CN103467613A - 一种姬松茸复合多糖的制备方法及其产品 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种姬松茸复合多糖的制备方法及其产品，该方法为：利用液体深层发酵培养姬松茸菌丝体，从培养的姬松茸菌丝体中提取多糖A；利用固体发酵培养姬松茸菌丝体和子实体，从培养的姬松茸菌丝体中提取多糖B，从培养的姬松茸子实体中提取多糖C；将前述提取的多糖A、多糖B和多糖C按1：1：1的质量比进行混合，将混合物灭菌、分装，获得姬松茸复合多糖。利用本发明，降低了姬松茸多糖的生产成本，获得的姬松茸复合多糖重金属含量不超标，为姬松茸多糖在医药领域和保健品行业中的工业化开发奠定了基础。

Description

一种姬松茸复合多糖的制备方法及其产品

技术领域

本发明属于保健食品加工技术领域，具体涉及一种姬松茸复合多糖的制备方法。

背景技术

姬松茸(agaricus blazeimurill，ABM)，又称巴西蘑菇、小松菇、柏氏蘑菇，属担子菌亚门层菌纲伞菌目蘑菇(黑伞)科蘑菇(黑伞)属，是一种食药兼用的名贵真菌。原产于美国加利福尼亚州南部、佛罗里达州海边草地、巴西东南部圣保罗市周边的草原以及秘鲁等国。姬松茸过去常作为治疗癌症、糖尿病和高胆固醇的药物，因为其富含免疫调节和抗肿瘤活性物质。

近年来，国内外研究人员对姬松茸提取物及作用机理进行了大量的研究。姬松茸多糖是使其具有药用功效的主要生物学活性物质。据日本东京大学医学部国立癌症研究中心报道，姬松茸活性多糖的抗癌作用明显高于其它11种已知具有抗癌作用的大型真菌。研究表明，姬松茸子实体沸水提取物不但具有刺激小鼠T细胞和巨噬细胞分泌白细胞介素IL-lβ和IL-6的作用，而且能刺激小鼠产生大量抗体。姬松茸多糖可刺激小鼠淋巴细胞分泌免疫球蛋白IgG和lgM，白细胞介素IL-6、IL-2和IL-4及干扰素IFN，从而提高了小鼠的免疫功能。进一步研究表明，姬松茸多糖可促进免疫器官的增殖，延缓其衰退，促进迟发型超敏反应的发生，能增强巨噬细胞的吞噬功能。因此，姬松茸多糖可以通过增强非特异性免疫和促进细胞免疫来发挥作用。姬松茸多糖的抗肿瘤活性，存在浓度和时间的依赖性。随着姬松茸多糖添加量的增多和作用时间的延长，其对肿瘤的抑制作用也加强。

从姬松茸中提取的多糖，常含有蛋白质组分。采用热水浸提法对姬松茸子实体进行分离纯化，从红外光谱和高压液相层析测定，其中一种成份是α-型吡喃环多糖，相对分子量为52500，气相色谱分析表明，其单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖及少量阿拉伯糖。通过分级醇沉和凝胶过滤法从姬松茸子实体中分离出3种成份：ABM-I、ABM-II及ABM-Ⅲ，其分子量分别为>2.0×10⁶、1.4×10⁶和3.8×10⁵，对ABM-I组分的结构进行完全酸水解和光谱法分析，表明其含有少量结合蛋白，其主链为α型1→6-D-吡喃葡聚糖。姬松茸多糖主要由α构型构成，只有少量β构型。其主链部分主要由1→6-Gal、1→6-Glc、1→2，6-Gal构成，分支点糖残基是1→2，6-Gal。1→Man、1→Gal形成主链的非还原末端，支链为1→6-Glc、1→6-Gal、1→6-Man及少量1→3-Man、1→2-Gal，该多糖能够提高小鼠的免疫功能。

