CN103772262B

CN103772262B - 一种具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物及其应用

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Publication number: CN103772262B
Application number: CN201410062027.3A
Authority: CN
Inventors: 卢久富
Original assignee: Shaanxi University of Technology
Current assignee: Shaanxi University of Technology
Priority date: 2014-02-24
Filing date: 2014-02-24
Publication date: 2015-10-14
Anticipated expiration: 2034-02-24
Also published as: CN103772262A

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体的说是一种具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物及其应用。异邻苯二甲酰亚胺类化合物如通式（Ⅰ）、通式（I）化合物异构体或通式（I）化合物的盐；其中，R₁,R₂,R₃和R₄可相同或不同，选自氢，氰基，羟基，卤代烷基，烷氧基，烷氧基烷基，烷胺基，烷胺基烷基或R₅；X是S，O,NH或N-烷基；所述R₅为取代的羰基。本发明化合物的药理活性筛选结果显示其对MCF-7(人乳腺癌细胞)和HeLa(人宫颈癌细胞)有很好的抑制作用，具有良好的抗肿瘤方面开发应用前景。

Description

一种具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物及其应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体的说是一种具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物及其应用。

背景技术

肿瘤是困扰现代人健康的一大顽症，它发病率高、死亡率高、复发率高、治疗难。每年全世界约有700万人死于癌症，约占总死亡人数的四分之一。其中，乳腺癌和卵巢癌则是危害妇女健康的主要恶性肿瘤，全世界每年约有120万妇女发生乳腺癌。目前我国现有癌症患者死亡率逾30%，己成为我国居民死亡的第二大因素。药物治疗已成为对恶性肿瘤有效而又普遍使用的一种治疗方法。2010年全球抗肿瘤药物销售额约为600亿美元。临床上应用的抗肿瘤药物种类繁多，其中化疗药物主要有烷化剂铂络合物抗肿瘤药物、葱环类抗肿瘤药物、破坏DNA的抗生素等。此外，天然抗肿瘤药物的研究也占有相当大的比例，如目前临床上常用一些药物有喜树碱、长春新碱、紫杉醇等。然而，现有的抗肿瘤药物存在着选择性较差、毒副作用、耐药性等问题。寻找高效低毒的抗肿瘤药物仍是科学家面临的重要课题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物及其应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物，异邻苯二甲酰亚胺类化合物如通式（Ⅰ）、通式（I）化合物异构体或通式（I）化合物的盐；

其中，R₁,R₂,R₃和R₄可相同或不同，选自氢，氰基，羟基，卤代烷基，烷氧基，烷氧基烷基，烷胺基，烷胺基烷基或R₅；X是S，O,NH或N-烷基；

所述R₅为取代的羰基。

所述R₅为羟基，卤素，烷基，氨基，卤代烷基，烷硫基烷基，烷氧基烷基或嘧啶基取代或如下所示基团或被选自以下基团进一步取代的咪唑烷基，2-咪唑烷基，3-咪唑烷基，吡咯基，2H-吡咯基，2-吡咯啉基，吡咯烷基，三唑基，吡唑基，哌嗪基，哒嗪基，吡嗪基，三嗪基，吗啉基或硫代吗啉基；Y是S，O,NH或N-烷基。

卤代烷基是选自3～6饱和碳原子形成的环状饱和烃或具有1～6饱和碳原子形成的直链或支链饱和烃基,卤素为氟，氯，溴或碘的取代基。

所述异邻苯二甲酰亚胺类化合物为化合物（1）、化合物（2）、化合物（3）、化合物（4）、化合物（5）、化合物（6）、化合物（7）、化合物（8）、化合物（9）或化合物（10），具体结构式如下：

一种具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物的应用，所述的通式(I)化合物、其盐或异构体用于制备抗肿瘤的药物。

将通式(I)化合物、其盐或异构体中的一种或几种作为活性组分用于制备抗肿瘤组合物的应用。

所述的抗肿瘤组合物中的活性组分的重量百分含量为30-80%。

所述的抗肿瘤组合物为片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂或乳剂。

本发明所具有的优点：本发明获得的化合物，对肿瘤细胞株有很好的抑制作用，并将化合物与一种或多种药物载体或赋形剂制备成片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂或乳剂。

