CN103613679A - 一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法。本发明的技术方案是将采集的鲜天麻洗净后用微波法杀青、加水磨浆、浆液采用单一或复合酶酶解，酶解液过滤后，超滤膜超滤，收集分子切割量20KDa以上,150KDa以下的组分，冷冻干燥，得到天麻多糖。采用酶法辅助超滤膜超滤提取天麻多糖，对多糖结构破坏小，既提高了多糖的得率，又提高了多糖的纯度，还保持多糖的活性。通过本方法制备的天麻多糖是除去蛋白后的纯多糖，具有生产工艺合理、简单，易于工业化生产的特点，生产的天麻多糖可以广泛的应用于各种保健食品及药品中。
Description
技术领域
本发明涉及一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法，属于植物活性成份提取加工领域。
背景技术
天麻(Gastrodia elata Bl)属兰科(Orehidaceae)、天麻属(Gastrodieae)多年生异养草本植物。又名定风草、离合草、仙人脚、鬼督邮、赤箭等，天麻是古今医家常用的名贵中药，也是绿色保健珍品，至今已有二千多年的应用历史。天麻以治疗眩晕头痛、惊厥抽搐、四肢麻木、风湿、体痛、语言不遂、血脉不通、痰痈气阻等症见长，故有“三镇”、“三抗”、“一补”之说，即抗癫痫、抗惊厥、抗风湿，镇静、镇痉、镇痛，补虚，现代药理研究表明，天麻主要有四大治疗作用：对神经中枢系统的镇静、抗惊厥和镇痛作用；对心血管系统的强心作用；有耐缺氧作用和增强免疫功能的作用；同时，天麻还具有很好的保健作用。天麻的主要有效成分是天麻素等酚性化合物和天麻多糖，其中天麻多糖有免疫调节、降血糖、清除体内自由基、延缓衰老等作用，另有多种矿质元素及蛋白质、氨基酸。但现代科学对天麻的研究主要集中在天麻素上，而对于天麻中所含的其它成分，特别是天麻多糖研究较少，既不够系统也不够深入。在现有的专利文献中，仅有CN101357192B以鲜天麻为原料的天麻粗多糖及天麻醇溶物的分离制备方法，鲜天麻杀青、破碎、加水磨浆、浆液过滤，清液醇沉，得天麻粗多糖，天麻滤渣用醇渗滤提取，提取液经过浓缩、干燥、得天麻醇溶物。其天麻粗多糖包含了蛋白质，蛋白质结合糖，低聚糖等。在非专利文献：[明建等.天麻水溶性多糖分离纯化及理化性质研究.食品科学，2008,29(9):344-348；赵鹏.天麻多糖的研究概况.甘肃中医学院学报,2008,25(4):49-52；朱晓霞等.天麻多糖提取工艺优化.时珍国药医药,2007,18（4）：906-907;刘明庆等.天麻多糖提取工艺及纯化研究中国药师.2011,14(11):1593-1596]均以干天麻为原料，水提、Seaveg法除蛋白、醇沉等制备天麻多糖；未见鲜天麻为原料，酶解后，膜分离制备天麻多糖的报道。
发明内容
本发明提供了一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法，其目的是通过简易可行、可操作行强的工艺技术，解决天麻多糖的制备工艺步骤复杂、操作耗时、生产成本较高问题。
本发明采用技术方案如下：
（1）将鲜天麻洗净，在微波功率600～800W进行微波杀酶处理，至天麻无白心。
（2）加3-5倍水磨浆，至颗粒度2～10μm。
（3）向天麻浆液中加入鲜天麻质量0.2～2.0％的酶活45万u/g的纤维素酶、酶活100万u/g的木瓜蛋白酶，酶活120万U/g中性蛋白酶中的一种或数种，进行酶解，酶解时间0.5～4小时，酶解温度30～65℃，酶解液pH5～7。
（4）酶解液过滤是先经过吊带式离心机粗滤，再经澄清型管式离心机精滤，滤得料液1，滤渣加5～8倍水，加入0.2～2.0％滤渣重量的单一酶或复合酶再进行酶解提取，酶解液经相同方法过滤得料液2，合并料液1和料液2。
（5）合并的料液先采用分子切割量150～120KDa超滤膜进行超滤处理，超滤压力为0.08～0.25MPa，温度为20～40℃，滤过液继续采用分子切割量20KDa的超滤膜在压力为0.08～0.20MPa，温度为20～40℃，进行超滤处理，收集截留液。
（6）截留液真空浓缩后，冷冻干燥，粉碎后得到天麻多糖。
本方法天麻多糖的得率比传统的水提醇沉法有较大的提高，获得的多糖的含量也远高于水提醇沉法的产品；本产品为白色粉末状，易溶于水，不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂；进行Molisch反应、蒽醌-硫酸反应呈阳性，表明产品为糖类化合物；茚三酮反应呈阴性，表明多糖中不含蛋白质；与碘反应呈阴性，表明多糖中不含有淀粉；费林试剂反应呈阴性，表明多糖中不含游离的还原性小分子糖。通过苯酚-硫酸法定量测定，本方法制备的多糖含量为72～78%。
本方法的优点：
（1）本方法天麻多糖的得率比传统的水提醇沉法有较大的提高，多糖的含量也远高于水提醇沉法的产品，同时还保持多糖的结构与活性。
（2）采用酶法辅助超滤膜超滤提取天麻多糖，具有生产工艺合理、简单，易于工业化生产的特点。
（3）本方法天麻多糖产品纯度高，可用来制成医药或功能食品上可以接受的制剂，与适当辅料可制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、散剂或其它药学上可能的剂型。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，但实施例并不是对本发明的限定。
实施例一
将鲜天麻50kg洗净后用微波法进行杀青，微波功率600W，至天麻透心；将杀青后天麻破碎、加3倍水磨浆，至颗粒度2～10μm，向天麻浆液中加入100g酶活45万u/g的纤维素酶、100g酶活100万u/g的木瓜蛋白酶，100g酶活120万U/g中性蛋白酶进行酶解，酶解时间4小时，酶解温度60℃，酶解液pH6～7；酶解液先经过吊带式离心机粗滤，再经澄清型管式离心机精滤，滤得料液1；滤渣再加5倍水，加入120g酶活100万u/g的木瓜蛋白酶，100g酶活120万U/g中性蛋白酶进行酶解提取，酶解液过滤得料液2，合并料液1和料液2；合并的料液采用分子切割量150KDa超滤膜进行超滤处理，超滤压力为0.10MPa，温度为35℃，滤过液继续采用分子切割量20KDa的超滤膜在压力为0.09MPa，温度为30℃进行超滤处理，收集截留液，截留液真空浓缩后，冷冻干燥，粉碎后得到天麻多糖。
实施例二
将鲜天麻50kg洗净后用微波法进行杀青，微波功率800W，至天麻透心；将杀青后天麻破碎、加5倍水磨浆，至颗粒度2～10μm，向天麻浆液中加入250g酶活45万u/g的纤维素酶、300g酶活100万u/g的木瓜蛋白酶，酶解时间2小时，酶解温度50℃，酶解液pH6；酶解液先经过吊带式离心机粗滤，再经澄清型管式离心机精滤，滤得料液1；滤渣再加5倍水，100g酶活120万U/g中性蛋白酶进行酶解提取，酶解液过滤得料液2，合并料液1和料液2；合并的料液采用分子切割量150KDa超滤膜进行超滤处理，超滤压力为0.15MPa，温度为30℃，滤过液继续采用分子切割量20KDa的超滤膜进行超滤处理，超滤压力为0.12MPa，温度为30℃，收集截留液，截留液真空浓缩后，冷冻干燥，粉碎后得到天麻多糖。
实施例三
将鲜天麻50kg洗净后用微波法进行杀青，微波功率600W，至天麻透心；将杀青后天麻破碎、加3倍水磨浆，至颗粒度2～10μm，向天麻浆液中加入400g酶活100万u/g的木瓜蛋白酶，酶解时间2小时，酶解温度50℃，酶解液pH7；酶解液先经吊带式离心机粗滤，再经澄清型管式离心机精滤，滤得料液1；滤渣再加5倍水，加入100g酶活45万u/g的纤维素酶、120g酶活120万U/g中性蛋白酶进行酶解提取，酶解液过滤得料液2，合并料液1和料液2；合并的料液采用分子切割量120KDa超滤膜进行超滤处理，超滤压力为0.20MPa，温度为40℃，滤过液继续采用分子切割量20KDa的超滤膜进行超滤处理，超滤压力为0.10MPa，温度为40℃，收集截留液，截留液真空浓缩后，冷冻干燥，粉碎后得到天麻多糖。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法，所述方法包括：
（1）将鲜天麻洗净进行微波杀酶处理，微波功率600～800W，至天麻无白心。
（2）加3-5倍水磨浆，至颗粒度2～10μm。
（3）向天麻浆液中加入鲜天麻质量0.2～2.0％的单一酶或复合酶进行酶解，酶解时间0.5～4小时，酶解温度30～65℃，酶解液pH5～7。
（4）酶解液经过滤得料液1，滤渣加5～8倍水量，加入滤渣质量0.2～2.0％的单一酶或复合酶再进行酶解提取，酶解液过滤得料液2，合并料液1和料液2。
（5）合并的料液采用超滤膜超滤，超滤压力为0.08～0.25MPa，温度为20～40℃，先采用分子切割量150～120KDa超滤膜进行超滤处理，滤过液继续采用分子切割量20KDa的超滤膜进行超滤处理，收集截留液。
（6）截留液真空浓缩后，冷冻干燥，粉碎后得到天麻多糖。
2.如权利要求1所述的一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法，其特征在于：步骤3的酶解是在30～65℃，pH为5～7的条件下，向天麻浆液加入单一或复合酶混合酶，所述酶与鲜天麻的重量百分比为0.2～2.0％；所述酶按重量百分比包括：酶活45万u/g的纤维素酶0～2.0％、酶活100万u/g的木瓜蛋白酶0～2.0％，酶活120万U/g中性蛋白酶0～2.0％，酶解时间0.5～4小时。
3.如权利要求1所述的一种天麻多糖的提取方法，其特征在于：步骤4的过滤是先经吊带式离心机粗滤，再经澄清型管式离心机精滤。
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