CN103637245A - 一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片，它由鱼骨粉、蛋白肽粉、酪蛋白磷酸肽粉、维生素D3、糊精、甜奶粉、甘露醇、羧甲基纤维素钠组成，所述鱼骨粉和蛋白肽粉是按照以下方法制备而成的：将鱼骨绞碎，加入3-5倍水，调节pH值至7-9，先用碱性蛋白酶酶解，再用风味蛋白酶酶解，之后在沸水浴中煮沸10-20min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥、粗粉碎、超微粉碎得纳米鱼骨粉；将酶解液浓缩、干燥、粉碎得蛋白肽粉。本发明得到的蛋白肽粉中降血压肽含量高，降血压活性强，鱼骨中的钙得到了充分利用。本发明食用方便、香甜可口，适于缺钙高危人群（儿童和老人）和高血压高危人群（老人）食用，没有任何副作用。
Description
技术领域
本发明属于营养食品领域，具体涉及一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片及其制备方法。
背景技术
2010年全世界的鱼类捕捞量和养殖量总和大约为14.8千万吨，这些鱼类加工后将产生超过2千万吨的下脚料。丢弃下脚料会造成极大的浪费，同时对环境造成污染。鱼骨是最主要的固态下脚料，约占鱼体总重量的10-15%。鱼骨的蛋白质含量高、脂肪含量低，并且含有丰富的钙、磷等矿物质。每100g鱼骨中含有蛋白质25-40g，脂肪1-5g，灰分25-50g，钙13-23g，磷8-11g。鱼骨中的钙含量与磷含量的比值接近人体骨骼的钙磷比（2：1），易被人体消化吸收，是一种良好的天然钙源。我国的膳食营养结构是以谷类为主，导致我国居民普遍缺钙，其中成年人的平均每日钙摄入量只达到了营养学会推荐供给量标准（RDA）的40-45%，儿童和青少年的平均每日钙摄入量只达到RDA的30-40%。合理开发和利用鱼骨中的钙是预防和治疗钙缺乏、骨质疏松的又一重要途径。
另一方面，鱼骨中的蛋白质可作为原料制备降血压肽。Angiotension-converting enzyme(ACE)，即血管紧张素转换酶是原发性高血压中最重要的作用因素，降血压肽是一类对ACE酶活性具有抑制作用的生物活性肽。据世界卫生组织估计，全球患高血压的人数已愈5亿，同时，它又是冠心病、心及肾功能衰竭的最主要的发病因素。因此，防治高血压成为全球面临的一项艰巨和紧迫的任务。以带有碎肉的鱼骨为原料，经蛋白酶酶解制备降血压多肽将为预防和治疗高血压提供一种重要途径。
目前，利用鱼骨开发高钙或者降血肽功能食品的研究已有报道，但多数是将酶解后的鱼骨弃去制备降血肽，或者将鱼骨酶解液去除制备高钙鱼骨粉，使得鱼骨原料没有得到充分利用。而且酶解产物多为氨基酸，降血压肽含量低，降压功效差。另外，制得的鱼骨蛋白肽腥味重，口感差，消费者难以接受。
发明内容
本发明的目的在于提供一种营养丰富，富含钙和蛋白肽，且口感好，食用方便的鱼蛋白肽钙咀嚼片及其制备方法。
上述目的是通过如下的技术方案实现的：
一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片，由下述重量百分比的成分组成：鱼骨粉：6-10％；蛋白肽粉：1-3％；酪蛋白磷酸肽粉：0.5-1.5％；维生素D3：0.05-0.15％；糊精：20-30％；甜奶粉：15-25％；甘露醇：30-50％；羧甲基纤维素钠：1-3％，
所述鱼骨粉和蛋白肽粉是按照以下方法制备而成的：将鱼骨绞碎，加入3-5倍水，调节pH值至7-9，按1500-2500U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在45-55℃下酶解2-3h，再按1000-2000U/g鱼骨的添加量添加风味蛋白酶，继续在40-50℃下酶解2-3h，之后在沸水浴中煮沸10-20min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥、粗粉碎、超微粉碎得纳米鱼骨粉；将酶解液浓缩、干燥、粉碎得蛋白肽粉。
优选地，所述成分的重量百分比为：鱼骨粉：8％；蛋白肽粉：2％；酪蛋白磷酸肽粉：1％；维生素D3：0.1％；糊精：25％；甜奶粉：21.9％；甘露醇：40％；羧甲基纤维素钠：2％。
