CN103740784B - 一种在发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,包括以下步骤:制备培养液,将细菌纤维素生产菌株接种到所述培养液中,然后在28℃~32℃静态发酵或者在100rpm~200rpm旋转发酵至100h~120h,在发酵过程初期向培养液中添加荧光增白剂,发酵结束后,倒出培养液,得到细菌纤维素,所述荧光增白剂的体积为所述培养液体积的0.01%~1%。该方法在细菌的发酵过程中加入荧光增白剂,降低了细菌纤维素纤维带的聚集状况,降低了细菌纤维素的结晶度,该方法简单快速,不会对纤维素的分子量造成影响,成本较低,对细菌纤维素的结晶度具有很好地调控作用。
Description
技术领域
本发明涉及降低细菌纤维素结晶度的方法,特别涉及一种在发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法。
背景技术
纤维素是具有β-1,4糖苷键葡萄糖单元的生物聚合物,是地球上最广泛存在的生物质来源。不同于植物纤维素,细菌纤维素是一种由细菌分泌产生的胞外多糖,细菌纤维素通常具有高纯度(95%以上纤维素含量)、高结晶度(结晶度80%以上)、纳米结构(几十纳米的微纤维结构)和较高的机械强度等特点,被广泛应用于食品、造纸和纺织等领域。
然而,细菌纤维素之间、细菌纤维素和水分子之间形成了数目庞大的氢键,这些氢键构成巨大的氢键网格,直接导致了致密的晶体结构的形成。致密的晶体结构严重阻碍了化学试剂或者生物酶与细菌纤维素表面的有效接触和作用,这也正是天然细菌纤维素非常难于水解的重要原因。因此,要充分利用细菌纤维素,就需要降低纤维素的结晶度,破坏纤维素分子间和纤维素和水分子间的氢键,得到无定形程度较高的纤维素。现有的技术通常采用酸碱的方法对已经合成的细菌纤维素进行部分降解从而获得所需的结晶度,但该方法容易造成纤维素分子量的损失,从而影响纤维素使用时的机械性能;现有技术还通过加入一些多糖或者药物改变细菌细胞的形状来获得不同结晶度的细菌纤维素,但需要加入多糖或者药物量较多(加入的体积分数为2%~10%),成本也会有相应的增加。
因此,如何更有效地降低细菌纤维素的结晶度成为目前研究的重点。
发明内容
为解决上述问题,本发明提供了一种在发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,该方法在细菌的发酵过程中通过加入荧光增白剂,改变细菌纤维素纤维带的聚集状况,降低细菌纤维素的结晶度,该方法简单快速,不会对细菌纤维素的分子量造成影响。
本发明提供了一种发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,包括以下步骤:
制备培养液,将细菌纤维素生产菌株接种到所述培养液中,然后在28℃~32℃静态发酵或者在100rpm~200rpm旋转发酵至100h~120h,在发酵过程初期向培养液中添加荧光增白剂,发酵结束后,倒出培养液,得到细菌纤维素,所述荧光增白剂的体积为所述培养液体积的0.01%~1%。
优选地,在发酵0h~48h加入所述荧光增白剂。
更优选地,在发酵0h~6h加入所述荧光增白剂。
优选地,在发酵0h~6h加入体积为所述培养液体积0.05%~1%的荧光增白剂。
更优选地,在发酵0h~6h加入体积为所述培养液体积0.5%的荧光增白剂。
进一步优选地,在静态发酵0h~6h加入体积为所述培养液体积0.5%的荧光增白剂。
优选地,所述培养液的成分为:0.2~0.5g/mL葡糖糖,0.02~0.08g/mL蛋白胨,0.02~0.08g/mL酵母粉,0.005~0.02g/mL磷酸氢二钠,0.001~0.02g/mL硫酸镁,0.01~0.02g/mL硫酸铵,0.005~0.02mL/mL玉米糖浆提取液。
优选地,所述细菌纤维素生产菌株为木醋杆菌。
更优选地,所述细菌纤维素生产菌株为保藏于美国菌种保藏中心的保藏编号为ATCC700178、ATCC53582或ATCC53524的木醋杆菌。
优选地,将1~5mL的细菌纤维素生产菌株接种到100~200mL的所述培养液中。
优选地,所述荧光增白剂为2,2’-(1,2-亚乙烯基)二[5-[[4-[二(2-羟乙基)氨基]-6-(苯氨基)-1,3,5-三嗪-2-基]氨基]]苯磺酸(M2R)和伊文思蓝的混合物。
更优选地,所述荧光增白剂中M2R的浓度为1g/L,伊文思蓝的浓度为0.5g/L。
优选地,所述荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌后加入所述培养液中。
优选地,发酵结束后,倒出培养液,将所述细菌纤维素用去离子水冲洗,蒸气灭菌后保存备用。
在细菌发酵过程中,加入荧光增白剂,荧光增白剂中的M2R可以和细菌纤维素中的羟基形成氢键,从而阻止细菌纤维素之间、细菌纤维素和水分子之间形成氢键,导致细菌纤维素之间不能相互缠绕聚集,水分子也不能参与细菌纤维素结晶的形成,因此不会形成巨大的氢键网格,最终得到无定形程度较高的细菌纤维素,降低了细菌纤维素的结晶度。
