CN103739325B - 一种利用中药药渣发酵的有机肥及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种利用中药药渣发酵的有机肥及其制备方法，所述有机肥由中药药渣、秸秆和麸皮经过真菌菌液、细菌菌液发酵制得，其中：中药药渣80-120份，秸秆40-100份，麸皮10-40份，真菌菌液1.5-8.0份，细菌菌液0.13-3.0份。本发明提供的有机肥中，有机质含量高于50%，NKP含量高于6%，达到并高于国标要求，能有效改善土壤性质，达到增产、增效、环保的多重目的。

Description

一种利用中药药渣发酵的有机肥及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种发酵肥料，具体涉及一种利用中药药渣发酵的有机肥及其制备方法。

背景技术

中草药是祖国传统医学的重要组成部分，新药的开发和中成药的生产，使中草药逐步走向世界。中药制药工业的进步日新月异，中药新药、新建药厂急剧增加，因此不可避免的，药厂主要固体废弃物——药渣的排放量也在与日俱增。据了解90%以上的中药制剂生产厂家均将药渣作为废料垃圾掩埋或焚烧，这样不仅占用了大量的土地，而且对地下水也有污染，其燃烧后产生大量的烟尘、二氧化碳等污染物，给大气环境也带来相当大的污染，同时也是一种严重的资源浪费。

以株洲千金药业股份有限公司为例，该公司生产妇科千金片、妇科千金胶囊等中成药制剂为主，其中：

妇科千金片，如CN98112696.0（授权公告号CN1078079C），公开了糖衣片或薄膜衣片的制备方法，具体为：9重量份的当归、党参、穿心莲，在粉碎机中粉碎成100目以上的细粉，按照至少93.3%的得粉率留取备用；选取9重量份的单面针及16重量份的金樱根、鸡血藤、十大功劳及千斤拔五味中药，将他们置于多功能提取罐中，加上热水并按每2小时提取一次的方法提取两次，过滤取液，同时将该提取液在三效浓缩器中浓缩成比重为1.08（80℃）的浸膏备用；将细粉与浸膏混匀制粒，并通过沸腾干燥机将其制成颗粒，经压片、包衣工序后制成糖衣片或薄膜衣片。

妇科千金胶囊，如CN99115683.8（授权公告号为CN1158087C）、CN99115682.X（授权公告号为CN1170549C），其中CN99115683.8的制备方法为：将9%的穿心莲和9%的当归一起用85%浓度的乙醇经加热回流法提取过滤，回收乙醇，并将滤液浓缩成清膏；将16%的功劳木和9%的单面针水煮提取，过滤脱渣以后将滤液浓缩成清膏；16%的千斤拔、16%的金樱根、16%的鸡血藤和9%的党参水煮提取，过滤脱渣取滤液，并将滤渣与穿心莲和当归的滤渣合并，再次水煮提取后，将两次所得滤后滤液合并，并浓缩成清膏，合并三种清膏，混匀、喷雾干燥、制粒、灌装即得胶囊；CN99115682.X的制备方法为：当归、党参、穿心莲和单面针的掺入量各为药材总量的9%；金樱根、鸡血藤、功劳木和千斤拔的掺入量各为药材总量的16%；其制备方法为：将当归用乙醇渗漉法提取制成清膏；将穿心莲用乙醇回流法提取制成清膏；将功劳木、单面针水煮提取两次，经过滤后将两者滤液合并制成清膏；将千斤拔、金樱根、鸡血藤和党参水煮提取一次后过滤，将过滤后的药渣与当归药渣、穿心莲药渣一起水煮，过滤，合并滤液并制成清膏，合并上述四种清膏，混匀、喷雾干燥、制粒、灌装，即得妇科千金胶囊。

中药药渣作为植物类废弃物，仍含有纤维素、蛋白质、多糖、残留药物成分等多种有效成分，充分利用废弃中药药渣资源有着重要的现实意义：一是废物利用，保护环境；二是节约工厂处理废弃物的费用；三是用中药药渣制成高附加值产品，使现有资源得到最大化的利用。

目前，中药药渣的资源化利用已越来越多的受到药企和社会各界的重视，开发的方向也逐渐丰富起来，例如将药渣开发为动物饲料、堆肥、发酵产沼气、制成活性炭等等。

中药药渣固态发酵生产蛋白饲料（王兵等，中药药渣固态发酵生产蛋白饲料，食品与生物技术学报，2007年7月，26卷（4）：77-82）公开了用白腐菌对药渣发酵的的方法。

张振宇等（张振宇等，六种食用菌中药药渣固体发酵及其粗多糖对NK细胞活性的影响，食用菌学报，2010，17（3）：46-50）揭示了六种食用菌如花脸香蘑、杏鲍菇、金针菇、香菇、白灵菇、杨树菇等6种食用菌进行中药药渣固体发酵。

