CN103608343B

CN103608343B - 用于制备作为大麻素受体调节剂的稠合氮杂环的晶形和制备方法

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Publication number: CN103608343B
Application number: CN201280020512.3A
Authority: CN
Inventors: A.C.布莱克本; 韩相敦; R.M.琼斯; 安东尼奥·加利多·蒙塔尔班; B.B.帕尔; J.K.鲁特
Original assignee: Arena Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Arena Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2011-02-25
Filing date: 2012-02-24
Publication date: 2019-02-01
Anticipated expiration: 2032-02-24
Also published as: AU2012222146A1; MY165767A; US11560369B2; MX346533B; EP2678330A1; US20210380560A1; DK3395812T3; AU2012222146B2; EP3395812B8; CL2013002436A1; CO6852066A2; ES2932441T3; BR112013021549A2; EP4166552A1; JP2014506602A; CA2827057C; NZ614787A; EP3395812B1; ZA201306402B; US10183930B2

Abstract

本发明涉及(1aS,5aS)‑2‑(4‑氧‑吡嗪‑2‑基)‑1a,2,5,5a‑四氢‑1H‑2,3‑二氮杂‑环丙并[a]并环戊二烯‑4‑甲酸((S)‑1‑羟基甲基‑2,2‑二甲基‑丙基)‑酰胺(化合物1)的晶形及其药物组合物，所述晶形和组合物调节大麻素受体的活性并因此可用于治疗CB₂受体介导的病症，所述CB₂受体介导的病症例如，骨关节炎；疼痛；痛觉过敏；异常性疼痛；炎性痛觉过敏；神经性痛觉过敏；急性伤害感受；骨质疏松症；与多发性硬化症有关的痉挛状态；自身免疫性病症；变应性应答；CNS炎症，例如动脉粥样硬化；不期望的免疫细胞活动，以及与选自以下的病症有关的炎症：骨关节炎、过敏性反应、贝切特氏病、移植排异、血管炎、痛风、脊椎炎、病毒性疾病、细菌性疾病、狼疮、炎性肠病、自身免疫性肝炎和1型糖尿病；年龄相关性黄斑变性；咳嗽；白血病；淋巴瘤；CNS肿瘤；前列腺癌；阿尔茨海默病；卒中诱导的损伤；痴呆；肌萎缩性侧索硬化；以及帕金森病。

Description

用于制备作为大麻素受体调节剂的稠合氮杂环的晶形和制备方法

技术领域

本发明涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的晶形及其药物组合物，所述晶形和组合物调节大麻素受体的活性并因此可用于治疗CB₂受体介导的病症，所述病症例如，骨关节炎；疼痛，例如骨痛和关节痛、肌肉疼痛、牙痛、偏头痛和其它头痛、炎性疼痛、神经性疼痛、由于治疗剂的不良作用而引起的疼痛，以及与选自以下病症有关的疼痛：骨关节炎、癌症、多发性硬化症、变应性应答、肾炎综合征、硬皮病、甲状腺炎、糖尿病性神经病、纤维肌痛、HIV相关的神经病、坐骨神经痛和自身免疫性疾病；痛觉过敏；异常性疼痛；炎性痛觉过敏；神经性痛觉过敏；急性伤害感受；骨质疏松症；多发性硬化症有关的痉挛状态；自身免疫性病症，例如选自以下的自身免疫性病症：多发性硬化症、格-巴综合征(Guillan-Barré syndrome)、多发性神经根性神经病(polyradiculoneuropathy)、慢性炎性脱髓鞘、类风湿性关节炎、牛皮癣性关节炎、强直性脊椎关节炎(ankylosing spondylarthritis)和反应性关节炎；变应性应答，例如与选自以下的病症有关的变应性应答：特应性皮炎、瘙痒症、荨麻疹、哮喘、结膜炎、变应性鼻炎和过敏性反应(anaphylaxis)；CNS炎症，例如，与选自以下的病症有关的CNS炎症：阿尔茨海默病(Alzheimer's disease)、卒中(stroke)、痴呆、肌萎缩性侧索硬化(amyotrophic lateralsclerosis)和人免疫缺陷病毒；动脉粥样硬化；不期望的免疫细胞活性(undesired immunecell activity)，以及与选自以下的病症有关的炎症：骨关节炎、过敏性反应、贝切特氏病(Behcet's disease)、移植排异(graft rejection)、血管炎、痛风、脊椎炎、病毒性疾病、细菌性疾病、狼疮、炎性肠病、自身免疫性肝炎和1型糖尿病；年龄相关性黄斑变性；咳嗽；白血病；淋巴瘤；CNS肿瘤；前列腺癌；阿尔茨海默病；卒中诱导的损伤(stroke-induceddamage)；痴呆；肌萎缩性侧索硬化和帕金森病(Parkinson's disease)。本发明还涉及用于制备化合物1的晶形和溶剂化物及其药物组合物的方法和中间体。

背景技术

大麻素是存在于植物和动物中的一组细胞外信号传导分子。来自这些分子的信号在动物是通过两种G-蛋白偶联受体介导的：大麻素受体1(CB₁)和大麻素受体2(CB₂)。CB₁在CNS神经元中表达最丰富，但还以较低浓度存在于各种外周组织和细胞中(Matsuda,L.A.etal.(1990)Nature346:561-564)。相反，CB₂虽然不专有地，但主要在非神经组织中表达，例如在造血细胞、内皮细胞、成骨细胞、破骨细胞、内分泌胰腺(the endocrine pancreas)和癌性细胞系(Munro,S.et al.(1993)Nature365:61-65;以及如Pacher,P.et al.(2006)Pharmacol.Rev.58(3):389-462中所综述的)。正因如此，CB₁被认为主要负责介导大麻素对机体的向精神作用(psychotropic effect)，而CB₂则被认为主要负责大麻素的大多数非神经作用。

发明内容

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的晶形：

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的无水晶形。

本发明的一个方面涉及制备(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形的方法，其包括以下步骤：

1)使(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺从结晶混合物中结晶，从而获得在结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的晶形，其中所述结晶混合物包含乙腈和水；以及

2)使(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的晶形与所述结晶混合物分离，从而获得(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形。

本发明的一个方面涉及通过如本申请所述方法制备的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形。

本发明的一个方面涉及组合物，其包含如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形。

本发明的一个方面涉及组合物，其包含如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形，以及可药用载体。

本发明的一个方面涉及制备组合物的方法，其包括将本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水结晶与可药用载体混合。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗大麻素受体介导的病症的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗CB₂受体介导的病症的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形在制备用于治疗大麻素受体介导的病症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形在制备用于治疗CB₂受体介导的病症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形，其用于通过疗法治疗人体或动物体的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形，其用于治疗大麻素受体介导的病症的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水形式，其用于治疗CB₂受体介导的病症的方法中。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的丙酮溶剂化物。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的非选择性溶剂化物。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的乙酸乙酯溶剂化物。

大麻素受体的某些调节剂披露于2010年8月27日提交的PCT申请PCT/US2010/002360(国际公开号WO2011/025541)中，以及在美国临时专利申请61/275,506、61/396,588和61/400,146中，在此将其中每个的全部内容引入本申请作为参考。

本申请所公开的发明的这些和其它方面将会随着专利公开进行而陈述更多的细节。

附图简述

图1显示含化合物1的晶形(CH₂Cl₂溶剂化物)的样品的差示扫描量热法(DSC)热分析图和含化合物1的晶形(CH₂Cl₂溶剂化物)的样品的热重分析(TGA)热分析图。

图2显示含使用CH₂Cl₂/己烷从重结晶获得的化合物1的晶形(CH₂Cl₂溶剂化物)的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图(顶部迹线)与含通过将非溶剂化的化合物1在CH₂Cl₂中浆化所获得的化合物1的晶形(CH₂Cl₂溶剂化物)的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图(底部迹线)的叠加。所述PXRD显示从CH₂Cl₂浆化所获得的结晶溶剂化物基本上不能与从CH₂Cl₂/己烷重结晶所获得的结晶溶剂化物相区别。

图3显示基于单晶X-射线衍射分析的化合物1的半-CH₂Cl₂溶剂化物的不对称单元。

图4显示含化合物1的无水晶形的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图。

图5显示含化合物1的无水晶形的样品的差示扫描量热法(DSC)热分析图和含化合物1的无水晶形的样品的热重分析(TGA)热分析图。

图6显示含化合物1的无水晶形的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图。

图7显示含化合物1的无水晶形的样品的差示扫描量热法(DSC)热分析图和含化合物1的无水晶形的样品的热重分析(TGA)热分析图。

图7A显示含化合物1的无水晶形的样品的动态水分吸附(DMS)的吸附和解吸等温线。

图8显示含化合物1的晶形(丙酮溶剂化物)的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图。

图9显示含化合物1的晶形(丙酮溶剂化物)的样品的差示扫描量热法(DSC)热分析图和含化合物1的晶形(丙酮溶剂化物)的样品的热重分析(TGA)热分析图。

图10显示含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图，见实施例6。

图11显示含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图，见实施例6。

图12显示含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图，见实施例6。

图13显示含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的差示扫描量热法(DSC)热分析图和含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的热重分析(TGA)热分析图，见实施例6。

图14显示含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的差示扫描量热法(DSC)热分析图和含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的热重分析(TGA)热分析图，见实施例6。

图15显示含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的差示扫描量热法(DSC)热分析图和含化合物1的晶形(非选择性溶剂化物)的样品的热重分析(TGA)热分析图，见实施例6。

图16显示含化合物1的晶形(乙酸乙酯溶剂化物)的样品的粉末X-射线衍射(PXRD)图。

图17显示含化合物1的晶形(乙酸乙酯溶剂化物)的样品的差示扫描量热法(DSC)热分析图和含化合物1的晶形(乙酸乙酯溶剂化物)的样品的热重分析(TGA)热分析图。

图18显示化合物1在大鼠骨关节炎的碘乙酸单钠(MIA)模型中的作用，见实施例9。

具体实施方式

定义

为了清楚和一致，将在整个专利文件中使用下列定义。

术语“激动剂”指与G蛋白偶联受体(例如大麻素受体)相互作用并激活G蛋白偶联受体，并可因此引起所述受体的生理学或药理学应答特性的部分。例如，当激动剂与受体结合时，激动剂可激活细胞内应答，或者增强GTP与膜的结合。

术语“有治疗需要”和术语“有此需要”当涉及治疗时可互换使用以表示由医护人员(caregiver)(例如就人类而言为医师、护士、从业护士等等；就包括非人类哺乳动物的动物而言为兽医)所作的关于个人或动物需要治疗或会从治疗中获益的判断。该判断是基于多种因素而作出的，所述因素在医护人员专业知识领域内，但包括关于个体或动物由于可用本发明化合物治疗的疾病、病情或病症而生病或将要生病的认识。相应地，本发明化合物可以保护的或预防的方式来使用；或者本发明化合物可用于减轻、抑制或改善所述疾病、病情或病症。

术语“个体”指任何动物，其包括哺乳动物，优选地指小鼠、大鼠、其它啮齿类、兔、狗、猫、猪、牛、羊、马或灵长类，并且最优选地指人类。

术语“调节(modulate or modulating)”意在表示具体活性、功能或分子的量、质量、应答或作用的增加或减少。

术语“组合物”指化合物或其晶形(包括但不限于，本发明化合物的盐、溶剂化物和水合物)与至少一种其它组分的组合，例如，在合成、预先配制(preformulation)、过程内测试(in-process testing)所获得/制备的组合物(即，TLC、HPLC、NMR样品)等等。

术语“药物组合物”指包含至少一种活性成分的具体组合物；所述活性成分包括包括但不限于，本发明化合物的盐、溶剂化物和水合物，由此所述组合物适合于在哺乳动物(例如但不限于人类)中详细说明的、有效结果的研究。本领域的普通技术人员基于技术人员的需要，应当明白和理解适合用于确定活性成分是否具有希望的有效结果的技术。

术语“治疗有效量”指在正为研究人员、兽医、医生或其它临床医师或医护人员或者个体所寻找的组织、系统、动物、个体或人类中引起生物或医学应答的活性化合物或药物的量，包括下列的一种或多种：

(1)预防疾病，例如，在可能易患疾病、病情或病症但尚未经历或展现出所述疾病病理(pathology)或征候(symptomatology)的个体中预防疾病、病情或病症；

(2)抑制疾病，例如，在正经历或展现出所述疾病、病情或病症病理或征候的个体中抑制疾病、病情或病症(即，阻止病况和/或征候的进一步发展)；以及

(3)改善疾病，例如，在正经历或展现出所述疾病、病情或病症病理或征候的个体中改善疾病、病情或病症(即，逆转所述病况和/或征候)。

应当理解的是，为了清楚，在单独实施方案背景下描述的本发明的某些特征，还可在单个实施方案中以组合的形式提供。相反地，为了简洁，在单个实施方案背景下描述的本发明的各种特征，还可单独或在任何适合的亚组合中提供。此外，本发明还具体包括描述这些本申请所述用途和医学适应症的实施方案中所列出的用途和医学适应症的亚组合，正如在本申请中单独且明确引用用途和医学适应症的每个亚组合。

本发明方法

本发明尤其涉及用于制备大麻素CB₂受体调节剂(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形的方法。

1)使(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺从结晶混合物中结晶，从而获得结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺，其中所述结晶混合物包含乙腈和水；以及

2)将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的晶形与结晶混合物分离，从而获得(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形。

在一些实施方案中，结晶在约-10℃至约35℃的温度进行。在一些实施方案中，结晶在约-10℃至约25℃的温度进行。在一些实施方案中，结晶在-10℃至约10℃的温度进行。在一些实施方案中，结晶在约-5℃至约5℃的温度进行。

在一些实施方案中，所述结晶混合物通过以下步骤制备：

1)将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺溶解于乙腈和第一含量水，形成第一混合物；以及

2)加入第二含量水，从而获得所述结晶混合物。在一些实施方案中，溶解在约25℃至约80℃的温度进行。在一些实施方案中，溶解在约40℃至约70℃的温度进行。在一些实施方案中，溶解在约55℃至约65℃的温度进行。在一些实施方案中，溶解在约58℃至约62℃的温度进行。在一些实施方案中，溶解在约60℃的温度进行。在一些实施方案中，存在于第一混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、乙腈和第一含量水之间的摩尔比为约1.0:7.3:30.0至约1.0:12.1:49.6。在一些实施方案中，存在于第一混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、乙腈和第一含量水之间的摩尔比为约1.0:7.8:31.8至约1.0:11.6:47.6。在一些实施方案中，存在于第一混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、乙腈和第一含量水之间的摩尔比为约1.0:8.2:33.7至约1.0:11.2:45.7。在一些实施方案中，存在于第一混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、乙腈和第一含量水之间的摩尔比为约1.0:8.7:35.7至约1.0:10.7:43.7。在一些实施方案中，存在于第一混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、乙腈和第一含量水之间的摩尔比为约1.0:9.2:37.0至约1.0:10.2:41.7。在一些实施方案中，存在于第一混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、乙腈和第一含量水之间的摩尔比为约1.0:9.7:39.7。在一些实施方案中，以使得第二含量水与第一混合物的混合物的温度在约25℃至约80℃的速率，向第一混合物中加入第二含量水。在一些实施方案中，以使得第二含量水与第一混合物的混合物的温度在约40℃至约70℃的速率，向第一混合物中加入第二含量水。在一些实施方案中以是使得第二含量水与第一混合物的混合物的温度在约55℃至约65℃的速率，向第一混合物中加入第二含量水。在一些实施方案中，以使得第二含量水与第一混合物的混合物的温度在约58℃至约62℃的速率，向第一混合物中加入第二含量水。在一些实施方案中，以使得第二含量水与第一混合物一起的混合物的温度在约60℃的速率，向第一混合物中加入第二含量水。

