:6/超敏C反应蛋白。
2.以下试剂(a)、(b)或(c)在制备用于确定未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症的制剂和/或试剂盒中的应用:
a试剂(a)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中的浓度与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大,
其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:Cer 18:1/16:0,GlcCer(d18:1/16:0),LacCer(d18:1/16:0),CE 19:1(oxCE 682.6),SM(d18:1/18:1),CE 20:4,SM18:1/16:0,和CE 16:0;
且其中,与所述对照相比浓度减少的一种或多种脂质选自:PC 18:0/22:6,SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),PC 16:0/22:6,SM 18:1/24:0,和LPC 16:0;
b试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中的脂质-脂质浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC 16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC 16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC 16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC 18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC 16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC 16:0/22:6,CE 16:0/PC 18:0/22:6,和CE 18:2/PC 18:0/22:6;
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:PC 18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)和PC 18:0/22:6/SM(d18:1/18:1);
c试剂(c)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品的脂质-临床浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比是:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇;
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC 18:0/22:6/LDL胆固醇,PC 18:0/22:6/总胆固醇,和PC 18:0/22:6/载脂蛋白B。
3.以下试剂(a)、(b)或(c)在制备用于确定未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症的制剂和/或试剂盒中的应用:
a.试剂(a)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中的浓度与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大,
其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/16:0),Gb3(d18:1/24:1),GlcCer 18:1/16:0,LacCer 18:1/16:0,和PC 16:0/22:6;
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE 20:4,CE 18:0,CE 14:0,CE 22:6,CE 18:3,GlcCer 18:1/18:0,和SM 18:1/24:0;
b.试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品中的脂质-脂质浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),和Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE 18:3/PC16:0/18:1,CE 18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE 14:0/PE 18:0/18:2,CE 18:3/PC O-16:0/18:1-烷基,CE 18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE 18:0/Gb3(d18:1/24:1);
c.试剂(c)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中的脂质-临床浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC 18:1/18:1/脂蛋白(a),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a),和LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比是:CE 14:0/超敏C反应蛋白。
4.如权利要求1至3中任一项所述的应用,其中,所述一种或多种CVD并发症为急性心肌梗死和/或CVD死亡。
5.以下试剂(a)或(b)在制备用于评估对未接受他汀药物治疗的受试对象降低一种或多种CVD并发症发展风险的有效性的制剂和/或试剂盒中的应用:
a.试剂(a)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品的脂质-脂质浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述风险降低,
其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/20:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/22:0)/Cer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,和SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH);
且其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/Cer(d18:1/24:1),Cer(d18:1/24:0)/PC 16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH);