CN201210438591.1（公开号为CN102919513A）公开了中药药渣、真菌发酵液、玉米秸秆、麸皮发酵的饲料，其中真菌发酵液为灵芝菌种、平菇、杏鲍菇。

中药药渣除了上述报道外，大多是与其他中药或食用菌等组合用于新的途径。

但目前资源化利用药渣的关键问题即简化开发工艺和降低开发成本，因此研究出易于操作、便捷生产的新型中药药渣发酵技术是当务之急。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用中药药渣发酵的有机肥。

本发明提供的一种利用中药药渣发酵的有机肥，所述有机肥由中药药渣、秸秆和麸皮经过真菌菌液、细菌菌液发酵制得。

具体的，所述有机肥中：中药药渣80-120份，秸秆40-100份，麸皮10-40份，真菌菌液1.5-8.0份，细菌菌液0.13-3.0份。

优选地，所述有机肥中：中药药渣100-120份，秸秆50-100份，麸皮10-40份，真菌菌液1.6-7.8份，细菌菌液0.15-2.6份。

进一步优选，所述有机肥中：中药药渣100-110份，秸秆63-88份，麸皮10-22份，真菌菌液1.8-4.4份，细菌菌液0.18-1.1份。

更进一步优选，所述有机肥中：中药药渣100-105份，秸秆75-80份，麸皮17-20份，真菌菌液3.0-4.0份，细菌菌液0.9-1.0份。

最优选，所述有机肥中：中药药渣100份，秸秆80份，麸皮20份，真菌菌液4.0份，细菌菌液1.0份。

上述有机肥中：

所述重量份可以是μg、mg、g、kg等生物医药领域公知的重量单位，也可以是其倍数，如1/10、1/100、10倍、100倍等。

所述中药药渣为千斤拔、金樱根、鸡血藤、单面针、功劳木、穿心莲、当归、党参中的一种或多种中药提取后剩余的残渣；

优选地，所述药渣为以下重量份的中药提取后剩余的残渣：当归8-12份、党参8-12份、穿心莲8-12份、单面针8-12份、功劳木12-18份、千斤拔12-18份、金樱根12-18份、鸡血藤12-18份；

进一步优选，所述药渣为妇科千金片或妇科千金胶囊制备过程中的制药残渣。

所述秸秆为水稻秸秆、玉米秸秆或小麦秸秆，优选为水稻秸秆。

所述真菌菌液为：黑曲霉与酵母菌或黑曲霉与绿色木霉，当真菌菌液为黑曲霉和酵母菌的组合物时，二者的重量比为3:7-7:3，优选为1:1；当真菌菌液为黑曲霉和绿色木霉的组合物时，二者的重量比为3:7-7:3，优选为1:1。

所述酵母菌优选为酿酒酵母。

所述真菌菌液，由以下方法制备：

1）真菌种子液的制备：取新鲜培养的黑曲霉平板和酵母菌平板或黑曲霉平板和绿色木霉平板，用无菌接种铲按照配比分别挖取菌种块投入新鲜PDA培养基，120-180rpm转速在30℃震荡培养40-60h即制成真菌种子液；

2）真菌菌液的制备：按照0.3%-0.8%的接种量将真菌种子液加入到PDA液体培养基中，保持温度30℃，120-180rpm转速的培养条件，培养2-5天，即得真菌菌液。

所述PDA培养基：马铃薯浸取液1.0L，葡萄糖20.0g，琼脂15.0g，pH值自然，于121℃灭菌20min。

菌种块与培养基的比例关系：200-400mlPDA培养液中，加入0.3cm×0.3cm的菌种块2-10块，以200ml的PDA培养基为例，加入0.3cm×0.3cm的菌种块2-5块。

所述细菌菌液为：用排渣区土壤细菌菌群发酵制备，具体由以下方法制备：

1）细菌种子液的制备：取排渣区旁边1-3米范围内的土壤1-5g（不包括被药渣覆盖的土壤），置于预先配置的LB培养基，以150-220rpm转速在37℃震荡10-30min，然后37℃静置15-30min，将上清液倒入另外新的LB培养基中，150-220rpm转速在37℃震荡培养20-30h，即制成细菌种子液；

2）细菌菌液的制备：按0.05%-0.2%的接种量，将细菌种子液加入到LB液体培养基中，保持温度37℃，150-220rpm转速的培养条件，培养土壤中的菌群0.5-3天，即得细菌菌液。

所述排渣区土壤为正常使用3年以上的排渣区排渣点旁1-3米范围内的排渣三年以上的土壤，不包括被药渣覆盖的土壤，优选为本发明中药药渣的排渣区土壤。

所述LB培养基（为Luria-Bertani培养基）：950ml去离子水中加入胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl10g，摇动容器直至溶质溶解，用5mol/LNaOH调pH至7.0，用去离子水定容至1L，于121℃灭菌20min。