在一些实施方案中，存在于结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、乙腈和水之间的摩尔比为约1.0:7.3:327.4至约1.0:12.1:545.6。在一些实施方案中，存在于结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、结晶混合物中的乙腈、水之间的摩尔比为约1.0:7.8:349.2至约1.0:11.6:523.8。在一些实施方案中，存在于结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、结晶混合物中的乙腈、水之间的摩尔比为约1.0:8.2:371.0至约1.0:11.2:502.0。在一些实施方案中，存在于结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、结晶混合物中的乙腈、水之间的摩尔比为约1.0:8.7:392.8至约1.0:10.7:480.1。在一些实施方案中，存在于结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、结晶混合物中的乙腈、水之间的摩尔比为约1.0:9.2:414.7至约1.0:10.2:458.3。在一些实施方案中，存在于结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、结晶混合物中的乙腈、水之间的摩尔比为约1.0:9.7:436.5。

在一些实施方案中，结晶和溶解步骤中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺选自：

1)(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的二氯甲烷溶剂化物；

2)(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的丙酮溶剂化物；

3)(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的非选择性溶剂化物；以及

4)(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的乙酸乙酯溶剂化物；以及

它们的混合物。

在一些实施方案中，在溶解步骤之前的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺选自：

它们的混合物。

在一些实施方案中，分离包括将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的晶形从结晶混合物中过滤出。

在一些实施方案中，分离包括将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的晶形从结晶混合物中移除。

本发明的一个方面涉及制备无水晶形的方法，所述方法还包括将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的晶形干燥以获得(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形的步骤。在一些实施方案中，干燥在约15℃至约80℃的温度进行。在一些实施方案中，干燥在约25℃至约65℃的温度进行。在一些实施方案中，干燥在约35℃至约55℃的温度进行。在一些实施方案中，干燥在约50℃的温度进行。在一些实施方案中，干燥在小于760mm Hg的压力和约35℃至约55℃的温度进行。在一些实施方案中，干燥在小于760mm Hg和约55℃至约65℃的温度进行。

在一些实施方案中，在分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形具有约95%或更高的化学纯度。在一些实施方案中，在分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形具有约98%或更高的化学纯度。在一些实施方案中，在分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形具有约99%或更高的化学纯度。在一些实施方案中，在分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形具有约95%或更高的对映体过量。在一些实施方案中，在分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形具有约98%或更高的对映体过量。在一些实施方案中，在分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形具有约99%或更高的对映体过量。在一些实施方案中，在分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形具有约99%或更高的化学纯度并具有约99%或更高的对映体过量。

本发明的一个方面涉及通过本申请所述方法制备的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形。

本发明的一个方面涉及制备组合物的方法，其包括将如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形与可药用载体混合。

本发明的一个方面涉及制备组合物的方法，其还包括使所述组合物制成药品，例如，片剂、丸剂、粉剂(powder)、锭剂、囊剂(sachet)、扁囊剂(cachet)、酏剂、混悬剂(suspension)、乳剂、溶液剂、糖浆剂、软明胶胶囊剂、硬明胶胶囊剂、栓剂、无菌注射液或无菌包装的粉剂。

化合物1的晶形

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的无水形式和溶剂化物形式。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的DCM溶剂化物。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的无水形式。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的丙酮溶剂化物。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的非选择性溶剂化物。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的乙酸乙酯溶剂化物。

本申请所述溶剂化物和无水形式的晶形可通过它们对以下方法的独特固态特征图(signature)来鉴别，所述方法，例如，差示扫描量热法(DSC)、粉末X-射线衍射(PXRD)，以及其它固态方法。

对晶形的水或溶剂含量的进一步表征可通过任何下列的方法来测量(gauged)，例如，热重分析(TGA)、DSC等等。

对于DSC，已知的是，所观察的温度将会取决于样品纯度、温度变化的速率，以及样品制备技术和所用的具体仪器。因此，本申请所报道的与DSC热分析图有关的值可变化约正或负4℃(即，±4℃)。本申请所报道的与DSC热分析图有关的值还可变化约正或负20焦耳/克(即，±20焦耳/克)。

在一些实施方案中，本申请所报道的DSC热分析图值涉及去溶剂化事件(dissolvation event)。当本申请所报道的DSC热分析图值涉及去溶剂化事件时，本申请所报道的值为估计值。扫描速率和盘闭合度(pan closure)可影响去溶剂化事件的DSC值，所述DSC值可变化约正或负25℃(即，±25℃)。使用具有无褶皱盖(uncrimped lid)的铝盘和10℃/分钟的扫描速率记录本申请所报道的去溶剂化事件的DSC值.

对于PXRD，峰的相对强度是可变化的，这取决于样品制备技术、样品固定操作(sample mounting procedure)和所用的具体仪器。此外，仪器差异(instrumentvariation)和其它因素常常能影响2θ值。因此，衍射图的峰归属可变化正或负0.2°2θ(即，±0.2°2θ)。

对于TGA，本申请所报道的特征可变化约正或负5℃(即，±5℃)。本申请所报道的TGA特征还可例如由于样品差异(sample variation)而变化约正或负2%(即，±2%)重量变化，。

对晶形吸湿性的进一步表征可通过例如动态水分吸附(DMS)测量。本申请所报道的DMS特征可变化约正或负5%(即，±5%)相对湿度。本申请所报道的DMS特征还可变化约正或负5%(即，±5%)重量变化。

1.化合物1的二氯甲烷(DCM)溶剂化物。

A.化合物1(DCM溶剂化物)

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的DCM溶剂化物。化合物1的DCM溶剂化物通过PXRD来表征。如PXRD所测定的DCM溶剂化物的物理性质概述于下表1中。

表1

存在于这些溶剂化物中DCM的量是可变化的，并至多为约10.6wt%(重量百分比)。DCM的量可容易地通过TGA测定。来自实施例1,方法1,步骤F的DCM溶剂化物的物理性质概述与下表2中。

表2

	化合物1(DCM溶剂化物，实施例1,方法1,步骤F)
		TGA	图1：在高达约150℃约5.9%的重量减少
DSC	图1：吸热外推起始温度：约163℃

(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)DCM溶剂化物的一些粉末X-射线衍射峰示于下表3中。

表3

B.化合物1的二氯甲烷半溶剂化物

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的DCM半溶剂化物。化合物1的DCM半溶剂化物通过从CH₂Cl₂和己烷中的慢慢结晶来制备(实施例2)。将晶体结构解析并示于图3中。

2.化合物1(无水形式)。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的无水形式。化合物1(无水形式)的晶形的物理性质概述于下表4中。

表4

(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的无水形式的一些粉末X-射线衍射峰示于下表5中。

表5

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形，其中所述无水晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述无水晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°和10.7°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述无水晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°和16.9°±0.2°峰。在一些实施方案中，所述无水晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°和11.1°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述无水晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°和17.4°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述无水晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°、17.4°±0.2°、22.1°±0.2°和16.5°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述无水晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°、17.4°±0.2°、22.1°±0.2°、16.5°±0.2°、14.5°±0.2°、11.8°±0.2°和18.9°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述无水晶形具有基本上如图6所示的粉末X-射线衍射图，其中“基本上”意思是所报道的峰可改变约±0.2°2θ。

在一些实施方案中，所述无水晶形具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约159.6℃至约169.6℃的吸热。在一些实施方案中，所述无水晶形具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约160.6℃至约168.6℃的吸热。在一些实施方案中，所述无水晶形具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约162.6℃至约166.6℃的吸热。在一些实施方案中，所述无水晶形具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约163.6℃至约165.6℃的吸热。在一些实施方案中，所述无水晶形具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约164.6℃的吸热。在一些实施方案中，所述无水晶形具有基本上如图7所示的差示扫描量热分析图，其中“基本上”意思是所报道的DSC特征可改变约±4℃并且所报道的DSC特征可改变约±20焦耳/克。

在一些实施方案中，所述无水晶形具有在低于约135℃显示约0.5%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述无水晶形具有在低于约135℃显示约0.25%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述无水晶形具有在低于约135℃显示约0.05%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述无水晶形具有基本上如图7所示的热重分析曲线，其中“基本上”意思是所报道的TGA特征可改变约±5℃，并且所报道的TGA特征可改变约±2%重量变化。

本发明的一个方面涉及所述无水晶形，其具有：

1)包含8.5°±0.2°和10.7°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

2)包含外推起始温度为约159.6℃至约169.6℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在低于约135℃显示约0.5%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述无水晶形，其具有：

1)包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°和16.9°±0.2°2θ峰的X-射线粉末衍射图；

2)包含外推起始温度为约160.6℃至约168.6℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在低于约135℃显示约0.25%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述无水晶形，其具有：

1)包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°和11.1°±0.2°2θ峰的X-射线粉末衍射图；

2)包含外推起始温度为约162.6℃至约166.6℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在低于约135℃显示约0.05%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述无水晶形，其具有：

1)包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°和17.4°±0.2°2θ峰的X-射线粉末衍射图；

2)包含外推起始温度为约163.6℃至约165.6℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在低于约135℃显示约0.05%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述无水晶形，其具有：

1)包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°、17.4°±0.2°、22.1°±0.2°和16.5°±0.2°2θ峰的X-射线粉末衍射图；

2)包含外推起始温度为约164.6℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在低于约135℃显示约0.05%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述无水晶形，其具有：

1)包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°、17.4°±0.2°、22.1°±0.2°、16.5°±0.2°、14.5°±0.2°、11.8°±0.2°和18.9°±0.2°2θ峰的X-射线粉末衍射图；

3)在低于约135℃显示约0.05%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述无水晶形，其具有：

1)基本上如图6所示的X-射线粉末衍射图；

2)基本上如图7所示的差示扫描量热分析图；和/或

3)基本上如图7所示的热重分析曲线。

3.化合物1(丙酮溶剂化物)。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的丙酮溶剂化物。化合物1的丙酮溶剂化物通过PXRD表征。如PXRD所测定的丙酮溶剂化物的物理性质概述于下表6中。

表6

存在于这些溶剂化物中的丙酮的量是可变化的并可容易地通过TGA测定。来自实施例5的丙酮溶剂化物的物理性质概述于下表7中。

表7

	化合物1(丙酮溶剂化物，实施例5)
		TGA	图9：在高达约150℃约5.5%的重量减少
DSC	图9：吸热外推起始温度：约163℃

(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的丙酮溶剂化物的一些粉末X-射线衍射峰示于表8中。

表8

本发明的一个方面涉及丙酮溶剂化物，其中所述丙酮溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°和25.0°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°和16.6°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°和11.0°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°、11.0°±0.2°、10.1°±0.2°和26.0°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°、11.0°±0.2°、10.1°±0.2°、26.0°±0.2°、7.1°±0.2°和22.7°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°、11.0°±0.2°、10.1°±0.2°、26.0°±0.2°、7.1°±0.2°、22.7°±0.2°、13.7°±0.2°、16.1°±0.2°和25.6°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有基本上如图8所示的粉末X-射线衍射图，其中“基本上”意思是所报道的峰可改变约±0.2°2θ。

在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约158.0℃至约168.0℃的吸热。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约159.0℃至约167.0℃的吸热。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约161.0C至约165.0℃的吸热。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约162.0℃至约163.0℃的吸热。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约163.0℃的吸热。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有基本上如图9所示的差示扫描量热分析图，其中“基本上”意思是所报道的DSC特征可改变约±4℃并且所报道的DSC特征可改变约±20焦耳/克。

在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有在约150℃以下显示约6.0%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有在约150℃以下显示约5.75%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有在约150℃以下显示约5.5%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述丙酮溶剂化物具有基本上如图9所示的热重分析曲线，其中“基本上”意思是所报道的TGA特征可改变约±5℃，并且所报道的TGA特征可改变约±2%重量变化。

本发明的一个方面涉及所述丙酮溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°和25.0°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约158.0℃至约168.0℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述丙酮溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°和16.6°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约159.0℃至约167.0℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述丙酮溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°和11.0°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约161.0℃至约165.0℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述丙酮溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°、11.0°±0.2°、10.1°±0.2°和26.0°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

2)包含外推起始温度为约162.0℃至约163.0℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在约150℃以下显示约6.0%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述丙酮溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°、11.0°±0.2°、10.1°±0.2°、26.0°±0.2°、7.1°±0.2°和22.7°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

2)包含外推起始温度为约163.0℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在约150℃以下显示约5.75%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述丙酮溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、25.0°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°、11.0°±0.2°、10.1°±0.2°、26.0°±0.2°、7.1°±0.2°、22.7°±0.2°、13.7°±0.2°、16.1°±0.2°和25.6°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

3)在约150℃以下显示约5.5%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述丙酮溶剂化物，其具有：

1)基本上如图8所示的X-射线粉末衍射图；

2)基本上如图9所示的差示扫描量热分析图；和/或

3)基本上如图9所示的热重分析曲线。

4.化合物1(非选择性溶剂化物)。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的非选择性溶剂化物。非选择性溶剂化物指这样的溶剂化物，所述溶剂化物具有基本上与PXRD所测定的相同的晶形，并且取决于纯度，所述溶剂化物在去溶剂化之后将会具有与DSC所测定的类似的外推起始温度(+/-4.0℃)，而不管使用何种溶剂或多种溶剂来制备所述溶剂化物。应当理解的是，所述TGA迹线将会因非选择性溶剂化物而异，并且主要由制备中所使用的溶剂、所形成的溶剂化物和所述溶剂化物中存在的溶剂量决定。

化合物1的非选择性溶剂化物通过PXRD表征。如PXRD所测定的非选择性溶剂化物的物理性质概述于下表9中。

表9

存在于这些溶剂化物中各溶剂的量是可变化的并且可容易地通过TGA测定。化合物1的这样一种非选择性溶剂化物是如实施例6中所述的乙酸乙酯溶剂化物。该乙酸乙酯非选择性溶剂化物的物理性质(即，TGA和DSC)概述于下表10中。

表10

	化合物1(非选择性溶剂化物/乙酸乙酯,实施例6)
		TGA	图13：在高达约150℃约4.8%的重量减少
DSC	图13：吸热外推起始温度：约161℃

(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的非选择性溶剂化物的一些粉末X-射线衍射峰示于下表11中。

表11

本发明的一个方面涉及非选择性溶剂化物，所述非选择性溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含18.2°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含18.2°±0.2°和18.3°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°和19.9°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°、19.9°±0.2°、23.8°±0.2°和13.0°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°、19.9°±0.2°、23.8°±0.2°、13.0°±0.2°、7.9°±0.2°和9.9°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°、19.9°±0.2°、23.8°±0.2°、13.0°±0.2°、7.9°±0.2°、9.9°±0.2°、21.8°±0.2°和17.4°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°、19.9°±0.2°、23.8°±0.2°、13.0°±0.2°、7.9°±0.2°、9.9°±0.2°、21.8°±0.2°、17.4°±0.2°、20.5°±0.2°、20.4°±0.2°、10.7°±0.2°、10.3°±0.2°、16.5°±0.2°、18.9°±0.2°、14.9°±0.2°和10.9°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有基本上如图10所示的粉末X-射线衍射图，其中“基本上”意思是所报道的峰可改变约±0.2°2θ。

