CN103550775B - 一种抗失眠组合物及其应用及利用该组合物制备的多相脉冲顿释制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗失眠组合物及其应用及利用该组合物制备的多相脉冲顿释制剂及其制备方法，抗失眠组合物由组分A和组分B组成，所述的组分A为褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5‑羟基色胺2C、受体拮抗剂、5‑HTP中的一种或几种，所述的组分B为香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物中的一种或几种。这种组合物以及利用该组合物制备的多相脉冲顿释制剂具有比一般褪黑素制剂在抗失眠效果上更佳的特点，能有效解决和改善人或哺乳动物的难以入眠同时有效解决和改善人或哺乳动物的睡眠不深或多梦或早醒或醒后不易再睡等失眠问题。

Description

一种抗失眠组合物及其应用及利用该组合物制备的多相脉冲 顿释制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说，是一种抗失眠组合物及其应用及利用该组合物制备的多相脉冲顿释制剂及其制备方法。

背景技术

失眠是一种常见的心理疾患，它原发或继发于其他的躯体和心理疾病，是人类面临的重要健康问题，其发生率在全球为30%左右,而在2002年全球失眠调查显示，有43.4%的中国人在过去一年中曾经历过不同程度的失眠（李舜伟，王玉平，王拥军，等. 失眠定义、诊断及药物治疗专家共识[J]. 中华神经科杂志，2006,39（2）：141）。世界卫生组织曾在14个国家进行调查，约27%的人有睡眠问题。中国中华医学会精神病学会在上海、北京、广州、南京、杭州、山东等地进行了一次有1万多人参加的睡眠问题调查，被调查者中，因易醒、醒得过早、睡眠时间不足、睡眠质量不好等而存在睡眠问题的达42.5%（江华，制药巨头瞩目中国催眠药市场国外药称霸，南都网(广州) 2009/5/7/）。美国睡眠情况调查结果显示，有近25%的18岁及以上的成年人报告过于早醒的症状，且难再入睡，且发病频率随年龄的增长而增加(National Sleep Foundation. 2003 Sleep inamerica poll. 2003. 引自: URL:http://www.sleepfoundation.org.）(National, Sleep Foundation. 2002 Sleep inamerica poll. 2002. 引自: URL:http://www.sleepfoundation.org.）。US5,776,969 公开的一种治疗多种睡眠障碍的方法中，其中特别讨论和定义了原发性失眠，其可能以不可恢复的睡眠为特征，也可能没有此特征。在第四版的《Diagnostic and statisticalmanual of mental disorders》（DSM-IV）（American Psychiatric Association, 1994）中，对原发性失眠的定义如下：“主要症状在于难以进入或维持睡眠，或者不可恢复的睡眠，持续时间至少1个月。睡眠障碍（或伴随的白天疲劳）在社交、职业或者其它重要功能领域上引起临床上明显的痛苦和损害”。此外，根据定义，如果白天的机能被损害，单独的不可恢复的睡眠足以诊断为原发性失眠。第十版的《The International Classification ofDiseases》（ICD-10）（World Health Organisation,1991）把非器质性失眠症描述为“一种睡眠质量和/或数量不满意的症状”，其进一步描述“存在主要患有睡眠质量差的人群，但在这些人群中，睡眠数量被主观和/或客观判断为在正常范围内。”其以难以入眠或难以维持睡眠或难以从疲惫中恢复精力为特征。

随着年龄的增长，内源性褪黑素分泌减少；倒时差、倒班工作、盲人患者、失眠患者、神经损伤患者的昼夜循环失调；都会导致睡眠状况不佳（JE Chase and BE Gidal.Melatonin: therapeutic use in sleep disorders. Ann Pharmacother October 1,1997 vol.31 No.10 1218-1226）。随着年龄增大，III阶段和IV阶段睡眠减少，I阶段睡眠增多，导致深睡眠减少，夜间转醒的次数也增加，导致更多的片段睡眠（Morin C, MimeaultV, Gagne A. Nonpharmacological treatment of late-life insomnia. 1999 JPsychosom Res 1999; 46: 103–16.）。

常用治疗失眠的药物有精神类药物有苯二氮卓类和其他非苯二氮卓类安眠药，如吡唑坦、扎来普隆、曲唑酮等（Ruth M. Benca. Diagnosis and Treatment of ChronicInsomnia: A Review. Psychiatric Service. March 2005 Vol.56 No.3. 332-343）。大多数苯二氮卓类安眠药的半衰期长，可以有效维持夜间睡眠，但会造成第二天的损伤（Kripke DF, Hauri P, Ancoli-Israel S, et al: Sleep evaluation in chronicinsomniacs during 14-day use of flurazepam and midazolam. Journal of ClinicalPsychopharmacology 10:32S-43S, 1990；Kales A, Ansel RD, Markham CH, et al:Sleep in patients with Parkinson’s disease and normal patients prior to andfollowing levodopa administration. Clinical Pharmacology and Therapeutics 12:397-406,1971）。短效的三唑仑或其他非苯二氮卓类可以有效促发睡眠，且对服药后第二天的残留影响较小，但不能有效维持夜间睡眠（Vogel GW, Barker K, Gibbons P, et al: Acomparison of the effects of flurazepam 30 mg and triazolam leep latency isshortened during 4 weeks of treatment with zaleplon, a novelnonbenzodiazepine hypnotic. Journal of Clinical Psychiatry 60:536-544,1999；Scharf MB, Roth T, Vogel GW, et al: A multicenter, placebo-controlled studyevaluating zolpidem in the treatment of chronic insomnia. Journal of ClinicalPsychiatry 55:192-199,1994；Fry J, Scharf M, Mangano R, et al: Zaleplonimproves sleep without producing rebound effects in outpatients withinsomnia. International Clinical Psychopharmacology 15:141-152,2000）。常用的精神类药物（苯二氮卓类和其他非苯二氮卓类安眠药）都未能改善服药后第二天的日常行为，且可能存在发生驾驶事故、摔倒骨折、剂量过度、认知障碍和潜在的药物滥用和依赖性（Stiefel F, Stagno D, Management of insomnia in patients with chronic painconditions, CNS Drugs, 2004;18(5):285-96）。此外，现有批准的安眠药都未进行慢性失眠的长期治疗的评估（Ruth M. Benca. Diagnosis and Treatment of ChronicInsomnia: A Review. Psychiatric Service. March 2005 Vol.56 No.3. 332-343）。

褪黑素（melatonin）是松果体分泌的一种神经内分泌激素，对生物的昼夜节律、性成熟及生殖、免疫反应、肿瘤、衰老等均有调节作用。褪黑素分泌节律由位于下丘脑视交叉上核（Suprachiasmatic nuclei，SCN）的内源生物钟引发，SCN接受视网膜感觉的输入，保持每日24小时内的褪黑素节律，褪黑素分泌是昼夜节律的同步因素，也是生物体与自然界环境同步的重要环节（卢磊磊, 褪黑素(melatonin)对睡眠节律紊乱的影响. 2002年国际康复工程与临床康复学术研讨会论文集, 2002.）。人类的褪黑素水平通常在凌晨2点到5点分泌达到高峰，正常年轻人在白天的血清褪黑素水平约为10 pg/mL，到夜间可达到60 pg/mL以上(Brzezinski, A., Melatonin in humans. N Engl J Med, 1997. 336(3): p. 186-195.)。而当褪黑素分泌与昼夜循环不同步时，则可能发生睡眠失常(Skocbat, T., I.Haimov, and P. Lavie, Melatonin-the key to the gate of sleep. Annals ofmedicine, 1998. 30(1): p. 109-114.）。人在婴幼儿期（1~3岁）夜间褪黑素水平最高，从儿童到青少年期平均褪黑素水平下降10%，尔后维持在这水平（陈志伟, 许惠玉, 金香兰.褪黑素的抗衰老作用及其应用前景. 齐齐哈尔医学院学报, 2001. 22(2): p. 232-233.）。至50岁以后，随年龄继续增加，褪黑素分泌减少，可能是导致老年人睡眠失常的部分原因（Arendt J, Deacon S. Treatment of circadian rhythm disorders—melatonin.Chronobiol Int 1997; 14: 185–204.）。

