CN103831066A - Cm琼脂基层析微球制备技术 - Google Patents

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Abstract

一种CM琼脂基层析微球制备技术，具体包括如下步骤：(1)、将90℃6％琼脂溶液(含10％硫酸钙)加入已预热90℃的液体石蜡中，保温搅拌30min，自然降温至室温，并维持搅拌速度，继续搅拌15min，离心，异丙醇洗涤，制得的琼脂糖微球。(2)、将琼脂糖微球放入反应器中，加入异丙醇，加入环氧氯丙烷，搅拌2h，加入NaOH，搅拌2h，然后，加热，保温65℃12h，自然冷却至室温，将样品过滤，得环氧化交联琼脂糖微球。(3)、将环氧化交联琼脂糖微球放入反应器中，加入异丙醇，加入NaOH，搅拌2h，加入氯乙酸，加热，保温85℃10h，自然冷却至室温，将样品过滤，用EDTA、水和乙醇洗净，室温干燥，得CM琼脂基层析微球。

Description

CM琼脂基层析微球制备技术
技术领域
本发明涉及一种CM琼脂基层析微球制备技术。
背景技术
由于琼脂糖具有良好的亲水性和生物相容性，常规pH和温度范围内稳定，耐受强酸和强碱的清洗，且再生容易，琼脂糖是现今层析介质中应用得最为广泛的基质材料。目前，国内生产的琼脂糖基的层析介质，除了具体性能有待于考察和检验外，并没有形成规模，在市场上也没有表现出良好竞争能力，大多数研究单位和生产企业采用进口产品，但是国外商品介质价格昂贵，且逐年上涨，亟需要国产同等性能的产品来替代，因此，琼脂糖基高效层析介质的规模化制备对于促进我国生物下游技术的发展具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种CM琼脂基层析微球制备技术，利用乳化-冷却法制得了琼脂糖凝胶微球，在此基础上，利用交联、功能化制备出了具有良好分离性能的弱阳离子型CM琼脂基层析微球。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种CM琼脂基层析微球制备技术，具体包括如下步骤：
(1)、将90℃6％琼脂溶液(含10％硫酸钙)加入已预热90℃的液体石蜡中，保温搅拌30min，自然降温至室温，并维持搅拌速度，继续搅拌15min，离心，异丙醇洗涤，制得的琼脂糖微球。
(2)、将琼脂糖微球放入反应器中，加入异丙醇，加入环氧氯丙烷，搅拌2h，加入NaOH，搅拌2h，然后，加热，保温65℃12h，自然冷却至室温，将样品过滤，得环氧化交联琼脂糖微球。
(3)、将环氧化交联琼脂糖微球放入反应器中，加入异丙醇，加入NaOH，搅拌2h，加入氯乙酸，加热，保温85℃10h，自然冷却至室温，将样品过滤，用EDTA、水和乙醇洗净，室温干燥，得球型良好，粒径范围在50-150um之间的CM琼脂基层析微球。
具体实施方式
附图为本发明制备工艺流程图。
实施例
如制备工艺流程图所示的一种CM琼脂基层析微球制备技术，制备步骤如下：
(1).将90℃6％琼脂溶液(含10％硫酸钙)加入已预热90℃的液体石蜡中，保温搅拌30min，自然降温至室温，并维持搅拌速度，继续搅拌15min，离心，异丙醇洗涤，制得的琼脂糖微球。
(2)、将25mL琼脂糖微球放入反应器中，加入25ml异丙醇，加入5ml环氧氯丙烷，搅拌2h，加入2g NaOH，搅拌2h，然后，加热，保温65℃12h，自然冷却至室温，将样品过滤，得环氧化交联琼脂糖微球。
(3)、将环氧化交联琼脂糖微球放入反应器中，加入50ml异丙醇，加入8gNaOH，搅拌2h，加入8g氯乙酸，加热，保温85℃10h，自然冷却至室温，将样品过滤，用EDTA，水和乙醇洗净，室温干燥，得球型良好，粒径范围在50-150um之间的CM琼脂基层析微球。

Claims (1)

1.CM琼脂基层析微球制备技术，其特征在于：包括如下步骤：
(1)、将90℃6％琼脂溶液(含10％硫酸钙)加入已预热90℃的液体石蜡中，保温搅拌30min，自然降温至室温，并维持搅拌速度，继续搅拌15min，离心，异丙醇洗涤，制得的琼脂糖微球。
(2)、将琼脂糖微球放入反应器中，加入异丙醇，加入环氧氯丙烷，搅拌2h，加入NaOH，搅拌2h，然后，加热，保温65℃12h，自然冷却至室温，将样品过滤，得环氧化交联琼脂糖微球。
(3)、将环氧化交联琼脂糖微球放入反应器中，加入异丙醇，加入NaOH，搅拌2h，加入氯乙酸，加热，保温85℃10h，自然冷却至室温，将样品过滤，用EDTA、水和乙醇洗净，室温干燥，得球型良好，粒径范围在50-150um之间的CM琼脂基层析微球。
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Date Code Title Description
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PB01 Publication
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SE01 Entry into force of request for substantive examination
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Denomination of invention: Preparation Technology of CM Agar-based Chromatography Microspheres

Effective date of registration: 20230221

Granted publication date: 20151202

Pledgee: Postal Savings Bank of China Limited Yishui County sub branch

Pledgor: SHANDONG DINGXIN BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.

Registration number: Y2023980033046

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