通过静态发酵制得的细菌纤维素的形态为胶膜状,通过旋转发酵制得的细菌纤维素的形态为球状。
在发酵0h~6h加入所述荧光增白剂,结晶度相较于未加入荧光增白剂的细菌纤维素和其他时间点加入荧光增白剂的细菌纤维素相比,结晶度降低更加显著。原因为在细菌发酵0h~6h时,接种到培养液的细菌细胞正处于迟缓期,细菌刚刚开始生产纤维素,分泌到细胞外的纤维素微纤维数量不多,发酵6h后,细菌开始处于生长旺盛期,分泌到胞外的微纤维足够到正好支撑形成纤维素的初始微结构(形成类球形或者层状)。在发酵0h~6h加入荧光增白剂,荧光增白剂能够迅速参与破坏纤维素微纤维之间以及纤维素微纤维和水分子之间的氢键,分泌到胞外的微纤维因为数量不够,不能形成纤维素的初始微结构从而导致了纤维素初始微结构的破坏,对纤维素的最终结晶度破坏明显,而在6h之后再加入荧光增白剂,纤维素初始微结构已经稳定的形成,荧光增白剂的加入只能部分破坏纤维素微纤维结构,对纤维素最终结晶度的破坏作用较小,因此在发酵0h~6h加入所述荧光增白剂,结晶度降低更加显著。
所述荧光增白剂的添加量越大,对细菌纤维素的结晶度的降低作用越明显,但荧光增白剂有毒,添加太多会使细菌纤维素的生物相容性较低,因此本发明选择所述荧光增白剂的添加体积为所述培养液体积的0.01%~1%,加入的荧光增白剂量较少,成本较低,且不会对细菌纤维素的分子量和生物相容性产生较大影响,对细菌纤维素的结晶度降低作用也比较明显。
在发酵0h~6h加入体积为所述培养液体积0.5%的荧光增白剂,荧光增白剂的添加量较小,且降低细菌纤维素结晶度的作用比较显著。
在静态发酵0h~6h加入体积为所述培养液体积0.5%的荧光增白剂,在静态发酵过程中添加荧光增白剂对细菌纤维素结构破坏较大,纤维素的结晶度将会大大降低。原因为在旋转发酵时,荧光增白剂与纤维素的接触时要克服剪切力、重力和溶液阻力等带来的多重影响,从而导致旋转发酵时荧光增白剂与细菌纤维素微纤维的接触和静态发酵相比更加困难,因此静态发酵时荧光增白剂对细菌纤维素微纤维结构破坏作用更强烈。
本发明提供的降低细菌纤维素结晶度的方法简单快速,对细菌纤维素的结晶度具有很好地调控作用。
综上,本发明有益效果包括以下几个方面:
(1)通过在培养液中添加荧光增白剂可以降低细菌纤维素的结晶度;
(2)该方法简单快速,对细菌纤维素的分子量影响较小,成本较低,对细菌纤维素的结晶度具有很好地调控作用。
附图说明
图1为对比实施例1、实施例1和实施例2制得的纤维素小球的形态对比图;
图2为对比实施例1制得的纤维素小球横断面的扫描电镜图;
图3为实施例2制得的纤维素小球横断面的扫描电镜图;
图4为对比实施例2和实施例3制得的纤维素胶膜的形态对比图;
图5为对比实施例2制得的纤维素胶膜横断面的扫描电镜图;
图6为实施例3制得的纤维素胶膜横断面的扫描电镜图。
具体实施方式
以下所述是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
实施例1
一种发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分为:0.2g/mL葡糖糖,0.02g/mL蛋白胨,0.02g/mL酵母粉,0.005g/mL磷酸氢二钠,0.001g/mL硫酸镁,0.01g/mL硫酸铵,0.005mL/mL玉米糖浆提取液;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;将荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,然后在培养液中加入0.01mL的荧光增白剂Fluka18909(购自Simga),在125rpm旋转发酵120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球。
实施例2
一种发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分为:0.2g/mL葡糖糖,0.02g/mL蛋白胨,0.02g/mL酵母粉,0.005g/mL磷酸氢二钠,0.001g/mL硫酸镁,0.01g/mL硫酸铵,0.005mL/mL玉米糖浆提取液;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;将荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,然后在培养液中加入1mL的荧光增白剂Fluka18909(购自Simga),在125rpm旋转发酵120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球。
对比实施例1
对比实施例1和实施例1的区别在于对比实施例1在发酵过程中没有添加荧光增白剂,制得细菌纤维素小球。
分别观察实施例1、实施例2和对比实施例1制得的细菌纤维素小球的形态,结果参见图1,采用扫描电镜观察对比实施例1制得的细菌纤维素小球和实施例2发酵24h时细菌纤维素小球的横断面结构,结果分别参见图2和图3。