所述细菌或真菌的接种量即：种子液量与新鲜培养基的体积比。

具体的，所述有机肥由以下方法制备：

1）收集中药药渣、秸秆和麸皮，分别粉碎成颗粒，粒径为0.4-0.8cm；

2）粉碎好的药渣在阳光下暴晒10-12小时；

3）暴晒后的药渣与秸秆、麸皮按配比混合，适当搅拌均匀；

4）喷洒配方量的真菌菌液，混合均匀后常温堆积发酵，5-10天翻堆一次，发酵3-5周；

5）喷洒配方量的细菌菌液，混合均匀后常温堆积发酵，3-5天翻堆一次，发酵3-4周，风干或烘干，即得。

上述方法中：

在发酵过程中要保证良好通风，注意加水保持发酵物料水分含量40%-50%。

所述步骤4）或5）的发酵终点，当物料颜色变为褐色或黑褐色，手握感觉柔软而有弹性，即可停止发酵。

所述步骤5）中风干或烘干的温度为40-50℃，含水量为10-15%；优选为50℃，含水量为15%。

本发明还提供了上述有机肥的制备方法，该方法包括以下步骤：

1）收集中药药渣、秸秆和麸皮，粉碎成颗粒，粒径为0.4-0.8cm；

2）粉碎好的药渣在阳光下暴晒10-12小时；

3）暴晒后的药渣与秸秆、麸皮按上述比例混合，适当搅拌均匀；

4）喷洒配方量的真菌菌液，混合均匀后常温堆积发酵，5-10天翻堆一次，发酵3-5周；

5）喷洒配方量的细菌菌液，混合均匀后常温堆积发酵，3-5天翻堆一次，发酵3-4周，风干或烘干，即得。

上述方法中：

在发酵过程中要保证良好通风，注意加水保持发酵物料水分含量40%-50%。

所述步骤4）或5）的发酵终点，当物料颜色变为褐色或黑褐色，手握感觉柔软而有弹性，即可停止发酵。

所述步骤5）中风干或烘干的温度为40-50℃，含水量为10-15%；优选为50℃，含水量为15%。

本发明还提供了上述肥料在制备用于中药材种植和蔬菜的肥料中的应用。

本发明提供的利用中药药渣发酵的有机肥具有以下优势：

1、有机肥的优势：

1）合理实现中药药渣的资源化利用；

2）采用微生物分步发酵，使物料的腐熟更彻底；

3）选用从排渣区土壤富集的细菌菌群对药渣进行二次发酵，木质纤维素降解效果更明显；

4）过程简单，操作方便，成本低廉。

2、与现有技术相比，优点在于：

首先，在制备方法上，本发明提供的方法采用两步发酵方式，一步发酵选择实验室筛选的降解能力强的真菌菌种进行，二步发酵中选用排渣区土壤中的细菌菌群进行（直接用不被药渣覆盖的排渣区旁边1-3米范围内的土壤中的细菌菌群进行，因为排渣过程中，会有大量的这种排渣土壤，这也是中药行业药渣的二次利用），该细菌菌群在较长期自然选择条件下，更能充分降解药渣，二者相配合可确保发酵过程中物料的降解更充分，便于养分更好地被吸收利用；

其次，主要采用中药药渣和秸秆为原料，充分利用了中药药渣及秸秆这两种工业、农业废弃物，既节约了药渣、秸秆再处理的费用，又降低了肥料生产成本；

第三，本技术工艺过程简单、卫生条件好控制，为实现工业化规模的生产应用提供了基础，满足产业化需求。

3、本发明提供的有机肥中，有机质含量高于50%，NKP含量高于6%（国家标准为：有机质含量30%，NKP含量4%），达到并高于国标要求，能有效改善土壤性质，达到增产、增效、环保的多重目的。

4、对本发明提供的有机肥进行肥效实验，结果表明，本发明的中药渣有机肥料可以促进蔬菜、中药材的生长，对黄瓜成熟期的缩短、产量的提高以及当归产量的提高具有明显的作用，并且效果均优于现有技术。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

所述酵母菌优选为酿酒酵母。

真菌菌液的制法为：

制法一：

1）真菌种子液的制备：取新鲜培养的黑曲霉平板和酵母菌平板（或黑曲霉平板和绿色木霉平板），以0.3cm×0.3cm的菌种块为单元，用无菌接种铲分别挖取黑曲霉平板2块、酵母菌平板（或绿色木霉平板）4.6块，投入400mlPDA培养基，120rpm转速在30℃震荡培养40h，即制成真菌种子液；

2）按照0.3%的接种量，将真菌种子液加入到PDA液体培养基中，保温30℃、120rpm震荡培养2天，即得真菌菌液。

制法二：

1）真菌种子液的制备：取新鲜培养的黑曲霉平板和酵母菌平板（或黑曲霉平板和绿色木霉平板），以0.3cm×0.3cm的菌种块为单元，用无菌接种铲分别挖取黑曲霉平板1块、酵母菌平板（或绿色木霉平板）1块，投入200mlPDA培养基，150rpm转速在30℃震荡培养56h，即制成真菌种子液；