b.试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品的脂质-临床浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述风险降低,
其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:GlcCer(d18:1/16:0)/总胆固醇,Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I,Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I,Gb3(d18:1/16:0)/HDL胆固醇,和PC 16:0/18:2/总胆固醇;
且其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白和PC 18:0/22:6/超敏C反应蛋白。
6.以下试剂(a)、(b)或(c)在制备用于评估对未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象降低一种或多种CVD并发症发展风险的有效性的制剂和/或试剂盒中的应用:
a.试剂(a)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中的浓度与对照样品相比增加或减少表明所述风险降低,
其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:Cer 18:1/16:0,GlcCer(d18:1/16:0),LacCer(d18:1/16:0),CE 19:1oxCE 682.6,SM(d18:1/18:1),CE 20:4,SM18:1/16:0,和CE 16:0;
且其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:PC 18:0/22:6,SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),PC 16:0/22:6,SM 18:1/24:0,和LPC 16:0;
b.试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品的脂质-脂质浓度比与对照样品相比时增加或减少表明所述风险降低,
其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0)Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC 16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC 16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC 16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC 18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC 16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC 16:0/22:6,CE 16:0/PC 18:0/22:6,和CE 18:2/PC 18:0/22:6;
且其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:PC 18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)和PC 18:0/22:6/SM(d18:1/18:1);
c.试剂(c)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品的脂质-临床浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述风险降低,
其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比是:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇;
且其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC 18:0/22:6/LDL胆固醇,PC 18:0/22:6/总胆固醇,和PC 18:0/22:6/载脂蛋白B。
7.以下试剂(a)、(b)或(c)在制备用于评估对未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象降低一种或多种CVD并发症发展风险的有效性的制剂和/或试剂盒中的应用:
a.试剂(a)用于在所述受试对象的样品确定中一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中的浓度与对照样品相比增加或减少表明所述风险降低,
其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/16:0),Gb3(d18:1/24:1),GlcCer 18:1/16:0,LacCer 18:1/16:0,和PC 16:0/22:6;
且其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE 20:4,CE 18:0,CE 14:0,CE 22:6,CE 18:3,GlcCer 18:1/18:0,和SM 18:1/24:0;
b.试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品的脂质-脂质浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述风险降低,
其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),和Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0);
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE 18:3/PC 16:0/18:1,CE 18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE 14:0/PE 18:0/18:2,CE 18:3/PCO-16:0/18:1-烷基,CE 18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE 18:0/Gb3(d18:1/24:1);