进一步优选地，所述鱼骨粉的平均粒径≤300nm。
一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，包括以下步骤：
1）将鱼骨绞碎，加入3-5倍水，调节pH值至7-9，按1500-2500U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在45-55℃下酶解2-3h，再按1000-2000U/g鱼骨的添加量添加风味蛋白酶，继续在40-50℃下酶解2-3h，之后在沸水浴中煮沸10-20min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥、粗粉碎、超微粉碎得纳米鱼骨粉；将酶解液浓缩、干燥、粉碎得蛋白肽粉；
2）按下述重量百分比配料：鱼骨粉：6-10％；蛋白肽粉：1-3％；酪蛋白磷酸肽粉：0.5-1.5％；维生素D3：0.05％-0.15％；糊精：20-30％；甜奶粉：15-25％；甘露醇：30-50％；羧甲基纤维素钠：1-3％；
3）将步骤2）中的原料混合均匀，加水搅拌制软材，过12-20目筛造粒，颗粒干燥后压片成型。
优选地，所述原料的重量百分比为：鱼骨粉：8％；蛋白肽粉：2％；酪蛋白磷酸肽粉：1％；维生素D3：0.1％；糊精：25％；甜奶粉：21.9％；甘露醇：40％；羧甲基纤维素钠：2％。
进一步优选地，所述鱼骨粉的平均粒径≤300nm。
进一步优选地，步骤1）中，将鱼骨绞碎，加入4倍水，调节pH值至8，按2000U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在50℃下酶解2.5h，再按1500U/g鱼骨的添加量添加风味蛋白酶，继续在45℃下酶解2.5h，之后在沸水浴中煮沸15min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥、粗粉碎、超微粉碎得纳米鱼骨粉；将酶解液浓缩、干燥、粉碎得蛋白肽粉。
进一步优选地，步骤3）中所述的颗粒干燥为鼓风干燥，干燥温度为40-60℃，干燥时间为3-6h。
本发明的有益效果是：
（1）采用本发明的碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步酶解制备得到的蛋白肽粉中降血压肽含量高，对ACE的抑制效果好。
（2）鱼骨中的营养物质特别是钙得到了充分利用，将鱼骨粉碎到粒径≤300nm后，鱼骨粉中钙的生物利用率达到65%，显著高于微米鱼骨粉和活性钙的生物利用率。
（3）本发明食用方便、香甜可口，适于缺钙高危人群（儿童和老人）和高血压高危人群（老人）食用，没有任何副作用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，包括以下步骤：
1）将经机械或手工采肉后的鱼骨切成3cm左右的长段，接着用筛板孔径为5mm的绞肉机绞碎，然后加入4倍水，调节pH值至8，按2000U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在50℃下酶解2.5h，再按1500U/g鱼骨的添加量添加风味蛋白酶，继续在45℃下酶解2.5h，之后在沸水浴中煮沸15min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣于100℃的鼓风干燥箱中烘24h，接着进行粗粉碎、超微粉碎，得到平均粒径≤300nm的鱼骨粉，酶解液经减压浓缩、冷冻干燥、粉碎后得蛋白肽粉。
2）按下述重量百分比配料：鱼骨粉：8％；蛋白肽粉：2％；酪蛋白磷酸肽粉：1％；维生素D3：0.1％；糊精：25％；甜奶粉：21.9％；甘露醇：40％；羧甲基纤维素钠：2％。。
3）将步骤2）中的原料混合均匀，加水搅拌制软材，过20目筛造粒，颗粒鼓风干燥，干燥温度为50℃，干燥时间为5h，干燥后压片成型。
实施例2