附图说明

图1为本发明实施例提供的化合物(1)H NMR图谱;

图2为本发明实施例提供的化合物(2)H NMR图谱;

图3为本发明实施例提供的化合物(3)H NMR图谱;

图4为本发明实施例提供的化合物(4)H NMR图谱;

图5为本发明实施例提供的化合物(5)H NMR图谱;

图6为本发明实施例提供的化合物(6)H NMR图谱;

图7为本发明实施例提供的化合物(7)H NMR图谱;

图8为本发明实施例提供的化合物(8)H NMR图谱;

图9为本发明实施例提供的化合物(9)H NMR图谱;

图10为本发明实施例提供的化合物(10)H NMR图谱.

具体实施方式

下列合成实施例、药理实施例、对比例结果可用来进一步说明本发明，但不意味着限制本发明，本发明中除另有注明外，所用原料均有市售。

具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物按照如下的合成路线制备而得。具体以取代的磺酰基化合物为起始原料，在LDA的强碱性条件下与醛基进行迈克尔加成反应，再经过次氯酸钠的氧化将醇氧化成对应的羰基化合物，再经氢化钠脱去磺酰基，在甲醇和钯/碳条件下还原硝基为对应的氨基化合物，同时，在缩合剂EDCI/DMAP条件下与取代的羧酸成酰胺，最后在碱性条件下，脱去单分子的苯甲酰基，最终得到目标产物。

合成路线I

本发明包括上述通式I所包含的化合物为活性成分配制成的制剂成分以及其制剂组成的配制。制剂制备方法为：将本发明所涵盖的化合物溶解到水溶性的有机溶剂、非离子性的表面活性剂、水溶性的类脂、各种环糊精、脂肪酸、脂肪酸酯、磷脂或其组合溶剂中而制得制剂溶液；加入生理盐水获1-20%的碳水化合物。所述有机溶剂包括聚乙二醇（PEG）,乙醇，丙二醇或这些溶剂的组合溶剂。

本发明所述通式I中所涵盖的化合物和前药用于制备治疗、预防或缓解抗肿瘤药物或药物制剂，药物活性成分为一种或两种以上通式I所示的化合物。尤其适用于治疗或缓解人体组织或器官肿瘤细胞引起的癌症。所指癌症优选结肠癌、肝癌、淋巴瘤、肺癌、食管癌、乳腺癌、中枢神经系统肿瘤、黑色素瘤、卵巢癌、宫颈癌、肾癌、白血病、前列腺癌、胰腺癌、膀胱癌、直肠癌或胃癌等。

本发明合成的化合物可用于抗肿瘤药物的活性成分，可以单独使用，也可以与其它抗肿瘤、抗病毒药物联合用药。本发明所指的联合用药治疗过程中，包括运用至少一种本发明化合物以及其活性衍生物与其他一种或多种抗肿瘤抗病毒药物一起使用以增加总体疗效。联合用药时的药量和给药时间应根据不同的情况下所取得的最合理治疗效果而定。

所涵盖的药剂配伍包括通式I中的化合物的有效剂量。此处的“有效剂量”指的是对于所治疗对象能产生治疗效果所需要该化合物的用量。该有效剂量或剂量可以由有经验者根据不同情况的建议而不同。比如，所治疗的肿瘤种类不同，药物的用法不同；是否与其它的治疗方法如其他抗肿瘤药物或抗病毒药物共用等，剂量均可发生改变。可以制成任何可使用的制剂剂型。如果某些具有碱性或酸性化合物并可形成无毒性的酸或盐，可以使用该化合物的盐的形式。药学中可使用的有机酸盐包括生理上可使用的负离子盐，如对甲基苯磺酸盐、甲基磺酸盐、乙酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、抗坏血酸盐或甘油磷酸盐等；可使用的无机盐包括氯化物、溴化物、氟化物、碘化物、硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐、碳酸盐或磷酸盐等；如有像胺这样的碱性的化合物与合适的酸可以制成所述的盐的形式；羧酸类的化合物可以与碱金属或碱土金属形成可使用的盐。