实施例3
一种发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分为:0.2g/mL葡糖糖,0.02g/mL蛋白胨,0.02g/mL酵母粉,0.005g/mL磷酸氢二钠,0.001g/mL硫酸镁,0.01g/mL硫酸铵,0.005mL/mL玉米糖浆提取液;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;将荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,然后在培养液中加入1mL的荧光增白剂Fluka18909(购自Simga),在28℃静态培养发酵120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素胶膜。
对比实施例2
对比实施例2和实施例3的区别在于对比实施例2在发酵过程中没有添加荧光增白剂,制得细菌纤维素胶膜。
分别观察实施例3和对比实施例2制得的细菌纤维素胶膜的形态,结果参见图4,采用扫描电镜观察对比实施例2制得的细菌纤维素胶膜和实施例3发酵24h时细菌纤维素胶膜的横断面结构,结果分别参见图5和图6。
图1中a为对比实施例1制得的纤维素小球的形态图,图1中b为实施例1制得的纤维素小球的形态图(实施例1荧光增白剂的添加体积为培养液体积的为0.01%),图1中c为实施例2制得的纤维素小球的形态图(实施例2荧光增白剂的添加体积为培养液体积的为1%),从图1可以看出,实施例1和实施例2制得的纤维素小球的形态和对比实施例1相比,实施例1的纤维素小球荧光增白剂的添加量较小,纤维素小球被伊文思蓝部分染色,纤维素小球形态有细微的变化,实施例2的纤维素小球荧光增白剂的添加量较多,纤维素小球被完全染色,且纤维素小球表面变得不光滑。图4中d为对比实施例2的纤维素胶膜的形态图,图4中e为实施例3的纤维素胶膜的形态图,从图4可以看出,对比实施例2制得的纤维素胶膜形状固定、表面光滑,而实施例3制得的纤维素胶膜呈絮状,胶膜松散,没有固定的形状,说明在静态发酵过程中添加荧光增白剂对细菌纤维素结构破坏较大,纤维素的结晶度将会大大降低。原因为在旋转发酵时,荧光增白剂与细菌纤维素接触时要克服剪切力、重力和溶液阻力等带来的多重影响,从而导致旋转发酵时荧光增白剂与细菌纤维素微纤维的接触和静态发酵相比更加困难,因此静态发酵时荧光增白剂对细菌纤维素微纤维结构破坏作用更强烈。
图2为对比实施例1制得的纤维素小球横断面的扫描电镜图;图3中a为实施例2制得的纤维素小球横断面的扫描电镜图,图3中b为a的放大图;图5为对比实施例2制得的纤维素胶膜横断面的扫描电镜图;图6中c为实施例3制得的纤维素胶膜横断面的扫描电镜图,图6中d为c的放大图,从图2和图5可以看出,在没有添加荧光增白剂时,无论在旋转发酵下或者是在静态发酵下,在制得的纤维素横断面上,都可以很清晰的看到层状的结构。从图3和图6可以看出,加入荧光增白剂后,无论是纤维素小球或者是纤维素胶膜,其横断面的层状结构都部分或者全部消失。说明,加入荧光增白剂,细菌纤维素的结晶度将会受到不同程度的降低,细菌纤维素层状有序结构也会被破坏。这是因为在细菌发酵过程中,加入荧光增白剂,荧光增白剂中的M2R可以和细菌纤维素中的羟基形成氢键,从而阻止细菌纤维素之间、细菌纤维素和水分子之间形成氢键,导致细菌纤维素之间不能相互缠绕聚集,水分子也不能参与细菌纤维素结晶的形成,因此不会形成巨大的氢键网格,最终得到无定形程度较高的细菌纤维素,降低了细菌纤维素的结晶度。
实施例4
一种细菌纤维素的制备方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分为:0.5g/mL葡糖糖,0.08g/mL蛋白胨,0.08g/mL酵母粉,0.02g/mL磷酸氢二钠,0.02g/mL硫酸镁,0.02g/mL硫酸铵,0.02mL/mL玉米糖浆提取液;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;在125rpm旋转发酵6h时,在培养液中加入0.5mL的荧光增白剂Fluka18909,该荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,继续发酵直至120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球,通过X射线衍射仪(XRD)测试该细菌纤维素小球细菌纤维素的结晶度和晶体尺寸。
实施例5
一种细菌纤维素的制备方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分同实施例4;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;在125rpm旋转发酵12h时,在培养液中加入0.5ml的荧光增白剂Fluka18909,该荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,继续发酵直至120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球,测试该细菌纤维素小球的结晶度和晶体尺寸。
