CN103848835B - 二肽基肽酶-iv抑制剂、其用途及其中间体和中间体的制备方法 - Google Patents

二肽基肽酶-iv抑制剂、其用途及其中间体和中间体的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种通式I所示的化合物或其光学异构体或药学上可接受的盐、其用途及其中间体和该中间体的制备方法。其中，式I中的R1、R2、R3、R4、R5、R6如说明书中所定义。这些式I化合物结构新颖，对二肽基肽酶‑IV具有更强的抑制活性、更好的选择比和安全性，可用于制备治疗或预防二肽基肽酶‑IV相关疾病的药物。

Description

二肽基肽酶-IV抑制剂、其用途及其中间体和中间体的制备 方法
技术领域
本发明涉及医药领域，特别是涉及二肽基肽酶-IV(Dipeptidyl peptidases，DPP-IV)抑制剂及其在制备治疗和预防DPP-IV相关疾病的药物中的应用，特别是在制备糖尿病尤其是II型糖尿病的治疗药物中的应用。本发明还涉及制备上述二肽基肽酶-IV抑制剂的中间体，及该中间体的制备方法。
背景技术
糖尿病（diabetes）是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征。它分Ⅰ型糖尿病和Ⅱ型糖尿病。
II型糖尿病是一种常见的以高血糖为特征的慢性疾病，它的发生伴随着外周组织中的胰岛素抵抗、体内胰岛素分泌相对减少以及肝脏糖异生作用的增加[Exp.Opin.Ther.Patents,2003,13(4):499-510]。在糖尿病患者中，Ⅱ型糖尿病所占的比例约为95%，目前治疗糖尿病药物的研究多是针对Ⅱ型糖尿病展开的。传统的药物种类繁多，但是一般都伴有体重增加，低血糖等副作用以及药效逐渐降低等问题，因此，人们正在寻找新的治疗药物，许多新的治疗靶点正在研究中，其中以二肽肽基酶Ⅳ(DPP-IV)为靶点的药物研究取得的成果尤为突出[Medicinal Research Review,2009,29(1),125-195]。
胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是由胰岛α-细胞和肠道L-细胞分泌的一种激素，具有葡萄糖依赖性促胰岛素分泌以及增加胰岛素生物合成的作用，因此使用GLP-1治疗糖尿病引起科学家极大兴趣。GLP-1除了具有促进胰岛素分泌作用外，还具有促进β-细胞增生、抗β-细胞凋亡、抑制胰高血糖素和肝糖的生成、抑制食欲、降低胃肠排空速度、保护神经细胞等生理功能[Trends Endocrinol Metab,1999,10(6):229-235]。GLP-1这些特点使其成为理想的糖尿病治疗药物，然而，GLP-1在体内的半衰期仅数分钟，迅速被内源性二肽基肽酶-IV(DPP-IV)降解（除去N端二肽），而失去促胰岛素分泌活性[ExpertOpin.Investing.Drugs,2004,13(9):1091-1102]。
DPP-IV在人体内广泛分布，是GLP-1的主要代谢酶，在调控GLP-1活性中发挥着重要作用。因此抑制DPP-IV的活性化合物即DPP-IV抑制剂，可增强GLP-1的作用。除此之外，DPP-IV抑制剂还具有促进β-细胞增生、抗β-细胞凋亡、抑制胰高血糖素和肝糖的生成、抑制食欲、不增加体重，降低胃肠排空速度、保护神经细胞等作用[Trends Endocrinol Metab,1999,10(6):229-235]。因此，DPP-IV抑制剂还可用于与二肽基肽酶相关的各种疾病例如肥胖症和高血脂的治疗[Diabetologia,2007,50(6):1148-1155;Regul Pept,2008,31(1):108-113]。
现有文献和专利公开了许多DPP-IV抑制剂[Current Medicinal Chemistry,1999,6,311-327；Biochemistry1999,38,11597-11603；Expert Opin.Ther.Patents,2003,13(4):499-510；Expert Opin.Investing.Drugs,2005,15(10):1387-1407]。专利WO00/34241公开了具有DPP-IV抑制活性的N-取代-2-氰基吡咯类化合物，其金刚烷部分为单取代或简单烷基取代。专利US2003/0100563公开了用于治疗糖尿病的β-氨基杂环类DPP-IV抑制剂。专利WO03/057666公开了环丙烷化的2-氰基吡咯类DPP-IV抑制剂。专利US2004/0171848公开了一系列含有偕二苯基侧链的2-氰基吡咯化合物。专利WO2005/095381公开了一类新结构的2,4二氧3,4二氢嘧啶类DPP-IV抑制剂。自2006年美国FDA批准第一个DPP-IV抑制剂默克公司的磷酸西格列汀（sitagliptin phosphate）上市以后，又有四个(包括alogliptin)不同的DPP-IV抑制剂在不同的国家或地区先后上市用于治疗Ⅱ型糖尿病。
然而，现有技术中这些化合物对二肽基肽酶的抑制活性还不够令人满意，其降糖和HbA1c活性没有二甲双胍强[Medicinal Research Review,2009,29(1),125-195]。因此本领域迫切需要开发结构新颖，活性更高的二肽基肽酶抑制剂，以便治疗与二肽基肽酶相关的各种疾病。
发明内容
本发明要解决的技术问题之一是提供一类二肽基肽酶-IV抑制剂，它们结构新颖，对二肽基肽酶具有很高的抑制活性和优异的药物代谢性质。
为解决上述技术问题，本发明的二肽基肽酶-IV抑制剂，具有通式I所示结构，或其各种光学异构体、药学上可接受的无机或有机盐：
其中，
R1选自：氢，氰基，卤素；
R2选自：氢，氰基，卤素，任意取代的C1-4烷基；
R3、R5相同或不相同均可，分别选自：氢，卤素，任意取代的C1-6烷基，C1-6的烷氧基；
R6选自：氢，甲基；
R4选自：
(1)NR7R8，NR7COR8，NR7CO2R8，NCONR7R8，NR7SO2R8，
(2)氢，CO2R7,CONR7R8，
(3)OR7，SR7，
(4)SO2R7，
(5)C1-6烷基,C3-6环烷基，
(6)芳基或含有N、S或O杂原子的杂芳基，其是未取代的或被一至二个独立选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基砜基和氰基的取代基取代；
上述R7和R8各自独立地选自：
(1)氢，
(2)C1-6烷基，C1-6烷氧基，C3-6环烷基，苯基C1-6烷基，
(3)芳基，其是未取代的或被一至三个独立选自卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基和C1-6烷基砜基的取代基取代，
(4)含有至少一个选自N、S和O的杂原子的杂芳基，其是未取代的或被一至二个独立选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和氰基取代。
本发明的化合物可以含有至少一个不对称中心，即存在至少一个不对称碳原子，因此通式I包括单一手性异构体、消旋体或手性异构体混合物。可以存在的不对称中心，取决于分子上各种取代基的性质。每个这种不对称中心将独立地产生两个旋光异构体。所有可能的旋光异构体和非对映体混合物和纯或部分纯的化合物均包括在本发明的范围之内。
通式I的化合物中，比较具有代表性的化合物如表1所示：
表1本发明的代表性化合物
本发明要解决的技术问题之二是提供具有上述通式I结构的二肽基肽酶-IV抑制剂在制备二肽基肽酶相关疾病的预防和治疗药物中的用途。
本发明要解决的技术问题之三是提供制备上述通式I结构的二肽基肽酶-IV抑制剂的中间体化合物。
为解决上述技术问题，本发明的中间体化合物，具有通式Ⅱ所示结构，或其各种光学异构体：
式中，R1、R2、R6的定义同上。
本发明要解决的技术问题之四是提供上述式Ⅱ结构的中间体化合物的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明的式Ⅱ结构中间体的制备方法，步骤包括：
1）0～50℃，在极性非质子性溶剂中，碱存在下，将4-溴-吡咯-2羧酸甲酯（制备方法参照J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1,1997,10,1443-1448）胺基化，得到甲基1-氨基-4-溴-1H-吡咯-2-羧酸酯。
其中，极性非质子性溶剂可以选自四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、甲苯、1，4-二氧六环、二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮，优选四氢呋喃。碱可以选自氢化钠、氢化钾、叔丁醇钾、叔丁醇钠、甲醇钠、乙醇钠，优选氢化钠。反应温度优选为20℃。
2）0～50℃，在极性溶剂中，步骤1）的产物和氯甲酸苄酯反应得到甲基1-(苄氧基羰基氨基)-4-溴-1H-吡咯-2-羧酸酯。
其中，溶剂可以选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁醚、二氧六环、甲苯、水或上述两种的混合溶剂，优选二氧六环和水的混和溶剂；碱可以选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钡、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、碳酸氢钾、碳酸氢钠、三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶，优选碳酸氢钠。反应温度优选为25℃。
3）60～120℃，氮源存在下，步骤2）的产物密闭反应得到6-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2,4(1H,3H)-二酮。
其中，溶剂可以选自甲醇、乙醇、二氧六环、乙腈、二甲基甲酰胺、水或者上述两种的混合溶剂。氮源可以使用氨水。优选条件是以氨水做溶剂和氮源，在120℃下进行反应。
4）60～120℃，在非质子性溶剂中，有机碱存在下，步骤3）的产物经氯化得到6-溴-2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪。
其中，溶剂可以选自甲苯、苯、二甲苯、乙酸乙酯、氯仿，优选为甲苯。氯代试剂可以使用三氯氧磷。碱可以选自三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基苯胺、二乙基苯胺，优选为二异丙基乙胺。反应温度优选为120℃。
5）10～80℃，碱存在下，步骤4）的产物选择性水解，得到6-溴-2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮。
其中，溶剂可以选自甲醇、乙醇、二氧六环、乙腈、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、水或者上述两种的混合溶剂，优选为四氢呋喃和水的混和溶剂；碱可以选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钡、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯，优选为氢氧化钠。反应温度优选为40℃。
6）20～120℃，在极性非质子性溶剂中，无机碱存在下，步骤5）的产物和苄溴衍生物反应得到式Ⅰ-6化合物；式中，R1、R2的定义同上。
溶剂可以选自乙腈、丙酮、二氧六环、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲亚砜，优选为二氧六环。碱可以选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钡、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、叔丁醇钾、叔丁醇钠、氢化钠、氢化钾，优选为碳酸铯。反应温度优选为60℃。
7）20～150°℃，在极性非质子溶剂中，无机碱存在下，式I-6化合物和R-3-氨基哌啶或其衍生物反应，得到式I-7化合物；式中，R1、R2、R6的定义同上。
反应的溶剂可以选自乙腈、丙酮、二氧六环、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲亚砜，优选二甲基甲酰胺。碱可以选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钡、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、叔丁醇钾、叔丁醇钠、氢化钠、氢化钾，优选为碳酸钾。反应温度优选为120℃。
8）20～80℃，在非质子性溶剂中，有机碱存在下，式I-7化合物和二碳酸二叔丁酯反应，得到式Ⅱ化合物。
其中，溶剂可以选自甲苯、苯、二甲苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃，优选为二氯甲烷。碱可以选自三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶吡啶、二甲基苯胺、二乙基苯胺，优选为三乙胺。反应温度优选为25℃。
与现有的DPP-IV抑制剂相比，本发明的DPP-IV抑制剂具有下列优点和有益效果：
(1)本发明的化合物是一类新分子结构的DPP-IV抑制剂。