一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）将经机械或手工采肉后的鱼骨切成长段，接着用绞肉机绞碎，然后加入3倍水，调节pH值至7，按2500U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在45℃下酶解3h，再按1000U/g鱼骨的添加量添加风味蛋白酶，继续在40℃下酶解3h，之后在沸水浴中煮沸20min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥，接着进行粗粉碎、超微粉碎，得到平均粒径≤300nm的鱼骨粉，酶解液经浓缩、干燥、粉碎后得蛋白肽粉。
2）按下述重量百分比配料：鱼骨粉：6％；蛋白肽粉：3％；酪蛋白磷酸肽粉：0.5％；维生素D3：0.15％；糊精：30％；甜奶粉：25％；甘露醇：34.35％；羧甲基纤维素钠：1％。
3）将步骤2）中的原料混合均匀，加水搅拌制软材，过12目筛造粒，颗粒鼓风干燥，干燥温度为40℃，干燥时间为6h，干燥后压片成型。
实施例3
一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）将鱼骨绞碎，加入5倍水，调节pH值至9，按1500U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在55℃下酶解2h，再按1000U/g的添加量添加适量风味蛋白酶，继续在50℃下酶解2h，之后在沸水浴中煮沸10min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥、粉碎得鱼骨粉；将酶解液浓缩、干燥、粉碎得蛋白肽粉；
2）按下述重量百分比配料：鱼骨粉：10％；蛋白肽粉：1％；酪蛋白磷酸肽粉：1.5％；维生素D3：0.05％；糊精：20％；甜奶粉：15％；甘露醇：49.45％；羧甲基纤维素钠：3％；
3）将步骤2）中的原料混合均匀，加水搅拌制软材，过18目筛造粒，颗粒干燥后压片成型。
试验例1鱼骨粉中钙的生物利用率
1）试验方法：分别以纳米鱼骨粉、微细化鱼骨粉和活性钙为钙源，参照AIN-93配制动物饲料，然后饲养Wistar雄性大鼠12周，测定代谢期间大鼠钙摄入量A,粪便中含钙量B和料液中钙含量C。按照下列公式分别计算钙吸收率和钙存留率：
钙吸收率（％）＝100×(A－B)/A钙存留率（％）＝100×(A－B－C)/A
2）试验结果：见表1。
表1鱼骨粉中钙的生物利用率
3）结论：从以上数据可以看出，本发明制得的纳米鱼骨粉中的钙吸收性好、利用率高，显著强于普通粒径鱼骨粉的。
试验例2不同蛋白酶制备的鱼骨多肽对ACE的抑制率
1）试验方法：酶解液与ACE底物（HGG）混匀后于37℃水浴中预热10min，加入ACE粗提液（SHR大鼠血清）后于37℃反应60min，然后用HCl终止反应；加入乙酸乙酯漩涡混合后离心，取1ml脂层转入另一洁净试管中置于120烘箱中挥干后用3ml的蒸馏水将之溶解在228nm处测定其OD值。抑制率的计算公式如下：
ACE抑制率I(%)=(B－A)/(B－C)100
其中A为在有ACE及ACE抑制物存在的条件下的OD值；B为无ACE抑制物存在的条件下测得的OD值；C为无ACE粗提物存在的条件下测得的OD值。
2）试验结果：见表2。
表2不同蛋白酶制备的鱼骨多肽对ACE的抑制率
| 酶 | 碱性蛋白酶＋风味蛋白酶 | 风味蛋白酶＋碱性蛋白酶 | 碱性蛋白酶 | 风味蛋白酶 |
| 抑制率 | 81.5 | 72.0 | 67.4 | 50.1 |
注：“碱性蛋白酶＋风味蛋白酶”表示先加碱性蛋白酶，后加风味蛋白酶；“风味蛋白酶＋碱性蛋白酶”表示先加风味蛋白酶，后加碱性蛋白酶。
3）结论：从以上数据可以看出，采用分步酶解制备的多肽对ACE的抑制率显著高于两种酶分别酶解制备的多肽；添加酶的顺序对ACE的抑制率有显著影响，先加碱性蛋白酶后加风味蛋白酶制备的多肽对ACE的抑制率最高，达到81.5％。
本发明中所用的碱性蛋白酶和风味蛋白酶均通过商业途径购买得到，其中，碱性蛋白酶是由细菌原生质体诱变选育出的地衣芽孢杆菌2709，经深层发酵、提取及精制而成的一种蛋白水解酶，其主要酶成分为地衣芽孢杆菌蛋白酶，是一种丝氨酸型的内切蛋白酶，它能水解蛋白质分子肽链生成多肽或氨基酸，具有较强的分解蛋白质的能力，广泛应用于食品、医疗、酿造、洗涤、丝绸、制革等行业。风味蛋白酶是利用米曲霉发酵提取而得，筛选复配而成的复合酶，包含了内切蛋白酶与外切肽酶两种活性，可以用来去除低水解度产物的苦肽链，也可以用于彻底水解蛋白质，增进和改善水解液的风味。
