CN103664938A - 含有嘧啶并环的syk抑制剂 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及通式（Ⅰ）所示含有嘧啶并环的SYK抑制剂、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物，其中X、Y、R¹、R²、R³、R⁴如说明书中所定义；本发明还涉及这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物制剂，以及这些化合物在制备治疗和/或预防由syk介导的信号通路有关的疾病的药物中的应用。

Description

含有嘧啶并环的SYK抑制剂

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及含有嘧啶并环的SYK抑制剂，其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物，这些化合物的制备方法和含有这些化合物的药物制剂，以及这些化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物在制备治疗和/或预防由syk介导的信号通路有关的疾病的药物中的应用。 

背景技术

蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinases，PTKs)是一组能催化底物蛋白酪氨酸残基磷酸化的蛋白酶，参与许多信号转导途径，并在控制细胞分化、增殖和扩散中起重要作用。根据PTKs家族成员的细胞拓扑结构的不同，可将其分为受体型和非受体型。配体与PTKs受体的胞膜外区结合，激活其胞内酪氨酸激酶区域，触发特定的信号转导途径。胞内非受体型的PTKs作为信号转导成员，在配体结构缺乏内源性PTKs结构的跨膜受体等许多方面发挥着重要作用。 

Syk是一种可溶性的非受体型酪氨酸激酶。由Taniguchi在1991年从猪脾cDNA克隆出来。人类Syk编码基因为Syk基因，位于人类染色体9q²²，蛋白质分子量为72KD，由629个氨基酸组成，在B细胞的成熟和活化过程中起关键性作用。 

Syk是B细胞抗原受体(BCR)信号转导途径的重要影响因子之一。BCR激活后，依赖Syk的信号转导途径调整B细胞克隆的表达、分化或凋亡。Syk是B细胞激活信号转导过程中最重要的激酶，该酶含有2个Src同源功能区SH2(N)和SH2(C)，因而成为免疫酪氨酸受体激活基序(immunoreceptor tyrosine-based activation motif，ITAM)磷酸化招募的首选对象。被招募的Syk立即成为Src作用的第2个靶目标，进而启动B细胞活化信号转导的3条主要途径(磷脂酰肌醇途径、MAP激酶相关途径和磷酸肌醇3-激酶途径)。磷脂酶C(PLC)-γ2，磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是Syk酪氨酸磷酸化的关键底物。在B细胞内，Syk磷酸化PLC-γ2引起ERK和JNK激酶的级联激活，而PI3-K被Syk磷酸化后介导Akt活化。Syk优先磷酸化微管蛋白的a亚单位，该亚单位被认为可以调节细胞骨架微管蛋白使之作为组装信号转导复合体的支架。最终激活各自的转录因子转位进入细胞核，与基因启动子区域中各种顺式作用元件或DNA小盒结合，使相应的基因发生转录激活和产物表达。 

ITAM介导的信号事件是使免疫细胞中传统免疫受体例如T细胞受体、B细胞受体、Fc受体和血小板中GPVI等被引发的激活信号传递至下游细胞内分子例如syk的关键因素。 

Syk抑制剂可抑制syk的酪氨酸激酶活性，控制肥大细胞、嗜碱性粒细胞和其他免疫细胞中信号激活，从而抑制炎性反应相关的细胞介质释放，因此对炎症疾病有广泛的治疗前景，例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化、溶血性贫血、免疫性血小板减少性紫癜、肝素引起的血小板减少症和动脉粥样硬化。 

类风湿关节炎是一种常见的关节病，发病率和致残率很高。由于目前还没有根治类风湿的办法，因此被称为“不死的癌症”。现有治疗药物主要有非甾体抗炎药，类固醇类，但这些药物的副作用大，不能满足临床的长期使用需求。此外，目前在类风湿药物上的最新进展是应用一些生物制剂，如TNF-α抑制剂，IL-1β拮抗剂，虽然病人的耐受性好，但其价格高，难以广泛推广。综上，临床上仍需副作用小、价格便宜的新作用机制的类风湿性关节炎治疗药物。因此，急需研究治疗效果好的新的Syk抑制剂。 

发明内容

本发明的技术方案如下： 

通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物: 

其中，X选自6-10元芳基、5-6元杂芳单环基或9-10元杂芳双环基； 

R¹选自氢原子或5-6元杂芳单环基， 

R¹可任选被1-3个取代基进一步取代，所述取代基独立地选自C_1-8烷基、C_2-8烯基、C_2-8炔基、氨基、羟基、C_1-8烷氧基、卤素原子、C_1-8烷基胺基、二(C_1-8烷基)胺基、C_1-8烷基羰基、氨基甲酰基、C_1-8烷基羰基氨基、C_1-8烷基胺基甲酰基、氨基C_1-8烷基、羟基C_1-8烷基、氰基、卤代C_1-8烷基、卤代C_1-8烷氧基或氨基磺酰基； 

R²选自氢原子或C_1-8烷基； 

R³、R⁴独立地选自氢原子、氰基、C_1-8烷基、羟基C_1-8烷基、氨基C_1-8烷基或C_3-8环烷基； 

Y选自C_3-8环烷基、C_3-8环烷基C_1-8烷基、4-8元杂环烷基、4-8元杂环烷基C_1-8烷基或 

Z为氧原子或硫原子， 

f为整数1、2或3， 

R⁵为氢原子、C_1-8烷基或C_3-8环烷基， 

R⁶和R⁷独立地选自氢原子、C_1-8烷基、羟基C_1-8烷基、卤代C_1-8烷基、氨基、C_1-8烷基胺基、C_1-8烷氧基C_1-8烷基或C_3-8环烷基， 

或Y与R²连接与氮原子一起形成4-8元杂环烷基， 

Y或Y与R²连接与氮原子一起形成的基团可进一步被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自氨基、羟基、氧代、C_1-8烷基、C_1-8烷基胺基、二(C_1-8烷基)胺基、氨基C_1-8烷基、羧基、C_1-8烷基胺基C_1-8烷基、C_1-8烷氧基C_1-8烷基、羟基C_1-8烷基、羧基C_1-8烷基、氨基甲酰基或C_1-8烷基羰基。 

通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物的优选方案为： 

其中，X选自苯基、5-6元杂芳单环基或9-10元杂芳双环基； 

R¹选自氢原子或5-6元杂芳单环基； 

R¹可任选被1-3个取代基进一步取代，所述取代基独立地选自C_1-6烷基、氨基、羟基、C_1-6烷氧基、卤素原子、氨基C_1-6烷基、氰基或卤代C_1-6烷基； 

R²选自氢原子或C_1-6烷基； 

R³、R⁴独立地选自氢原子或C_1-6烷基； 

Y选自C_4-6环烷基、C_4-6环烷基C_1-6烷基、4-6元杂环烷基、4-6元杂环烷基C_1-6烷基或 

Z为氧原子， 

f为整数1、2或3， 

R⁵为氢原子或C_1-6烷基， 

R⁶和R⁷独立地选自氢原子、C_1-6烷基或卤代C_1-6烷基， 

或Y与R²连接与氮原子一起形成4-6元杂环烷基， 

Y或Y与R²连接与氮原子一起形成的基团可进一步被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自氨基、羟基、氧代、C_1-6烷基、C_1-6烷基胺基、二(C_1-6烷基)胺基、氨基C_1-6烷基或羧基。 

