CN103750341A - 一种灭活拟杆菌微生态制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生态制剂领域，具体公开了一种灭活的拟杆菌微生态制剂及其制备方法。所述制剂以灭活拟杆菌及发酵浓缩物为主要成分，所述灭活拟杆菌微生态制剂具有抗菌，消炎，调整胃肠道微生物菌群，预防人和动物胃肠道疾病等功效，具有见效快、安全性高、使用方便等特点。本发明应用到人和动物的疾病预防和保健等，具有较好的实际应用价值，特别是在动物饲料方面的应用更加突出。因此该益生菌灭活微生态制剂是一项值得推广的技术。
Description
技术领域
本发明涉及微生态制剂领域，具体涉及一种灭活拟杆菌微生态制剂及其制备方法。
背景技术
拟杆菌是人和动物体内大量存在的正常菌群，约占肠道菌群的1/4以上，与肠道其他菌群及宿主之间有着一起维持肠道的特殊环境，对宿主的健康起到重要的作用。拟杆菌能帮助宿主分解多糖、形成肠粘膜血管、提高宿主免疫力、维持肠道微生态平衡等有着重要的作用。肠道中含有较多种类的拟杆菌，它们共同构成肠道拟杆菌菌群，相互协调补充，维持肠道菌群平衡。因此制备复合型的拟杆菌微生态制剂，相比单一拟杆菌微生态制剂的效果将更加显著。这主要是由于复合微生态制剂更符合肠道微生态结构，使得益生菌更能发挥益生作用的缘故，另一方面微生态制剂在宿主体内产生作用过程复杂，是由多种菌的多步反应来共同完成的。例如申请号为201310374524.2的发明专利公开一种用于生猪养殖保健的复合微生态制剂，所述制剂由嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母组成。曾红根等于2011年发表的“拟杆菌微生态制剂对仔猪免疫能力的影响”文献中公开一种复合微生态制剂，由多形拟杆菌、乳酸杆菌、枯草芽胞杆菌组成。虽然上述复合微生态制剂能够在一定程度上调整人或动物的肠道平衡，从而提高免疫力，但是，上述微生态制剂存在以下缺点：1.上述活菌制剂容易受环境条件的影响，在生产和运输过程中容易失活，货架期较短；2.微生态制剂在和饲料等一起使用时，活菌容易被饲料中添加的抗菌物质杀死；3.制剂中的活菌在进入消化道后不能有效抵抗盐酸、胆盐，无法到达肠道或无法长时间定植在肠道起作用。
为了克服上述缺点，出现的一种灭活微生态制剂。灭活微生态制剂是利用活的有益菌的培养物，经过扩大培养，灭活而制成的含有灭活有益菌和代谢产物的具有有效生理功能的制剂。但是，现有技术中关于灭活微生态制剂的研究比较少见，目前见报道仅有乳酸菌，但是灭活微生态制剂以其独特的优势正在成为微生态制剂的一个重要方向。
发明内容
本发明要解决的技术问题是为了克服现有技术中灭活微生态制剂资源不足的缺陷，提供一种灭活拟杆菌微生态制剂。
本发明的另一个目的是提供一种灭活拟杆菌微生态制剂的制备方法。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现：
一种灭活拟杆菌微生态制剂，含有如下重量份数的各组分：灭活拟杆菌细胞及发酵浓缩物20～50份，赋形剂40～70份。
本发明通过研究发现，拟杆菌也可以制成灭活微生态制剂。优选地，所述灭活拟杆菌细胞的浓度为108～109个/克。
作为优选实施方案，所述拟杆菌选自多形拟杆菌、脆弱拟杆菌、普通拟杆菌、吉氏拟杆菌、卵形拟杆菌、粪便拟杆菌、单形拟杆菌、埃氏拟杆菌或粪拟杆菌中的一种或一种以上。更优选地，所述拟杆菌为多形拟杆菌和脆弱拟杆菌。