2）按照0.5%的接种量，将真菌种子液加入到PDA液体培养基中，保温30℃、150rpm震荡培养4天，即得真菌菌液。

制法三：

1）真菌种子液的制备：取新鲜培养的黑曲霉平板和酵母菌平板（或黑曲霉平板和绿色木霉平板），以0.3cm×0.3cm的菌种块为单元，用无菌接种铲分别挖取黑曲霉平板2.3块、酵母菌平板（或绿色木霉平板）1块，投入200mlPDA培养基，180rpm转速在30℃震荡培养60h，即制成真菌种子液；

2）按照0.8%的接种量，将真菌种子液加入到PDA液体培养基中，保温30℃、180rpm震荡培养5天，即得真菌菌液。

所述PDA培养基：马铃薯浸取液1.0L，葡萄糖20.0g，琼脂15.0g，pH值自然，于121℃灭菌20min。

细菌菌液制法为：

制法一：

1）细菌种子液的制备：取不被药渣覆盖的排渣区旁1米范围内的土壤1g，置于预先配置的LB培养基，以150rpm转速在37℃震荡10min，然后37℃静置15min，将上清液倒入另外新的LB培养基中，150rpm转速在37℃震荡培养20h，即制成细菌种子液；

2）按照0.05%的接种量，将细菌种子液加入到LB液体培养基中，37℃、150rpm震荡培养0.5天，即得细菌菌液。

制法二：

1）细菌种子液的制备：取不被药渣覆盖的排渣区旁2米范围内的土壤2.5g，置于预先配置的LB培养基，以180rpm转速在37℃震荡20min，然后37℃静置20min，将上清液倒入另外新的LB培养基中，180rpm转速在37℃震荡培养25h，即制成细菌种子液；

2）按照0.15%的接种量，将细菌种子液加入到LB液体培养基中，37℃、180rpm震荡培养2天，即得细菌菌液。

制法三：

1）细菌种子液的制备：取不被药渣覆盖的排渣区旁3米范围内的土壤5g，置于预先配置的LB培养基，以220rpm转速在37℃震荡30min，然后37℃静置30min，将上清液倒入另外新的LB培养基中，220rpm转速在37℃震荡培养30h，即制成细菌种子液；

2）按照0.2%的接种量，将细菌种子液加入到LB液体培养基中，37℃、220rpm震荡培养3天，即得细菌菌液。

所述排渣区土壤为正常使用3年以上的排渣区排渣点旁1-3米范围内的排渣三年以上的土壤，不包括被药渣覆盖的土壤，该区域长期处于自然条件中，优选为株洲千金药业股份有限公司的排渣区土壤，其排渣时间为10年以上。

所述LB培养基（为Luria-Bertani培养基）：950ml去离子水中加入胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl10g，摇动容器直至溶质溶解，用5mol/LNaOH调pH至7.0，用去离子水定容至1L，于121℃灭菌20min。

实施例1：利用中药药渣发酵的有机肥

1、原料：中药药渣（为妇科千金片的制药废渣，其制备方法如CN1078079C）100kg、水稻秸秆50kg、麸皮12.5kg，黑曲霉和酵母菌混合的真菌菌液（真菌制法一）1.625kg、细菌菌液（细菌制法一）0.1625kg。

2、制备方法：

（1）收集中药药渣、水稻秸秆和麸皮，分别粉碎成颗粒，粒径为0.4cm；

（2）粉碎好的药渣在阳光下暴晒10小时；

（3）称取配方量的中药药渣100kg、水稻秸秆50kg与麸皮12.5kg混合，适当搅拌均匀；

（4）喷洒真菌菌液1.625kg，混合均匀后常温堆积发酵3周，5天翻堆一次；

（5）喷洒细菌菌液0.1625kg，混合均匀后常温堆积发酵，3天翻堆一次，发酵3周，风干或烘干；

（6）步骤（4）、（5）两步发酵过程中保证良好通风，当物料逐渐失水时注意加水保持发酵物料水分含量50%；当物料颜色变为褐色或黑褐色，手握感觉柔软而有弹性，即可停止发酵。

（7）将上述两步发酵后的有机肥风干或烘干，注意温度保持50℃，水分降至15%即可，进行包装，即得。

实施例2：利用中药药渣发酵的有机肥

1、原料：中药药渣（为妇科千金片的制药废渣，其制备方法如CN1078079C）110kg、水稻秸秆88kg、麸皮22kg，黑曲霉和绿色木霉混合的真菌菌液（真菌制法二）4.4kg、细菌菌液（细菌制法二）1.1kg。