c.试剂(c)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品的脂质-临床浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述风险降低,
其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC 18:1/18:1/脂蛋白(a),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a),和LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a);
且其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比是:CE 14:0/超敏C反应蛋白。
8.以下试剂(a)或(b)在制备用于为未接受他汀药物治疗的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症选择适合的治疗的制剂和/或试剂盒中的应用:
a.试剂(a)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品的脂质-脂质浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/18:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/20:0)/Cer(d18:1/24:0),Cer(d18:1/22:0)/Cer(d18:1/24:0),Gb3(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,和SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/Cer(d18:1/24:1),Cer(d18:1/24:0)/PC 16:0/18:2,SM(d18:1/24:0)(d18:1/23:1-OH)/SM(d18:1/24:1)(d18:1/23:2-OH),Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),Cer(d18:1/24:0)/Gb3(d18:1/16:0),和Cer(d18:1/24:0)/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH);
b.试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品的脂质-临床浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:GlcCer(d18:1/16:0)/总胆固醇,Gb3(d18:1/16:0)/载脂蛋白A-I,Gb3(d18:1/18:0)/载脂蛋白A-I,Gb3(d18:1/16:0)/HDL胆固醇,和PC 16:0/18:2/总胆固醇;
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:Cer(d18:1/24:0)/超敏C反应蛋白和PC 18:0/22:6/超敏C反应蛋白。
9.以下试剂(a)、(b)或(c)在制备用于为未接受他汀药物治疗且未患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症选择适合的治疗的制剂和/或试剂盒中的应用:
a.试剂(a)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中的浓度与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,
其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:Cer 18:1/16:0,LacCer(d18:1/16:0),GlcCer(d18:1/16:0),CE 19:1(oxCE 682.6),SM(d18:1/18:1),CE 20:4,SM18:1/16:0,和CE 16:0;
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC 18:0/22:6,SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),PC 16:0/22:6,SM 18:1/24:0,和LPC 16:0;
b.试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品的脂质-脂质浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0)Cer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,Cer(d18:1/18:0)/PC 16:0/22:6,GlcCer(d18:1/16:0)/PC 18:0/22:6,GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/16:0)/PC 16:0/22:6,Cer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/22:6,SM(d18:1/18:1)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/20:0)/PC 16:0/22:6,SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),SM(d18:1/15:0)(d18:1/14:1-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/20:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),Cer(d18:1/24:1)/PC 18:0/22:6,SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH),GlcCer(d18:1/16:0)/PC 16:0/22:6,LacCer(d18:1/22:0)/PC 16:0/22:6,CE 16:0/PC 18:0/22:6,和CE 18:2/PC 18:0/22:6;
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:PC 18:0/22:6/SM(d18:1/16:1)(d18:1/15:2-OH)和PC 18:0/22:6/SM(d18:1/18:1);
c.试剂(c)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品中与对照样品相比时增加或减少的脂质-临床浓度比表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比是:Cer(d18:1/16:0)/HDL胆固醇;