因此，补充褪黑素，则可以弥补体内褪黑素的分泌减少或分泌异常，改善睡眠问题。

褪黑素作为食品补充剂，在美国被广泛用于改善睡眠质量的历史已经达30年以上。根据Summary of Product Characteristics-EU (Circadin 2 mg prolonged-releasetablets)的总结，褪黑素的药理学剂量范围为2 mg-2500 mg, 高剂量情况下迄今也未报告毒性，临床研究结果表明，当每日给药剂量为5 mg，持续给药12个月，不会产生显著的副作用，当每日给药剂量达到300 mg时，也不会产生显著的副作用。当服用过量时，会产生嗜睡。褪黑素组分会在12小时内从体内自动清除，不需要其他的治疗措施。迄今国内也已批准了54个国产褪黑素保健品和21个进口褪黑素保健品。褪黑素促进睡眠的作用经过国际各类医学机构千百次的验证，毋庸置疑（吴彬. 解决失眠，在于正确选择褪黑素. 用药指南，2010年第10期）。此外，长期安全性研究结果表明长期使用和停止使用时，不会产生安全性问题（Efficacy and Safety of Circadin® in the Treatment of Primary Insomnia）。综上所述，褪黑素是一种机体内源调节睡眠的神经内分泌激素，由于褪黑素半衰期短，能快速起效和消除、外源补充不同制剂类型的褪黑素产品，能相应有效地改善睡眠质量，而且无显著次晨残留或副作用，不存在不良耐受、滥用、依赖性、停药反应和反弹情况，是一种安全有效天然的助睡眠产品。

市场上的褪黑素制剂分别有普通制剂和缓释制剂两类，普通制剂血浆半衰期为20-30 分钟，起效迅速但作用时间短，个体差异大（Srinivasan V，Pandi-Perumal SR，Trahkt I，et al. Melatonin and melatonergic drugs on sleep: possiblemechanisms of action［J］．Int J Neurosci，2009，119( 6) : 821-826．）。褪黑素长效缓释片( Circadin) 是由Neurim制药公司开发的天然褪黑激素的长效缓释片剂，每片2 mg，在体内8～10 h 内逐步释放，经口服0. 75 h 后血药浓度达峰值（Wade AG，Ford I，Crawford G，et al．Nightly treatment of primary insomnia with prolonged releasemelatonin for 6 months: a randomized placebo controlled trial on age andendogenous melatonin as predictors of efficacy and safety［J］．BMC Med，2010，8:51．；Wade AG，Crawford G，Ford I，et al．Prolonged release melatonin in thetreatment of primary insomnia: evaluation of the age cut-off for short andlong-term response［J］．Curr Med Res Opin，2011，27( 1) : 87-98．），作用时间长但起效慢。

Arendt等 (Neurosci. Lett. 45: 317-325, 1984;CIBA Found. Symp. 117:226-283, 1986)发现，初始给予高剂量褪黑素能够增加受试人群的疲倦感和诱导入眠。J.E. Jan et al., J Pineal Res. 29:34-39 (2000)中，对儿童使用控释褪黑素制剂的有效剂量水平进行了研究，结果发现，速释褪黑素对延迟性失眠比控释褪黑素制剂有效，但控释褪黑素制剂的维持睡眠效果优于速释制剂。Hughes, R.J. Sleep 1998, 21: 52-68中，对患有睡眠维持性失眠的老年患者，在睡觉前30分钟给予褪黑激素的顿释制剂和控释制剂（0.5 mg和5 mg），另外还在半夜间给药0.5 mg 褪黑激素的速释制剂，用多功能睡眠记录仪观察，发现这两种褪黑激素制剂均缩短了睡眠潜伏期，但并不改变进入睡眠后的清醒时间（睡眠维持性失眠的一个重要参数）或总睡眠时间。

美国专利US20040097577A1中公开了一种用于治疗注意力缺陷多动障碍(ADHD)的组合物，该组合物含有至少一种选自褪黑素、褪黑素类似物、褪黑素盐或褪黑素类似物盐中组分，该组合物为控释制剂，初始顿释部分剂量后缓慢释放。

中国专利02815832.6公开了一种治疗原发性失眠的方法，该方法涉及一种治疗和改善原发性失眠患者睡眠恢复质量的药物，其含有0.0025-50 mg有效量的至少一种选自褪黑激素、其他褪黑激素能试剂、褪黑激素激动剂和褪黑激素拮抗剂的化合物，和任选的一种或多种选自抗焦虑剂、抗抑郁剂、安眠药、镇静剂、抗高血压药、镇痛药、多巴胺能激动剂、抗精神病药、抗焦虑药、减食欲剂和抗炎药的化合物，其为在预先选择的时间段缓慢在体内释放褪黑激素的缓释形式，该方法可以改善原发性失眠患者睡眠恢复质量改善入眠、缩短睡眠潜伏期，并且提高白天警惕性。

美国专利5498423公开了一种，该专利公开了一种采用不同粒径的褪黑素或至少两种不同溶解速度的包衣材料或包不同厚度的包衣的方法制成单位制剂含褪黑素为1ng-8mg的在体内释放如附图1所述的控释制剂。然而控释制剂有不同的释放行为、剂型、处方、工艺，该专利并未给出具体地实施方案，也即该专利并未给出体内释放行为如附图1所述的控释制剂的具体实施方法。

PCT专利WO95/03043公开了一种治疗昼夜节律混乱及睡眠混乱的方法。该方法涉及一种包含褪黑素的缓释制剂，褪黑素的释放模拟体内褪黑素随昼夜变化的分泌,该缓释制剂由含有不低于1mg褪黑素的糖丸和5-25%乙基纤维素包衣增重的丸子组成。

PCT专利WO2012/013595A1公开了一种包含褪黑素的三相控释片及其制备方法，最里层为含有褪黑素的缓释片芯，中间层为不含褪黑素的包衣层，外层为含有褪黑素的顿释包衣层，该制剂缓释片芯含褪黑素2-3 mg，顿释层含褪黑素为0.5-3 mg，该制剂在10分钟内释放25-40% (第一相)，10分钟至30分钟不释放 (第二相)，30分钟至6小时逐步释放至总量的90%以上，该发明描述可以治疗睡眠障碍、增加睡眠总时间、降低睡眠潜伏期、睡着后的觉醒及觉醒次数。

美国专利4665086和4600723公开了一种采用褪黑素来减轻昼夜节律紊乱的影响的方法，这些专利披露，在睡前服用1-10 mg的褪黑素，深夜早醒时再次服用，实验表明可减轻包括旅行者在内的昼夜节律紊乱患者的症状，虽然也在夜间醒来一次或两次，但在再次服用后15分钟内又入睡，且可以在早晨自然醒同时感觉处于最佳状态、可以从事繁重的工作。

薰衣草提取物具有镇静催眠作用，动物实验表明薰衣草的作用与安定相似，具有镇静作用，临床使用针刺加薰衣草香薰疗法治疗失眠，总有效率为90.6%，薰衣草提取的挥发油用于改善老年人睡眠（徐洁华，薰衣草挥发性有机物及其药理功效研究进展，时珍国医国药 2010年第21卷第4期，P979-983）。缬草制剂已成为目前欧美市场上最畅销的天然植物制剂之一，多用作镇静剂，欧美国家用缬草及其提取物来治疗轻中度失眠十分普遍。缬草常和香蜂花、五味子、酸枣仁以及其他具有镇静安神作用的中药配合应用。缬草常和蛇麻花制成复方制剂，口服2片即能减少咖啡因引起的觉醒（黄宝康，缬草属植物的镇静催眠作用及机制，药学实践杂志 2007年第25卷第3期，P134-142）。西番莲自古以来就用于治疗焦虑和失眠（Dhawan K.粉色西番莲提取物的抗焦虑作用Ethnopharmacol.-2001,78(2/3).-165~170）。夜交藤具有“安五脏、和心志、令人欢乐无忧”的作用，可起调和阴阳而促进入睡，夜交藤的提取物有镇静催眠作用（孙洲亮，夜交藤.不同提取物对抗焦虑作用的比较，中国医院药学杂志2008年第28卷第2期，P164-165）。动物实验结果表明：贯叶连翘提取物能明显延长小鼠的睡眠时间，延长幅度在2-3倍之间，作用强度弱于地西泮（杜海燕，贯叶连翘醇提取物的镇静作用，国外医学中医中医分册 1998年第20卷第4期，P46）。合欢花味甘、性平，归心、肝经，功能为理气解郁、养心安神、活络止痛（嵇扬，合欢花正丁醇提取物对小鼠睡眠时间的影响及其急性毒性实验，中华中医药学刊 2007年2月第25卷第2期，P242-244）。白芍具有安神功效，白芍提取物对戊巴比妥钠有协同作用（张雄飞，白芍提取物对小鼠改善睡眠的影响，当代医学 2008年6月总第142期，P33-34）。