本发明中通式I中涵盖的化合物一般易溶解到有机溶剂、水溶性溶剂以及有机溶剂和水溶性溶剂与水的混合溶剂中。水溶性溶剂优选醇、多聚乙二醇、N-甲基-2-吡咯啉酮、N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、乙腈以及其合用。所述的醇优选甲醇，乙醇，异丙醇，丙三醇或乙二醇。本发明化合物可以与常用的制剂载体混合而制成制剂。化合物溶解到水溶性的有机溶剂、非质子性溶剂、水溶性类脂、环糊精、脂肪酸、磷脂中或这些溶剂的混合溶剂中而制得药物溶液；再加入生理盐水获1-20%的碳水化合物，如葡萄糖的水溶液。由此而制得的制剂稳定并用于动物和临床。

以上述通式I中化合物为活性成分制备成的产品药物，可以通过口服或非肠道途径给药，也可通过体内移植药物泵以及其他方法给药，此处所指的非肠道途径给药是指皮下皮内、肌肉内、静脉内、动脉内、心房内、滑膜内、胸骨内、鞘内、创伤部位内、颅内注射或滴注技术等。由技术人员运用常规的方法配比，混合最终成为所需要的药物剂型。可以是片剂、丸剂、胶囊、冲剂、糖浆、注射液、冻干粉针剂型、乳剂、粉剂、冻干粉、滴丸、乳悬液、水悬溶液、水溶液、胶体、胶体溶液、缓释制剂、纳米制剂或以其他形式的剂型用于动物或临床。

本发明通式I中的化合物用于治疗或缓解某一组织或器官的癌症药物的制备。所指癌症包括但不只限于结肠癌、肝癌、淋巴瘤、肺癌、食管癌、乳腺癌、中枢神经系统肿瘤、黑色素瘤、卵巢癌、宫颈癌、肾癌、白血病、前列腺癌、胰腺癌、膀胱癌、直肠癌或胃癌等。

实施例1：化合物(1)的合成

将二异丙基胺1.88g(18.43mmol,2.00equiv)用10mL四氢呋喃溶解在100mL圆底烧瓶中，然后氮气保护，-70oC下滴加正丁基锂7.4mL(2.00equiv)，滴加时间约10min，并继续搅拌2h在-70^～0oC，然后滴加用10mL四氢呋喃溶解的1-(苯磺基)-6-(三氟甲基)-1H-吲哚3.0g(9.23mmol,1.00equiv)，滴加时间约为20min,继续搅拌1h,再滴加用10mL四氢呋喃溶解的5-氟-2-硝基苯甲醛2.19g(12.96mmol,1.40equiv)，继续搅拌1h,然后自然升至室温反应过夜，加入氯化铵水溶液猝灭，反应毕，用乙酸乙酯100mL×3洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩有机相，最后采用硅胶柱色谱分离方式进行提纯，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯(1:10-1:5)，得浅棕色油状物(5-氟-2-硝基苯基)(1-(苯磺基)-6-(三氟甲基)-1H-吲哚-2)甲醇3.7g，产率81%，(ES,m/z):495.2[M+H]⁺¹，497.2[M+H+2]⁺¹。

将上述油状物300mg(0.61mmol,1.00equiv)用10mL二氯甲烷溶解在100mL圆底烧瓶中，再加入TEMPO0.19mg,溴化钾7.23mg(0.06mmol,0.10equiv),碳酸钾51.0mg(0.61mmol,1.00equiv)和水1mL，再在0-5oC下滴加10%NaClO水溶液904mg(1.21mmol,2.00equiv)，滴加时间约为20min,自然升至室温搅拌过夜，加入10mL10%的亚硫酸钠水溶液猝灭，反应毕。用乙酸乙酯100mL×3萃取反应液，再用饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩有机相，得棕色固体粗品(5-氟-2-硝基苯基)(1-(苯磺基)-6-(三氟甲基)-1H-吲哚-2)甲醇295mg，不必提纯直接投下一步反应。

在100mL圆底烧瓶中加入氢化钠234mg(5.85mmol,3.60equiv,60%),DMF30mL和环丁醇210.9mg(2.92mmol,1.80equiv,100%).整个体系在0oC下搅拌30min，再将上步反应得到的固体(800mg,1.62mmol,1.00equiv)，然后自然升至室温并继续搅拌2h,加入30mL纯化水猝灭，反应毕。用乙酸乙酯100mL×3萃取，再用饱和食盐水100mL×3洗涤反应液，无水硫酸钠干燥，减压浓缩有机相，得黑色油状粗品(5-环丁基-2-硝基苯基)(6-(三氟甲基)-1H-吲哚-2)甲醇780mg。

