CN103476430A - 抗egfl7抗体用于治疗的给药 - Google Patents

Abstract

本发明涉及抗EGFL7抗体用于癌症疗法的剂量给药。

Description

抗EGFL7抗体用于治疗的给药

发明优先权

本申请依据35U.S.C.§119(e)要求2011年2月2日提交的美国临时申请No.61/438,944、2011年6月2日提交的美国临时申请No.61/492,743、和2012年1月17日提交的美国临时申请No.61/587,382的优先权。

发明领域

本发明涉及癌症治疗。更具体地，本发明关注使用抗EGFL7抗体特异性治疗对癌症易感的或诊断有癌症的人患者。

发明背景

现在完全确立了涉及自已有的内皮形成新血管的血管发生参与多种病症的发病机理。这些包括实体瘤和转移、动脉粥样硬化、晶状体后纤维组织增生、血管瘤、慢性炎症、眼内新血管综合征诸如增殖性视网膜病例如糖尿病性视网膜病、老年性黄斑变性(AMD)、新生血管性青光眼、移植角膜组织和其它组织的免疫排斥、类风湿性关节炎、和银屑病。Folkman et al.,J.Biol.Chem.,267:10931-10934(1992);Klagsbrun et al.,Annu.Rev.Physiol.,53:217-239(1991);及Garner A.,"Vascular diseases",In:Pathobiology of OcularDisease.A Dynamic Approach,Garner A.,Klintworth GK,eds.,2nd Edition(Marcel Dekker,NY,1994),pp1625-1710。在肿瘤生长的情况中，血管发生对于自增生至瘤形成的转换，及为肿瘤的生长和转移提供营养似乎是至关重要的。Folkman et al.,Nature,339:58(1989)。新血管形成(neovascularization)让肿瘤细胞获得了与正常细胞相比的生长优势和增殖自治。

血管发育过程受到严密调节。迄今为止，多种分子，多为由周围细胞生成的分泌性因子，已显示出调节EC分化、增殖、迁移和接合成索样结构。例如，血管内皮生长因子(VEGF)已鉴定为涉及刺激血管发生和诱导血管通透性的关键因子。Ferrara et al.,Endocr.Rev.,18:4-25(1997)。还正在阐明其它分子在此过程中的作用，包括表皮生长因子样域7（EGFL7；参见例如2005年4月14日提交的WO2005/117968）。抑制EGFL7已经显示出有效抑制血管发生和治疗肿瘤（参见例如2007年3月16日提交的WO2007/106915和2010年5月7日提交的US-2010-0285009-A1）。

鉴于脉管发生(vasculogenesis)和血管发生(angiogenesis)在许多疾病和病症中的作用及EGFL7在此过程中的作用，希望有降低或抑制一种或多种引起这些过程的生物学效应的手段。通过述及完整收录本文中引用的所有参考文献，包括专利申请和出版物。

发明概述

靶向EGFL7代表癌症治疗的一种重要且有利的治疗模态，尤其是与其它抗血管发生剂，例如抗VEGF剂组合。本发明部分基于抗EGFL7抗体用于治疗癌症的最有效剂量的鉴定和最佳剂量显著低于最大耐受剂量的令人惊讶的发现。因而，本发明提供与之相关的方法、组合物、试剂盒和制品。

例如，在一些实施方案中，本发明提供一种用于治疗人患者中的癌症的方法，包括施用抗EGFL7抗体，该方法包括以介于1mg/kg和15mg/kg之间的剂量施用该抗体。在一些实施方案中，该剂量介于约5mg/kg和约7.5mg/kg之间。在一些实施方案中，该剂量为约5mg/kg。在一些实施方案中，该剂量为约7.5mg/kg。

在一些实施方案中，本发明提供一种用于治疗人患者中的癌症的方法，包括施用抗EGFL7抗体，该方法包括以选自下组的固定剂量(flat dose)施用该抗体：(a)每两周375-400mg和(b)每三周550-600mg。在一些实施方案中，该固定剂量为每两周375-400mg。在一些实施方案中，该固定剂量为每三周550-600mg。在一些实施方案中，该固定剂量为400mg每两周。在一些实施方案中，该固定剂量为600mg每三周。

在一些实施方案中，本发明提供一种用于治疗人患者中的癌症的方法，包括施用抗EGFL7抗体，该方法包括对该患者施用第一剂该抗EGFL7抗体和对该患者施用第二剂该抗EGFL7抗体，其中该第一剂和该第二剂均介于1mg/kg和15mg/kg之间且该第二剂在该第一剂之后1-4周。在一些实施方案中，该第一剂和该第二剂均介于5mg/kg和7.5mg/kg之间且该第二剂在该第一剂之后2-3周。在一些实施方案中，该第一剂和该第二剂均为5mg/kg且该第二剂在该第一剂之后2周。在一些实施方案中，该第一剂和该第二剂均为7.5mg/kg且该第二剂在该第一剂之后3周。

在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含可变域，该可变域包含下述HVR序列：(i)HVR-L1，其包含KASQSVDYSGDSYMS(SEQ ID NO：1)；(ii)HVR-L2，其包含GASYRES(SEQ ID NO：2)；(iii)HVR-L3，其包含QQNNEEPYT(SEQ ID NO：3)；(iv)HVR-H1，其包含GHTFTTYGMS(SEQID NO：4)；(v)HVR-H2，其包含GWINTHSGVPTYADDFKG(SEQ ID NO：5)；和(vi)HVR-H3，其包含LGSYAVDY(SEQ ID NO：6)。在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGHTFTTYGMSWVRQAPGKGLEWVGWINTHSGVPTYADDFKGRFTISLDNSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGSYAVDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：7)。在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：EIQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGHTFTTYGMSWVRQAPGKGLEWMGWINTHSGVPTYADDFKGRFTISLDNSKSTAYLQMNSLRAEDTAVYFCARLGSYAVDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：8)。在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQSVDYSGDSYMSWYQQKPGKAPKLLIYGASYRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQNNEEPYTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：9)。

在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含可变域，该可变域包含下述HVR序列：(i)HVR-L1，其包含RTSQSLVHINGITYLH(SEQ ID NO：10)；(ii)HVR-L2，其包含RVSNRFS(SEQ ID NO：11)；(iii)HVR-L3，其包含GQSTHVPLT(SEQ ID NO：12)；(iv)HVR-H1，其包含GYTFIDYYMN(SEQID NO：13)；(v)HVR-H2，其包含GDINLDNGGTHYNQKFKG(SEQ ID NO：14)；和(vi)HVR-H3，其包含AREGVYHDYDDYAMDY(SEQ ID NO：15)。在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFIDYYMNWVRQAPGKGLEWVGDINLDNGGTHYNQKFKGRFTISRDKSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGVYHDYDDYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：16)。在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRTSQSLVHINGITYLHWYQQKPGKAPKLLIYRVSNRFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCGQSTHVPLTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：17)。

在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含可变域，该可变域包含下述HVR序列：(i)HVR-L1，其包含RTSQSLVHINAITYLH(SEQ ID NO：18)；(ii)HVR-L2，其包含RVSNRFS(SEQ ID NO：11)；(iii)HVR-L3，其包含GQSTHVPLT(SEQ ID NO：12)；(iv)HVR-H1，其包含GYTFIDYYMN(SEQID NO：13)；(v)HVR-H2，其包含GDINLDNSGTHYNQKFKG(SEQ ID NO：19)；和(vi)HVR-H3，其包含AREGVYHDYDDYAMDY(SEQ ID NO：15)。在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFIDYYMNWVRQAPGKGLEWVGDINLDNSGTHYNQKFKGRFTISRDKSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGVYHDYDDYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：20)。在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRTSQSLVHINAITYLHWYQQKPGKAPKLLIYRVSNRFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCGQSTHVPLTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：21)。

在一些实施方案中，该抗体在10、20或30分钟的输注中施用。

在一些实施方案中，该方法进一步包括施用另一种抗血管发生剂的步骤。在一些实施方案中，该另一种抗血管发生剂是抗血管内皮生长因子(VEGF)拮抗剂。在一些实施方案中，该抗VEGF拮抗剂是抗VEGF抗体。在一些实施方案中，该抗VEGF抗体是贝伐单抗。

在一些实施方案中，该抗EGFL7抗体是双特异性抗体。在一些实施方案中，该双特异性抗体结合VEGF。在一些实施方案中，该双特异性抗体与贝伐单抗结合相同VEGF表位。

在一些实施方案中，该癌症选自下组：乳腺癌，白血病，鳞状细胞癌，小细胞肺癌，非小细胞肺癌，胃肠癌，胰腺癌，成胶质细胞瘤，宫颈癌，卵巢癌，肝癌，膀胱癌，肝瘤，结肠癌，结肠直肠癌，子宫内膜癌，唾液腺癌，肾癌，肝癌，前列腺癌，外阴癌，甲状腺癌，肝癌瘤和各种类型的头和颈癌。在一些实施方案中，该癌症是乳腺癌、NSCLC或CRC。

在一些实施方案中，该方法进一步包括施用有效量的化疗剂。

本发明提供一种用于治疗人患者中的NSCLC的方法，其包括剂量给药方案，该剂量给药方案包含多个治疗周期，其中每个周期的第1天对该患者施用200mg/m²帕利他赛、卡铂（AUC6mg/ml min)、15mg/kg贝伐单抗、和600mg抗EGFL7抗体，每21天重复每个周期。在一些实施方案中，施用帕利他赛和卡铂直至疾病进展或长达6个周期。在一些实施方案中，施用贝伐单抗和抗EGFL7抗体直至疾病进展或长达34个周期。该抗EGFL7抗体可以是本文所述抗EGFL7抗体任一。

本发明还提供一种用于治疗人患者中的结肠直肠癌的方法，其包括剂量给药方案，该剂量给药方案包含多个治疗周期，其中第一个周期的第1天对该患者施用85mg/m²奥沙利铂、400mg/m²5-氟尿嘧啶(5-FU)、400mg/m²亚叶酸、5mg/kg贝伐单抗、和400mg抗EGFL7抗体，且其中每个后续周期的第1天对该患者施用85mg/m²奥沙利铂、2400mg/m²5-FU、400mg/m²亚叶酸、5mg/kg贝伐单抗、和400mg抗EGFL7抗体，每14天重复每个周期。在一些实施方案中，施用奥沙利铂长达8个周期。在一些实施方案中，施用5-FU、亚叶酸、贝伐单抗和抗EGFL7抗体直至疾病进展或长达52个周期。该抗EGFL7抗体可以是本文所述抗EGFL7抗体任一。

在一些实施方案中，本发明提供一种制品，其包括容器、该容器内的组合物、和标签或包装插页，该组合物包含抗EGFL7抗体，该标签或包装插页印有以介于1mg/kg和15mg/kg之间的剂量施用该抗体的用法说明书。

在一些实施方案中，本发明提供一种制品，其包括容器、该容器内的组合物、和标签或包装插页，该组合物包含抗EGFL7抗体，该标签或包装插页印有对患者施用第一剂抗EGFL7抗体和对患者施用第二剂抗EGFL7抗体的用法说明书，其中该第一剂和该第二剂均介于1mg/kg和15mg/kg之间且该第二剂在该第一剂之后1-4周。在一些实施方案中，该第一剂和该第二剂均介于5mg/kg和7.5mg/kg之间且该第二剂在该第一剂之后2-3周。在一些实施方案中，该第一剂和该第二剂均为5mg/kg且该第二剂在该第一剂之后2周。在一些实施方案中，该第一剂和该第二剂均为7.5mg/kg且该第二剂在该第一剂之后3周。