中国专利 200510108929.7公开了一种改善睡眠的药学组合物，作为一般用药品使用，具有优良的安全性，可以让更多患者利用抗组胺药的催眠作用，通过睡前一天一次服用可以减轻所谓“难以入睡”、“无法沉睡”等许多现代人所抱有的暂时性失眠症状，确保舒适的睡眠。一种改善睡眠的药学组合物，其特征为，调配抗组胺药与(a)选自由钓藤钩(Uncariae Uncis Cum Ramulus)、啤酒花(Humulus lupulus)、人参(Ginseng Radix)、燕麦(Avena sativa)、西洋檞寄生(viscum album)、甘草(Glycyrrhizae Radix)、茯苓(Poria)、川芎(Cnidii Rhizoma)、知母(Anemarrhenae Rhizoma)、天南星(Arisaematis Tuber)、牡丹皮(Moutan Cortex)、翻白草(Potentilla anserine L)、春黄菊(camomile)、卡瓦胡椒(Piper methysticum)、以及菩提树(Tilia spp.)等组成群中1种或2种以上的生药；(b)香味成分；(c)选自由维生素类及/或矿物质组成群中之化合物；以及(d)选自褪黑激素(melatonin)化合物组成群中任一种成分而成。

中国专利200510093406公开了一种用于治疗失眠、调整睡眠节律、减少时差反应的保健品，其特征是由褪黑素及5-羟色氨酸组成。可达到目前各种治疗失眠药物的疗效，不影响正常睡眠结构，起效快，很少宿醉效应，无戒断反应，使用方便、安全，可达到治疗失眠，调整睡眠结构，减少时差反应的目的。

中国专利201210159673公开了一种含有蜜环菌与香蜂草、薰衣草、菊花、茉莉花其中一种或几种组合的组合物，该发明涉及营养食品及药品，特别是涉及一种在缓解紧张性头痛的同时又能清脑安神、调节神经、有助于改善睡眠且无副作用的组合物，所述组合物包括2-98重量份的蜜环菌与2-98重量份的香蜂草、薰衣草、菊花、茉莉花其中的一种或几种。

中国专利201210226399.6公开了一种利于睡眠的保健品。以解决睡眠失调问题。采用的技术方案是：由以下原料药按重量份配比制成：缬草100份、圣约翰草70-90份、西番莲10-30份、沙棘10-30份、牡蛎30-50份、夜交藤5-15份、决明子5-15份、酸枣仁5-15份、茯苓5-15份。本发明通过9味中药的协同作用，提高脑供血量，提高大脑皮层调节功能，进而达到镇静催眠，宁心安神的作用。对于长期失眠人群具有显著帮助睡眠的作用，对于提高睡眠质量具有显著疗效。

中国专利201210159673公开了一种含有蜜环菌与香蜂草、薰衣草、菊花、茉莉花其中一种或几种组合的组合物，该发明涉及营养食品及药品，特别是涉及一种在缓解紧张性头痛的同时又能清脑安神、调节神经、有助于改善睡眠且无副作用的组合物，所述组合物包括2-98重量份的蜜环菌与2-98重量份的香蜂草、薰衣草、菊花、茉莉花其中的一种或几种。

中国专利201210024763.0公开了了一种治疗失眠的药，该药由绞股蓝、合欢皮、夜交藤、柏子仁、百合五味中草药混合制成，各味中草药所占的重量份为：绞股蓝15～20份、合欢皮23～28份、夜交藤23～28份、柏子仁16～20份、百合14～18份，该专利披露在服用该发明的药治疗有关失眠等症时，除某些个体差异的原因，该发明在缓解和恢复的时间有所增加外，该发明治疗有关失眠病症的总有效率达到92～96%，不仅具有治疗失眠效果较好的优点，而且还具有无依赖性、能有效缓解便秘症状、无异味、无毒副作用等优点。

中国专利200610136397公开了一种治疗失眠症或不眠症的组合物，该发明的组合物包含白芍根提取物并且特别的包含芍药苷，其单独或与枣提取物，远志提取物和西番莲中的至少一种组合，该专利披露组合物与GABA受体结合并且协同起作用通过减少睡眠中的觉醒和增加睡眠的持续时间来缩短入睡需要的时间和提高睡眠质量。

香芹提取物中含有挥发油化合物、不饱和脂肪酸、类黄酮物质、叶绿素、丁基苯酞类、氨基酸、香豆素衍生物等多种物质，其中的类黄铜物质、丁基苯酞类物质具有镇静等药理作用（周辉，芹菜化学成分及药理活性研究进展 氨基酸和生物资源 2006,28（1）：6-9）。香芹中含有的丁基苯酞活性成分，能作用于大脑的边缘系统和间脑，从而起到镇静、安定、催眠的作用，另外，香芹中含有的芹菜素、挥发油等成分能够对抗兴奋，纠正植物神经功能紊乱，有效消除焦虑、烦躁的情绪（2012-01-04 13:48:05 凤凰中医）。香芹提取物通过降低花生四烯酸含量，有提高脑血管内皮NO和PGI2的水平，抑制谷氨酸释放，降低细胞内钙浓度，抑制自由基和提高抗氧化酶活性等作用。褪黑素是神经内分泌激素，是昼夜节律的调节剂。将香芹提取物与褪黑素能类药物组合，可以从纠正神经功能紊乱和调节昼夜节律两种互补机理协同地治疗和改善睡眠问题。

申请人经长期研究，出人意料地发现采用褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5-羟基色胺2C（5HT2C）受体拮抗剂、5-HTP等褪黑素能类药物中的至少一种和香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物等提取物中的至少一种的组合物制备成的药物比单纯地使用褪黑素能类药物或单纯使用草本及提取物有更好的安眠作用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术现状，提供一种抗失眠组合物及利用该组合物制备的多相脉冲顿释制剂及其制备方法及其应用，这种抗失眠组合物的抗失眠功效优于单纯使用褪黑素能类的药物或单纯使用草本及提取物，利用该组合物制备的多相脉冲顿释制剂可以用于治疗和改善难以入眠并具有维持睡眠的功效，抗失眠组合物和多相脉冲顿释制剂可以广泛地应用在治疗和改善人或哺乳动物的难以入眠同时治疗和改善人或哺乳动物的睡眠不深或多梦或早醒或醒后不易再睡的药物或保健食品或食品中。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

一种抗失眠组合物，其中：由组分A和组分B组成，组分A为褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5-羟基色胺2C、受体拮抗剂、5-HTP中的一种或几种，组分B为香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物中的一种或几种。

一种抗失眠的组合物还可以含有维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B9、维生素B12、纤维醇、钙、镁、色氨酸中的一种或几种组合。

为优化上述技术方案，采取的措施还包括：

组分A为褪黑素、雷美尔通、阿戈美拉汀、特斯美尔通、5-HTP中的一种或几种，组分B为香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物；组分A用量为0.1 mg至50 mg，组分B用量为5 mg至100 mg。

