CN103524638B - 一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法 - Google Patents
一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103524638B CN103524638B CN201310483502.XA CN201310483502A CN103524638B CN 103524638 B CN103524638 B CN 103524638B CN 201310483502 A CN201310483502 A CN 201310483502A CN 103524638 B CN103524638 B CN 103524638B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- yeast glucan
- glucan
- soluble
- yeast
- ball
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法，将粉末状酵母葡聚糖与磨球按1:5~20的质量比混合好后，采用行星式球磨在功率900~1200W的条件下处理5~30min，所得酵母葡聚糖与水按1:10~25的质量比混合以溶解酵母葡聚糖，离心除去不溶物，得到酵母葡聚糖溶解液。本发明方法具有简单、快速、高效、清洁的特点，所制酵母葡聚糖具有较好的水溶解性及优良的免疫活性。
Description
技术领域
本发明涉及酵母葡聚糖技术领域，尤其涉及一种提高酵母葡聚糖溶解度，制备可溶性酵母葡聚糖的方法。
背景技术
酵母β-D-葡聚糖（简称酵母β-葡聚糖或酵母葡聚糖）是一种良好的免疫应答剂（非特异性免疫增强剂），具有增强免疫力、抗肿瘤、抗氧化、促进伤口愈合、抗辐射等生理功效，但是由于其特殊的化学结构，不溶于水，仅微溶于二甲桠枫，这严重制约了酵母葡聚糖在工业上的应用。
为了提高酵母葡聚糖的溶解度，国内外学者对其进行了修饰和改性研究，包括化学修饰法和物理方法。化学修饰法主要是通过在酵母葡聚糖上连接亲水性基团来增加其溶解度，例如磷酸化、羧甲基化、硫酸酯化修饰，但这类反应通常都要在有机溶剂体系以及强酸、强碱中进行，不仅成本高、污染严重，还可能造成安全隐患；物理方法主要是超声解聚和氧化降解法，通过降低酵母葡聚糖的分子量来增加其溶解度，但超声解聚只能降低其分子量至一个极限恒定值，而氧化降解则会在葡聚糖中引入氧化剂等杂质。
发明内容
针对现有提高酵母葡聚糖溶解度的方法存在的上述缺陷，本申请人提供了一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法。本发明制备得到的酵母葡聚糖具有较好的水溶解性及优良的免疫活性，本发明方法具有简单、快速、高效、清洁的特点。
本发明的技术方案如下：
一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法，采用机械化学方法，于固相体系对酵母葡聚糖进行改性处理。
具体步骤如下：
（1）将粉末状酵母葡聚糖与磨球按1:5~20的质量比混合好后，采用行星式球磨在功率900~1200W的条件下处理5~30min，球罐外通自来水循环制冷；
（2）将步骤（1）处理所得酵母葡聚糖与水按1:10~25的质量比混合以溶解酵母葡聚糖，离心除去不溶物，得到酵母葡聚糖溶解液。
其进一步的技术方案为：
将步骤（2）所得酵母葡聚糖溶解液进行浓缩，可得酵母葡聚糖浓缩液；将步骤（2）所得酵母葡聚糖溶解液进行喷雾干燥或冷冻干燥，可得酵母葡聚糖干粉。
步骤（1）所述磨球规格为直径3~10mm的钢球或陶瓷球。
发明的有益技术效果如下：
申请人创造性地将机械化学方法（优选行星式球磨处理）应用于酵母葡聚糖的改性，于固相体系中通过摩擦、碰撞、冲击、剪切等机械力作用，将磨球作用于酵母葡聚糖的机械能高效转化成葡聚糖固体粉末的内能，改进其晶体结构和理化性质，结果发现，在一定处理工艺参数下，酵母葡聚糖的溶解性将得以显著提升，可达到快速、有效的增溶效果，制备得到的可溶性酵母葡聚糖具有优良的免疫活性（实验证明其可有效促进巨噬细胞分泌NO、肿瘤坏死因子TNF-α、白介素IL-6等），整个过程无需使用有机溶剂和强酸、强碱溶剂，只需常温反应和较低的能量消耗，可实现清洁生产，因此有望广泛应用于食品、保健品、医药、饲料等行业，提升酵母葡聚糖作为生物免疫调节剂的应用价值。
具体实施方式
以下通过实施例来进一步阐释本发明，下列实施例用于说明目的而非用于限制本发明范围。
以下实施例所用酵母葡聚糖粉末为上海杰康诺生物科技有限公司生产的酵母β-葡聚糖GNP-80，行星式球磨为嘉兴中俄科技转化中心生产的XXM型行星磨。
