CN103454365A - 液相色谱装置、液相色谱分析方法、及液相色谱分析程序 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种在一个检体的分析中被送液至吸附部的洗提液中不产生脉动而能够省略缓冲器从而削减成本的液相色谱装置、液相色谱分析方法、及液相色谱分析程序。一种液相色谱装置，具备：柱，吸附检体中的分析成分；柱塞泵，利用一次的杆的按压动作从筒部传送一个检体的分析所需的量以上的对柱吸附的分析成分进行洗提的洗提液A；测光单元，对由洗提液A洗提后的分析成分进行分析；洗提液环，保持洗提液B；送液流路，将柱塞泵与柱连通；及第一切换阀，将送液流路切换成第一流路和第二流路中的任一者，该第一流路使洗提液A从柱塞泵向柱流通，该第二流路使洗提液A从柱塞泵通过第一洗提液保持环而向柱流通。

Description

液相色谱装置、液相色谱分析方法、及液相色谱分析程序

技术领域

本发明涉及一种液相色谱装置、液相色谱分析方法、及液相色谱分析程序，尤其是涉及一种在血液等的生物体试料的分析中使用的液相色谱装置、液相色谱分析方法、及液相色谱分析程序。

背景技术

作为对检体中的成分进行分析的分析装置，有一种使检体中的成分吸附于柱等的吸附部，在向该吸附部传送洗提液而使特定的成分脱离之后，利用测定单元对洗提液中的成分进行分析的液相色谱装置（日本特开2007-212277号公报）。

另外，也存在如下的液相色谱装置，其包括传送一洗提液的定量泵、导入另一洗提液的导入流路、及能够向该导入流路导入一洗提液的第一流路切换阀，定量泵将两种以上的洗提液以非混合状态经由第一流路切换阀向吸附部送液（WO2010/041637号说明书）。

然而，在以往的液相色谱装置中，在一个检体的分析中，定量泵多次进行行程，因此在送液时，洗提液会产生脉动。因此，为了将向吸附部供给且由测定单元测定的洗提液的压力及流速保持一定，而需要在定量泵的下游侧设置缓冲器。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抑制在一个检体的分析中被送液的洗提液的脉动的液相色谱装置、使用了所述液相色谱装置的液相色谱分析方法、及用于在所述液相色谱装置中使用的液相色谱分析程序。

本发明第一方面涉及一种液相色谱装置，其特征在于，具备：吸附部，其对检体中的分析成分进行吸附；送液装置，其利用一次的杆的按压动作从筒部传送一个检体的分析所需的量以上的第一洗提液，所述第一洗提液对由所述吸附部吸附的分析成分进行洗提；送液流路，其将所述送液装置与所述吸附部连通；及分析单元，其对由所述第一洗提液洗提后的分析成分进行分析。

在所述液相色谱装置中，在送液装置中，利用一次的按压动作，将一个检体的分析所需的量以上的第一洗提液从筒部送液，因此在一个检体的分析中不需要反复进行按压动作。因此，能够有效地抑制伴随着反复进行按压拉拽动作的脉动的产生，从而可以省略用于抑制脉动的缓冲器，能削减成本。而且，洗提液在送液流路中以一定的压力、流量流动，因此在分析单元中，能抑制伴随着洗提液的压力、流量的变动的精度的下降。

本发明第二方面以本发明第一方面记载的液相色谱装置为基础，其特征在于，还具备：第一保持流路，其保持与所述第一洗提液不同的第二洗提液；及第一切换单元，其将所述送液流路切换成第一流路和第二流路中的任一者，该第一流路使所述第一洗提液从所述送液装置向所述吸附部流通，该第二流路使所述第一洗提液从所述送液装置通过所述第一保持流路而向所述吸附部流通。

在所述液相色谱装置中，利用第一切换单元将送液流路从第一流路切换成第二流路，由此，保持于第一保持流路的第二洗提液由向第一保持流路流入的第一洗提液朝向吸附部压出。

在此，送液流路及第一保持流路形成为细至不发生洗提液彼此的混合的程度的流路，由此将从第一保持流路压出的第二洗提液以与第一洗提液未混合的非混合状态向吸附部传送。

本发明第三方面以本发明第二方面记载的液相色谱装置为基础，其特征在于，还具备：第二保持流路，其保持与所述第一及第二洗提液不同的第三洗提液；及第二切换单元，其将所述送液流路切换成所述第一流路和第三流路中的任一者，所述第三流路使所述第一洗提液从所述送液装置通过所述第二保持流路而向所述吸附部流通。