(2)本发明的化合物对DPP-IV有更强的抑制活性。相比现有的上市药物西格列汀，本发明的化合物对DPP-IV的抑制活性最高可达到西格列汀对DPP-IV抑制活性的4倍以上。
(3)本发明的化合物对于二肽酶有更好的选择比。已经证实抑制DPP-IV的同系酶DPP8和DPP9与产生胃肠道和免疫毒性相关，因此，较好的靶点选择性表明该类化合物具有更好的安全性。
(4)本发明的化合物具有更强的体内降糖活性。
具体实施方式
除非有特别说明，本文所用的以下术语具有下述含义：
“烷基”指饱和的脂族烃基团，包括1至6个碳原子的直链和支链基团。优选含有1至6个碳原子的中等大小烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基等。更优选的是含有1至4个碳原子的低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等。
“环烷基”指3至8元全碳单环、全碳5元/6元或6元/6元稠合环或多环稠合环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。例如：环丙基、环丁基、环戊基、环己烷、环己二烯、金刚烷、环庚烷、环庚三稀等。
“芳基”指具有至少一个芳环结构的基团，即具有共轭的π电子系统的芳环，包括但不限于碳环芳基、杂芳基。
“杂芳基”指具有1至3个杂原子作为环原子，其余的环原子为碳的芳基，杂原子包括氧、硫、氮，所述环可以是5元或6元环。杂环芳基基团包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、四唑基、吲哚基、三嗪基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基等。
“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(未取代的环烷基)。例如：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。
“卤素”指氟、氯、溴或碘。
“烷氧羰基”指-COO-(烷基)。例如：甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、异丙氧羰基、丁氧羰基等。
“烷基砜基”指-SO2-(烷基)。例如：甲基砜基、乙基砜基、丙基砜基、异丙基砜基、丁基砜基等。
“药学上可接受的盐”指只要是药学上可以接受的盐就没有特别的限定，具体地可列举本发明化合物与酸形成的盐，适合成盐的酸包括但不限于：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、苯磺酸等有机酸以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。
实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规条件或制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则份数和百分比为重量份和重量百分比。
所有实施例中，熔点用X-4熔点仪测定，温度计未校正；1H NMR用VarianMercury400或600核磁共振仪记录，化学位移以δ（ppm）表示；MS的测定用岛津LC-MS-2020质谱仪。分离用硅胶未说明均为200-300目，洗脱液的配比均为体积比。
实施例1N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-4-甲基苯磺酰胺（化合物-1）的制备
（1）甲基1-氨基-4-溴-1H-吡咯-2-羧酸酯（式I-1）的制备
制备NH2Cl溶液：将500mL乙醚倒入1L的三颈瓶中，冷至-5℃。加入13.5g NH4Cl、21.2mL浓氨水,在0℃以下滴加NaOCl(324mL)溶液。加毕，继续搅拌20min，分液，乙醚层用饱和食盐水洗涤，乙醚层在0℃以下加入无水氯化钙干燥，备用。
制备式I-1化合物：将4-溴-吡咯-2羧酸甲酯（30g,0.15mol，制备方法参照文献J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1,1997,10,1443-1448）溶于120mL THF（四氢呋喃）中，加入NaH（7.2g,0.18mol)，完毕后室温反应0.5h，然后加入制备好的NH2Cl溶液440mL。LC-MS检测，室温反应2h，加入饱和的硫代硫酸钠溶液，分液，水层用乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥，浓缩，得黑色油状物（33g），不经纯化直接下步反应。Ms m/z(ESI)：218.97和220.97[M+1]+。
（2）甲基1-(苄氧基羰基氨基)-4-溴-1H-吡咯-2-羧酸酯（式I-2）的制备
将甲基1-氨基-4-溴-1H-吡咯-2-羧酸酯（式I-1）溶于150mL二氧六环中，加入150mL H2O和18.9g NaHCO3（0.22mol），在搅拌下滴加氯甲酸苄酯（28g,0.165mol），滴加完毕后室温搅拌，TLC（薄层色谱）检测。完毕后，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，干燥，浓缩，得黑色油状物(52g)，不经纯化直接下步反应。分析样品用柱层析纯化（石油醚:乙酸乙酯=8:1）。Ms m/z(ESI)：353.01和355.00[M+1]+。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:3.73(s,3H),5.20(s,2H),6.90(d,1H),6.94(d,1H),7..32-7.36(m,5H),7.96(brs,1H)。
（3）6-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2,4(1H,3H)-二酮（式I-3）的制备
将30g甲基1-(苄氧基羰基氨基)-4-溴-1H-吡咯2羧酸酯(式I-2)投入封管中，加入100mL浓氨水，密封。加热至120℃反应4.0h。冷至室温，LC-MS检测，原料反应完全。将反应液倒入旋蒸瓶中，浓缩至干。固体物用少量无水乙醇洗涤，干燥，得浅黄色固体(14g)。不再继续纯化，直接下步反应。Ms m/z(ESI)：229.95和231.95[M+1]+。
（4）6溴-2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪（式I-4）的制备
将6-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪2,4(1H，3H)-二酮（式I-3）（18.4g,0.08mol）投入反应管中，加入甲苯(100mL)，加入POCl3（24.5g,0.16mol）和DIPEA（30.9g,0.24mol）,密封。在125℃反应24h。冷至室温，缓慢倒入冰水中，分液，水层用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥，浓缩，柱层析(石油醚:乙酸乙酯=10:1)，得浅黄色固体(6.5g,30.5%)。
熔点：86-88℃。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ：7.10(d,1H),7.86(d,1H)。
（5）6-溴-2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（式I-5）的制备
将6-溴2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪（式I-4）（6.14g,23mmol）溶于50mL四氢呋喃中，室温下加入1N NaOH（50mL）。室温搅拌反应，TLC检测，原料反应完全后用1NHCl将pH值调节至3-4之间，在此过程中有大量固体析出。用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，干燥，过滤，浓缩，得淡黄色固体(5.6g,98.2%)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ：7.11(d,1H),7.40(d,1H)。
（6）2-((6溴-2-氯-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（式I-6a）的制备
将6-溴-2-氯吡咯并[1,2-f][1，2,4]三嗪-4(3H)-酮（式I-5）（5.2g，20mmol）溶于80mL四氢呋喃中，加入邻氰基苄溴（3.92g，20mmol）、碳酸铯（7.15g,22mmol）和碘化钾（664mg，4mmol），50℃反应，TLC检测。反应结束后过滤，除去不溶性盐，滤液浓缩，柱层析(石油醚：乙酸乙酯=8：1)，得淡黄色固体(3.8g,52.3%)。
熔点：139-141℃。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:5.61(s,2H),7.13(d,1H),7.20(d,1H),7.38(d,1H),7.43(t,1H),7.57(t,1H),7.73(d,1H)。
（7）2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-6-溴-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（式I-7a）的制备
将2-((6-溴-2-氯-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（式I-6a）（3.63g，10mmol）溶于干燥的40mL DMF(二甲基甲酰胺)中，加入(R)-3-氨基哌啶二三氟乙酸盐（6.56g，20mmol）和碳酸钾（4.14g，30mmol），加热至120℃反应3h，反应结束后倒入水中，用乙酸乙酯萃取，有机层干燥，过滤，浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇=100:1)，得白色泡沫状固体(3.95g,92.5%)。熔点：53-55℃。Ms m/z(ESI)：427.08和429.08[M+1]+。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:1.18-1.21(m,2H),1.75-1.79(m,1H),1.89-1.96(m,1H),2.54-2.61(m,1H),2.71-2.80(m,1H),2.88-3.00(m,2H),3.02-3.16(dd,1H),5.43(s,2H),7.00(d,1H),7.18(d,1H),7.30(d,1H),7.36(t,1H),7.53(dt,1H),7.67(dd,1H)。
（8）(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8a）的制备
将2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-6-溴-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（式I-7a）（3.41g,8mmol）溶于干燥的40mL二氯甲烷中，加入三乙胺（1.21g，12mmol）和二碳酸二叔丁酯（1.91g，8.8mmol），室温反应。反应结束后倒入水中，分液，水层用二氯甲烷萃取，合并有机层，干燥，过滤，浓缩。得淡黄色固体(3.79g,90%)。直接下步反应。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:0.84-0.89(m,2H),1.41(s,9H),1.63-1.70(m,1H),1.78-1.85(m,2H),2.90-2.92(m,1H),2.93-2.95(m,1H),3.27-3.30(m,1H),3.73-3.75(brs,1H),5.34-5.47(m,2H),6.97(d,1H),7.16(d,1H),7.28(d,1H),7.35(t,1H),7.52(t,1H),7.66(d,1H)。
（9）(R)-叔丁基1-(6-氨基-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式Ⅱ-1）的制备
将(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8a）（660mg，1.25mmol）溶于12mL二甲亚砜中，加入CuI（237mg，1.25mmol），trans-4-羟基脯氨酸（164mg,1.25mmol），碳酸钾（517mg，1.25mmol）和3mL浓氨水，加热至70℃反应，TLC检测。原料消失后，加入水和乙酸乙酯，分液，水层用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥，过滤，浓缩，得黄色固体(370mg,64.3%)。分析样品经柱层析纯化(二氯甲烷:甲醇=150:1)。Ms m/z(ESI)：364.28[M+1]+。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:1.42(s,9H),1.61-1.63(m,4H),1.71-1.75(m,2H),2.72-2.92(brs,1H),2.85-2.89(m,2H),3.21-3.25(m,1H),3.72-3.74(brs,1H),5.36-5.50(m,2H),6.48(d,1H),6.89(s,1H),7.13(d,1H),7.34(t,1H),7.52(t,1H),7.66(dd,1H)。