实施例1 机械化学法制备可溶性酵母葡聚糖方案1
将酵母葡聚糖粉末与磨球（直径3mm的钢球）按1:20的质量比混合均匀，采用行星式球磨对其进行机械化学处理，功率为900W，处理时间30min，球罐外通自来水循环制冷；将处理后的酵母葡聚糖以1:25的质量比溶于水，使用离心机在4000rpm转速下离心20min，得到酵母葡聚糖溶解液，其中54%的酵母葡聚糖溶于水，46%的酵母葡聚糖不溶于水。
实施例2 机械化学法制备可溶性酵母葡聚糖方案2
将酵母葡聚糖粉末与磨球（直径6mm的陶瓷球）按1:12的质量比混合均匀，采用行星式球磨对其进行机械化学处理，功率为900W，处理时间15min，球罐外通自来水循环制冷；将处理后的酵母葡聚糖以1:20的质量比溶于水，使用离心机在4000rpm转速下离心20min，得到酵母葡聚糖溶解液，其中34%的酵母葡聚糖溶于水，66%的酵母葡聚糖不溶于水；将该溶解液用水定容后，得到浓度为8.8g/L的可溶性酵母葡聚糖。
实施例3 机械化学法制备可溶性酵母葡聚糖方案3
将酵母葡聚糖粉末与磨球（直径10mm的陶瓷球）按1:5的质量比混合均匀，采用行星式球磨对其进行机械化学处理，功率为1200W，处理时间5min，球罐外通自来水循环制冷；将处理后的酵母葡聚糖以1:10的质量比溶于水，使用离心机在4000rpm转速下离心20min，得到酵母葡聚糖溶解液，其中29%的酵母葡聚糖溶于水，71%的酵母葡聚糖不溶于水；将该溶解液用水定容后，得到浓度为6.0g/L的可溶性酵母葡聚糖。
可溶性酵母葡聚糖免疫活性检测
将实施例2制备得到的可溶性酵母葡聚糖经0.22 μm滤膜过滤除菌，再稀释至浓度50 mg/L后，刺激小鼠巨噬细胞RAW 264.7，测定细胞产生的NO、TNF-α和IL-6的含量。具体操作方法如下：
小鼠巨噬细胞RAW 264.7分泌NO和TNF-α含量的检测：（1）细胞培养：将5×105个/mL小鼠RAW 264.7细胞悬浮液加至96孔板中，每孔加180 μL，同时加入20 μL葡聚糖样品液（浓度50 mg/L），以20 μL PBS缓冲液和20 μL 1 mg/L的脂多糖（LPS）溶液分别作阴、阳性对照；于37 ℃、5%CO2条件下培养24 h。（2）NO含量的测定：取上述细胞培养液50 μL加入96孔板中，然后加入50 μL Griess试剂（1%磺胺：0.1%N-1-萘基乙二胺盐酸盐=1:1），室温下反应10 min，测定540nm的吸光值；利用标样亚硝酸钠制备标准曲线，利用标准曲线计算实验组产生的NO含量。（3）TNF-α含量的测定：将上述细胞培养液稀释100倍后，利用eBioscience公司生产的TNF-α检测用ELISA试剂盒检测其中的TNF-α含量，利用TNF-α标样绘制标准曲线，根据标准曲线计算实验组产生的TNF-α含量。（4）L-6含量的测定：将上述细胞培养液稀释50倍后，利用eBioscience公司生产的IL-6检测用ELISA试剂盒检测其中的IL-6含量，利用IL-6标样绘制标准曲线，根据标准曲线计算实验组产生的IL-6含量。
结果显示，用浓度为50 mg/L的酵母葡聚糖刺激RAW 264.7细胞后，RAW 264.7细胞产生的NO含量提高了4.7倍，说明本发明可溶性酵母葡聚糖能够有效地促进小鼠RAW 264.7细胞分泌NO；TNF-α含量提高了11倍，IL-6含量提高了3.6倍，说明可溶性酵母葡聚糖能够高效地促进小鼠RAW 264.7细胞分泌细胞因子TNF-α和IL-6。证明本发明制备的可溶性酵母葡聚糖具有优良的免疫活性。
Claims (3)
1.一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法，其特征在于：采用机械化学方法，于固相体系对酵母葡聚糖进行改性处理；
具体步骤如下：
（1）将粉末状酵母葡聚糖与磨球按1:5~20的质量比混合好后，采用行星式球磨在功率900~1200W的条件下处理5~30min，球罐外通自来水循环制冷；
（2）将步骤（1）处理所得酵母葡聚糖与水按1:10~25的质量比混合以溶解酵母葡聚糖，离心除去不溶物，得到酵母葡聚糖溶解液。
2.根据权利要求1所述制备可溶性酵母葡聚糖的方法，其特征在于：将步骤（2）所得酵母葡聚糖溶解液进行浓缩，可得酵母葡聚糖浓缩液；将步骤（2）所得酵母葡聚糖溶解液进行喷雾干燥或冷冻干燥，可得酵母葡聚糖干粉。