实施例6
一种细菌纤维素的制备方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分同实施例4;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;在125rpm旋转发酵24h时,在培养液中加入0.5mL的荧光增白剂Fluka18909,该荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,继续发酵直至120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球,测试该细菌纤维素小球的结晶度和晶体尺寸。
实施例7
一种细菌纤维素的制备方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分同实施例4;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;在125rpm旋转发酵36h时,在培养液中加入0.5mL的荧光增白剂Fluka18909,该荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,继续发酵直至120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球,测试该细菌纤维素小球的结晶度和晶体尺寸。
实施例8
一种细菌纤维素的制备方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分同实施例4;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;在125rpm旋转发酵48h时,在培养液中加入0.5mL的荧光增白剂Fluka18909,该荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,继续发酵直至120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球,测试该细菌纤维素小球的结晶度和晶体尺寸。
实施例9
一种细菌纤维素的制备方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分同实施例4;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;将荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,然后在培养液中加入0.5mL的荧光增白剂Fluka18909,然后125rpm旋转发酵,在发酵到24h,48h和72h时,再在培养液中分别加入0.2ml的荧光增白剂Fluka18909,继续发酵直至120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球,测试该细菌纤维素小球的结晶度和晶体尺寸,该实施例荧光增白剂的添加量为1.1mL。
实施例10
一种细菌纤维素的制备方法,包括以下步骤:
(1)制备培养液,培养液的成分同实施例4;
(2)将1mL的保藏编号为ATCC700178的木醋杆菌菌液接种到100mL上述培养液中;将荧光增白剂通过25μm的滤膜过滤除菌,然后在培养液中加入0.5mL的荧光增白剂Fluka18909,然后125rpm旋转发酵,在发酵到12h、24h、36h、48h、60h和72h时,再在培养液中分别加入0.2mL的荧光增白剂Fluka18909,继续发酵直至120h,发酵结束后,倒出培养液并将生成的纤维素用去离子水冲洗直到没有培养液的残液存留,再蒸汽灭菌后,得到细菌纤维素小球,测试该细菌纤维素小球的结晶度和晶体尺寸,该实施例荧光增白剂的添加量为1.7mL。
对比实施例3
对比实施例3和实施例4的区别在于对比实施例3在发酵过程中没有添加荧光增白剂,制得细菌纤维素小球后,测试该细菌纤维素小球的结晶度和晶体尺寸。
表1为实施例4~10和对比实施例3得到的细菌纤维素小球的结晶度和晶体尺寸。
表1实施例4~10和对比实施例3制得的细菌纤维素小球的结晶度(%)和晶体尺寸