（10）(R)-N-(2-(3-氨基哌啶-1-基)-3-(2氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-4-甲基苯磺酰胺（化合物-1）的制备
将(R)-叔丁基1-(6-氨基-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式Ⅱ-1，93mg，0.2mmol）溶于干燥的10mL二氯甲烷中，加入吡啶（32mg，0.4mmol），在搅拌下滴加对甲基苯磺酰氯（57mg，0.3mmol）。加毕后在室温下反应4h。反应液直接旋干，柱层析纯化(二氯甲烷:甲醇=200:1)。将中间体溶于干燥的6mL二氯甲烷中，加入2mL三氟乙酸，在室温下反应，TLC检测。反应完全后旋干，加入少量乙醚，析出固体，过滤，得淡黄色固体。该固体悬浮在10mL二氯甲烷中，加入饱和NaHCO3溶液，搅拌10min，分液有机相干燥旋干，得泡沫状固体(31mg,30.1%)。
Ms m/z(ESI)：518.19[M+1]+。
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ:1.71(brs,2H),1.86(brs,1H),2.14(brs,4H),2.90(brs,1H),3.09(brs,2H),3.53-3.56(m,2H),5.226-5.39(q,2H),6.51(s,1H),7.13(d,1H),7.24-7.27(m,3H),7.35(t,3H),7.51(t,1H),7.53-7.67(m,2H)。
实施例2 N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)噻吩-2-磺酰胺（化合物-2）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)噻吩-2-磺酰胺（化合物-2）的制备
操作同实施例1，所不同的是在搅拌下滴加的是噻吩-2-磺酰氯（55mg，0.3mmol），最后得到泡沫状固体28mg(收率27.6%)。
Ms m/z(ESI)：510.13[M+1]+。
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ：1.56-1.58(br,1H),1.72-1.84(br,2H),2.08-2.13(br,1H),3.02-3.05(br,1H),3.09-3.12(m,2H),3.46-3.51(m,2H),5.33-5.45(q,2H),6.56(s,1H),7.057.08(t,1H),7.28-7.29(d,1H),7.32-7.33(d,1H),7.42-7.46(t,1H),7.50-7.51(d,1H),7.59-7.63(t,1H),7.71-7.74(t,2H)。
实施例3 N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-环丙磺酰胺（化合物3）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-环丙磺酰胺（化合物-3）的制备
操作同实施例1，所不同的是在搅拌下滴加的是环丙基磺酰氯（42mg，0.3mmol），最后得到泡沫状固体17mg（收率18%)。
Ms m/z(ESI)468.17[M+1]+。
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ：1.08-1.13(m,4H),1.61-1.65(m,2H),1.86-1.87(m,1H),2.14-2.17(m,1H),2.71-2.74(m,1H),3.00(brs,1H),3.20(brs,2H),3.55-3.58(m,2H),5.42-5.64(q,4H),6.91(d,1H),7.44-7.56(m,3H),7.71(t,1H),7.82(d,1H)
实施例4 (2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基吡咯[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯腈-6-基）甲磺酰胺（化合物-4）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）(2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基吡咯[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯腈-6-基）甲磺酰胺（化合物-4）的制备
操作同实施例1，所不同的是在搅拌下滴加的是甲基磺酰氯（34mg，0.3mmol），最后得到泡沫状固体34mg(收率39%)。
Ms m/z(ESI)442.16[M+1]+。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ：1.72-1.79(br,2H),1.89-1.92(br,1H),2.15-2.17(br,1H),3.13(s,3H),3.18-3.21(br,3H),3.54-3.61(m,2H),5.48(q,2H),6.88(s,1H),7.43(d,1H),7.49-7.54(m,2H),7.67-7.71(t,1H),7.81(d,1H)。
实施例5 N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2f][1,2,4]三嗪-6-基)-3-吡啶磺酰胺（化合物-5）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-3-吡啶磺酰胺（化合物-5）的制备
操作同实施例1，所不同的是在搅拌下滴加的是吡啶基-3-磺酰氯（53mg，0.3mmol），最后得到泡沫状固体32mg(收率32%)。
Ms m/z(ESI)505.17[M+1]+。
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ：1.60-1.80(m,2H),1.80-1.90(m,1H),2.08-2.20(m,1H),2.85-3.08(m,2H),3.06-3.20(m,2H),3.45-3.60(m,1H),5.35-5.50(m,2H),6.58-6.61(s,1H),7.40-7.46(d,2H),7.49-7.52(t,1H),7.60-7.69(m,2H),7.77-7.80(d,1H),8.18-8.21(d,2H),8.74-8.84(m,2H)。
实施例6 N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-2-呋喃甲酰胺（化合物6）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-2-呋喃甲酰胺（化合物-6）的制备
将(R)-叔丁基1-(6-氨基-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式Ⅱ-1，93mg,0.2mmol）溶于干燥的二氯甲烷(10mL)中，加入三乙胺（41mg，0.4mmol），在搅拌下滴加呋喃-2-甲酰氯（39mg，0.3mmol），加毕后在室温下反应2h。反应液直接旋干，柱层析纯化(二氯甲烷∶甲醇=200:1)。将中间体溶于干燥的二氯甲烷6mL中，加入2mL三氟乙酸。在室温下反应，TLC检测。反应完全后旋干，加入少量乙醚，析出固体，过滤，得淡黄色固体。该固体悬浮在10mL二氯甲烷中，加入饱和NaHCO3溶液，搅拌10min，分液有机相干燥旋干，得泡沫状固体(29mg,32.1%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=458.19。
1H NMR(D2O,400MHz)δ:1.68-1.80(m,2H),1.82-1.90(m,1H),2.10-2.18(m,1H),3.10-3.16(m,1H),3.55-3.60(m,2H),4.78-4.79(m,2H),5.27-5.40(m,2H),6.65(s,1H),6.89-6.91(s,1H),7.24-7.26(s,1H),7.36-7.38(s,1H),7.46-7.50(t,1H),7.64-7.67(t,1H),7.71-7.74(s,1H),7.78-7.81(d,1H),7.84-7.87(s,1H)。
实施例7 N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)乙酰胺（化合物-7）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)乙酰胺（化合物-7）的制备
操作同实施例6，所不同的是在搅拌下滴加的是乙酰氯（24mg，0.3mmol），最后得到泡沫状固体13mg(收率16%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=406.19。
1HNMR(D2O,400MHz)δ:1.28-1.30(br,2H),1.51-1.62(br,1H),1.74-1.82(br,1H),2.10(s,3H),2.85-2.98(br,1H),3.01-3.11(br,2H),3.42-3.54(m,2H),5.36-5.51(q,2H),6.73-6.74(d,1H),7.33-7.37(d,2H),7.42-7.48(t,1H),7.59-7.64(t,1H),7.72-7.75(d,1H),7.83.7.84(d,1H)。
实施例8 N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-4-氟苯甲酰胺（化合物-8）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-4-氟苯甲酰胺（化合物-8）的制备
操作同实施例6，所不同的是在搅拌下滴加的是对氟苯甲酰氯（48mg，0.3mmol），最后得到泡沫状固体31mg(收率32%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=486.20。
1HNMR(D2O,400MHz)δ:1.80-1.82(br,1H),1.85-1.89(br,2H),2.10-2.15(br,1H),2.88-2.90(br,1H),3.07-3.21(br,2H),3.42-3.62(br,2H),5.38-5.51(q,2H),6.96(d,1H),7.22-7.28(t,2H),7.35-7.37(d,1H),7.42-7.48(t,1H),7.60-7.66(t,1H),7.73-7.76(d,1H),7.98-8.02(m,3H)。
实施例9 N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-3-吡啶甲酰胺（化合物-9）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-3-吡啶甲酰胺（化合物-9）的制备
操作同实施例6，所不同的是在搅拌下滴加的是吡啶基-3-甲酰氯（43mg，0.3mmol），最后得到泡沫状固体27mg（收率28%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=469.20。
1H NMR(D2O,400MHz)δ:1.53-1.60(m,2H),1.62-1.78(m,1H),1.90-2.00(m,1H),2.95-3.08(m,2H),3.35-4.06(m,3H),5.20-5.38(m,2H),6.80-6.81(s,1H),7.20-7.25(d,1H),7.26-7.35(t,1H),7.48-7.50(t,1H),7.60-7.65(d,1H),7.78-7.82(m,2H),8.52-8.58(d,1H),8.64-8.75(s,1H),8.97-9.02(s,1H)。
实施例10 2-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)乙酸甲酯（化合物-10）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）2-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)乙酸甲酯（化合物-10）的制备
操作同实施例6，所不同的是在搅拌下滴加的是氯甲酸甲酯（29mg，0.3mmol），最后得泡沫状固体36mg（收率43%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=422.19。
1H NMR(D2O,400MHz)δ:1.54-1.62(br,1H),1..74-1.83(br,2H),2.09-2.15(br,1H),2.72-2.85(br,1H),3.01-3.13(br,2H),3.47-3.52(m,2H),3.73(s,3H),5.37-5.49(q,2H),6.71(s,1H),7.32-7.34(d,1H),7.43-7.46(t,1H),7.60-7.64(t,2H),7.73-7.75(d,1H)。