2、制备方法：

（1）收集中药药渣、水稻秸秆和麸皮，分别粉碎成颗粒，粒径为0.5cm；

（2）粉碎好的药渣在阳光下暴晒12小时；

（3）称取配方量中药药渣110kg、水稻秸秆88kg与麸皮22kg混合，适当搅拌均匀；

（4）喷洒真菌菌液4.4kg，混合均匀后常温堆积发酵5周，7天翻堆一次；

（5）喷洒细菌菌液1.1kg，混合均匀后常温堆积发酵，3天翻堆一次，发酵3周，风干或烘干；

（6）步骤（4）、（5）发酵过程中保证良好通风，当物料逐渐失水时注意加水保持发酵物料水分含量50%；当物料颜色变为褐色或黑褐色，手握感觉柔软而有弹性，即可停止发酵。

（7）将上述两步发酵后的有机肥料风干或烘干，注意温度保持45℃，水分降至15%即可，进行包装，即得。

实施例3：利用中药药渣发酵的有机肥

1、原料：中药药渣（为妇科千金胶囊的制药废渣，其制备方法如CN1158087C）120kg、小麦秸秆100kg、麸皮40kg，黑曲霉和酵母菌混合的真菌菌液（真菌制法三）7.8kg、细菌菌液（细菌制法三）2.6kg。

2、制备方法：

（1）收集中药药渣、小麦秸秆和麸皮，分别粉碎成颗粒，粒径为0.8cm；

（2）粉碎好的药渣在阳光下暴晒11小时；

（3）称取配方量中药药渣120kg、小麦秸秆100kg与麸皮40kg混合，适当搅拌均匀；

（4）喷洒真菌菌液7.8kg，混合均匀后常温堆积发酵5周，10天翻堆一次；

（5）喷洒细菌菌液2.6kg，混合均匀后常温堆积发酵，5天翻堆一次，发酵4周，风干或烘干；

（6）步骤（4）、（5）发酵过程中保证良好通风，当物料逐渐失水时注意加水保持发酵物料水分含量45%；当物料颜色变为褐色或黑褐色，手握感觉柔软而有弹性，即可停止发酵。

（7）将上述两步发酵后的有机肥料风干或烘干，注意温度保持50℃，水分降至13%即可，进行包装，即得。

实施例4：利用中药药渣发酵的有机肥

1、原料：中药药渣（为妇科千金胶囊的制药废渣，其制备方法如CN1158087C）105kg、玉米秸秆63kg、麸皮10.5kg，黑曲霉和绿色木霉混合的真菌菌液（真菌制法一）1.8kg、细菌菌液（细菌制法二）0.18kg。

2、制备方法：

（1）收集中药药渣、玉米秸秆、麸皮，分别粉碎成颗粒，粒径为0.6cm；

（2）粉碎好的药渣在阳光下暴晒10.5小时；

（3）称取配方量中药药渣105kg、玉米秸秆63kg与麸皮10.5kg混合，适当搅拌均匀；

（4）喷洒真菌菌液1.8kg，混合均匀后常温堆积发酵4周，8天翻堆一次；

（5）喷洒细菌菌液0.18kg，混合均匀后常温堆积发酵，3天翻堆一次，发酵4周，风干或烘干；

（6）步骤（4）、（5）发酵过程中保证良好通风，当物料逐渐失水时注意加水保持发酵物料水分含量50%；当物料颜色变为褐色或黑褐色，手握感觉柔软而有弹性，即可停止发酵。

（7）将上述两步发酵后的有机肥料风干或烘干，注意温度保持50℃，水分降至15%即可，进行包装，即得。

实施例5：利用中药药渣发酵的有机肥

1、原料：中药药渣（为妇科千金胶囊的制药废渣，其制备方法如CN1170549C）105kg、水稻秸秆75kg、麸皮17kg，黑曲霉和酵母菌混合的真菌菌液（真菌制法二）3.0kg、细菌菌液（细菌制法一）0.9kg。

2、制备方法

（1）同实施例1；

（2）同实施例1；

（3）称取配方量中药药渣105kg、水稻秸秆75kg与麸皮17kg混合，适当搅拌均匀；

（4）喷洒真菌菌液3.0kg，混合均匀后常温堆积发酵5周，5天翻堆一次；

（5）喷洒细菌菌液0.9kg，5天翻堆一次，发酵3周，风干或烘干；

（6）-（7）同实施例1。

实施例6：利用中药药渣发酵的有机肥

1、原料：中药药渣（为妇科千金胶囊的制药废渣，其制备方法如CN1170549C）100kg、水稻秸秆80kg、麸皮20kg，黑曲霉和绿色木霉混合的真菌菌液（真菌制法二）4.0kg、细菌菌液（细菌制法二）1.0kg。