研究显示多形拟杆菌能够帮助宿主吸收多糖及提高营养利用率、调控脂肪的积累、加快肠道粘膜的血管形成和提高宿主免疫力，维持肠道微生态平衡等方面均有非常重要的作用。特别是多形拟杆菌在对多糖的利用方面作用尤其突出。能够利用其它菌不能消耗的多糖的能力，也减少了菌群对营养源的竞争，奠定了拟杆菌优势地位，且多形拟杆菌在代谢多糖过程中产生的中间产物，还可以为宿主提供营养，这一重大发现对研究动物和人体肥胖有重要的意义，特别是在增加猪肉廋肉率上方面的应用。断奶猪仔肠道菌群严重失调功能出现紊乱，即使使用多种很多的药物也疗效甚微，反而破坏了肠道菌群平衡，使用多形拟杆菌可恢复肠道的微生态，使有益菌群快速的增殖从而改善肠道功能有效解决腹泻问题。
脆弱拟杆菌为一种专性厌氧的革兰氏阴性菌，分为产肠毒素和非产肠毒素型。脆弱拟杆菌主要存在于结肠中，此外呼吸道、胃肠道及泌尿系统生殖道粘膜也可定植生长。脆弱拟杆菌是一种条件致病菌，主要是宿主的粘膜受损后，会侵犯粘膜下层造成感染，经血液循环引起身体其他部位器官如肠道、腹腔、肝、肺等组织的脓性感染，和急慢性腹泻等。拟杆菌的条件致病性，易造成人们对活拟杆菌的微生态制剂的安全性的疑惑，影响人们的使用。
所述赋形剂为玉米芯粉和沉淀二氧化硅的混合物、玉米粉和沉淀二氧化硅的混合物、玉米粉或玉米淀粉和沉淀二氧化硅的混合物。所述玉米芯粉的颗粒大小为60～100目。
所述微生态制剂的产品形式包括但不限于干粉剂、片剂、胶囊剂、栓剂以及保健食品如饮料等。所述选自干粉剂：载体选自但不限于玉米芯粉、玉米淀粉和沉淀二氧化硅的一种或多种。所述片剂载体：选自但不限于磷酸氢钙、硬脂酸、交联羧甲纤维素、二氧化硅；栓剂载体：聚乙二醇、阿拉伯树胶、乙酰胆酸甘油乙酯、棕榈蜡、领苯二甲酸乙酸纤维素、玉米淀粉、邻苯二甲酸二丁酯、多库酯钠、明胶、甘油、氧化铁、高岭土、乳糖、硬脂酸镁、对羟基苯甲酸甲酯、药用釉料、聚维酮、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸钠、失水山梨醇单油酸酯、蔗糖滑石粉、二氧化钛、白蜡和着色剂的一种或多种；所述胶囊剂载体：选自但不限于明胶、纤维素、碳水化合物的一种或多种。
如上所述灭活拟杆菌微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：
S1. 拟杆菌的发酵培养；
S2. 发酵结束后向发酵液中加入占发酵液质量分数为0.1～0.5%的保护剂得混合液；
S3. 将混合液灭活，离心并收集菌体；离心后的上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4. 将菌体和赋形剂混合均匀后再与浓缩上清液混合，干燥使残留水分＜15%，即得灭活拟杆菌微生态制剂。
优选地，S3所述灭活的方式可以为冷冻灭活、热灭活或者化学灭活。
本发明所述灭活微生态制剂是利用活的拟杆菌的培养物，经过扩大培养，灭活而制成的含有灭活拟杆菌和代谢产物的具有有效生理功能的制剂。具有如下优点：（1）与活菌相比耐高温、耐抗生素、耐胃酸和胆盐，效果稳定；（2）具有完整的细胞结构，可粘附到肠细胞表面，竞争性排斥有害菌；（3）选择性抑杀有害菌，而对乳酸菌没有抑制作用；（4）细胞壁多糖有免疫刺激作用；（5）经灭活菌体不产生毒素和相关的酶，而菌体表面的抗原决定簇可以诱导机体产生抗原，有利于预防和治疗腹泻等胃肠道等疾病。
优选地，S2所述保护剂为海藻酸钠和甘油的混合物或脱脂牛奶。