通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物： 

其中，X选自苯基、5-6元杂芳单环基或9-10元杂芳双环基； 

R¹选自氢原子或5-6元杂芳单环基； 

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或C_1-6烷基； 

Y选自

Z为氧原子，f为整数1， 

R⁵为氢原子或C_1-6烷基， 

R⁶和R⁷独立地选自氢原子、C_1-6烷基或卤代C_1-6烷基。 

通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物的优选方案为： 

其中，X选自苯基或喹啉基； 

R¹选自氢原子、1，2，3-三氮唑基、1，2，4-三氮唑基或吡唑基； 

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或甲基； 

Y选自

Z为氧原子，f为整数1， 

R⁵为氢原子或甲基， 

R⁶和R⁷独立地选自氢原子、甲基、乙基、丙基或异丁基。 

通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物： 

其中，X选自苯基或5-6元杂芳单环基； 

R¹选自5-6元杂芳单环基； 

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或C_1-6烷基； 

Y选自C_4-6环烷基、C_4-6环烷基C_1-3烷基、5-6元杂环烷基或5-6元杂环烷基C_1-3烷基，所述“C_4-6环烷基、C_4-6环烷基C_1-3烷基、5-6元杂环烷基或5-6元杂环烷基C_1-3烷基”中的“C_4-6环烷基或5-6元杂环烷基”上的碳原子可被氧代， 

Y可进一步被1个取代基取代，所述取代基选自氨基、C_1-6烷基胺基、二(C_1-6烷基)胺基、羟基、羧基或C_1-6烷基。 

通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物的优选方案为： 

其中，X选自苯基或吡啶基； 

R¹选自1，2，3-三氮唑基、1，2，4-三氮唑基或吡唑基； 

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或甲基； 

Y选自环戊烷基、环己烷基、吡咯烷基、哌啶基、6-氧代哌啶-3-基、2-氧代吡咯烷-3-基、 5-氧代吡咯烷-2-基、环戊烷甲基、环己烷甲基、吡咯烷甲基、哌啶甲基、6-氧代哌啶-3-基甲基、2-氧代吡咯烷-3-基甲基或5-氧代吡咯烷-2-基甲基， 

Y可进一步被1个取代基取代，所述取代基选自氨基、甲基胺基或二(甲基)胺基。 

通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物： 

其中，X选自9-10元杂芳双环基； 

R¹选自氢原子； 

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或C_1-6烷基； 

Y选自C_4-6环烷基、C_4-6环烷基C_1-3烷基、5-6元杂环烷基或5-6元杂环烷基C_1-3烷基， 

Y可进一步被1个取代基取代，所述取代基选自氨基、C_1-6烷基胺基、二(C_1-6烷基)胺基、羟基、羧基或C_1-6烷基。 

通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物的优选方案为： 

其中，X选自喹啉基、吲唑基、苯并噻唑基或2，3-二氢苯并[b][1，4]二噁烷基； 

R¹选自氢原子； 

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或甲基； 

Y选自环戊烷基、环己烷基、吡咯烷基或哌啶基， 

Y可进一步被1个取代基取代，所述取代基选自氨基、甲基胺基或二(甲基)胺基。 

进一步优选化合物如下： 

在本发明中，术语“卤素原子”指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。 

在本发明中，术语“C_1-8烷基”指含有1-8个碳原子的直链或支链的烷基，其中包括例如“C_1-6烷基”、“C_1-4烷基”、“C_1-3烷基”、“C_2-4烷基”、“C_2-5烷基”等，其实例包括但不限于例如甲基、 乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、1，1-二甲基乙基、正戊基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、正己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3，3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1，2-二甲基丙基、庚基、辛基等。 

在本发明中，术语“C_2-8烯基”是指含有双键的碳原子数为2-8的直链或支链的烯基，其中包括例如“C_2-6烯基”、“C_2-4烯基”、“C_2-5烯基”、“C_2-3烯基”等；其实例包括但不限于例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-甲基乙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-甲基-1-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-甲基-1-丁烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、1-甲基-2-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-甲基-3-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、3-甲基-3-丁烯基、1，1-二甲基-2-丙烯基、1，2-二甲基-1-丙烯基、1，2-二甲基-2-丙烯基、1-乙基-1-丙烯基、1-乙基-2-丙烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、1-甲基-1-戊烯基、2-甲基-1-戊烯基、3-甲基-1-戊烯基、4-甲基-1-戊烯基、1-甲基-2-戊烯基、2-甲基-2-戊烯基、3-甲基-2-戊烯基、4-甲基-2-戊烯基、1-甲基-3-戊烯基、2-甲基-3-戊烯基、3-甲基-3-戊烯基、4-甲基-3-戊烯基、1-甲基-4-戊烯基、2-甲基-4-戊烯基、3-甲基-4-戊烯基、4-甲基-4-戊烯基、1，1-二甲基-2-丁烯基、1，1-二甲基-3-丁烯基、1，2-二甲基-1-丁烯基、1，2-二甲基-2-丁烯基、1，2-二甲基-3-丁烯基、1，3-二甲基-1-丁烯基、1，3-二甲基-2-丁烯基、1，3-二甲基-3-丁烯基、2，2-二甲基-3-丁烯基、2，3-二甲基-1-丁烯基、2，3-二甲基-2-丁烯基、2，3-二甲基-3-丁烯基、3，3-二甲基-1-丁烯基、3，3-二甲基-2-丁烯基、1-乙基-1-丁烯基、1-乙基-2-丁烯基、1-乙基-3-丁烯基、2-乙基-1-丁烯基、2-乙基-2-丁烯基、2-乙基-3-丁烯基、1，1，2-三甲基-2-丙烯基、1-乙基-1-甲基-2-丙烯基、1-乙基-2-甲基-1-丙烯基、1-乙基-2-甲基-2-丙烯基、1，3-丁二烯、1，3-戊二烯、1，4-戊二烯、1，4-己二烯等。 

