CN103565799A - 伞形花内酯在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了伞形花内酯在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用,伞形花内酯与可接受的辅料,制成散剂,添加至饲料中,混匀,按日常饲料量喂食鸡;或将伞形花内酯制成伞形花内酯水溶性粉剂,溶于水中,按日常饮水量喂食鸡。通过动物感染实验证实伞形花内酯的抗球虫指数(ACI)可达到165以上,具有较好的抗柔嫩艾美耳球虫作用。
Description
技术领域
本发明涉及伞形花内酯的一种新用途,具体涉及伞形花内酯在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用。
背景技术
鸡球虫病是严重危害集约化养鸡业生产的最主要疫病,每年因此而造成的经济损失高达25亿英镑以上,其病原是顶复门原虫类的艾美耳球虫(Eimeriaspp),其中危害最大的是柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)。我国对此虽然至今无准确统计,但最保守的估计其损失应不小于25亿元RMB。化学药物治疗是控制鸡球虫病的重要措施之一,但目前鸡球虫具有广泛而严重的抗药性,迫切需要新的抗球虫药物面市。
伞形花内酯(Umbelliferone),又称伞形酮;7-羟香豆素,主要存在于伞形科植物胡萝卜(Daucus carota L.var.sativa DC)的根,豆科植物多变小冠花(Coronilla varia L.)的种子,芸香科植物芸香(Ruta graveolens L.)全草中。现有的研究显示其具有如下作用:1.抗菌作用:伞形花内酯对细菌、真菌和酵母菌均有活性,65μg/g对大肠杆菌和枯草杆菌有完全的抑制作用;对白色念珠菌、须发癣菌和红色发癣菌有抑制作用。2.降压作用:狗静脉注射伞形花内酯10mg/kg,血压下降10%,持续时间7min。3.抗癌作用:伞形花内酯对鼻咽癌9KB细胞的ED50为33.0μg/ml。4.其他作用:伞形花内酯还有镇静和解痉作用。抗菌、降压、抗癌作用。临床上用于治疗鲁氏菌病(波伏热)。该化合物的分子式是C9H6O3,分子量162.14, CAS登录号:93-35-6,其化学结构如式(Ⅰ)所示。
伞形花内酯作为一种具有抗菌、抗癌和降血压应用前景的药物近年来备受关注,但目前尚未有伞形花内酯具有抗柔嫩艾美耳球虫作用的报导,通过伞形花内酯已知的性质无法推断其是否具有抗柔嫩艾美耳球虫的作用。
发明内容
本发明的目的在于提供伞形花内酯在制备抗柔嫩艾美耳球虫药物中的应用。
本发明通过将伞形花内酯与可接受的辅料,制成散剂,添加至饲料中,混匀,按日常饲料量喂食鸡,伞形花内酯的添加量为每100kg饲料中添加3g 伞形花内酯;或将伞形花内酯制成伞形花内酯水溶性粉剂,溶于水中,按日常饮水量喂食鸡,伞形花内酯的添加量为每100kg 水中溶于1.5g 伞形花内酯。通过动物感染实验证实伞形花内酯的抗球虫指数(ACI)可达到165以上,具有较好的抗柔嫩艾美耳球虫作用。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本说明作进一步的说明,但并不局限如此。
实施例1
伞形花内酯散剂的制备:取3g 伞形花内酯(含量不低于99%)和97g淀粉混匀,即可。
散剂的用法用量:将上述100g散剂拌入100kg饲料中,按日常食量喂食。
实施例2
伞形花内酯水溶性粉剂的制备: 取3g 伞形花内酯(含量不低于99%)和97g葡萄糖混匀,即可。
水溶性粉剂的用法用量:将上述100g粉剂溶于200L水中,在用药前给试验鸡断水2小时,然后按正常饮水量喂食。
下面结合具体的实验说明伞形花内酯的抗鸡球虫实验。
实验材料:
对照药物:常规抗球虫药物三字球虫粉(30%磺胺氯吡嗪钠,批号001010),由上海诺华动物保健有限公司生产。
伞形花内酯:实施例1的伞形花内酯散剂,实施例2的伞形花内酯水溶性粉剂。
球虫卵囊:柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)广东株孢子化卵囊,由广东省农业科学院兽医研究所保存,使用前在无球虫雏鸡体内复壮。
雏鸡:岭南黄雏鸡,由广东省农业科学院畜牧研究所提供,饲养于已消毒的专用动物房内;鸡笼和所用器皿均严格消毒,自由采食和饮用纯净水;试验前观察雏鸡有无临床症状及连续2天检查粪便有无球虫卵囊,备用。
饲料:由广东省新南都饲料有限公司定制育雏料,不含任何抗球虫药物。
实验方法:
分组:按试验分组及处理将150只岭南黄雏鸡饲养至10日龄,逐只称重,淘汰弱雏和体重过大者,将剩余雏鸡随机分成5组,每组30只,并适当调整使每组雏鸡总体重大致相等。
处理:除第I (空白对照)组外,其余各组雏鸡均经口灌服柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊l×105个/羽;除第I组和第Ⅱ(阳性对照)组外,其余各组雏鸡均于感染后立即饲喂或饮用含抗球虫药物的饲料或水,第Ⅲ组饲喂含三字球虫粉的饲料,第Ⅳ组饲喂实施例1的伞形花内酯散剂与饲料制成的伞形花内酯拌料,第Ⅴ组饮用实施例2的伞形花内酯水溶性粉剂与饮水制成的伞形花内酯饮水,各组饮水和饲料的用量均相同。试验雏鸡的分组情况见表1。
表1 试验雏鸡分组
组别 | 雏鸡数/只 | 卵囊接种量/(个/羽) | 药物添加情况 |
第I组 | 30 | 0 | 不添加 |
第Ⅱ组 | 30 | l×105 | 不添加 |
第Ⅲ组 | 30 | l×105 | 三字球虫粉 |
第Ⅳ组 | 30 | l×105 | 伞形花内酯拌料 |
第Ⅴ组 | 30 | l×105 | 伞形花内酯饮水 |
每天观察并记录鸡群的精神状况、采食量、粪便情况等;对死亡雏鸡称重,剖检,若为柔嫩艾美耳球虫感染引起死亡则病变记分为+4分;所有雏鸡于感染后第7天逐只称重,剖检,进行盲肠病变记分;最后计算各组雏鸡的增重和饲料报酬。
药效判定方法及标准抗球虫指数(ACI)按美国默克公司推荐的公式计算:ACI=(相对增重率+存活率)一(卵囊值+病变值);相对增重率=(试验组增重÷空白对照组增重)×100%;存活率=(各组存活雏鸡数÷各组雏鸡总数)×100%。病变按五级记分:①无卵囊,盲肠正常,为0分;②有卵囊,盲肠黏膜稍增厚,有少量散在出血或少量血样肠内容物,为+1分;③有卵囊,盲肠黏膜增厚,有明显出血或明显血样肠内容物,为+2分;④有卵囊,盲肠黏膜增厚,有大量凝血块或血样肠芯,为+3分;⑤雏鸡因球虫病死亡或有大量卵囊,盲肠外观呈酱油色(或小肠中部有点状坏死灶,黏膜面呈绯红色),肠管明显肿大,内容物形成明显的血样肠芯,为+4分。组内病变值=每组平均病变记分×20。药效判定标准是ACI<120为无效,120~160为弱效,160~180为中效,180以上为强效。卵囊值由盲肠内容物克卵囊数(OPG)换算而来。
实验结果:
临床症状观察:
接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的对照组第2天,病鸡出现精神沉郁,呆立,食欲减退;第5天出现明显血便,并出现死亡,随后血便逐渐减少。
分别计算各组的抗球虫指数,结果见表2所示。由表2可知,第Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的抗球虫指数均高于第Ⅱ组,第Ⅳ、Ⅴ组的抗球虫指数明显高于第Ⅲ组,故实验证实伞形花内酯的抗球虫指数(ACI)可达到165以上,具有较好的抗柔嫩艾美耳球虫作用,且明显优于常规抗球虫药物三字球虫粉。
表2 各组抗球虫指数
组别 | 存活率(%) | 相对增重率(%) | 病变值 | 卵囊值 | 抗球虫指数 |
第I组 | 100 | 100 | 0 | 0 | 200 |
第Ⅱ组 | 60 | 60.3 | 35 | 20 | 65.3 |
第Ⅲ组 | 90 | 88.1 | 15 | 10 | 153.1 |
第Ⅳ组 | 100 | 89.3 | 10 | 10 | 169.3 |
第Ⅴ组 | 100 | 88.4 | 10 | 10 | 168.4 |
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