2、制备方法：

（1）同实施例1；

（2）同实施例1；

（3）称取配方量中药药渣100kg、水稻秸秆80kg与麸皮20kg混合，适当搅拌均匀；

（4）喷洒真菌菌液4.0kg，混合均匀后常温堆积发酵5周，7天翻堆一次；

（5）喷洒细菌菌液1.0kg，3天翻堆一次，发酵3周，风干或烘干；

（6）-（7）同实施例1。

对比例1：

参考王兵等在《食品与生物技术学报》发表的中药药渣固态发酵生产蛋白饲料的方法（2007年7月，26卷（4）：77-82），用白腐菌对药渣发酵，具体方法为：

1、药渣：采用与实施例6相同的药渣。

2、培养基：PDA培养基：马铃薯浸取液1.0L，葡萄糖20.0g，琼脂15.0g，pH值自然，于121℃灭菌20min，用于菌种培养。

固态发酵培养基：以中药药渣为唯一培养基质，添加一定量的水分，磷酸二铵及微量元素，配制成用于考察葡萄糖添加量、磷酸二铵添加量、料水质量比、初始pH值、发酵时间对发酵产物真蛋白和粗纤维含量的影响的不同培养基。

3、将菌种在PDA斜面培养基上活化3代后，制成一定浓度的孢子悬液，然后接种到固态发酵培养基中，在35-39℃静止培养一定时间后，55-65℃烘干。

对比例2：

参考张振宇等（张振宇等，六种食用菌中药药渣固体发酵及其粗多糖对NK细胞活性的影响，食用菌学报，2010，17（3）：46-50）写明的六种食用菌如花脸香蘑、杏鲍菇、金针菇、香菇、白灵菇、杨树菇等6种食用菌进行中药药渣固体发酵，具体方法为：

1、培养基质：加富PDA：马铃薯200.0g、葡萄糖20.0g、酵母粉3.5g、磷酸二氢钾2.0g、硫酸镁0.6g、琼脂10.0g，pH自然（pH7-8）；

中药药渣100kg，具体组成同实施例6，另加10kg麸皮、1kg蔗糖。

2、菌丝培养：六种供试菌种在加富PDA上活化后制成平板菌种，取直径5mm的菌块接种至中药渣培养料菌袋（含水量约65%，15cm×30cm菌袋，袋重850-1050g，pH自然），每袋接种8块，25℃、相对湿度50%，黑暗培养6天，干燥。

实验例1：有机肥的实验

对实施例1-6制备的有机肥和对比例1、2的发酵物进行检测：

1、有机肥中有机质含量的测定

检测方法：重铬酸钾容量法。

将0.5g样品粉末加入1mol/L重铬酸钾-硫酸溶液50mL，摇匀加入浓硫酸60mL，置于回流三角瓶中沸水中保温30min，每5min摇动一次，使样品充分氧化。取出冷却至室温，加水定容至250mL，加入2滴邻啡口罗琳指示剂，再逐滴将0.2mol/L硫酸亚铁溶液滴入上述溶液，当液体变为砖红色时，滴定结束，记录硫酸亚铁溶液用量。同样方法用0.5g二氧化硅代替样品加入测试体系，作为空白对照，计算样品中有机质含量。

2、全氮的测定

检测方法：精确称取0.5g样品粉末加入5.0mL硫酸和1.5mL过氧化氢，缓慢加热至硫酸冒烟；稍冷却后加15滴过氧化氢，加热10min；后多次重复第二步；至溶液接近无色，加热除去过氧化氢，定容至100mL，制成消煮液。同样方法，用二氧化硅粉末代替样品粉末，制成空白样品消煮液。消煮液加入硼酸溶液和指示剂，加热蒸馏，流出液用硫酸或盐酸滴定，计算肥料全氮含量。

3、全钾的测定：

检测方法：精确称取0.5g样品粉末加入5.0mL硫酸和1.5mL过氧化氢，缓慢加热至硫酸冒烟；稍冷却后加15滴过氧化氢，加热10min；后多次重复第二步；至溶液接近无色，加热除去过氧化氢，定容至100mL，制成消煮液。同样操作步骤，不加入样品粉末，制成空白样品消煮液。以火焰吸收法测定钾的火焰光度，与钾标准溶液绘制的火焰光度值标准曲线对比，计算出钾浓度。

4、全磷的测定：

检测方法：精确称取0.5g样品粉末加入5.0mL硫酸和1.5mL过氧化氢，缓慢加热至硫酸冒烟；稍冷却后加15滴过氧化氢，加热10min；后多次重复第二步；至溶液接近无色，加热除去过氧化氢，定容至100mL，制成消煮液。同样操作步骤，不加入样品粉末，制成空白样品消煮液。消煮液中加入二硝基酚指示剂，并以硫酸溶液和氢氧化钠溶液调节至微黄色，加入钼酸铵试剂，并按照绘制标准曲线的方法进行定容，在440nm处测定溶液吸光度值，与用磷标准溶液绘制的吸光度值标准曲线对比，计算出磷浓度。

5、检测结果：见表1

表1：有机质及NKP的含量检测

组别	有机质（%）	N(%)	K(%)	P(%)	NKP（%）
						实施例1	51.0	2.6	1.5	2.0	6.1
实施例2	52.0	2.5	1.7	2.1	6.3
						实施例3	52.0	2.5	1.6	2.1	6.2
实施例4	53.0	2.6	1.7	2.0	6.3
						实施例5	53.0	2.5	1.8	2.1	6.4
实施例6	55.0	2.6	1.8	2.1	6.5
						对比例1	42.6	1.8	1.3	1.6	4.7
对比例2	45.0	1.7	1.3	1.5	4.5

