CN103721071B - 一种玉露保肺丸的制备方法及应用 - Google Patents
一种玉露保肺丸的制备方法及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103721071B CN103721071B CN201310610969.6A CN201310610969A CN103721071B CN 103721071 B CN103721071 B CN 103721071B CN 201310610969 A CN201310610969 A CN 201310610969A CN 103721071 B CN103721071 B CN 103721071B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- baofei
- yulu
- bolus
- preparation
- radix
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 17
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 101000981253 Mus musculus GPI-linked NAD(P)(+)-arginine ADP-ribosyltransferase 1 Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 14
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims abstract description 11
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims abstract description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 15
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 9
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 7
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 229960004756 ethanol Drugs 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 3
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethoxybenzenecarbothioamide Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(N)=S WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QZKDXSOKZHLFHE-UHFFFAOYSA-N 4-(1,3-benzodioxol-5-yl)benzoic acid Chemical compound C1=CC(C(=O)O)=CC=C1C1=CC=C(OCO2)C2=C1 QZKDXSOKZHLFHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002953 Aphonia Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 229920002334 Spandex Polymers 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 208000031971 Yin Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 230000000954 anitussive effect Effects 0.000 description 1
- 229940124584 antitussives Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000010165 autogamy Effects 0.000 description 1
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012738 dissolution medium Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000004900 laundering Methods 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004759 spandex Substances 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 229960002385 streptomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供一种玉露保肺丸的制备方法，由天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g作为原料药，采用超临界萃取制备而成，使得含量有很大提高，服用量减少，本发明还提供了玉露保肺丸在制备抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖药物中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及中药制剂技术领域，具体涉及一种玉露保肺丸的制备方法及应用。
背景技术
玉露保肺丸记载于卫生部标准WS3-B-0238-90，处方为天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g，以上七味，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜70～90g制成大蜜丸，即得。能滋阴清热，润肺止嗽。用于阴虚咳嗽，失音声哑，口渴咽干，痰中带血。
现有技术中，尚未有玉露保肺丸在提取制备方面采用超临界技术的报道，而采用打粉的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。
发明内容
发明目的：为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种玉露保肺丸的制备方法。
本发明的另一个目的在于提供一种玉露保肺丸在制备抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖药物中的应用。
技术方案：本发明的目的是通过如下的方案实现的：
一种玉露保肺丸的制备方法，由天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g作为原料药制成，所述的方法由下列步骤组成：取天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO2流量1-3m1/g生药·min，萃取时间150-180min，得超临界萃取物，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜100g，制成大蜜丸，即得,每丸重4.5g。
上述一种玉露保肺丸的制备方法，所述CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。
上述一种玉露保肺丸的制备方法，所述CO2超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40℃，CO2流量2ml/g生药·min，萃取时间160min。
上述一种玉露保肺丸在制备抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖药物中的应用，玉露保肺丸由天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g作为原料药制成，制备方法由下列步骤组成：取天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO2流量1-3m1/g生药·min，萃取时间150-180min，得超临界萃取物，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜100g，制成大蜜丸，即得,每丸重4.5g。