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC 18:0/22:6/LDL胆固醇,PC 18:0/22:6/总胆固醇,和PC 18:0/22:6/载脂蛋白B。
10.以下试剂(a)、(b)或(c)在制备用于为未接受他汀药物治疗且患有2型糖尿病的受试对象的CVD和/或一种或多种CVD并发症选择适合的治疗的制剂和/或试剂盒中的应用:
a.试剂(a)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质的浓度,其中,所述样品中的浓度与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,
其中,与所述对照相比浓度增加的所述一种或多种脂质选自:Gb3(d18:1/16:0),Gb3(d18:1/24:1),GlcCer 18:1/16:0,LacCer 18:1/16:0,和PC 16:0/22:6;
且其中,与所述对照相比浓度减少的所述一种或多种脂质选自:PC O-16:0/20:4-烷基,CE 20:4,CE 18:0,CE 14:0,CE 22:6,CE 18:3,GlcCer 18:1/18:0,和SM 18:1/24:0;
b.试剂(b)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-脂质浓度比,其中,所述样品的脂质-脂质浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:Gb3(d18:1/24:1)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),Gb3(d18:1/16:0)/SM(d18:1/17:0)(d18:1/16:1-OH),和Gb3(d18:1/24:1)/GlcCer(d18:1/24:0);
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自:CE 18:3/PC 16:0/18:1,CE 18:0/SM(d18:1/14:0)(d18:1/13:1-OH),CE 14:0/PE 18:0/18:2,CE 18:3/PCO-16:0/18:1-烷基,CE 18:0/Gb3(d18:1/16:0),和CE 18:0/Gb3(d18:1/24:1);
c.试剂(c)用于在所述受试对象的样品中确定一种或多种脂质-临床浓度比,其中,所述样品的脂质-临床浓度比与对照样品相比增加或减少表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充,
其中,与所述对照相比增加的所述一种或多种脂质-临床浓度比选自:PC 18:1/18:1/脂蛋白(a),Gb3(d18:1/18:0)/脂蛋白(a),Gb3(d18:1/16:0)/脂蛋白(a),和LacCer(d18:1/24:1)/脂蛋白(a);
且其中,与所述对照相比减少的所述一种或多种脂质-临床浓度比是:CE 14:0/超敏C反应蛋白。
11.如权利要求5至10中任一项所述的应用,其中,所述一种或多种CVD并发症为急性心肌梗死。
12.如权利要求2、3、6、7、9和10中任一项所述的应用,其中,使用测定来分别确定所述脂质浓度、所述脂质-脂质浓度比或所述脂质-临床浓度比。
13.如权利要求1、5和8中任一项所述的应用,其中,使用测定来分别确定所述脂质-脂质浓度比或所述脂质-临床浓度比。
14.如权利要求8~10中任一项所述的应用,其中,所述受试对象需要的治疗、所述已经施用的治疗、或所选择的合适的治疗是脂质调节治疗。
15.如权利要求2、6或9中任一项所述的应用,其中,
利用试剂(a)所确定的所述一种或多种脂质选自:
Cer 18:1/16:0,CE 20:4,CE 16:0,PC 18:0/22:6,PC 16:0/22:6,和LPC 16:0。
16.如权利要求3、7或10中任一项所述的应用,其中,
利用试剂(a)所确定的所述一种或多种脂质选自:
PC 16:0/22:6、
PC O-16:0/20:4-烷基、CE 20:4、CE 18:0、CE 14:0、CE 22:6和CE 18:3。
17.如权利要求1、5和8中任一项所述的应用,所述应用包含至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种或至少8种脂质-脂质浓度比;或至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种或至少7种脂质-临床浓度比,或者其组合。
18.如权利要求2、6和9中任一项所述的应用,所述应用包含至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种或至少8种脂质浓度;至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种或至少8种脂质-脂质浓度比;或至少2种、至少3种或至少4种脂质-临床浓度比,或者其组合。
19.如权利要求3、7和10中任一项所述的应用,所述应用包含至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种或至少8种脂质浓度;至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种或至少8种脂质-脂质浓度比;或至少2种、至少3种、至少4种或至少5种脂质-临床浓度比,或者其组合。
20.如权利要求1至3和5至10中任一项所述的应用,其中,
a.所述CVD的特征在于冠状动脉疾病、外周动脉疾病和/或卒中;且/或
b.所述CVD是动脉粥样硬化所引发的;且/或
c.所述受试对象具有动脉粥样硬化;或
d.所述受试对象不具有动脉粥样硬化。
21.如权利要求1至3和5-10中任一项所述的应用,其中,
a.同时确定所述样品中的总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B和/或载脂蛋白C-III的血清或血浆水平;且/或
b.所述受试对象不具有血清或血浆水平增加的总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白C-III或载脂蛋白B中的一种或多种或者血清水平减少的高密度脂蛋白胆固醇。
22.如权利要求1至3和5至10中任一项所述的应用,其中,
a.所述样品是血液、血浆、血清、尿或组织,或其脂蛋白组分;
且/或
b.所述脂质-脂质浓度比或所述脂质-临床浓度比用下述方法确定:质谱测定法,核磁共振谱法,荧光光谱法或双偏振干涉法,高效分离方法,和/或用能够特异性地结合分析物的结合性部分确定。
23.如权利要求22所述的应用,其中,
所述高效分离方法是HPLC或UPLC,和/或所述用能够特异性地结合分析物的结合性部分确定是免疫测定。
24.如权利要求22所述的应用,其中,
所述用能够特异性地结合分析物的结合性部分确定是ELISA。
25.如权利要求1至3中任一项所述的应用,其中,所述制剂和/或试剂盒用于确定所述受试对象发展CVD并发症的风险,所述CVD并发症包括死亡和心肌梗死。