经检测：实施例1-6提供的有机肥料有机质平均含量可达52.7%，NKP含量平均达到6.3%，可有效改善土壤性质，并且堆置过程工艺简单，成本低廉，可达到增产、增效、环保的多重目的。

结果表明：通过与对照例方法比较，本技术制成有机肥的有机质含量和NKP含量平均值优于对比例，并且具有发酵周期短、简便易行、成本低廉的特点。

实验例2：肥效实验—蔬菜实验

1、实施地点：株洲千金药业食堂蔬菜基地

2、实施材料：本发明实施例1、6提供的中药药渣有机肥，按照对比例1、2方法制备的有机肥，黄瓜。

3、实施分组：试验设5组，分别为A1：本发明实施例1提供的有机肥组；A2：本发明实施例6提供的有机肥组；B1.按照对比例1方法制备的有机肥组；B2.按照对比例2方法制备的有机肥组；C.未施肥组；每个组别设置彼此分隔至少5m以上的4m×4m黄瓜种植地块各3块，每个地块上种植24株。

4、种植管理：各地块除肥料管理之外的的其他管理一致。A1、A2组每个地块施入12kg按照本发明实施例1、6方法制备的有机肥，肥料与土壤混合作基肥施入；B1、B2组每个地块施入12kg按照对比例1、2方法制备的有机肥，肥料与土壤混合作基肥施入。C组不施肥。各地块移入同一批萌发、生长至高15cm左右，茎粗0.25cm的幼苗，至第一次采摘记录每一地块植株幼苗移入至采瓜初期的时间，以及收获黄瓜的总重量。

5、实验结果：见表2-3

表2黄瓜幼苗从移入至采瓜初期的时间

注：a:相比于A1组，p<0.05，具有显著性差异；b:相比于A2组，p<0.05，具有显著性差异；c:相比于B1组，p<0.05，具有显著性差异；d:相比于B2组，p<0.05，具有显著性差异

表3：收获黄瓜总重量

注：a:相比于A1组，p<0.05，具有显著性差异；b:相比于A2组，p<0.05，具有显著性差异；c:相比于B1组，p<0.05，具有显著性差异；d:相比于B2组，p<0.05，具有显著性差异

由上可知：施用本发明有机肥可使黄瓜生长加快，采瓜初期所需的生长时间由未施肥组的42.3天减少至35天左右，相比对比例的生长也加快了3天；黄瓜产量（试验地块）由110.7kg提高到137kg以上，提高约23.7%，且相比于对比例的产量，提高了8%以上，增产效果更明显。

实验例3：肥效实验—药材实验

1、实施地点：株洲千金药业陇西药材基地

2、实施材料：本发明实施例6提供的中药药渣有机肥，按照对比例1方法制备的有机肥，当归。

3、实施分组：试验设5组，分别为A1：本发明实施例1提供的有机肥组；A2：本发明实施例6提供的有机肥组；B1.按照对比例1方法制备的有机肥组；B2.按照对比例2方法制备的有机肥组C.未施肥组；每个组别设置彼此分隔至少5m以上的5m×5m当归种植地块各3块，每个地块上种植180株。

4、种植管理：各地块除基肥施用之外的其他田间管理一致。。A1、A2组每个地块施入25kg按照本发明实施例1、6方法制备的有机肥，肥料与土壤混合作基肥施入；B1、B2组每个地块施入25kg按照对比例1、2方法制备的有机肥，肥料与土壤混合作基肥施入。C组不施肥。各地块移入无病染、无机械损伤、侧根少、大小均匀，中部直径为3mm左右的优质种苗，后均采用相同的田间管理至采挖期，记录每一地块收获的当归总重量（干重）。

5、实验结果：见表4

表4：收获当归总重量

注：a:相比于A1组，p<0.05，具有显著性差异；b:相比于A2组，p<0.05，具有显著性差异；c:相比于B1组，p<0.05，具有显著性差异；d:相比于B2组，p<0.05，具有显著性差异

表4结果显示：施用本发明有机肥可使当归产量（试验地块)由5.16kg提高到7.2kg以上，提高幅度超过40%，且相比于对比例的产量，提高超过16%，增产效果更明显。

上述实验是以实施例1、6提供的有机肥作为实验进行的，用其他实施例和配比进行实验，结果同实施例1、6。

试验总结：本发明的中药渣有机肥料可以促进蔬菜、中药材的生长，对黄瓜成熟期的缩短、产量的提高以及当归产量的提高具有明显的作用，并且效果均优于现有技术。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (12)

