CN103877010A - 一种罗米地辛溶液的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种罗米地辛溶液的制备方法，具体而言主要包括以下三步：1.配制含聚维酮的乙醇水溶液；2.调节步骤1所得溶液pH；3.控制溶液温度并维持溶液pH，加入罗米地辛至完全溶解得所述溶液，罗米地辛浓度为0.5-6mg/ml。以及本方法制备得到的罗米地辛溶液在制备冻干粉针剂中的应用。

Description

一种罗米地辛溶液的制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种罗米地辛溶液及其制备方法。

背景技术

罗米地辛为来源于紫色色杆菌的天然产物，属双环缩酚酸肽类化合物。

式I——罗米地辛

罗米地辛是一种组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂。HDACs可催化组蛋白中乙酰化赖氨酸残基的去乙酰基反应，从而调节基因表达。HDACs对非组蛋白的蛋白质亦有脱乙酰作用，例如转录因子。在体外，罗米地辛可引起乙酰组蛋白的蓄积、诱导细胞周期停止和某些癌症细胞株凋亡，其IC₅₀值在纳克范围。

现有资料表明，罗米地辛能特异性地与组蛋白去乙酰化酶(HDACs)结合，抑制HDAC1和HDAC2的活性，且对两者的选择性相似，催化组蛋白或非组蛋白中已被乙酰化的赖氨酸残基脱乙酰基，调控肿瘤细胞基因的表达，诱导肿瘤细胞分化、阻滞肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡。

罗米地辛在体内增加组蛋白H3和H4的乙酰化，抑制Ha-ras激活的NH3T3的细胞生长水平，并能有效诱导p21^WAF1/CIP1的表达，阻滞肿瘤细胞周期。p21^WAF1/CIP1是细胞周期依赖性蛋白激酶(CDKs)的天然抑制剂，能抑制CDKs的活性，导致细胞周期G1/S期的停滞。本品还诱导Hsp90乙酰化，降低肿瘤蛋白水平和突变异种的表达，抑制ErbB1和ErbB2和类风湿性因子(Ra-f1)，对多种血液肿瘤和实体瘤都具有明显的杀伤作用。

注射用罗米地辛适用于已接受至少1次全身治疗的皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)和接受至少1次全身治疗的外周T-细胞淋巴瘤(PTCL)的患者。尽管CTCL和PTCL发病率很低，但一直以来尚无疗效比较持久的治疗方法，且疾病进入晚期后大多预后较差，罗米地辛的获批上市为这些患者提供了新的治疗希望。

注射用罗米地辛，在制备过程中遇到最大的技术障碍在于罗米地辛为难溶性药物。如何溶解使之适于制剂的生产或者使之适于注射给药，为罗米地辛最为关键的技术难题。现有技术(US2012/0046442)提供了叔丁醇作为溶剂的解决方案，但是该方案存在诸多缺陷依然不能完全满足药物配置方面的需求。其中最为关键的是采用叔丁醇溶解方案中，为保证叔丁醇的流动性(叔丁醇凝固点低约为23-25度，易结晶)需要提高系统温度，然而系统温度提高之后对罗米地辛的稳定性带来负面影响，现有技术为了克服这一缺陷一方面控制系统温度不至过高(28-32℃)，另一方面对整个系统采用氮气保护的策略。显然这一方案对罗米地辛溶液以及工艺过程本身均带来诸多限制。

发明人为解决这一技术问题而完成本发明。

发明内容

本发明提供了一种罗米地辛溶液配制方法，包括以下步骤：

1、配制含聚维酮的乙醇水溶液，其中乙醇浓度为15-50％(体积比)，优选20-45％(体积比)，最优选25-40％(体积比)，聚维酮的浓度为1-10mg/ml，优选2-8mg/ml，最优选2-6mg/ml；