真菌多糖的获得方法一般分两种：一是从固体培养的子实体中提取；二是通过液体发酵获得。目前国内外对姬松茸多糖的研究主要集中在子实体提取，近几年来，相继有学者在液体深层发酵方面进行了研究。相对于从子实体提取多糖，液体深层发酵具有以下几方面的优势：1)生产成本低，原料来源广，2)生产迅速，生产周期大为缩短；3)生产过程不受地域性及季节性限制，劳动强度小，可进行工业化生产；4)有效减少污染，由于食用菌栽培过程中会富集重金属，导致重金属超标。邹积宏等对不同来源的姬松茸菌体多糖含量进行了比较，发现采用深层发酵法培养姬松茸菌丝体提取出的多糖含量比鲜品子实体、干品子实体所得到的多糖含量要高（黑龙江医药，2008），表明液体发酵能够大规模生产姬松茸多糖，实现工业化生产。

多糖的药效活性与其分子结构和分子量水平密切相关。研究表明较大分子量（200万左右）和较小分子量（1万-5万）的姬松茸多糖均有较高的肿瘤抑制率（Takashi,Agric Biol Chem,1990）。因此，了解姬松茸子实体多糖的分子量情况及各段分子量多糖的质量分布情况对其大规模的开发生产有着非常大的参考价值。比较不同来源的姬松茸粗多糖的HPLC谱图发现，菌丝体多糖和胞外多糖中分子量小的组分含量相对较高，而子实体粗多糖中分子量大的组分含量较高（孙培龙，浙江大学博士论文，2007）。因此，开发一种包含各级分子量多糖成分的姬松茸复合多糖，对于开发姬松茸多糖在医药领域和保健品行业中的应用具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种姬松茸复合多糖的制备方法，通过该方法制备的各级分子量范围内多糖成份均匀的姬松茸复合多糖，能广泛应用于医药领域和保健品行业中。

为达到上述目的，本发明的技术方案是：

一种姬松茸复合多糖的制备方法，包括以下步骤：

（1）利用液体深层发酵培养姬松茸菌丝体，从培养的姬松茸菌丝体中提取多糖A；

（2）利用固体发酵培养姬松茸菌丝体和子实体，从培养的姬松茸菌丝体中提取多糖B，从培养的姬松茸子实体中提取多糖C；

（3）将前述提取的多糖A、多糖B和多糖C进行混合，将混合物灭菌、分装，获得姬松茸复合多糖。

需要说明的是：上述步骤（1）和步骤（2）并没有时间先后顺序的限定。两个步骤可以同时进行，也可以先进行步骤（1）再进行步骤（2），或者先进行步骤（2）再进行步骤（1）。

较佳地，所述利用液体深层发酵培养姬松茸菌丝体的条件如下：

发酵培养基为：玉米粉2%，豆饼粉0.3%，蔗糖2%，酵母粉0.2%，KH₂PO₄0.2%，MgSO₄·7H₂O0.1%，余量为水。采用分级发酵方法：将斜面菌种转接到装有种子培养基的三角瓶中，25-28℃，振荡培养7-10d，培养的菌种分三级发酵；第1级为摇瓶发酵培养，将前述种子培养基中培养的菌丝体打碎，按5-10%接种量接种到三角瓶中，25-28℃，振荡培养4-6d；第2级为5升罐发酵培养，将前述摇瓶培养的菌丝体打碎，按5-10%接种量接种到5升罐发酵，罐温：25-28℃，风量：1：0.3，转速：100r/min，发酵时间为36h；第3级为5吨罐发酵培养，将前述5升罐液体培养的菌丝体打碎，按5-10%接种量接种到5吨罐发酵，罐温：25-28℃，风量：1：0.3，转速：100r/min，发酵至50%液体形成胶状物后，终止发酵。

较佳地，所述利用固体发酵培养姬松茸菌丝体和子实体的条件如下：

培养基配方为：甘蔗渣80%，麸皮17%，玉米粉1%，蔗糖1%，石膏粉1%，加水量为干培养料100%；按照所述配方配好培养基后，将培养基先堆料预发酵，然后装聚乙烯塑料袋，常压灭菌6小时。培养方法为：将斜面菌种转接到装有种子培养基的三角瓶中，25-28℃，振荡培养7-10d；在无菌接种室将种子培养基中培养的菌种接种到前述含有固体发酵培养基的聚乙烯塑料袋中；将接种好的菌棒放入塑料大棚发酵，纵横交错整齐码放，高度在1.2-1.5米，大棚上覆盖双层黑色塑料薄膜，温度保持在25-30℃，发酵期2-4个月。