从表1中可以看出,在细菌发酵过程中添加荧光增白剂可明显降低细菌纤维素的结晶度;表1还说明在不同发酵时间点加入不同浓度的荧光增白剂后,得到的细菌纤维素小球的结晶度的也不同。实施例4在发酵6h时加入0.5mL的荧光增白剂获得了58.51%左右的结晶度,实施例5在发酵12h时加入0.5mL的荧光增白剂,结晶度为60%左右,因此,越早加入荧光增白剂,对细菌纤维素结晶度的降低作用越明显,本发明在发酵0h~6h加入荧光增白剂时,降低细菌纤维素的结晶度的效果最好;原因为在细菌发酵0h~6h时,接种到培养液的细菌细胞正处于迟缓期,细菌刚刚开始生产纤维素,分泌到细胞外的纤维素微纤维数量不多,发酵6h时,细菌开始处于生长旺盛期,分泌到胞外的微纤维足够到正好支撑形成纤维素的初始微结构(形成类球形或者层状)。在发酵0h~6h加入荧光增白剂,荧光增白剂能够迅速参与破坏纤维素微纤维之间以及纤维素微纤维和水分子之间的氢键,分泌到胞外的微纤维因为数量不够,不能形成纤维素的初始微结构从而导致了纤维素初始微结构的破坏,对纤维素的最终结晶度破坏明显,而在6h之后再加入荧光增白剂,纤维素初始微结构已经稳定的形成,荧光增白剂的加入只能部分破坏纤维素微纤维结构,对纤维素最终结晶度的破坏作用较小,因此在发酵0h~6h加入所述荧光增白剂,结晶度降低更加显著。
实施例10在发酵0h加入0.5mL荧光增白剂,并且每隔12小时加入0.2mL的荧光增白剂,持续到72小时,总共加入了1.7mL的荧光增白剂,发酵结束后,所生成的纤维素的结晶度从初始的71.25%降低到55.42%,降幅较大。实施例9在发酵0h加入0.5mL荧光增白剂,并且每隔24小时加入0.2mL持续到72小时,总共加入了1.1mL的荧光增白剂,所生成的纤维素的结晶度从初始的71.25%降低到60.02%,实施例9和实施例10的对比结果表明,加入的荧光增白剂的量越多,荧光增白剂的作用时间越持久,对细菌纤维素的降低作用越大。但是考虑到荧光增白剂的毒性和成本等因素,本发明选择荧光增白剂的添加体积为培养液体积的0.01%~1%,加入的荧光增白剂量较少,成本较低,且不会对细菌纤维素的分子量和生物相容性产生较大影响,对细菌纤维素的结晶度降低作用也比较明显。
综上,通过在细菌发酵过程中加入不同浓度的荧光增白剂,可以获得不同结晶度的细菌纤维素。因此可以通过在发酵过程中加入荧光增白剂来调控细菌纤维素的结晶度,本发明提供的降低细菌纤维素结晶度的方法简单,经济,且细菌纤维素的结晶度大小可控。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (9)
1.一种发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,包括以下步骤:
制备培养液,将细菌纤维素生产菌株接种到所述培养液中,然后在28℃~32℃静态发酵或者在100rpm~200rpm旋转发酵至100h~120h,在发酵过程初期向培养液中添加荧光增白剂,所述荧光增白剂为2,2’-(1,2-亚乙烯基)二[5-[[4-[二(2-羟乙基)氨基]-6-(苯氨基)-1,3,5-三嗪-2-基]氨基]]苯磺酸和伊文思蓝的混合物,发酵结束后,倒出培养液,得到细菌纤维素,所述荧光增白剂的体积为所述培养液体积的0.01%~1%。
2.如权利要求1所述的发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,在发酵0h~48h加入所述荧光增白剂。
3.如权利要求2所述的发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,在发酵0h~6h加入所述荧光增白剂。
4.如权利要求1所述的发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,在发酵0h~6h加入体积为所述培养液体积0.05%~1%的荧光增白剂。
5.如权利要求4所述的发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,在发酵0h~6h加入体积为所述培养液体积0.5%的荧光增白剂。
6.如权利要求1所述的发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,所述培养液的成分为:0.2~0.5g/mL葡糖糖,0.02~0.08g/mL蛋白胨,0.02~0.08g/mL酵母粉,0.005~0.02g/mL磷酸氢二钠,0.001~0.02g/mL硫酸镁,0.01~0.02g/mL硫酸铵,0.005~0.02mL/mL玉米糖浆提取液。
7.如权利要求1所述的发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,所述细菌纤维素生产菌株为木醋杆菌。
8.如权利要求7所述的发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,所述细菌纤维素生产菌株为保藏于美国菌种保藏中心的保藏编号为ATCC700178、ATCC53582或ATCC 53524的木醋杆菌。
9.如权利要求1所述的发酵过程中降低细菌纤维素结晶度的方法,其特征在于,所述荧光增白剂中2,2’-(1,2-亚乙烯基)二[5-[[4-[二(2-羟乙基)氨基]-6-(苯氨基)-1,3,5-三嗪-2-基]氨基]]苯磺酸的浓度为1g/L,伊文思蓝的浓度为0.5g/L。
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