3.根据权利要求1所述制备可溶性酵母葡聚糖的方法，其特征在于：步骤（1）所述磨球规格为直径3~10mm的钢球或陶瓷球。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310483502.XA CN103524638B (zh) | 2013-10-16 | 2013-10-16 | 一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310483502.XA CN103524638B (zh) | 2013-10-16 | 2013-10-16 | 一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103524638A CN103524638A (zh) | 2014-01-22 |
| CN103524638B true CN103524638B (zh) | 2015-09-09 |
Family
ID=49927026
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310483502.XA Active CN103524638B (zh) | 2013-10-16 | 2013-10-16 | 一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103524638B (zh) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104017104B (zh) * | 2014-05-20 | 2016-05-25 | 江南大学 | 一种可溶性、高取代度磷酸化酵母葡聚糖的制备方法 |
| CN106243239B (zh) * | 2016-07-29 | 2018-11-27 | 山东大学齐鲁医院 | 一种用于提高肝炎患者免疫力的可溶性小分子β-1,3-葡聚糖 |
| CN106947002A (zh) * | 2016-09-13 | 2017-07-14 | 广西科开成林科技有限公司 | 一种机械活化制备微分子右旋糖酐的方法 |
| CN106317247B (zh) * | 2016-10-21 | 2018-12-21 | 扬州大学 | 一种水溶性银杏外种皮多糖及其制剂的制备方法 |
| CN107319482A (zh) * | 2017-07-31 | 2017-11-07 | 无锡甜丰食品有限公司 | 一种具膳食营养保健功能的葡萄糖浆甜味剂 |
| CN110105466A (zh) * | 2019-03-21 | 2019-08-09 | 浙江九如堂生物科技有限公司 | 基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102257011A (zh) * | 2008-12-18 | 2011-11-23 | 格莱科斯芬兰公司 | 通过酵母细胞的碱水解和酸水解生产包含葡聚糖和甘露聚糖的糖类组合物 |
| CN102838688A (zh) * | 2012-09-12 | 2012-12-26 | 江南大学 | 一种可溶性酵母葡聚糖的制备方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2953217B1 (fr) * | 2009-11-27 | 2012-10-05 | Ifremer | Procede de depolymerisation de polysaccharides par broyage mecanique |
-
2013
- 2013-10-16 CN CN201310483502.XA patent/CN103524638B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102257011A (zh) * | 2008-12-18 | 2011-11-23 | 格莱科斯芬兰公司 | 通过酵母细胞的碱水解和酸水解生产包含葡聚糖和甘露聚糖的糖类组合物 |
| CN102838688A (zh) * | 2012-09-12 | 2012-12-26 | 江南大学 | 一种可溶性酵母葡聚糖的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| "Optimised methodology for carboxymethylation of (1→3)-β-D-glucan from Yeast(Saccharomyces cerevisiae) and promotion of mechanical activation";Junzhou Ding等;《International Journal of Food Science and Technology》;20120911;第48卷;第255,257-258页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103524638A (zh) | 2014-01-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103524638B (zh) | 一种制备可溶性酵母葡聚糖的方法 | |