较佳地，从所述姬松茸菌丝体中提取多糖的方法为：将姬松茸菌丝体用热水循环提取，将提取液用微滤膜截流1000-200万分子量的多糖组分，用纯水洗滤一次以上，得粗多糖；将所述获得的粗多糖依次通过鞣酸溶液、活性炭、乙醇进行提纯后，获得姬松茸菌丝体多糖A或多糖B。

较佳地，从所述姬松茸菌丝体子实体中提取多糖的方法为：将固体发酵子实体用热水提取三次，第三次提取时加入氢氧化钠，提取液经减压干燥后粉碎获得姬松茸粗多糖；将所述取提的姬松茸粗多糖通过分子筛层析进行纯化后，获得姬松茸子实体多糖C。

较佳地，所述多糖A、多糖B和多糖C按照1：1：1的质量比进行混合。

本发明还提供一种根据上述制备方法获得的姬松茸复合多糖产品。该姬松茸复合多糖的重金属总残余量为：铅0.5-0.8ppm，镉0.01-0.03ppm，铬0.05-0.1ppm，砷0.25-0.4ppm。所获得的姬松茸复合多糖产品的重金属含量不超标，能够工业化生产。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1）减少生产成本，通过液体深层发酵能够获得低成本的姬松茸多糖；

2）与姬松茸子实体的栽培过程相比，通过液体深层发酵获得的姬松茸菌丝体能够避免重金属污染；

3）在复合多糖中加入一部分子实体多糖可以提高大分子量多糖含量，提高药效。

4）该制备工艺简单、合理，制备成本低。所制备的复合多糖富含大分子量的多糖和小分子量多糖，重金属含量不超标，能广泛应用于医药领域和保健品行业中。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。

实施例1

（1）姬松茸菌种的纯化及筛选

姬松茸菌种Agaricus brasiliensis分别购自金华药用真菌研究所和山东济宁光大食用菌科研究中心，将菌株接种到PDA斜面培养基，25℃培养7天，采用稀释法分离菌种。采用摇瓶筛选，经过初筛和复筛，选择菌种生长快，产量高的菌株。

（2）姬松茸菌种液体深层发酵

将斜面培养的菌种转接到100mL装有种子培养基的三角瓶中，装液量35mL，25℃，100r/min，培养7-10d左右。种子培养基配方为：玉米粉3%，蔗糖2%，酵母膏0.2%，KH₂PO₄0.2%，MgSO₄·7H₂O0.1%，VB11mg，pH6。将种子培养基中培养的菌种分3级发酵：第1级为摇瓶发酵培养，将前述种子培养基中培养的菌丝体放入灭菌的漩涡混合仪内，把菌丝体打碎，按10%接种量接种到装液量为75mL的500mL三角瓶中，25-28℃，100r/min，培养4-6d左右。摇瓶发酵基础培养基：蔗糖2%，KH₂PO₄0.2%，MgSO₄·7H₂O0.1%。第2级为5升罐发酵培养，将前述摇瓶发酵培养的菌丝体放入灭菌的漩涡混合仪内把菌丝体打碎，按5-10%接种量接种到5升罐发酵，罐温：25-28℃，风量：1：0.3，转速：100r/min，发酵时间为36h。第3级为5吨罐发酵培养，将前述5升罐发酵培养的菌丝体放入灭菌的漩涡混合仪内把菌丝体打碎，按5-10%接种量接种到5吨罐发酵，罐温：25-28℃，风量：1：0.3，转速：100r/min，发酵至约有50%液体形成胶状物后，终止发酵。菌丝体得率：2.0%。液体深层发酵培养基配方为：玉米粉2%，豆饼粉0.3%，蔗糖2%，酵母粉0.2%，KH₂PO₄0.2%，MgSO₄.7H₂O0.1%。