Claims (8)
1.一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片，其特征在于由下述重量百分比的成分组成：鱼骨粉：6-10％；蛋白肽粉：1-3％；酪蛋白磷酸肽粉：0.5-1.5％；维生素D3：0.05-0.15％；糊精：20-30％；甜奶粉：15-25％；甘露醇：30-50％；羧甲基纤维素钠：1-3％。
所述鱼骨粉和蛋白肽粉是按照以下方法制备而成的：将鱼骨绞碎，加入3-5倍水，调节pH值至7-9，按1500-2500U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在45-55℃下酶解2-3h，再按1000-2000U/g鱼骨的添加量添加风味蛋白酶，继续在40-50℃下酶解2-3h，之后在沸水浴中煮沸10-20min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥、粗粉碎、超微粉碎得纳米鱼骨粉；将酶解液浓缩、干燥、粉碎得蛋白肽粉。
2.根据权利要求1所述补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片，其特征在于所述成分的重量百分比为：鱼骨粉：8％；蛋白肽粉：2％；酪蛋白磷酸肽粉：1％；维生素D3：0.1％；糊精：25％；甜奶粉：21.9％；甘露醇：40％；羧甲基纤维素钠：2％。
3.根据权利要求1或2所述补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片，其特征在于：所述鱼骨粉的平均粒径≤300nm。
4.一种补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）将鱼骨绞碎，加入3-5倍水，调节pH值至7-9，按1500-2500U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在45-55℃下酶解2-3h，再按1000-2000U/g鱼骨的添加量添加风味蛋白酶，继续在40-50℃下酶解2-3h，之后在沸水浴中煮沸10-20min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥、粗粉碎、超微粉碎得纳米鱼骨粉；将酶解液浓缩、干燥、粉碎得蛋白肽粉；
2）按下述重量比配料：鱼骨粉：6-10％；蛋白肽粉：1-3％；酪蛋白磷酸肽粉：0.5-1.5％；维生素D3：0.05％-0.15％；糊精：20-30％；甜奶粉：15-25％；甘露醇：30-50％；羧甲基纤维素钠：1-3％；
3）将步骤2）中的原料混合均匀，加水搅拌制软材，过12-20目筛造粒，颗粒干燥后压片成型。
5.根据权利要求4所述补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，其特征在于：所述原料的重量百分比为：鱼骨粉：8％；蛋白肽粉：2％；酪蛋白磷酸肽粉：1％；维生素D3：0.1％；糊精：25％；甜奶粉：21.9％；甘露醇：40％；羧甲基纤维素钠：2％。
6.根据权利要求4所述补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，其特征在于：所述鱼骨粉的平均粒径≤300nm。
7.根据权利要求4所述补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，其特征在于：步骤1）中，将鱼骨绞碎，加入4倍水，调节pH值至8，按2000U/g鱼骨的添加量添加碱性蛋白酶，在50℃下酶解2.5h，再按1500U/g鱼骨的添加量添加风味蛋白酶，继续在45℃下酶解2.5h，之后在沸水浴中煮沸15min，然后离心分离固体渣和酶解液，将固体渣干燥、粗粉碎、超微粉碎得纳米鱼骨粉；将酶解液浓缩、干燥、粉碎得蛋白肽粉。
8.根据权利要求4所述补钙降血压的鱼蛋白肽钙咀嚼片的制备方法，其特征在于：步骤3）中所述的颗粒干燥为鼓风干燥，干燥温度为40-60℃，干燥时间为3-6h。
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