CN103901137A

CN103901137A - 检测有机磷类农药中茶叶的前处理方法及其应用以及检测茶叶中有机磷类农药的方法

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Publication number: CN103901137A
Application number: CN201210587434.7A
Authority: CN
Inventors: 陈世恒; 章晴; 杨永坛
Original assignee: Cofco Corp; Cofco Nutrition and Health Research Institute Co Ltd
Current assignee: Cofco Corp; Cofco Nutrition and Health Research Institute Co Ltd
Priority date: 2012-12-28
Filing date: 2012-12-28
Publication date: 2014-07-02

Abstract

本发明公开了一种用于检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，所述方法包括如下步骤：（1）将粉碎后的茶叶粉末浸于提取溶剂中，涡旋振荡4-8min，振荡后在4000-6000rpm下离心4-6min，所述提取溶剂能够溶解茶叶中有机磷类农药但不溶解茶叶；（2）取步骤（1）离心后的上清液，加入固体吸附剂，涡旋振荡3-5min，振荡后在11000-13000rpm下离心5-7min；（3）将步骤（2）离心后的上清液过孔径为0.22-0.45μm的滤膜，得到待测溶液。还公开上述方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用及检测茶叶中有机磷类农药的方法。本发明方法处理时间短，消耗溶剂少，成本低。

Description

检测有机磷类农药中茶叶的前处理方法及其应用以及检测茶叶中有机磷类农药的方法

技术领域

本发明涉及农药检测技术领域，具体地，涉及检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，及该方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用，以及通过该方法进行的检测茶叶中有机磷类农药的方法。

背景技术

有机磷类农药是用于防治植物病、虫、害的含有机磷农药的有机化合物。这一类农药品种多、药效高，用途广，易分解，在人、畜体内一般不积累，在农药中是极为重要的一类化合物。但有不少品种对人、畜的急性毒性很强。有机磷类农药是我国使用范围最广、用量最大的一类广谱、高效的农药。

为了提高产量和改善茶叶外形，农民在茶树种植过程中往往喷洒了大量的化学农药。据统计，约有98%的茶叶在栽培过程中要使用农药和化肥。茶叶的需求和产量的矛盾导致必须使用农药和化肥。我国是世界第一产茶大国，茶叶的进出口贸易带来了大量外汇储备。同时茶叶中农药残留超限量已成为我国茶叶出口欧盟、北美和日本等发达地区和国家的主要技术性贸易壁垒。确保这些茶叶的质量安全，大量的茶叶生产商需要农药残留检测技术对茶叶原料和成品进行农药残留的监控。

茶叶较多的保留了鲜叶中的嘌呤类生物碱、糖类、色素、维生素和矿物质，基质复杂，对痕量的农药残留检测有严重干扰。采用色谱法分离检测有机磷类农药时大多需要前处理方法对茶叶样品进行处理。目前，国内外研究茶叶中农药残留的前处理方法主要有索氏提取、振荡提取、超声提取、加速溶剂萃取、分散液液微萃取、固相萃取、凝胶渗透色谱等方法。这些方法有些步骤较多，有些耗时较长，有些需操作人员与大量的有机溶剂接触，污染环境，成本较高。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中处理时间长、消耗溶剂多、成本高的缺点，为茶叶中有机磷类农药检测提供一种快速、有效和低成本的前处理方法。

为了实现上述目的，一方面，本发明提供了一种用于检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，所述方法包括如下步骤：

（1）将粉碎后的茶叶粉末浸于提取溶剂中，涡旋振荡4-8min，振荡后在4000-6000rpm下离心4-6min，所述提取溶剂能够溶解茶叶中有机磷类农药但不溶解茶叶；

（2）取步骤（1）离心后的上清液，加入固体吸附剂，涡旋振荡3-5min，振荡后在11000-13000rpm下离心5-7min；

（3）将步骤（2）离心后的上清液过孔径为0.22-0.45μm的滤膜，得到待测溶液。

优选地，步骤（1）中，茶叶粉末的粒径≤2mm。

优选地，步骤（1）中，相对于1g茶叶粉末，提取溶剂的用量为1-3mL。

优选地，所述提取溶剂选自乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一种或多种；更优选地，所述提取溶剂为乙酸乙酯与正己烷的混合溶液，乙酸乙酯与正己烷的体积比为1：0.5-1.5。