在一些实施方案中，本发明提供一种制品，其包括容器、该容器内的组合物、和标签或包装插页，该组合物包含抗EGFL7抗体，该标签或包装插页印有以选自下组的固定剂量施用该抗体的用法说明书：(a)每两周375-400mg和(b)每三周550-600mg。在一些实施方案中，该固定剂量为每两周375-400mg。在一些实施方案中，该固定剂量为每三周550-600mg。在一些实施方案中，该固定剂量为每两周400mg。在一些实施方案中，该固定剂量为每三周600mg。

附图简述

图1描绘Ia期和Ib期临床试验的设计。

图2描绘来自Ia期的PD生物标志物(CPC)。

图3描绘来自Ib期的PD生物标志物(CPC)。

发明详述

本发明提供涉及抗EGFL7抗体的方法、组合物、试剂盒和制品及癌症治疗。

本文中提供这些方法、组合物、试剂盒和制品的详情。

通用技术

本文中描述或提到的技术和规程一般得到了本领域技术人员的充分理解，而且通常利用常规方法得以采用，诸如例如下列文献中记载的广泛应用的方法：Sambrook et al.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual3rd.edition(2001)Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y；CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY(F.M.Ausubel,et al.eds.,(2003))；丛书METHODS IN ENZYMOLOGY(Academic Press,Inc.):PCR2:A PRACTICAL APPROACH(M.J.MacPherson,B.D.Hames and G.R.Taylor eds.(1995))；Harlow and Lane,eds.(1988)ANTIBODIES,ALABORATORY MANUAL；及ANIMAL CELL CULTURE(R.I.Freshney,ed.(1987))。

定义

术语“EGFL7”（可互换地称为“表皮生长因子样域7”），在用于本文时，除非另有明确说明或者上下文另有说明，指任何天然的或变异的（无论是天然的或合成的）EGFL7多肽。术语“天然序列”明确涵盖天然存在的截短或分泌形式（例如胞外结构域序列）、天然存在的变异形式（例如可变剪接形式）和天然存在的等位变体。

术语“抗EGFL7抗体”或“结合EGFL7的抗体”指能够以足够亲和力结合EGFL7，使得该抗体可用作靶向EGFL7的诊断剂和/或治疗剂的抗体。在某些实施方案中，结合EGFL7的抗体具有≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、或≤0.1nM的解离常数(Kd)。抗EGFL7抗体具体包括2007年3月16日提交的WO2007/106915和2010年5月7日提交的US-2010-0285009-A1中记载的抗EGFL7抗体。

“结合亲和力”通常指分子（例如抗体）的单一结合位点与其结合配偶体（例如抗原）之间全部非共价相互作用总和的强度。除非另有说明，在用于本文时，“结合亲和力”指反映结合对的成员（例如抗体与抗原）之间1:1相互作用的内在结合亲和力。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可用解离常数(Kd)来表述。亲和力可通过本领域知道的常用方法来测量，包括本文中所描述的。低亲和力抗体通常缓慢的结合抗原且趋于容易解离，而高亲和力抗体通常更快速的结合抗原且趋于保持更长时间的结合。本领域知道测量结合亲和力的多种方法，其中任一种都可用于本发明的目的。下文描述了具体的示例性实施方案。

在一个实施方案中，依照本发明的“Kd”或“Kd值”是通过如下测定法所述使用Fab型式的感兴趣抗体及其抗原进行的放射性标记抗原结合测定法(RIA)来测量的：通过在存在未标记抗原的滴定系列的条件下，用最小浓度的125I标记抗原平衡，然后用抗Fab抗体包被的平板捕捉结合的抗原来测量Fab对抗原的溶液结合亲和力(Chen,et al.,(1999)J.Mol Biol293:865-881)。为了确定测定条件，用50mM碳酸钠(pH9.6)中的5μg/ml捕捉用抗Fab抗体(Cappel Labs)包被微量滴定板(Dynex)过夜，随后用PBS中的2%(w/v)牛血清清蛋白在室温（约23℃）封闭2-5小时。在非吸附平板(Nunc#269620)中，将100pM或26pM[125I]-抗原与连续稀释的目的Fab混合（例如与Presta et al.,(1997)Cancer Res.57:4593-4599中抗VEGF抗体，Fab-12的评估一致）。然后将目的Fab保温过夜；不过，保温可持续更长时间（例如65个小时）以保证达到平衡。此后，将混合物转移至捕捉板以进行室温保温（例如1小时）。然后除去溶液，并用含0.1%Tween^TM-20的PBS洗板8次。平板干燥后，加入150μl/孔闪烁液(MicroScint^TM-20;Packard)，然后在TopCount伽马计数器(Packard)上对平板计数10分钟。选择各Fab给出小于或等于最大结合之20%的浓度用于竞争性结合测定法。依照另一实施方案，Kd或Kd值是通过表面等离振子共振测定法使用BIAcore^TM-2000或BIAcore^TM-3000(BIAcore,Inc.,Piscataway,NJ)在25℃使用固定化抗原CM5芯片在约10个响应单位(RU)测量的。简而言之，依照供应商的说明书用盐酸N-乙基-N’-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化羧甲基化右旋糖苷生物传感器芯片(CM5,BIAcore Inc.)。用10mM乙酸钠pH4.8将抗原稀释至5μg/ml（约0.2μM），然后以5μl/分钟的流速注入至获得约10个响应单位(RU)的偶联蛋白质。注入抗原后，注入1M乙醇胺以封闭未反应基团。为了进行动力学测量，在25℃以约25μl/分钟的流速注入在含0.05%Tween^TM-20的PBS(PBST)中两倍连续稀释的Fab（0.78nM至500nM）。使用简单一对一朗格缪尔(Langmuir)结合模型(BIAcore^TMEvaluation Software version3.2)通过同时拟合结合和解离传感图计算结合速率(kon)和解离速率(koff)。平衡解离常数(Kd)以比率koff/kon计算。参见例如Chen,Y.,et al.,(1999)J.Mol.Biol.293:865-881。如果根据上文表面等离振子共振测定法，结合速率超过106M-1S-1，那么结合速率可使用荧光淬灭技术来测定，即根据分光计诸如配备了断流装置的分光光度计(astop-flow equipped spectrophometer)(Aviv Instruments)或8000系列SLM-Aminco分光光度计(ThermoSpectronic)中用搅拌比色杯的测量，在存在浓度渐增的抗原的条件下，测量PBS,pH7.2中的20nM抗抗原抗体（Fab形式）在25℃的荧光发射强度（激发=295nm；发射=340nm，16nm带通）的升高或降低。

术语“抗体”和“免疫球蛋白”以最广义互换使用，包括单克隆抗体（例如全长或完整单克隆抗体）、多克隆抗体、多价抗体、多特异性抗体（例如双特异性抗体，只要它们展现出期望的生物学活性），而且还可以包括某些抗体片段（如本文中更为详细描述的）。抗体可以是人的、人源化的和/或亲和力成熟的。

“分离的”抗体指已经鉴定且自其天然环境的一种成分分开和/或回收的抗体。其天然环境的污染性成分指将会干扰该抗体的诊断或治疗用途的物质，可包括酶、激素、和其它蛋白质性质或非蛋白质性质的溶质。在优选的实施方案中，将抗体纯化至(1)根据Lowry法的测定，抗体重量超过95%，最优选重量超过99%，(2)足以通过使用转杯式测序仪获得至少15个残基的N-末端或内部氨基酸序列的程度，或(3)根据还原性或非还原性条件下的SDS-PAGE及使用考马斯蓝或优选银染色，达到同质。既然抗体天然环境的至少一种成分不会存在，那么分离的抗体包括重组细胞内的原位抗体。然而，分离的抗体通常将通过至少一个纯化步骤来制备。

“可变的”指可变域中的某些部分在抗体序列间差异广泛且用于每种特定抗体对其特定抗原的结合和特异性的实情。然而，变异性并非均匀分布于抗体的整个可变域。它集中于轻链和重链可变域中称作互补决定区或高变区（CDR或HVR，在本文中可互换使用）的三个区段。可变域中较保守的部分称作框架区(FR)。天然重链和轻链的可变域各自包含四个FR，它们大多采取β-折叠片构象，通过形成环状连接且在有些情况中形成β-折叠片结构一部分的三个HVR连接。每条链中的HVR通过FR非常接近的保持在一起，并与另一条链的HVR一起促成抗体的抗原结合位点的形成(参见Kabat et al.,序列ofProteins of Immunological Interest,第5版,National Institute of Health,Bethesda,MD.(1991))。恒定域不直接参与抗体与抗原的结合，但展现出多种效应器功能，诸如抗体依赖性细胞的（细胞）毒性中抗体的参与。

用木瓜蛋白酶消化抗体产生两个相同的抗原结合片段，称为“Fab”片段，各自具有一个抗原结合位点，及一个剩余的“Fc”片段，其名称反映了它易于结晶的能力。胃蛋白酶处理产生一个F(ab')2片段，它具有两个抗原结合位点且仍能够交联抗原。

“Fv”是包含完整抗原识别和结合位点的最小抗体片段。在双链Fv种类中，此区由紧密、非共价结合的一个重链可变域和一个轻链可变域的二聚体组成。在单链Fv种类中，一个重链可变域和一个轻链可变域可以通过柔性肽接头共价相连，使得轻链和重链在与双链Fv种类类似的“二聚体”结构中相结合。正是在这种构造中，各可变域的三个HVR相互作用而在VH-VL二聚体表面上确定了抗原结合位点。六个HVR共同赋予抗体以抗原结合特异性。然而，即使是单个可变域（或只包含对抗原特异的三个HVR的半个Fv）也具有识别和结合抗原的能力，只是亲和力低于完整结合位点。

Fab片段还包含轻链的恒定域和重链的第一恒定域(CH1)。Fab'片段与Fab片段的不同之处在于重链CH1结构域的羧基末端增加了少数残基，包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。Fab'-SH是本文中对其中恒定域半胱氨酸残基携带游离硫醇基的Fab'的称谓。F(ab')2抗体片段最初是作为在Fab'片段之间有铰链半胱氨酸的成对Fab'片段生成的。还知道抗体片段的其它化学偶联。

根据其恒定域的氨基酸序列，来自任何脊椎动物物种的抗体（免疫球蛋白）的“轻链”可归入两种截然不同的型中的一种，称作卡帕(κ)和拉姆达(λ)。

根据其重链恒定域的氨基酸序列，免疫球蛋白可归入不同的类。免疫球蛋白有五大类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中有些可进一步分为亚类（同种型），例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。将与不同类的免疫球蛋白对应的重链恒定域分别称作α、δ、ε、γ和μ。不同类的免疫球蛋白的亚基结构和三维构造是众所周知的。