2、调节步骤1所得溶液pH至2.0～4.0，优选pH至2.5～3.5，最优选2.8～3.0；

3、控制溶液温度20-60℃，优选35-50℃，最优选35-45℃，维持溶液pH至2.0～4.0，优选pH至2.5～3.5，最优选2.8～3.0，加入罗米地辛至完全溶解得所述溶液，罗米地辛浓度为0.5-6mg/ml，优选1-5mg/ml，最优选2-4mg/ml。

本发明所述的聚维酮是指可供医药使用的聚乙烯吡咯烷酮，可供选择的型号或规格按其K值划分可以是K12-30，优选K12、K15、K17、K25、K30；再优选K12、K15、K17；最优选K17；K值定义以及计算方法参照美国药典中相应的规定和记载。

步骤2中调节溶液pH至一定范围，可以采用添加有机酸、无机酸水溶液或有机碱、无机碱水溶液的方式达到。常用的有机酸、无机酸水溶液包括醋酸水溶液、盐酸水溶液、磷酸水溶液；常用的无机碱或有机碱水溶液包括氢氧化钠水溶液、氨水溶液等。上述酸和碱的浓度以适合调节溶液pH为度，例如1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠溶液。

步骤3中维持溶液pH至一定范围，可以采用添加有机酸、无机酸水溶液或有机碱、无机碱水溶液的方式达到。常用的有机酸、无机酸水溶液包括醋酸水溶液、盐酸水溶液、磷酸水溶液；常用的无机碱或有机碱水溶液包括氢氧化钠水溶液、氨水溶液等。上述酸和碱的浓度以适合调节溶液pH为度，例如1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠溶液。

特别有益的是步骤2、3中的pH值维持在各自范围内，可以相同亦可以不同。

罗米地辛属于难溶性药物，为加速其在溶液中的溶解过程可以采用超声、搅拌等常规加速溶解的方法。

特别有益的是，本发明制备方法所获得的罗米地辛溶液适于制备罗米地辛的各类药物制剂，尤其适合于制备罗米地辛冻干粉针剂。本发明的另一目的即在于提供通过本发明方法制备得到的罗米地辛溶液在制备冻干粉针剂中的用途。

为制备罗米地辛冻干粉针剂，可直接将本发明方法制备得到的罗米地辛溶液通过微孔滤膜过滤除菌除杂，进而采用常规冻干设备和常规冻干工艺即可得到所需的罗米地辛冻干粉针剂。

本发明与现有技术相比具有多方面的技术优势。具体体现在以下几个方面：

1、罗米地辛在乙醇中溶解度高于现有技术中的叔丁醇。

2、作为一种医药原料，乙醇较叔丁醇更易获得，且质量更为稳定可靠。

3、乙醇较叔丁醇安全，毒性、刺激性小。

4、乙醇在常温下无叔丁醇易凝固流动性差等缺陷。

除上述例举的优点之外，乙醇溶解方案还有一个令人意料不到的技术效果，采用乙醇溶解方案，整个系统可以不用氮气保护，所获得溶液质量稳定可靠，适合用于制备包括冻干粉针剂在内的多种药物制剂，并且能保证包括冻干粉针剂在内的多种药物制剂质量稳定可靠。

具体实施方式

实施例1溶解度考察

称取罗米地辛约10mg，精密称定，加入溶剂10ml，混合，密闭，超声30min，灯检箱下观察，如溶解完全，继续加入罗米地辛约10mg(精密称定)，混合，密闭，超声(系统温度逐渐升温至约45～55℃)，灯检箱下观察。反复操作直至无法溶解完全。试验结果见表1、表2。

表1罗米地辛在单一溶剂中的溶解度

表2罗米地辛在混合溶剂中的溶解度

试验结果：单一溶剂中，罗米地辛在PEG400、叔丁醇中溶解性较差，在丙二醇、乙醇中溶解性较好，在乙醇中溶解性最好；混合溶剂中在酸性条件下聚维酮-乙醇水混合溶液中溶解性最好。且叔丁醇目前无药用级别，乙醇有药用级别，相对于叔丁醇安全性较高。