在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约159.8℃至约165.8℃的吸热。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约160.8℃至约164.8℃的吸热。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约158.8℃至约162.8℃的吸热。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约159.8℃至约161.8℃的吸热。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约160.8℃的吸热。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有基本上如图13所示的差示扫描量热分析图，其中“基本上”意思是所报道的DSC特征可改变约±4℃并且所报道的DSC特征可改变约±20焦耳/克。

在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有在约150℃以下显示约5.0%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有在约150℃以下显示约4.9%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有在约150℃以下显示约4.8%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述非选择性溶剂化物具有基本上如图13所示的热重分析曲线，其中“基本上”意思是所报道的TGA特征可改变约±5℃，并且所报道的TGA特征可改变约±2%重量变化。

本发明的一个方面涉及所述非选择性溶剂化物，其具有：

1)包含18.2°±0.2°和18.3°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约160.8℃至约165.8℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述非选择性溶剂化物，其具有：

1)包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°和19.9°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约160.8℃至约164.8℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述非选择性溶剂化物，其具有：

1)包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°、19.9°±0.2°、23.8°±0.2°和13.0°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约158.8℃至约162.8℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述非选择性溶剂化物，其具有：

1)包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°、19.9°±0.2°、23.8°±0.2°、13.0°±0.2°、7.9°±0.2°和9.9°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

2)包含外推起始温度为约159.8℃至约161.8℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在约150℃以下显示约5.0%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述非选择性溶剂化物，其具有：

1)包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°、19.9°±0.2°、23.8°±0.2°、13.0°±0.2°、7.9°±0.2°、9.9°±0.2°、21.8°±0.2°和17.4°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

2)包含外推起始温度为约160.8℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在约150℃以下显示约4.9%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述非选择性溶剂化物，其具有：

1)包含18.2°±0.2°、18.3°±0.2°、19.9°±0.2°、23.8°±0.2°、13.0°±0.2°、7.9°±0.2°、9.9°±0.2°、21.8°±0.2°、17.4°±0.2°、20.5°±0.2°、20.4°±0.2°、10.7°±0.2°、10.3°±0.2°、16.5°±0.2°、18.9°±0.2°、14.9°±0.2°和10.9°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

3)在约150℃以下显示约4.8%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述非选择性溶剂化物，其具有：

1)基本上如图10所示的X-射线粉末衍射图；

2)基本上如图13所示的差示扫描量热分析图；和/或

3)基本上如图13所示的热重分析曲线。

5.化合物1(乙酸乙酯溶剂化物)。

本发明的一个方面涉及(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的乙酸乙酯溶剂化物。化合物1的乙酸乙酯溶剂化物通过PXRD表征。如PXRD所测定的乙酸乙酯溶剂化物的物理性质概述于下表12中。

表12

存在于该溶剂化物中乙酸乙酯的量是可变化的并可容易地通过TGA测定。来自实施例7乙酸乙酯溶剂化物形式的非选择性溶剂化物的物理性质概述于下表13中。

表13

	化合物1(非选择性溶剂化物/乙酸乙酯,实施例7)
		TGA	图17：在高达约120℃约4.7wt%的重量减少
DSC	图17：吸热外推起始温度：约121℃

(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的乙酸乙酯溶剂化物的晶形的一些粉末X-射线衍射峰示于下表14中。

表14

本发明的一个方面涉及乙酸乙酯溶剂化物，所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°和9.0°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°和14.2°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°和12.8°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°、12.8°±0.2°、8.1°±0.2°和18.4°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°、12.8°±0.2°、8.1°±0.2°、18.4°±0.2°、17.9°±0.2°和17.3°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°、12.8°±0.2°、8.1°±0.2°、18.4°±0.2°、17.9°±0.2°、17.3°±0.2°、24.7°±0.2°、25.7°±0.2°、22.9°±0.2°和16.1°±0.2°2θ峰。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有基本上与如图16所示的粉末X-射线衍射图，其中“基本上”意思是所报道的峰可改变约±0.2°2θ。

在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约116.4℃至约126.4℃的吸热。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约117.4℃至约125.4℃的吸热。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约119.4℃至约123.4℃的吸热。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约120.4℃至约122.4℃的吸热。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为约121.4℃的吸热。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有基本上如图17所示的差示扫描量热分析图，其中“基本上”意思是所报道的DSC特征可改变约±4℃并且所报道的DSC特征可改变约±20焦耳/克。

在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有在低于约135℃显示约5.5%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有在低于约135℃显示约5.4%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有在低于约135℃显示约5.3%重量损失的热重分析曲线。在一些实施方案中，所述乙酸乙酯溶剂化物具有基本上如图17所示的的热重分析曲线，其中“基本上”意思是所报道的TGA特征可改变约±5℃并且所报道的TGA特征可改变约±2%重量变化。

本发明的一个方面涉及所述乙酸乙酯溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°和9.0°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约116.4℃至约126.4℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述乙酸乙酯溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°和14.2°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约117.4℃至约125.4℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述乙酸乙酯溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°和12.8°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；和/或

2)包含外推起始温度为约119.4℃至约123.4℃的吸热的差示扫描量热分析图。

本发明的一个方面涉及所述乙酸乙酯溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°、12.8°±0.2°、8.1°±0.2°和18.4°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

2)包含外推起始温度为约120.4℃至约122.4℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在低于约135℃显示约5.5%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述乙酸乙酯溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°、12.8°±0.2°、8.1°±0.2°、18.4°±0.2°、17.9°±0.2°和17.3°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

2)包含外推起始温度为约121.4℃的吸热的差示扫描量热分析图；和/或

3)在低于约135℃显示约5.4%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述乙酸乙酯溶剂化物，其具有：

1)包含8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°、12.8°±0.2°、8.1°±0.2°、18.4°±0.2°、17.9°±0.2°、17.3°±0.2°、24.7°±0.2°、25.7°±0.2°、22.9°±0.2°和16.1°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

3)在低于约135℃显示约5.3%重量损失的热重分析曲线。

本发明的一个方面涉及所述乙酸乙酯溶剂化物，其具有：

1)基本上如图16所示的X-射线粉末衍射图；

2)基本上如图17所示的差示扫描量热分析图；和/或

3)基本上如图17所示的热重分析曲线。

本申请所述的晶形可通过在制备结晶多晶型物领域中已知的任何适宜操作来制备。在一些实施方案中，本申请所述的晶形按照实施例来制备。在一些实施方案中，本申请所述的晶形可通过将不同于本申请所述晶形的晶形加热来制备。在一些实施方案中，本申请所述的晶形可通过使不同于本申请所述晶形的晶形重结晶来制备。

本发明的化合物1可按照相关已发表的文献操作来制备，所述操作是本领域的技术人员所使用的。这些反应的示例性试剂和操作在下文以工作实施例的形式出现。保护和脱保护可通过本领域通常已知的操作步骤来进行(见，例如，Greene,T.W.and Wuts,P.G.M.,Protecting Groups in Organic Synthesis,3^rd Edition,1999[Wiley])。

应当理解的是，本发明包括本申请所公开的各个对映异构体及其混合物，单独异构体的分离(例如，通过手性HPLC、非对映异构混合物的重结晶等)或单独异构体的选择性合成(例如，通过对映异构选择性合成等)是通过施用各种为本领域从业者所熟知的方法来完成的。

适应症及预防和/或治疗方法

除本申请所述作为大麻素受体活性调节剂的上述有益用途外，本申请公开的化合物可用于治疗几种其它疾病和病症且可用于改善其症状。这些疾病和病症包括但不限于下述疾病和病症：

1.疼痛

多年以来已认识到大麻素的镇痛性质。例如，动物研究已证实CB₁/CB₂激动剂花生四烯乙醇胺、THC、CP55,940和WIN55212-2可有效对抗由化学、机械和热疼痛刺激引起的急性和慢性疼痛(参见Walker and Huang(2002)Pharmacol.Ther.95:127-135；Pacher,P etal.(2006)Pharmacol.Rev.58(3):389-462)。在人类中，CB₁/CB₂激动剂HU-210的局部给药降低了由辣椒素引起的痛觉过敏和异常性疼痛(Rukwied,R.et al.(2003)Pain102:283-288)且CB₁/CB₂激动剂THC和大麻二酚(nabiximols,商品名)的共给药可缓解与癌症相关的疼痛(GW Pharmaceuticals press release Jan19,2005,Jun19,2007)及与多发性硬化相关的疼痛和痉挛状态(GW Pharmaceuticals press release Sept27,2005,Mar11,2009)。

CB₁在介导这些镇痛作用中的作用是充分记载的(参见Manzanares,J.et al.(2006)Current Neuropharmacology4:239-57；Pacher,P.et al.(2006)Pharmacol.Rev.58(3):389-462)。例如，对外周或中枢CB₁的阻断导致痛觉过敏(Richardson,J.D.et al.(1997)Eur.J.Pharmacol.345:145-153；Calignano,A.et al.(1998)Nature394:277-281)，而通过外源性给药CB₁激动剂花生四烯酸2-氯乙基酰胺而引起的CB₁活化减轻了疼痛(Furuse,S.et al.(2009)Anesthesiology111(1):173-86)。

尽管没有充分地记载，但CB₂也在介导大麻素的镇痛作用中发挥作用(参见Guindon and Hohmann(2008)Br.J.Pharmacol.153:319-334)。例如，CB₂选择性激动剂AM1241的系统给药在啮齿类动物炎性疼痛的角叉菜胶、辣椒素和福尔马林模型中抑制了所诱导的痛觉过敏(参见Guindon and Hohmann(2008)Br.J.Pharmacol.153:319-334)。AM1241的局部(皮下)或系统给药也在神经性疼痛的慢性缩窄性损伤模型中逆转了大鼠在脊神经结扎后的触觉和热超敏反应(Malan,T.P.et al.(2001)Pain93:239-245；Ibrahim,M.M.et al.(2003)Proc.Natl.Acad.Sci.100(18):10529-10533)，所述作用通过用CB₂选择性拮抗剂AM630进行处置来抑制(Ibrahim,M.M.et al.(2005)Proc.Natl.Acad.Sci.102(8):3093-8)。系统给药的CB₂选择性激动剂GW405833显著逆转了大鼠在脊神经结扎后对机械刺激的超敏反应(Hu,B.et al.(2009)Pain 143:206-212)。因此，还已证实CB₂选择性激动剂在急性、炎性和神经性疼痛及痛觉过敏的实验模型中减轻了疼痛。

因此，CB₂特异性激动剂和/或CB₁/CB₂激动剂可用于治疗和/或预防急性伤害感受和炎性痛觉过敏及异常性疼痛和由神经性疼痛引起的痛觉过敏。例如，这些激动剂可用作治疗由以下疾病引起的疼痛的镇痛剂：自身免疫性疾病；变应性应答；骨和关节痛；肌肉疼痛；牙痛；肾炎综合征；硬皮病；甲状腺炎；偏头痛和其它头痛；与糖尿病性神经病相关的疼痛；纤维肌痛、与HIV相关的神经病、坐骨神经痛和神经痛；由癌症引起的疼痛；及由于用于治疗疾病的治疗剂的不良作用而引起的疼痛。

另外，尽管大麻素通过复杂的机制(涉及对中枢神经系统、脊髓和外周感觉神经的作用)来发挥其抗伤害性疼痛作用(参见Pacher,P.et al.(2006)Pharmacol.Rev.58(3):389-462)，但对仅在位于外周神经系统中的伤害性疼痛神经元中缺乏CB₁的小鼠炎性和神经性疼痛模型进行的分析证实在伤害性感受器的外周末端上表达的CB₁型受体对由大麻素引起的镇痛作用的贡献是至关重要的(Agarwal,N.et al.(2007)Nat.Neurosci.10(7):870-879)。因此，不能穿过血脑屏障的CB₁激动剂仍可用于治疗和/或预防急性疼痛、炎性疼痛、神经性疼痛和痛觉过敏。

2.免疫系统疾病

自身免疫性疾病

已证实大麻素受体激动剂减轻了自身免疫性疾病中的异常免疫应答且在一些情况下保护免疫系统所不适当靶向的组织。

例如，多发性硬化(MS)为导致CNS中神经元脱髓鞘的自身免疫性疾病。CB₁/CB₂激动剂THC在MS实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型中显著抑制了临床疾病的严重性，据信该作用通过神经元上的CB₁和免疫细胞上的CB₂来介导(Maresz,K.et al.(2007)Nat.Med.13(4):492-497)。与这些结果一致的是，CB₁选择性激动剂WIN55212-2在小鼠实验性变应性葡萄膜炎(EAU)模型中提供显著的神经保护作用(Pryce,G.et al.(2003)Brain126:2191-2202)，而CB₂选择性激动剂HU-308在EAE模型中显著降低了未成熟的骨髓细胞和T细胞的募集、小神经胶质细胞和浸润的骨髓细胞的增殖及轴突的丢失(Palazuelos,J.et al.(2008).J.Biol.Chem.283(19):13320-9)。类似地，CB₁/CB₂激动剂WIN55212-2在EAE小鼠模型中显著抑制了白细胞在脑中的滚动和粘附，该作用通过CB₂选择性拮抗剂SR144528而非CB₁选择性拮抗剂SR141716A来阻断(Ni,X.etal.Mult.Sclerosis10(2):158-64)。因此，CB₂选择性激动剂和/或CB₁/CB₂激动剂可用于治疗和/或预防多发性硬化和相关的自身免疫性脱髓鞘性疾病例如格-巴综合征、多发性神经根性神经病和慢性炎性脱髓鞘。

作为另一个实例，自身免疫性疾病类风湿性关节炎(RA)为慢性系统性骨骼系统炎性疾病，其主要发作于关节以形成炎性滑膜炎且通常发展成关节软骨破坏和关节强直。CB₁/CB₂激动剂WIN55212-2和HU-210在体外牛鼻软骨外植体中显著抑制了由IL-1α刺激的蛋白多糖和胶原降解(Mbvundula,E.et al.(2006)J.Pharm.and Pharmacol.58:351-358)。因此，CB₂选择性激动剂和/或CB₁/CB₂激动剂可用于治疗和/或预防自身免疫性关节炎性疾病例如类风湿性关节炎、牛皮癣性关节炎、强直性脊椎关节炎和反应性关节炎。

I型超敏反应和变应性应答

还已证实大麻素受体激动剂减轻了变应性反应中的异常免疫应答。在I型或即时超敏反应中，已被变应原活化的浆细胞分泌IgE抗体，而IgE抗体与组织肥大细胞及血液嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞表面上的Fc受体结合。对相同变应原的重复暴露使致敏细胞上结合的IgE发生交联，这导致药理学活性介质诸如组胺、白三烯和前列腺素的分泌。这些介质引起与变态反应相关的症状，包括血管舒张和通透性增加、平滑肌痉挛及白细胞外渗。CB₁/CB₂激动剂HU-210的局部给药降低了人类皮肤中由组胺引起的这些应答(Dvorak,M.etal.(2003)Inflamm.Res.52:238-245)。类似地，CB₁/CB₂激动剂THC的皮下注射或内源性大麻素的水平提高在小鼠变应性接触性皮炎模型中减少了皮肤炎症和与其相关的搔痒症(Karsak et al.(2007)Science,316(5830),1494-1497)。相反地，CB₁受体拮抗剂S141716A或CB₂受体拮抗剂SR144528的注射加重了该炎症和搔痒症(Karsak et al.(2007)Science,316(5830),1494-1497)。因此，CB₂选择性激动剂和/或CB₁/CB₂激动剂可用于治疗变应性反应，包括特应性皮炎(搔痒症)、荨麻疹、哮喘、结膜炎、变应性鼻炎(花粉热)和过敏反应。

与CNS炎症相关的疾病

已证实CB₂激动剂减轻了CNS中的炎症。例如，CB₂激动剂的给药在阿尔茨海默病的啮齿类动物模型中预防了小胶质细胞的活化(Ashton J.C.,et al.(2007)Curr.Neuropharmacol.5(2):73-80)。类似地，CB₂激动剂的给药在中风的啮齿类动物阻塞模型中使梗塞体积减少了30%(Zhang,M.et al.(2007)J.Cereb.Blood Flow Metab.27:1387-96)。因此，CB₂激动剂可用于治疗和/或预防与CNS炎症相关的神经病理学例如阿尔茨海默病、卒中诱导的损伤、痴呆、ALS和HIV。

与血管炎症相关的疾病

在动脉粥样硬化斑块中CB₂表达在巨噬细胞和T细胞中且CB₁/CB₂激动剂THC在ApoE敲除小鼠(经充分研究的动脉粥样硬化的小鼠模型)中减缓了动脉粥样硬化的进程。CB₂特异性拮抗剂SR144528在体外和在体内完全阻断了该作用(Steffens,S.et al.(2005)Nature434:782-786)。因此，CB₂激动剂可用于治疗动脉粥样硬化。

与异常或不期望的免疫应答相关的其它疾病

考虑到CB₂在多种不同类型的免疫细胞上的表达及已观察到的CB₂激动剂对这些细胞活性的降低作用，CB₂激动剂可用于治疗和/或预防其中观察到不期望的免疫细胞活性和/或炎症的其它疾病。所述示例性疾病包括骨关节炎、过敏反应、贝切特病、移植排斥、血管炎、痛风、脊椎炎、病毒疾病和细菌疾病例如AIDS和脑膜炎、其它自身免疫性疾病诸如狼疮例如系统性红斑狼疮、炎性肠病例如克罗恩病和溃疡性结肠炎、牛皮癣、自身免疫性肝炎和I型糖尿病。

3.骨和关节疾病

骨质疏松症

CB₂表达在成骨细胞、骨细胞和破骨细胞中。成骨细胞产生新骨，而破骨细胞使骨降解。CB₂特异性激动剂HU-308提高皮质内成骨细胞数目和活性同时抑制破骨细胞前体在骨髓源性成骨细胞/间质细胞中的体外增殖且减轻由卵巢切除术引起的骨丢失且通过刺激皮质内骨形成和抑制体内破骨细胞数目来增加皮质厚度(Ofek,O.et al.(2006)Proc.Natl.Acad.Sci.103(3):696-701)。因此，CB₂激动剂可用于治疗和/或预防其中骨密度降低的疾病，诸如骨质疏松症。

关节炎

如上所述，CB₂选择性激动剂和CB₁/CB₂激动剂可用于治疗和/或预防自身免疫性关节炎性疾病例如类风湿性关节炎、牛皮癣性关节炎、强直性脊椎关节炎和反应性关节炎且可用于治疗和/或预防与骨关节炎相关的炎症。另外，如上所述，CB₁选择性激动剂和CB₁/CB₂激动剂可用于治疗与这些关节炎性疾病相关的疼痛。

4.眼部疾病

视网膜色素上皮(RPE)细胞为眼中的视细胞提供营养支持且已证实RPE细胞的死亡为与年龄相关的黄斑变性(AMD)的主要原因。CB₁/CB₂激动剂CP55940显著保护RPE细胞以使其不会遭受氧化损伤；CB₂受体激动剂JWH015提供同等的保护(Wei,Y.et al.(2009)Mol.Vis.15:1243-51)。因此，CB₂选择性激动剂可用于预防AMD相关视觉丧失的发作或进程。

5.咳嗽

咳嗽反射主要受两类感觉传入神经纤维即有髓鞘的A-δ纤维和无髓鞘的C纤维的控制，所述纤维的活化(即去极化)经由迷走神经传入途径而引起咳嗽。CB₁/CB₂激动剂CP55940在体外减少了由辣椒素、PGE₂和高渗盐水引起的豚鼠和人类迷走神经制品的去极化(Patel,H.J.et al.(2003)British J.Pharma.140:261-8)。CB₁/CB₂激动剂WIN55212-2在小鼠中剂量依赖性地抑制由辣椒素引起的咳嗽次数(Morita,K.et al.(2003)Eur.J.Pharmacol.474:269-272)。CB₁/CB₂激动剂花生四烯乙醇胺在豚鼠中剂量依赖性地抑制由辣椒素引起的咳嗽次数(Calignano,A.et al.(2000)Nature408:96-101)。CB₁特异性拮抗剂SR141716A削弱了WN55212-2和花生四烯乙醇胺的镇咳作用(Morita,K.et al.(2003)Eur.J.Pharmacol.474:269-272；Calignano,A.et al.(2000)Nature408:96-101)。CB₂选择性激动剂JWH133在体外减少了由辣椒素、PGE₂和高渗盐水引起的豚鼠和人类迷走神经制品的去极化且CB₂选择性激动剂JWH133在暴露于咳嗽剂枸橼酸前的给药在清醒的豚鼠中显著减少了咳嗽(Patel,H.J.et al.(2003)British J.Pharma.140:261-8)。因此，CB₁和CB₂均在介导大麻素的镇咳作用中发挥重要作用且CB₁选择性激动剂和CB₁/CB₂激动剂可用于治疗和/或预防咳嗽。

6.癌症

多种人类白血病和淋巴瘤细胞系(包括Jurkat、Molt-4和Sup-T1)表达CB₂而不表达CB₁且CB₂激动剂在这些细胞系和原发性急性成淋巴细胞性白血病(ALL)细胞中引起凋亡(Nagarkatti,L.C.等人的US2004/0259936)。类似地，CB₂表达在成胶质细胞瘤细胞系中且用CB₂激动剂进行的处置在体外使这些细胞凋亡(Widmer,M.(2008)J.Neurosci.Res.86(14):3212-20)。因此，CB₂选择性激动剂可用于减轻免疫系统恶性肿瘤的生长例如白血病、淋巴瘤和神经胶质细胞系的实体瘤。

另外，如上所述，CB₁选择性激动剂和CB₁/CB₂激动剂可用于缓解与癌症相关的疼痛(GW Pharmaceuticals press release Jan19,2005,Jun19,2007)。

由CB₂介导的信号传导参与对前列腺癌细胞的体内和体外生长的抑制，这表明CB₂激动剂在控制前列腺癌中具有潜在的治疗意义(Inhibition of human tumour prostatePC-3cell growth by cannabinoids R(+)-Methanandamide and JWH-015:Involvementof CB₂;Olea-Herrero,et al.British Journal of Cancer advance onlinepublication18August2009;doi:10.1038/sj.bjc.6605248)。

7.再生性药物

CB₂激动剂调节神经元的祖细胞池在CNS中的扩增。CB₂拮抗剂抑制所培养的神经干细胞的增殖及祖细胞在幼年动物的SVZ中的增殖，而CB₂选择性激动剂刺激祖细胞的体内增殖，其中该作用在老年动物中是更显著的(Goncalves,M.B.et al.(2008)Mol.CellNeurosci.38(4):526-36)。因此，CB₂激动剂可用于再生性药物例如促进祖细胞扩增以对在损伤或疾病期间丢失的神经元进行置换的再生性药物，所述损伤或疾病为诸如阿尔茨海默病、卒中诱导的损伤、痴呆、肌萎缩性侧索硬化(ALS)和帕金森病。

8.某些实施方案。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗大麻素受体介导的病症的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗CB₂受体介导的病症的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗疼痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗骨痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗关节痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗与骨关节炎有关的疼痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗骨关节炎的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗骨质疏松症的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗痛觉过敏的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗异常性疼痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗炎性疼痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗炎性痛觉过敏的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗神经性疼痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗神经性痛觉过敏的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗急性伤害感受的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗肌肉疼痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗牙痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗偏头痛和其它头痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗以不良反应形式出现的疼痛的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗与病症有关的疼痛的方法，所述病症选自：癌症、多发性硬化症、变应性应答、肾炎综合征、硬皮病、甲状腺炎、糖尿病性神经病、纤维肌痛、HIV相关的神经病、坐骨神经痛和自身免疫性疾病，所述方法包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗与多发性硬化症有关的痉挛状态的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗自身免疫性病症的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗自身免疫性病症的方法，所述病症选自：多发性硬化症、格-巴综合征、多发性神经根性神经病、慢性炎性脱髓鞘、类风湿性关节炎、牛皮癣性关节炎、强直性脊椎关节炎和反应性关节炎，所述方法包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗变应性应答的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗与病症有关的变应性应答的方法，所述病症选自：特应性皮炎、瘙痒症、荨麻疹、哮喘、结膜炎、变应性鼻炎和过敏性反应，所述方法包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗CNS炎症的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗与病症有关的CNS炎症的方法，所述病症选自：阿尔茨海默病、卒中、痴呆、肌萎缩性侧索硬化和人免疫缺陷病毒病，所述方法包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗动脉粥样硬化的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗与病症有关的不期望的免疫细胞活性和炎症的方法，所述病症选自：骨关节炎、过敏性反应、贝切特氏病、移植排异、血管炎、痛风、脊椎炎、病毒性疾病、细菌性疾病、狼疮、炎性肠病、自身免疫性肝炎和1型糖尿病，所述方法包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗年龄相关性黄斑变性的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗咳嗽的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗白血病的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗淋巴瘤的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗CNS肿瘤的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗前列腺癌的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗阿尔茨海默病的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗卒中诱导的损伤的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗痴呆的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗肌萎缩性侧索硬化的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及在个体中治疗帕金森病的方法，其包括对有此需要的个体给予治疗有效量的如本申请所述无水晶形或其药物组合物。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗大麻素受体介导的病症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗CB₂受体介导的病症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗疼痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗骨痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗关节痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗与骨关节炎有关的疼痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗骨关节炎的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗骨质疏松症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗痛觉过敏的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗异常性疼痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗炎性疼痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗炎性痛觉过敏的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗神经性疼痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗神经性痛觉过敏的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗急性伤害感受的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗肌肉疼痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗牙痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗偏头痛和其它头痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗以疗法的不良反应形式出现的疼痛的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗与病症有关的疼痛的药物中的用途，所述病症选自：癌症、多发性硬化症、变应性应答、肾炎综合征、硬皮病、甲状腺炎、糖尿病性神经病、纤维肌痛、HIV相关的神经病、坐骨神经痛和自身免疫性疾病。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗与多发性硬化症有关的痉挛状态的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗自身免疫性病症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗自身免疫性病症的药物中的用途，所述自身免疫性病症选自：多发性硬化症、格-巴综合征、多发性神经根性神经病、慢性炎性脱髓鞘、类风湿性关节炎、牛皮癣性关节炎、强直性脊椎关节炎和反应性关节炎。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗变应性应答的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗变应性应答的药物中的用途，所述变应性应答选自：特应性皮炎、瘙痒症、荨麻疹、哮喘、结膜炎、变应性鼻炎和过敏性反应。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗CNS炎症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗与病症有关的CNS炎症的药物中的用途，所述病症选自：阿尔茨海默病、卒中、痴呆、肌萎缩性侧索硬化和人免疫缺陷病毒病。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗动脉粥样硬化的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗与病症有关的不期望的免疫细胞活性和炎症的药物中的用途，所述病症选自：骨关节炎、过敏性反应、贝切特氏病、移植排异、血管炎、痛风、脊椎炎、病毒性疾病、细菌性疾病、狼疮、炎性肠病、自身免疫性肝炎和1型糖尿病。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗年龄相关性黄斑变性的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗咳嗽的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗白血病的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗淋巴瘤的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗CNS肿瘤的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗前列腺癌的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗卒中诱导的损伤的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗痴呆的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗肌萎缩性侧索硬化的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形在制备用于治疗帕金森病的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于通过疗法治疗人体或动物体的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗大麻素受体介导的病症的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗CB₂受体介导的病症的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗疼痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗骨痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗关节痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗与骨关节炎有关的疼痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗骨关节炎的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗骨质疏松症的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗痛觉过敏的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗异常性疼痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗炎性疼痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗炎性痛觉过敏的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗神经性疼痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗神经性痛觉过敏的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗急性伤害感受的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗肌肉疼痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗牙痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗偏头痛和其它头痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗以疗法的不良反应形式出现的疼痛的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗与病症有关的疼痛的方法中，所述病症选自：癌症、多发性硬化症、变应性应答、肾炎综合征、硬皮病、甲状腺炎、糖尿病性神经病、纤维肌痛、HIV相关的神经病、坐骨神经痛和自身免疫性疾病。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗与多发性硬化症有关的痉挛状态的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗自身免疫性病症的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗自身免疫性病症的方法中，所述病症选自：多发性硬化症、格-巴综合征、多发性神经根性神经病、慢性炎性脱髓鞘、类风湿性关节炎、牛皮癣性关节炎、强直性脊椎关节炎和反应性关节炎。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗变应性应答的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗与病症有关的变应性应答的方法中，所述病症选自：特应性皮炎、瘙痒症、荨麻疹、哮喘、结膜炎、变应性鼻炎和过敏性反应。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗CNS炎症的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗与病症有关的CNS炎症的方法中，所述病症选自：阿尔茨海默病、卒中、痴呆、肌萎缩性侧索硬化和人免疫缺陷病毒病。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗动脉粥样硬化的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗与病症有关的不期望的免疫细胞活性和炎症的方法中，所述病症选自：骨关节炎、过敏性反应、贝切特氏病、移植排异、血管炎、痛风、脊椎炎、病毒性疾病、细菌性疾病、狼疮、炎性肠病、自身免疫性肝炎和1型糖尿病。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗年龄相关性黄斑变性的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗咳嗽的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗白血病的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗淋巴瘤的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗CNS肿瘤的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗前列腺癌的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗阿尔茨海默病的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗卒中诱导的损伤的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗痴呆的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗肌萎缩性侧索硬化的方法中。

本发明的一个方面涉及如本申请所述的无水晶形，用于治疗帕金森病的方法中。

药物组合物和剂型

本发明的一个方面涉及药物组合物，其包含如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形，以及可药用载体。

本发明的一个方面涉及剂型，其包含如本申请所述的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形，以及可药用载体。

本发明的一个方面涉及制备药物组合物的方法，其包括以下步骤：

1)按照本申请所述的任何方法制备(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形；以及

2)将所述(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水晶形与可药用载体混合。

本发明的一个方面涉及制备剂型的方法，其包括以下步骤：

本发明的一个方面涉及组合物，其包含如本申请所述的溶剂化物。

本发明的一些实施方案包括制备药物组合物的方法，其包括将本申请所公开的任一种化合物实施方案的至少一种化合物与可药用载体混合。

制剂可通过任一适宜的方法来制备，通常通过将一种或多种活性化合物以需要的比例，与液体或细碎的固体载体均匀混合，或者与两者均匀混合，然后如有必要，使所得混合物形成期望的形状或将其配制到期望的小瓶(vial)或安瓿中。

常规赋型剂例如粘合剂、填充剂、可接受的润湿剂、制片润滑剂和崩解剂可用在用于口服给药的片剂和胶囊剂中。用于口服给药的液体制剂可呈以下形式：溶液剂、乳剂、含水或油性混悬剂和糖浆剂。可选择地，口服制剂可呈干粉剂形式，所述干粉剂可在使用前用水或其它合适的液体媒介物复溶。可将其它添加剂例如助悬剂、乳化剂、非含水媒介物(包括食用油)、防腐剂、矫味剂和着色剂加到液体制剂中。胃肠外剂型可如下制备：将本发明化合物溶于合适的液体媒介物中，对溶液进行过滤灭菌，然后装填到合适的小瓶或安瓿中并密封。这些方法仅是本领域公知用于制备剂型的多种合适方法中的几个实例。

本发明化合物可使用本领域技术人员公知的技术来配制成药物组合物。除本申请提及的那些药用载体外的合适药用载体是本领域已知的；例如参见Remington,TheScience and Practice of Pharmacy,20^th Edition,2000,Lippincott Williams&Wilkins(Editors:Gennaro et al.)。

尽管本发明化合物在可选择的用途中可按原料化学物质或纯化学物质形式来给药以进行预防或治疗，但优选的是，所述化合物或活性成分以还含有药用载体的药物制剂或药物组合物形式来提供。

药物制剂包括适于口服给药、直肠给药、经鼻给药、局部给药(包括含服给药和舌下给药)、阴道给药或胃肠外给药(包括肌内给药、皮下给药和静脉内给药)的那些药物制剂或其形式适于吸入给药、吹入给药或透皮贴剂给药的那些药物制剂。透皮贴剂如下以受控速率递送药物：以有效的方式提供用于吸收的药物并使药物的降解最小化。通常，透皮贴剂包含不可渗透的背层、单一的压敏粘合剂层和可除去的具有剥离衬里的保护层。本领域技术人员基于技术人员的需要而应该理解和知晓适于制备所需有效透皮贴剂的技术。

因此，可将本发明化合物及常规辅料、载体或稀释剂配制成药物制剂及其单位剂量形式且可按以下形式用于口服使用：固体形式(例如片剂或填充胶囊剂)或液体形式(例如溶液剂、混悬剂、乳剂、酏剂、凝胶剂或填充有溶液剂、混悬剂、乳剂、酏剂或凝胶剂的胶囊剂)；按栓剂形式用于直肠给药；或按无菌注射溶液剂形式用于胃肠外(包括皮下)使用。所述药物组合物及其单位剂量形式可包含常规比例的常规成分及具有或不具有其它活性化合物或成分且所述单位剂量形式可含有与待用预定每日剂量范围相称的任何合适有效量的活性成分。

对于口服给药，所述药物组合物可呈以下形式：例如片剂、胶囊剂、混悬剂或液体制剂。优选将所述药物组合物配制成含有具体量的活性成分的剂量单位形式。所述剂量单位的实例为胶囊剂、片剂、粉末剂、颗粒剂或混悬剂，其中常规添加剂为例如乳糖、甘露醇、玉米淀粉或马铃薯淀粉；其中粘合剂为例如结晶纤维素、纤维素衍生物、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；其中崩解剂为例如玉米淀粉、马铃薯淀粉或羧甲基纤维素钠；和其中润滑剂为例如滑石或硬脂酸镁。活性成分也可按组合物形式通过注射来给药，其中例如盐水、右旋糖或水可用作合适的药用载体。

本发明化合物或其盐、溶剂化物、水合物或生理学功能性衍生物可用作药物组合物中的活性成分，特别是作为大麻素受体调节剂。在关于“药物组合物”的上下文中定义了术语“活性成分”且表示药物组合物中提供主要药理学作用的组分，其与通常被认为不提供药物益处的“非活性成分”是相对的。

当使用本发明化合物时，剂量可在宽范围内变化且如医生所惯用和已知的那样，对所述剂量进行调整以在每种个体情况下适于个体情况。例如，所述剂量取决于待治疗的疾病的性质和严重程度、患者的情况、所使用的化合物、治疗或预防的是急性病症还是慢性病症或除本发明化合物外是否还给药其它活性化合物。本发明代表性剂量包括但不限于约0.001mg至约5000mg、约0.001mg至约2500mg、约0.001mg至约1000mg、约0.001mg至约500mg、约0.001mg至约250mg、约0.001mg至100mg、约0.001mg至约50mg和约0.001mg至约25mg。可在一天内给药多次剂量，特别是当认为需要相对大的量时，所述多次剂量为例如2、3或4次剂量。基于个体且当患者的医生或护理人员认为合适时，可能需要上调或下调本申请描述的剂量。

活性成分或其活性盐或衍生物用于治疗所需要的量不但将随所选择的具体盐而变化，而且将随给药途径、所治疗的疾病的性质及患者的年龄和情况而变化且最终将由护理医生或临床医生来确定。通常，本领域技术人员理解如何将在模型系统(通常为动物模型)中得到的体内数据外推至另一种模型系统(例如人类)。在一些情况下，这些外推可仅基于所述动物模型与另一种动物模型的体重比较，所述另一种动物模型为例如哺乳动物，优选为人类，然而较常见的是，这些外推不是简单地基于体重，而是结合多种因素。代表性因素包括患者的类型、年龄、体重、性别、饮食和医药情况、疾病的严重程度、给药途径、药理学所考虑的因素例如所用具体化合物的活性、功效、药物代谢动力学和毒理学分布、是否使用药物递送系统、治疗或预防的是急性病症还是慢性病症或除本发明化合物外是否还给药其它活性化合物并作为药物联用中的一部分。用本发明化合物和/或组合物治疗病症的给药方案根据上述多种因素来选择。因此，所使用的实际给药方案可变化很大，因此可能偏离优选的给药方案且本领域技术人员应该理解的是，可对在这些典型范围外的剂量和给药方案进行试验且当合适时，在这些典型范围外的剂量和给药方案可用在本发明方法中。

所需剂量通常可按单一剂量形式或分份剂量形式来提供，所述分份剂量以合适的间隔(例如每天两次、三次、四次或更多次亚剂量)来给药。所述亚剂量本身可被进一步分成例如多个松散分开的离散给药形式。可将每日剂量分成若干份(例如2份、3份或4份)给药形式，特别是当认为给药相对大的量是合适的时。当基于个体行为而需要时，可能需要上调或下调所述每日剂量。

本发明化合物可按很多种口服和胃肠外剂型来给药。对于本领域技术人员显而易见的是，下述剂型可包含本发明化合物或本发明化合物的药用盐、溶剂化物或水合物作为活性组分。

为了由本发明化合物制备药物组合物，所选择的合适药用载体可为固体、液体或这两者的混合物。固体制剂包括粉末剂、片剂、丸剂、胶囊剂、扁囊剂、栓剂和可分散颗粒剂。固体载体可为一种或多种物质，所述物质也可作为稀释剂、矫味剂、增溶剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包囊材料。

在粉末剂中，载体为微细分散的固体，其与微细分散的活性组分形成混合物。

在片剂中，将活性组分与具有必要粘合能力的载体以合适的比例混合且压制成所需形状和尺寸。

粉末剂和片剂可含有各种百分量的活性化合物。粉末剂或片剂中的代表性量可为约0.5至约90%活性化合物；然而，本领域技术人员可知道何时需要在该范围外的量。适于粉末剂和片剂的载体包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、蔗糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。术语“制剂”包括对活性化合物与作为载体的包囊材料进行配制，这得到活性组分(带有或不带有载体)被载体包围且因此与载体结合的胶囊剂。类似地，本发明包括扁囊剂和锭剂。片剂、粉末剂、胶囊剂、丸剂、扁囊剂和锭剂可用作适于口服给药的固体形式。

为了制备栓剂，首先将低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂)熔化且将活性组分均匀分散在其中(例如通过搅拌)。然后将熔化的均匀混合物倒入合适尺寸的模具中，将其冷却且因此固化。

适于阴道给药的制剂可按以下形式来提供：阴道栓剂、塞剂、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂，它们除活性成分外还含有本领域已知合适的上述载体。

液体制剂包括溶液剂、混悬剂和乳剂(例如水溶液剂或水-丙二醇溶液剂)。例如，可将胃肠外注射液体制剂配制成在含水聚乙二醇溶液中的溶液剂。注射剂(例如无菌注射含水或油性混悬剂)可按照已知的技术使用合适的分散剂或润湿剂和助悬剂来配制。无菌注射剂也可为在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液剂或混悬剂(例如在1,3-丁二醇中的溶液剂)。可接受且可使用的媒介物和溶剂为水、林格溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌非挥发油通常用作溶剂或混悬介质。出于该目的，可使用任何温和的非挥发油，包括合成的甘油一酯或甘油二酯。另外，脂肪酸例如油酸可用于制备注射剂。

因此，可将本发明化合物配制成用于胃肠外给药(例如通过注射(例如推注或连续输注))且可按单位剂量形式存在于加有防腐剂的安瓿、预装填注射器、小体积输注容器或多剂量容器中。药物组合物可呈以下形式：在油性或含水媒介物中的混悬剂、溶液剂或乳剂且可含有制剂物质例如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。可选择地，活性成分可呈粉末形式(其通过对无菌固体进行无菌分装或通过对溶液进行冷冻干燥来得到)以在使用前用合适的媒介物(例如无菌的无热原的水)复溶。

适于口服使用的含水制剂可如下制备：将活性组分溶解或混悬在水中且按需加入合适的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂。

适于口服使用的含水混悬剂可如下制备：将微细分散的活性组分分散在含有粘性物质的水中，所述粘性物质为例如天然胶或合成胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或其它公知的助悬剂。

本发明也包括这样的固体制剂，其在使用前才被转化成用于口服给药的液体制剂。上述液体制剂包括溶液剂、混悬剂和乳剂。这些制剂除活性组分外还可含有着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人造甜味剂和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。

就局部给药于表皮而言，可将本发明化合物配制成软膏剂、乳膏剂、洗剂或透皮贴剂。

例如，软膏剂和乳膏剂可用含水或油性基质配制，其中加入合适的增稠剂和/或胶凝剂。洗剂可用含水或油性基质配制且通常还将含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂、增稠剂或着色剂。

适于在口腔中进行局部给药的制剂包括锭剂，其在经矫味的基质(通常为蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶)中含有活性剂；软锭剂，其在惰性基质例如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶中含有活性成分；和漱口剂，其在合适的液体载体中含有活性成分。

通过常规手段例如用点滴器、吸移管或喷雾器将溶液剂或混悬剂直接施用到鼻腔中。所述制剂可按单剂量形式或多剂量形式来提供。就点滴器或吸移管的多剂量形式而言，这可通过向患者给药合适的预定体积的溶液剂或混悬剂来实现。就喷雾器而言，这可例如通过计量雾化喷雾泵来实现。

给药于呼吸道也可通过气雾剂来实现，其中在具有合适推进剂的加压包装中提供活性成分。若本发明化合物或包含它们的药物组合物以气雾剂形式(例如经鼻气雾剂或通过吸入)来给药，则这可例如使用喷雾器、雾化器、泵式雾化器、吸入装置、计量吸入器或干粉吸入器来进行。用于以气雾剂形式来给药本发明化合物的药物形式可通过本领域技术人员公知的方法来制备。对于本发明化合物的制剂，例如可使用本发明化合物在水、水/醇混合物或合适的盐水中的溶液剂或分散剂，其中使用常规添加剂例如苯甲醇或其它合适的防腐剂、用于提高生物利用度的吸收促进剂、增溶剂、分散剂和其它添加剂及任选的常规推进剂(例如二氧化碳、CFC例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷等)。气雾剂通常也可含有表面活性剂例如卵磷脂。药物剂量可通过提供计量阀来控制。

在意在给药于呼吸道的制剂(包括鼻内制剂)中，所述化合物通常将具有小的粒度(例如10微米或更小的粒度)。上述粒度可通过本领域已知的方法例如通过微粉化来得到。当需要时，可使用适于实现活性成分持续释放的制剂。

可选择地，活性成分可按干粉剂形式(例如所述化合物在合适的粉末基质[例如乳糖、淀粉、淀粉衍生物例如羟丙基甲基纤维素和聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)]中的粉末混合物)来提供。通常，粉末载体将在鼻腔中形成凝胶。粉末组合物可按单位剂量形式而提供在例如明胶包装或泡罩包装中的胶囊或药筒中，所述粉末可通过吸入器而由所述胶囊或药筒来给药。

药物制剂优选呈单位剂量形式。在上述形式中，将制剂细分为含有合适量的活性组分的单位剂量。单位剂量形式可为经包装的制品即含有多个离散制剂的包装例如经包装的在小瓶或安瓿中的片剂、胶囊剂和粉末剂。另外，单位剂量形式可为胶囊剂、片剂、扁囊剂或锭剂本身或其可为呈包装形式的合适数量的上述剂型中的任何一种。

用于口服给药的片剂或胶囊剂和用于静脉内给药的液体制剂是优选的组合物。

本发明化合物可任选以药用盐形式存在，包括由药用无毒酸制备的药用酸加成盐，所述药用无毒酸包括无机酸和有机酸。代表性酸包括但不限于乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、枸橼酸、乙磺酸、二氯乙酸、甲酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、草酸、扑酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、草酸、对甲苯磺酸等。一些含有羧酸官能团的本发明化合物可任选以含有无毒药用金属阳离子和得自有机碱的阳离子的药用盐形式存在。代表性金属包括但不限于铝、钙、锂、镁、钾、钠、锌等。在一些实施方案中，药用金属为钠。代表性有机碱包括但不限于苄星(N¹,N²-二苄基乙烷-1,2-二胺)、氯普鲁卡因(4-(氯氨基)苯甲酸2-(二乙基氨基)乙基酯)、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺((2R,3R,4R,5S)-6-(甲基氨基)己烷-1,2,3,4,5-五醇)、普鲁卡因(4-氨基苯甲酸2-(二乙基氨基)乙基酯)等。一些药用盐参见Berge,et al.,Journal of Pharmaceutical Sciences,66:1-19(1977)。

酸加成盐可按化合物合成的直接产物形式来得到。可选择地，可将游离碱溶于含有合适酸的合适溶剂中且盐通过蒸发溶剂来分离或以其它方法对盐和溶剂进行分离。本发明化合物可使用本领域技术人员已知的方法来与标准低分子量溶剂形成溶剂化物。

可将本发明化合物转化成“前药”。术语“前药”是指这样的化合物，所述化合物已用本领域已知的具体化学基团进行修饰且当给药到个体中时，这些基团经历生物转化，得到母体化合物。因此，前药可被认为是这样的本发明化合物，其含有一个或多个暂时改变或消除化合物性质的专门无毒保护基。通常，使用“前药”措施以促进口服吸收。参见T.Higuchi and V.Stella,Pro-drugs as Novel Delivery Systems Vol.14of theA.C.S.Symposium Series和Bioreversible Carriers in Drug Design,ed.EdwardB.Roche,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987，将这两篇文献完整引入本申请作为参考。

本发明一些实施方案包括制备用于“组合疗法”的药物组合物的方法，所述方法包括对本申请公开的任何化合物实施方案中的至少一种化合物与本申请描述的至少一种已知的药物物质和药用载体进行混合。

应该注意的是，当大麻素受体调节剂用作药物组合物中的活性成分时，这些大麻素受体调节剂不但意在用于人类，而且意在用于其它非人类哺乳动物。实际上，动物保健领域中的最新进展表明应该考虑在伴侣动物(例如猫、狗等)和家畜(例如牛、鸡雏等)中使用活性剂例如大麻素受体调节剂以治疗与大麻素受体相关的疾病或病症。相信本领域技术人员可容易地理解上述化合物在上述情况下的用途。

水合物和溶剂化物

应当理解的是，当使用短语“可药用盐、溶剂化物和水合物”或者术语“可药用盐、溶剂化物或水合物”指本申请所述的化合物时，它包括所述化合物的可药用溶剂化物和/或水合物、所述化合物的可药用盐，以及所述化合物的可药用盐的可药用溶剂化物和/或水合物。还应当理解的是，当使用短语“可药用溶剂化物和水合物”或短语“可药用溶剂化物或水合物”指本申请所述的盐时，它包括这样的盐的可药用溶剂化物和/或水合物。

对本领域的技术人员显而易见的是，本申请所述的剂型可包含，作为活性组分的本申请所述的化合物或可药用盐，或者作为其可药用溶剂化物或水合物。此外，本申请所述化合物及其盐的多种溶剂化物和水合物将作为中间体用于制备药物组合物中。除本申请所提到的之外，制备和鉴别适宜水合物和溶剂化物的典型操作为本领域的技术人员所熟知；见例如，pages202-209of K.J.Guillory,“Generation of Polymorphs,Hydrates,Solvates,and Amorphous Solids,”in:Polymorphism in Pharmaceutical Solids,ed.Harry G.Britain,Vol.95,Marcel Dekker,Inc.,New York,1999.相应地，本发明的一个方面涉及(pertains to)给予本申请所述水合物和溶剂化物和/或其可药用盐的方法，所述物质可通过本领域已知的方法来分离并表征，例如，热重分析(TGA)、TGA-质谱、TGA-红外光谱、粉末X-射线衍射(XRPD)、Karl Fisher滴定法、高分辨X-射线衍射等。有例行提供鉴别溶剂化物和水合物的快速和有效服务的若干商业实体。提供这些服务的公司实例包括Wilmington PharmaTech(Wilmington,DE)、Avantium Technologies(Amsterdam)和Aptuit(Greenwich,CT)。

多晶型物和假多晶型物

多晶型为物质以两种或更多种结晶相形式存在的能力，所述两种或更多种结晶相在晶格中具有分子的不同排列和/或构象。多晶型物在液态或气态下显示出相同的性质，但在固态下具有不同的表现。

除单组分多晶型物外，药物也可按盐和其它多组分结晶相形式存在。例如，溶剂化物和水合物可含有活性药物成分(API)主体和分别作为客体的溶剂分子或水分子。类似地，当客体化合物在室温为固体时，所得形式通常称为共晶体(cocrystal)。盐、溶剂化物、水合物和共晶体也可显示出多晶型。活性药物成分主体相同但其客体不同的结晶相可称为彼此的假多晶型物(pseudopolymorph)。

溶剂化物在明确的晶格中含有结晶的溶剂分子。其中结晶的溶剂为水的溶剂化物称为水合物。由于水是空气中的组分，因此药物的水合物可相对容易地形成。

例如，Stahly最近公开了对具有“很多种结构类型”的245种化合物进行的多晶型物筛选，其中所述245种化合物中的约90%显示出多种固体形式。综上，约一半化合物为多晶型的，其通常具有一至三种形式。约三分之一化合物形成水合物且约三分之一化合物形成溶剂化物。来自对64种化合物进行的共晶体筛选的数据显示60%形成除水合物或溶剂化物外的共晶体(G.P.Stahly,Crystal Growth&Design(2007),7(6),1007-1026)。

其它用途

本发明的另一个目的涉及放射标记的本发明的化合物，所述化合物在体外和体内不但在放射成像而且在试验中都是有用的，其用于在包括人的组织样本中定位和定量大麻素受体以及通过抑制放射标记的化合物的结合鉴别大麻素受体配体。本发明的另一个目的是开发新型大麻素受体试验，其中包括这样的放射标记的化合物。

本发明包括同位素标记的本发明的晶形。若非事实上一个或多个原子被具有与自然中最常见的原子量或质量数不同的原子量或质量数的原子所替换或取代，同位素标记的或放射标记的化合物是与本申请所公开的化合物完全相同的化合物。可掺入到本发明化合物中的适宜放射性核素包括但不限于²H(也写作与氘对应的D)、³H(也写作与氚对应的T)、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、¹⁸F、³⁵S、³⁶Cl、⁷⁵Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br、⁸²Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I和¹³¹I。掺入到即时放射标记的化合物中的放射性核素将取决于所述放射标记的化合物的具体用法。例如，对于体外大麻素受体标记和竞争试验，掺入³H、¹⁴C、⁸²Br、¹²⁵I、¹³¹I或³⁵S的化合物通常会是最有用的。对用于放射成像，¹¹C、¹⁸F、¹²⁵I、¹²³I、¹²⁴I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br或⁷⁷Br通常会是最有用的。

应当理解的是，“放射标记的”或“标记的化合物”为掺入至少一种放射性核素的化合物1的晶形；在一些实施方案中，所述放射性核素选自³H和¹⁴C。

某些同位素标记的本发明的晶形在化合物和/或底物组织分布试验中是有用的。在一些实施方案中，所述放射性核素³H和/或¹⁴C同位素在这些研究中是有用的。此外，用例如氘(即，²H)的更重同位素的取代可提供由更强的代谢稳定性产生的某些治疗优点(例如，增加体内半衰期或降低需要剂量)并因此在一些情况下是优选的。通过用同位素标记的试剂代替无同位素标记的试剂，同位素标记的本发明的晶形通常可通过下列与下文实施例所公开的步骤类似的步骤制备。其它有用的合成方法在下文讨论。此外，应当理解的是，在本发明化合物中所表示的所有原子，或者是这些原子最常出现的同位素，或者是较为稀少的放射性同位素，或者是非放射性同位素。

用于将放射性同位素引入到有机化合物中的合成方法可适用于本发明化合物且是本领域公知的。这些合成方法(例如将活性水平的氚引入到目标分子中)如下所述：

A.用氚气进行催化还原：该方法通常得到具有高比活性的产物且需要卤化或不饱和前体。

B.用硼氢化钠[³H]还原：该方法相当廉价且需要含有可还原的官能团的前体例如醛、酮、内酯、酯等。

C.用氢化锂铝[³H]还原：该方法得到比活性几乎为理论值的产物。其也需要含有可还原的官能团的前体例如醛、酮、内酯、酯等。

D.氚气暴露标记：该方法包括在合适的催化剂存在下将含有可交换的质子的前体暴露于氚气。

E.使用碘甲烷[³H]进行N-甲基化：该方法通常用于通过用具有高比活性的碘甲烷(³H)处理合适的前体来制备O-甲基或N-甲基(³H)产物。通常，该方法可得到较高的比活性例如约70-90Ci/mmol。

用于将活性水平的¹²⁵I引入到目标分子中的合成方法包括：

A.桑德迈尔(Sandmeyer)及类似反应：该方法将芳基胺或杂芳基胺转化成重氮盐例如重氮鎓四氟硼酸盐，然后使用Na¹²⁵I来转化成经¹²⁵I标记的化合物。代表性方法参见Zhu,G-D et al.J.Org.Chem.,2002,67,943-948。

B.对苯酚进行邻位碘(¹²⁵I)化：该方法可在苯酚的邻位引入¹²⁵I，参见Collier,T.Let al.J.Labelled Compd.Radiopharm.,1999,42,S264-S266。

C.芳基溴和杂芳基溴用¹²⁵I交换：该方法通常为两步操作。第一步使用例如以下方法将芳基溴或杂芳基溴转化成相应的三烷基锡中间体：在三烷基卤化锡或六烷基二锡[例如(CH₃)₃SnSn(CH₃)₃]存在下进行由Pd[即Pd(Ph₃P)₄]催化的反应或通过芳基锂或杂芳基锂进行转化。代表性方法参见Le Bas,M.-D et al.J.Labelled Compd.Radiopharm.2001,44,S280-S282。

放射标记的大麻素受体化合物可用于筛选试验，从而鉴别/评价化合物。一般地说，可评价新合成的或鉴别的化合物(即，测试化合物)降低所述“放射标记的化合物1”对大麻素受体的结合的能力。相应地，测试化合物与所述“放射标记的化合物1”竞争对大麻素受体的结合的能力，与其结合亲和力直接相关。

一些标记的本发明化合物与一些大麻素受体结合。在一个实施方案中，所述标记的化合物具有小于约500μM的IC₅₀，在另一个实施方案中，所述标记的化合物具有小于约100μM的IC₅₀，在另一个实施方案中，所述标记的化合物具有小于约10μM的IC₅₀，在另一个实施方案中，所述标记的化合物具有小于约1μM的IC₅₀及在另一个实施方案中，所述标记的抑制剂具有小于约0.1μM的IC₅₀。

基于本申请公开的内容，所述受体和方法的其它用途对于本领域技术人员将是显而易见的。

应该理解的是，本发明方法的步骤无需进行任何具体次数或无需以任何具体顺序进行。基于本发明以下实施例(所述实施例是示例性的并且是非限制的)，本发明其它目的、优点和新颖的特征对于本领域技术人员将是显而易见的。

实施例

实施例1：(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的制备。

步骤A：(1S,5R)-二环[3.1.0]己-2-酮的制备。

将2.5M n-BuLi(489mL,1223mmol)的己烷溶液滴加至在干冰/丙酮浴中冷却的(S)-2-(丁-3-烯基)环氧乙烷(100g,1019mmol)和2,2,6,6-四甲基哌啶(86mL,509mmol)在MTBE(1000mL)中的搅拌溶液中，滴加速率使得内温维持在-12至-5℃(滴加时间=1小时)。加入完毕后，将反应混合物在-5至0℃再搅拌一小时。

当温度仍在0℃时，随着搅拌加入(首先滴加)3M HCl水溶液(545mL)(内温升至3℃)。分离各层，并用另外的200mL3M HCl洗涤有机层。将合并的含水洗涤液用MTBE(2x500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x300mL)洗涤，然后浓缩(在350mbar和29℃水浴)至大约1000mL淡黄色溶液。对该溶液没有进行进一步纯化。

向407mL水中加入磷酸氢二钾(216g,1240mmol)、磷酸二氢钾(12.8g,94mmol)和溴化钾(18.19g,153mmol)。pH纸指示pH为～9。在装备有顶置搅拌器的5L3-颈圆底烧瓶中，将所述水溶液加入到(1S,2S,5R)-二环[3.1.0]己-2-醇的MTBE溶液中。将混合物在干冰/异丙醇浴中冷却至-20℃。加入TEMPO(4.30g,27.5mmol)。将温度温热至0℃并滴加10-13%次氯酸钠水溶液(1059mL,1630mmol)同时维持内温在-10至0℃(加入时间=70分钟)。在0℃再继续搅拌一小时。加入50g亚硫酸钠淬灭过量的次氯酸钠(温度升至12℃)。分离各层，并用MTBE(先后用500mL和250mL)萃取含水层两次。将合并的有机层(总体积大约1600mL)干燥(MgSO₄)然后过滤。在300毫巴(mbar)和35℃水浴将所述溶液浓缩至大约300mL。将产物蒸馏--首先用真空管道和50℃水浴蒸馏掉大部分剩余的MTBE。连接真空泵得到～2托的真空并将产物蒸馏(2托/36℃)，得到所述标题化合物(65.8g)，为浅橙色油状物(注意：将接受瓶在干冰/丙酮浴中冷却)。1H NMR(400MHz,CDCl₃)δ0.93(td,J=4.6,3.3Hz,1H),1.20(td,J=8.0,4.8Hz,1H),1.74-1.79(m,1H),1.98-2.19(m,5H).

步骤B：2-肼基吡嗪的制备。

反应在氮气氛下进行。在65℃历时1小时，向35wt%含水肼(544mL,6009mmol)中滴加2-氯吡嗪(96mL,1073mmol)。加入之后，在63-67℃继续搅拌16小时，然后使其在室温静置两天。将混合物过滤，除去少量的沉淀，然后用10%iPrOH/二氯甲烷(5x250mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，过滤，然后减压浓缩。将所得固体用乙酸异丙酯(600mL)研磨。经由过滤收集固体，用乙酸异丙酯冲洗并真空干燥，得到2-肼基吡嗪(60g,51%)，为浅黄色固体。LCMS m/z=111.2[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.21(s,2H),7.70(d,J=2.8Hz,1H),7.89(s,1H),7.93(dd,J=2.8,1.5Hz,1H),8.10(d,J=1.5Hz,1H).

步骤C：(1aS,5aS)-2-(吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸乙酯的制备。

历时15分钟(维持温度低于43℃)，向(1S,5R)-二环[3.1.0]己-2-酮(52.9g,539mmol)和草酸二乙酯(0.073L,539mmol)在无水乙醇(0.9L)(不是用甲醇变性的)中的溶液加入1.0M叔丁醇钾的THF溶液(0.539L,539mmol)。将所得黄色溶液在40℃搅拌3.5小时(10分钟之内出现沉淀并且反应混合物最终变成浓稠的混悬液)。先后加入2-肼基吡嗪(59.4g,539mmol)和6.0M氯化氢(0.270L,1618mmol)的水溶液。将反应混合物在50℃搅拌1.5小时。将所述混合物倾入冰-水(5L)中。立即出现沉淀。在冰浴中静置30分钟后，经由过滤收集固体，用水(5x1L)冲洗，然后干燥，得到所述标题产物(106g,73%)，为灰白色固体。LCMS m/z=271.2(M+H+).1H NMR(400MHz,CDCl₃)δ0.47(td,J=4.7,3.3Hz,1H),1.27(td,J=8.0,4.9Hz,1H),1.41(t,J=7.1Hz,3H),2.26-2.32(m,1H),2.77-2.82(m,1H),2.88(dd,J=16.7,1.4Hz,1H),2.99(dd,J=16.6,6.4Hz,1H),4.40(q,J=7.1Hz,2H),8.41(dd,J=2.5,1.5Hz,1H),8.52(d,J=2.5Hz,1H),9.40(d,J=1.5Hz,1H).

步骤D：(1aS,5aS)-2-(吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸的制备。

向(1aS,5aS)-2-(吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸乙酯(106g,392mmol)在MeOH(300mL)和THF(300mL)中的混悬液加入2.0MNaOH的水溶液(235mL,471mmol)。将所述混合物在23℃搅拌20小时。通过蒸馏除去有机溶剂。将剩余的水溶液用水稀释至大约1.5L，然后用6M HCl(大约95mL)酸化至pH～2。经由过滤收集所得精细沉淀，用水冲洗，然后干燥，得到所述标题化合物(95g,100%)，为白色固体。LCMS m/z=243.1(M+H⁺).¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.43(td,J=4.6,3.2Hz,1H),1.26(td,J=8.0,4.4Hz,1H),2.27-2.33(m,1H),2.71-2.75(m,1H),2.76(d,J=16.8Hz,1H),2.89(dd,J=16.4,6.4Hz,1H),8.61(dd,J=2.7,1.5Hz,1H),8.67(d,J=2.5Hz,1H),9.17(d,J=1.5Hz,1H),13.02(s,1H).

使用两种不同方法制备化合物1，一种方法以氧化吡嗪环氮作为最后反应步骤，而第二种方法在与(S)-2-氨基-3,3-二甲基丁-1-醇偶联之前氧化羧酸中间体的吡嗪环氮(即，步骤D的标题化合物)。步骤E和F在下面显示。

方法1

步骤E：(1aS,5aS)-2-吡嗪-2-基-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的制备。

向(1aS,5aS)-2-(吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸(1.4g,5.78mmol)和三乙胺(1.611mL,11.56mmol)在DMF(15mL)中的溶液中加入HATU(2.242g,5.90mmol)。将反应混合物在23℃搅拌5分钟，然后加入(S)-2-氨基-3,3-二甲基丁-1-醇(0.711g,6.07mmol)。将反应混合物在23℃搅拌15分钟，然后浓缩。残余物通过硅胶快速色谱纯化(35%至100%EtOAc/己烷)，得到所述标题产物(1.97g,100%)，为白色固体。LCMSm/z=342.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ0.48(td,J=4.6,3.4Hz,1H),1.05(s,9H),1.24(td,J=8.0,4.7Hz,1H),2.26-2.32(m,1H),2.74-2.78(m,1H),2.94(d,J=16.8Hz,1H),3.01(dd,J=16.7,6.1Hz,1H),3.67-3.72(m,1H),3.93-3.98(m,2H),7.08(d,J=8.5Hz,1H),8.42(dd,J=1.4,0.9Hz,1H),8.51(d,J=2.7Hz,1H),9.26(d,J=1.1Hz,1H).

步骤F：(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的制备。

向(1aS,5aS)-2-吡嗪-2-基-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(900mg,2.64mmol)在氯仿(10mL)中的溶液中加入3-氯过氧化苯甲酸(1772mg,7.91mmol)。将反应混合物在23℃搅拌3小时。加入另外的MCPBA(1.2g)并在室温继续搅拌18小时。混合物通过硅胶柱色谱纯化，得到所述标题化合物(550mg)，为白色固体。LCMS m/z=358.3[M+H]⁺;¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm0.49(td,J=4.6,3.3Hz,1H),1.03(s,9H),1.27(td,J=8.0,4.9Hz,1H),2.08(bs,1H),2.27-2.33(m,1H),2.71-2.76(m,1H),2.93(d,J=16.8Hz,1H),3.00(dd,J=16.7,6.1Hz,1H),3.65-3.71(m,1H),3.92-3.97(m,2H),6.97(d,J=8.5Hz,1H),7.99(dd,J=4.0,1.4Hz,1H),8.28(d,J=4.2Hz,1H),8.78(dd,J=1.4,0.8Hz,1H).

将样品从CH₂Cl₂/己烷中重结晶，从而得到结晶溶剂化物。该溶剂化物的热重分析(TGA)热分析图显示在164℃熔化吸热反应出现的～5%重量损失。将化合物1的非溶剂化形式在CH₂Cl₂中浆化并在～28℃搅拌过夜。在粉末X-射线衍射(PXRD)图分析之前，使用离心过滤器将混悬液过滤并空气干燥。PXRD图显示，CH₂Cl₂浆化后的物质不能与用CH₂Cl₂/己烷重结晶产生的原始溶剂化物形式相区别。使用CH₂Cl₂/己烷从重结晶获得的结晶CH₂Cl₂溶剂化物的差示扫描量热法(DSC)热分析图和热重分析(TGA)热分析图示于图1；从两种不同方法获得每种结晶CH₂Cl₂溶剂化物的PXRD图(即，使用CH₂Cl₂/己烷重结晶；以及在CH₂Cl₂中浆化的非溶剂化的化合物1)显示为图2中的叠加。

方法2

步骤E：(1aS,5aS)-2-(吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸N-氧化物的制备。

在室温，向(1aS,5aS)-2-(吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸(68.8g,284mmol)在甲酸(688mL)中的混悬液加入50wt%过氧化氢的水溶液(82mL,1420mmol)。将混合物加热至64℃。将反应混合物在58至64℃搅拌3小时。加入另一份8mL50%H₂O₂并继续在60℃再搅拌一小时。使混合物冷去至室温并用1L水稀释。在冰浴贮藏1小时后，经由过滤收集沉淀，用水冲洗并真空干燥，得到所述标题化合物(56.7g)，为浅黄色固体，通过¹H NMR显示所述固体含有2%起始原料。使所述物质再经受上述反应条件，得到所述标题化合物(45g)。LCMS m/z=259.2[M+H]⁺;¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ0.42(td,J=4.4,3.3Hz,1H),1.27(td,J=7.8,4.7Hz,1H),2.27-2.33(m,1H),2.68-2.73(m,1H),2.75(dd,J=16.9,1.5Hz,1H),2.88(dd,J=16.4,6.4Hz,1H),8.33(dd,J=4.2,1.5Hz,1H),8.50(dd,J=4.2,0.6Hz,1H),8.54(dd,J=1.5,0.6Hz,1H),13.08(s,1H).

向(1aS,5aS)-2-(吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸N-氧化物(46.82g,181mmol)、(S)-2-氨基-3,3-二甲基丁-1-醇(23.37g,199mmol)和三乙胺(76mL,544mmol)在DMF(400mL)中的混悬液中加入HATU(76g,199mmol)。将反应混合物在23℃搅拌60分钟并浓缩。加入0.5M HCl(500mL)。用二氯甲烷(3x400mL)萃取混合物。将合并的有机萃取物用饱和的NaHCO₃(2x250mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，然后浓缩至～250mL。向所得淤浆加入500mL己烷。将混合物在室温静置数小时，并经由过滤收集固体，得到所述标题化合物(55g)，为灰白色固体。将该物质从DCM/己烷中重结晶，得到所述标题化合物(43.5g)，为白色固体(在～65℃真空干燥箱中干燥10天后)。LCMS m/z=358.3[M+H]⁺;¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm0.49(td,J=4.6,3.3Hz,1H),1.03(s,9H),1.27(td,J=8.0,4.9Hz,1H),2.08(bs,1H),2.27-2.33(m,1H),2.71-2.76(m,1H),2.93(d,J=16.8Hz,1H),3.00(dd,J=16.7,6.1Hz,1H),3.65-3.71(m,1H),3.92-3.97(m,2H),6.97(d,J=8.5Hz,1H),7.99(dd,J=4.0,1.4Hz,1H),8.28(d,J=4.2Hz,1H),8.78(dd,J=1.4,0.8Hz,1H).

实施例2：(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1,DCM溶剂化物)的制备。

通过从CH₂Cl₂和己烷缓慢结晶获得DCM半溶剂化物(10.6wt%)并解析该物质的晶体结构，见图3。通过形成化合物1与DCM的淤浆进一步尝试分离所述半-DCM溶剂化物，生成基本上与国际公开文本WO2011/025541中所公开的相同的DCM溶剂化物，先前所公开的DCM溶剂化物PXRD的叠加示于图2。

实施例3：(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1,无水形式)的制备。

化合物1的无水形式通过在DCM和己烷中重结晶来制备。用PXRD图表征，见图4。该物质在～162℃熔化并且基于TGA图5为非溶剂化形式。

应当注意的是，已观察到在不同时间使用DCM/己烷的混合物作为重结晶溶剂，得到不同晶形。

实施例4：(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1,无水形式)的制备。

方法1

向装备有顶置搅拌器、冷却器/加热器和滴液漏斗的4L反应器中加入(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1,145g,406mmol)、乙腈(205mL,3925mmol)和水(290mL)。将混合物加热至60℃然后搅拌60分钟。向所得反应混合物中加入另外量的水(2900mL)，冷却至0℃，并将其搅拌4小时。将混合物过滤，将所述固体用水洗涤，并在50℃真空干燥，得到化合物1，为无水形式，所述物质通过PXRD(图6)和DSC/TGA(图7)表征。

方法2

以与方法1中所述类似的方式制备(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1)的无水形式，不同的是从乙腈/水结晶混合物中分离结晶(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺之后，将所述物质在60℃±5℃真空干燥，由此得到无水形式的化合物1。按照方法2制备的无水形式通过PXRD、DSC和TGA来表征，并且发现其与按照方法1制备的物质是基本上类似的。

实施例5：(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1,丙酮溶剂化物)的制备。

化合物1的丙酮溶剂化物是由化合物1在丙酮中的淤浆制备的。用PXRD图表征，见图8。该物质经TGA显示约5.5%的重量损失、去溶剂化吸热作用于约100℃开始，以及随后的熔化起始吸热温度为约163℃，见图9。所述丙酮溶剂化物从不同批次的无水化合物1重复制备，PXRD与图8所观察的基本上相同，但如TGA所示，具有不同的丙酮损失，并且因此化学计算量的该溶剂化物可表征为可变的或者非化学计算量的化合物1的丙酮溶剂化物。

实施例6：(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1,非选择性溶剂化物)的制备。

化合物1的溶剂化物是由化合物1在乙酸乙酯中的淤浆制备的。用PXRD图表征，见图10。从通过将化合物1在THF中浆化制备的物质中再次产生了基本上相同的PXRD图，见图11。此外，从通过将化合物1在甲基乙基甲酮(MEK)中浆化制备的物质中再次产生了基本上相同的PXRD图，见图12。此外，使用乙酸乙酯制备的化合物1的非选择性溶剂化物显示了在高达约150℃的约4.8%的重量损失，具有160.8℃的外推起始温度；见TGA和DSC(图13)。使用THF制备的化合物1的非选择性溶剂化物在高达约150℃的约6.8%的重量损失，具有161.0℃的外推起始温度；见TGA和DSC(图14)。使用MEK制备的化合物1的非选择性溶剂化物在高达约150℃约4.5%的重量损失，具有160.5℃的外推起始温度；见TGA和DSC(图15)。

化合物1的非选择性溶剂化物，独立于制备所述溶剂化物所使用的溶剂，显示了与图10、11和12中所观察到的基本上相同的PXRD，并且在所述溶剂化物去溶剂化后各自以具有约161℃的外推起始温度熔化，见图13、14和15。基于TGA，这些溶剂化物可认为是非化学计量的、非选择性的化合物1的溶剂化物晶形。

实施例7：(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1,乙酸乙酯溶剂化物)的制备。

化合物1的乙酸乙酯溶剂化物通过从乙酸乙酯和庚烷中重结晶来制备。在45℃，将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺(化合物1,430-580mmol)溶于乙酸乙酯(450mL)中。然后将混合物冷却至25℃并向反应器中加入100mL庚烷。将混合物在22℃搅拌20分钟。然后加入庚烷(2250mL)并加热至55℃。将混合物在25℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至20℃，然后过滤并用500mL庚烷洗涤。将滤饼在45℃真空干燥。用PXRD图表征，见图16。所述乙酸乙酯溶剂化物显示了宽的去溶剂化吸热作用，即约30-110℃，这对应于1%TGA重量损失，见图17。存在第二个更高的去溶剂化/熔化吸热作用，即约115-135℃，这对应于约4%的TGA重量损失。合并的重量损失与NMR一致，这显示了约17mol%(摩尔百分数)的乙酸乙酯，与约4.7wt%相当。该溶剂化物可含有痕量的庚烷。

实施例8：PathHunterβ-视紫红质抑制蛋白测定

A：CB₂测定

使用DiscoveRx PathHunterβ-视紫红质抑制蛋白测定就化合物1对人CB₂受体的激动剂活性进行筛选，所述测定测量在其活化后与CB₂受体结合的β-视紫红质抑制蛋白(β-arrestin)。将CB₂克隆到pCMV-PK载体(DiscoveRx,Fremont,CA;目录号93-0167)中且转染到CHO-K1EA-视紫红质抑制蛋白亲代细胞系(DiscoveRx,Fremont,CA;目录号93-0164)中。稳定表达CB₂-Prolink融合蛋白的CHO-K1阳性克隆通过其对CB₂激动剂CP55,940的应答来鉴定。克隆编号61由于其大的激动剂窗和同质表达(通过抗HA流式细胞术来检测)而被选择。

测定原理：PathHunterβ-视紫红质抑制蛋白测定使用酶片段互补来测量β-视紫红质抑制蛋白与活化的GPCR的相互作用(Yan et al.,J.Biomol.Screen.7:451-459,2002)。使小的由42个氨基酸构成的β-半乳糖苷酶片段即Prolink与GPCR的C-末端融合且使β-视紫红质抑制蛋白与较大的β-半乳糖苷酶片段即EA(酶受体)融合。β-视紫红质抑制蛋白与活化的GPCR的结合使两个酶片段得以互补，这形成具有活性的β-半乳糖苷酶，其可使用化学发光PathHunter快速检测试剂盒(DiscoveRx,Fremont,CA;目录号93-0001)来测量。

测定：在含有1%FBS的Opti-MEM培养基(Invitrogen,Carlsbad,CA;目录号31985088)中将表达CB₂-Prolink融合蛋白的稳定CHO-K1细胞以5000个细胞/5μL/孔在384孔板(Optiplate384-Plus,PerkinElmer,Fremont,CA;目录号6007299)中铺板过夜。将5μL测试化合物在补充有1%BSA的Opti-MEM中的稀释液转移到Optiplate的每个孔中。然后将板在37℃/5%CO₂孵育2小时。将由PathHunter快速检测试剂盒(DiscoveRx,Fremont,CA;目录号93-0001)制备的12μL底物转移到Optiplate的每个孔中。然后将板在室温避光孵育2小时，然后对测定板进行读数。

测定读数：β-视紫红质抑制蛋白测定读数使用PHERAstar(BMG Labtech Inc.,Durham,NC)或EnVision^TM(PerkinElmer,Fremont,CA)微量板读数器来进行。

B：CB₁测定

使用DiscoveRx PathHunterβ-视紫红质抑制蛋白测定就化合物1对人CB₁受体激动剂活性进行筛选，所述测定测量在其活化后与CB₁受体结合的β-视紫红质抑制蛋白。将CB₁克隆到pCMV-PK载体(DiscoveRx,Fremont,CA;目录号93-0167)中且转染到CHO-K1EA-视紫红质抑制蛋白亲代细胞系(DiscoveRx,Fremont,CA;目录号93-0164)中。稳定表达CB₁-Prolink融合蛋白的CHO-K1阳性克隆通过其对CB₁激动剂CP55,940的应答来鉴定。克隆编号3由于其大的激动剂窗和同质表达(通过抗HA流式细胞术来检测)而被选择。

测定：在含有1%FBS的Opti-MEM培养基(Invitrogen,Carlsbad,CA;目录号31985088)中将表达CB₁-Prolink融合蛋白的稳定CHO-K1细胞以5000个细胞/5μL/孔在384孔板(Optiplate384-Plus,PerkinElmer,Fremont,CA;目录号6007299)中铺板过夜。将5μL测试化合物在补充有1%BSA的Opti-MEM中的稀释液转移到Optiplate的每个孔中。然后将板在37℃/5%CO₂孵育2小时。将由PathHunter快速检测试剂盒(DiscoveRx,Fremont,CA;目录号93-0001)制备的12μL底物转移到Optiplate的每个孔中。然后将板在室温避光孵育2小时，然后对测定板进行读数。

观察到hCB₁的EC₅₀值是基本上无活性的，而观察到的化合物1对hCB₂的EC₅₀值示于下表中。化合物1为CB₂的选择性激动剂。

	EC<sub>50</sub>hCB<sub>2</sub>
		化合物1	5.4

实施例9：化合物1对骨关节炎疼痛的作用。

将碘乙酸单钠(MIA)注射到关节中(Kalbhen D.A.,J.Rheumatol.,1987,May;14Spec No:130-1;Combe,R.,et.al.,Neuroscience Letters,2004,370,236–240)抑制了甘油醛-3-磷酸脱氢酶在软骨细胞中的活性，由此破坏糖酵解且最终导致细胞死亡。软骨细胞的进行性丢失使关节软骨的组织学和形态学发生变化，这与在骨关节炎患者中观察到的那些情况是非常类似的。

在200g雄性斯普拉-道来(斯普拉-道来)大鼠中诱导骨关节炎。用异氟烷短暂麻醉后，以50μL体积向大鼠单次关节内注射MIA(2mg)(Sigma Aldrich,Saint Louis,MO,USA;目录号I9148)在0.9%无菌盐水中的溶液，用30G针头将其经由髌骨韧带而给药到左膝关节腔中。注射后，使动物从麻醉中恢复，然后返回到主饲养笼(main housing vivarium)中。

通常，在疾病进展期间有关节内注射后0-7天的炎症期，然后软骨和软骨下骨在第14-55天发生进行性变性。本发明化合物对疼痛发展的效力研究在第14天开始且每周进行两次，其中在每次测定之间有至少3天的清除期(wash-out)。三种不同的测定用于测量疼痛。触觉异常性疼痛通过von Frey测定来测量，后肢爪重量分布使用电容式测试仪(incapacitence tester)(Columbus Instruments,Columbus,OH,USA)来监测且后肢抓力使用抓力计(Columbus Instruments,Columbus,OH,USA)来测量。简言之，von Frey测定使用具有von Frey丝的标准上下法来进行。后爪重量分布如下确定：将大鼠置于腔室中以使每只后爪处于电容式测试仪的分开的测力板上。对每个后肢在3秒内所施加的力(以克测量)进行平均。对每只大鼠进行三次测量且计算后爪重量分布的变化。峰值后肢抓力如下进行：对施加在设置在抓力计上的后肢网状计量器上的最大压力进行记录。在测试期间，每只大鼠受到限制且使在接受注射的膝侧的爪抓住网。然后向上拉动动物直到它们不再抓住。对每只大鼠进行3次测试，其中对侧爪用作对照。

测试化合物处理之前，动物作为基线。然后将MIA处理组的大鼠(每组6只)给予媒介物(0.5%甲基纤维素,口服)或者化合物1(以3mg/kg、10mg/kg和30mg/kg,口服)。给药体积为500μL。给药一小时后，进行von Frey测定、后肢重量分布和/或后肢抓力分析，以测量测试化合物的功效。图18显示了，与媒介物相比，化合物1缩爪阈值(PWT)的增加表明了测试化合物在骨关节炎的MIA模型中展现出治疗功效。

实施例10：粉末X-射线衍射。

在X'Pert PRO MPD粉末衍射仪(PANalytical,Inc.)上收集粉末X-射线衍射(PXRD)数据，所述衍射仪具有在45kV和40mA设置的Cu源、Cu(Kα)辐射和X'Celerator检测器。用刮刀和称量纸将样品添加到样品支架和光滑平面。随着样品旋转，通过在2-θ范围5-40°2θ内扫描12分钟获得X-射线衍射图。用X'Pert Data Viewer Software,version1.0aand X’Pert HighScore Software,version1.0b查看并分析衍射数据。

实施例11：差示扫描量热法。

使用TA Instruments,Q2000以10℃/分钟的加热速率，进行差示扫描量热法(DSC)研究。使用铟标准物的熔点和熔融的焓对仪器进行温度和能量校正。使用UniversalAnalysis2000software,version4.1D,Build4.1.0.16评价热事件(去溶剂化、熔化等等)。

实施例12：热重分析。

使用TA Instruments TGA Q500或Q5000以10℃/分钟的加热速率，进行热重分析(TGA)。使用标准重量校正仪器平衡，并使用镍合金(Alumel)和镍标准物校正仪器熔炉(居里点测量)。使用Universal Analysis2000software,version4.1D,Build4.1.0.16计算例如减重的热事件。

实施例13：动态水分吸附分析。

使用动态水分吸附分析器,VTI Corporation,SGA-100,进行动态水分吸附(DMS)研究。使用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和NaCl校正仪器。通过将5mg至20mg样品放置在扣除皮重的样品支架中来准备用于DMS分析的样品。将样品放置在VTI天平的下垂钢丝(hang-downwire)上。通常在40℃和0.5-1%RH运行干燥步骤1小时。等温线温度为25℃。定义的%RH通常保持在10%RH至90%RH，具有10%至20%RH的间隔。无论哪个首先出现，在继续下一个%RH保持之前需要历时10分钟或至多2小时的小于0.010%的A%重量变化。在每个%RH保持测定如上所述平衡的样品的水含量。

化合物1的无水晶形的DMS分布图(profile)(吸附/解吸等温线)示于图7A中。下面以列表的形式提供相应的数据：

本领域的技术人员应当认识到的是，在不脱离本发明的精神下，可对本申请所述用作说明的实施例做各种修改、添加、替换和变更，并因此认为其在本发明的范围之内。

Claims

1.制备(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形的方法，其包括以下步骤：

1)使(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺从结晶混合物中结晶，从而获得在所述结晶混合物中的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的晶形，其中所述结晶混合物包含乙腈和水；以及

2)将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述晶形与所述结晶混合物分离，从而获得(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述无水非溶剂化晶形；

其中所述结晶在-5℃至5℃的温度进行；且

其中所述无水非溶剂化晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°和11.1°±0.2°2θ峰；且热重分析曲线在低于135℃显示0.5％、0.25％或0.05％重量损失或热重分析曲线基本上如图7所示，其中基本上是指图7的热重分析曲线的特征在温度方面可改变±5℃且在重量变化百分比方面可改变±2％。

2.权利要求1的方法，其中所述结晶混合物通过以下步骤制备：

1)将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺溶于乙腈和第一含量水，形成第一混合物；以及

2)向所述第一混合物中加入第二含量水，从而获得所述结晶混合物。

3.权利要求2的方法，其中所述溶解在58℃至62℃的温度进行。

4.权利要求3的方法，其中存在于所述第一混合物中(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、乙腈和第一含量水之间的摩尔比为1.0:9.2:37.0至1.0:10.2:41.7。

5.权利要求3的方法，其中以使得所述第二含量水与所述第一混合物的混合物的温度在25℃至80℃的速率，向所述第一混合物中加入所述第二含量水。

6.权利要求3的方法，其中存在于所述结晶混合物中(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺、所述结晶混合物中乙腈和水之间的摩尔比为1.0:9.2:414.7至1.0:10.2:458.3。

7.权利要求3的方法，其中在所述溶解步骤之前的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺选自：

1)(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的二氯甲烷溶剂化物，

其中所述二氯甲烷溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.3°±0.2°、9.6°±0.2°、10.7°±0.2°、11.0°±0.2°、15.0°±0.2°、16.5°±0.2°、16.7°±0.2°、17.3°±0.2°和25.1°±0.2°2θ峰；

2)(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的丙酮溶剂化物，

其中所述丙酮溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含7.1°±0.2°、8.3°±0.2°、10.1°±0.2°、11.0°±0.2°、13.7°±0.2°、16.6°±0.2°、17.3°±0.2°、25.0°±0.2°和26.0°±0.2°2θ峰；以及

3)(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的乙酸乙酯溶剂化物，

其中所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.1°±0.2°、8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、12.8°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°、17.3°±0.2°、17.9°±0.2°、18.4°±0.2°和24.7°±0.2°2θ峰；以及

它们的混合物。

8.权利要求1的方法，其中所述分离包括从结晶混合物中过滤出(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述晶形。

9.权利要求1的方法，其中所述分离包括从所述结晶混合物中移除(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述晶形。

10.权利要求1的方法，还包括以下步骤：将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述晶形干燥，从而获得(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述无水非溶剂化晶形。

11.权利要求10的方法，其中所述干燥在15℃至80℃的温度进行。

12.权利要求10的方法，其中所述干燥在小于760mm Hg的压力和55℃至65℃的温度进行。

13.权利要求1的方法，其中在所述分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述无水非溶剂化晶形具有98％或更高的化学纯度。

14.权利要求1的方法，其中在所述分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述无水非溶剂化晶形具有98％或更高的对映体过量。

15.权利要求1的方法，其中在所述分离之后，(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述无水非溶剂化晶形具有99％或更高的化学纯度和99％或更高的对映体过量。

16.权利要求1的方法，其中所述无水非溶剂化晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°和17.4°±0.2°2θ峰。

17.权利要求1的方法，其中所述无水非溶剂化晶形具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为159.6℃至169.6℃的吸热。

18.权利要求1的方法，其中所述无水非溶剂化晶形具有在低于135℃显示0.5％、0.25％或0.05％重量损失的热重分析曲线或基本上如图7所示的热重分析曲线，其中基本上是指图7的热重分析曲线的特征在温度方面可改变±5℃且在重量变化百分比方面可改变±2％。

19.权利要求1的方法，其中所述无水非溶剂化晶形具有：

1)包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°和17.4°±0.2°2θ峰的粉末X-射线衍射图；

2)包含外推起始温度为159.6℃至169.6℃的吸热的差示扫描量热分析图；和

3)在低于135℃显示0.5％、0.25％或0.05％重量损失的热重分析曲线或基本上如图7所示的热重分析曲线，其中基本上是指图7的热重分析曲线的特征在温度方面可改变±5℃且在重量变化百分比方面可改变±2％。

20.制备药物组合物的方法，其包括以下步骤：

1)按照权利要求1至15的任一项，制备(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形；以及

2)将(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的所述无水非溶剂化晶形与可药用载体混合；

21.权利要求20的方法，其中所述无水非溶剂化晶形具有：

22.制备剂型的方法，其包括以下步骤：

23.权利要求22的方法，其中所述无水非溶剂化晶形具有：

24.(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形，其中所述无水非溶剂化晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°和11.1°±0.2°2θ峰；且热重分析曲线在低于135℃显示0.5％、0.25％或0.05％重量损失或热重分析曲线基本上如图7所示，其中基本上是指图7的热重分析曲线的特征在温度方面可改变±5℃且在重量变化百分比方面可改变±2％。

25.权利要求24的无水非溶剂化晶形，其中所述无水非溶剂化晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°、11.1°±0.2°、9.8°±0.2°和17.4°±0.2°2θ峰。

26.权利要求24的无水非溶剂化晶形，其中所述无水非溶剂化晶形具有差示扫描量热分析图，其包含外推起始温度为159.6℃至169.6℃的吸热。

27.权利要求24的无水非溶剂化晶形，其中所述无水非溶剂化晶形具有：

28.组合物，其包含权利要求24-27中任一项的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形。

29.药物组合物，其包含权利要求24-27中任一项的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形，以及可药用载体。

30.剂型，其包含权利要求24-27中任一项的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形，以及可药用载体。

31.制备药物组合物的方法，其包括将权利要求24-27中任一项的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形与可药用载体混合。

32.制备剂型的方法，其包括将权利要求24-27中任一项的(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形与可药用载体混合。

33.权利要求24-27中任一项的无水非溶剂化晶形、权利要求29的药物组合物或权利要求30的剂型在制备用于治疗疼痛的药物中的用途。

34.权利要求24-27中任一项的无水非溶剂化晶形、权利要求29的药物组合物或权利要求30的剂型在制备用于治疗疼痛的药物中的用途；其中所述疼痛与一种或多种病症有关，所述病症选自：骨痛、关节痛、肌肉疼痛、牙痛、偏头痛、头痛、炎性疼痛、神经性疼痛、以疗法的不良反应形式出现的疼痛、骨关节炎疼痛、癌症疼痛、多发性硬化疼痛、变应性应答、肾炎综合征、硬皮病、甲状腺炎、糖尿病性神经病、纤维肌痛、HIV相关的神经病、坐骨神经痛和自身免疫性疾病。

35.权利要求24-27中任一项的无水非溶剂化晶形、权利要求29的药物组合物或权利要求30的剂型在制备用于治疗骨质疏松症的药物中的用途。

36.组合物，其包含通过权利要求1至19中任一项的方法所制备的无水非溶剂化晶形。

37.药物组合物，其包含通过权利要求1至19中任一项的方法所制备的无水非溶剂化晶形，以及可药用载体。

38.剂型，其包含通过权利要求1至19中任一项的方法所制备的无水非溶剂化晶形，以及可药用载体。

39.制备药物组合物的方法，其包括将通过权利要求1至19中任一项的方法所制备的无水非溶剂化晶形与可药用载体混合。

40.制备剂型的方法，其包括将通过权利要求1至19中任一项的方法所制备的无水非溶剂化晶形与可药用载体混合。

41.通过权利要求1至19中任一项的方法所制备的无水非溶剂化晶形、权利要求37的药物组合物或权利要求38的剂型在制备用于治疗疼痛的药物中的用途。

42.通过权利要求1至19中任一项的方法所制备的无水非溶剂化晶形、权利要求37的药物组合物或权利要求38的剂型在制备用于治疗疼痛的药物中的用途；其中所述疼痛与一种或多种病症有关，所述病症选自：骨痛、关节痛、肌肉疼痛、牙痛、偏头痛、头痛、炎性疼痛、神经性疼痛、以疗法的不良反应形式出现的疼痛、骨关节炎疼痛、癌症疼痛、多发性硬化疼痛、变应性应答、肾炎综合征、硬皮病、甲状腺炎、糖尿病性神经病、纤维肌痛、HIV相关的神经病、坐骨神经痛和自身免疫性疾病。

43.通过权利要求1至19中任一项的方法所制备的无水非溶剂化晶形、权利要求37的药物组合物或权利要求38的剂型在制备用于治疗骨质疏松症的药物中的用途。

44.溶剂化物，其选自：

(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的无水非溶剂化晶形，其中所述无水非溶剂化晶形的粉末X-射线衍射图包含8.5°±0.2°、10.7°±0.2°、16.9°±0.2°、25.4°±0.2°和11.1°±0.2°2θ峰；且热重分析曲线在低于135℃显示0.5％、0.25％或0.05％重量损失或热重分析曲线基本上如图7所示，其中基本上是指图7的热重分析曲线的特征在温度方面可改变±5℃且在重量变化百分比方面可改变±2％；

(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的丙酮溶剂化物，

(1aS,5aS)-2-(4-氧-吡嗪-2-基)-1a,2,5,5a-四氢-1H-2,3-二氮杂-环丙并[a]并环戊二烯-4-甲酸((S)-1-羟基甲基-2,2-二甲基-丙基)-酰胺的乙酸乙酯溶剂化物，

其中所述乙酸乙酯溶剂化物的粉末X-射线衍射图包含8.1°±0.2°、8.3°±0.2°、9.0°±0.2°、12.8°±0.2°、14.2°±0.2°、16.7°±0.2°、17.3°±0.2°、17.9°±0.2°、18.4°±0.2°和24.7°±0.2°2θ峰。

45.组合物，其包含权利要求44的溶剂化物或其混合物。