“抗体片段”只包含完整抗体的一部分，其中所述部分优选保留该部分存在于完整抗体中时通常与之有关的至少一项、优选大多数或所有功能。抗体片段的例子包括Fab、Fab'、F(ab')2和Fv片段；双抗体；线性抗体；单链抗体分子；及由抗体片段形成的多特异性抗体。在一个实施方案中，抗体片段包含完整抗体的抗原结合位点，如此保留结合抗原的能力。在另一个实施方案中，抗体片段，例如包含Fc区的抗体片段，保留通常与Fc区存在于完整抗体中时通常与之有关的至少一项生物学功能，诸如FcRn结合、抗体半衰期调控、ADCC功能和补体结合。在一个实施方案中，抗体片段是体内半衰期与完整抗体基本上相似的单价抗体。例如，这样的抗体片段可包含一个抗原结合臂且其与能够赋予该片段以体内稳定性的Fc序列相连。

术语“高变区”、“HVR”或“HV”在用于本文时指抗体可变域中序列上高度可变和/或形成结构上定义的环的区域。通常，抗体包含六个HVR：三个在VH中（H1、H2、H3），三个在VL中（L1、L2、L3）。在天然抗体中，H3和L3展示这六个HVR的最大多样性，而且认为特别是H3在赋予抗体以精密特异性中发挥独特作用。参见例如Xu et al.,Immunity13:37-45(2000);Johnsonand Wu,in Methods in Molecular Biology248:1-25(Lo,ed.,Human Press,Totowa,NJ,2003)。事实上，仅由重链组成的天然存在camelid抗体在缺乏轻链时是有功能的且稳定的。参见例如Hamers-Casterman et al.,Nature363:446-448(1993);Sheriff et al.,Nature Struct.Biol.3:733-736(1996)。

本文中使用且涵盖许多HVR的叙述。Kabat互补决定区(CDR)是以序列变异性为基础的，而且是最常用的(Kabat et al.,序列of Proteins ofImmunological Interest,5th Ed.Public Health Service,National Institutes ofHealth,Bethesda,MD.(1991))。Chothia改为指结构环的位置(Chothia and LeskJ.Mol.Biol.196:901-917(1987))。AbM HVR代表Kabat HVR与Chothia结构环之间的折衷，而且得到Oxford Molecular的AbM抗体建模软件的使用。“接触(contact)”HVR是以对可获得的复合物晶体结构的分析为基础的。下文记录了这些HVR中每一个的残基。

HVR可包括如下“延伸的HVR”：VL中的24-36或24-34(L1)、46-56或50-56(L2)和89-97或89-96(L3)及VH中的26-35(H1)、50-65或49-65(H2)和93-102、94-102或95-102(H3)。对于这些定义中的每一个，可变区残基是依照Kabat等,见上文编号的。

“框架”或“FR”残基指可变域中除本文中所定义的高变区残基外的那些残基。

非人（例如鼠）抗体的“人源化”形式指最低限度包含衍生自非人免疫球蛋白的序列的嵌合抗体。在一个实施方案中，人源化抗体指人免疫球蛋白（受体抗体）中的HVR残基用具有期望特异性、亲和力和/或能力的非人物种（供体抗体）诸如小鼠、大鼠、兔或非人灵长类的HVR残基替换的免疫球蛋白。在有些情况中，将人免疫球蛋白的FR残基用相应的非人残基替换。此外，人源化抗体可包含在受体抗体或供体抗体中没有找到的残基。进行这些修饰可以是为了进一步改进抗体的性能。一般而言，人源化抗体将包含至少一个、通常两个基本上整个如下可变域，其中整个或基本上整个高变环对应于非人免疫球蛋白的高变环，且整个或基本上整个FR是人免疫球蛋白序列的FR。人源化抗体任选还将包含至少部分免疫球蛋白恒定区(Fc)，通常是人免疫球蛋白的恒定区。更多细节参见例如Jones et al.,Nature321:522-525(1986);Riechmann et al.,Nature332:323-329(1988);Presta,Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596(1992)。还可参见例如Vaswani and Hamilton,Ann.Allergy,Asthma&Immunol.1:105-115(1998);Harris,Biochem.Soc.Transactions23:1035-1038(1995);Hurle and Gross,Curr.Op.Biotech.5:428-433(1994);及美国专利No.6,982,321和7,087,409。

术语“单克隆抗体”在用于本文时指从一群基本上同质的抗体获得的抗体，即构成群体的各个抗体是相同的，除了可以以极小量存在的可能突变（例如天然存在突变）外。如此，修饰语“单克隆”表明抗体不是不同抗体混合物的特征。在某些实施方案中，此类单克隆抗体典型的包括包含能结合靶物的多肽序列的抗体，其中靶物结合多肽序列是通过包括从众多多肽序列中选择单一靶物结合多肽序列在内的过程得到的。例如，选择过程可以是从众多克隆（诸如杂交瘤克隆、噬菌体克隆或重组DNA克隆的集合）中选择独特克隆。应当理解，所选择的靶物结合序列可进一步改变，例如为了提高对靶物的亲和力、将靶物结合序列人源化、提高其在细胞培养物中的产量、降低其在体内的免疫原性、创建多特异性抗体等，而且包含改变后的靶物结合序列的抗体也是本发明的单克隆抗体。与典型的包含针对不同决定簇（表位）的不同抗体的多克隆抗体制备物不同，单克隆抗体制备物的每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。在它们的特异性之外，单克隆抗体制备物的优点在于它们通常未受到其它免疫球蛋白的污染。

修饰语“单克隆”表明抗体从基本上同质的抗体群获得的特征，不应解释为要求通过任何特定方法来生产抗体。例如，将依照本发明使用的单克隆抗体可通过多种技术来生成，包括例如杂交瘤法(例如Kohler and Milstein,Nature256:495-97(1975);Hongo et al.,Hybridoma,14(3):253-260(1995);Harlow et al.,Antibodies:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor LaboratoryPress,2nd ed.1988;Hammerling et al.,于:Monoclonal Antibodies and T-CellHybridomas,563-681,Elsevier,N.Y.,1981)、重组DNA法(参见例如美国专利No.4,816,567)、噬菌体展示技术(参见例如Clackson et al.,Nature352:624-628(1991);Marks et al.,J.Mol.Biol.222:581-597(1992);Sidhu et al.,J.Mol.Biol.338(2):299-310(2004);Lee et al.,J.Mol.Biol.340(5):1073-1093(2004);Fellouse,Proc.Nat.Acad.Sci.USA101(34):12467-12472(2004);及Lee et al.,J.Immunol.Methods284(1-2):119-132(2004))、及用于在具有部分或整个人免疫球蛋白基因座或编码人免疫球蛋白序列的基因的动物中生成人或人样抗体的技术(参见例如WO1998/24893;WO1996/34096;WO1996/33735;WO1991/10741;Jakobovits et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:2551(1993);Jakobovits et al.,Nature362:255-258(1993);Bruggemann et al.,Year inImmuno.7:33(1993);美国专利No.5,545,807;5,545,806;5,569,825;5,625,126;5,633,425;5,661,016;Marks et al.,Bio/Technology10:779-783(1992);Lonberget al.,Nature368:856-859(1994);Morrison,Nature368:812-813(1994);Fishwild et al.,Nature Biotechnol.14:845-851(1996);Neuberger,NatureBiotechnol.14:826(1996);及Lonberg and Huszar,Intern.Rev.Immunol.13:65-93(1995))。

单克隆抗体在本文中明确包括“嵌合”抗体，其中重链和/或轻链的一部分与衍生自特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而链的剩余部分与衍生自另一物种或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及此类抗体的片段，只要它们展现出期望的生物学活性(参见例如美国专利No.4,816,567;Morrison et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:6851-6855(1984))。嵌合抗体包括“灵长类化”抗体，其中抗体的抗原结合区衍生自通过例如用感兴趣抗原免疫猕猴而生成的抗体。

“单链Fv”或“scFv”抗体片段包含抗体的VH和VL结构域，其中这些结构域存在于一条多肽链上。一般地，scFv多肽在VH与VL结构域之间进一步包含多肽接头，其使得scFv能够形成结合抗原的期望结构。关于scFv的综述参见Pluckthun，于《The Pharmacology of Monoclonal Antibodies》，第113卷，Rosenburg和Moore编，Springer-Verlag，New York，第269-315页，1994。

“抗原”指抗体可选择性结合的预定抗原。靶抗原可以是多肽、碳水化合物、核酸、脂质、半抗原或其它天然存在的或合成的化合物。

术语“双抗体”指具有两个抗原结合位点的小抗体片段，该片段在同一条多肽链（VH-VL）中包含相连的重链可变域(VH)和轻链可变域(VL)。通过使用过短的接头使得同一条链上的两个结构域之间不能配对，迫使这些结构域与另一条链的互补结构域配对，从而产生两个抗原结合位点。双抗体更完整的记载于例如EP404,097;WO93/11161;及Hollinger et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90:6444-6448(1993)。三抗体(Triabody)和四抗体(tetrabody)也记载于Hudson et al.,Nat.Med.9:129-134(2003)。

“人抗体”指拥有与由人生成的抗体的氨基酸序列对应的氨基酸序列和/或使用本文所公开的用于生成人抗体的任何技术生成的抗体。人抗体的这种定义明确排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。人抗体可使用本领域已知的多种技术来生成，包括噬菌体展示文库(Hoogenboom and Winter,J.Mol.Biol.227:381(1991);Marks et al.,J.Mol.Biol.222:581(1991))。还可用于制备人单克隆抗体的是以下文献中记载的方法：Cole et al.,Monoclonal Antibodiesand Cancer Therapy,Alan R.Liss,p.77(1985);Boerner et al.,J.Immunol.147(1):86-95(1991)。还可参见van Dijk and van de Winkel,Curr.Opin.Pharmacol.,5:368-74(2001)。可通过给已经修饰以应答抗原性刺激而生成人抗体但其内源基因组已经失能的转基因动物例如经过免疫的异种小鼠(xenomice)施用抗原来制备人抗体(参见例如6,075,181和6,150,584，关于XENOMOUSE^TM技术)。还可参见例如Li et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,103:3557-3562(2006)，关于经人B-细胞杂交瘤技术生成的人抗体。

术语“依照Kabat的可变域残基编号”或“依照Kabat的氨基酸位置编号”及其变体指Kabat et al.,见上文中的抗体编辑用于重链可变域或轻链可变域的编号系统。使用此编号系统，实际的线性氨基酸序列可包含较少或另外的氨基酸，对应于可变域FR或HVR的缩短或插入。例如，重链可变域可包含H2残基52后的单一氨基酸插入（依照Kabat为残基52a）及重链FR残基82后的插入残基（例如依照Kabat为残基82a、82b和82c等）。给定抗体的Kabat残基编号可通过将抗体序列与“标准”Kabat编号序列对比同源区来确定。

Kabat编号系统一般在提及可变域中的残基（大约是轻链残基1-107和重链残基1-113）时使用(例如Kabat et al.,Sequence of Immunological Interest.5thEd.Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,Md.(1991))。“EU编号系统”或“EU指数”一般在提及免疫球蛋白重链恒定区中的残基时使用（例如Kabat et al.,见上文中报道的EU指数）。“Kabat中的EU指数”指人IgG1EU抗体的残基编号方式。除非本文中另有说明，提及抗体可变域中的残基编号指根据Kabat编号系统的残基编号方式。除非本文中另有说明，提及抗体恒定域中的残基编号指根据EU编号系统的残基编号方式（例如参见美国临时申请60/640,323，关于EU编号方式的图）。

“阻断性”抗体或“拮抗性”抗体指抑制或降低其所结合的抗原的生物学活性的抗体。某些阻断性抗体或拮抗性抗体实质或完全抑制抗原的生物学活性。

短语“基本上相似”或“基本上相同”在用于本文时表示两个数值（例如一个涉及本发明的抗体而另一个涉及参照/比较抗体）之间足够高的相似程度，以致本领域技术人员将认为在用所述数值（例如Kd值）所测量的生物学特性背景内两个数值之间的差异具有很小的或没有生物学显著性。作为参照/比较值的函数，所述两个数值之间的差异例如小于约50%、小于约40%、小于约30%、小于约20%、和/或小于约10%。

短语“实质性降低”或“实质性不同”在用于本文时表示两个数值（通常一个与某分子有关而另一个与参照/比较分子有关）之间足够高的差异程度，以致本领域技术人员将认为在用所述数值（例如Kd值）所测量的生物学特性背景内两个数值之间的差异具有统计学显著性。作为参照/比较分子该数值的函数，所述两个数值之间的差异例如大于约10%，大于约20%，大于约30%，大于约40%，和/或大于约50%。

“药物”或“药剂”指用于治疗所讨论的病症或其症状、或副作用的活性药物。

“肿瘤”在用于本文时指所有肿瘤性细胞生长和增殖，无论是恶性的还是良性的，及所有癌前(pre-cancerous)和癌性细胞和组织。术语“癌症”、“癌性”、和“肿瘤”在本文中提到时并不互相排斥。

术语“癌症”和“癌性”指向或描述哺乳动物中特征通常为细胞生长/增殖不受调控的生理疾患。癌症的例子包括但不限于癌瘤、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤和白血病。此类癌症的更具体例子包括鳞状细胞癌、小细胞肺癌、脑垂体癌、食管癌、星形细胞瘤、软组织肉瘤、非小细胞肺癌、肺的腺癌、肺的鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌(liver cancer)、膀胱癌、肝瘤(hepatoma)、乳腺癌、结肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌(hepatic carcinoma)、脑癌、子宫内膜癌、睾丸癌、胆管癌、胆囊癌、胃癌、黑素瘤、及各种类型的头和颈癌。血管发生失调可导致可通过本发明的组合物和方法来治疗的许多病症。这些病症包括非赘生性的和赘生性的疾患。赘生病包括但不限于上文所描述的那些。非赘生性病症包括但不限于不想要的或异常的肥大、关节炎、类风湿性关节炎(RA)、银屑病、银屑病斑块、结节病、动脉粥样硬化、动脉粥样硬化斑块、糖尿病性和其它增殖性视网膜病包括早产儿视网膜病、晶状体后纤维组织增生、老年性黄斑变性、糖尿病性黄斑水肿、角膜新血管形成、角膜移植片新血管形成、角膜移植片排斥、视网膜/脉络膜新血管形成、眼角的新血管形成（发红）、眼新血管疾病、血管再狭窄、动静脉畸形(AVM)、脑脊膜瘤、血管瘤、血管纤维瘤、甲状腺增生（包括格雷夫斯氏(Graves)病）、角膜和其它组织移植、慢性炎症、肺炎、急性肺损伤/ARDS、败血症、原发性肺动脉高压、恶性肺积液(malignantpulmonary effusion)、脑水肿（例如与急性中风/闭合性头部外伤/创伤有关的）、滑液炎症、RA中的血管翳形成、骨化性肌炎、肥大性骨形成、骨关节炎(OA)、顽固性腹水、多囊卵巢病、子宫内膜异位症、第三空间流体病(3rd spacing offluid diseases)（胰腺炎、间隔综合征、烧伤、肠病）、子宫纤维瘤(uterinefibroids)、早产、慢性炎症诸如IBD（克罗恩氏(Crohn)病和溃疡性结肠炎）、肾同种异体移植物排斥、炎性肠病、肾病综合征、不想要的或异常的组织块生长（非癌性的）、血友病性关节、肥厚性瘢痕、毛发生长的抑制、奥-韦二氏(Osler-Weber)综合征、脓性肉芽肿晶状体后纤维组织增生、硬皮病、沙眼、血管粘连、滑膜炎、皮炎、先兆子痫、腹水、心包积液（诸如与心包炎有关的）和胸腔积液。

在用于本文时，“治疗”或“处理”指试图改变所治疗个体或细胞的自然进程的临床干预，可以是为了预防或在临床病理学的进程中进行。治疗的期望效果包括预防疾病的发生或复发、缓解症状、削弱疾病的任何直接或间接病理学后果、减缓疾病进展的速率、改善或减轻疾病状态、及免除或改善预后。在有些实施方案中，本发明的抗体用于延迟疾病或病症的发生/发展。

如本文中使用的，“周”指7天±2天。

术语“治疗有效量”指在哺乳动物中有效治疗疾病或病症的药物量。在癌症的情况中，治疗有效量的药物可减少癌细胞的数目；缩小肿瘤的尺寸；抑制（即一定程度的减缓，优选阻止）癌细胞浸润入周围器官；抑制（即一定程度的减缓，优选阻止）肿瘤转移；一定程度地抑制肿瘤生长；和/或一定程度的减轻一种或多种与病症有关的症状。根据药物可阻止现有癌细胞生长和/或杀死现有癌细胞的程度，它可以是细胞抑制性的和/或细胞毒性的。对于癌症疗法，可以例如通过评价存活持续时间、无进展存活持续时间(PFS)、响应率(RR)、响应持续时间、和/或生活质量来测量体内功效。

“存活”(survival)指患者保持存活，包括无进展存活(progression freesurvival)(PFS)和总体存活(overall survival)(OS)。存活可通过Kaplan-Meier法来评估，而且存活的任何差异可使用分层时序检验(stratified log-rank test)来计算。

“无进展存活(Progression free survival)(PFS)”指自治疗（或随机化）至第一次疾病进展或死亡的时间。例如，它指如下的时间，即自治疗启动或自初始诊断起，例如限定的时间段，诸如约1个月、2个月、3个月、4个月、6个月、7个月、8个月、9个月、1年、约2年、约3年、等，患者仍然活着且癌症没有复发。在本发明的一个方面，PFS可通过实体瘤响应评价标准(RECIST)来评估。在某些实施方案中，PFS延长约6个月。

“总体存活(overall survival)”指患者自治疗启动或自初始诊断起保持一定时期活着，诸如约1年、约1.5年、约2年、约3年、约4年、约5年、约10年、等。在构成本发明基础的研究中，用于存活分析的事件为任何原因的死亡。

“延长存活(extending survival)”或“提高存活可能性”意味着使接受治疗的患者的PFS和/或OS相对于未接受治疗的患者（即相对于未用EGFL拮抗剂，例如抗EGFL7抗体治疗的患者）或相对于对照治疗方案（诸如只用化疗剂的治疗，诸如癌症的标准治疗(standard of care)中使用的那些）有延长。存活在治疗启动之后或在初始诊断之后监测至少约1个月、2个月、4个月、6个月、9个月、或至少约1年、或至少约2年、或至少约3年、或至少约4年、或至少约5年、或至少约10年、等。

危害比(Hazard ratio,HR)是事件比率的统计定义。为了本发明的目的，危害比定义为代表任何特定时间点时实验分部中的事件概率除以对照分部中的事件概率。无进展存活分析中的“危害比(hazard ratio)”是两条无进展存活曲线之间的差异的汇总，代表随访期里与对照相比治疗的死亡风险降低。

“抗血管发生剂”或“血管发生抑制剂”指或直接或间接抑制血管发生(angiogenesis)、脉管发生(vasculogenesis)、或不想要的血管通透性的小分子量物质、多核苷酸、多肽、分离的蛋白质、重组蛋白、抗体、或其偶联物或融合蛋白。例如，抗血管发生剂是上文定义的血管发生剂的抗体或其它拮抗剂，例如VEGF的抗体、VEGF受体的抗体、阻断VEGF受体信号传导的小分子（例如PTK787/ZK2284、SU6668、

/SU11248(sunitinib malate)、AMG706）。抗血管发生剂还包括天然血管发生抑制剂，例如血管他丁(angiostatin)、内皮他丁(endostatin)等。参见例如Klagsbrun and D’Amore,Annu.Rev.Physiol.,53:217-39(1991);Streit and Detmar,Oncogene,22:3172-3179(2003)(例如列举恶性黑素瘤中抗血管发生疗法的表3);Ferrara&Alitalo,Nature Medicine5(12):1359-1364(1999);Tonini et al.,Oncogene,22:6549-6556(2003)(例如列举抗血管发生因子的表2);Sato Int.J.Clin.Oncol.,8:200-206(2003)(例如列举临床试验中所使用的抗血管发生剂的表1)。

“化疗剂”指可用于治疗癌症的化学化合物。化疗剂的实例包括烷化剂类(alkylating agents)，诸如塞替派(thiotepa)和环磷酰胺(cyclophosphamide)

磺酸烷基酯类(alkyl sulfonates)，诸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶类(aziridines)，诸如苯佐替派(benzodepa)、卡波醌(carboquone)、美妥替派(meturedepa)和乌瑞替派(uredepa)；乙撑亚胺类(ethylenimines)和甲基蜜胺类(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)、三乙撑蜜胺(triethylenemelamine)、三乙撑磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三乙撑硫代磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和三羟甲蜜胺(trimethylolomelamine)；番荔枝内酯类(acetogenin)（尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone)）；δ-9-四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol)（屈大麻酚(dronabinol)，

）；β-拉帕醌(lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙素类(colchicines)；白桦脂酸(betulinicacid)；喜树碱(camptothecin)（包括合成类似物托泊替康(topotecan)

CPT-11（伊立替康(irinotecan)，

乙酰喜树碱、东莨菪亭(scopoletin)和9-氨基喜树碱）；苔藓抑素(bryostatin)；callystatin；CC-1065（包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物）；鬼臼毒素(podophyllotoxin)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；替尼泊苷(teniposide)；隐藻素类(cryptophycins)（特别是隐藻素1和隐藻素8）；多拉司他汀(dolastatin)；duocarmycin（包括合成类似物，KW-2189和CB1-TM1）；艾榴塞洛素(eleutherobin)；pancratistatin；sarcodictyin；海绵抑素(spongistatin)；氮芥类(nitrogen mustards)，诸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、胆磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxide hydrochloride)、美法仑(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；亚硝脲类(nitrosoureas)，诸如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimustine)；抗生素类，诸如烯二炔类抗生素(enediyne)（如加利车霉素(calicheamicin)，尤其是加利车霉素γ1I和加利车霉素ωI1（参见例如Nicolaou et al.,Angew.ChemIntl.Ed.Engl.,33:183-186(1994)）；CDP323，一种口服α-4整联蛋白抑制剂；蒽环类抗生素(dynemicin)，包括dynemicin A；埃斯波霉素(esperamicin)；以及新制癌素(neocarzinostatin)发色团和相关色蛋白烯二炔类抗生素发色团）、阿克拉霉素(aclacinomycin)、放线菌素(actinomycin)、氨茴霉素(anthramycin)、偶氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素(bleomycin)、放线菌素C(cactinomycin)、carabicin、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-二氮-5-氧-L-正亮氨酸、多柔比星(doxorubicin)（包括

吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2-吡咯代多柔比星、盐酸多柔比星脂质体注射剂

脂质体多柔比星TLC D-99

PEG化脂质体多柔比星

和脱氧多柔比星）、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素类(mitomycins)诸如丝裂霉素C、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素(streptonigrin)、链佐星(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物类，诸如甲氨蝶呤、吉西他滨(gemcitabine)

替加氟(tegafur)

卡培他滨(capecitabine)埃坡霉素(epothilone)和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、蝶酰三谷氨酸(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤(mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，诸如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素类，诸如卡鲁睾酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、表硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺类，诸如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸如亚叶酸(folinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defosfamide)；地美可辛(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋铵(elliptinium acetate)；epothilone；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidamine)；美登木素生物碱类(maytansinoids)，诸如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌达醇(mopidamol)；二胺硝吖啶(nitracrine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；2-乙基酰肼(ethylhydrazide)；丙卡巴肼(procarbazine)；

多糖复合物（JHS NaturalProducts,Eugene,OR）；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西索菲兰(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2''-三氯三乙胺；单端孢菌素类(trichothecenes)（尤其是T-2毒素、疣孢菌素(verrucarin)A、杆孢菌素(roridin)A和蛇行菌素(anguidin)）；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)（

）；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)（“Ara-C”）；塞替派(thiotepa)；类紫杉醇(taxoids)，例如帕利他塞(paclitaxel)（

）、清蛋白改造的纳米颗粒剂型帕利他塞（ABRAXANE^TM）和多西他塞(doxetaxel)（

）；苯丁酸氮芥(chlorambucil)；6-硫鸟嘌呤(thioguanine)；巯基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；铂类似物，诸如顺铂(cisplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)(例如

)和卡铂(carboplatin)；长春药类(vincas)，其阻止微管蛋白聚合形成微管，包括长春碱(vinblastine)

长春新碱(vincristine)

长春地辛(vindesine)

和长春瑞滨(vinorelbine)

依托泊苷(etoposide)（VP-16）；异环磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；亚叶酸(leucovorin)；能灭瘤(novantrone)；依达曲沙(edatrexate)；道诺霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；伊本膦酸盐(ibandronate)；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类维A酸(retinoids)，诸如维A酸(retinoic acid)，包括贝沙罗汀(bexarotene)

二膦酸盐类(bisphosphonates)，诸如氯膦酸盐(clodronate)（例如

或

）、依替膦酸钠(etidronate)

NE-58095、唑来膦酸/唑来膦酸盐(zoledronicacid/zoledronate)阿伦膦酸盐(alendronate)帕米膦酸盐(pamidronate)替鲁膦酸盐(tiludronate)或利塞膦酸盐(risedronate)

以及曲沙他滨(troxacitabine)（1,3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物）；反义寡核苷酸，特别是抑制涉及异常细胞增殖的信号途经中的基因表达的反义寡核苷酸，诸如例如PKC-α、Raf、H-Ras和表皮生长因子受体(EGF-R)；疫苗，诸如

疫苗和基因疗法疫苗，例如

疫苗、

疫苗和

疫苗；拓扑异构酶1抑制剂（例如

rmRH（例如

BAY439006(sorafenib;Bayer)；SU-11248(sunitinib,

Pfizer)；哌立福辛(perifosine)，COX-2抑制剂（如塞来考昔(celecoxib)或艾托考昔(etoricoxib)），蛋白体抑制剂（例如PS341）；bortezomibCCI-779；tipifarnib（R11577）；orafenib，ABT510；Bcl-2抑制剂，诸如oblimersensodium（

）；pixantrone；EGFR抑制剂（见下文定义）；酪氨酸激酶抑制剂（见下文定义）；丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂，诸如雷帕霉素(rapamycin)(sirolimus,

)；法尼基转移酶抑制剂，诸如lonafarnib(SCH6636,SARASARTM)；及任何上述各项的药学可接受盐、酸或衍生物；以及两种或更多种上述各项的组合，诸如CHOP（环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松龙联合疗法的缩写）和FOLFOX（奥沙利铂（ELOXATIN^TM）联合5-FU和亚叶酸的治疗方案的缩写）。

本文中定义的化疗剂包括起调节、降低、阻断或抑制可促进癌生长的激素效果作用的“抗激素剂”或“内分泌治疗剂”类。它们自身可以是激素，包括但不限于：具有混合的激动剂/拮抗剂特性的抗雌激素类，包括他莫昔芬(tamoxifen)(NOLVADEX)、4-羟基他莫昔芬、托瑞米芬(toremifene)

艾多昔芬(idoxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、雷洛昔芬(raloxifene)曲沃昔芬(trioxifene)、那洛昔芬(keoxifene)，和选择性雌激素受体调节剂类(SERM)，诸如SERM3；没有激动剂特性的纯的抗雌激素类，诸如氟维司群(fulvestrant)

和EM800（此类药剂可阻断雌激素受体(ER)二聚化、抑制DNA结合、提高ER周转、和/或遏制ER水平）；芳香酶抑制剂类，包括类固醇芳香酶抑制剂类，诸如福美坦(formestane)和依西美坦(exemestane)和非类固醇芳香酶抑制剂类，诸如阿那曲唑(anastrozole)

来曲唑(letrozole)

和氨鲁米特(aminoglutethimide)，和其它芳香酶抑制剂类，包括伏氯唑(vorozole)醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)法倔唑(fadrozole)和4(5)-咪唑；促黄体生成激素释放激素激动剂类，包括亮丙瑞林(leuprolide)

和

戈舍瑞林(goserelin)、布舍瑞林(buserelin)和曲普瑞林(triptorelin)；性类固醇类(sex steroids)，包括妊娠素类(progestine)，诸如醋酸甲地孕酮和醋酸甲羟孕酮(medroxyprogesteroneacetate)，雌激素类，诸如二乙基己烯雌酚(diethylstilbestrol)和普雷马林(premarin)，和雄激素类/类视黄酸类，诸如氟甲睾酮(fluoxymesterone)、所有反式视黄酸(transretionic acid)和芬维A胺(fenretinide)；奥那司酮(onapristone)；抗孕酮类；雌激素受体下调剂类(ERD)；抗雄激素类，诸如氟他米特(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)和比卡米特(bicalutamide)；及任何上述物质的药学可接受盐、酸或衍生物；以及两种或更多种上述物质的组合。

“生长抑制剂”在用于本文时指在体外或在体内抑制细胞（诸如表达EGFL7的细胞）生长的化合物或组合物。因此，生长抑制剂可以是显著降低处于S期的细胞（诸如表达EGFL7的细胞）百分比的药剂。生长抑制剂的例子包括阻断细胞周期行进（处于S期以外的位置）的药剂，诸如诱导G1停滞和M期停滞的药剂。经典的M期阻断剂包括长春药类(vincas)（长春新碱(vincristine)和长春碱(vinblastine)）、紫杉烷类(taxanes)、和拓扑异构酶II抑制剂诸如多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、柔红霉素(daunorubicin)、依托泊苷(etoposide)和博来霉素(bleomycin)。那些阻滞G1的药剂也溢出进入S期停滞，例如DNA烷化剂类诸如他莫昔芬(tamoxifen)、泼尼松(prednisone)、达卡巴嗪(dacarbazine)、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)、顺铂(cisplatin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)和ara-C。更多信息可参见Mendelsohn和Israel编，《The Molecular Basis of Cancer》，第1章，题为“Cellcycle regulation,oncogenes,and antieioplastic drugs”，Murakaini等人，W.B.Saunders，Philadelphia，1995，例如第13页。紫杉烷类（紫杉醇(paclitaxel)和多西他赛(docetaxel)）是衍生自紫杉树的抗癌药。衍生自欧洲紫杉的多西他赛(

Rhone-Poulenc Rorer)是紫杉醇(

Bristol-MyersSquibb)的半合成类似物。紫杉醇和多西他赛促进由微管蛋白二聚体装配成微管并通过防止解聚使微管稳定，导致对细胞中有丝分裂的抑制。

“多柔比星(Doxorubicin)”是蒽环类抗生素。多柔比星的完整化学名是(8S-顺式)-10-[(3-氨基-2,3,6-三脱氧-α-L-来苏-吡喃己糖基)氧基]-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-8-(羟基乙酰基)-1-甲氧基-5,12-萘二酮。(8S-cis)-10-[(3-amino-2,3,6-trideoxy-α-L-lyxo-hexapyranosyl)oxy]-7,8,9,10-tetrahydro-6,8,11-trihydroxy-8-(hydroxyacetyl)-1-methoxy-5,12-naphthacenedione

含“Fc区多肽”指包含Fc区的多肽，诸如抗体或免疫粘附素（见下文定义）。Fc区的C-末端赖氨酸（依照EU编号系统的残基447）可以消除，例如在纯化多肽的过程中或者通过重组改造编码多肽的核酸。因此，依照本发明包含具有Fc区的多肽的组合物可包含具有K447的多肽、消除了所有K447的多肽、或具有与没有K447残基的多肽的混合物。

贯穿本说明书和权利要求书，词语“包含”、“包括”、“含有”或其变化形式应当理解为暗示包括所述整数或整数组，但不排除任何其它整数或整数组。

用途

本发明提供了可用于治疗癌症的方法和组合物，所述方法包括对需要此类治疗的个体施用有效剂量的抗EGFL7抗体。要理解，治疗方法中可以使用任何合适抗EGFL7抗体，包括单克隆和/或多克隆抗体、人抗体、嵌合抗体、亲和力成熟的抗体、人源化抗体、和/或抗体片段。

在一些实施方案中，以介于1mg/kg和15mg/kg之间的剂量施用抗EGFL7抗体。在其它实施方案中，以约5mg/kg、7.5mg/kg或10mg/kg的剂量施用抗EGFL7抗体。在本发明的方法中，可以以每两周374-400mg或每三周550-600mg的固定剂量(flat dose)施用抗EGFL7抗体。在一些实施方案中，以每两周400mg的固定剂量施用抗EGFL7抗体。在其它实施方案中，以每三周600mg的固定剂量施用抗EGFL7抗体。

在本文中的任何方法中，可以与本文中的抗体一起对受试者或患者施用有效量的选定药物（其中本文中的抗体是第一药物），该选定药物是另一种能治疗需要治疗的受试者中的状况的活性剂。例如，本发明的抗体可以与另一种抗体、化疗剂（包括化疗剂鸡尾酒）、抗血管发生剂、免疫抑制剂、细胞因子、细胞因子拮抗剂、和/或生长抑制剂共施用。此类第二药物的类型取决于多个因素，包括病症的类型、疾病的严重程度、患者的状况和年龄、采用的第一药物的类型和剂量、等。

例如，在本发明的抗体抑制肿瘤生长的情况中，可能特别希望将它与一种或多种也抑制肿瘤生长的其它治疗剂组合。例如，可以在治疗方案中，例如在治疗本文所述任何疾病（包括结肠直肠癌、肺癌、肝细胞癌、乳腺癌和/或胰腺癌）时组合本发明的抗体与抗血管发生剂，诸如抗VEGF抗体（例如

）和/或抗ErbB抗体（例如trastuzumab抗HER2抗体或结合HER2结构域II的抗HER2抗体，诸如OMNITARG^TMpertuzumab抗HER2抗体）。在有些情况中，前述组合可以使用双特异性抗体来实现。或者/另外，患者可以接受联合放疗（例如外线束辐照或使用放射性标记药剂诸如抗体的疗法）。上文所述此类联合疗法包括联合施用（其中在同一配制剂或分开的配制剂中包括两种或更多种药剂）和分开施用（在该情况中，本发明抗体的施用可发生于辅助疗法的施用之前和/或之后）。另外，与组合本发明的抗体与对细胞产生高度毒性的其它药剂中的化疗剂相比，组合该抗体与相对无细胞毒性的药剂诸如另一种生物学分子例如另一种抗体预期降低细胞毒性。

本文中抗体与一种或多种第二药物的组合治疗优选导致癌症体征或症状的改善。例如，相对于只用第二药物（例如化疗剂）治疗的患者，此类疗法可导致存活（总体存活和/或无进展存活）改善，和/或可导致客观响应*（部分的或完全的，优选完全的）。此外，本文中抗体和一种或多种第二药物的组合治疗优选对患者产生叠加的，更优选协同的（或大于叠加的）治疗好处。优选地，在此组合方法中，第二药物的至少一次施用和本文中抗体的至少一次施用之间的时间为约1个月或更短，例如约2周或更短。

对于癌症的治疗，第二药物优选为另一种抗体、化疗剂（包括化疗剂鸡尾酒）、抗血管发生剂、免疫抑制剂、前药、细胞因子、细胞因子拮抗剂、细胞毒性放疗剂、皮质类固醇、止吐剂、癌症疫苗、止痛剂、抗血管剂、和/或生长抑制剂。细胞毒剂包括与DNA相互作用的药剂、抗代谢物、拓扑异构酶I或II抑制剂、或纺锤体抑制剂或稳定剂（例如优选长春花生物碱，更优选选自长春碱、脱氧长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、长春匹定、长春磷汀、长春利定和长春氟宁），或化疗中使用的任何药剂，诸如5-FU、紫杉烷、多柔比星、或地塞米松。

在一些实施方案中，第二药物是另一种用于治疗癌症的抗体，诸如那些针对HER2/neu受体的胞外域的（例如曲妥单抗），或其功能性片段之一，泛HER抑制剂，Src抑制剂，MEK抑制剂，或EGFR抑制剂（例如抗EGFR抗体（诸如抑制EGFR的酪氨酸激酶活性的），其优选是小鼠单克隆抗体225，它的小鼠-人嵌合衍生物C225，或自此抗体225衍生的人源化抗体或衍生天然剂，二苯胺基酞酰亚胺，吡唑并或吡咯并吡啶并嘧啶，quinaziline，gefitinib，erlotinib，cetuximab，ABX-EFG，canertinib，EKB-569和PKI-166），或双重EGFR/HER-2抑制剂诸如lapatanib。别的第二药物包括alemtuzumab（CAMPATH^TM），FavID（IDKLH），糖基化改变的CD20抗体，诸如GA-101/GLYCART^TM，oblimersen（GENASENSE^TM），沙利度胺及其类似物，诸如lenalidomide（REVLIMID^TM），imatinib，sorafenib，ofatumumab（HUMAX-CD20^TM），抗CD40抗体，例如SGN-40，和抗CD-80抗体，例如galiximab。

止吐剂优选为盐酸昂丹司琼、盐酸格拉司琼、甲氧氯普胺(metroclopramide)、多潘立酮、氟哌啶醇、赛克力嗪、劳拉西泮、丙氯拉嗪、地塞米松、左美丙嗪、或托烷司琼。疫苗优选为基于GM-CSF DNA和细胞的疫苗、树突细胞疫苗、重组病毒疫苗、热休克蛋白（HSP）疫苗、同基因或自体肿瘤疫苗。止痛剂优选为布洛芬、萘普生、三水杨酸胆碱镁、或盐酸羟考酮。抗血管剂优选为贝伐单抗或rhuMAb-VEGF。别的第二药物包括抗增殖剂，诸如法呢基蛋白转移酶抑制剂、抗VEGF抑制剂、p53抑制剂、或PDGFR抑制剂。本文中的第二药物还包括生物学靶向疗法诸如抗体治疗以及小分子靶向疗法例如针对某些受体的。

本领域已经鉴定和知道许多抗血管发生剂，包括本文所列的那些，例如定义中所列的，还可参见例如Carmeliet和Jain,Nature407:249-257(2000);Ferrara等,Nature Reviews:Drug Discovery,3:391-400(2004);Sato Int.J.Clin.Oncol.,8:200-206(2003)。还可参见美国专利申请US20030055006。在一个实施方案中，抗EGFL7抗体与抗VEGF中和性抗体（或片段）和/或另一VEGF拮抗剂或VEGF受体拮抗剂（包括但不限于例如可溶性VEGF受体（例如VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3、神经毡蛋白（例如NRP1、NRP2））片段）、能够阻断VEGF或VEGFR的适体、中和性抗VEGFR抗体、VEGFR酪氨酸激酶(RTK)的低分子量抑制剂、VEGF的反义策略、针对VEGF或VEGF受体的核酶、VEGF的拮抗性变体、及其任意组合联合使用。或者/另外，任选的是，可以在VEGF拮抗剂和其它药剂外对患者共施用两种或更多血管发生抑制剂。在某些实施方案中，可以与抗EGFL7抗体、VEGF拮抗剂和抗血管发生剂联合施用一种或多种别的治疗剂，例如抗癌剂。

上文（例如“化疗剂”的定义中）描述了在本文中有用的化疗剂。

此类第二药剂可以在施用本文中抗体后48小时内，或者在所述药剂后24小时内、或12小时内、或3-12小时内施用，或者可以在预先选择的一段时间里施用，其优选是约1-2天。另外，此类药剂的剂量可以是亚治疗性的。

本文中的抗体可以与第二药剂同时、序贯、或交替施用，或者在无响应性时与其它疗法同时、序贯、或交替施用。如此，第二药剂的联合施用包括使用分开的配制剂或单一的药物配制剂的共施用（同时施用），及任一次序的序贯施用，其中优选有一段时间所有（两种或更多种）药剂同时发挥其生物学活性。所有这些第二药剂可以彼此组合或者单独与第一药剂一起使用，因此表述“第二药剂”在用于本文时不意味着它是第一药剂以外的唯一药剂。如此，第二药剂不必是一种药剂，而是可以包含超过一种此类药剂或由其组成。

本文所列的这些第二药剂通常以与第一药剂相同的剂量和施用途径或者第一药剂的剂量的大约1-99%使用。如果确实使用此类第二药剂，那么优选它们以低于不存在第一药剂时的量使用，尤其是在第一药剂的初始给药之后的后续给药中，以便消除或降低由此引起的副作用。

本发明提供了用于治疗患者中的肺癌例如非小细胞肺癌(NSCLC)的方法，包括剂量给药方案，该剂量给药方案包含多个治疗周期，其中每个周期的第1天对患者施用200mg/m²帕利他赛、卡铂（AUC6mg/ml）、15mg/kg贝伐单抗和600mg抗EGFL7抗体，其中每21天重复每个周期。在一些实施方案中，施用帕利他赛和卡铂直至疾病进展或长达6个周期。在一些实施方案中，对患者施用抗EGFL7抗体和/或贝伐单抗直至疾病进展或长达34个周期。

本发明还提供了用于治疗患者中的肺癌例如NSCLC的方法，包括剂量给药方案，该剂量给药方案包含多个治疗周期，其中4个周期每个的第1天对患者施用卡铂（AUC6mg/ml）、培美曲赛500mg/m²、15mg/kg贝伐单抗和600mg抗EGFL7抗体，其中每个后续周期的第1天对患者施用培美曲赛500mg/m²、15mg/kg贝伐单抗和600mg抗EGFL7抗体，其中每21天重复每个周期。在一些实施方案中，对患者施用抗EGFL7抗体和/或贝伐单抗直至疾病进展。

本发明还提供了用于治疗患者中的结肠直肠癌的方法，包括剂量给药(dosing)方案，该剂量给药方案包含多个治疗周期，其中第1个周期的第1天对患者施用85mg/m²奥沙利铂、400mg/m²5-氟尿嘧啶(5-FU)、400mg/m²亚叶酸、5mg/kg贝伐单抗和400mg抗EGFL7抗体，其中每个后续周期的第1天对患者施用85mg/m²奥沙利铂、2400mg/m²5-FU、400mg/m²亚叶酸、5mg/kg贝伐单抗和400mg抗EGFL7抗体，其中每14天重复每个周期。在一些实施方案中，施用奥沙利铂长达8个周期。在一些实施方案中，施用5-FU、亚叶酸、贝伐单抗和/或抗EGFL7抗体直至疾病进展或长达52个周期。

本发明的抗体(以及附加的治疗剂)通过任何适合的方式给药，包括肠胃外、皮下、腹膜内、肺内和鼻内给药，以及视局部治疗需要，损伤区给药。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。此外，抗体适于通过脉冲式输注给药，特别是使用递减剂量的抗体。部分取决于给药是否是短期或长期的，可以是任何适合的途径如通过注射，例如静脉或皮下注射。

制品

在本发明的另一个方面，提供了包含可用于治疗、预防和/或诊断上文所述病症的物质的制品。制品包括容器和贴在所述容器上或与其相联的标签或包装插页。合适的容器包括例如瓶子、小管、注射器等。容器可用各种材料制成，诸如玻璃或塑料。容器中装有其自身或在联合其它组合物时有效治疗、预防和/或诊断疾患的组合物，而且可具有无菌存取口（例如容器可以是具有皮下注射针可刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小管）。组合物中的至少一种活性剂是本发明的抗体。标签或包装插页指示该组合物用于治疗选择的疾患，诸如癌症。此外，制品可包括(a)其中装有组合物的第一容器，其中所述组合物包含本发明的抗体；和(b)其中装有组合物的第二容器。本发明此实施方案中的制品还可包括指示第一和第二抗体组合物可用于治疗特定疾患例如癌症的包装插页。或者/另外，制品还可包括第二（或第三）容器，其中装有药学可接受的缓冲剂，诸如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏(Ringer)溶液和右旋糖溶液。它还可包括商业和用户立场上所需的其它物质，包括其它缓冲剂、稀释剂、滤器、针头和注射器。