（3）用液体深层发酵培养的姬松茸菌丝体提取多糖

取姬松茸液体发酵菌丝体10公斤，加超滤水100升，用半自动提取罐110℃循环提取四小时，同时浓缩到30升体积。用超滤机将提取液通过0.5μm微滤膜截流获得1000-200万分子量的多糖组分。将1000-200万分子量截取部分的滤液，用纯净水洗滤三次，得粗多糖。将获取的粗多糖搅拌中加入1%鞣酸溶液，边加鞣酸边加温，直到液体不浑浊为止，煮沸后4000rpm离心去除沉淀；加入活性炭，搅拌15分钟，过滤收集滤液；加95%乙醇，使含醇量达到70%左右，静止24小时，离心收集沉淀；用70%乙醇反复洗涤，至洗液不含鞣酸为止；沉淀溶于20%的热乙醇中，通过200克中性氧化铝层，减压过滤，浓缩至少量；加95%乙醇，使醇浓度达到70%，静止12小时，析出白色絮状沉淀；过滤，低温真空干燥，得到液体发酵姬松茸菌丝体多糖A。

（4）姬松茸菌丝体的固体发酵

姬松茸菌种Agaricus brasiliensis分别购自金华药用真菌研究所和山东济宁光大食用菌科研究中心，将菌株接种到PDA斜面培养基，25℃培养7天，采用稀释法分离菌种。采用摇瓶筛选，经过初筛和复筛，选择菌种生长快，产量高的菌株。将斜面菌种转接到100mL装有种子培养基的三角瓶中，装液量35mL，25℃，100r/min，培养7-10d左右。种子培养基配方为：葡萄糖2%，酵母膏0.2%，K₂HPO₄0.2%，MgSO₄0.05%pH6。

固体发酵培养基配方为：甘蔗渣80%，麸皮17%，玉米粉1%，蔗糖1%，石膏粉1%。加水量为干培养料100%。培养基配好后，先堆料预发酵，然后装入10厘米直径，60厘米长的聚乙烯塑料袋，常压灭菌6小时。

在无菌接种室将前述种子培养基中培养的菌种接种到含有固体发酵培养基的聚乙烯塑料袋中。将接种好的菌棒放入塑料大棚发酵，纵横交错整齐码放，高度在1.2-1.5米，大棚上覆盖双层黑色塑料薄膜，发酵期2-4个月，一年可发酵两次，春、秋天可各开始发酵一次。双层黑色塑料薄膜大棚内保持温热条件，温度25-30℃。

（5）用固体发酵培养的姬松茸子实体提取多糖

固体发酵子实体100公斤，洗净、烘干粉碎，加水2吨，100℃加热提取1小时，通过筛网获取提取液，将滤渣再加800公斤水，100℃加热提取一次，最后滤渣再加入800公斤0.01m的氢氧化钠（NaOH），煮沸2小时，离心合并三次滤液，真空减压浓缩至波美1.2度。置于65℃干燥箱内，减压真空干燥。粉碎至100目，即得姬松茸粗多糖。将取提的姬松茸粗多糖用葡聚糖凝胶SephadexG-100层析柱（1.5cm*60cm）进行柱层析，用水洗脱，流速0.5ml，洗脱液用自动收集器每6分钟收集一管，用苯酚-硫酸法检测收集液，将含多糖的层析液按组分合并。将合并获得的层析液预冻至-60℃，维持至少4h，在-45℃进行真空干燥得到固体发酵姬松茸子实体多糖C。

（6）用固体发酵培养的姬松茸菌丝体提取多糖

取固体发酵的姬松茸菌丝体10公斤，粉碎成20目，加超滤水100升，用半自动提取罐110℃循环提取四小时，同时浓缩到30升体积。用超滤机将提取液通过0.5μm微滤膜截流获得1000-200万分子量的多糖组分。将1000-200万分子量截取部分的滤液，用纯净水洗滤三次，得粗多糖。将获取的粗多糖搅拌中加入1%鞣酸溶液，边加鞣酸边加温，直到液体不浑浊为止，煮沸后4000rpm离心去除沉淀；加入活性炭，搅拌15分钟，过滤收集滤液；加95%乙醇，使含醇量达到70%左右，静止24小时，离心收集沉淀；用70%乙醇反复洗涤，至洗液不含鞣酸为止；沉淀溶于20%的热乙醇中，通过200克中性氧化铝层，减压过滤，浓缩至少量；加95%乙醇，使醇浓度达到70%，静止12小时，析出白色絮状沉淀；过滤，低温真空干燥，得到固体发酵姬松茸菌丝体多糖B。