将上述油状物800mg(1.98mmol,1.00equiv,100%)用30mL甲醇溶解在100mL圆底烧瓶中，再加入钯/碳800mg，在反应液面下导入氢气，室温搅拌3h，反应毕，过滤，收集母液，最后采用硅胶柱色谱分离方式进行提纯，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯(1:10-1:5)，最后采用硅胶柱色谱分离方式进行提纯，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯(1:5)，得浅黄色油状物(14%)of(2-氨基-5-环丁基苯基)(6-(三氟甲基)-1H-吲哚-2)甲醇180mg，产率17.0%，(ES,m/z):375.2[M+H]⁺¹，377.2[M+H+2]⁺¹。

将上步产物100mg(0.27mmol,1.00equiv,100%)用10mL二氯甲烷溶解在50mL圆底烧瓶中，再加入3-(2,2-二甲基-4-氧代-3,7,10,13,16-五氧杂十烷-19)苯甲酸352mg(0.80mmol,3.00equiv,100%),EDCI263.5mg(1.37mmol,5.00equiv,100%)和DMAP163mg(1.34mmol,5.00equiv,100%)，室温搅拌过夜，反应毕。用饱和氯化铵水溶液洗涤有机相，合并有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩有机相，得浅黄色油状二取代物粗品400mg，不必提纯直接投下一步反应。

将上步产物350mg(0.29mmol,1.00equiv)用10mL甲醇溶解在50mL圆底烧瓶中，再加入碳酸钾(198mg,1.43mmol,5.00equiv)，室温搅拌2h，反应毕，过滤，收集母液，加入20mL乙酸乙酯稀释，再用纯化水洗涤，合并有机相无水硫酸钠干燥，真空浓缩，粗产品约700mg，采用硅胶柱色谱分离方式进行提纯，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯=1:1得白色固体化合物(1)160mg，产率70%，(ES,m/z):741.2[M+H]⁺¹，743.2[M+H+2]⁺¹。HNMR(300MHz,DMSO)δ:12.33(s,1H),10.40(s,1H),7.94(d,J=8.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.66(d,J=8.4Hz,1H),7.59(d,J=3.3Hz,1H),7.53(s,1H),7.38-7.32(m,3H),7.20-7.14(m,3H),4.78(m,1H),3.60(t,J=6.3Hz,2H),3.51-3.37(m,14H),2.61(t,J=7.5Hz,2H),2.44(t,J=6.3Hz,4H),2.12(m,2H),1.74(m,4H),见图1。

实施例2：化合物(2)的合成

与实施例1采用相同的起始原料，但在第二步的加成反应中采用5-氯-2-硝基苯甲醛,再按照实施例1的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（2），具体结构式如下：

(ES,m/z):705.2[M+H]⁺¹，707.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:8.31(d,J=9Hz,1H),7.97(d,J=3Hz,1H),7.84-7.90(m,2H),7.67-7.70(m,3H),7.33-7.44(m,3H),7.19(s,1H),3.69(t,J=6.6Hz,2H),3.52-3.66(m,12H),3.46(t,J=6,6Hz,2H),2.71-2.76(m,3H),2.51(t,J=6Hz,2H),1.87-1.91(m,2H),见图2。

实施例3：化合物(3)的合成

与实施例1采用相同的起始原料，但在第二步的加成反应中采用5-(丙基氨基)-2-硝基苯甲醛,再按照实施例1的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（3），具体结构式如下：

(ES,m/z):770.2[M+H]⁺¹，772.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:12.28(s，1H),10.23（s，1H）,7.90(d，J=8.8Hz,1H),7.77(s,1H),7.55(s,1H),7.49(s,1H),7.34(d,J=10.4Hz,3H),7.11(s,1H),6.98(s,1H),3.59^-3.30(m,20H),2.57(t,J=7.0Hz,2H),2.42(t，J=5.6Hz,2H),1.72(s,2H),1.57(m,4H),088(t,J=7.0Hz,6H),见图3。