实施例11 R-1-(3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-6-(3-苯氧甲酰胺基)-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸（化合物-11）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）R-1-(3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-6-(3-苯氧甲酰胺基)-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪2-基)哌啶-3-基氨基甲酸（化合物-11）的制备
操作同实施例6，所不同的是在搅拌下滴加的是氯甲酸苯酯（29mg，0.3mmol），最后得泡沫状固体15mg(收率15%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=484.20。
1H NMR(D2O,400MHz)δ:1.66(brs,2H),1.81(brs,1H),2.10(brs,1H),2.80(brs,1H),3.06(brs,2H),3.44-3.51(m,2H),5.25-5.40(m,2H),6.75(s,1H),7.12(d,2H),7.38-7.39(m,2H),7.41-7.43(m,2H),7.52(s,1H),7.58(t,1H),7.70(d,1H)。
实施例12 R-1-(3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-6-(3-苯脲基)-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2基)哌啶-3-基氨基甲酸（化合物-12）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）R-1-(3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-6-(3-苯脲基)-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸（化合物-12）的制备
操作同实施例6，所不同的是在搅拌下滴加的是异氰酸苯酯（36mg,0.3mmol），最后得泡沫状固体16mg(收率17%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=483.22。
1H NMR(D2O,400MHz)δ:1.59(brs,3H),2.15(brs,1H),3.08-3.27(m,2H),3.67-3.72(m,1H),5.29-5.59(m,2H),7.33-7.48(m,5H),7.50-7.54(m,3H),7.63-67(m,2H),7.79-7.83(m,1H)。
实施例13 (R)-N-(（2-(3-氨基哌啶-1-基)-6-(苄胺)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基）苯甲腈（化合物-13）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）(R)-N-(（2-(3-氨基哌啶-1-基)-6-(苄胺)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基）苯甲腈（化合物-13）的制备
将(R)-叔丁基1-(6-氨基-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式Ⅱ-1，116mg,0.25mmol）溶于干燥的甲醇(5mL)中，加入无水氯化锌（21mg，0.15mmol）和苯甲醛（27mg，0.25mmol），搅拌反应0.5h。加入氰基硼氰化钠（24mg，0.375mmol）。反应完毕后直接旋干柱层析（二氯甲烷:甲醇=150：1）。将中间体溶于干燥的二氯甲烷(6mL)中，加入2mL三氟乙酸，在室温下反应，TLC检测。反应完全后旋干，加入少量乙醚，析出固体，过滤，得淡黄色固体。该固体悬浮在10mL二氯甲烷中，加入饱和NaHCO3溶液，搅拌10min，分液有机相干燥旋干，得泡沫状固体(29mg,收率26.1%)。Ms(ESI)[M+1]=454.23。
1HNMR(CD3OD)δ:1.72-1.78(m,2H),1.88-1.89（m,1H),2.11-2.15(m,1H),2.98-2.99(m,1H),3.16-3.20（m,1H),3.56-3.59(m,1H),4.59(s,2H),5.37-5.53(q,2H),6.86(s,1H),7.33-7.40(m,3H),7.41-7.53(m,3H),7.70(t,1H),7.80(d,1H)。
实施例14 (R)-2-(3氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-(N-甲基-N-甲磺酰基氨基)吡咯[1,2f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-14）的制备
步骤（1）～（9）同实施例1。
（10）(R)-2-(3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-(N-甲基-N-甲磺酰基氨基)吡咯[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-14）的制备
将(R)-叔丁基1-(6-氨基-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式Ⅱ-1，463mg，1.0mmol）溶于干燥的二氯甲烷(30mL)中，加入吡啶（158mg，2.0mmol），在搅拌下滴加甲基磺酰氯（171mg，1.5mmol）。加毕后在室温下反应4h。反应液直接旋干柱层析纯化(二氯甲烷:甲醇=200:1)，得到中间体(342mg，收率63%)。取该中间体(210mg，0.14mmol)溶于15ml MeCN中，依次加入碳酸铯(241mg，0.74mmol)、碘甲烷(80mg,0.56mmol)，室温搅拌3h，加水，CH2Cl2萃取，干燥，浓缩，得到中间体。将中间体溶于5ml CH2Cl2中，加入2ml三氟乙酸，室温搅拌3h。浓缩至干，加入5ml乙醚搅拌30min，抽滤，得固体化合物。该固体悬浮在10mL二氯甲烷中，加入饱和NaHCO3溶液，搅拌10min，分液有机相干燥旋干，得泡沫状固体(51mg,收率80%)。
Ms(ESI)[M+1]=456.17[M+1]。
1HNMR(CD3OD,300M):1.60(m,2H),1.71(m,1H),2.15(m,1H),3.00(s,3H),3.16(m,2H),3.28(s,3H),3.56(m,4H),5.40(q,2H),6.96(d,1H),7.39(d,1H),7.48(t,1H),7.57(d,1H),7.64(t,1H),7.77(d,1H).
实施例15 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-对甲苯基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物15）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-对甲苯基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物15）的制备
将(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8a，436mg,0.827mmol)溶于DMF:H2O10:1的混合溶液(5mL)中，加入对甲基苯硼酸(135mg，0.993mmol)、PdCl2(dppf)(20mg,0.02mmol)、碳酸钾(228mg，1.65mmol)，置换氮气保护，升温至100°C反应过夜，TLC检测反应完全。旋除DMF，加入水，乙酸乙酯，萃取分液，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，旋干，用石油醚:乙酸乙酯=3:1进行柱层析，得到白色泡状中间体。将该中间体溶于5mlCH2Cl2中,加入2ml TFA(三氟乙酸)，室温搅拌3h。浓缩至干，加入5ml乙醚搅拌30min，抽滤，得固体化合物。该固体悬浮在二氯甲烷(10mL)中，加入饱和NaHCO3溶液，搅拌10min，分液有机相干燥旋干，得泡沫状固体(79mg，收率22%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=439.22。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.45-1.51(m,2H),1.54-1.61(s,1H),1.791-1.797(s,1H),2.29-2.46(s,3H),2.77-2.78(s,1H),2.95(s,1H),3.07(s,1H),3.41-3.43(d,2H),5.24-5.40(dd,2H),7.16-7.18(d,2H),7.224-7.228(d,1H),7.29-7.32(d,1H),7.44-7.48(t,1H),7.60-7.66(m,3H),7.83-7.85(d,1H),8.01-8.03(s,1H),8.05-8.055(s,1H)。
实施例16 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-（3-吡啶）吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物16）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-（3-吡啶）吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物16）的制备
操作同实施例15，所不同的是，实施例15中加入的是对甲基苯硼酸，而本实施例中加入的是吡啶-3硼酸(122mg,0.993mmol)，最后得到泡沫状固体109mg(收率31%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=426.20。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.53-1.61(m,2H),1.81-1.82(s,1H),1.97-1.98(s,1H),2.79-2.80(s,1H),2.96(s,1H),3.07-3.11(s,1H),3.39-3.40(d,1H),3.406-3.458(m,2H),5.24-5.40(dd,2H),7.33-7.35(d,1H),7.40-7.406(d,1H),7.44-7.48(t,1H),7.62-7.63(t,1H),7.64-7.66(t,2H),7.71-7.72(d,1H),7.83-7.84(d,2H),7.84(s,1H),8.55-8.56(d,1H)。
实施例17 (R)-2-(3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-17）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）(R)-2-(3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物17）的制备
将(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8a，100mg，0.19mmol)、苯亚磺酸钠(47mg，0.285mmol，1.5eq)、碘化亚铜(36mg，0.19mmol，1eq)、L-脯氨酸(22mg，0.19mmol，1eq)、碳酸钾(26mg，0.19mmol，1eq)依次加入到DMSO（二甲基亚砜）中，加热到80°C反应过夜，反应完毕，加入乙酸乙酯分液，有机相依次用水、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析（二氯甲烷：甲醇=150:1）得淡黄色泡沫状中间体。将该中间体溶于5mlCH2Cl2中，加入2ml TFA，室温搅拌3h。浓缩至干，加入5ml乙醚搅拌30min，抽滤，得固体化合物。该固体悬浮在10mL二氯甲烷中，加入饱和NaHCO3溶液，搅拌10min，分液，有机相干燥旋干，得泡沫状固体(34mg，收率36.8%)。
Ms(ESI)[M+1]=489.16。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ：1.53(br,3H),1.74(br,2H),1.94(br,1H),2.81(br,1H),3.00(br,2H),3.41(m,2H),5.15-5.32(q,2H),7.16(d,1H),7.34(d,1H),7.45(t,1H),7.57-7.67(m,4H),7.76(d,1H),7.96(d,2H),8.18(d,1H).
实施例18 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-甲砜基吡咯并[1,2f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-18）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-甲砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-18）的制备
操作同实施例17中的步骤（9），所不同的是将苯亚磺酸钠替换为甲基亚磺酸钠(29mg,0.285mmol,1.5eq)，最后得泡沫状固体38mg(收率47%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=427.15。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.72-1.78(m,3H),2.03-2.07(m,1H),2.87(s,3H),3.04-3.08(m,1H),3.25-3.29(m,2H),3.31(br,2H),4.11-4.15(m,2H),5.35-5.38(m,2H),6.62(s,1H),6.91(s,1H),7.52-7.55(m,1H),7.61-7.66(m,2H),7.84-7.87(m,1H)。
实施例19 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-环丙砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-19）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-环丙砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)酮（化合物-19）的制备
操作同实施例17中的步骤（9），所不同的是将苯亚磺酸钠替换为环丙基基亚磺酸钠(37mg，0.285mmol，1.5eq)，最后得到泡沫状固体27mg(收率32%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=453.16。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.08-1.13(m,4H),1.61-1.65(m,2H),1.86-1.87(m,1H),2.14-2.17(m,1H),2.71-2.74(m,1H),3.00(brs,3H),3.55-3.58(m,2H),4.2(m,2H),5.3(m,2H),6.62(s,1H),6.90(s,1H),7.52-7.54(m,1H),7.61-7.66(m,2H),7.82-7.85(m,1H)。
实施例20 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对氟苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-20）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对氟苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-20）的制备
操作同实施例17中的步骤（9），所不同的是将苯亚磺酸钠替换为对氟苯亚磺酸钠(52mg，0.285mmol，1.5eq)，最后得泡沫状固体24mg（收率29%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=443.19。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.40-1.64(br,2H),1.75-1.84(br,1H),1.93-2.02(br,1H),2.73-2.83(br,1H),2.89-3.01(br,1H),3.04-3.12(br,1H),3.30(brs,4H),5.24-5.41(q,2H),7.20(t,2H),7.26(d,1H),7.32(d,1H),7.46(td,1H),7.63(t,1H),7.75-7.79(m,1H)，7.83-7.85(dd,2H),8.09(d,1H)。
实施例21 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对甲苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-21）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对甲苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-21）的制备
操作同实施例17中的步骤（9），所不同的是将苯亚磺酸钠替换为对甲苯亚磺酸钠(51mg，0.285mmol，1.5eq)，最后得泡沫状固体40mg(收率42%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=503.18。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.49-1.57(br,2H),1.75(br,1H),1.92-1.96(br,1H),2.36(s,3H),2.73-2.83(br,1H),2.89-3.01(br,1H),3.04-3.12(br,1H),3.30-3.32(br,4H),5.18-5.34(q,2H),7.15(d,1H),7.35-7.46(m,2H),7.58-7.62(td,1H),7.80-7.82(dd,1H),7.86-7.88(d,2H),8.01(br,2H),8.22(d,1H)。
实施例22 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对氰基苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-22）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对氰基苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-22）的制备
操作同实施例17中的步骤（9），所不同的是将苯亚磺酸钠替换为对氰基苯亚磺酸钠(54mg，0.285mmol，1.5eq)，最后得泡沫状固体26mg（收率27%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=513.57。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.40-1.64(br,2H),1.75-1.84(br,1H),1.93-2.02(br,1H),2.73-2.83(br,1H),2.89-3.01(br,1H),3.04-3.12(br,1H),2.89-3.32(br,4H),5.24-5.41(q,2H),7.20(t,2H),7.26(d,1H),7.32(d,1H),7.46(td,1H),7.63(t,1H),7.75-7.79(m,2H)，7.83-7.85(dd,1H),8.09(d,1H)。
实施例23 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对甲氧苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-23）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对甲氧苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-23）的制备
操作同实施例17中的步骤（9），所不同的是将苯亚磺酸钠替换为对甲氧基苯亚磺酸钠(55mg，0.285mmol，1.5eq)，最后得泡沫状固体31mg（收率32%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=519.17。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.46-1.57(br,2H),1.76(br,1H),1.96-1.98(br,1H),2.74(br,1H),2.90(br,1H),3.31(br,3H),3.42(d,2H),3.82(s,3H),5.18-5.34(q,2H),7.07-7.14(m,3H),7.36(d,1H),7.44(td,1H),7.60(td,1H),7.81(dd,1H),7.90-8.00(m,2H),8.20(d,1H)。
实施例24 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-（3,4二甲基）苯砜基吡咯并[1,2f][1,2,4]三嗪4(3H)-酮（化合物-24）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-（3,4-二甲基）苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-24）的制备
操作同实施例17中的步骤（9），所不同的是将苯亚磺酸钠替换为3,4二甲基苯亚磺酸钠(55mg，0.285mmol，1.5eq)，最后得泡沫状固体42mg（收率43%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=517.19。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.53-1.56(br,1H),1.65-1.71(br,1H),1.86(br,1H),1.97(br,1H),2.27(d,6H),2.89-2.97(br,1H),3.24-3.28(br,1H),5.18-5.33(q,2H),7.15(d,1H),7.34-7.37(m,2H),7.46(t,1H),7.60(t,1H),7.68(dd,1H),7.77(d,1H),7.80(d,1H),8.20(d,1H)。
实施例25 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-（3-吡啶）砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-25）的制备
步骤（1）～（8）同实施例1。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-（3-吡啶）砜基吡咯并[1，2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-25）的制备
操作同实施例17中的步骤（9），所不同的是将苯亚磺酸钠替换为吡啶-3-亚磺酸钠(47mg，0.285mmol，1.5eq)，最后得泡沫状固体33mg（收率35%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=490.16。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.47-1.57(br,2H),1.75-1.78(br,1H),1.94-1.96(br,1H),2.76(br,1H),2.92(br,1H),3.04(br,1H),3.30-3.43(br,4H),5.18-5.34(q,2H),7.31(d,1H),7.37(d,1H),7.42-7.46(td,1H),7.58-7.60(dd,1H),7.62-7.66(m,1H),7.80-7.82(dd,1H),8.02-8.06(br,1H),8.34(dd,1H),8.38-8.41(m,1H),8.82-8.84(dd,1H),9.16(t,1H)。
实施例26 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氟苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-26）的制备
步骤（1）～（5）同实施例1。
步骤（6）～（8）操作同实施例1，所不同的是，用2-氰基-5-氟苄溴（2.14g，10mmol）代替邻氰基苄溴，制备得到式I-6b化合物（2.45g,64.3%）、式I-7b化合物（1.95g,87.8%）、式I-8b化合物（1.87g,88.2%）。
（9）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氟苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-26）的制备
将(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(4-氟-2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8b，109mg，0.2mmol)、苯亚磺酸钠(49mg，0.3mmol，1.5eq)、碘化亚铜(38mg，0.2mmol，1eq)、L-脯氨酸(23mg,0.2mmol,1eq)、碳酸钾(28mg,0.2mmol,1eq)依次加入到DMSO中，加热到80°C反应过夜，反应完毕，加入乙酸乙酯分液，有机相依次用水、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析得淡黄色泡沫状中间体。将中间体溶于5ml CH2Cl2中，加入2ml TFA，室温搅拌3h。浓缩至干，加入5ml乙醚搅拌30min，抽滤，得固体化合物。该固体悬浮在10mL二氯甲烷中，加入饱和NaHCO3溶液，搅拌10min，分液有机相干燥旋干，得泡沫状固体(41mg,41%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=507.15。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.57-1.60(m,1H),1.76-1.84(m,2H),2.11-2.16(m,1H),2.89-2.91(m,1H),3.05-3.14(m,2H),3.55(s,1H),3.56-3.58(m,1H),5.20-5.31(q,2H),7.18(d,1H),7.36(d,1H),7.47(t,1H),7.58-7.66(m,3H),7.74(d,1H),7.97(d,2H),8.20(d,1H)。
实施例27 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氟苯甲基)-6-对甲苯砜基吡咯并[1,2f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-27）的制备
操作同实施例26，所不同的是，步骤（9）制备化合物-27时，用对甲苯亚磺酸钠(53mg,0.3mmol,1.5eq)代替实施例26中的苯亚磺酸钠，最后得泡沫状固体39mg(收率38%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=521.17。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.50-1.57(br,2H),1.77(br,1H),1.93-1.97(br,1H),2.39(s,3H),2.74-2.85(br,1H),2.92-3.03(br,1H),3.05-3.13(br,1H),3.30-3.33(br,4H),5.20-5.33(q,2H),7.16(d,1H),7.37-7.48(m,1H),7.58-7.62(td,1H),7.80-7.83(dd,1H),7.86-7.88(d,2H),8.03(br,2H),8.21(d,1H)。
实施例28 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氯苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-28）的制备
步骤（1）～（5）同实施例1。
步骤（6）～（8）的操作同实施例1，所不同的是，用2-氰基-5-氯苄溴（1.15g,5mmol）代替邻氰基苄溴，制备得到式I-6c化合物（1.38g,68.0%）、式I-7c化合物（1.05g,87.7%）、式I-8c化合物（1.04g,92.8%）。
步骤（9）化合物-28的制备方法同实施例26，所不同的是用(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(4-氯-2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯(式I-8c，112mg，0.2mmol)代替式I-8b化合物，最后得泡沫状固体37mg(收率35%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=523.12。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.51-1.59(br,2H),1.80(br,1H),1.82(br,2H),1.98(br,1H),2.83(br,1H),3.07(br,2H),3.41(m,2H),5.23-5.31(q,2H),7.17(d,1H),7.38(d,1H),7.45(t,1H),7.60-7.66(m,3H),7.77(d,1H),7.80(d,2H),8.22(d,1H)。
实施例29 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-甲基苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-29）的制备
步骤（1）～（5）同实施例1。
步骤（6）～（8）的操作同实施例1，所不同的是，用2-氰基-5-甲基苄溴（1.05g,5mmol）代替邻氰基苄溴，制备得到式I-6d化合物（1.16g,61.8%）、式I-7d化合物（0.94g,85.0%）、式I-8d化合物（0.89g,82.4%）。
步骤（9）化合物-29的制备方法同实施例26，所不同的是用(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(4-甲基-2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8d，108mg,0.2mmol)代替式I-8b化合物，最后得泡沫状固体40mg（收率40%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=503.18。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.48-1.56(br,2H),1.78(br,1H),1.93-1.97(br,1H),2.21(s,3H),2.77-2.85(br,1H),2.97-3.05(br,1H),3.07-3.13(br,1H),3.31-3.35(br,4H),5.20-5.33(q,2H),7.17(d,1H),7.37-7.48(m,1H),7.57-7.62(td,1H),7.81-7.84(dd,1H),7.86-7.88(d,2H),8.05(br,2H),8.20(d,1H)。
实施例30 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氰基苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-30）的制备
步骤（1）～（5）同实施例1。
步骤（6）～（8）的操作同实施例1，所不同的是，用2、5-二氰基苄溴（1.10g,5mmol）代替邻氰基苄溴，制备得到式I-6e化合物（0.98g,50.7%）、式I-7e化合物（0.96g,84.9%）、式I-8e化合物（0.96g,87.7%）。
步骤（9）化合物-30的制备方法同实施例26，所不同的是用(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(1,4-二氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8e，110mg，0.2mmol)代替式I-8b化合物，最后得泡沫状固体(30mg,29%)。Ms(ESI)m/z[M+1]=514.16。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.48-1.57(br,2H),1.79(br,1H),1.82(br,2H),2.00(br,1H),2.81(br,1H),3.08(br,2H),3.42(m,2H),5.24-5.31(q,2H),7.20(d,1H),7.38(d,1H),7.46(t,1H),7.61-7.66(m,3H),7.78(d,1H),7.82(d,2H),8.19(d,1H)。
实施例31 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(5-氟苯甲基)-6-对氟苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-31）的制备
步骤（1）～（5）同实施例1。
步骤（6）～（8）的操作同实施例1，所不同的是，用3-氟苄溴（0.95g,5mmol）代替邻氰基苄溴，制备得到式I-6f化合物（1.02g,57.3%）、式I-7f化合物（0.75g,89.2%）、式I-8f化合物（0.72g,86.5%）。
步骤（9）化合物-31的制备方法同实施例26，所不同的是用(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(3-氟苄基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯(式I-8f，104mg，0.2mmol)代替式I-8b化合物，最后得泡沫状固体(34mg,35%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=482.16。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.44-1.64(br,2H),1.76-1.78(br,1H),1.80(br,2H),1.93(br,1H),2.81(br,1H),3.04(br,2H),3.40(m,2H),5.21-5.31(q,2H),7.16(d,1H),7.35(d,1H),7.45(t,1H),7.56-7.67(m,3H),7.77(d,1H),7.97(d,2H),8.18(d,1H)。
实施例32 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氯-5-氟苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-32）的制备
步骤（1）～（5）同实施例1。
步骤（6）～（8）的操作同实施例1，所不同的是，用2-氯-5-氟苄溴（1.11g,5mmol）代替邻氰基苄溴，制备得到式I-6g化合物（1.05g,53.8%）、式I-7g化合物（0.79g,87.0%）、式I-8g化合物（0.77g,86.9%）。
步骤（9）化合物-32的制备方法同实施例26，所不同的是用(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(2-氯-5-氟苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8g，111mg，0.2mmol）代替式I-8b化合物，最后得泡沫状固体32mg（收率31%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=516.12。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.47-1.54(br,2H),1.76(br,1H),1.80(br,2H),2.01(br,1H),2.80(br,1H),3.07(br,2H),3.43(m,2H),5.21-5.30(q,2H),7.21(d,1H),7.34(d,1H),7.47(t,1H),7.60-7.65(m,3H),7.79(d,1H),7.84(d,2H),8.22(d,1H)。
实施例33 2-((R)-3-氨基-3-甲基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-33）的制备
步骤（1）～（6）同实施例1。
步骤（7）～（8）的操作同实施例1，所不同的是，步骤（7）用(R)-3-氨基-3-甲基哌啶二三氟乙酸盐（684mg,2mmol）代替(R)-3-氨基哌啶二三氟乙酸盐，制备得到式I-7i化合物（820mg,89.3%），再进一步制备得到步骤（8）的式I-8i化合物（478mg,88.3%）。
步骤（9）化合物-33的制备方法同实施例26，所不同的是用(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)-3-甲基哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8h，108mg，0.2mmol）代替式I-8b化合物，最后得泡沫状固体38mg（收率38%)。Ms(ESI)m/z[M+1]=503.18。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.21(s,3H),1.54(br,3H),1.75(br,2H),1.96(br,1H),2.83(br,1H),3.01(br,2H),3.32(br,1H),3.42(m,2H),5.15-5.23(q,2H),7.16(d,1H),7.34(d,1H),7.45(t,1H),7.57-7.67(m,4H),7.76(d,1H),7.96(d,2H),8.18(d,1H)。
实施例34 2-((R)-3-氨基-3-甲基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氟苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-34）的制备
步骤（1）～（6）同实施例26。
步骤（7）～（9）的操作同实施例26，所不同的是，步骤（7）用(R)-3-氨基-3-甲基哌啶二三氟乙酸盐（684mg,2mmol）代替(R)-3-氨基哌啶二三氟乙酸盐，制备得到式I-7i化合物（825mg,89.8%），再进一步制备得到步骤（8）的式I-8i化合物（454mg,81.2%）。步骤（9）用(R)-叔丁基1-(6-溴-3-(4-氟-2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2-基)-3-甲基哌啶-3-基氨基甲酸酯（式I-8i，118mg，0.2mmol）代替式I-8b化合物，最后得到泡沫状固体（即化合物-34）28mg（收率27%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=521.17。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.22(s,3H),1.55(br,3H),1.74(br,2H),1.95(br,1H),2.82(br,1H),3.00(br,2H),3.33(br,1H),3.44(m,2H),5.14-5.22(q,2H),7.17(d,1H),7.34(d,1H),7.47(t,1H),7.60-7.69(m,3H),7.75(d,1H),7.95(d,2H),8.15(d,1H)。
实施例35 N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-4-甲基苯磺酰胺甲烷磺酸盐（化合物-35）的制备
步骤（1）～（10）同实施例1。
（11）N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-4-甲基苯磺酰胺甲烷磺酸盐（化合物-35）的制备
将N-(2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-4-羰基-3,4-二氢吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-基)-4-甲基苯磺酰胺（化合物-1，51.7mg，0.1mmol）溶于5mL乙醇中，冰浴下加入甲磺酸（16.6mg，0.11mmol）的乙醇溶液(1mL)，然后反应1h，旋干，乙醇:水=5:1重结晶，得白色固体(19mg,32%)。熔点：182-184℃。Ms(ESI)[M+1]=518.19。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ：1.71(brs,2H),1.86(brs,1H),2.14(brs,4H),2.90(brs,1H),3.09(brs,2H),3.53-3.56(m,2H),5.226-5.39(q,2H),6.59(d,1H),6.99(d,2H),7.26(d,1H),7.35(d,1H),7.48-7.55(m,4H),7.63(d,1H)。
实施例36 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-（3-吡啶）吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈苯甲酸盐（化合物-36）的制备
步骤（1）～（9）同实施例16。
（10）2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-（3-吡啶）吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪3(4H)-基)甲基)苯甲腈苯甲酸盐（化合物-36）的制备
将2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-（3-吡啶）吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈(化合物-16，42.5mg，0.1mmol）溶于5mL乙醇中，冰浴下加入苯甲酸（13.4mg，0.11mmol）的乙醇溶液(1mL)，然后反应1h，旋干，乙醇:水=4:1重结晶，得白色固体(22mg,40%)。熔点：195-197℃。Ms(ESI)m/z[M+1]=426.20。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.52-1.60(m,2H),1.80-1.81(s,1H),1.96-1.98(s,1H),2.77-2.80(s,1H),2.98(s,1H),3.07-3.12(s,1H),3.40-3.41(d,1H),3.41-3.45(m,2H),5.25-5.40(dd,2H),7.34-7.35(d,1H),7.41-7.42(d,1H),7.44-7.48(m,3H),7.61-7.63(m,2H),7.64-7.65(t,2H),7.70-7.72(d,1H),7.83-7.84(d,2H),7.85(s,1H),7.13-7.15(m,2H),8.54-8.55(d,1H).