上述玉露保肺丸在制备抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖药物中的应用，玉露保肺丸制备方法中所述CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。
上述玉露保肺丸在制备抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖药物中的应用，玉露保肺丸制备方法中所述CO2超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40℃，CO2流量2ml/g生药·min，萃取时间160min。
现有技术中，玉露保肺丸每丸9g，每次1-2丸，一日1-2次，采用本发明制备成的玉露保肺丸每丸4.5g，但含有的药材量和原来一样多，因此每次1-2丸，一日1-2次，在具有更多活性成分的条件下大大减少了服用量。
具体实施方式
以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
取天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力15MPa，温度30℃，CO2流量1m1/g生药·min，萃取时间150min，得超临界萃取物，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜100g，制成大蜜丸，即得,每丸重4.5g。
实施例2
取天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为6%，萃取压力30MPa，温度50℃，CO2流量3m1/g生药·min，萃取时间180min，得超临界萃取物，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜100g，制成大蜜丸，即得,每丸重4.5g。
实施例3
取天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力20MPa，温度40℃，CO2流量2m1/g生药·min，萃取时间160min，得超临界萃取物，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜100g，制成大蜜丸，即得,每丸重4.5g。
实施例4：玉露保肺丸抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖的实验研究资料
1实验材料
1.1实验用细胞株
小鼠淋巴瘤细胞YAC-1，南京医科大学实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。1.2实验药物
研究药物：本发明玉露保肺丸：按实施例3方法制备。
药液储液：称取100mg玉露保肺丸，溶于5ml无水乙醇中，0.2μm滤器过滤，500μldoff管分装，-20℃存储，同时0.2μm滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
1.3实验试剂
DMEM（GIBCO公司Cat.No.12100-061Lot.No.758137）；胎牛血清（浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419）；NaHCO3（上海久亿化学试剂有限公司Cat.No.11810-033Lot.No.1088387）；Trypsin（AMRESCO公司批号：2010/04）；EDTA（AMRESCO公司批号：2009/10）；PenicillinGSodiumSalt（AMRESCO公司批号：2010242）；StreptomycinSulfate（AMRESCO公司批号：2010382）；无水乙醇（南京化学试剂有限公司批号：080310182）；MTT(Biosharp批号：0793);PBS（实验室自配）；1.4实验器材
莱卡倒置显微镜（德国Leica型号：DM1L）；可见-紫外光微孔板检测仪（美国MD公司型号：SPECTRAMAX190）；CO2培养箱（FORMA型号：3111）；超净台（苏净集团安泰公司制造型号：SW-CJ-ZFD）；纯水仪（美国Spring公司型号：S/N020579）；精密移液器（法国吉尔森公司型号：P2）；电子天平（德国赛多利斯有限公司型号：BT323S）；全自动高压灭菌锅（日本SANYO公司型号：MLS-3020）；台式电热鼓风干燥箱（上海精密实验设备公司型号：DHG9123A）；冰箱（西门子公司型号：KG18V21TI）；液氮罐（CBS型号：2001）；低速离心机（上海安亭科学仪器厂型号：KA-1000）；0.2μm滤器（MILLIPORE型号：SLGP033RB）；10cm培养皿(NEST公司)、96孔培养板（NEST公司）；细胞计数板；离心管、移液管、Tips若干。
2实验方法
1）小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞用DMEM+10%FBS于37℃、5%CO2进行常规培养（10cm培养皿），当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3ml0.25%胰蛋白酶-0.04%EDTA，37℃消化2min后，向其中加入5ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转入离心管中，1000rpm离心5min，调整细胞悬液浓度3×104个/ml。
2）将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180μl，培养板放入细胞培养箱中（37℃，5%CO2）常规培养。
3）根据细胞生长情况，一般长至50%-70%，加入玉露保肺丸溶液，继续培养24h。
4）24h后加入20μlMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4h。
5）4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。
6）同时设置本底（不加细胞，只加培养液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜），每组设定6个复孔。
7）结果以药物对细胞的抑制率表示：
细胞增值抑制率（%）=（对照孔OD值-给药孔OD值）/对照孔OD值×100%。实验重复3次。
3统计处理
采用MicrosoftExcel2003软件中的相关分析和Studentt检验，数据以mean±S.D.表示。
4实验结果
MTT法实验后统计结果显示，与对照组比较，当剂量达到5mg/ml时，对小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖抑制有差异（P<0.05），剂量在10mg/ml时该差异具有显著性（P<0.01），当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异（P<0.001）。
表1玉露保肺丸对小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖抑制影响研究(X±SD)
注：与对照组比较，*P<0.01；**P<0.001
5实验结论
玉露保肺丸可以抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖，减少小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞的细胞生长数目，该作用呈剂量依赖性。
Claims (3)
1.一种玉露保肺丸在制备抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖药物中的应用，其特征在于玉露保肺丸由天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g作为原料药制成，制备方法由下列步骤组成：取天冬120g、麦冬120g、石斛80g、地黄80g、熟地黄80g、知母40g、黄柏40g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6％，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO2流量1-3m1/g生药·min，萃取时间150-180min，得超临界萃取物，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜100g，制成大蜜丸，即得,每丸重4.5g。