本发明所述的灭活拟杆菌微生态制剂可应用于动物胃肠道疾病的预防和保健，所述胃肠道疾病为腹泻、便秘、肠炎及胃肠道微生物菌群失调引起的各类疾病。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明通过研究发现，拟杆菌也可以制成灭活微生态制剂，而且本发明所述灭活拟杆菌微生态制剂拥有与活的微生态制剂相同的功效。灭活的拟杆菌细胞不仅能高效的粘附到人和动物的肠道上皮细胞，发挥保护作用，而且还具有活的微生态制剂不具有的优点。灭活的拟杆菌细胞耐高温、耐高酸、胆汁，可与抗生素协同作用；另外，拟杆菌发酵过程产生的代谢产物也能有效的抑杀人和动物肠道及病菌；本发明所述的灭活拟杆菌微生态制剂安全、有效、经济地解决了目前困扰活菌拟杆菌微生态制剂的问题。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步详细说明本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、设备为本技术领域常规试剂和设备。
实施例中使用的脆弱拟杆菌选自已知安全无毒的商业菌种脆弱拟杆菌(B.fragili(NCTC9343)，多形拟杆菌选自已知安全无毒的商业菌种多形拟杆菌(Bacteroides thetaiotaotaomicron(ATTC29148)。
实施例1
一种灭活拟杆菌微生态制剂，每公斤制剂中含有：灭活多形拟杆菌及其发酵产物450克，其中灭活的多形拟杆菌细胞含量为108～109个/克，规格为80目的玉米芯粉和沉淀二氧化硅共550克，其中玉米芯粉和沉淀二氧化硅各225克。
灭活拟杆菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
S1.多形拟杆菌的发酵培养：将种子龄为15小时的多形拟杆菌按照8%（v/v或v/w）的接种量接种发酵培养基，在发酵温度为37℃的条件下，厌氧培养48小时；所述发酵培养基为改良肉汤培养基：改良肉汤培养基pH 7.0±0.2，121℃高压灭菌15分钟，冷却到50℃左右时，加入过滤除菌的维生素K1溶液0.5ml和氯化血红素溶液（5mg/ml）2.5ml，混匀，备用。
S2.发酵结束后，向发酵液中加入质量分数为0.5%（w/v）的脱脂牛奶得混合液；
S3.将混合液加热升温至80℃，维持60分钟进行热灭活；热灭活后将混合液3000r/min离心15分钟，去上清液，收集菌体；同时将上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4.将菌体与赋形剂混合：具体为向450克多形拟杆菌发酵产物中加入赋形剂550克，所述赋形剂为80目玉米芯粉和沉淀二氧化硅的混合物，其中玉米芯粉和沉淀二氧化硅的重量比为1:1，混合并搅拌25分钟，使之充分混合与吸附得混合物；将浓缩上清液与混合物充分混合，干燥使得总水分小于15%。
所述灭活拟杆菌微生态制剂在一吨全价料中的用量为2公斤。此组分比列和添加量可以用于仔猪养殖。
实施例2
一种灭活拟杆菌微生态制剂，每公斤制剂中含有：灭活脆弱拟杆菌及其发酵产物350克，其中灭活的脆弱拟杆菌细胞含量为108～109个/克，玉米淀粉和沉淀二氧化硅共650克，其中玉米淀粉和沉淀二氧化硅各325克。
所述微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：