实施例37 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-对甲砜苯基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈盐酸盐（化合物-37）的制备
步骤（1）～（9）同实施例21。
（10）2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-6-对甲砜苯基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈盐酸盐（化合物-37）的制备
将2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-6-对甲苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)酮(化合物-21，50.2mg，0.1mmol）溶于的5mL乙醇中，冰浴下加入的盐酸乙醇溶液(1mL，大约1M)，然后反应1h，旋干，乙醇:水=8:1重结晶，得白色固体(16mg,30%)。熔点：157-159℃。Ms(ESI)m/z[M+1]=503.18。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.46-1.57(br,2H),1.75(br,1H),1.93-1.96(br,1H),2.65-3.08(br,3H),3.30(br,2H),5.18-5.34(q,2H),7.22(d,1H),7.37(d,2H),7.45(td,1H),7.60(td,1H),7.68(dt,2H),7.81(dd,2H),8.29(d,1H)。
实施例38 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氟苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮磷酸盐（化合物-38）的制备
步骤（1）～（9）同实施例26。
（10）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氟苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮磷酸盐（化合物-38）的制备
将2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基-5-氟苯甲基)-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-26，50.6mg，0.1mmol）溶于的5mL乙醇中，冰浴下加入磷酸（12.9mg，0.11mmol）的乙醇溶液(1mL)，然后反应1h，旋干，乙醇:水=5:1重结晶，得白色固体(19mg,32%)。熔点：169-171℃。Ms(ESI)m/z[M+1]=407.15。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.58-1.61(m,1H),1.74-1.84(m,2H),2.10-2.14(m,1H),2.89-2.90(m,1H),3.05-3.16(m,2H),3.54(s,1H),3.57-3.59(m,1H),5.30-5.41(q,2H),7.17-7.18(d,1H),7.24-7.26(m,2H),7.36-7.38(d,2H),7.75-7.79(m,2H),7.82-7.84(d,2H),7.91-7.92(d,1H)。
实施例39 2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-5-甲基-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-39）的制备
除起始原料不同外，步骤（1）～（6）的操作方法与实施例1相同。起始原料3-甲基-4-苯砜基-吡咯-2羧酸甲酯可按照参考文献（J.Org.Chem.,2008,73,8057-8068）的方法制备。
（7）2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-3-(2-氰基苯甲基)-5-甲基-6-苯砜基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮（化合物-39）的制备
将2-((3-甲基-4-苯砜基-2-氯-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（式III-6）（438mg,1mmol）溶于干燥的DMF(10mL)中，加入(R)-3-氨基哌啶二三氟乙酸盐（0.61g，2mmol）和碳酸钾（414mg，3mmol），加热至120℃反应3h，反应结束后倒入水中，用乙酸乙酯萃取，有机层干燥，过滤，浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇=100:1)。得泡沫状固体(210mg,42%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=502.18。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ：1.53(br,3H),1.74(br,2H),1.94(br,1H),2.04(s,3H),2.81(br,1H),3.00(br,2H),3.41(m,2H),5.15-5.32(q,2H),6.75(t,1H),7.57-7.67(m,5H),7.76(d,1H),7.96(d,2H),8.18(d,1H)。
实施例40 3-（2-氰基苄基）-2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-N,N,5-三甲基-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-6-甲酰胺（化合物-40）的制备
本实施例与实施例39操作方法相同，但起始原料不同。起始原料4-二甲氨基羰基-3-甲基吡咯-2羧酸甲酯可按照参考文献（J.Am.chem.Soc.,2005,127,9260-9266）的方法制备。化合物式IV-6的用量为370mg（1mmol），最后制备得到泡沫状固体（即化合物-40）186mg（收率43%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=434.22。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.73-1.77(m,3H),2.00-2.04(m,1H),2.09(s,3H),2.92(s,6H),3.02-3.07(m,1H),3.24-3.26(m,2H),3.30(br,2H),4.10-4.12(m,2H),5.32-5.37(m,2H),6.60(s,1H),7.50-7.54(m,1H),7.60-7.63(m,2H),7.81-7.86(m,1H)。
实施例41 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-6-甲氧基-5-甲基-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物-41）的制备
本实施例与实施例39操作方法相同，但起始原料不同。起始原料3-甲基-4-甲氧基-吡咯-2羧酸甲酯按照参考文献（J.Med.chem.,1998,41,802-820）的方法制备。式V-6化合物的用量为328mg（1mmol），最后得泡沫状固体（即化合物-41）153mg（收率39%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=393.20。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.41-1.65(br,2H),1.76-1.84(br,1H),1.95-2.03(br,1H),2.05(s,3H),2.75-2.84(br,1H),2.90-3.01(br,1H),3.06-3.16(br,1H),3.32(brs,2H),3.78(s,3H),5.25-5.42(q,2H),6.62(s,1H),7.48-7.52(m,1H),7.58-7.62(m,2H),7.80-7.85(m,1H)。
实施例42 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-6-乙基-5-甲基-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物-42）的制备
本实施例与实施例39操作方法相同，但起始原料不同。起始原料4-乙基-3-甲基-吡咯-2羧酸甲酯按照文献（Tetrahedron,1990,46,7587-7598）的方法制备。式VI-6化合物的用量为326mg（1mmol），最后制备得到泡沫状固体（即化合物-42）183mg（收率47%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=391.22。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.25(t,3H),1.40-1.59(br,2H),1.77-1.83(br,1H),1.96-2.03(br,1H),2.07(s,3H),2.48(q,2H),2.74-2.83(br,1H),2.90-3.00(br,1H),3.04-3.13(br,1H),3.30(brs,2H),5.24-5.40(q,2H),6.59(s,1H),7.47-7.50(m,1H),7.56-7.60(m,2H),7.78-7.84(m,1H)。
实施例43 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物-43）的制备
本实施例的步骤（1）～（3）的操作方法同实施例39中的步骤（5）～（7），但起始原料与实施例39中步骤（5）的原料不同。本实施例的起始原料2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪可按照参考文献（US2007/4731A1）的方法制备。步骤（3），制备化合物-43时，所用式VII-2化合物的量为284mg（1mmol），最后制备得到泡沫状固体（即化合物-43）156mg（收率45%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=349.17。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.46-1.55(m,2H),1.64-1.66(m,1H),1.89-1.93(m,2H),2.77(br,1H),2.94-2.97(br,2H),3.30-3.36(m,1H),5.15-5.32(q,2H),6.31(s,1H),6.41-6.44(q,1H),6.76-6.78(q,1H),7.18(d,1H),7.23-7.28(m,2H),7.44(td,1H)。
实施例44 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-7-甲基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物-44）的制备
本实施例与实施例39操作方法相同，但起始原料不同。起始原料5-甲基-吡咯-2羧酸甲酯可按照参考文献（J.Org.Chem.,1984,42,4203-4209）的方法制备。式VIII-6化合物的用量为298mg（1mmol），最后制备得到泡沫状固体（即化合物-44）101mg（收率28%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=363.19。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.23-1.28(m,2H),1.61-1.67(m,1H),1.72-1.78(m,1H),2.38(s,3H),2.65-2.69(t,1H),2.76-2.79(t,1H),2.97-2.99(m,2H),3.15-3.18(m,1H),5.44(s,2H),6.28-6.29(dd,1H),6.96-6.98(d,1H),7.13-7.15(d,1H),7.32-7.36(t,1H),7.48-7.52(t,1H),7.65-7.67(d,1H)。
实施例45 2-((2-((R)-3-氨基哌啶-1-基)-7-氯-6-乙基-4-羰基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物-45）的制备
（1）5-氯-4-乙基1H-吡咯-2-羧酸甲酯（式IX-1）的制备
将4-乙基-吡咯-2羧酸甲酯（7.65g,0.05mol，制备方法参照文献TetradedronLett.,2010,51,4150-4152）溶于100mL DMF中，冰浴下加入N-氯代丁二酰亚胺（6.67g，0.05mol)。完毕后室温反应过夜。然后加入水和乙酸乙酯，分液，有机层依次用饱和的硫代硫酸钠溶液和饱和食盐水溶液洗，分液，干燥，得产物(8.75g,93.2%)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ：1.23(t,3H),2.45(q,2H),3.79(s,3H),6.63(s,1H)。
步骤（2）～（8）的操作方法同实施例39中的步骤（1）～（7），式IX-7化合物的用量为347mg（1mmol），最后制备得到泡沫状固体（即化合物-45）143mg（收率35%)。
Ms(ESI)m/z[M+1]=411.16。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:1.24(t,3H),1.44-1.55(br,2H),1.76-1.80(br,1H),1.97-2.00(br,1H),2.49(q,2H),2.75-2.84(br,1H),2.92-3.00(br,1H),3.03-3.11(br,1H),3.28(brs,2H),5.23-5.39(q,2H),6.59(s,1H),6.81(s,1H),7.47-7.50(m,1H),7.56-7.60(m,2H)。
实施例46 2-((2-(-3-氨基哌啶-1-基)-4-羰基-吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（化合物-46）的制备
2-((2-氯-4-羰基-吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-3(4H)-基)甲基)苯甲腈（式VII-2）的制备方法参见实施例43。由式VII-2化合物制备化合物-46的方法同实施例39，其中，式VII-2化合物的用量为284mg（1mmol）。最后制备得到白色泡沫状化合物（即化合物-46）167mg（收率48%)。
Ms(ESI)[M+1]=349.17。
1HNMR(CD3OD,400MHz)δ：1.48-1.57(m,2H),1.64-1.66(m,1H),1.90-1.94(m,2H),2.77(br,1H),2.95-3.00(br,2H),3.30-3.36(m,1H),5.17-5.32(q,2H),6.33(s,1H),6.41-6.44(q,1H),6.77-6.79(q,1H),7.20(d,1H),7.23-7.28(m,2H),7.45(td,1H)。
实施例47:化合物的DPP-IV抑制活性
DPP-IV抑制活性测定可用常规方法进行。DPP-IV为应用杆状病毒表达系统表达并经纯化的纯酶，纯酶的Km,Kcat均与文献报道相符，表明表达纯化得到的DPP-IV纯酶在酶学性质上完全正常。反应体系在PH7.5的缓冲液(Hepes（4-羟乙基哌嗪乙硫磺酸），0.1mg/mlBSA（牛血清白蛋白）)中进行，酶反应底物为丙氨酸脯氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素(Ala-Pro-AMC)。
DPP-IV可降解底物Ala-Pro-AMC生成产物AMC，AMC被355nm的紫外光激发产生460nm的发射光。通过动态测量AMC在460nm处荧光值的上升的速度来测定DPP-IV的活性。
将受试化合物、酶和反应缓冲液混匀，在37℃预孵15min，加入底物启动反应，连续测定460nm荧光值5min。同时设置不加底物的空白对照组、以DMSO替代受试化合物的溶剂对照组、以及LAF-237[Bioorg.Med.Chem.Lett.,2005,15,4770-4773]为阳性对照组。所有反应终体积均为100μL。每个样品每个浓度设3个复孔。
首先计算酶初速度期内单位时间荧光强度的增量(单位：RFU/sec)，以此代表酶的初速度，然后计算样品各浓度组的活性百分数,公式如下：
其中，v样品表示样品各浓度组的初速度，vDMSO表示DMSO组的初速度。
以浓度的对数值对活性百分数作图，然后采用非线性回归算出拟和曲线，计算得到IC50值。
本发明代表性化合物的分子结构式及化合物的生物活性测试结果见下表2。
表2本发明代表性化合物对DPP-IV的抑制活性
由表2中的数据可以看出本发明的代表性化合物对DPP-IV的抑制活性明显强于西格列汀，尤其化合物-1、化合物-17、化合物-21、化合物-26和化合物-27的DPP-IV抑制活性比西格列汀强4倍以上，因此，本发明化合物相对于现有药物具有更优的生物活性。
实施例48化合物-21和化合物-26大鼠体内药代动力学实验
一、实验方法：
健康SD大鼠12只，雄性，体重200-220g，随机分成3组（每组4只），具体安排如下：
试验前禁食12h，自由饮水。给药后2h统一进食。
采血时间点及样品处理：给药后0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，7.0，9.0和24h经大鼠眼球后静脉丛取静脉血0.3ml，置肝素化试管中，3000rpm离心10min，分离血浆，于–20°C冰箱中冷冻。以液相色谱-串联质谱法测定血浆中的原形药物浓度。其中，
色谱条件为：
色谱柱为C18柱（50mm×4.6mm I.D.，1.8μm粒径），美国Agilent公司；C18保护柱（4×3.0mm I.D.），美国Agilent公司。流动相为含乙腈：含0.2%甲酸5mM醋酸铵水溶液(43:57，v/v)；柱温为室温；进样量为20μL；流速0.8mL/min。
质谱条件：
离子源为大气压化学离子源（APCI源）；正离子方式检测；干燥气温度350°C；干燥气流速6l/min；雾化气压力20psi；气化温度350°C；电晕电流4μA；毛细管电压4500V；扫描方式为多反应监测（MRM）。YF-236-350和YF-236-352的碰撞能量均为20V，毛细管出口碰撞电压分别为135V和160V；内标普罗帕酮的碰撞能量为15V，毛细管出口碰撞电压为110V。扫描时间分别为80ms。
二、实验结果
表3化合物-21和化合物-26大鼠灌胃给予10mg/kg后的药动学参数
化合物 Tmax(h) Cmax(ng/mL) AUC0-t(ngh/mL) t1/2(h)
化合物-21 4.67 298 3479 3.54
化合物-26 3.00 595 3440 2.80
西格列汀 0.72 497 1885 2.56
由表3所示，化合物-21和化合物-26在大鼠灌胃给予10mg/kg剂量下，比阳性对照药西格列汀有着更大的体内暴露量(AUC)和更长的体内半衰期(t1/2)。表明本发明化合物比现有上市药物具有更好的体内代谢特性。
实施例49 化合物-21和化合物-26对DPP-IV的选择性
近年来研究发现，人体内有一些和DPPIV活性和/或者结构类似的蛋白（DASH），包括DPP7、DPP8、DPP9和FAP等。临床前实验表明抑制这些DASH成员的活性将导致毒性甚至致死。因此，筛选具有高选择性、高效的DPPIV的抑制剂对于糖尿病的治疗具有重要价值。
应用昆虫表达系统，表达得到DPPIV、DPP7、DPP8、DPP9和FAP的重组蛋白。采用荧光底物7-氨基-4-甲基香豆素（AMC）检测此5种酶的活性。观察不同化合物对酶的活性抑制以评价化合物的抑制效果。采用的阳性参照药物是西格列汀。实验方法参照文献J.Med.Chem.2006,49,3520-3535所描述的方法。结果见表4和表5。
表4受试化合物及阳性对照物对五种二肽酶的IC50值（μM）
受试化合物 DPPIV DPP7 DPP8 DPP9 FAP
化合物-21 0.0039±0.07 164.05±9.34 24.49±2.29 78.08±6.80 15.05±0.00
化合物-26 0.0035±0.52 131.29±4.39 24.57±5.42 70.54±3.28 16.29±2.31
西格列汀 0.016±1.91 270.46±11.49 90.12±5.09 90.75±8.41 54.68±1.26
表5受试化合物及阳性对照物对二肽酶抑制活性的选择比
受试化合物 DPP8/DPPIV DPP8/DPPIV DPP9/DPPIV FAP/DPPIV
化合物-21 42068 6173 19677 3794
化合物-26 37513 6980 20039 4627
西格列汀 16904 5309 5344 3221
由表4和表5数据可以看出：化合物-21和-26对于DPP7、DPP8、DPP9和FAP的选择比均比阳性药物西格列汀高，表明本发明化合物比现有阳性对照药物具有更好的安全性，比现有药物更适用于治疗或预防与二肽基肽酶IV相关的疾病，如糖尿病等。
实施例50化合物-26的体内降糖活性实验
一、实验材料：
1．受试物（化合物-26）
性状：类白色粉末
配制方法：将称好的化合物-26加入适量无菌水中，涡旋10秒，超声2分钟，配成澄清溶液。
2．溶媒
名称：无菌水
生产单位：Millipore纯水系统
3．试剂
名称：血糖试纸
生产单位：罗氏
批号：470335
4．仪器
名称：血糖测试仪
生产单位：罗氏
型号：ACCU-Chek卓越型血糖检测仪
5．试验动物
种：小鼠
系：C57/BL6
性别和数量：雄性，40只
动物年龄：8周龄
动物体重范围：20-24g
动物来源：上海西普尔-必凯实验动物有限公司
动物合格证号：2008001612592
动物生产许可证号：SCXK（沪）2008-0016
二、实验方法
试验前一天下午5点将食物移走，空腹过夜，第二天上午九点测定空腹血糖，为-60分钟血糖，记录体重，按血糖和体重分组，每组10只小鼠。-30分钟给药，给药容积5mL/kg。灌胃给药后30分钟，测定血糖，为0分钟血糖，灌胃给葡萄糖，剂量为2g/kg。然后测定给糖后15、30、60和120分钟的血糖值。
试验结果见表6：
表6化合物-26对正常小鼠血糖曲线下面积的影响
t检验，与阴性对照组比较，**P＜0.01，***P＜0.001。AUC值以给糖前血糖水平下面积校正。
由表6可以看出，化合物-26对在3mg/kg剂量下单次灌胃给药对小鼠口服葡萄糖耐量有明显降低作用，其AUC与阴性对照组比较的降低百分率为36.6%；阳性对照药西格列汀在3mg/kg剂量下也有明显降糖作用，其AUC与阴性对照组比较的降低百分率为32.3%。表明本发明化合物比现有上市药物具有更强的体内降糖活性。

Claims (10)

1.一种通式I所示化合物或其光学异构体或药学上可接受的盐：
其中，
R1选自：氢，氰基，卤素；
R2选自：氢，氰基，卤素，C1-4烷基；
R3、R5分别选自：氢，卤素，C1-6烷基，C1-6烷氧基；
R6选自：氢，甲基；
R4选自：NR7R8，NR7COR8，NR7CO2R8，NCONR7R8，NR7SO2R8，氢，CO2R7，CONR7R8，OR7，SR7，SO2R7，C1-6烷基，C3-6环烷基；
R7、R8分别选自：氢，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C3-6环烷基，苯基C1-6烷基；
所述化合物不包括R1为氰基，R2、R3、R4、R5、R6均为氢的化合物。
2.如权利要求1所述的化合物或其光学异构体或药学上可接受的盐，其特征在于，所述R1为氰基，R2、R3、R5、R6为氢，所述R4为：
3.如权利要求1所述的化合物或其光学异构体或药学上可接受的盐，其特征在于，所述R1为氰基，R2、R6为氢，R3、R5为氢、甲基或卤素，R4为氢、甲氧基、乙基或二甲基甲酰胺基，R3、R4、R5不同时为氢。
4.一种通式I所示化合物或其光学异构体或药学上可接受的盐：
其中，R1为氢、氰基或卤素，R2为氢、甲基、氰基或卤素，R3、R5、R6为氢或甲基，R4为对甲苯砜基。
5.如权利要求4所述的化合物或其光学异构体或药学上可接受的盐，其特征在于，具有如下结构式：
6.一种化合物或其光学异构体或药学上可接受的盐，其特征在于，具有如下结构式：
7.权利要求1-6任何一项所述化合物或其光学异构体或药学上可接受的盐的用途，其特征在于，用于制备治疗或预防二肽基肽酶-IV相关疾病的药物。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述二肽基肽酶-IV相关疾病包括糖尿病。
9.一种通式Ⅱ所示化合物或其光学异构体：
其中，
R1选自：氢，氰基，卤素；
R2选自：氢，氰基，卤素，C1-4烷基；
R6选自：氢，甲基；
所述化合物不包括R1为氰基，R2、R6均为氢的化合物。
10.权利要求9所述化合物或其光学异构体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)0～50℃，在极性非质子性溶剂中，碱存在下，将4-溴-吡咯-2羧酸甲酯胺基化，得到1-氨基-4-溴-1H-吡咯-2-羧酸甲酯；
2)0～50℃，在极性溶剂中，步骤1)的产物和氯甲酸苄酯反应得到1-(苄氧基羰基氨基)-4-溴-1H-吡咯-2-羧酸甲酯；
3)60～120℃，氮源存在下，步骤2)的产物密闭反应得到6-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2,4(1H,3H)-二酮；
4)60～120℃，在非质子性溶剂中，有机碱存在下，步骤3)的产物经氯化得到6-溴-2,4-二氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪；
5)10～80℃，碱存在下，步骤4)的产物选择性水解，得到6-溴-2-氯吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮；
6)20～120℃，在极性非质子性溶剂中，无机碱存在下，步骤5)的产物和苄溴衍生物反应得到式Ⅰ-6化合物；式中，R1选自氢、氰基、卤素，R2选自氢、氰基、卤素、C1-4烷基；
7)20～150℃，在极性非质子溶剂中，无机碱存在下，式I-6化合物和R-3-氨基哌啶或其衍生物反应，得到式I-7化合物；式中，R1、R2的定义同上，R6为氢或甲基；
8)20～80℃，在非质子性溶剂中，有机碱存在下，式I-7化合物和二碳酸二叔丁酯反应，得到式Ⅱ化合物。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4634769A (en) * 1984-09-25 1987-01-06 Ortho Pharmaceutical Corporation Process for the preparation of 8-halo-5,6-dialkoxyquinazoline-2,4-diones and their salts
WO2009124259A1 (en) * 2008-04-04 2009-10-08 Cv Therapeutics, Inc. Pyrrolotriazinone derivatives for use as stearoyl coa desaturase inhibitors
CN101817833A (zh) * 2009-02-26 2010-09-01 中国科学院广州生物医药与健康研究院 Dpp-iv抑制剂

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4634769A (en) * 1984-09-25 1987-01-06 Ortho Pharmaceutical Corporation Process for the preparation of 8-halo-5,6-dialkoxyquinazoline-2,4-diones and their salts
WO2009124259A1 (en) * 2008-04-04 2009-10-08 Cv Therapeutics, Inc. Pyrrolotriazinone derivatives for use as stearoyl coa desaturase inhibitors
CN101817833A (zh) * 2009-02-26 2010-09-01 中国科学院广州生物医药与健康研究院 Dpp-iv抑制剂

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Discovery of alogliptin: a potent, selective, bioavailable, and efficacious inhibitor of dipeptidyl peptidase Ⅳ;Jun Feng, et al.;《J.Med.Chem》;20070419;第50卷;第2297-2300页 *

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