26.如权利要求1至3和5至10中任一项所述的应用,其中,所述受试对象有风险发展或已患有一种或多种CVD并发症,且/或有发生心脏血管疾病死亡的风险。
27.一种权利要求1-25中任一项所制备的试剂盒,所述试剂盒用于预测CVD和/或一种或多种CVD并发症,其中,所述试剂盒包含:
a.构成选自以下脂质-脂质浓度比中至少一种脂质-脂质浓度比的成对脂质标准物:Cer(d18:1/16:0)/Cer(d18:1/24:0)、Cer(d18:1/18:0)/Cer(d18:1/24:0)、Cer(d18:1/24:0)/Cer(d18:1/24:1)、Cer(d18:1/20:0)/Cer(d18:1/24:0)和/或Cer(d18:1/22:0)/Cer(d18:1/24:0);和可选的一种或多种其他参照化合物,所述其他参照化合物选自:
b.一种或多种对照标志;
c.阳性对照和/或阴性对照;
d.内参标准物和/或外参标准物;
e.校准线对照;和
f.能够与权利要求1~10、权利要求16和权利要求17中的任一项所定义的任一种脂质结合的试剂;和
g.用于执行所述应用或应用的试剂。
28.如权利要求27所述的试剂盒,其中,所述能够与权利要求1~10、权利要求16和权利要求17中的任一项所定义的任一种脂质结合的试剂为抗体。
29.如权利要求27所述的试剂盒,其中,所述一种或多种对照标志为一种或多种脂质。
30.如权利要求27所述的试剂盒,其中,所述一种或多种对照标志为权利要求1~10、权利要求16和权利要求17中的任一项所定义的脂质。
31.权利要求27所述的试剂盒在制备用于预测CVD并发症的试剂中的应用,其中,使用质谱测定法来确定未接受他汀药物治疗的受试对象的样品中的脂质浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比。
32.如权利要求1至3和5至10中任一项所述的应用,其中,所述对照样品来自CAD患者或CAD患者群,其中,所述CAD患者或CAD患者群没有主要CVD事件史并且未接受他汀药物治疗;其中,所述对照样品是血液、血浆、血清、尿或组织,或其脂蛋白组分。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161556909P | 2011-11-08 | 2011-11-08 | |
EP11188328.6 | 2011-11-08 | ||
EP11188328.6A EP2592423A1 (en) | 2011-11-08 | 2011-11-08 | Lipidomic biomarkers for the prediction of cardiovascular outcomes in coronary artery disease patients not undergoing statin treatment |
US61/556,909 | 2011-11-08 | ||
PCT/EP2012/071972 WO2013068373A2 (en) | 2011-11-08 | 2012-11-07 | Lipidomic biomarkers for the prediction of cardiovascular outcomes in coronary artery disease patients not undergoing statin treatment |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103917876A CN103917876A (zh) | 2014-07-09 |
CN103917876B true CN103917876B (zh) | 2018-02-02 |
Family
ID=45033777
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201280054323.8A Active CN103917876B (zh) | 2011-11-08 | 2012-11-07 | 用于预测未接受他汀药物治疗的冠状动脉疾病患者的心血管后果的脂质组学生物标志 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US9052328B2 (zh) |
EP (3) | EP2592423A1 (zh) |
JP (1) | JP6388283B2 (zh) |
CN (1) | CN103917876B (zh) |
CA (1) | CA2853220A1 (zh) |
HK (1) | HK1202157A1 (zh) |
WO (1) | WO2013068373A2 (zh) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2592423A1 (en) | 2011-11-08 | 2013-05-15 | Zora Biosciences OY | Lipidomic biomarkers for the prediction of cardiovascular outcomes in coronary artery disease patients not undergoing statin treatment |
EP2592422A1 (en) | 2011-11-08 | 2013-05-15 | Zora Biosciences OY | Lipidomic biomarkers for the prediction of cardiovascular outcomes in coronary artery disease patients undergoing statin treatment |
ES2552371T3 (es) * | 2012-05-25 | 2015-11-27 | Zora Biosciences Oy | Biomarcadores sensibles, eficaces e inocuos, para la inhibición de la Proproteína Convertasa Subtilisina/Kexina de tipo 9 (PCSK9) |
JP6495902B2 (ja) * | 2013-11-14 | 2019-04-03 | ネステク ソシエテ アノニム | 健康的な加齢に関係する脂質バイオマーカー |
JP6654624B2 (ja) | 2014-04-10 | 2020-02-26 | エムイーピー・イークワイン・ソリューションズ・エルエルシー | 糞便中の寄生虫卵の定量法 |
US9347960B2 (en) * | 2014-06-16 | 2016-05-24 | Zora Biosciences, Oy | Ceramides and their use in diagnosing CVD |
CN107110939B (zh) | 2014-09-11 | 2021-05-14 | 力保科学公司 | 用于测定心血管疾病或事件的风险参数的系统 |