S1.脆弱拟杆菌的发酵培养：将种子龄12小时的脆弱拟杆菌按照5%（v/v或v/w）的接种量接种发酵培养基，在发酵温度为37℃的条件下，厌氧培养40小时；所述发酵培养基为改良肉汤培养基：改良肉汤培养基pH7.0±0.2，121℃高压灭菌15分钟，冷却到50℃左右时，加入过滤除菌的维生素K1溶液0.5ml和氯化血红素溶液（5mg/ml）2.5ml，混匀，备用。
S2.发酵结束后，向发酵总液中加入占发酵总液质量分数为0.4%（w/v）的海藻酸钠和甘油的混合物，得混合液；其中海藻酸钠和甘油的质量比为1：1；
S3.将混合液加热升温至75℃，维持50分钟进行热灭活；热灭活后将混合液3000r/min离心15分钟，去上清液，收集菌体；同时将上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4.将菌体与赋形剂混合：具体为向350克脆弱拟杆菌发酵产物中加入赋形剂650克，所述赋形剂为玉米淀粉和沉淀二氧化硅的混合物，其中玉米淀粉和沉淀二氧化硅的重量比为1:1，混合并搅拌25分钟，使之充分混合与吸附得混合物；将浓缩上清液与混合物充分混合，干燥使得总水分小于15%。
所述灭活拟杆菌微生态制剂在一吨全价料中的用量为2公斤。此组分比列和添加量可以用于仔猪养殖。
实施例3
一种灭活拟杆菌微生态制剂，每公斤制剂中含有：灭活脆弱拟杆菌和多形拟杆菌及其发酵产物480克，其中灭活脆弱拟杆菌和多形拟杆菌总的细胞含量为108～109个/g，规格为80目的玉米芯粉和沉淀二氧化硅共520克，其中玉米芯粉和沉淀二氧化硅各260克。
如上所述灭活拟杆菌微生态制剂的制备方法：包括如下步骤：
S1.脆弱拟杆菌和多形拟杆菌分别发酵培养：将种子龄为16小时的脆弱拟杆菌和多形拟杆菌分别按照8%（v/v或v/w）的接种量接种发酵培养基，在发酵温度为37℃的条件下，厌氧培养48小时；所述发酵培养基为改良肉汤培养基：改良肉汤培养基pH7.0±0.2，121℃高压灭菌15分钟，冷却到50℃左右时，加入过滤除菌的维生素K1溶液0.5ml和氯化血红素溶液（5mg/ml）2.5ml，混匀，备用。
S2.发酵结束后，将脆弱拟杆菌和多形拟杆菌发酵培养液按照1:1的比例混合后得发酵总液，向发酵总液中加入占发酵总液质量分数为0.4%（w/v）的脱脂牛奶，得混合液；
S3.将混合液加热升温至70℃，维持60分钟进行热灭活；热灭活后将混合液3000r/min离心15分钟，去上清液，收集菌体；同时将上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4.将菌体与赋形剂混合：具体为向480克拟杆菌发酵产物中加入赋形剂520克，所述赋形剂为80目玉米芯粉和沉淀二氧化硅的混合物，其中玉米芯粉和沉淀二氧化硅的重量比为1:1，混合并搅拌30分钟，使之充分混合与吸附得混合物；将浓缩上清液与混合物充分混合，干燥使得总水分小于15%。
所述灭活拟杆菌微生态制剂在一吨全价料中的用量为2公斤。此组分比列和添加量可以用于仔猪养殖。
实施例4
一种灭活拟杆菌微生态制剂，每公斤制剂中含有：灭活脆弱拟杆菌、多形拟杆菌和普通拟杆菌及其发酵产物400克，其中灭活脆弱拟杆菌、多形拟杆菌和普通拟杆菌总的细胞含量为108～109个/g，玉米粉和沉淀二氧化硅共600克，其中玉米粉和沉淀二氧化硅各300克。
如上所述灭活拟杆菌微生态制剂的制备方法：包括如下步骤：
S1.脆弱拟杆菌、多形拟杆菌和普通拟杆菌分别发酵培养：将种子龄为16小时的脆弱拟杆菌、多形拟杆菌和普通拟杆菌分别按照8%（v/v或v/w）的接种量接种发酵培养基，在发酵温度为37℃的条件下，厌氧培养48小时；所述发酵培养基为改良肉汤培养基：改良肉汤培养基pH7.0±0.2，121℃高压灭菌15分钟，冷却到50℃左右时，加入过滤除菌的维生素K1溶液0.5ml和氯化血红素溶液（5mg/ml）2.5ml，混匀，备用。