2.根据权利要求1所述一种玉露保肺丸在制备抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖药物中的应用，其特征在于玉露保肺丸制备方法中所述CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5％。
3.根据权利要求1所述一种玉露保肺丸在制备抑制小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞增殖药物中的应用，其特征在于玉露保肺丸制备方法中所述CO2超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40℃，CO2流量2ml/g生药·min，萃取时间160min。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310610969.6A CN103721071B (zh) | 2013-11-26 | 2013-11-26 | 一种玉露保肺丸的制备方法及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310610969.6A CN103721071B (zh) | 2013-11-26 | 2013-11-26 | 一种玉露保肺丸的制备方法及应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103721071A CN103721071A (zh) | 2014-04-16 |
| CN103721071B true CN103721071B (zh) | 2016-04-20 |
Family
ID=50445532
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310610969.6A Active CN103721071B (zh) | 2013-11-26 | 2013-11-26 | 一种玉露保肺丸的制备方法及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103721071B (zh) |
-
2013
- 2013-11-26 CN CN201310610969.6A patent/CN103721071B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103721071A (zh) | 2014-04-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103495117B (zh) | 一种消栓通络片的制备方法及应用 | |
| CN103494885B (zh) | 一种通窍鼻炎片的制备方法及应用 | |
| CN103536739A (zh) | 一种左归丸的制备方法及应用 | |
| CN103599292B (zh) | 一种归芍六君丸的制备方法及应用 | |
| CN103520446B (zh) | 一种正骨紫金丸的制备方法及应用 | |
| CN103479749B (zh) | 一种葛根芩连片的制备方法及应用 | |
| CN103494915B (zh) | 一种乳块消片的制备方法及应用 | |
| CN103656600B (zh) | 一种十二温经丸的制备方法及应用 | |
| CN103505517B (zh) | 一种安胃片的制备方法及应用 | |
| CN103721136B (zh) | 一种咽炎片的制备方法及应用 | |
| CN103721071B (zh) | 一种玉露保肺丸的制备方法及应用 | |
| CN103536654B (zh) | 一种川芎茶调丸的制备方法及应用 | |
| CN103536691B (zh) | 一种五味子丸的制备方法及应用 | |
| CN104922227A (zh) | 一种元和正胃片的制备方法及应用 | |
| CN104887814A (zh) | 一种参芪五味子胶囊的制备方法及应用 | |
| CN103494930B (zh) | 一种复方鱼腥草片的制备方法及应用 | |
| CN103585615B (zh) | 一种丁蔻理中丸的制备方法及应用 | |
| CN103599217B (zh) | 一种咳喘丸的制备方法及应用 | |
| CN103520266B (zh) | 一种藿胆丸的制备方法及应用 | |
| CN103536725B (zh) | 一种不换金正气散的制备方法及应用 | |
| CN103494857B (zh) | 一种舒胸片的制备方法及应用 | |
| CN103623212B (zh) | 一种固本丸的制备方法及应用 | |
| CN103520296B (zh) | 一种精制冠心颗粒的制备方法及应用 | |
| CN103638489B (zh) | 一种补肾丸的制备方法及应用 | |
| CN103610857B (zh) | 一种归红跌打丸的制备方法及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Li Jian Inventor after: Cao Guangchao Inventor after: Wang Lijun Inventor after: Li Jun Inventor after: Guo Zhongping Inventor before: Gao Zhongqing |
|
| COR | Change of bibliographic data | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20170614 Address after: 226500 Yang Zhuangju, Dong Chen Town, Rugao City, Jiangsu, Nantong Patentee after: Rugao Ding Bei hospital Address before: Industrial Park No. 87 Yu Bridge 255086 Shandong province Zibo high tech Zone Wanjie Road Room 301 Patentee before: Zibo Qidingli Patent Information Consulting Co., Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20191204 Address after: Room 306, building 3, business center, No. 82, Huayuan West Road, Chuzhou, Anhui Patentee after: Chuzhou Tianshun productivity promotion Co. Ltd. Address before: 226500 Yang Zhuangju, Dong Chen Town, Rugao City, Jiangsu, Nantong Patentee before: Rugao Ding Bei hospital |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20211209 Address after: 255000 rooms 1608 and 1610, main building, scientific research center, biomedical park, No.1 Lutai Avenue, high tech Zone, Zibo City, Shandong Province Patentee after: SHANDONG YI YAN HERBAL BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Address before: 239000 incubation workshop, room 306, building 3, entrepreneurship center, No.82 Huayuan West Road, Chuzhou City, Anhui Province Patentee before: CHUZHOU TIANSHUN PRODUCTIVITY PROMOTION Co.,Ltd. |