CN103642893B - 一种用于化妆品微生物检测的中和剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于化妆品微生物检测的中和剂。它按质量分数100%计，包括卵磷脂1.0-1.5%、吐温-801.0-3.0%、组氨酸0.1-0.5%、硫代硫酸钠0.1-0.5%、蛋白胨0.1-0.5%、巯基乙酸钠0.05-0.1%、氯化钠0.85%，余量为水。本发明的用于化妆品微生物检测的中和剂本身或与化妆品反应的产物对实验微生物无杀灭或抑制其生长的作用；对营养成分无破坏作用，亦不影响其物理性状，对化妆品中的防腐剂具有切实可靠的中和作用，是一种效果非常好的用于化妆品微生物检测的中和剂，具有非常大的市场前景。

Description

一种用于化妆品微生物检测的中和剂及其制备方法

技术领域：

本发明属于化妆品微生物检测领域，具体涉及一种用于化妆品微生物检测的中和剂及其制备方法。

背景技术：

大多数化妆品中都会添加适量的防腐剂以加强化妆品抵抗微生物的能力和延长化妆品的储存时间。化妆品防腐功效挑战试验的核心问题是评价化妆品的杀菌和抑菌作用。评价化妆品的防腐效能，必须严格掌握挑战试验的次数和时间。微生物和化妆品接触一段时间后，必须对化妆品进行检测，这样才能准确的获得防腐剂作用效果的数据；同时在检测的化妆品中必须不含有残留的防腐剂，以防止在恢复培养中微生物继续受到防腐剂的作用。因此，任何一个评价防腐剂防腐效能的实验，都必须有可靠的去除残留的防腐剂的方法。不采用去除残余防腐剂措施的实验得出的结果是不可靠的。化学中和法是目前最常用的去除残余防腐剂的方法，其优点是方法简单，使用方便，效果可靠。化妆品中和剂可用于评价化妆品的防腐效能。已有的中和剂品种很多，常见的有酸、碱、中草药、稀释法、过滤法等。上述均未经过严格的筛选；对化妆品的防腐剂不具有切实可靠的中和作用；中和剂本身或与防腐剂反应的产物对实验微生物有杀灭或抑制其生长的作用；对培养成分有破坏作用，亦影响其物理性状。随着化妆品研究的进展，国内外对中和剂的研究也在不断发展中，根据《化妆品卫生规范》（2007年版），菌落总数检验所用培养基为卵磷脂、吐温-80营养琼脂培养基,其中所含卵磷脂和吐温-80为中和剂，能够中和部分防腐剂，但是其中和效果并不能充分反映微生物总数，而且并没有确定其使用浓度。因此，研究者一直希望能有一种克服上述中和剂不足的中和剂。

发明内容：

本发明的目的是能克服已有化妆品中和剂的不足提供一种在评价化妆品的防腐效能时，能对防腐剂具有全面切实可靠的中和作用、对实验微生物无杀灭或抑制其生长的作用；对培养成分无破坏作用，亦不影响其物理性状的用于化妆品微生物检测的中和剂及其制备方法。

本发明的用于化妆品微生物检测的中和剂，其特征在于，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.0-1.5%、吐温-801.0-3.0%、组氨酸0.1-0.5%、硫代硫酸钠0.1-0.5%、蛋白胨0.1-0.5%、巯基乙酸钠0.05-0.1%、氯化钠0.85%，余量为水。

本发明的用于化妆品微生物检测的中和剂，其制备方法为：按上述组份的含量，将卵磷脂和吐温-80溶解于水中，再将硫代硫酸钠、组氨酸、蛋白胨、巯基乙酸钠和氯化钠加入卵磷脂和吐温-80的混合液中，混合均匀，得到用于化妆品微生物检测的中和剂。

本发明的用于化妆品微生物检测的中和剂中的卵磷脂可中和季铵化合物，吐温-80可中和酚类化合物，硫代硫酸钠可中和具有氧化性的防腐剂如碘和氯，巯基乙酸钠可中和含汞防腐剂，组氨酸可中和醛类防腐剂。上述物质按比例混合后对化妆品中的防腐剂具有切实可靠的中和作用，能与残余的化妆品发生化学反应，生成对实验微生物没有杀灭或抑制其生长的作用、对培养成分没有破坏作用、对物理性状没有影响的中和产物，对相应的化妆品具有切实可靠的中和作用。

因此本发明的用于化妆品微生物检测的中和剂本身或与化妆品反应的产物对实验微生物无杀灭或抑制其生长的作用；对营养成分无破坏作用，亦不影响其物理性状，对化妆品中的防腐剂具有切实可靠的中和作用，是一种效果非常好的用于化妆品微生物检测的中和剂，具有非常大的市场前景。

具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：本实施例的用于化妆品微生物检测的中和剂，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.0%、吐温-803.0%、组氨酸0.1%、硫代硫酸钠0.5%、蛋白胨0.1%、巯基乙酸钠0.1%、氯化钠0.85%，余量为水。

实施例2：本实施例的用于化妆品微生物检测的中和剂，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.2%、吐温-801.5%、组氨酸0.3%、硫代硫酸钠0.2%、蛋白胨0.3%、巯基乙酸钠0.06%、氯化钠0.85%，余量为水。

实施例3：本实施例的用于化妆品微生物检测的中和剂，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.5%、吐温-802.0%、组氨酸0.4%、硫代硫酸钠0.3%、蛋白胨0.5%、巯基乙酸钠0.08%、氯化钠0.85%，余量为水。

实施例4：本实施例的用于化妆品微生物检测的中和剂，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.3%、吐温-802.5%、组氨酸0.2%、硫代硫酸钠0.4%、蛋白胨0.4%、巯基乙酸钠0.06%、氯化钠0.85%，余量为水。

实施例5：本实施例的用于化妆品微生物检测的中和剂，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.3%、吐温-802.8%、组氨酸0.5%、硫代硫酸钠0.5%、蛋白胨0.1%、巯基乙酸钠0.05%、氯化钠0.85%，余量为水。

实施例6：本实施例的用于化妆品微生物检测的中和剂，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.5%、吐温-803.0%、组氨酸0.5%、硫代硫酸钠0.1%、蛋白胨0.4%、巯基乙酸钠0.1%、氯化钠0.85%，余量为水。

实施例7：本实施例的用于化妆品微生物检测的中和剂，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.5%、吐温-801.0%、组氨酸0.5%、硫代硫酸钠0.5%、蛋白胨0.5%、巯基乙酸钠0.1%、氯化钠0.85%，余量为水。

实施例8：本实施例的用于化妆品微生物检测的中和剂，按质量分数100%计，包括卵磷脂1.5%、吐温-803.0%、组氨酸0.5%、硫代硫酸钠0.1%、蛋白胨0.5%、巯基乙酸钠0.1%、氯化钠0.85%，余量为水。

按上述实施例1～8组份的含量，将卵磷脂和吐温-80放入水中，然后进行加温至100℃使其溶解于水中，再将硫代硫酸钠、组氨酸、蛋白胨、巯基乙酸钠和氯化钠加入冷却后的卵磷脂和吐温-80的混合液中，混合均匀，冷却后进行分装，121℃灭菌15分钟备用。

接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至10mL营养肉汤培养基中，37℃培养24h后用0.85%氯化钠溶液制成含菌数为50～100cfu/ml的菌悬液。取化妆品样品10g，加到装有玻璃珠及90mL上述中和剂溶液的三角瓶中，充分振摇混匀后即为1：10的供试液。

取已配制好的菌悬液1mL,注入平皿中，加入营养琼脂培养基，测定菌液中的菌落数，结果为a。取1：10的供试液1mL注入平皿中，加入营养琼脂培养基，测定样品中的菌落数，结果为b。实验组：取1：10的供试液1mL和菌悬液1mL分别注入同一平皿中,加入营养琼脂培养基，测定菌落数，结果为c。对照组：取上述中和剂1mL和菌悬液1mL分别注入同一平皿中，加入营养琼脂培养基，测定菌落数，结果为d。回收率计算公式如下：

试验组回收率（%）： $R1=\frac{c-b}{a}\×100\%;$

中和剂对照组回收率（%）：

若R2≥70%，而且R1≥70%，可认为该中和剂稀释液制备方法和计数方法可用于该样品的菌落计数。回收率结果见表1～3。

表1不同中和剂稀释后大肠杆菌的回收率

表2不同中和剂稀释后金黄色葡萄球菌的回收率

表3不同中和剂稀释后铜绿假单胞菌的回收率

从表1～3结果可知，用本发明的中和剂对化妆品进行微生物检测，微生物的回收率（检出率）均超过了90％，说明该中和剂可消除防腐剂对检测结果的干扰，更好的反映化妆品中的微生物数量，提高化妆品微生物检测的准确性。

Claims (2)

1.一种用于化妆品微生物检测的中和剂，其特征在于，按质量分数100％计，由以下组份组成：卵磷脂1.0-1.5％、吐温-80 1.0-3.0％、组氨酸0.1-0.5％、硫代硫酸钠0.1-0.5％、蛋白胨0.1-0.5％、巯基乙酸钠0.05-0.1％、氯化钠0.85％，余量为水。

2.一种权利要求1所述的用于化妆品微生物检测的中和剂的制备方法，其特征在于，按组份的含量，将卵磷脂和吐温-80溶解于水中，再将硫代硫酸钠、组氨酸、蛋白胨、巯基乙酸钠和氯化钠加入卵磷脂和吐温-80的混合液中，混合均匀，得到用于化妆品微生物检测的中和剂。