实施例4：化合物(4)的合成

与实施例1采用相同的起始原料，但在第二步的加成反应中采用5-环丁氧基-2-硝基苯甲醛,再按照实施例1的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（4），具体结构式如下：

(ES,m/z):649.2[M+H]⁺¹，650.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:7.99(m,2H),7.90(m,1H),7.87(s,1H),7.69(m,1H),7.60(m,1H),7.33(m,2H),7.19(m,2H),4.85(m,1H),3.93(m,4H),3.35(m,2H),3.31(m,2H),3.09(m,2H),2.51(m,2H),2.22(m,2H),2.19(m,2H)，见图4。

实施例5：化合物(5)的合成

与实施例3采用相同的起始原料，但在第六步的成酰胺反应中采用3-(甲基(2-乙基吗啉)甲酰基)苯甲酸,再按照实施例3的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（5），具体结构式如下：

(ES,m/z):678.2[M+H]⁺¹，680.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:

7.95(m,5H),7.90(m,1H),7.69(d,J=7.5Hz,1H),7.59(t,J=8.1Hz,1H),7.36(d,J=1.5Hz,1H),7.26(s,1H),7.13(m,J=9.3Hz,1H),3.94(m,7H),3.52(m,2H),3.36(m,4H),3.08(m,3H),1.69(m,4H),0.96(t,J=7.5Hz,6H),见图5。

实施例6：化合物(6)的合成

与实施例1不同之处在于，采用6-氯-1-(苯磺酰基)-1-氢-吲哚为原料，按照实施例1的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（6），具体结构式如下：

(ES,m/z):720.2[M+H]⁺¹，722.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:12.06(s,1H),10.47(s,1H),7.80～7.72(m,2H),7.61～7.46(m,5H),7.37(d.J=4.8Hz,2H),7.16(t,J=6.9Hz,2H),3.78～3.57(m,2H),3.49(d,J=6.0Hz,12H),3.39～3.32(m,6H),2.61(t,J=7.8Hz,2H),2.52～2.41(m,2H),1.81～1.73(m,6H),1.60～1.52(m,2H),见图6。

实施例7：化合物(7)的合成

与实施例1不同之处在于，采用1-(苯磺酰基)-5-(三氟甲基)-1-氢-吲哚为原料，按照实施例1的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（7），具体结构式如下：

(ES,m/z):754.2[M+H]⁺¹，756.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:8.47-8.44(d,J=9.3Hz,1H),8.11-8.09(d,J=7.2Hz,2H),7.84-7.82(d,J=7.2Hz,1H),7.74-7.68(m,3H),7.61-7.59(d,J=8.7Hz,1H),7.47-7.40(m,2H),7.34(s,1H),3.72-3.68(m,2H),3.62(s,10H),3.60(s,7H),3.50-3.46(m,2H),2.79-2.74(m,2H),2.55-2.50(m,2H),2.01(s,4H),1.94-1.85(m,2H),1.81-1.79(m,2H),见图7。

实施例8：化合物(8)的合成

与实施例1不同之处在于，采用1-(苯磺酰基)-5-氟-1-氢-吲哚为原料，按照实施例1的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（8），具体结构式如下：

(ES,m/z):704.2[M+H]⁺¹，706.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:7.31(s,2H),6.83～6.77(m,3H),6.44～6.35(m,4H),4.13(s,2H),3.94～3.81(m,2H),3.77(s,3H),3.73～3.64(m,3H),3.61～3.55(m,6H),3.53～3.30(m,3H),3.08(s,1H),2.60(s,2H),1.54(s,6H),见图8。

实施例9：化合物(9)的合成

与实施例1不同之处在于，采用1-(苯磺酰基)-5-甲氧基-1-氢-吲哚为原料，按照实施例1的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（9），具体结构式如下：

(ES,m/z):716.2[M+H]⁺¹，718.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:8.56-8.53(d,J=7.2Hz,1H),8.10-8.09(d,J=2.4Hz,1H),7.83-7.79(m,1H),7.75-7.70(m,2H),7.48-7.41(m,3H),7.15-7.12(m,2H),7.07-7.03(m,1H),3.84(s,3H),3.72-3.68(m,3H),3.67-3.58(m,16H),3.51-3.46(m,2H),2.79-2.74(m,2H),2.54-2.50(m,2H),2.03-2.02(m,4H),2.00-1.85(m,2H),1.82-1.80(m,2H),见图9。

