CN103548740A

CN103548740A - 一种生产全雌泥鳅的方法

Info

Publication number: CN103548740A
Application number: CN201310546649.9A
Authority: CN
Inventors: 刘汉勤; 徐江; 侯昌春; 陈丽慧
Original assignee: WUHAN BAIRUI BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: WUHAN BAIRUI BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2013-11-07
Filing date: 2013-11-07
Publication date: 2014-02-05

Abstract

本发明公开一种生产全雌泥鳅的方法，包括如下步骤：1）人工催产和人工授精；2）性逆转：鱼苗用雄性激素溶液浸泡过的卤虫幼体作饵料，鱼苗中大部分XX♀雌鱼性逆转成为XX♂生理雄鱼，XY♂雄鱼不变，饲养至可区分雌雄时剔除XX♀雌鱼；3）测交：将XX♂生理雄鱼、XY♂雄鱼饲养至性成熟，然后分别与XX♀雌鱼交配，将子代为100%XX♀雌鱼的父本，即XX♂生理雄鱼保留；4）扩群：XX♂生理雄鱼与XX♀雌鱼交配产生100%XX♀雌鱼苗，取一部分雌鱼苗按步骤2）性逆转成为XX♂生理雄鱼；5）种群的建立：XX♀雌鱼和XX♂生理雄鱼交配生产100％XX♀雌鱼，重复步骤4）和5），可规模化持续生产全雌泥鳅。

Description

一种生产全雌泥鳅的方法

技术领域

本发明涉及鱼类的人工性别控制技术，属于一种鱼类生理遗传繁殖的方法，是以人工性逆转、测交筛选、扩群等技术控制单性鱼类繁育的技术领域，具体涉及一种生产全雌泥鳅的方法。

背景技术

泥鳅是淡水养殖的重要鱼类。在相同的养殖条件下，雌性泥鳅比同胞雄鱼的生长快、增重量大。养殖全雌泥鳅将显著提高养殖产量和经济效益。

生产单性雌鱼有几种方法可供选择：如人工选择、雌性激素直接诱导性逆转、雌核发育和性别特异的DNA探针技术等。人工选择方法因劳动强度大，而且不能准确区分雌雄鱼，不适合单性雌鱼的规模化生产。雌性激素直接诱导性逆转方法可以规模化使雄性鱼性逆转成为雌性鱼，但这种方法不能达到全雌的目的，且有性激素残留的危险，不利于安全生产，早已被许多国家禁用。目前，利用雌核发育产生全雌鱼的方法已经应用于养殖生产，但这种方法最大的困难是二倍体出现频率低，仔幼鱼阶段成活率低，个体差异大，能达到性成熟的个体不多。再者，在雌核发育产生的子代中也可能出现雄性鱼。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种生产全雌泥鳅的方法。

本发明提供的生产全雌泥鳅的方法，包括如下步骤：

1）人工催产和人工授精：挑选体表无伤、性腺发育良好的泥鳅雌鱼和雄鱼，进行人工催产、授精，把受精卵置于生化培养箱中恒温孵育成雄性和雌性鱼苗；

2）性逆转：待卵黄吸收后，鱼苗用雄性激素溶液浸泡过的卤虫幼体作为开口饵料，连续投喂40-60天，经雄性激素处理后存活的鱼苗中大部分XX♀雌鱼性逆转成为XX♂生理雄鱼，XY♂雄鱼不变，然后将用雄性激素溶液浸泡过渡的卤虫幼体喂养过的所有幼鱼转移至水泥池之后，饲料中不再拌合雄性激素，转为正常饲养至可按胸鳍形状区分雌雄时剔除XX♀雌鱼，保存XX♂生理雄鱼、XY♂雄鱼备用；

3）测交：将XX♂生理雄鱼、XY♂雄鱼饲养至性成熟，然后分别与XX♀雌鱼交配，将子代为100% XX♀雌鱼的父本，即XX♂生理雄鱼保留；

4）扩群：取步骤3）中已被确认的XX♂生理雄鱼与XX♀雌鱼交配产生100% XX♀雌鱼苗，在鱼苗开口时，取一部分按步骤2）用雄性激素诱导性逆转成为XX♂生理雄鱼；

5）全雌泥鳅繁育种群的建立：取步骤4）得到的XX♀雌鱼和XX♂生理雄鱼交配，可持续生产100％XX♀雌鱼，重复步骤4）和步骤5），建立全雌泥鳅繁育种群，即可规模化持续生产全雌泥鳅。

作为优选技术方案，步骤1）中人工催产、受精的步骤为：用地欧酮和鱼用促黄体释放激素类似物2号一次注射，剂量为雌鱼：地欧酮5mg + 鱼用促黄体释放激素类似物2号5ug/kg，雄鱼减半，当亲鳅发情剧烈时，将亲鳅捕起，用手轻轻挤压雌雄鳅腹部，挤出卵子和精子，取卵子与精子混合进行干法人工受精。

作为优选技术方案，步骤1）中受精卵置于27℃的生化培养箱中恒温孵育成雄性和雌性鱼苗。

优选地，步骤2）所述雄性激素为甲基睾丸酮。

作为优选技术方案，步骤2）中卤虫幼体先在200～400 IU的甲基睾丸酮中浸泡1小时，再抽滤取出富集雄性激素的卤虫幼体投喂已开口4天的人工繁殖泥鳅鱼苗，每天上午、下午和晚上各投喂一次，投喂量以30分钟内吃完为准，连续投喂40-60天。

本发明具有以下有益效果：

1. 因省略了雌核发育步骤，可以降低人工诱导雌核发育对受精卵遗传物质的损伤，提高了XX♀雌鱼的获得率。

2. 有明显的经济和社会效益：由于采用了XX♀雌鱼和XX♂生理雄鱼交配法，可以迅速获得100％XX♀雌鱼，产品可规模化生产，进行全雌泥鳅养殖，可提高产量和商品质量。

附图说明

图1为本发明建立全雌泥鳅繁育种群的方法技术原理图。

图2为本发明的生产全雌泥鳅的方法步骤流程方框图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。

附图1示出了建立全雌泥鳅繁育种群的方法技术原理图，附图2示出了建立规模化生产全雌泥鳅的方法步骤流程方框图，结合附图1和2，具体论述本发明的生产全雌泥鳅的方法具体如下：

步骤1、人工催产与人工授精：根据实验或工业化生产的需要，取若干数量成熟的泥鳅亲本，按常规方法进行人工催产。用地欧酮（DOM）和鱼用促黄体释放激素类似物2号（LRH-A2）一次注射，剂量为雌鱼(DOM 5mg+ LRH-A2 5ug)/kg，雄鱼减半。当亲鳅发情剧烈时，将亲鳅捕起，用手轻轻挤压雌雄鳅腹部，挤出卵子和精子。根据需要取一定量的卵子与精子混合进行干法人工受精，受精卵在27℃生化培养箱中恒温孵育至鱼苗全部出膜，得到的雄性和雌性鱼苗，即为F0。待卵黄吸收后，鱼苗用卤虫幼体作为开口饵料。

步骤2、性逆转：将普通XX♀雌鱼泥鳅性逆转成XX♂生理雄鱼，以卤虫幼体作为雄激素载体，将其先在200～400 IU的甲基睾丸酮（MT；sigma）溶液中浸泡1小时，再抽滤取出富集雄激素的卤虫幼体投喂已开口4天的人工繁殖泥鳅鱼苗，每天上午、下午和晚上各投喂一次，投喂量以30分钟内吃完为准，连续投喂40-60天，实验证明鱼苗存活率为60%以上，性逆转率达95%以上，由于泥鳅是雄性配子异型的鱼类，其性别体制是XX♀雌鱼/ XY♂雄鱼，雌雄鱼的比例近似为1:1。所以，经性激素处理后成活的鱼苗中，约有50%是XX♀雌鱼性逆转成XX♂生理雄鱼，将经激素性逆转后的幼鱼（包括XX♂生理雄鱼、XY♂雄鱼和XX♀雌鱼）一并转移至水泥池中，养至可按胸鳍形状区分雌雄时（雌鱼胸鳍短而圆，雄鱼胸鳍长而尖），剔除XX♀雌鱼泥鳅，保存雄性泥鳅（XX♂生理雄鱼和XY♂雄鱼）备用。

步骤3、性逆转鱼的测交筛选：将XX♂生理雄鱼、XY♂雄性泥鳅饲养至性成熟，然后分别与普通XX♀雌鱼交配，将子代为100% XX♀雌鱼的父本，即XX♂生理雄性泥鳅保留备用。

步骤4、扩群：取步骤3中已被确认的XX♂生理雄鱼与普通的XX♀雌鱼交配，产生100%XX♀雌鱼（即F1），当鱼苗开口4天时，取一部分XX♀雌鱼鱼苗按步骤2，用MT诱导性逆转成为XX♂生理雄鱼。

步骤5、全雌泥鳅繁育种群的建立：取步骤4中XX♀雌鱼和XX♂生理雄鱼交配，可持续生产XX♀雌鱼（即F2），重复步骤4和步骤5，建立全雌泥鳅繁育种群，可规模化生产全雌泥鳅。

至此，即形成了全雌泥鳅的持续规模化生产过程以及它们的繁育体系。

以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。

Claims

1.一种生产全雌泥鳅的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的生产全雌泥鳅的方法，其特征在于，步骤1）中人工催产、受精的步骤为：用地欧酮和鱼用促黄体释放激素类似物2号一次注射，剂量为雌鱼：地欧酮5mg + 鱼用促黄体释放激素类似物2号5ug/kg，雄鱼减半，当亲鳅发情剧烈时，将亲鳅捕起，用手轻轻挤压雌雄鳅腹部，挤出卵子和精子，取卵子与精子混合进行干法人工受精。

3.根据权利要求1所述的生产全雌泥鳅的方法，其特征在于，步骤1）中受精卵置于27℃的生化培养箱中恒温孵育成雄性和雌性鱼苗。

4.根据权利要求1所述的生产全雌泥鳅的方法，其特征在于，步骤2）所述雄性激素为甲基睾丸酮。

5.根据权利要求1所述的生产全雌泥鳅的方法，其特征在于，步骤2）中卤虫幼体先在200～400 IU的甲基睾丸酮中浸泡1小时，再抽滤取出富集雄性激素的卤虫幼体投喂已开口4天的人工繁殖泥鳅鱼苗，每天上午、下午和晚上各投喂一次，投喂量以30分钟内吃完为准，连续投喂40-60天。