在本发明中，术语“C_2-8炔基”是指含有三键的碳原子数为2-8的直链或支链的炔基，其中包括例如“C_2-6炔基”、“C_2-5炔基”、“C_2-4炔基”、“C_2-3炔基”等，其实例包括但不限于例如乙炔基、2-丙炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、1-甲基-3-丁炔基、2-甲基-3-丁炔基、1，1-二甲基-2-丙炔基、1-乙基-2-丙炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基、5-己炔基、1-甲基-2-戊炔基、1-甲基-3-戊炔基、1-甲基-4-戊炔基、2-甲基-3-戊炔基、2-甲基-4-戊炔基、3-甲基-4-戊炔基、4-甲基-2-戊炔基、1，1-二甲基-2-丁炔基、1，1-二甲基-3-丁炔基、1，2-二甲基-3-丁炔基、2，2-二甲基-3-丁炔基、1-乙基-2-丁炔基、1-乙基-3-丁炔基、2-乙基-3-丁炔基、1-乙基-1-甲基-2-丙炔基等。 

在本发明中，术语“C_1-8烷氧基”是指以“C_1-8烷基-O-”方式连接的基团，“C_1-8烷基”的定义如 前文所述；其中包括例如“C_1-6烷氧基”、“C_1-4烷氧基”、“C_1-3烷氧基”、“C_2-4烷氧基”、“C_2-5烷氧基”等。 

在本发明中，术语“氧代”是指氧原子以双键形式连接在被取代的原子上。 

在本发明中，术语“C_3-8环烷基”指含有3-8个碳原子的环烷基，其中包括例如“C_3-6环烷基”、“C_4-6环烷基”、“C_5-6环烷基”等，其实例包括但不限于例如环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基等。 

在本发明中，术语“卤代C_1-8烷基”、“卤代C_1-8烷氧基”指一至多个“卤素原子”取代前文定义的“C_1-8烷基”、“C_1-8烷氧基”所衍生的基团，优选为氯代或氟代。 

在本发明中，术语“4-8元杂环烷基”指C_4-8环烷基中的一至多个碳原子被S、O、N、S(O)或S(O)₂替换所衍生的基团，其中包括例如“5-8元杂环烷基”、“5-6元杂环烷基”、“4-6元杂环烷基”等，其实例包括但不限于例如硫杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、四氢噻吩基、1，3-二氧杂环戊烷基、1，3-二硫杂环戊烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、1，4-二氧杂环己烷基、1，3-二氧杂环己烷基、哌嗪基等。 

在本发明中，术语“6-10元芳基”是指环原子全部为碳原子的6-10元环状芳香基团，包括6-8元单环芳基和8-10元稠环芳基。6-8元单环芳基是指全部不饱和的芳基，例如苯基、环辛四烯基等。8-10元稠环芳基是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的碳原子所形成的至少有一个环为不饱和的芳香环的稠环基团，包括8-10元不饱和稠环芳基，例如萘等，还包括8-10元部分饱和稠环芳基，例如苯并C_3-6环烷基、苯并C_4-6环烯基，具体实例如2，3-二氢-1H-茚基、1H-茚基、1，2，3，4-四氢萘基、1，4-二氢萘基等。 

本发明所述“5-6元杂芳单环基”，是指具有5-6个环原子的芳香性基团，并且环原子中含有1-4个杂原子，所述杂原子选自N、O或S。具体的实例包括但不限于：呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、噻二唑基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、三氮唑（如1，2，3-三氮唑、1，2，4-三氮唑等）、吡啶基、嘧啶基、1，4-二氧杂环己二烯基、2H-1，2-噁嗪基、4H-1，2-噁嗪基、6H-1，2-噁嗪基、4H-1，3-噁嗪基、6H-1，3-噁嗪基、4H-1，4-噁嗪基、哒嗪基、吡嗪基、1，2，3-三嗪基、1，2，4-三嗪基、1，3，5-三嗪基和1，2，4，5-四嗪基。 

本发明所述“9-10元杂芳双环基”，是指含有9-10个环原子（其中至少含有一个杂原子，所述杂原子选自N、O或S）的稠环基团， 

本发明要求保护式（Ⅰ）化合物的制备方法，式（Ⅰ）化合物可以采用下述流程中描述的方法和/或本领域普通技术人员已知的其它技术来合成，但不仅限于以下方法。 

反应方程式： 

其中，原料2：NH₂XR¹，原料3：YNHR²。 

反应步骤： 

步骤1：原料1和原料2，碱（例如三乙胺、DIEA、碳酸钾、碳酸钠、乙酸钠等）溶于极性溶剂中，加热反应结束。将溶剂蒸干后剩余物溶于有机溶剂，用水洗涤，干燥后浓缩经硅胶柱分离得中间体1。 

步骤2：将中间体1和碱（例如NaOH、LiOH、KOH等）溶于极性溶剂和水混合溶液中，室温下反应至原料消失。浓缩后，加水，酸化，过滤，固体干燥后得中间体2。 

步骤3：将中间体2溶于有机溶剂中，缓慢滴加草酰氯，室温下反应至原料消失，将溶剂蒸干。将剩余物重新溶于有机溶剂中，缓慢滴加氨水，室温下反应至结束。或将中间体2溶于有机溶剂中，加入HATU和三乙胺。室温下搅拌反应，加入氨水，室温下反应至结束。加水，用有机溶剂萃取，干燥，浓缩，固体经硅胶柱分离得中间体3。 

步骤4：将中间体3溶于DMF中，滴加LiHMDS，加热至回流反应至结束，或将中间体3溶于DMF-DMA和DMF溶液中，加热反应至结束，将溶剂蒸干，再溶于醋酸中，加热反应至结束。将剩余物加水，萃取，干燥，浓缩后得中间体4。 

步骤5：将中间体4溶于有机溶剂中，加入m-CPBA，室温下反应至原料消失。反应液用饱和碳酸氢钠淬灭，萃取，干燥，浓缩后得中间体5。 

步骤6：将中间体5，有机碱（例如三乙胺，DIEA等）溶于有机溶剂中，冰水浴滴加原料3，室温下反应至结束，加水，萃取，干燥浓缩后经硅胶柱分离得式（Ⅰ）化合物。 

以上反应方程式中的X、Y、R¹、R²、R³、R⁴如前文所定义。必要时，可对需要保护的官 能团进行保护，此后通过常规方法脱去保护基团；必要时，可根据化合物的性质，对反应溶剂进行适当的替换；必要时，根据化合物的性质，可省去某些化合物或者增加某些化合物的制备。 