实施例10：化合物(10)的合成

与实施例6采用相同的起始原料6-氯-1-(苯磺酰基)-1-氢-吲哚,但在第二步的加成反应中采用2-硝基-5-(哌啶基-1)苯甲醛，按照实施例6的合成方法即合成路线I，即可制得化合物（10），具体结构式如下：

(ES,m/z):628.2[M+H]⁺¹，630.2[M+H+2]⁺¹;H NMR(300MHz,CDCl₃)δ:8.25(d,J=9.0,1H),8.00(d,J=7.8,2H),7.85(d,J=2.7,1H),7.74(d,J=7.8,1H),7.60-7.65(m,6H),7.47-7.52(m,1H),7.36-7.39(m,1H),7.12-7.19(m,2H),3.65-3.96(m,8H),3.47-3.50(m,7H),3.07(s,3H),1.91(d,J=5.1,4H),1.74(d,J=5.1,2H),见图10。

实施例11：化合物药理实验

待测化合物对MCF-7(人乳腺癌细胞)和HeLa(人宫颈癌细胞)肿瘤细胞作为研究对象，采用四甲基偶氮唑盐比色法，即MTT法。活性用半数抑制浓度(IC₅₀)表示，单位为μM，以5-氟尿嘧啶为对照药。

以MCF-7细胞为例：

取0.25%胰蛋白酶消化单层培养的MCF-7细胞，用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液配成单细胞悬液，接种于96孔板中，每孔200μL（含3×10⁴-5×10⁴个细胞）。将培养板放入CO2孵箱，在37oC、5%CO₂条件下，待培养细胞贴壁后加入不同浓度的待测化合物，每个化合物测试4个浓度（1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8mol/L），对照组加入与给药组等体积的溶剂。继续在CO₂孵箱中于37oC、5%CO₂条件下培养72h。每孔加入20μL MTT溶液（5mg/mL），于37℃继续孵育4h，中止培养，弃去孔内培养上清液，每孔加入150μL DMSO，轻度振荡10min，选择570nm波长，在酶标仪上测定各孔光吸收值（OD值），用下面公式计算化合物对肿瘤细胞的抑制率，并计算IC₅₀。重复测试3次，取平均值为最终结果。

化合物	MCF-7(IC₅₀μM)	HeLa(IC₅₀μM)
			5-Fu	5.58	4.77
(1)	7.28	9.04
			(2)	7.90	11.37
(3)	8.01	8.44
			(4)	17.14	＞100
(5)	20.58	16.73
			(6)	10.21	13.25
(7)	7.03	9.26
			(8)	8.24	10.73
(9)	7.69	9.16
			(10)	14.05	＞100

通过上述数据可知，除了化合物4,5和10外,其余化合物对MCF-7和HeLa肿瘤细胞具有明显的抑制活性，有进一步研究的价值；化合物4,5和10对MCF-7肿瘤细胞均显示了较弱的抑制活性，对HeLa肿瘤细胞几乎无抑制活性。初步构效关系表明R₄为长链状氧杂羧酸取代基时是有利于提高化合物的抗肿瘤活性的。

应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims

1.一种具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物，其特征在于：

异邻苯二甲酰亚胺类化合物为化合物(1)、化合物(2)、化合物(3)、化合物(6)、化合物(7)、化合物(8)或化合物(9)，具体结构式如下：

2.一种权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物的应用，其特征在于：所述化合物或其盐用于制备抗肿瘤的药物。

3.按权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物的应用，其特征在于：将所述化合物或其盐作为活性组分用于制备抗肿瘤组合物的应用。

4.按权利要求3所述的具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物的应用，其特征在于：所述的抗肿瘤组合物中的活性组分的重量百分含量为30-80％。

5.按权利要求4所述的具有抗肿瘤活性的异邻苯二甲酰亚胺类化合物的应用，其特征在于：所述的抗肿瘤组合物为片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂或乳剂。