1.一种利用中药药渣发酵的有机肥，其特征在于，所述有机肥由中药药渣、秸秆和麸皮经过真菌菌液、细菌菌液发酵制得，其中：中药药渣80-120份，秸秆40-100份，麸皮10-40份，真菌菌液1.5-8.0份，细菌菌液0.13-3.0份，所述药渣为以下中药提取后剩余的残渣：当归、党参、穿心莲、单面针、功劳木、千斤拔、金樱根、鸡血藤；所述细菌菌液为：用排渣区土壤细菌菌群发酵制备；所述真菌菌液为：黑曲霉与酵母菌或黑曲霉与绿色木霉的组合；

所述真菌菌液由以下方法制备：

1)真菌种子液的制备：取新鲜培养的黑曲霉平板和酵母菌平板或黑曲霉平板和绿色木霉平板，用无菌接种铲按照配比分别挖取菌种块投入新鲜PDA培养基，120-180rpm转速在30℃震荡培养40-60h，即制成真菌种子液,所述PDA培养基：马铃薯浸取液1.0L，葡萄糖20.0g，琼脂15.0g，pH值自然，于121℃灭菌20min；

2)真菌菌液的制备：按照0.3％-0.8％的接种量将真菌种子液加入到PDA液体培养基中，保持温度30℃，120-180rpm转速的培养条件，培养2-5天，即得真菌菌液；

所述细菌菌液由以下方法制备：

1)细菌种子液的制备：取排渣区旁边1-3米范围内的土壤1-5g,不包括被药渣覆盖的土壤，置于预先配置的LB培养基，以150-220rpm转速在37℃震荡10-30min，然后37℃静置15-30min，将上清液倒入另外新的LB培养基中，150-220rpm转速在37℃震荡培养20-30h，即制成细菌种子液；

2)细菌菌液的制备：按0.05％-0.2％的接种量，将细菌种子液加入到LB液体培养基中，保持温度37℃，150-220rpm转速的培养条件，培养土壤中的菌群0.5-3天，即得细菌菌液；

所述有机肥的制备方法包括以下步骤：

1)收集中药药渣、秸秆和麸皮，粉碎成颗粒，粒径为0.4-0.8cm；

2)粉碎好的药渣在阳光下暴晒10-12小时；

3)暴晒后的药渣与秸秆、麸皮按配比混合，适当搅拌均匀；

4)喷洒配方量的真菌菌液，混合均匀后常温堆积发酵，5-10天翻堆一次，发酵3-5周；

5)喷洒配方量的细菌菌液，混合均匀后常温堆积发酵，3-5天翻堆一次，发酵3-4周，风干或烘干，即得。

2.根据权利要求1所述的有机肥，其特征在于，所述有机肥中：中药药渣100-120份，秸秆50-100份，麸皮10-40份，真菌菌液1.6-7.8份，细菌菌液0.15-2.6份。

3.根据权利要求1所述的有机肥，其特征在于，所述有机肥中：中药药渣100-110份，秸秆63-88份，麸皮10-22份，真菌菌液1.8-4.4份，细菌菌液0.18-1.1份。

4.根据权利要求1所述的有机肥，其特征在于，所述有机肥中：中药药渣100-105份，秸秆75-80份，麸皮17-20份，真菌菌液3.0-4.0份，细菌菌液0.9-1.0份。

5.根据权利要求1-4任一项所述的有机肥，其特征在于，所述药渣为以下重量份的中药提取后剩余的残渣：当归8-12份、党参8-12份、穿心莲8-12份、单面针8-12份、功劳木12-18份、千斤拔12-18份、金樱根12-18份、鸡血藤12-18份；

6.根据权利要求5所述的有机肥，其特征在于，所述药渣为妇科千金片或妇科千金胶囊制备过程中的制药残渣。

7.根据权利要求1-4任一项所述的有机肥，其特征在于，当真菌菌液为黑曲霉和酵母菌的组合物时，二者的重量比为3:7-7:3。

8.根据权利要求7所述的有机肥，其特征在于，当真菌菌液为黑曲霉和酵母菌的组合物时，二者的重量比为1：1。

9.根据权利要求1-4任一项所述的有机肥，其特征在于，当真菌菌液为黑曲霉和绿色木霉的组合物时，二者的重量比为3:7-7:3。

10.根据权利要求9所述的有机肥，其特征在于，当真菌菌液为黑曲霉和绿色木霉的组合物时，二者的重量比为1：1。

11.一种制备权利要求1-10任一项所述有机肥的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1)收集中药药渣、秸秆和麸皮，粉碎成颗粒，粒径为0.4-0.8cm；

2)粉碎好的药渣在阳光下暴晒10-12小时；

3)暴晒后的药渣与秸秆、麸皮按配比混合，适当搅拌均匀；

4)喷洒配方量的真菌菌液，混合均匀后常温堆积发酵，5-10天翻堆一次，发酵3-5周；

5)喷洒配方量的细菌菌液，混合均匀后常温堆积发酵，3-5天翻堆一次，发酵3-4周，风干或烘干，即得。

12.权利要求1-10任一项所述的有机肥在制备用于中药材种植和蔬菜的肥料中的应用。