S2.发酵结束后，将脆弱拟杆菌、多形拟杆菌和普通拟杆菌的发酵培养液按照1：1：1的比例混合后得发酵总液，向发酵总液中加入占发酵总液质量分数为0.3%（w/v）的脱脂牛奶，得混合液；
S3.将混合液加热升温至70℃，维持60分钟进行热灭活；热灭活后将混合液3000r/min离心15分钟，去上清液，收集菌体；同时将上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4.将菌体与赋形剂混合：具体为向400克拟杆菌发酵产物中加入赋形剂600克，所述赋形剂为玉米粉和沉淀二氧化硅的混合物，其中玉米粉和沉淀二氧化硅的重量比为1:1，混合并搅拌30分钟，使之充分混合与吸附得混合物；将浓缩上清液与混合物充分混合，干燥使得总水分小于15%。
所述灭活拟杆菌微生态制剂在一吨全价料中的用量为2公斤。此组分比列和添加量可以用于仔猪养殖。
实施例5
一种灭活拟杆菌微生态制剂，每公斤制剂中含有：灭活脆弱拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌和吉氏拟杆菌及其发酵产物500克，其中灭活脆弱拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌和吉氏拟杆菌总的细胞含量为108～109个/g，玉米粉500克。
如上所述灭活拟杆菌微生态制剂的制备方法：包括如下步骤：
S1.脆弱拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌和吉氏拟杆菌分别发酵培养：将种子龄为16小时的脆弱拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌和吉氏拟杆菌分别按照5%（v/v或v/w）的接种量接种发酵培养基，在发酵温度为37℃的条件下，厌氧培养40小时；所述发酵培养基为改良肉汤培养基：改良肉汤培养基pH7.0±0.2，121℃高压灭菌15分钟，冷却到50℃左右时，加入过滤除菌的维生素K1溶液0.5ml和氯化血红素溶液（5mg/ml）2.5ml，混匀，备用。
S2.发酵结束后，将脆弱拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌和吉氏拟杆菌的发酵培养液按照1:1:1:1的比例混合后得发酵总液，向发酵总液中加入占发酵总液质量分数为0.5%（w/v）的脱脂牛奶，得混合液；
S3.将混合液加热升温至70℃，维持60分钟进行热灭活；热灭活后将混合液3000r/min离心15分钟，去上清液，收集菌体；同时将上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4.将菌体与赋形剂混合：具体为向500克拟杆菌发酵产物中加入赋形剂500克，所述赋形剂为玉米粉，混合并搅拌30分钟，使之充分混合与吸附得混合物；将浓缩上清液与混合物充分混合，干燥使得总水分小于15%。
所述灭活拟杆菌微生态制剂在一吨全价料中的用量为1.5公斤。此组分比列和添加量可以用于仔猪养殖。
实施例6
一种灭活拟杆菌微生态制剂，每公斤制剂中含有：灭活卵形拟杆菌、粪便拟杆菌、脆弱拟杆菌和吉氏拟杆菌及其发酵产物300克，其中灭活卵形拟杆菌、粪便拟杆菌、脆弱拟杆菌和吉氏拟杆菌总的细胞含量为108～109个/g，玉米粉700克。