优选地，步骤（2）中，相对于1g茶叶粉末，固体吸附剂的用量为50-150mg。

优选地，所述固体吸附剂选自石墨化炭黑、N-丙基乙二胺键合硅胶和C18键合硅胶中的一种或多种；更优选地，所述固体吸附剂为石墨化炭黑和 N-丙基乙二胺键合硅胶的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的重量比为1：0.125-1。

另一方面，本发明提供了如上所述的方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用。

第三方面，本发明提供了一种检测茶叶中有机磷类农药的方法，所述方法包括：

（1）将茶叶进行前处理，得到待测溶液；

（2）将步骤（1）得到的待测溶液进行气相色谱分析，

其中，步骤（1）中前处理的方法为如上所述的方法。

本发明的检测茶叶中有机磷类农药的前处理方法处理时间短，消耗溶剂少，成本低。为检测茶叶中有机磷类农药提供了快速、有效、低成本的操作技术。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

图1：0.010μg/mL的混合标准溶液的GC-FPD色谱图。

附图标记说明

1敌敌畏；2乐果；3甲基对硫磷；4杀螟硫磷；5对硫磷；6水胺硫磷；7三唑磷；8苯硫磷；9伏杀硫磷。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

一方面，本发明提供了一种用于检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，所述方法包括如下步骤：

（1）将粉碎后的茶叶粉末浸于提取溶剂中，涡旋振荡4-8min，振荡后在4000-6000rpm下离心4-6min，提取溶剂能够溶解茶叶中有机磷类农药但不溶解茶叶；

本发明中，步骤（1）中，茶叶粉末的粒径优选≤2mm。

本发明中，步骤（1）中，涡旋振荡4-8min通常为涡旋振荡2-4min，再重复一次，即涡旋振荡4-8min。

本发明中，步骤（1）中，相对于1g茶叶粉末，提取溶剂的用量优选为1-3mL。

本发明中，提取溶剂可以为本领域常用的各种提取茶叶中有机磷类农药的提取溶剂，例如可以为乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一种或多种。优选情况下，提取溶剂为乙酸乙酯与正己烷的混合溶液，乙酸乙酯与正己烷的体积比优选为1：0.5-1.5。

本发明中，步骤（2）中，相对于1g茶叶粉末，固体吸附剂的用量优选为50-150mg。

本发明中，固体吸附剂可以为本领域常用的固体吸附剂，例如，可以为石墨化炭黑、N-丙基乙二胺键合硅胶和C18键合硅胶中的一种或多种，优选情况下，固体吸附剂为石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的重量比优选为1：0.125-1。

第三方面，本发明提供了一种检测茶叶中有机磷类农药的方法，该方法包括：

（1）将茶叶进行前处理，得到待测溶液；

（2）将步骤（1）得到的待测溶液进行气相色谱分析，

其中，步骤（1）中前处理的方法为如上所述的检测有机磷类农药中茶叶的前处理方法。

本发明中，对于气象色谱分析的条件可以采用本领域常用的条件，此为本领域技术人员所公知，在此不再赘述。

实施例

以下的实施例将对本发明作进一步的说明，但并不因此限制本发明。

在以下实施例中：

将购买的茶叶用粉碎机粉碎，用圆孔筛筛出≤2.0mm茶叶粉末。

GC-2010Plus气相色谱仪（配FPD检测器，日本岛津公司）。

乙酸乙酯、正己烷（色谱纯，J.T.Baker公司）。

石墨化碳黑（GCB）、N-丙基乙二胺键合硅胶（PSA）（BESEP公司）

有机磷农药标准品包括：敌敌畏、乐果、甲基对硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、水胺硫磷、三唑磷、苯硫磷、伏杀硫磷，购于美国J.T.Baker公司。

将有机磷农药标准品用乙酸乙酯-正己烷（V:V=1:1）稀释并配制成各自浓度为10μg/mL的混合标准溶液。用乙酸乙酯-正己烷（V:V=1:1）将10μg/mL的混合标准溶液逐级稀释为浓度为0.250、0.100、0.050、0.020、0.010、0.005μg/mL的混合标准溶液，用GC-2010Plus气相色谱仪进行色谱分析，色谱柱条件如下，以浓度对峰面积绘制标准曲线（0.010μg/mL的混合标准溶液的GC-FPD色谱图见图1），线性方程及相关系数见表1。

色谱柱：DB-5ms毛细管柱，30m×0.25mm×0.25μm，恒线速度模式，初始流速0.8mL/min；进样口：不分流模式，温度250℃，进样量2μL；升温程序：50℃保持1min，50℃/min升至100℃，保持1min，8℃/min升至280℃，保持5min；载气：N2，纯度≥99.999%；FPD检测器：磷模式，温度300℃，H₂62.5mL/min，Air90mL/min。