组分A为褪黑素，组分B为香芹提取物。

组分A中的褪黑素为褪黑素固体分散体，褪黑素固体分散体为褪黑素组分与分散体聚合物共同热熔挤出形成，分散体聚合物为聚丙烯酸树脂、泊洛沙姆、羟丙基纤维素、共聚维酮S630、聚乙二醇中的一种或几种。

一种使用抗失眠组合物的多相脉冲顿释制剂，包括有抗失眠组合物以及包覆有至少一层延迟释放包衣材料的抗失眠组合物；使用时，抗失眠组合物以及包覆有至少一层延迟释放包衣材料的抗失眠组合物均在设计的时间点迅速释放。

该多相脉冲顿释制剂为多单元制剂，多单元制剂为微丸片或微丸胶囊或由微丸和其它组份组成的制剂形式；

微丸片或微丸胶囊包括顿释抗失眠组合物以及包覆有至少一层延迟释放包衣材料的脉冲抗失眠组合物微丸；

顿释抗失眠组合物包括抗失眠组合物、稀释剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂，稀释剂为微晶纤维素、聚乙二醇、乳糖、磷酸氢钙、蔗糖、糖粉、糊精、甘露醇、山梨醇、木糖醇中的一种或几种，粘合剂为聚维酮、羟丙甲基纤维素、淀粉、羟丙基纤维素、羟基乙基纤维素中的一种或几种，崩解剂为交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、微粉硅胶、低取代羟丙甲基纤维素中的一种或几种，润滑剂为硬脂酸镁、硬脂酸锌、滑石粉、十二烷基硫酸钠、硬脂酸富马酸钠中的一种或几种，所述助流剂为微粉硅胶、滑石粉中的一种或几种；

顿释抗失眠组合物制备成微丸即为顿释微丸；

脉冲抗失眠组合物微丸包括抗失眠组合物、稀释剂、粘合剂、崩解剂、延迟释放包衣材料、增塑剂，稀释剂为微晶纤维素、聚乙二醇、乳糖、磷酸氢钙、蔗糖、糖粉、糊精、甘露醇、山梨醇、木糖醇中的一种或几种，粘合剂为聚维酮、羟丙甲基纤维素、淀粉、羟丙基纤维素、羟基乙基纤维素中的一种或几种，崩解剂为交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、微粉硅胶、低取代羟丙甲基纤维素中的一种或几种，延迟释放包衣材料为蜂蜡、巴西棕榈蜡、羟丙甲基纤维素、羟丙纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素、虫胶、尤特奇L、乙烯-醋酸乙烯、卡波姆中的一种或几种，增塑剂为柠檬酸三乙酯、三醋酸甘油酯、聚乙二醇中的一种或几种；

顿释微丸包覆一层延迟释放包衣材料即为第二相脉冲顿释微丸，顿释微丸包覆一层较第二相脉冲顿释微丸包衣材料延迟释放效果更佳的延迟释放包衣材料或包覆两层延迟释放包衣材料即为第三相脉冲顿释微丸；该多相脉冲顿释制剂为二相脉冲顿释制剂或三相脉冲顿释制剂，二相脉冲顿释制剂由顿释抗失眠组合物和第二相脉冲顿释微丸组成；三相脉冲顿释制剂由顿释抗失眠组合物、第二相脉冲顿释微丸和第三相脉冲顿释微丸组成。

顿释微丸和脉冲抗失眠组合物微丸占微丸片的重量比为20%-60%，顿释微丸和脉冲抗失眠组合物微丸粒径为0.2 mm至2.0 mm。

一种制备多相脉冲顿释制剂的方法，其特征是包括以下步骤：

步骤一、褪黑素组分与分散体聚合物热熔挤出，粉碎，得到细粉；

步骤二、将细粉和香芹提取物以及其他药学上可接受的辅料混合，通过挤出滚圆制备顿释微丸；

步骤三、通过流化床在顿释微丸外包覆一层或多层延迟释放包衣材料，制成脉冲抗失眠组合物微丸；

步骤四、将脉冲抗失眠组合物微丸与褪黑素、香芹提取物和其他药学上可接受的辅料混合，压制成片；或将步骤二得到的顿释微丸与步骤三得到的脉冲抗失眠组合物微丸混合压片；或步骤二得到的顿释微丸与步骤三得到的脉冲抗失眠组合物微丸混合灌装胶囊。

抗失眠组合物的应用，应用于治疗和改善人或哺乳动物的难以入眠同时治疗和改善人或哺乳动物的睡眠不深或多梦或早醒或醒后不易再睡的药物或保健食品或食品中。

步骤一中的细粉为褪黑素固体分散体，褪黑素固体分散体具体制备方法为：

1) 将褪黑素组分和分散体聚合物按重量比1:1至1:20混合均匀，也可以加入适量的增塑剂，增塑剂选自柠檬酸三乙酯、三醋酸甘油酯、聚乙二醇中的一种或多种混合；分散体聚合物选自聚丙烯酸树脂、泊洛沙姆、羟丙基纤维素、共聚维酮S630、聚乙二醇中的一种或几种混合；

2) 设置热熔挤出机工作参数，平衡后，将混合物加入热熔挤出机中，挤出温度为130℃-190℃，挤出螺杆速度根据挤出温度进行适当调节；

3) 挤出物室温条件下冷却，粉碎，过80目筛，即得褪黑素固体分散体。

本发明组合物所述的褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5-羟基色胺2C（5HT2C）受体拮抗剂、5-HTP包括但不限于褪黑素、雷美尔通、阿戈美拉汀、特斯美尔通、5-HTP。雷美尔通、阿戈美拉汀以及特斯美尔通均属于褪黑素受体激动剂，该组合物含有至少一种选自褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5-羟基色胺2C（5HT2C）受体拮抗剂、5-HTP的组分和至少一种选自香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物的组分，优选褪黑素、雷美尔通、阿戈美拉汀、特斯美尔通、5-HTP中的至少一种组分和香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物的至少一种组分，更优选褪黑素、雷美尔通、阿戈美拉汀、特斯美尔通、5-HTP中的至少一种组分和香芹提取物，更优选褪黑素和香芹提取物。

组分B的提取可以采用合提法或分提法，合提法为将各原料粗粉混合后一起提取，分提法为将各原料粗粉分别提取再按需求混合。所述的提取物可采用乙醇提取或超临界二氧化碳提取或其他提取方式，优选采用乙醇提取或超临界二氧化碳提取，采用乙醇提取时，可用乙醇渗漉或回流，得提取液，将其减压回收溶剂至无醇味，过滤得滤液，将滤液上大孔吸附树脂柱，用7-8倍柱体积70～90％乙醇洗脱， 洗脱液减压干燥即得；更优选采用超临界二氧化碳低温提取法，选择萃取温度35-45℃和萃取压力100-200 bar作为提取条件，可以加入适量的第三组分（即夹带剂）进行提取，所述的第三组分包括但不限于乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，优选乙醇。

组分B用量为5-100 mg，其中，如果单独使用香芹提取物，优选10-30 mg，如果单独使用香蜂草提取物，优选50-100 mg，如果单独使用西番莲提取物，优选20-80 mg，如果单独使用白芍提取物，优选10-50 mg，如果单独使用远志提取物，优选30-80 mg，如果单独使用贯叶连翘提取物，优选5-15 mg。

该组合物制备的多相脉冲顿释制剂，每相均在设计的时间点迅速释放，释放时间为5分钟以内，优选制成二相脉冲顿释制剂，更优选制成三相脉冲顿释制剂。当制剂为二相脉冲顿释制剂时，各单位剂量的40%-60%在5分钟内释放，即第一相顿释，迅速起到诱导睡眠、治疗和改善难以入眠的问题；单位剂量的60%-40%在服用后3-5小时顿释，即第二相顿释，起到治疗和改善睡眠维持的效果。当制剂为三相脉冲顿释制剂时，各单位剂量的30%-50%在5分钟内释放，即第一相顿释，迅速起到诱导睡眠、治疗和改善难以入眠的问题；单位剂量的40%-30%在服用后2-3小时顿释，即第二相顿释，起到治疗和改善睡眠维持的效果；单位剂量的30%-20%在服用后4-6小时顿释，即第三相顿释，起到治疗和改善睡眠维持的效果。

褪黑素在水溶液中的溶解度仅约100 μg/ml，溶解速率慢，影响吸收速率，起效时间受到溶解速率限制。然而褪黑素的熔点仅为117℃，在熔融状态下能保持至少20分钟稳定。本发明根据这一特性，采用熔融分散法，制备褪黑素分子水平分散的固体分散体，可显著增加即溶速率。该组合物中褪黑素可以预先进行热熔挤出制成褪黑素固体分散体，使褪黑素在分子水平分散在聚合物体系中，见水即溶，提高顿释部分的溶解吸收速率。其中褪黑素组分和聚合物的重量比为1:1-1:20，优选重量比为1:1-1:10。所述的多相脉冲顿释制剂可以制成片剂、胶囊、混悬液或其他适宜的口服剂型，优选制成片剂和胶囊，更优选制成片剂和胶囊的多单元制剂，更优选制成微丸片和微丸胶囊。

所述的片剂为微丸片时；

所述的微丸占微丸片的重量比为20%-60%，优选30%-50%；

所述的微丸粒径为0.2mm-2.0mm，优选微丸粒径为0.3mm-1.0mm，更优选微丸粒径为0.4mm-0.8mm；

所述的微丸的制备方法可以采用挤出滚圆法制备或采用空白丸芯上药法制备：

所述的挤出滚圆法制备微丸包括以下步骤：

1) 组分A和组分B与稀释剂、粘合剂、崩解剂混合均匀，加适量水制备软材；或将褪黑素固体分散体和组分B与稀释剂、粘合剂、崩解剂混合均匀，加适量水制备软材。

2) 使用0.4 毫米挤出孔板的挤出滚圆制丸机将软材挤出滚圆制备微丸，并将微丸经干燥、过筛后收集35-60目微丸，即得顿释微丸。

3) 使用流化床将顿释微丸包覆一层延迟释放的包衣材料，即得可用于二相脉冲顿释制剂的第二相脉冲顿释微丸。

4)使用流化床将第二相脉冲释放微丸包覆一层延迟释放的包衣材料或使用流化床将顿释微丸包覆一层相对第二相脉冲顿释微丸更厚的延迟释放包衣材料或使用流化床将顿释微丸包覆一层相对第二相脉冲顿释微丸所用包衣材料延迟释放效果更强的材料，即得可用于三相脉冲顿释制剂的第三相脉冲顿释微丸。

所述的空白丸芯上药法制备微丸包括以下步骤：

1）将至少一种选自褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5-羟基色胺2C（5HT2C）受体拮抗剂、5-HTP的组分和至少一种选自香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物的组分配制成粘合剂的混悬液，采用流化床将混悬液包在空白丸芯上，干燥即得顿释微丸。

2）使用流化床将顿释微丸包覆一层延迟释放的包衣材料，即得可用于二相脉冲顿释制剂的第二相脉冲顿释微丸。

3）使用流化床将第二相脉冲释放微丸包覆一层延迟释放的包衣材料或使用流化床将顿释微丸包覆一层相对第二相脉冲顿释微丸更厚的延迟释放包衣材料或使用流化床将顿释微丸包覆一层相对第二相脉冲顿释微丸所用包衣材料延迟释放效果更强的材料，即得可用于三相脉冲顿释制剂的第三相脉冲顿释微丸。

二相脉冲顿释的微丸片，制备方法可以为：将上述的第二相脉冲顿释微丸和褪黑素固体分散体和组分B、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂混合压制成片；或将上述的第二相脉冲顿释微丸和顿释微丸，稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂混合压制成片。

三相脉冲顿释的微丸片，制备方法可以为：将上述的第三相脉冲顿释微丸和第二相脉冲顿释微丸和褪黑素固体分散体和组分B、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂混合压制成片；或将上述的第三相脉冲顿释微丸和第二相脉冲顿释微丸和顿释微丸，稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂混合压制成片。

所述的胶囊为微丸胶囊时；

所述的微丸的制备方法可以采用挤出滚圆法制备或采用空白丸芯上药法制备：

所述的挤出滚圆法制备微丸包括以下步骤：

1) 组分A和组分B与稀释剂、粘合剂、崩解剂混合均匀，加适量水制备软材；或将褪黑素固体分散体和组分B与稀释剂、粘合剂、崩解剂混合均匀，加适量水制备软材。

2）使用挤出滚圆制丸机将软材挤出滚圆制备微丸，并将微丸经干燥、过筛后收集35-60目微丸，即得顿释微丸。

3）使用流化床将顿释微丸包覆一层延迟释放的包衣材料，即得可用于二相脉冲顿释制剂的第二相脉冲顿释微丸。

4）使用流化床将二相脉冲释放微丸包覆一层延迟释放的包衣材料或使用流化床将顿释微丸包覆一层相对第二相脉冲顿释微丸更厚的延迟释放包衣材料或使用流化床将顿释微丸包覆一层相对第二相脉冲顿释微丸所用包衣材料延迟释放效果更强的材料，即得可用于三相脉冲顿释制剂的第三相脉冲顿释微丸。

空白丸芯上药法制备微丸包括以下步骤：

1）组分A和组分B配制成粘合剂的混悬液，采用流化床将混悬液包在空白丸芯上，干燥即得顿释微丸。

2）使用流化床将顿释微丸包覆一层延迟释放的包衣材料，即得可用于二相脉冲顿释制剂的第二相脉冲顿释微丸。

3）使用流化床将二相脉冲释放微丸包上一层延迟释放的包衣材料或使用流化床将顿释微丸包覆一层相对第二相脉冲顿释微丸更厚的延迟释放包衣材料或使用流化床将顿释微丸包覆一层相对第二相脉冲顿释微丸所用包衣材料延迟释放效果更强的材料，即得可用于三相脉冲顿释制剂的第三相脉冲顿释微丸。

二相脉冲顿释微丸胶囊的制备方法可以为：将上述的第二相脉冲顿释微丸和褪黑素固体分散体和组分B、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂混合灌装胶囊；或将上述的第二相脉冲顿释微丸和顿释微丸混合灌装胶囊。

三相脉冲顿释微丸胶囊的制备方法可以为：将上述的第三相脉冲顿释微丸和第二相脉冲顿释微丸和褪黑素固体分散体和组分B、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂混合灌装胶囊；或将上述的第三相脉冲顿释微丸和第二相脉冲顿释微丸和顿释微丸混合灌装胶囊。

使用在微丸胶囊中的各类微丸粒径为0.2mm-2.0mm，优选微丸粒径为0.4mm-1.5mm，更优选微丸粒径为0.6mm-1.0mm，

该种组合物应用于治疗和改善人或哺乳动物的入眠困难同时治疗和改善睡眠维持的药物或保健食品或食品中的用途，该组合物可以制备成多相脉冲顿释制剂，根据睡眠时间，一般制备成两相脉冲顿释制剂或者三相脉冲顿释制剂。多相脉冲顿释制剂因其中一部分有效成分在服用后迅速释放，迅速起到诱导睡眠、解决了难以入眠的问题；其中一部分有效成分包覆有延迟释放外衣，服用后可以在设计时间点迅速释放，使得药效在最易受干扰而醒来的时间段强效发挥，改善或解决睡眠不深或多梦或早醒或醒后不易再睡的问题。

本发明的组合物可以和其它顿释或缓释或控释的抗抑郁活性组分、安眠组分、镇静组分、增效组分的一种或多种复方组合使用。

附图说明

图1是美国专利5498423披露的控释制剂在体内的褪黑素水平图；

图2褪黑素热熔挤出形成固体分散体前后的溶解释放曲线；

图3褪黑素普通片、褪黑素缓释片和本发明实施例1的两相脉冲褪黑素微丸片的体外释放曲线

图4 比格犬体内血药浓度-时间曲线。

具体实施方式

以下为本发明实施例作进一步详细描述。

以下为实施例中会应用到的各种组合物的制备方法：

1、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法一：

称取褪黑素200g、HPC ELF 400g，混合均匀，设置挤出温度为150℃，预热平衡后，加入混粉，以60rpm螺杆速度挤出成条状物，室温放置3小时，粉碎，过80目筛即得褪黑素与HPC的固体分散体。

2、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法二：

称取褪黑素200g、Eudragit EPO 500g，混合均匀，设置挤出温度为125℃，预热15min，加入混粉，以70rpm螺杆速度挤出成条状物，室温放置3小时，粉碎，过80目筛即得褪黑素与Eudragit EPO的固体分散体。

3、提取香芹提取物的方法：

取香芹500g，粉碎过20目筛，置于超临界二氧化碳萃取仪中，萃取溶剂为体积比为95:5的二氧化碳和乙醇，选择萃取温度40℃和萃取压力180 bar作为提取条件，萃取即得香芹提取物。

4、提取贯叶连翘提取物的方法：

取贯叶连翘全草100g，粉碎过20目筛，加乙醇500ml浸泡24小时，采用减压回流提取1小时，过滤得提取液，将提取液减压回收溶剂至无醇味，过滤得滤液，将滤液上大孔吸附树脂柱，用7-8倍柱体积90％乙醇洗脱，洗脱液减压干燥即得。

5、褪黑素与香芹提取物的顿释微丸的制备方法：

取按1、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法一制备的固体分散体300g、按3、提取香芹提取物的方法制备的香芹提取物100g、微晶纤维素400g、HPMC E5 20g、交联聚维酮30g，混合均匀，加适量水制成软材，使用0.4 毫米挤出孔板的挤出滚圆制丸机将软材挤出滚圆制备微丸，将微丸干燥、过筛收集35-60目微丸，即得褪黑素与香芹提取物的顿释微丸。

6、褪黑素与贯叶连翘提取物的顿释微丸制备方法：

取HPMC E5 60g，溶于1940g水中，将褪黑素100g、按4、提取贯叶连翘提取物的方法提取的贯叶连翘提取200g加入HPMC溶液中，搅拌分散均匀得混悬液，采用流化床以底喷方式将混悬液包在500g蔗糖空白糖丸上，干燥即得褪黑素与贯叶连翘提取物的顿释微丸。

7、阿戈美拉汀与香芹提取物的顿释微丸制备方法：

取阿戈美拉汀200g、泊洛沙姆188 300g，混合均匀，设置挤出温度为120℃，预热20min，加入混粉，以80rpm螺杆速度挤出成条状物，室温放置2小时，粉碎，过80目筛即得阿戈美拉汀与泊洛沙姆的固体分散体。

取上述固体分散体250g、按3、提取香芹提取物的方法制备的香芹提取物100g、微晶纤维素200g、聚维酮K30 10g、交联羧甲基纤维素钠20g，混合均匀。

加适量水制成软材，使用0.5毫米挤出孔板的挤出滚圆制丸机将软材挤出滚圆制备微丸，将微丸干燥、过筛收集30-50目微丸，即得阿戈美拉汀与香芹提取物的顿释微丸。

8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法：

取按5、褪黑素与香芹提取物的顿释微丸的制备方法制备的顿释微丸500g，以EC和柠檬酸三乙酯重量比42:1溶解于适量水中，采用流化床包衣，包衣增重至50%，干燥，再以Eudragita L30D-55及适宜的增塑剂、抗粘剂采用流化床包一层肠溶衣，包衣增重10%，干燥即得可用于二相脉冲顿释制剂的第二相脉冲顿释微丸。

9、三相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法：

取按6、褪黑素与贯叶连翘提取物的顿释微丸制备方法制备的顿释微丸500g，以巴西棕榈蜡和蜂蜡和十二烷基硫酸钠重量比为1:4:0.1为包衣材料，采用流化床包衣，包衣增重至45%，干燥，再采用流化床包上一层5%增重的壳聚糖，干燥即得可用于三相脉冲顿释制剂的第三相脉冲顿释微丸。

10、二相脉冲的微丸片制备方法：

取按8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备的第二相脉冲顿释微丸70.5g、按2、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法二制备的褪黑素与Eudragit EPO的固体分散体17.5g、微晶纤维素100g、聚乙二醇40g、交联羧甲基纤维素钠10g、微粉硅胶1.2g、硬脂酸富马酸钠1.2g，混合均匀，压制成1000片微丸片。

11、二相脉冲的微丸片的制备方法：

取按7、阿戈美拉汀与香芹提取物的顿释微丸制备方法制备的顿释微丸58.1g，按8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备的第二相脉冲顿释微丸70.4g、微晶纤维素177.5g、交联聚维酮10g、微粉硅胶2g、硬脂酸镁2g，混合均匀，压制成1000片微丸片。

12、二相脉冲胶囊的制备方法：

取按5、褪黑素与香芹提取物的顿释微丸的制备方法制备的顿释微丸42.4g、按8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备制备的第二相脉冲顿释微丸42.3g，混合均匀，灌装成1000粒胶囊。

13、三相脉冲微丸片的制备方法：

取按1、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法一制备的褪黑素与HPC的固体分散体15g、按8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备的第二相脉冲顿释微丸42.3g、按9、三相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备的第三相脉冲顿释微丸26.3g、微晶纤维素155.5g、乳糖80g、交联羧甲基纤维素钠17g、微粉硅胶2g、硬脂酸富马酸钠2g，混合均匀，压制成1000片。

14、三相脉冲微丸片的制备方法：

取按5、褪黑素与香芹提取物的顿释微丸的制备方法制备的顿释微丸33.9g、按8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备的第二相脉冲顿释微丸56.3g、按9、三相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备的第三相脉冲顿释微丸26.3g、甘露醇90g、聚乙二醇37g、低取代羟丙甲基纤维素13g、滑石粉2.5g、硬脂酸镁1.3g，混合均匀，压制成1000片。

15、三相脉冲胶囊的制备方法：

取按6、褪黑素与贯叶连翘提取物的顿释微丸制备方法制备的顿释微丸25.9g、按8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备的第二相脉冲顿释微丸56.3g、按9、三相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备的第二相脉冲顿释微丸39.5g，混合均匀，灌装成1000粒胶囊。

值得注意的是，褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5-羟基色胺2C、受体拮抗剂、5-HTP中的一种或几种在促进睡眠的作用经过国际各类医学机构千百次的验证，效果毋庸置疑，香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物也均具有安神功效，稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、粘合剂、增塑剂、延迟释放包衣材料、粘附材料种类繁多，但是功能和效果相去不远，在各实施例中，我们选取其中几个较有代表性的组分进行说明，未进行说明的组分也应视为进行了相似的累述。

实施例1、

一种抗失眠组合物，由褪黑素及阿戈美拉汀和香芹提取物混合制备，褪黑素为褪黑素固体分散体，褪黑素固体分散体为褪黑素组分与分散体聚合物共同热熔挤出形成；

该香芹提取物采用3、提取香芹提取物的方法制备，褪黑素固体分散体采用1、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法一制备。

使用上述抗失眠组合物的二相脉冲顿释制剂，包括第二相脉冲顿释微丸和顿释微丸；

本实施例的顿释微丸采用7、阿戈美拉汀与香芹提取物的顿释微丸制备方法制备，第二相脉冲顿释微丸采用8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备。

本二相脉冲顿释制剂制作成微丸片；

本实施例的微丸片采用11、二相脉冲的微丸片的制备方法制备。

实施例2、

一种抗失眠组合物，由褪黑素和香芹提取物混合制备，褪黑素为褪黑素固体分散体，褪黑素固体分散体为褪黑素组分与分散体聚合物共同热熔挤出形成；

该香芹提取物采用3、提取香芹提取物的方法制备，褪黑素固体分散体采用2、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法二制备。

使用上述抗失眠组合物的二相脉冲顿释制剂，包括第二相脉冲顿释微丸和本实施例的抗失眠组合物；

第二相脉冲顿释微丸采用8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备。

本二相脉冲顿释制剂制作成微丸片；

本实施例的微丸片采用10、二相脉冲的微丸片制备方法制备。

实施例3、

一种抗失眠组合物，由褪黑素和香芹提取物及贯叶连翘提取物混合制备，褪黑素为褪黑素固体分散体，褪黑素固体分散体为褪黑素组分与分散体聚合物共同热熔挤出形成；

该香芹提取物采用3、提取香芹提取物的方法制备，贯叶连翘提取物采用4、提取贯叶连翘提取物的方法制备，褪黑素固体分散体采用1、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法一制备。

使用上述抗失眠组合物的三相脉冲顿释制剂，包括第三相脉冲顿释微丸、第二相脉冲顿释微丸和本实施例的褪黑素固体分散体；

第三相脉冲顿释微丸采用9、三相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备，第二相脉冲顿释微丸采用8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备。

本三相脉冲顿释制剂制作成微丸片；

本实施例的微丸片采用13、三相脉冲微丸片的制备方法制备。

实施例4、

一种抗失眠组合物，由褪黑素和香芹提取物及贯叶连翘提取物混合制备，褪黑素为褪黑素固体分散体，褪黑素固体分散体为褪黑素组分与分散体聚合物共同热熔挤出形成；

该香芹提取物采用3、提取香芹提取物的方法制备，贯叶连翘提取物采用4、提取贯叶连翘提取物的方法制备，褪黑素固体分散体采用1、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法一制备。

使用上述抗失眠组合物的三相脉冲顿释制剂，包括第三相脉冲顿释微丸、第二相脉冲顿释微丸和顿释微丸；

第三相脉冲顿释微丸采用9、三相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备，第二相脉冲顿释微丸采用8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备，顿释微丸采用5、褪黑素与香芹提取物的顿释微丸的制备方法制备。

本三相脉冲顿释制剂制作成微丸片；

本实施例的微丸片采用14、三相脉冲微丸片的制备方法制备。

实施例5、

一种抗失眠组合物，由褪黑素和香芹提取物混合制备，褪黑素为褪黑素固体分散体，褪黑素固体分散体为褪黑素组分与分散体聚合物共同热熔挤出形成；

该香芹提取物采用3、提取香芹提取物的方法制备，褪黑素固体分散体采用1、褪黑素热熔挤出制备固体分散体的方法一制备。

使用上述抗失眠组合物的二相脉冲顿释制剂，包括第二相脉冲顿释微丸和顿释微丸；

本实施例的顿释微丸采用5、褪黑素与香芹提取物的顿释微丸的制备方法制备，第二相脉冲顿释微丸采用8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备。

本二相脉冲顿释制剂制作成微丸胶囊；

本实施例的微丸胶囊采用12、二相脉冲胶囊的制备方法制备。

实施例6、

一种抗失眠组合物，由褪黑素和香芹提取物及贯叶连翘提取物混合制备；

该香芹提取物采用3、提取香芹提取物的方法制备，贯叶连翘提取物采用4、提取贯叶连翘提取物的方法制备。

使用上述抗失眠组合物的三相脉冲顿释制剂，包括第三相脉冲顿释微丸、第二相脉冲顿释微丸和顿释微丸；

本实施例的第三相脉冲顿释微丸采用9、三相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备，第二相脉冲顿释微丸采用8、二相脉冲顿释制剂的微丸的制备方法制备，顿释微丸采用6、褪黑素与贯叶连翘提取物的顿释微丸制备方法制备。

本二相脉冲顿释制剂制作成微丸胶囊；

本实施例的微丸胶囊采用15、三相脉冲胶囊的制备方法制备。

以下通过试验来验证本发明的有益效果：

试验验证1：褪黑素热熔挤出前后溶出速率比较

称取实施例1中制备的褪黑素固体分散体（含3 mg褪黑素），采用中国药典2010 年版二部附录XC 第二法，以900 mL 37℃ pH值为6.8的磷酸盐缓冲液为溶出介质，桨速为50转/分钟，分别于0分钟、2分钟、5分钟、10分钟、15分钟、20分钟取溶出液5ml过滤，HPLC法（检测波长225nm，进样体积20 ul，柱温箱25℃，流动相0.245%磷酸二氢钾溶液PH 3.0: 乙腈=70：30，色谱柱：XBridge C8, 150×4.6mm, 3.5um）测定含量。溶出速率曲线如图2所示。

结果表明：未进行热熔挤出处理的褪黑素2分钟仅溶出约35%，需约20分钟才能接近完全溶出，而进行热熔挤出处理后的褪黑素2分钟溶出可达约95%，5分钟即可接近完全溶出，可见褪黑素制成固体分散体可显著增加即溶速率。

试验验证2：褪黑素普通片、褪黑素缓释片和本发明实施例1的两相脉冲褪黑素微丸片的体外释放曲线

参考美国药典褪黑素缓释片个论的方法，在下列溶出条件设置（桨法，50 rpm，900mL pH 6.8, 37°C）下，考察Natrol 10 mg 褪黑素普通片、Natrol 10 mg TR褪黑素缓释片和含10 mg褪黑素的本发明实施例1的两相脉冲褪黑素微丸片的体外释放行为。结果如图3所示。

结果表明：本发明的两相脉冲褪黑素微丸片在前半小时的体外释放量高于褪黑素缓释片但低于褪黑素普通片，能快速起到诱导入眠的效果；本发明的两相脉冲褪黑素微丸片在2-4小时顿释剩余剂量，起到在最易受干扰而醒来的时间段强效发挥维持睡眠的效果。

试验验证3：比格犬体内血药浓度研究

为了比较褪黑素普通片、褪黑素缓释片和本发明实施例1的两相脉冲褪黑素微丸片之间的口服吸收情况和清除情况，三组成年健康比格犬、每组5只，后肢股静脉插管用于取血。早餐喂标准狗粮，两小时后按照下列方案口服饲药。实验组一给予1片Natrol 5 mg褪黑素普通片，3.5小时后再给予1片。实验组二给予1片Natrol 10 mg TR褪黑素缓释片。实验组三给予1片含褪黑素10 mg的本发明实施例1制备的两相脉冲褪黑素微丸片。分别在给药前，和给药后半小时、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时和10小时时，用含抗凝血剂的针筒抽取5ml 血浆，离心分离后，取上层血清，冷冻。以MS-HPLC法〔lagana A, Marino A, Fago G, et al. Sensitive assay for melatonin in humanserum by liquid chromatography [J]. Anal Chim Acta, 1995, 316: 377-385〕测定血浆浓度。结果如图4所示。

结果表明：本发明的两相脉冲褪黑素微丸片的体内血药行为与两次给予褪黑素普通片的行为相近，但无需中途干扰后使用，能够在最易受干扰而醒来的时间段强效发挥维持睡眠的效果。

试验验证4：受试者试用效果统计

以20例入眠困难且觉醒后难以入眠的患者（年龄22-70岁）为研究对象，按照平行对照组随机双盲研究方法，研究脉冲释放褪黑素制剂对促进入眠和改善觉醒后再入眠的作用。用安慰剂组试用一周确定基线特征，然后分安慰剂组和试验组（含褪黑素10 mg的本发明实施例1两相脉冲褪黑素制剂）试验2周。在试用第2天开始，询问受试者前一晚的睡眠情况，持续2周。结果如表1。结果表明，本发明的双相脉冲褪黑素组合物对改善入眠困难的同时又易中途醒来的睡眠问题有显著作用。

表1：平行对照组随机双盲试用结果

试验验证5：受试者试用效果统计

以20例入眠困难且觉醒后难以入眠的患者（年龄22-70岁）为研究对象，按照平行对照组随机双盲研究方法，研究脉冲释放褪黑素制剂对促进入眠和改善觉醒后再入眠的作用。用安慰剂组试用一周确定基线特征，然后分普通褪黑素制剂组（5 mg褪黑素 Natrol普通片x2）和试验组（含褪黑素10 mg的本发明实施例1两相脉冲褪黑素制剂）试验2周。在试用第2天开始，询问受试者前一晚的睡眠情况，持续2周。结果如表2。

表2：平行对照组随机双盲试用结果

试验验证5：受试者试用效果统计

以20例入眠困难且觉醒后难以入眠的患者（年龄22-70岁）为研究对象，按照平行对照组随机双盲研究方法，研究脉冲释放褪黑素制剂对促进入眠和改善觉醒后再入眠的作用。用安慰剂组试用一周确定基线特征，然后分褪黑素缓释制剂组（10 mg褪黑素 TRNatrol缓释片）和试验组（含褪黑素10 mg的本发明实施例1两相脉冲褪黑素制剂）试验2周。在试用第2天开始，询问受试者前一晚的睡眠情况，持续2周。结果如表3。

表3：平行对照组随机双盲试用结果

试验验证6：受试者试用效果统计

以20例入眠困难且觉醒后难以入眠的患者（年龄22-70岁）为研究对象，按照平行对照组随机双盲研究方法，研究脉冲释放褪黑素制剂对促进入眠和改善觉醒后再入眠的作用。用安慰剂组试用一周确定基线特征，然后分褪黑素缓释制剂组（10 mg褪黑素 TRNatrol缓释片）和试验组（含褪黑素10 mg的本发明实施例3三相脉冲褪黑素制剂）试验2周。在试用第2天开始，询问受试者前一晚的睡眠情况，持续2周。结果如表4。

表4：平行对照组随机双盲试用结果

试验验证7：受试者试用效果统计

以20例入眠困难且觉醒后难以入眠的患者（年龄22-70岁）为研究对象，按照平行对照组随机双盲研究方法，研究本发明的组合物对促进入眠和改善觉醒后再入眠的作用。用安慰剂组试用一周确定基线特征，然后分普通褪黑素制剂组（5 mg褪黑素 Natrol普通片）和试验组（5 mg褪黑素与香芹提取物组成的顿释制剂）试验2周。在试用第2天开始，询问受试者前一晚的睡眠情况，持续2周。结果如表5。

表5：平行对照组随机双盲试用结果

试验验证8：受试者试用效果统计

以20例入眠困难且觉醒后难以入眠的患者（年龄22-70岁）为研究对象，按照平行对照组随机双盲研究方法，研究本发明的组合物对促进入眠和改善觉醒后再入眠的作用。用安慰剂组试用一周确定基线特征，然后分试验组1（5 mg褪黑素与香芹提取物组成的顿释制剂）和试验组2（5 mg褪黑素与夜交藤提取物组成的顿释制剂）试验2周。在试用第2天开始，询问受试者前一晚的睡眠情况，持续2周。结果如表6。

表6：平行对照组随机双盲试用结果

试验验证9受试者试用效果统计

以20例入眠困难且觉醒后难以入眠的患者（年龄22-70岁）为研究对象，按照平行对照组随机双盲研究方法，研究本发明的组合物对促进入眠和改善觉醒后再入眠的作用。用安慰剂组试用一周确定基线特征，然后分本发明试验组（5 mg褪黑素与香芹提取物组成的顿释制剂）和百合枣仁胶囊试验组（5 mg睿康牌百合枣仁胶囊）试验2周。在试用第2天开始，询问受试者前一晚的睡眠情况，持续2周。结果如表7。

表7：平行对照组随机双盲试用结果

从实验验证4至实验验证9可以看出，本发明的抗失眠组合物比现在市场上常用的褪黑素制剂在抗失眠效果上更佳，由本发明的抗失眠组合物制成的脉冲制剂对改善入眠困难的同时又易中途醒来的睡眠问题有显著作用，且比一般的褪黑素缓释制剂效果更好。申请人认为，褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5-羟基色胺2C、受体拮抗剂、5-HTP这些组分与香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物进行组合使用，比单独使用效果要好很多，二者的抗失眠功能能够协同有效。

这里列出的实验数据仅为一部分数据，完全列出的话应当还有褪黑素、褪黑素类似物和对应的盐、褪黑素受体激动剂、5-羟基色胺2C、受体拮抗剂、5-HTP中的一种或几种与香芹提取物、香蜂草提取物、夜交藤提取物、洋甘菊提取物、西番莲提取物、白芍提取物、刺五加提取物、远志提取物、贯叶连翘提取物、合欢花提取物、百合提取物、夏枯草提取物中的一种或几种进行分别组合的实验表格，在此不一一列出，通过这些表格得出的结论是本发明抗失眠组合物，尤其是该组合物制备的多相脉冲顿释制剂在抗失眠的功能上确实优于单纯的褪黑素药物，且在这些众多的组合之中，效果最为明显的是褪黑素与香芹提取物的组合。

本发明的最佳实施例已阐明，由本领域普通技术人员做出的各种变化或改型都不会脱离本发明的范围。

Claims (1)

1.一种使用抗失眠组合物的三相脉冲顿释制剂，其特征是：

该三相脉冲顿释制剂为微丸片；

所述微丸片是由以下方法制备而成：取褪黑素固体分散体15g、第二相脉冲顿释微丸42.3g、第三相脉冲顿释微丸26.3g、微晶纤维素155.5g、乳糖80g、交联羧甲基纤维素钠17g、微粉硅胶2g、硬脂酸富马酸钠2g，混合均匀，压制成1000片；

所述褪黑素固体分散体是由以下方法制备而成的：称取褪黑素200g、HPC ELF 400g，混合均匀，设置挤出温度为150℃，预热平衡后，加入混粉，以60rpm螺杆速度挤出成条状物，室温放置3小时，粉碎，过80目筛即得褪黑素与HPC的固体分散体；

所述第二相脉冲顿释微丸是由以下方法制备而成的：取褪黑素与香芹提取物制备的顿释微丸500g，以EC和柠檬酸三乙酯重量比42:1溶解于适量水中，采用流化床包衣，包衣增重至50％，干燥，再以Eudragit L30D-55及适宜的增塑剂、抗粘剂采用流化床包一层肠溶衣，包衣增重10％，干燥即得第二相脉冲顿释微丸；

所述褪黑素与香芹提取物制备的顿释微丸是由以下方法制备而成的：取所述褪黑素固体分散体300g、香芹提取物100g、微晶纤维素400g、HPMC E5 20g、交联聚维酮30g，混合均匀，加适量水制成软材，使用0.4毫米挤出孔板的挤出滚圆制丸机将软材挤出滚圆制备微丸，将微丸干燥、过筛收集35-60目微丸，即得褪黑素与香芹提取物的顿释微丸；

所述香芹提取物是由以下方法制备而成的：取香芹500g，粉碎过20目筛，置于超临界二氧化碳萃取仪中，萃取溶剂为体积比为95:5的二氧化碳和乙醇，选择萃取温度40℃和萃取压力180bar作为提取条件，萃取即得香芹提取物；

所述第三相脉冲顿释微丸是由以下方法制备而成的：取褪黑素与贯叶连翘提取物制备的顿释微丸500g，以巴西棕榈蜡和蜂蜡和十二烷基硫酸钠重量比为1:4:0.1为包衣材料，采用流化床包衣，包衣增重至45％，干燥，再采用流化床包上一层5％增重的壳聚糖，干燥即得第三相脉冲顿释微丸；

所述褪黑素与贯叶连翘提取物制备的顿释微丸是由以下方法制备而成的：取HPMC E560g，溶于1940g水中，将褪黑素100g、贯叶连翘提取物200g加入HPMC溶液中，搅拌分散均匀得混悬液，采用流化床以底喷方式将混悬液包在500g蔗糖空白糖丸上，干燥即得褪黑素与贯叶连翘提取物的顿释微丸；

所述贯叶连翘提取物是由以下方法制备而成的：取贯叶连翘全草100g，粉碎过20目筛，加乙醇500ml浸泡24小时，采用减压回流提取1小时，过滤得提取液，将提取液减压回收溶剂至无醇味，过滤得滤液，将滤液上大孔吸附树脂柱，用7-8倍柱体积90％乙醇洗脱，洗脱液减压干燥即得。