如上所述灭活拟杆菌微生态制剂的制备方法：包括如下步骤：
S1.卵形拟杆菌、粪便拟杆菌、脆弱拟杆菌和吉氏拟杆菌分别发酵培养：将种子龄为16小时的卵形拟杆菌、粪便拟杆菌、脆弱拟杆菌和吉氏拟杆菌分别按照5%（v/v或v/w）的接种量接种发酵培养基，在发酵温度为37℃的条件下，厌氧培养35小时；所述发酵培养基为改良肉汤培养基：改良肉汤培养基pH7.0±0.2，121℃高压灭菌15分钟，冷却到50℃左右时，加入过滤除菌的维生素K1溶液0.5ml和氯化血红素溶液（5mg/ml）2.5ml，混匀，备用。
S2.发酵结束后，将卵形拟杆菌、粪便拟杆菌、脆弱拟杆菌和吉氏拟杆菌的发酵培养液按照1:1:1:1的比例混合后得发酵总液，向发酵总液中加入占发酵总液质量分数为0.5%（w/v）的脱脂牛奶，得混合液；
S3.将混合液加热升温至60℃，维持55分钟进行热灭活；热灭活后将混合液3000r/min离心15分钟，去上清液，收集菌体；同时将上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4.将菌体与赋形剂混合：具体为向300克拟杆菌发酵产物中加入赋形剂700克，所述赋形剂为玉米粉，混合并搅拌30分钟，使之充分混合与吸附得混合物；将浓缩上清液与混合物充分混合，干燥使得总水分小于15%。
所述灭活拟杆菌微生态制剂在一吨全价料中的用量为2公斤。此组分比列和添加量可以用于仔猪养殖。
对比例1
一种拟杆菌微生态制剂，每公斤制剂中含有：脆弱拟杆菌和多形拟杆菌及其发酵产物480克，其中脆弱拟杆菌和多形拟杆菌总的细胞含量为108～109个/g，规格为80目的玉米芯粉和沉淀二氧化硅共520克，其中玉米芯粉和沉淀二氧化硅各260克。
如上所述拟杆菌微生态制剂的制备方法：包括如下步骤：
S1.脆弱拟杆菌和多形拟杆菌分别发酵培养：将种子龄为16小时的脆弱拟杆菌和多形拟杆菌分别按照8%（v/v或v/w）的接种量接种发酵培养基，在发酵温度为37℃的条件下，厌氧培养48小时；所述发酵培养基为改良肉汤培养基：改良肉汤培养基pH7.0±0.2，121℃高压灭菌15分钟，冷却到50℃左右时，加入过滤除菌的维生素K1溶液0.5ml和氯化血红素溶液（5mg/ml）2.5ml，混匀，备用。
S2.发酵结束后，将脆弱拟杆菌和多形拟杆菌发酵培养液按照1:1的比例混合后得发酵总液；
S3.将发酵总液3000r/min离心15分钟，去上清液，收集菌体；同时将上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4.将菌体与赋形剂混合：具体为向480克拟杆菌发酵产物中加入赋形剂520克，所述赋形剂为80目玉米芯粉和沉淀二氧化硅的混合物，其中玉米芯粉和沉淀二氧化硅的重量比为1:1，混合并搅拌30分钟，使之充分混合与吸附得混合物；将浓缩上清液与混合物充分混合，干燥使得总水分小于15%。
所述拟杆菌微生态制剂在一吨全价料中的用量为2公斤。此组分比列和添加量可以用于仔猪养殖。
实施例8
将实施例2～6制备的灭活拟杆菌微生态制剂和对比例1制备的非灭活拟杆菌微生态制剂应用于仔猪生产
试验对象:选择取日龄比较接近为28天左右的336头断奶仔猪，分为8组，每组仔猪的雌性比例相同，体重差异不显著P＞0.05，将不同的窝别的仔猪随机分配到8个试验组中。