下面是本发明方法和组合物的实施例。应当理解，根据上文提供的一般描述，可实施各种其它实施方案。

实施例

实施例1：抗EGFL7对抗VEGF活性的增强是剂量依赖性的

这个实施例证明抗EGFL7疗法增强抗VEGF疗法的总体存活好处，该增强是剂量依赖性的，而且最佳剂量在小鼠中是每周两次1mg/kg，这对应于人中的每两周约5mg/kg。我们使用“K-rasG12D;;p53-缺无”驱动的NSCLCGEMM(Johnson et al(2001)Nature410:1111-16;Jackson et al(2001)Genes&Development15:3243-48;Singh et al(2010)Nature Biotechnology28:585-93)测试了抗EGFL7MAb增强抗VEGF活性的能力。对荷瘤小鼠进行计算机断层扫描以评估肿瘤负荷，并随机分入均值肿瘤负荷相等的五个小组。我们给荷瘤小鼠施用了抗VEGF MAb（mB20-4.1.1；2008年12月1日提交的WO2009/073160），单独或与鼠抗EGFL7抗体18F7（mu18F7；2010年5月7日提交的US-2010-0285009-A1）组合。每周两次以5mg/kg施用抗VEGF抗体（或对照抗豚草抗体），每周两次以0.1mg/kg、1.0mg/kg、和10mg/kg施用抗EGFL7抗体。如表1所示，抗EGFL7抗体的施用在所有测试剂量增强抗VEGF疗法的活性，但是有趣的是，最佳剂量发生于中间抗EGFL7剂量1mg/kg。

表1：抗EGFL7对抗VEGF活性的增强

抗体	小鼠数目	p值	HR
				B20-4.1.1(5mg/kg)	53	—	—
B20-4.1.1(5mg/kg)+m18F17(0.1mg/kg)	20	0.9722	0.79
				B20-4.1.1(5mg/kg)+m18F17(1mg/kg)	46	0.0130	0.56
B20-4.1.1(5mg/kg)+m18F17(10mg/kg)	37	0.4600	0.55

我们观察到，小鼠肿瘤模型中的一群循环祖细胞（CD34^高CD31^低CD45^低；“CPC”）在抗EGFL7治疗之后减少。这些细胞易于自血液分离和定量，而且我们在来自参加Ia期和Ib期，剂量扩大和扩充临床试验的人患者的样品中作为药效学(PD)生物标志物测量了CPC。图1概述了这些Ia期和Ib期试验的设计。在EDTA管中收集来自患者的血液。使用100ul全血在Trucount^TM管中用裂解/无清洗流式细胞术方法测量CPC。使用下述抗体偶联物进行染色：CD45-APC-Cy7，CD34-APC，CD31-PE-Cy7和CD133-PE。包括核染料（

16）来区分细胞与残骸，并使用适宜同种型对照来设置门。在FACSCanto^TMII细胞仪上获取样品，并使用FACSDiva^TM软件（BD Biosciences，CA）进行分析。与实施例1中观察到的功效数据一致，我们在人患者中观察到，CPC水平的最大变化发生于5mg/kg剂量水平（图2和3）。

我们还引入动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)，作为图1中概述的Ia期和Ib期临床试验中的PD标志物。在第1个周期第1天(C1D1)的给药之前获得两次基线扫描以评估再现性，并在1b期中的C1D3和C1D13实施治疗中DCE-MRI（每两周给药）。将数据拟合一种动态模型以推导血管参数的中值，诸如Ktrans，并使用一种线性混合效应模型来汇总结果。DCE-MRI测量的最大变化发生于5mg/kg剂量，与其它结果一致。

总之，PD数据支持抗EGFL7在人中每两周5mg/kg的剂量给药。而且，我们观察到该抗体展现出IgG1单克隆抗体典型的线性药动学特性，消除半衰期为大约2周。这些PK数据支持每2或3周剂量给药来维持期望的药物暴露及与最佳剂量给药每两周5mg/kg等同的固定剂量给药（例如每两周375-400mg或每三周550-600mg）。

实施例2：评估抗EGFL7抗体与卡铂、帕利他赛和贝伐单抗组合在尚未为晚 期疾病接受过在先化疗的具有晚期或复发性非鳞状非小细胞肺癌的患者中 的安全性和功效的研究

进行一项II期、多中心、随机化、双盲、安慰剂对照的试验来评估抗EGFL7抗体与帕利他赛+卡铂+贝伐单抗（抗VEGF）疗法组合在具有组织学或细胞学证明不可手术、局部晚期、转移性（IV期）、或复发性非鳞状NSCLC的患者中的功效和安全性。大约100名达到研究选择标准（见下文）的患者参加并随机分入两个治疗分支之一：

·对照分支：帕利他赛+卡铂+贝伐单抗加安慰剂

·实验分支：帕利他赛+卡铂+贝伐单抗加抗EGFL7抗体

研究治疗以每21天重复的周期给予且由第1天IV施用帕利他赛（200mg/m2）、第1天IV施用卡铂（AUC6mg/mL·min，根据Calvert方程）、和第1天IV施用贝伐单抗（15mg/kg）组成。实验分支中的患者在第1周期第1天以固定剂量600mg IV接受抗EGFL7抗体，接着是每21天的后续剂量600mg。对照分支中的患者依照相同进度表接受等同剂量的安慰剂。研究治疗施用的优选次序是帕利他赛、卡铂、和贝伐单抗，接着是抗EGFL7/安慰剂。施用帕利他赛和卡铂直至疾病进展或不可接受的毒性，最多6个周期；施用贝伐单抗和抗EGFL7/安慰剂直至疾病进展或不可接受的毒性，最多24个月（34个周期）。治疗中止时，大约每3个月跟踪患者的存活情况。

主要结果测量是无进展存活（定义为自随机化至基于RECIST1.1标准的进展的第一次发生或研究中任何原因的死亡的时间）。次要结果测量包括客观响应（部分响应加完全响应）（由调查人员使用RECIST1.1确定）、客观响应的持续时间（定义为有记录的客观响应的第一次发生直至进展或研究中任何原因的死亡的时间）、和总体存活（定义为自随机化直至任何原因的死亡的时间）。

对于患者的选择，进入标准包括组织学或细胞学证明不可手术（IV期）或复发性非鳞状NSCLC。基于单独痰细胞学的非鳞状NSCLC的诊断是不可接受的（混合肿瘤应当依照优势细胞类型来归类），ECOG性能状态0或1、预期寿命>12周、可测量的疾病（由RECIST1.1定义）、和足够的血液学和终末器官功能。排除标准包括在第1周期第1天之前用于治疗IV期或复发性NSCLC的在先疗法（包括化疗、抗体疗法、酪氨酸激酶抑制剂、放疗、免疫疗法、激素疗法或调查性疗法）（不排除为NSCLC接受在先辅助化疗或放疗的患者，如果自辅助疗法完成直至疾病进展的时间间隔超过12个月的话），在参加之前28天内用任何其它调查性药剂治疗或参与另一项有治疗意图的临床试验，在随机化之前5年内除NSCLC以外的恶性（除了充分治疗的宫颈、基底或鳞状细胞皮肤癌的原位癌），有治愈意图的手术治疗局部前列腺癌，有治愈意图的手术治疗原位导管癌，妊娠和哺乳妇女，和需要IV抗生素的活动性感染。贝伐单抗特异性排除包括组织学或细胞学证明不可手术、局部晚期、混合非小细胞和小细胞肿瘤或混合腺鳞癌（鳞状成分占优势），成像上肿瘤侵入主要血管的证据，CNS转移的证据，在治疗第1天之前6个月内中风或TIA的历史，在第1天之前6个月内重大血管病，和在第1天之前28天内大手术规程、切开活检、或重大外伤性损伤。

实施例3：评估抗EGFL7抗体与FOLFOX和贝伐单抗组合在具有先前未治疗 的转移性结肠直肠癌的患者中的安全性和功效的研究

进行一项II期、多中心、随机化、双盲、安慰剂对照的试验来评估抗EGFL7抗体与改良FOLFOX-6（mFOLFOX-6）+贝伐单抗（抗VEGF）疗法组合在具有转移性结肠直肠癌(mCRC)的患者中的功效和安全性。大约120名达到研究选择标准（见下文）的患者参加并随机分入两个治疗分支之一：

对照分支：mFOLFOX-6+贝伐单抗加安慰剂

实验分支：mFOLFOX-6+贝伐单抗加MEGF0444A

研究治疗以每14天重复的周期给予且由mFOLFOX-6+贝伐单抗组成。实验分支中的患者另外在第1周期第1天以固定剂量400mg IV接受抗EGFL7抗体，接着是每14天的后续剂量400mg。对照分支中的患者依照相同进度表接受等同剂量的安慰剂。奥沙利铂以起始剂量85mg/m²施用多至8个周期。施用5-氟尿嘧啶（5-FU；起始推注和输注剂量分别400mg/m²和2400mg/m²）、亚叶酸（起始剂量400mg/m²）、贝伐单抗（5mg/kg）和抗EGFL7抗体/安慰剂直至疾病进展或不可接受的毒性，最多24个月（多至52个周期）。如果患者部分或完全停止化疗，那么他们继续服用贝伐单抗和抗EGFL7抗体/安慰剂直至有记录的疾病进展或不可接受的毒性，最多24个月。

主要结果测量是无进展存活（定义为自随机化至基于RECIST1.1标准的进展的第一次发生或研究中任何原因的死亡的时间）。次要结果测量包括客观响应（部分响应加完全响应）（由调查人员使用RECIST1.1确定）、客观响应的持续时间（定义为有记录的客观响应的第一次发生直至进展或研究中任何原因的死亡的时间）、和总体存活（定义为自随机化直至任何原因的死亡的时间）。

对于患者的选择，进入标准包括不适合潜在治愈性切除、带有至少一处可测量的转移性损害（由RECIST1.1定义）的组织学或细胞学确认的结肠直肠癌(CRC)、ECOG性能状态0或1、和足够的血液学和终末器官功能。排除标准包括在第1周期第1天之前用于治疗mCRC的在先系统疗法（包括化疗、抗体疗法、酪氨酸激酶抑制剂、放疗、免疫疗法、激素疗法或调查性疗法），在第1周期第1天之前28天内用任何其它调查性药剂治疗或参与另一项有治疗意图的临床试验，在随机化之前5年内除CRC以外的恶性（除了转移或死亡风险可忽略的），哺乳妇女，临床怀疑或确认的CNS转移或癌性脑膜炎，需要IV抗生素的活动性感染，不受非类固醇抗炎药、吸入性皮质类固醇、或

10mg/天泼尼松等同物控制的活动性自身免疫病，已知的临床显著的肝病（包括活动性病毒性、酒精性、或其它肝炎，或肝硬化）。贝伐单抗特异性排除包括在治疗第1天之前6个月内中风或TIA的历史，在第1天之前6个月内重大血管病，和在第1天之前28天内大手术、切开活检、或重大外伤性损伤。

Claims (53)

1.一种用于治疗人患者中的癌症的方法，包括施用抗EGFL7抗体，该方法包括以介于1mg/kg和15mg/kg之间的剂量施用该抗体。

2.一种用于治疗人患者中的癌症的方法，包括施用抗EGFL7抗体，该方法包括以选自下组的固定剂量施用该抗体：(a)每两周375-400mg和(b)每三周550-600mg。

3.权利要求2的方法，其中该固定剂量为每两周375-400mg。

4.权利要求2的方法，其中该固定剂量为每三周550-600mg。

5.一种用于治疗人患者中的癌症的方法，包括施用抗EGFL7抗体，该方法包括对该患者施用第一剂抗EGFL7抗体和对该患者施用第二剂抗EGFL7抗体，其中该第一剂和该第二剂均介于1mg/kg和15mg/kg之间且该第二剂在该第一剂之后1-4周。

6.权利要求5的方法，其中该第一剂和该第二剂均介于5mg/kg和7.5mg/kg之间且该第二剂在该第一剂之后2-3周。

7.权利要求6的方法，其中该第一剂和该第二剂均为5mg/kg且该第二剂在该第一剂之后2周。

8.权利要求6的方法，其中该第一剂和该第二剂均为7.5mg/kg且该第二剂在该第一剂之后3周。

9.权利要求1-8任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含可变域，该可变域包含下述HVR序列：

(i)HVR-L1，其包含KASQSVDYSGDSYMS(SEQ ID NO：1)；

(ii)HVR-L2，其包含GASYRES(SEQ ID NO：2)；

(iii)HVR-L3，其包含QQNNEEPYT(SEQ ID NO：3)；

(iv)HVR-H1，其包含GHTFTTYGMS(SEQ ID NO：4)；

(v)HVR-H2，其包含GWINTHSGVPTYADDFKG(SEQ ID NO：5)；和

(vi)HVR-H3，其包含LGSYAVDY(SEQ ID NO：6)。

10.权利要求9的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGHTFTTYGMSWVRQAPGKGLEWVGWINTHSGVPTYADDFKGRFTISLDNSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGSYAVDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：7)。

11.权利要求9的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：

EIQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGHTFTTYGMSWVRQAPGKGLEWMGWINTHSGVPTYADDFKGRFTISLDNSKSTAYLQMNSLRAEDTAVYFCARLGSYAVDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：8)。

12.权利要求9-11任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQSVDYSGDSYMSWYQQKPGKAPKLLIYGASYRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQNNEEPYTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：9)。

13.权利要求1-8任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含可变域，该可

变域包含下述HVR序列：

(i)HVR-L1，其包含RTSQSLVHINGITYLH(SEQ ID NO：10)；

(ii)HVR-L2，其包含RVSNRFS(SEQ ID NO：11)；

(iii)HVR-L3，其包含GQSTHVPLT(SEQ ID NO：12)；

(iv)HVR-H1，其包含GYTFIDYYMN(SEQ ID NO：13)；

(v)HVR-H2，其包含GDINLDNGGTHYNQKFKG(SEQ ID NO：14)；

和

(vi)HVR-H3，其包含AREGVYHDYDDYAMDY(SEQ ID NO：15)。

14.权利要求13的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFIDYYMNWVRQAPGKGLEWVGDINLDNGGTHYNQKFKGRFTISRDKSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGVYHDYDDYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：16)。

15.权利要求13或14的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRTSQSLVHINGITYLHWYQQKPGKAPKLLIYRVSNRFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCGQSTHVPLTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：17)。

16.权利要求1-8任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含可变域，该可

变域包含下述HVR序列：

(i)HVR-L1，其包含RTSQSLVHINAITYLH(SEQ ID NO：18)；

(ii)HVR-L2，其包含RVSNRFS(SEQ ID NO：11)；

(iii)HVR-L3，其包含GQSTHVPLT(SEQ ID NO：12)；

(iv)HVR-H1，其包含GYTFIDYYMN(SEQ ID NO：13)；

(v)HVR-H2，其包含GDINLDNSGTHYNQKFKG(SEQ ID NO：19)；

和

(vi)HVR-H3，其包含AREGVYHDYDDYAMDY(SEQ ID NO：15)。

17.权利要求16的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：

VQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFIDYYMNWVRQAPGKGLEWVGDINLDNSGTHYNQKFKGRFTISRDKSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGVYHDYDDYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：20)。

18.权利要求16或17的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRTSQSLVHINAITYLHWYQQKPGKAPKLLIYRVSNRFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCGQSTHVPLTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：21)。

19.权利要求1-18任一项的方法，其中该抗体在10、20或30分钟的输注中施用。

20.权利要求1-19任一项的方法，其进一步包括施用另一种抗血管发生剂的步骤。

21.权利要求20的方法，其中该另一种抗血管发生剂是抗血管内皮生长因子(VEGF)拮抗剂。

22.权利要求21的方法，其中所述抗VEGF拮抗剂是抗VEGF抗体。

23.权利要求22的方法，其中所述抗VEGF抗体是贝伐单抗。

24.权利要求1-19任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体是双特异性抗体。

25.权利要求24的方法，其中所述双特异性抗体结合VEGF。

26.权利要求24的方法，其中所述双特异性抗体与贝伐单抗结合相同VEGF表位。

27.权利要求1-26任一项的方法，其中所述癌症选自下组：乳腺癌，白血病，鳞状细胞癌，小细胞肺癌，非小细胞肺癌，胃肠癌，胰腺癌，成胶质细胞瘤，宫颈癌，卵巢癌，肝癌，膀胱癌，肝瘤，结肠癌，结肠直肠癌，子宫内膜癌，唾液腺癌，肾癌，肝癌，前列腺癌，外阴癌，甲状腺癌，肝癌瘤和各种类型的头和颈癌。

28.权利要求27的方法，其中所述癌症是乳腺癌、NSCLC或CRC。

29.权利要求1-28任一项的方法，其进一步包括施用有效量的化疗剂。

30.一种制品，其包括容器、该容器内的组合物、和标签或包装插页，该组合物包含抗EGFL7抗体，该标签或包装插页印有以介于1mg/kg和15mg/kg之间的剂量施用该抗体的用法说明书。

31.一种制品，其包括容器、该容器内的组合物、和标签或包装插页，该组合物包含抗EGFL7抗体，该标签或包装插页印有对患者施用第一剂抗EGFL7抗体和对患者施用第二剂抗EGFL7抗体的用法说明书，其中该第一剂和该第二剂均介于1mg/kg和15mg/kg之间，且该第二剂在该第一剂之后1-4周。

32.权利要求31的制品，其中该第一剂和该第二剂均介于5mg/kg和7.5mg/kg之间且该第二剂在该第一剂之后2-3周。

33.权利要求32的制品，其中该第一剂和该第二剂均为5mg/kg且该第二剂在该第一剂之后2周。

34.权利要求32的制品，其中该第一剂和该第二剂均为7.5mg/kg且该第二剂在该第一剂之后3周。

35.一种制品，其包括容器、该容器内的组合物、和标签或包装插页，该组合物包含抗EGFL7抗体，该标签或包装插页印有以选自下组的固定剂量施用该抗体的用法说明书：(a)每两周375-400mg和(b)每三周550-600mg。

36.权利要求35的制品，其中该固定剂量为每两周375-400mg。

37.权利要求35的制品，其中该固定剂量为每三周550-600mg。

38.一种用于治疗人患者中的NSCLC的方法，其包括剂量给药方案，该剂量给药方案包含多个治疗周期，其中每个周期的第1天对该患者施用200mg/m²帕利他赛、卡铂（AUC6mg/ml min）、15mg/kg贝伐单抗、和600mg抗EGFL7抗体，每21天重复每个周期。

39.权利要求38的方法，其中施用帕利他赛和卡铂直至疾病进展或长达6个周期。

40.权利要求38的方法，其中施用贝伐单抗和抗EGFL7抗体直至疾病进展或长达34个周期。

41.一种用于治疗人患者中的结肠直肠癌的方法，其包括剂量给药方案，该剂量给药方案包含多个治疗周期，其中第一个周期的第1天对该患者施用85mg/m²奥沙利铂、400mg/m²5-氟尿嘧啶(5-FU)、400mg/m²亚叶酸、5mg/kg贝伐单抗、和400mg抗EGFL7抗体，且其中每个后续周期的第1天对该患者施用85mg/m²奥沙利铂、2400mg/m²5-FU、400mg/m²亚叶酸、5mg/kg贝伐单抗、和400mg抗EGFL7抗体，每14天重复每个周期。

42.权利要求41的方法，其中施用奥沙利铂长达8个周期。

43.权利要求41的方法，其中施用5-FU、亚叶酸、贝伐单抗和抗EGFL7抗体直至疾病进展或长达52个周期。

44.权利要求38-43任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含可变域，该可变域包含下述HVR序列：

(i)HVR-L1，其包含KASQSVDYSGDSYMS(SEQ ID NO：1)；

(ii)HVR-L2，其包含GASYRES(SEQ ID NO：2)；

(iii)HVR-L3，其包含QQNNEEPYT(SEQ ID NO：3)；

(iv)HVR-H1，其包含GHTFTTYGMS(SEQ ID NO：4)；

(v)HVR-H2，其包含GWINTHSGVPTYADDFKG(SEQ ID NO：5)；和

(vi)HVR-H3，其包含LGSYAVDY(SEQ ID NO：6)。

45.权利要求44的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGHTFTTYGMSWVRQAPGKGLEWVGWINTHSGVPTYADDFKGRFTISLDNSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARLGSYAVDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：7)。

46.权利要求44的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：

EIQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGHTFTTYGMSWVRQAPGKGLEWMGWINTHSGVPTYADDFKGRFTISLDNSKSTAYLQMNSLRAEDTAVYFCARLGSYAVDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：8)。

47.权利要求44-46任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQSVDYSGDSYMSWYQQKPGKAPKLLIYGASYRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQNNEEPYTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：9)。

48.权利要求38-43任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含可变域，该可变域包含下述HVR序列：

(i)HVR-L1，其包含RTSQSLVHINGITYLH(SEQ ID NO：10)；

(ii)HVR-L2，其包含RVSNRFS(SEQ ID NO：11)；

(iii)HVR-L3，其包含GQSTHVPLT(SEQ ID NO：12)；

(iv)HVR-H1，其包含GYTFIDYYMN(SEQ ID NO：13)；

(v)HVR-H2，其包含GDINLDNGGTHYNQKFKG(SEQ ID NO：14)；

和

(vi)HVR-H3，其包含AREGVYHDYDDYAMDY(SEQ ID NO：15)。

49.权利要求48的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFIDYYMNWVRQAPGKGLEWVGDINLDNGGTHYNQKFKGRFTISRDKSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGVYHDYDDYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：16)。

50.权利要求48或49的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRTSQSLVHINGITYLHWYQQKPGKAPKLLIYRVSNRFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCGQSTHVPLTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：17)。

51.权利要求38-43任一项的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含可变域，该可变域包含下述HVR序列：

(i)HVR-L1，其包含RTSQSLVHINAITYLH(SEQ ID NO：18)；

(ii)HVR-L2，其包含RVSNRFS(SEQ ID NO：11)；

(iii)HVR-L3，其包含GQSTHVPLT(SEQ ID NO：12)；

(iv)HVR-H1，其包含GYTFIDYYMN(SEQ ID NO：13)；

(v)HVR-H2，其包含GDINLDNSGTHYNQKFKG(SEQ ID NO：19)；

和

(vi)HVR-H3，其包含AREGVYHDYDDYAMDY(SEQ ID NO：15)。

52.权利要求51的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述重链可变区序列：

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFIDYYMNWVRQAPGKGLEWVGDINLDNSGTHYNQKFKGRFTISRDKSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGVYHDYDDYAMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：20)。

53.权利要求51或52的方法，其中所述抗EGFL7抗体包含下述轻链可变区序列：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRTSQSLVHINAITYLHWYQQKPGKAPKLLIYRVSNRFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCGQSTHVPLTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO：21)。

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