实施例2制备不同浓度罗米地辛溶液

溶液I

1、配制含聚维酮K17的乙醇水溶液，其中乙醇浓度为15％(体积比)，聚维酮的浓度为1mg/ml；

2、调节步骤1所得溶液pH至2.2；

3、控制溶液温度45℃，维持溶液pH至2.2，加入罗米地辛至完全，溶解得澄清透明溶液，罗米地辛浓度为0.5mg/ml。

溶液II

1、配制含聚维酮K30的乙醇水溶液，其中乙醇浓度为50％(体积比)，聚维酮的浓度为10mg/ml；

2、调节步骤1所得溶液pH至3.8；

3、控制溶液温度60℃，维持溶液pH至3.8，加入罗米地辛至完全，溶解得澄清透明溶液，罗米地辛浓度为6mg/ml。

溶液III

1、配制含聚维酮K12的乙醇水溶液，其中乙醇浓度为25％(体积比)，聚维酮的浓度为3mg/ml；

2、调节步骤1所得溶液pH至3.0；

3、控制溶液温度30℃，维持溶液pH至3.0，加入罗米地辛至完全，溶解得所述溶液，罗米地辛浓度为2mg/ml，得澄清透明溶液；

溶液IV

1、配制含聚维酮K25的乙醇水溶液，其中乙醇浓度为40％(体积比)，聚维酮的浓度为7mg/ml；

2、调节步骤1所得溶液pH至3.8；

3、控制溶液温度25℃，维持溶液pH至3.8，加入罗米地辛至完全溶解得澄清透明溶液，罗米地辛浓度为2mg/ml；

实施例3长期稳定性考察

取实施例2制备得到的各浓度罗米地辛溶液，0.2um微孔滤膜精滤和终端过滤，灌装，半压塞，冻干。考察各冻干粉末长期稳定性。包装：10ml中性硼硅玻璃管制注射剂瓶；考察条件：25±2℃，RH 60％±10％。罗米地辛的含量检测按照参考文献报道方法进行。Xiaohong Chen，Erin R.Gardner，and William D.Figg，Determination of the cyclic depsipeptide FK228 in human and mouse plasma byliquid chromatography with mass-spectrometric detection.J Chromatogr B AnalytTechnol Biomed Life Sci.

表3 溶液I冻干粉末长期稳定性

表4溶液II冻干粉末长期稳定性

表5溶液III冻干粉末长期稳定性

表6溶液IV冻干粉末长期稳定性

Claims (4)

1.一种罗米地辛溶液配制方法，包括以下步骤：(1)、配制含聚维酮的乙醇水溶液，其中乙醇浓度为15-50％(体积比)，聚维酮的浓度为1-10mg/ml；(2)、调节步骤1所得溶液pH至2.0～4.0；(3)、控制溶液温度20-60℃，维持溶液pH至2.0～4.0，加入罗米地辛至完全溶解得所述溶液，罗米地辛浓度为0.5-6mg/ml。

2.权利要求1所述的配制方法，特征在于：(1)、配制含聚维酮的乙醇水溶液，其中乙醇浓度为20-45％(体积比)，聚维酮的浓度为2-8mg/ml；(2)、调节步骤1所得溶液pH至2.5～3.5；(3)、控制溶液温度35-50℃，维持溶液pH至2.5～3.5，加入罗米地辛至完全溶解得所述溶液，罗米地辛浓度为0.5-6mg/ml。

3.权利要求1-2所述的配制方法，特征在于：(1)、配制含聚维酮的乙醇水溶液，其中乙醇浓度为25-40％(体积比)，聚维酮的浓度为2-6mg/ml；(2)、调节步骤1所得溶液pH至2.8～3.0；(3)、控制溶液温度35-45℃，维持溶液pH至2.8～3.0，加入罗米地辛至完全溶解得所述溶液，罗米地辛浓度为0.5-6mg/ml。

4.一种罗米地辛溶液在制备罗米地辛冻干粉针剂中的用途，特征在于该罗米地辛溶液由权利要求1-3任一所述方法制备得到。