试验组合：设置对照组、试验组1、试验组2、试验组3、试验组4、试验组5、试验组6、试验组7。对照组仅饲喂基础饲料（311料作为基础日粮），试验组1饲喂基础日粮+2kg/t的实施例1所述微生态制剂；试验组2饲喂基础日粮+2kg/t的实施例2所述微生态制剂；试验组3饲喂基础日粮+2kg/t的实施例3所述微生态制剂；试验组4饲喂基础日粮+2kg/t的实施例4所述微生态制剂；试验组5饲喂基础日粮+2kg/t的实施例5所述微生态制剂；试验组6饲喂基础日粮+2kg/t的实施例6所述微生态制剂。试验组7饲喂基础日粮+2kg/t的对比例1所述微生态制剂。将8组断奶仔猪在条件相同的不同圈舍中圈养，专人定时定量饲喂，每日仔猪加料四次，自由采食，充分饮水，常规防疫，定期消毒。每天按照标准称料饲喂，第二天早上把剩余料回收称量，每天观察记录仔猪采食、下痢等健康状况。
实验分析：记录母猪生产情况，仔猪出生重量，26天龄断奶重、35天龄重；按日记录添加料量与剩余料量，记录下痢头数及各阶段各组仔猪增重，所有数据均采用平均值并录入表1，分析下痢发生率。
表1 灭活拟杆菌微生态制剂对仔猪生长性能的影响
结果分析：添加灭活拟杆菌微生态制剂有利于仔猪的胃肠道健康水平，从试验结果来看，试验组的仔猪的生产性能提高，料肉比与对照组相比试验5组、试验6组相比分别高出12.61%和7.46%，说明仔猪对饲料的转化利用率有较大幅度的提高。其他各组料肉比，相比试验组5、6也较高，说明复合多种拟杆菌对于提高饲料转化率有较好的作用，同时试验组7灭活的拟杆菌与试验组3相比料肉比相近，因此说明灭活的拟杆菌微生态制剂，在饲料转化率的效果相近。
同时发现：添加灭活拟杆菌微生态制剂饲喂的仔猪，下痢疾病的发生率显著降低，其中试验5组和试验6组，相比对照组分别降低11.8和8.25个百分点。其他各组腹泻率也有不同程度的降低。添加灭活拟杆菌微生态制剂的仔猪，死亡率降低，其中试验5、6组相比对照组均提高了3个百分点。其他各组相比对照组也有不同程度的降低。
Claims (8)
1.一种灭活拟杆菌微生态制剂，其特征在于，含有如下重量份数的各组分：灭活拟杆菌细胞及发酵浓缩物20～50份，赋形剂40～70份。
2.根据权利要求1所述微生态制剂，其特征在于，所述灭活拟杆菌细胞的浓度为108～109个/克。
3.根据权利要求1或2所述微生态制剂，其特征在于，所述拟杆菌选自多形拟杆菌、脆弱拟杆菌、普通拟杆菌、吉氏拟杆菌、卵形拟杆菌、粪便拟杆菌、单形拟杆菌、埃氏拟杆菌或粪拟杆菌中的一种或一种以上。
4.根据权利要求1或3所述微生态制剂，其特征在于，所述拟杆菌为多形拟杆菌和脆弱拟杆菌。
5.根据权利要求1所述微生态制剂，其特征在于，所述赋形剂为玉米芯粉和沉淀二氧化硅的混合物、玉米粉和沉淀二氧化硅的混合物、玉米粉或玉米淀粉和沉淀二氧化硅的混合物。
6.根据权利要求1所述微生态制剂，其特征在于，所述微生态制剂的形态为干粉剂、片剂、胶囊剂或栓剂。
7.权利要求1至6任一项所述灭活拟杆菌微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1. 拟杆菌的发酵培养；
S2. 发酵结束后向发酵液中加入占发酵液质量分数为0.1～0.5%的保护剂得混合液；
S3. 将混合液灭活，离心并收集菌体，离心后的上清液进行浓缩得浓缩上清液；
S4. 将菌体和赋形剂混合均匀后再与浓缩上清液混合，干燥使残留水分＜15%，即得灭活拟杆菌微生态制剂。
8.根据权利要求7所述制备方法，其特征在于，S2所述保护剂为海藻酸钠和甘油的混合物或脱脂牛奶。
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