WO2016100549A2 (en) | 2014-12-16 | 2016-06-23 | Washington University | Ceramides for evaluating risk of cardiovascular disease |
US20180238914A1 (en) * | 2015-08-19 | 2018-08-23 | Metanomics Gmbh | Means and methods for diagnosing cardiac disease in a subject |
EP3859342A1 (en) * | 2015-10-20 | 2021-08-04 | MedImmune, LLC | Diagnostic marker for coronary artery disease |
EP3387446A2 (en) | 2015-12-07 | 2018-10-17 | Zora Biosciences OY | Use of ceramides and lpls in diagnosing cvd |
CN105424841B (zh) * | 2015-12-25 | 2017-11-03 | 齐炼文 | 用于诊断冠状动脉粥样硬化的代谢标志物 |
CN107014942A (zh) * | 2017-05-05 | 2017-08-04 | 北京骐骥生物技术有限公司 | 利用脂质生物标志物预测糖尿病冠心病的方法 |
CN107144624B (zh) * | 2017-05-15 | 2021-01-05 | 中国科学院生态环境研究中心 | 甄别二氧化硅颗粒来源的方法 |
CN114062581A (zh) * | 2017-12-14 | 2022-02-18 | 江苏豪思生物科技有限公司 | 一种用于评估冠状动脉疾病的试剂盒 |
WO2019119049A1 (en) * | 2017-12-20 | 2019-06-27 | Baker Heart and Diabetes Institute | Method of predicting drug therapeutic responder status and methods of treatment |
WO2020115288A1 (en) | 2018-12-06 | 2020-06-11 | Zora Biosciences Oy | Biomarkers for cardiovascular events |
CN113533754A (zh) * | 2021-07-12 | 2021-10-22 | 北京市心肺血管疾病研究所 | 神经酰胺在制备用于评估高血压患者发生不良事件风险的试剂盒中的应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101316863A (zh) * | 2005-09-02 | 2008-12-03 | 生物发明国际公司 | 用于诱导动脉粥样硬化斑块消退的免疫治疗 |
CN101772701A (zh) * | 2007-06-08 | 2010-07-07 | 奎斯特诊断投资公司 | 通过差分带电荷微粒迁移率进行脂蛋白分析 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998057179A1 (en) * | 1997-06-10 | 1998-12-17 | Medlyte Diagnostics, Inc. | Methods for early detection of heart disease |
WO2004038381A2 (en) | 2002-10-25 | 2004-05-06 | Metabolon, Inc. | Methods for drug discovery, disease treatment, and diagnosis using metabolomics |
US7972802B2 (en) | 2005-10-31 | 2011-07-05 | University Of Washington | Lipoprotein-associated markers for cardiovascular disease |
US8137977B2 (en) * | 2006-04-24 | 2012-03-20 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Lipidomic approaches to determining drug response phenotypes in cardiovascular disease |
DE102006034153B4 (de) | 2006-07-24 | 2018-02-08 | Magna powertrain gmbh & co kg | Getriebe |
US20100179066A1 (en) | 2007-06-07 | 2010-07-15 | Inserm (Institut National De La Santé Et De La Rec | Method for Assessing the Risk of a Cardiovascular Disease and for Diagnosing Dyslipidemia |
EP2048243A1 (en) | 2007-09-24 | 2009-04-15 | sanofi-aventis | Use of clec1B for the determination of cardiovascular and thrombotic risk |
GB2469244A (en) | 2008-01-28 | 2010-10-06 | Univ Singapore | Lipid tumour profile |
EP2265642A4 (en) | 2008-03-12 | 2012-05-02 | Otago Innovation Ltd | BIOMARKERS |
WO2010049538A1 (en) | 2008-10-30 | 2010-05-06 | Centre de Recherche Public de la Santé | Biomarkers |
US20110034419A1 (en) * | 2009-06-27 | 2011-02-10 | Musc Foundation For Research Development | Cardioprotective Drugs and Diagnostics for Assessing Risk of Cardiovascular Disease |
AR079057A1 (es) * | 2009-11-17 | 2011-12-21 | Baylor Res Inst | Triaosilceramida urinaria (gb3) como marcador de enfermedad cardiaca |
EP2944964B1 (en) | 2009-11-27 | 2018-01-10 | Baker IDI Heart and Diabetes Institute Holdings Ltd | Lipid biomarkers for stable and unstable heart disease |
NO2385374T3 (zh) | 2010-05-05 | 2014-06-07 | ||
CN103154742B (zh) | 2010-06-20 | 2017-11-21 | 佐拉生物科学公司 | 用于鉴定高风险冠状动脉疾病患者的脂质组学标志 |
EP2694981A1 (en) | 2011-04-08 | 2014-02-12 | Zora Biosciences OY | Biomarkers for sensitive detection of statin-induced muscle toxicity |
EP2592422A1 (en) | 2011-11-08 | 2013-05-15 | Zora Biosciences OY | Lipidomic biomarkers for the prediction of cardiovascular outcomes in coronary artery disease patients undergoing statin treatment |
EP2592423A1 (en) | 2011-11-08 | 2013-05-15 | Zora Biosciences OY | Lipidomic biomarkers for the prediction of cardiovascular outcomes in coronary artery disease patients not undergoing statin treatment |
-
2011
- 2011-11-08 EP EP11188328.6A patent/EP2592423A1/en not_active Withdrawn
-
2012
- 2012-11-07 CN CN201280054323.8A patent/CN103917876B/zh active Active
- 2012-11-07 JP JP2014540426A patent/JP6388283B2/ja active Active
- 2012-11-07 EP EP12781324.4A patent/EP2776841B1/en active Active
- 2012-11-07 WO PCT/EP2012/071972 patent/WO2013068373A2/en active Application Filing
- 2012-11-07 US US14/356,594 patent/US9052328B2/en active Active
- 2012-11-07 EP EP17150693.4A patent/EP3208617B1/en active Active
- 2012-11-07 CA CA2853220A patent/CA2853220A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-03-16 HK HK15102644.9A patent/HK1202157A1/zh unknown
- 2015-05-27 US US14/722,964 patent/US9423406B2/en active Active
-
2016
- 2016-07-14 US US15/210,048 patent/US9863965B2/en active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101316863A (zh) * | 2005-09-02 | 2008-12-03 | 生物发明国际公司 | 用于诱导动脉粥样硬化斑块消退的免疫治疗 |
CN101772701A (zh) * | 2007-06-08 | 2010-07-07 | 奎斯特诊断投资公司 | 通过差分带电荷微粒迁移率进行脂蛋白分析 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Lipidomic approach to evaluate rosuvastatin and atorvastatin at various dosages:investigating differential effects among statins;Bergheanu Sandrin C et al;《Current medical reseach and opinion》;20080901;第24卷(第9期);2477-2487 * |
Predicting CHD risk in patients with diabetes mellitus;W.W.TEO et al;《Diabetic medicine》;20010501;第18卷(第5期);341-344 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US9423406B2 (en) | 2016-08-23 |
WO2013068373A3 (en) | 2013-07-18 |
CN103917876A (zh) | 2014-07-09 |
US20140295467A1 (en) | 2014-10-02 |
EP3208617A3 (en) | 2017-11-01 |
JP2014532885A (ja) | 2014-12-08 |
EP2776841B1 (en) | 2017-01-11 |
EP3208617B1 (en) | 2021-02-24 |
HK1202157A1 (zh) | 2015-09-18 |
CA2853220A1 (en) | 2013-05-16 |
US9863965B2 (en) | 2018-01-09 |
US20160320418A1 (en) | 2016-11-03 |
WO2013068373A2 (en) | 2013-05-16 |
US9052328B2 (en) | 2015-06-09 |
EP2776841A2 (en) | 2014-09-17 |
US20150260737A1 (en) | 2015-09-17 |
JP6388283B2 (ja) | 2018-09-12 |
EP3208617A2 (en) | 2017-08-23 |
EP2592423A1 (en) | 2013-05-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103917876B (zh) | 用于预测未接受他汀药物治疗的冠状动脉疾病患者的心血管后果的脂质组学生物标志 | |
CN104024860B (zh) | 用于预测接受他汀药物治疗的冠状动脉疾病患者的心血管后果的脂质组学生物标志 | |
CN103154742B (zh) | 用于鉴定高风险冠状动脉疾病患者的脂质组学标志 | |
CN102971633B (zh) | 针对动脉粥样硬化和心脏血管疾病的脂质组学生物标志 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |