CN103540629B - 一种微生物Asp-1发酵法提取黄芪多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于黄芪多糖提取技术领域，特别公开了一种微生物Asp-1发酵法提取黄芪多糖的方法。以干黄芪和黄曲霉（Aspergillus niger)Asp-1为原料，首先将干黄芪粉碎后加水常温浸泡，黄芪：水的重量比=（0.9-1）:10；随后在黄芪的浸泡液中按照浸泡液加入0.5-1.5v% 含水量75-85wt%的Asp-1水悬液，同时按照黄芪加入0.01-0.02 wt %的亚硫酸钾作为防腐剂，并调节溶液pH值4-6，常温厌氧发酵，用苯酚硫酸法检测发酵液中黄芪多糖的含量，直至发酵液中黄芪多糖含量为3.5-4.5wt%时发酵结束；最后经提取、纯化、干燥即可。本发明发酵法提取黄芪多糖，不仅可以增加产物中黄芪多糖的含量，而且还能改善提取物口感。
Description
技术领域
本发明属于黄芪多糖提取技术领域，特别涉及一种微生物Asp-1发酵法提取黄芪多糖的方法。
背景技术
黄芪多糖是中药黄芪的有效成分，由α-糖苷键连接而成的分子量为37500左右的植物多糖，水解后可检出葡萄糖、丰乳糖和阿拉伯糖，三种糖的分子比为：1:0.95:0.70。黄芪多糖是一种有效免疫增强剂，并能诱导机体益生菌增殖，促进机体微生态平衡。研究报道表明黄芪多糖还具有增强细胞新陈代谢、促进血液循环、抗病毒、抗肿瘤、抗应激等保健功能，现在已经被广大养殖户所接受，应用于功能性饲料或者直接服用。
目前市场上的黄芪多糖均由常规的提取方法而来，大概有以下几种，包括水提醇沉法、超微粉碎法、超声波细胞粉碎法、超滤法、微波提取法、纤维素酶法、碱水提取法、醇碱提取法。水提醇沉法是目前最常用的提取方法，黄芪多糖的提取率平均为5.34%，其余的方法黄芪多糖提取率与其相比相差不多（超微粉黄芪多糖提取率4-5%之间，超声细胞粉碎法黄芪多糖提取率为7.6%左右，微波法黄芪多糖提取率6.5%左右，超滤法提取黄芪多糖提取收率低于水提醇沉法但产物多糖含量高，碱水提取法黄芪多糖提取率4.5-19%之间，但提取产物的收率稳定性较差），提取率不甚理想。
发明内容
为克服现有提取技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种微生物Asp-1发酵法提取黄芪多糖的方法，该法可以显著提高黄芪多糖的提取率和含量。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：
一种微生物Asp-1发酵法提取黄芪多糖的方法：以干黄芪和黄曲霉（Aspergillus niger)Asp-1为原料，首先将干黄芪粉碎后加水常温浸泡，黄芪：水的重量比=（0.9-1）:10；随后在黄芪的浸泡液中按照浸泡液加入0.5-1.5v% 含水量75-85wt%的Asp-1水悬液，同时按照黄芪加入0.01-0.02 wt %的亚硫酸钾作为防腐剂，并调节溶液pH值4-6，常温厌氧发酵，用苯酚硫酸法检测发酵液中黄芪多糖的含量，直至发酵液中黄芪多糖含量为3.5-4.5wt%时发酵结束；最后经提取、纯化、干燥即可；其中，所述黄曲霉（Aspergillus niger)Asp-1购自中国普通微生物菌种保藏管理中心提供，菌种编号为3.03928。
所述提取过程为过滤，所述纯化过程为醇沉。
本发明中：常温指25-35℃，v%代表体积百分数，wt%代表重量百分数。
本发明改变传统的黄芪多糖提取工艺，利用一种微生物Asp-1，在特定的条件下对中药黄芪进行发酵处理，再通过提取、纯化获得黄芪多糖，是一种既能提高黄芪多糖的保健功能质量，又能降低生产成本，而且还是节能环保的生产方式。本发明发酵法提取黄芪多糖，不仅可以增加产物中黄芪多糖的含量，而且还能改善提取物口感。
具体实施方式
实施例
一种微生物Asp-1发酵法提取黄芪多糖的方法，所述具体提取步骤为：
a、原料的选择：选用干黄芪和黄曲霉（Aspergillus niger)Asp-1（中国普通微生物菌种保藏管理中心提供，菌种编号为3.03928Asp-1）；
b、粉碎：将干黄芪用破碎机进行粉碎，粉碎粒度为40目；
c、浸泡：按黄芪与水的重量比为1：10的比例，将黄芪加入到30℃左右的水中浸泡1-3天；
d、厌氧发酵：在黄芪的浸泡液中按照浸泡液体积的比例，加入1v%含水量为80wt%的Asp-1种子水悬液，同时按照黄芪重量加入0.01wt%的亚硫酸钾作为防腐剂，并调节溶液pH值4-6，25℃进行厌氧发酵，检测发酵黄芪多糖的含量，发酵液中的多糖含量为4wt%时发酵结束；
e、过滤：将发酵物通过卧式螺旋分离机，将中药残渣与发酵液分离，再将滤液通过管式分离机，将菌类和其它细小杂质过滤；
f、醇沉：将滤液储存在醇沉罐中，加入等体积的95v%乙醇，搅拌10min后静止1h，用离心机5000rpm/min离心醇沉液，过滤，收取沉淀；
g、干燥：将醇沉后的沉淀通过干燥器进行干燥，获得的棕色粉末即为提取物。黄芪多糖提取率稳定在20.32±4.77%，提取产物中黄芪多糖含量为42.95±4.33%。
Claims (2)
1.一种微生物Asp-1发酵法提取黄芪多糖的方法，其特征在于：以干黄芪和黄曲霉（Aspergillus niger)Asp-1为原料，首先将干黄芪粉碎后加水常温浸泡，黄芪：水的重量比=（0.9-1）:10；随后在黄芪的浸泡液中按照浸泡液加入0.5-1.5v% 含水量75-85wt%的Asp-1水悬液，同时按照黄芪加入0.01-0.02 wt %的亚硫酸钾作为防腐剂，并调节溶液pH值4-6，常温厌氧发酵，用苯酚硫酸法检测发酵液中黄芪多糖的含量，直至发酵液中黄芪多糖含量为3.5-4.5wt%时发酵结束；最后经提取、纯化、干燥即可；其中，所述黄曲霉（Aspergillus niger)Asp-1购自中国普通微生物菌种保藏管理中心提供，菌种编号为3.03928。
2.如权利要求1所述的微生物Asp-1发酵法提取黄芪多糖的方法，其特征在于：所述提取过程为过滤，所述纯化过程为醇沉。
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