本发明上述任一化合物“药学上可接受的盐”包括根据本文中所述化合物上存在的特定取代基采用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐。当本发明化合物含相对酸性的官能团时，可通过使中性形式的这种化合物与足量的需要的碱单独或在合适的惰性溶剂中接触得到碱加成盐。由药学上可接受的无机碱衍生的盐的实例包括铝、铵、钙、铜、三价铁、亚铁、锂、镁、锰、二价锰、钾、钠、锌等。由药学上可接受的有机碱衍生的盐包括伯、仲和叔胺的盐，它们包括取代的胺、环胺、天然胺等，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、甲基葡糖胺、组氨酸、赖氨酸、异丙胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。当本发明化合物含有相对碱性的官能团时，可通过使中性形式的这种化合物与足量的需要的酸单独或在合适的惰性溶剂中接触得到酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括由无机酸衍生的盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氢碘酸盐或亚磷酸盐等；由相对无毒的有机酸衍生的盐，所述的有机酸为例如乙酸、丙酸、异丁酸、丙二酸、苹果酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃酸、苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等。还包括氨基酸例如精氨酸等的盐以及有机酸例如葡糖醛酸或半乳糖酸等的盐。本发明某些化合物含有碱性或酸性官能团，使得化合物可以转化为碱或酸加成盐。 

本发明还包括式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐的立体异构体。本发明式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐由于存在手性分子，可以以一种旋光异构体形式存在，因此，本发明还包括这些旋光异构体及其混合物。本发明式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐若含有双键或小环结构时，由于分子中双键或环的原子间的键的自由旋转受阻碍，存在不同的空间排列方式而产生立体异构体，又称顺反异构体，本发明还包括这些顺反异构体及其混合物。本发明还包括由于单键的旋转，使得连接在碳上的原子或原子团在空间的排布位置随之发生变化产生的立体异构体，又称构象异构，还包括其混合物。 

本发明的含有上述式（I）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物作为有效成分的药物组合物的给药方式，可以例举通过片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂等的口服给药，或者通过静脉注射剂、肌肉注射剂、注射用无菌粉末、注射用浓溶液、栓剂、吸入剂、经皮吸收剂、滴眼剂、滴鼻剂等的非口服给药。另外，配制上述各种剂型的药物 制剂时，可以单独使用该有效成分，或者与其他可药用载体，即赋形剂、粘结剂、增量剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂、分散剂、缓冲剂、矫味剂、香料、包膜剂、稀释剂等适当组合，采用常规方法制成药物制剂。 

发明还提供了通式(Ⅰ)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物在制备治疗和/或预防由syk介导的信号通路有关的疾病的药物中的应用，进一步地用于制备治疗和/或预防以不希望的炎性免疫反应为特征或与不希望的炎性免疫反应有关的炎性疾病或细胞增殖性疾病的药物中的应用。 

本发明所述的“治疗”，是指减轻、改善、消除或减少与疾病或病症相关的征兆和症状。 

本发明所述的“预防”，是指防止或延迟疾病或病症的发生或发展、或者防止或延迟与此疾病或病症相关的征兆或症状。 

所述的炎性疾病选自过敏、哮喘、类风湿性关节炎、过敏性结膜炎、过敏性角膜炎、干眼症、红斑狼疮、银屑病、多发性硬化等。 

所述的细胞增殖性疾病选自白血病、淋巴瘤、骨髓增生症、非霍奇金氏淋巴瘤等。 

以下通过部分本发明化合物的体外药理活性进一步阐述本发明化合物的有益效果，本发明其它化合物与试验中所列举的部分本发明化合物具有相同的有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。 

实验例1本发明化合物的体外药理活性 

供试品：本发明部分化合物，按照实施例方法制备； 

实验方法：酶学实验（enzyme assay） 

Caliper Mobility-Shift SYK Assay： 

准确称取供试品，加入DMSO溶解，充分混匀，配成10mM。用DMSO将其稀释至50倍终浓度。转移100μl化合物至96孔板中，进行3倍系列稀释，共10个浓度。转移10μl化合物至新的96孔板中，再向该96孔板每孔加入90ul激酶缓冲液（50mM Hepes pH7.5，10mM MgCl₂，0.0015%Brij-35，2mMDTT）。化合物的终浓度最大为10μM。转移5ul至384孔板中后，加入10μl包含SYK的激酶缓冲液，室温孵育10min后，加入10μl包含FAM-labeled peptide和ATP的肽缓冲液，28℃孵育特定时间后，加入25μl的终止液，终止反应。电泳分离检测底物和产物，Caliper’s Reviewer软件计算转化率，通过以下公式计算抑制率，抑制率用Prism5.0计算IC₅₀值。 

抑制率=[转化率(ZPE)-转化率(样品)]×100/[转化率(ZPE)-转化率(HPE)] 

注：HPE：不加酶的空白对照；ZPE：不加化合物的空白对照。 

实验结果和结论： 

表1本发明化合物对SYK的IC₅₀值 

结论：由表1可见，本发明化合物对SYK具有较好的抑制活性。 

实验例2本发明化合物的体外药理活性 

供试品：本发明部分化合物，按照实施例方法制备； 

实验方法：酶学实验（enzyme assay） 

HTRF SYK Assay： 

本实验采用HTRFR KinEASE^TM–TK试剂盒（Cisbio，62TK0PEB）。准确称取供试品，加入DMSO溶解，充分混匀，配成10mM。用DMSO将其稀释至50倍终浓度。转移30μl化合物至96孔板中，进行3倍系列稀释，共10个浓度。再分别取2μl转移至含有38μl Kinase buffer中，得到终浓度最大为25μM的工作液。将该化合物分别加至384孔板中，每孔4μl。再加入浓度为0.04ng/μl的SYK激酶2μl，孵育10min后，加入ATP和底物混合液4μl。25℃孵育30min后，加入10μl Streptavidin-XL665和TK Antibody-Cryptate混合液。25℃孵育1h后，用酶标仪分别检测检测样品在615nm和665nm处的荧光值。数据处理如下： 

$Z^{,}=1-3\×\frac{\mathrm{STDEV}\left(\mathrm{Positive}\right)+\mathrm{STDEV}\left(\mathrm{negative}\right)}{\mathrm{AVERAGE}\left(\mathrm{Positive}\right)-\mathrm{AVERAGE}\left(\mathrm{negative}\right)}$

采用GraphPad5.0软件进行曲线拟合，拟合方程为Y=Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC₅₀-X)*HillSlope))，得出IC₅₀值。 

表2本发明化合物对SYK的IC₅₀值 

结论：由表2可见，本发明化合物对SYK具有较好的抑制活性。 

实验例3本发明化合物的体外细胞学抑制活性 

供试品： 

本发明化合物：自制，其化学名称、结构式与制备方法见各化合物的制备实施例。 

1.实验仪器 

Envision2104读板仪，PerkinElmer，(美国) 

CO₂培养箱，SANYO.(日本) 

倒置显微镜，XDS-1B，重庆广电(重庆，中国) 

pH计，Mettler Toledo Five easy(中国) 

MACS分离器(Miltenyi，美国) 

FACSCalibur(BD，美国) 

2.细胞 

在37℃，5%CO₂培养箱中，用含有10%的超低免疫球蛋白的胎牛血清，青霉素/链霉素，5mM HEPES，50μMβ-巯基乙醇的RPMI1640培养基培养Balb/c小鼠原代脾脏B细胞。培养基购自美国GIBCO。 