表1

出峰顺序	农药名称	线性回归方程	相关系数
				1	敌敌畏	Y=14854.1x-65440.2	0.9988
2	乐果	Y=24974.3x-205908	0.9964
				3	甲基对硫磷	Y=23230.5x-134022	0.9980
4	杀螟硫磷	Y=22510.8x-134744	0.9976
				5	对硫磷	Y=20980.3x-108447	0.9988
6	水胺硫磷	Y=23530.7x-143771	0.9976
				7	三唑磷	Y=29719.0x-172587	0.9979
8	苯硫磷	Y=68833.4x-345716	0.9988
				9	伏杀硫磷	Y=74746.6x-455317	0.9982

实施例1

（1）取5g茶叶粉末，于50mL离心管中加入10mL乙酸乙酯-正己烷（V:V=1:1）提取液，涡旋振荡4min，并重复1次，然后在5000rpm下离心5min。

（2）取10mL聚丙烯离心管，加入70mg GCB、20mg PSA吸附剂，转入步骤（1）离心后的上清提取液1.5mL，涡旋振荡3min，在12000rpm下离心6min。

（3）取出步骤（2）离心后的上清液过0.45μm尼龙滤膜后，用GC-2010Plus气相色谱仪进行色谱分析。

（4）根据色谱分析的峰面积通过线性回归方程得出各有机磷农药的浓度。

实施例2

（1）取5g茶叶粉末，于50mL离心管中加入5mL乙酸乙酯-正己烷（V:V=1:0.5）提取液，涡旋振荡3min，并重复1次，然后在4000rpm下离心6min。

（2）取10mL聚丙烯离心管，加入60mg GCB、30mg PSA吸附剂，转入步骤（1）离心后的上清提取液1.5mL，涡旋振荡4min，在11000rpm下离心7min。

（3）取出步骤（2）离心后的上清液过0.40μm尼龙滤膜后，用GC-2010Plus气相色谱仪进行色谱分析。

实施例3

（1）取5g茶叶粉末，于50mL离心管中加入15mL乙酸乙酯-正己烷（V:V=1:1.5）提取液，涡旋振荡2min，并重复1次，然后在6000rpm下离心4min。

（2）取10mL聚丙烯离心管，加入35mg GCB、35mg PSA吸附剂，转入步骤（1）离心后的上清提取液1.5mL，涡旋振荡5min，在13000rpm下离心5min。

（3）取出步骤（2）离心后的上清液过0.3μm尼龙滤膜后，用GC-2010Plus气相色谱仪进行色谱分析。

试验例

以下试验例中的茶叶为有机茶叶，购于福建茗山茶业开发有限公司，视为无农药茶叶。

称取5g干茶叶粉末，添加混标溶液，基于茶叶的重量，使农药的总浓度分别为0.02mg/kg、0.04mg/kg、0.10mg/kg，按实施例1的方法进行分析，各添加水平下的平均回收率、相对标准偏差与检出限（以3倍信噪比计）见表2。

表2

从表2可以看出，本发明方法的平均回收率均在60-130%范围内，RSD均小于15%，符合分析方法要求。按实施例2或实施例3的方法进行分析，数据与表2中类似，均符合分析方法要求。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims

1.一种用于检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤（1）中，茶叶粉末的粒径≤2mm。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤（1）中，相对于1g茶叶粉末，提取溶剂的用量为1-3mL。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其中，所述提取溶剂选自乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述提取溶剂为乙酸乙酯与正己烷的混合溶液，乙酸乙酯与正己烷的体积比为1：0.5-1.5。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤（2）中，相对于1g茶叶粉末，固体吸附剂的用量为50-150mg。

7.根据权利要求1或6所述的方法，其中，所述固体吸附剂选自石墨化炭黑、N-丙基乙二胺键合硅胶和C18键合硅胶中的一种或多种。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述固体吸附剂为石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的重量比为1：0.125-1。

9.权利要求1-8中任意一项所述的方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用。

10.一种检测茶叶中有机磷类农药的方法，所述方法包括：

（1）将茶叶进行前处理，得到待测溶液；

（2）将步骤（1）得到的待测溶液进行气相色谱分析，

其中，步骤（1）中前处理的方法为权利要求1-8中任意一项所述的方法。