（7）姬松茸菌多糖的成分分析：

苯酚-硫酸法：精密量取100μg/mL的葡萄糖溶液，用蒸馏水稀释成浓度分别为2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL地标准溶液，取1mL标准试剂，分别精密量取1mL6％苯酚溶液和5mL浓硫酸，振荡混匀后，放置10分钟后，在490nm处测定吸收值，以葡萄糖用量(浓度)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。将样品精确称取0.1g，加水定容至50mL，取5mL稀释至100倍。配制成含量为100μg/mL溶液，按照上述苯酚-硫酸法测定其490nm处测定吸收值，测定结果带入到标准曲线中，测定其多糖含量。

二硝基水杨酸（DNS）法：将6.3克DNS和262ml2mol/L氢氧化钠，加到500ml含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中，再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加水定容到1000ml，即制成3,5-二硝基水杨酸试剂，贮于棕色瓶中备用。分别取葡萄糖标准液（1mg/ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于15ml试管中，用蒸馏水补足至1.0ml，分别准确加入DNS试剂2ml，沸水浴加热2min，流水冷却，用水补足到15ml刻度。在540nm波长下测定吸光度，制作标准曲线。样品液适当稀释，使糖浓度为0.1-1.0mg/ml，取稀释后的糖液1.0ml于15ml刻度试管中，加DNS试剂2.0ml，沸水煮沸2min，冷却后用水补足到15ml刻度，在540nm波长下测定吸光度。从标准曲线中查出葡萄糖mg/ml数值，求出样品中糖含量。

采用苯酚-硫酸法和二硝基水杨酸法法检测发现：液体发酵姬松茸菌丝体中，经热水提取后多糖得率为8-10%，粗多糖经超滤、喷雾干燥后，多糖含量33%。姬松茸固体发酵菌丝体中多糖含量为15%，经热水提取后多糖得率为7.5%，粗多糖经SephadexG-100层析柱过滤纯化、喷雾干燥后，多糖含量20.83%。姬松茸固体发酵子实体中多糖提取率为16.7%，粗多糖经超滤、喷雾干燥后，多糖含量26%。

（8）将提取的多糖混合获得姬松茸复合多糖

将前述通过固体发酵提取的姬松茸子实体多糖C、通过固体发酵提取的姬松茸菌丝体多糖B和通过液体深层发酵提取的姬松茸菌丝体多糖A分别粉碎至100目。将三种来源的多糖按1：1：1的质量比经胶体磨机充分混合均匀，再经UHT杀菌机超高温灭菌，定量，封闭分装，获得姬松茸复合多糖。

（9）姬松茸复合多糖中的重金属检测

称取1-5g多糖样品于瓷坩埚中，加2mL硝酸浸泡1h。先小火炭化，冷却后加2g过硫酸铵盖于上面，继续炭化至不冒烟，转入马弗炉，500℃恒温2h，再升至800℃，保持20min，冷却，加2mL硝酸(1mM)，用滴管将试样消化液转入25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，同时做试剂空白。分别以硝酸(1mM)溶液作介质，配制不同系列的浓度的铅、镉、铬、汞和砷标准溶液。采用WFS-210型原子吸收分光光谱仪（北京瑞利公司）分析标准溶液的重金属含量，仪器工作的空气流量为7L/min、乙炔流量1.5L/min和氧化性蓝色火焰，乙炔压力0.09MPa，空气压力0.3MPa；狭缝0.4nm，灯电流3mA。铅、镉、铬、和砷的监测波长为283、228、357和194nm。样品及标准使用液各l0μL，注入石墨炉，测得其吸光值。绘制标准曲线并求得吸光值与浓度关系的一元线性回归方程。

姬松茸复合多糖经过处理后，利用WFX-210型原子吸收分光光度计检测。经检测，姬松茸复合多糖中的重金属铅、镉、铬、和砷总残余量分别为：铅0.5-0.8ppm；镉0.01-0.03ppm；铬0.05-0.1ppm;砷0.25-0.4ppm。检测结果表明姬松茸复合多糖中的重金属含量不超标，可以应用于工业化生产。

本发明所述的方法是分别根据液体深层发酵和固体发酵获取姬松茸菌丝体和姬松茸子实体，再分别从姬松茸菌丝体和子实体中提取多糖成分，然后将不同来源的多糖进行混合，从而获得包含各级分子量多糖成分的姬松茸复合多糖。所开发的姬松茸多糖可应用于医药领域和保健品行业中。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的情况下，还可以做出各种改进和修改，这些改进和修改也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种姬松茸复合多糖的制备方法，其包括以下步骤：

1)利用液体深层发酵培养姬松茸菌丝体，从培养的姬松茸菌丝体中提取多糖A；

2)利用固体发酵培养姬松茸菌丝体和子实体，从培养的姬松茸菌丝体中提取多糖B，从培养的姬松茸子实体中提取多糖C；

3)将前述提取的多糖A、多糖B和多糖C进行混合，将混合物灭菌、分装，获得姬松茸复合多糖。

2.根据权利要求1所述的姬松茸复合多糖的制备方法，其特征是，所述利用液体深层发酵培养姬松茸菌丝体的条件如下：

发酵培养基为：玉米粉2%，豆饼粉0.3%，蔗糖2%，酵母粉0.2%，KH₂PO₄0.2%，MgSO₄·7H₂O0.1%，余量为水；

采用分级发酵方法，过程如下：

将斜面菌种转接到装有种子培养基的三角瓶中，25-28℃，振荡培养7-10d，培养的菌种分三级发酵；

第1级为摇瓶发酵培养，将前述种子培养基中培养的菌丝体打碎，按5-10%接种量接种到三角瓶中，25-28℃，振荡培养4-6d；

第2级为5升罐发酵培养，将前述摇瓶培养的菌丝体打碎，按5-10%接种量接种到5升罐发酵，罐温：25-28℃，风量：1：0.3，转速：100r/min，发酵时间为36h；

第3级为5吨罐发酵培养，将前述5升罐液体培养的菌丝体打碎，按5-10%接种量接种到5吨罐发酵，罐温：25-28℃，风量：1：0.3，转速：100r/min，发酵至50%液体形成胶状物后，终止发酵。

3.根据权利要求1所述的姬松茸复合多糖的制备方法，其特征是，所述利用固体发酵培养姬松茸菌丝体和子实体的条件如下：

培养基配方为：甘蔗渣80%，麸皮17%，玉米粉1%，蔗糖1%，石膏粉1%，加水量为干培养料100%；按照所述配方配好培养基后，将培养基先堆料预发酵，然后装聚乙烯塑料袋，常压灭菌6小时；

培养方法为：将斜面菌种转接到装有种子培养基的三角瓶中，25-28℃，振荡培养7-10d；在无菌接种室将种子培养基中培养的菌种接种到前述含有固体发酵培养基的聚乙烯塑料袋中；将接种好的菌棒放入塑料大棚发酵，纵横交错整齐码放，高度在1.2-1.5米，大棚上覆盖双层黑色塑料薄膜，温度保持在25-30℃，发酵期2-4个月。

4.根据权利要求1所述的姬松茸复合多糖的制备方法，其特征是，从所述姬松茸菌丝体中提取多糖的方法为：将姬松茸菌丝体用热水循环提取，将提取液用微滤膜截流1000-200万分子量的多糖组分，用纯水洗滤一次以上，得粗多糖；将所述获得的粗多糖依次通过鞣酸溶液、活性炭、乙醇进行提纯后，获得姬松茸菌丝体多糖。

5.根据权利要求1所述的姬松茸复合多糖的制备方法，其特征是，从所述姬松茸菌丝体子实体中提取多糖的方法为：将固体发酵子实体用热水提取三次，第三次提取时加入氢氧化钠，提取液经减压干燥后粉碎获得姬松茸粗多糖；将所述取提的姬松茸粗多糖通过分子筛层析进行纯化后，获得姬松茸子实体多糖。

6.根据权利要求1所述的姬松茸复合多糖的制备方法，其特征是，所述多糖A、多糖B和多糖C按照1：1：1的质量比进行混合。

7.一种由权利要求1所述的制备方法获得的姬松茸复合多糖产品。

8.根据权利要求7所述的姬松茸复合多糖产品，其特征是，所述姬松茸复合多糖的重金属总残余量为：铅0.5-0.8ppm，镉0.01-0.03ppm，铬0.05-0.1ppm，砷0.25-0.4ppm。

9.根据权利要求8所述的姬松茸复合多糖产品，其特征是，所述姬松茸复合多糖的重金属含量不超标，能够工业化生产。