3.小鼠 

雄性，6-8周的Balb/c小鼠。 

4.试剂与化合物配制 

1）CellTiter-Glo(CTG)(货号：G7572，Promega)，将CTG缓冲液和CTG底物保存于-20℃，推荐以以下的方法准备CTG试剂： 

使用前融化CTG缓冲液并平衡至室温，方便起见，CTG缓冲液可在使用前融化好并在室温保存到48小时以上。将冻干的CTG底物平衡到室温，取100ml的缓冲液到装有底物的琥珀色瓶子里，就得到了CTG试剂。轻轻混匀直到得到均一的溶液，底物应在1分钟内完全融解，分装并在-20℃冰箱中长期保存CTG试剂。 

2）

B细胞分离试剂盒(定购号：130-090-862，Miltenyi) 

3）PE anti-biotin antibody(货号：409003，Biolegend) 

4）PE/cy7anti-mouse CD45R/B220antibody(货号：103221，Biolegend) 

5）Cell strainer(货号：352340，BD Falcon) 

6）AffiniPure F(ab')₂fragment goat anti mouse IgM，μchain specific(货号：115-006-020，Jackson) 

7)配制测试化合物 

·配制测试化合物储液：将化合物粉末溶解于DMSO中，得到10mM浓度储液。 

·配制测试化合物梯度稀释溶液：首先，取10mM的测试化合物储液用DMSO3倍连续梯度稀释，共10个浓度。再分别取10μL的DMSO稀释的不同浓度的测试化合物溶液加到90μL化合物稀释缓冲液中，再分别取10μL的含10%DMSO稀释的化合物加到90μL化合物稀释缓冲液中，化合物最高浓度为1mM，DMSO浓度为1%，共10个浓度梯度。 

5.实验方法 

1)分离Balb/c小鼠B细胞： 

·取Balb/c小鼠脾脏，在MACS缓冲液中捣碎，用40μm的尼龙细胞筛网过滤得到单细胞悬液。 

·4℃，将得到的细胞悬液在400g离心五分钟，去上清液，室温下加入1ml的红细胞裂解液并轻轻地重悬起细胞团。两分钟后，加入预冷的MACS缓冲液。用40μm的细胞筛网过滤细胞悬液到一个新的离心管中。4℃，400g离心5分钟来收集细胞。 

·在加入磁珠前，用MACS缓冲液将细胞密度调整到10⁷个细胞/40μl。每10⁷个细胞中加入10μl的生物素化的抗体混合物。混匀后在冰上孵育20分钟，每10⁷个细胞中加入30μl的MACS缓冲液和20μl的抗生物素的磁珠并在冰上孵育20分钟。离心后用500μl的MACS缓冲液重悬细胞。将预冷的MACS分选柱置于MACS分选器中，将细胞悬液加到MACS分选柱中。收集流下的未结合抗体的细胞。 

·通过流式细胞术用PE anti-biotin抗体和CD45R(B220)抗体检测检测分选前和分选后的细胞。 

2）细胞毒性实验与IC₅₀测定 

·用血球计数板计数新鲜分离的小鼠B细胞，通过眙盼蓝染色法检测细胞活率应在98%以上。 

·用培养基将细胞密度调整到每毫升3.89×10⁵个细胞。用多道移液器取90μl细胞悬液到96孔板中，得到最终细胞密度为每孔3.5×10⁴个细胞。 

·用DMSO溶解稀释被测化合物和阳性化合物形成储存液，加入10μl配制的一系列化 合物溶液到96孔板里（每个化合物的每个浓度做三点重复）。在37℃，5%CO₂培养箱中孵育30分钟，然后再加入50μl B细胞刺激混合液，刺激混合液中anti-Igm的终浓度是10μg/ml。 

·将细胞板在37℃，5%CO₂培养箱中继续孵育72小时后用CTG的方法进行检测。 

·融化CTG试剂并平衡至室温，用多道移液器转入到96孔板中，50μl CTG试剂/孔，在微孔板快速震荡器上震荡2分钟后在黑暗中放置10分钟，用Envision检测luminescence读值。 

6.数据分析 

得到的数据会用Excel2007和GraphPad Prism5.0软件进行分析，为了计算IC₅₀，将利用非线性S曲线回归来拟合数据得出一条剂量-效应曲线，GraphPad Prism5.0软件会自动给出IC₅₀值。 

细胞存活率用以下公式进行计算：V_样品/V2_溶剂对照×100%，V_样品是化合物处理孔的读值，V2_溶剂对照是溶剂对照孔(V2)读值的平均值。 

7.实验结果： 

表3化合物对Balb/c小鼠B细胞体外细胞学抑制活性 

结论：由表3可见，本发明化合物在体外对Balb/c小鼠B细胞具有较好的增殖抑制作用。 

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。 

实施例1 4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-((cis)-2-胺基环己胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮（化合物4）的制备

(1)4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸乙酯 

将4-氯-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸乙酯(2.5g，10.13mmol)，3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺(1.78g，11.14mmol)，三水合乙酸钠(3.03g，22.3mmol)溶于40mL乙醇中，加热80℃反应过夜，将溶剂蒸干后剩余物溶于乙酸乙酯，用水洗涤，干燥后浓缩经硅胶柱分离(二氯甲烷:甲醇=100:1)得2.25g产物，产率60%。 

(2)4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸 

将4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸乙酯(2.2g，5.95mmol)，NaOH(0.53g，13.4mmol，溶于5mL水中)溶于25mL乙醇和25mL水中，室温下反应12h，浓缩后，加水，酸化，用乙酸乙酯萃取。干燥后浓缩得粗产物2.6g，该产物不需进一步提纯直接用于下一步反应。 

(3)4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-甲酰胺 

将4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸(1.05g，2.9mmol)溶于40mL THF中，缓慢滴加草酰氯(1.0mL，11.5mmol)，室温下反应3h后，将溶剂蒸干。将剩余物重新溶于40mL THF中，缓慢滴加氨水(1.76g，29mmol)，室温下反应12h。加水，用二氯甲烷萃取，干燥，浓缩，固体经硅胶柱分离(二氯甲烷:甲醇=100:1)得800mg产物，产率80%。 

(4)4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(甲巯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

将4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-甲酰胺(800mg，2.35mmol)溶于100mL DMF中，滴加LiHMDS(1M，23.4mL)，加热至125℃反应过夜，浓缩，将剩余物加水，用乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩后经硅胶柱分离(二氯甲烷:甲醇=50:1)得400mg产物，产率48.7%。 

(5)4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

将4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(甲巯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮(400mg，1.14mmol)溶于30mL DMF中，加入m-CPBA(258mg，1.5mmol)，室温下反应过夜。反应液用饱和碳酸氢钠淬灭，用乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩后得产物390mg，产率94%。 

(6)4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-((cis)-2-胺基环己胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

将4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮(390mg，1.05mmol)，三乙胺(0.5mL，3.15mmol)溶于20mL DMF中，冰水浴滴加(cis)-1，2-环己二胺(120mg，1.1mmol)。室温下反应10h后，加水用二氯甲烷萃取，干燥浓缩后经硅胶柱分离(二氯甲烷:甲醇=10:1)得产物23mg，产率5.6%。 

质谱(m/e)：418.2(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，d₆-DMSO，δ_ppm):1.29-1.55(m，4H)，1.62(m，2H)，1.77(m，2H)，3.39(m，2H)，4.32(m，2H)，6.09-6.21(m，1H)，7.42(m，2H)，7.52(t，1H)，7.92(m，1H)，8.14(m，2H)，8.32(m，2H)，8.94(s，1H)，12.22(m，1H). 