| CN103265645B (zh) | 一种超声波辅助提取海藻多糖的装置及方法 | |
| CN102218541A (zh) | 一种水溶性纳米银的新型大规模制备方法 | |
| RU2012145123A (ru) | Противоаллергическое средство | |
| JP7220670B2 (ja) | オゾンを用いた多糖類の分解方法 | |
| WO2022073438A1 (zh) | 一种高负载藻蓝蛋白的纳米颗粒及其制备方法与应用 | |
| Shi et al. | Mechanochemical phosphorylation and solubilisation of β-D-glucan from yeast Saccharomyces cerevisiae and its biological activities | |
| CN104492391B (zh) | 一种壳聚糖修饰的白蛋白纳米球重金属吸附材料的制备方法 | |
| CN104418971A (zh) | 葡萄糖氧化酶介导自由基引发体系及其制备水凝胶的方法 | |
| CN104277129A (zh) | 一种灰树花多糖提取方法 | |
| CN204717191U (zh) | 一种生物制药用管道快接卡箍 | |
| CN104017104B (zh) | 一种可溶性、高取代度磷酸化酵母葡聚糖的制备方法 | |
| Sato et al. | Inhibitory effects of water-soluble low-molecular-weight β-(1, 3-1, 6) D-glucan isolated from Aureobasidium pullulans 1A1 strain black yeast on mast cell degranulation and passive cutaneous anaphylaxis | |
| Yao et al. | A novel biotransformation of astragalosides to astragaloside IV with the deacetylation of fungal endophyte Penicillium canescens | |
| de Melo et al. | β-(1→ 3)-glucan of the southern bracket mushroom, Ganoderma australe (Agaricomycetes), stimulates phagocytosis and interleukin-6 production in mouse peritoneal macrophages | |
| CN104445459B (zh) | 一种高效纳米净水剂及其制备方法 | |
| CN110699405B (zh) | 一种固定化聚半乳糖醛酸酶制备具有抑菌性的芒果皮果胶低聚糖的方法 | |
| CN110623999B (zh) | 一种含抗炎活性成分的组合物的环保制备方法和应用 | |
| CN202921158U (zh) | 一种青霉素生产中的废气处理装置 | |
| CN102512425A (zh) | 一种熊果酸环糊精包合物的制备方法 | |
| CN102206289A (zh) | 一种芫根多糖提取工艺 | |
| CN104059250A (zh) | 一种茯苓多糖颗粒及其制备方法 | |
| CN204529716U (zh) | 羟丙基倍他环糊精生产装置 | |
| Mohamad et al. | Production of endopolysaccharides from Malaysia’s local mushrooms in air-lift bioreactor | |
| Xu et al. | Extraction process optimization of endo-polysaccharides from Phellinus igniarius |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |