CN103565782A - 用白藜芦醇抗卵巢衰老 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种抗卵巢衰老的方法。该方法是将白藜芦醇以30mg/L的浓度加入到小鼠的日常饮用水当中,并使小鼠自由进水进食。本发明的方法能使小鼠的卵巢衰老发生时间延缓,维持卵子数量和质量,因此对抵抗雌鼠的卵巢衰老具有重要意义。并且,人类的雌性生殖衰老与小鼠相似,该发明的实验结果也可用于人类的抗卵巢衰老、延长女性生殖年龄中,对于制药提供直接证据。此外,除直接用药外,在保健品中加入白藜芦醇,也可以对抵抗卵巢衰老、延长生殖年龄具有重要帮助。
Description
技术领域
本发明涉及用白藜芦醇抗卵巢衰老的方法,属于生物与新医药领域。
背景技术
白藜芦醇(Resveratrol,反式3,4’,5-三羟基茋),化学名称芪三酚,在1940年时从白藜芦的根部首次被提取出来,之后在1983年时,人们又在中草药虎杖的根部发现含量丰富的白藜芦醇。它最初被认为是一种植物抗毒素。在1992年,人们发现红酒的抗肿瘤效果并发现红酒中有浓度较高的白藜芦醇后,这个化合物才开始收到广泛的关注。接着大量的报道显示白藜芦醇可以阻止或者缓解一系列疾病的发生,包括癌症、心血管疾病以及缺血性损伤。白藜芦醇还可以增强生物体抗逆性,并延长从酵母到脊椎动物等不同生物的寿命。
白藜芦醇对于生殖系统的作用的研究在近些年才开始兴起。实验发现,在对大鼠喂白藜芦醇4个月后发现,其卵巢中的健康卵泡数量明显增多,而闭锁卵泡明显减少,研究者们推测白藜芦醇可能在原始卵泡和初级卵泡的发育过程中起作用并抑制卵子的凋亡而延长生殖寿命。科学家们还发现,Sirt1在卵巢中的黄体化的颗粒细胞中表达,而且白藜芦醇可以刺激Sirtz1的表达量升高,并增强孕酮的分泌。白藜芦醇是一种植物雌激素,它能够与17β-雌二醇(17β-Estradiol,17β-E2)竞争性结合于雌激素受体(ER)并激活雌激素应答基因的转录,因此在体外具有雌激素样作用。
目前已知的动物实验以及流行病学观察都已显示,白藜芦醇对心血管疾病、骨质疏松症、肿瘤、阿茨海默症等与绝经后妇女常见疾病具有一定的疗效。本研究发现,通过口服白藜芦醇的方法可以抵抗雌鼠增龄过程中发生的卵巢衰老,从而白藜芦醇的药用价值进一步得到了证实。又因为人类和小鼠的雌性生殖衰老过程相似,该发明的结果也适用于延缓人类女性的卵巢衰老,只是在用量上会有所不同。除直接用药外,在保健品中加入一定量的白藜芦醇,也可以对延缓女性衰老、延长生殖年龄具有重要作用。因此,本发明对延缓雌性生殖衰老的制药提供直接的根据。
发明内容
本发明是一种通过口服白藜芦醇抗卵巢衰老的方法。实验中采用生殖衰老速度较快的C57雌鼠,对实验组采取口服一定浓度的白藜芦醇的方法,来检测白藜芦醇在延缓C57雌鼠卵巢衰老方面的作用。研究结果表明,在喂药一年后,白藜芦醇喂药组雌鼠所产后代数目高于同龄对照组雌鼠。对喂药半年和喂药一年的C57雌鼠的卵巢组织进行包埋、切片、HE染色的结果表明,喂药白藜芦醇的雌鼠卵巢中的原始卵泡和初级卵泡的数量明显多于同龄对照组;而生长卵泡和成熟卵泡的数量也在喂药一年后与对照组相比有明显的提高。对于各组雌鼠进行超排并染色的结果表明白藜芦醇可以在一定程度上维持卵子的数量和质量。同时,喂养白藜芦醇的雌鼠卵巢中的端粒酶活性、端粒长度以及衰老相关基因的表达都比同龄对照组要更接近于年轻对照组。
附图说明
图1为用白藜芦醇喂药一年后平均每只小鼠见栓后生仔数目(A)和平均每只小鼠受孕后生仔数目(B)。“n”为参与实验的小鼠数目,在B图中,n为受孕小鼠数目。从图中可以看到,喂药一年后平均每只小鼠见栓后生仔数目与年老组相比有明显增多,并且在单独计算受孕小鼠的平均生仔数目时,喂药组小鼠相对于年老对照组来讲也有更好的表现。
图2为用白藜芦醇喂药一年后各组小鼠的卵巢形态(A)和各级卵泡数目(原始和初级卵泡数目(B)、次级和生长卵泡数目(C)、闭锁卵泡数目(D))。在A图中,年轻对照组的卵巢中清晰可见数量众多的各级卵泡,而年老对照组基本看不到健康卵泡的存在。然而,白藜芦醇喂药组中的卵泡数量有一定的提升。这个结果在B图、C图和D图的卵泡计数结果中也再一次被证实。
图3为用白藜芦醇喂药一年后各组小鼠卵巢中的端粒长度。端粒长度对于维持生物体的寿命有重要作用,而随着年龄机体内积累下来活性氧化物会对端粒DNA造成损伤,以致端粒长度变短。从图中我们可以看到,端粒长度在喂药组中相对于年老对照组有显著的提升,更接近于年轻对照组。
图4为用白藜芦醇喂药一年后各组小鼠的衰老相关基因p21(A)和Sirt1(B)的表达情况。p21基因表达随着年龄的增加而上升,Sirt1基因表达随着年龄的增加而下降。这两个基因的表达量在白藜芦醇喂药组中更接近于年轻对照组,而与年老对照组相比呈现比较显著的差异。
图5为喂药半年(A)和一年(B)时各组小鼠超排后的卵子数量。对两个年龄段的各组小鼠施以一定量的激素使其超数排卵,将输卵管划破后释放出卵泡,此时记录每只雌鼠取到的卵子个数。统计结果发现,喂药半年时,各组小鼠的卵子数目没有显著差异,而到了一年时,年老对照组的卵子数目显著下降,而白藜芦醇喂药组的卵子数目在一定程度上得以维持,与年老对照组相比有显著的提升。
图6为喂药半年时各组小鼠超排后取得的卵子的质量。(纺锤体形态比较(A)、正常率比较(B))。A图中显示的是MⅡ期的卵子经过微管染色(绿色)和核酸(蓝色)染色后,用荧光显微镜照相后的形态。纺锤体的正常形态和染色体的正常排列是卵子进行下一步分裂至关重要的条件。在年老对照组中,染色体排列异常的情况增多(如图A所示),标志着卵子质量的下降。进一步的统计结果显示,在喂药半年时,纺锤体与染色体排列正常的卵子在年老对照组中明显降低,而这一个值在白藜芦醇喂药组中得到显著提升,说明白藜芦醇的摄入可以维持卵巢衰老过程中发生的卵子质量的下降。
星号表示两组之间存在显著性差异,“*”代表p<0.05,“**”代表p<0.01,“***”代表p<0.001。“Young”代表2个月龄的年轻对照组,“Old”代表与喂药组同龄的喂正常饮用水的年老对照组,“Res”代表饮用水中添加了30mg/L的白藜芦醇的喂药组。
具体实施方式
将白藜芦醇以30mg/L的浓度加入到小鼠的日常饮用水中,让其自由进水进食。
Claims (3)
1.一种延缓雌鼠卵巢衰老的方法,即将白藜芦醇加入到雌鼠的引用水中,使其长期并自由地饮用这样的水。
2.因为人的生殖衰老与小鼠相似,该发明也适用于抗人的卵巢衰老,只是在用量上不同。
3.该发明除应用于直接用药外,在保健药品中加入白藜芦醇以期获得抗小鼠及人类的卵巢生殖衰老的作用。
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WO2018056409A1 (ja) * | 2016-09-26 | 2018-03-29 | 学校法人 聖マリアンナ医科大学 | 卵巣機能の低下予防又は改善剤 |
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2012
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