实施例2 (S)-2-[4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮-2-基胺基]丁酰胺（化合物1）的制备

操作同实施例1（6），产率9.7%。 

质谱(m/e)：405.9(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，d₆-DMSO，δ_ppm):0.94(m，3H)，1.85(m，2H)，4.43(m，1H)，6.13(m，1H)，7.05(s，1H)，7.18(m，1H)，7.4(m，2H)，7.54(m，1H)，7.75(m，1H)，7.84～8.06(m，1H)，8.14(m，2H)，8.14～8.54(m，1H)，11.4(m，1H)，12.2(m，1H). 

实施例3 (S)-2-[4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮-2-基胺基]-4-甲基戊酰胺（化合物2）的制备

操作同实施例1（6），产率5.2%。 

质谱(m/e)：434.3(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，CD₃OD，δ_ppm):0.88～1.0(m，6H)，1.29(m，1H)，1.32(m，1H)，2.12(m，1H)，4.60(m，1H)，6.3(m，1H)，7.37(m，1H)，7.51(m，2H)，7.81(s，1H)，7.99(m，2H)，9.04(m，1H). 

实施例4 (R)-4-甲基-2-[5-氧代-4-(喹啉-6-基胺基)-5，6-二氢吡啶[4，3-d]嘧啶-2-基胺基]戊酰胺（化合物3）的制备

(1)4-甲基-2-(甲巯基)-6-(喹啉-6-基胺基)嘧啶-5-羧酸乙酯 

操作同实施例1(1)，产率64%。 

(2)4-甲基-2-(甲巯基)-6-(喹啉-6-基胺基)嘧啶-5-羧酸 

操作同实施例1(2)，产率63%。 

(3)4-甲基-2-(甲巯基)-6-(喹啉-6-基胺基)嘧啶-5-甲酰胺 

将4-甲基-2-(甲巯基)-6-(喹啉-6-基胺基)嘧啶-5-羧酸(2.0g，6.1mmol)溶于40mL DMF中，加入HATU(6.9g，18.3mmol)和三乙胺(1.8g，18.3mmol)。室温下搅拌反应10min后，加入氨水(3.47g，61mmol)，反应12h后，加水，搅拌半小时后，过滤得固体1.0g产物，产率50%。 

(4)2-(甲巯基)-4-(喹啉-6-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(4)，产率48%。 

(5)2-(甲基亚磺酰基)-4-(喹啉-6-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(5)，产物不经提纯直接用于下一步反应。 

(6)(R)-4-甲基-2-[5-氧代-4-(喹啉-6-基胺基)-5，6-二氢吡啶[4，3-d]嘧啶-2-基胺基]戊酰胺 

操作同实施例1(6)，产率2.8%。 

质谱(m/e)：418.6(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，d₆-DMSO，δ_ppm):0.82-0.94(m，6H)，1.56-1.74(m，3H)，4.40-4.57(m，1H)，6.11-6.15(t，1H)，6.97-7.10(d，1H)，7.25-7.40(d，2H)，7.51-7.58(m，1H)，7.77-7.79(d，1H)，7.96(s，2H)，8.36-8.50(m，1H)，8.76-8.87(d，2H)，11.44-11.47(s，1H)，12.22-12.34(m，1H). 

实施例5 (R)-4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(哌啶-3-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮三氟乙酸盐（化合物5三氟乙酸盐）的制备

(1)(R)-3-[4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-5-氧代-5，6-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基胺基]哌啶-1-羧酸叔丁酯 

操作同实施例1(6)，产率40%。 

(2)(R)-4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(哌啶-3-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮三氟乙酸盐 

将(R)-3-[4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-5-氧代-5，6-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基胺基]哌啶-1-羧酸叔丁酯（300mg，0.6mmol）溶于30mL甲醇中，加入1mL TFA。室温搅拌4h后，将溶剂蒸干得产物210mg，产率87%。 

质谱(m/e)：404.2(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，CD₃OD，δ_ppm):1.86～1.91(m，2H)，2.08～2.19(m，2H)，2.23(m，1H)，3.13(m，1H)，3.3(m，1H)，3.54(m，1H)，4.48(m，1H)，6.48(d，1H)，7.47(d，1H)，7.59(m，1H)，7.74(d，1H)，7.98(m，3H)，8.98(s，1H). 

实施例6 (R)-4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(6-氧代哌啶-3-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮（化合物6）的制备

将4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮(367mg，1.0mmol)，三乙胺(300mg，3.0mmol)溶于20mL DMF中，冰水浴滴加(R)-5-胺基-2-哌啶酮(300mg，2.6mmol)。室温下反应18h后，加水用二氯甲烷萃取，干燥浓缩后经硅胶柱分离(二氯甲烷:甲醇=12:1)得产物40mg，产率10%。 

质谱(m/e)：418.2(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，d₆-DMSO，δppm):1.80～1.90(m，1H)，2.20～2.33(m，2H)，3.05～3.15(m，1H)，3.35～3.40(m，2H)，4.20～4.55(m，1H)，6.05～6.20(m，1H)，7.25～7.30(d，1H)，7.35(m，2H)，7.55(t，1H)，7.68～7.75(m，2H)，8.00～8.12(s，2H)，9.20～9.30(s，1H)，11.40～11.50(m，1H)，12.10～12.50(m，1H). 

实施例7 (S)-4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-[(5-氧代吡咯-2-基)甲基胺基]吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮（化合物8）的制备

将4-[3-(2H-1，2，3-三氮唑-2-基)苯胺基]-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮(367mg，1.0mmol)，三乙胺(300mg，3.0mmol)溶于20mL DMF中，冰水浴滴加(S)-5-(胺基甲基)-2-吡咯烷酮(228mg，2.0mmol)。室温下反应18h后，加水用二氯甲烷萃取，干燥浓缩后经硅胶柱分离(二氯甲烷:甲醇=15:1)得产物90mg，产率21.6%。 

质谱(m/e)：418.2(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，d₆-DMSO，δppm):1.77(m，1H)，2.10～2.20(m，2H)，3.35～3.45(m，2H)，3.65～3.80(m，2H)，6.05～6.20(m，1H)，7.35(m，2H)，7.45(t，1H)，7.50～7.65(m，1H)，7.75(d，2H)，8.05～8.15(s，2H)，9.13(s，1H)，11.35～11.45(m，1H)，12.10～12.30(m，1H). 

实施例8 2-((cis)-2-胺基环己胺基)-4-(喹啉-6-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮（化合物9）的制备

操作同实施例1（6），产率2%。 

质谱(m/e)：401.9(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，d₆-DMSO，δ_ppm):1.37(m，4H)，1.77(m，5H)，1.87(m，2H)，4.20(m，1H)，6.21(t，1H)，7.41(m，1H)，7.50(m，1H)，7.61(m，1H)，8.02(m，2H)，8.22(m，1H)，8.58(s，1H)，8.76(d，1H)，8.96(s，1H)，12.25(d，1H). 

实施例9 2-((cis)-2-胺基环己胺基)-4-(喹啉-3-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮（化合物10）的制备

(1)4-甲基-2-(甲巯基)-6-(喹啉-3-基胺基)嘧啶-5-羧酸乙酯 

操作同实施例1(1)，产率67%。 

(2)4-甲基-2-(甲巯基)-6-(喹啉-3-基胺基)嘧啶-5-羧酸 

操作同实施例1(2)，产率67%。 

(3)4-甲基-2-(甲巯基)-6-(喹啉-3-基胺基)嘧啶-5-甲酰胺 

操作同实施例4（3），产率36%。 

(4)2-(甲巯基)-4-(喹啉-3-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

将4-甲基-2-(甲巯基)-6-(喹啉-3-基胺基)嘧啶-5-甲酰胺（25mg，0.077mmol）溶于5mLDMF中，然后加入DMF-DMA(N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛)（27.5mg，0.231mmol），加热到80℃反应2h。然后冷却至室温将溶剂蒸干。加入15mL醋酸，加入至105℃反应2h后将溶剂蒸干，加入二氯甲烷，过滤得固体15mg，产率58%。 

(5)2-(甲基亚磺酰基)-4-(喹啉-3-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(5)，产物不经提纯直接用于下一步反应。 

(6)2-((cis)-2-胺基环己胺基)-4-(喹啉-3-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(6)，产率6.4%。 

质谱(m/e)：401.9(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃，δ_ppm):1.21～1.75(m，8H)，3.11～3.13(m，2H)，3.97～3.99(m，1H)， 6.10～6.17(d，1H)，7.13～7.19(d，1H)，7.38～7.40(d，1H)，7.59～7.65(m，3H)，7.83～7.85(m，1H)，7.94～8.01(m，2H)，8.96～9.12(m，2H)，12.22(d，1H). 

实施例10 4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-((cis)-2-胺基环己胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮（化合物11）的制备

(1)4-(1H-吲唑-5-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸乙酯 

操作同实施例1(1)，产率72%。 

(2)4-(1H-吲唑-5-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸 

操作同实施例1(2)，产率87%。 

(3)4-(1H-吲唑-5-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-甲酰胺 

操作同实施例4(3)，产率65%。 

(4)4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-(甲巯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例9（4），产率75%。 

(5)4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(5)，产物不经提纯直接用于下一步反应。 

(6)4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-((cis)-2-胺基环己胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(6)，产率8.2%。 

质谱(m/e)：391.2(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，CD₃OD，δ_ppm):1.34～1.41(m，4H)，1.61～1.99(m，4H)，2.2(m，1H)，4.56(m，1H)，6.37(m，1H)，7.29(m，1H)，7.46(m，1H)，7.61(m，1H)，7.77(m，1H)，8.02(m，1H). 

实施例11 2-((cis)-2-胺基环己胺基)-4-(苯并[d]噻唑-6-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮（化合物12）的制备

(1)4-(苯并[d]噻唑-6-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸甲酯 

操作同实施例1(1)，产率42%。 

(2)4-(苯并[d]噻唑-6-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸 

操作同实施例1(2)，产率83%。 

(3)4-(苯并[d]噻唑-6-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-甲酰胺 

操作同实施例4（3），产率75%。 

(4)4-(苯并[d]噻唑-6-基胺基)-2-(甲巯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例9（4），产率13%。 

(5)4-(苯并[d]噻唑-6-基胺基)-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(5)，产物不经提纯直接用于下一步反应。 

(6)）2-((cis)-2-胺基环己胺基)-4-(苯并[d]噻唑-6-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(6)，产率17%。 

质谱(m/e)：408.2 (M+1) 

¹H-NMR(400MHz，CD₃OD，δ_ppm):9.12(s，2H)，7.99(d，1H)，7.60(s，1H)，7.32(d，1H)，6.12～6.37(m，1H)，4.11～4.32(m，1H)，3.21～3.27(m，1H)，1.28～1.82(m，8H). 

实施例12 2-((cis)-2-胺基环己胺基)-4-(2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环-6-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮（化合物13）的制备

(1)4-(2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环-6-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸乙酯 

操作同实施例1(1)，产率97%。 

(2)4-(2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环-6-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-羧酸 

操作同实施例1(2)，产率100%。 

(3)4-(2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环-6-基胺基)-6-甲基-2-(甲巯基)嘧啶-5-甲酰胺 

操作同实施例4(3)，产率67%。 

(4)4-(2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环-6-基胺基)-2-(甲巯基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(4)，产率97%。 

(5)4-(2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环-6-基胺基)-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(5)，产物不经提纯直接用于下一步反应。 

(6)2-((cis)-2-胺基环己胺基)-4-(2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环-6-基胺基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮 

操作同实施例1(6)，产率1.3%。 

质谱(m/e)：408.7(M+1) 

¹H-NMR(400MHz，d₆-DMSO，δ_ppm):1.37-1.38(m，4H)，1.45-1.62(m，4H)，3.85(s，2H)，4.20-4.23(m，4H)，6.00-6.12(d，1H)，6.79-6.81(d，1H)，6.96-7.06(m，2H)，7.31-7.32(d，1H)，7.62(s，1H)，11.72-11.77(s，1H)。

Claims (14)

1.通式（Ⅰ）所示的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

其中，X选自6-10元芳基、5-6元杂芳单环基或9-10元杂芳双环基；

R¹选自氢原子或5-6元杂芳单环基，

R¹可任选被1-3个取代基进一步取代，所述取代基独立地选自C_1-8烷基、C_2-8烯基、C_2-8炔基、氨基、羟基、C_1-8烷氧基、卤素原子、C_1-8烷基胺基、二(C_1-8烷基)胺基、C_1-8烷基羰基、氨基甲酰基、C_1-8烷基羰基氨基、C_1-8烷基胺基甲酰基、氨基C_1-8烷基、羟基C_1-8烷基、氰基、卤代C_1-8烷基、卤代C_1-8烷氧基或氨基磺酰基；

R²选自氢原子或C_1-8烷基；

R³、R⁴独立地选自氢原子、氰基、C_1-8烷基、羟基C_1-8烷基、氨基C_1-8烷基或C_3-8环烷基；

Y选自C_3-8环烷基、C_3-8环烷基C_1-8烷基、4-8元杂环烷基、4-8元杂环烷基C_1-8烷基或

Z为氧原子或硫原子，

f为整数1、2或3，

R⁵为氢原子、C_1-8烷基或C_3-8环烷基，

R⁶和R⁷独立地选自氢原子、C_1-8烷基、羟基C_1-8烷基、卤代C_1-8烷基、氨基、C_1-8烷基胺基、C_1-8烷氧基C_1-8烷基或C_3-8环烷基，

或Y与R²连接与氮原子一起形成4-8元杂环烷基，

Y或Y与R²连接与氮原子一起形成的基团可进一步被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自氨基、羟基、氧代、C_1-8烷基、C_1-8烷基胺基、二(C_1-8烷基)胺基、氨基C_1-8烷基、羧基、C_1-8烷基胺基C_1-8烷基、C_1-8烷氧基C_1-8烷基、羟基C_1-8烷基、羧基C_1-8烷基、氨基甲酰基或C_1-8烷基羰基。

2.如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

其中，X选自苯基、5-6元杂芳单环基或9-10元杂芳双环基；

R¹选自氢原子或5-6元杂芳单环基；

R¹可任选被1-3个取代基进一步取代，所述取代基独立地选自C_1-6烷基、氨基、羟基、C_1-6烷氧基、卤素原子、氨基C_1-6烷基、氰基或卤代C_1-6烷基；

R²选自氢原子或C_1-6烷基；

R³、R⁴独立地选自氢原子或C_1-6烷基；

Y选自C_4-6环烷基、C_4-6环烷基C_1-6烷基、4-6元杂环烷基、4-6元杂环烷基C_1-6烷基或

Z为氧原子，

f为整数1、2或3，

R⁵为氢原子或C_1-6烷基，

R⁶和R⁷独立地选自氢原子、C_1-6烷基或卤代C_1-6烷基，

或Y与R²连接与氮原子一起形成4-6元杂环烷基，

Y或Y与R²连接与氮原子一起形成的基团可进一步被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自氨基、羟基、氧代、C_1-6烷基、C_1-6烷基胺基、二(C_1-6烷基)胺基、氨基C_1-6烷基或羧基。

3.如权利要求2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

其中，X选自苯基、5-6元杂芳单环基或9-10元杂芳双环基；

R¹选自氢原子或5-6元杂芳单环基；

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或C_1-6烷基；

Y选自

Z为氧原子，f为整数1，

R⁵为氢原子或C_1-6烷基，

R⁶和R⁷独立地选自氢原子、C_1-6烷基或卤代C_1-6烷基。

4.如权利要求3所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

其中，X选自苯基或喹啉基；

R¹选自氢原子、1，2，3-三氮唑基、1，2，4-三氮唑基或吡唑基；

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或甲基；

Y选自

Z为氧原子，f为整数1，

R⁵为氢原子或甲基，

R⁶和R⁷独立地选自氢原子、甲基、乙基、丙基或异丁基。

5.如权利要求2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

其中，X选自苯基或5-6元杂芳单环基；

R¹选自5-6元杂芳单环基；

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或C_1-6烷基；

Y选自C_4-6环烷基、C_4-6环烷基C_1-3烷基、5-6元杂环烷基或5-6元杂环烷基C_1-3烷基，所述“C_4-6环烷基、C_4-6环烷基C_1-3烷基、5-6元杂环烷基或5-6元杂环烷基C_1-3烷基”中的“C_4-6环烷基或5-6元杂环烷基”上的碳原子可被氧代，

Y可进一步被1个取代基取代，所述取代基选自氨基、C_1-6烷基胺基、二(C_1-6烷基)胺基、羟基、羧基或C_1-6烷基。

6.如权利要求5所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

其中，X选自苯基或吡啶基；

R¹选自1，2，3-三氮唑基、1，2，4-三氮唑基或吡唑基；

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或甲基；

Y选自环戊烷基、环己烷基、吡咯烷基、哌啶基、6-氧代哌啶-3-基、2-氧代吡咯烷-3-基、5-氧代吡咯烷-2-基、环戊烷甲基、环己烷甲基、吡咯烷甲基、哌啶甲基、6-氧代哌啶-3-基甲基、2-氧代吡咯烷-3-基甲基或5-氧代吡咯烷-2-基甲基，

Y可进一步被1个取代基取代，所述取代基选自氨基、甲基胺基或二(甲基)胺基。

7.如权利要求2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

其中，X选自9-10元杂芳双环基；

R¹选自氢原子；

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或C_1-6烷基；

Y选自C_4-6环烷基、C_4-6环烷基C_1-3烷基、5-6元杂环烷基或5-6元杂环烷基C_1-3烷基，

Y可进一步被1个取代基取代，所述取代基选自氨基、C_1-6烷基胺基、二(C_1-6烷基)胺基、羟基、羧基或C_1-6烷基。

8.如权利要求7所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

其中，X选自喹啉基、吲唑基、苯并噻唑基或2，3-二氢苯并[b][1，4]二噁烷基；

R¹选自氢原子；

R²、R³、R⁴独立地选自氢原子或甲基；

Y选自环戊烷基、环己烷基、吡咯烷基或哌啶基，

Y可进一步被1个取代基取代，所述取代基选自氨基、甲基胺基或二(甲基)胺基。

9.如权利要求2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：

10.如权利要求1-9所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物，所述的其药学上可接受的盐为苯甲酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐，氢溴酸盐、氢氯酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐，精氨酸盐、葡甲胺盐、氨基葡萄糖盐或铵盐、锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、锌盐、钡盐。

11.如权利要求1-9所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物，为药学上可接受的任一剂型。

12.如权利要求1-9所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物在用于制备治疗和/或预防由syk介导的信号通路有关的疾病的药物中的应用。

13.如权利要求12所述的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物在用于制备治疗和/或预防以不希望的炎性免疫反应为特征或与不希望的炎性免疫反应有关的炎性疾病或细胞增殖性疾病的药物中的应用。

14.如权利要求13所述的应用，其中炎性疾病选自哮喘、过敏、类风湿性关节炎、过敏性结膜炎、过敏性角膜炎或干眼症，细胞增殖性疾病选自白血病、淋巴瘤和骨髓增生症。