在所述液相色谱装置中，利用第二切换单元将送液流路从第一流路切换成第三流路，由此，保持于第二保持流路的第三洗提液由向第二保持流路流入的第一洗提液朝向吸附部压出。

在此，送液流路及第二保持流路形成为细至不发生洗提液彼此的混合的程度的流路，由此将从第二保持流路压出的第三洗提液以与第一洗提液未混合的非混合状态向吸附部传送。

本发明第四方面以本发明第一至第三方面中任一方面记载的液相色谱装置为基础，其特征在于，还具备：检体保持流路，其保持检体；及第三切换单元，其将所述送液流路切换成所述第一流路和第四流路中的任一者，所述第一流路使所述第一洗提液从所述送液装置向所述吸附部流通，所述第四流路使所述第一洗提液从所述送液装置通过所述检体保持流路而向所述吸附部流通。

在所述液相色谱装置中，利用第三切换单元将送液流路从第一流路切换成第四流路，由此，保持于检体保持流路的检体由向检体保持流路流入的第一洗提液朝向吸附部压出。

在此，送液流路及检体保持流路形成为细至不发生洗提液彼此的混合的程度的流路，由此将从检体保持流路压出的检体以与第一洗提液未混合的非混合状态向吸附部传送，在吸附部中吸附检体中的分析成分。

本发明第五方面涉及一种液相色谱分析方法，其特征在于，具有如下步骤：洗提步骤，在具备筒部和杆的送液装置中，利用一次的杆的按压动作从筒部向吸附了检体中的分析成分的吸附部传送一个检体的分析所需的量以上的对所述分析成分进行洗提的第一洗提液，从而对所述分析成分进行洗提；及分析步骤，利用分析单元对由所述洗提步骤洗提后的分析成分进行分析。

在所述液相色谱分析方法中，在洗提步骤中利用一次的按压动作，将一个检体的分析所需的量以上的第一洗提液从筒部送液，因此在一个检体的分析中不需要反复进行按压动作。因此，能够有效地抑制伴随着反复进行按压拉拽动作的脉动的产生，从而可以省略用于抑制脉动的缓冲器，能削减成本。而且，洗提液在送液流路中以一定的压力、流量流动，因此在分析步骤中，能抑制伴随着洗提液的压力、流量的变动的精度的下降。

本发明第六方面以本发明第五方面记载的液相色谱分析方法为基础，其特征在于，具有将与所述第一洗提液不同的第二洗提液保持于第一保持流路的第一洗提液保持步骤，并且，所述洗提步骤具有将连通所述送液装置和所述吸附部的送液流路从第一流路切换成第二流路的第一流路切换步骤，所述第一流路使所述第一洗提液从所述送液装置向所述吸附部流通，所述第二流路使所述第一洗提液从所述送液装置经由在所述第一洗提液保持步骤中保持所述第二洗提液的第一保持流路而向所述吸附部流通。

在所述液相色谱分析方法中，在第一流路切换步骤中将送液流路从第一流路切换成第二流路，由此，保持于第一保持流路的第二洗提液由向第一保持流路流入的第一洗提液朝向吸附部压出。

在此，送液流路及第一保持流路形成为细至不发生洗提液彼此的混合的程度的流路，由此将从第一保持流路压出的第二洗提液以与第一洗提液未混合的非混合状态向吸附部传送。

本发明第七方面以本发明第六方面记载的液相色谱分析方法为基础，其特征在于，具有将与所述第一及第二洗提液不同的第三洗提液保持于第二保持流路的第二洗提液保持步骤，并且，所述洗提步骤还具有将所述送液流路从所述第一流路切换成第三流路的第二流路切换步骤，所述第三流路使所述第一洗提液从所述送液装置经由在所述第二洗提液保持步骤中保持所述第三洗提液的第二保持流路而向所述吸附部流通。

在所述液相色谱分析方法中，通过实施第一流路切换步骤，而将保持于第一保持流路的第二洗提液朝向吸附部压出。并且，在实施了第一流路切换步骤之后，在第二流路切换步骤中将送液流路切换成第三流路，由此，保持于第二保持流路的第三洗提液由向第二保持流路流入的第一洗提液朝向吸附部压出。

在此，送液流路、第一保持流路、及第二保持流路形成为细至不发生洗提液彼此的混合的程度的流路，由此将从第一保持流路压出的第二洗提液、及从第二保持流路压出的第三洗提液均以与第一洗提液未混合的非混合状态向吸附部传送。

本发明第八方面以本发明第五至第七方面中任一方面记载的液相色谱分析方法为基础，其特征在于，具有将检体保持于检体保持流路的检体保持步骤，并且，所述洗提步骤具有将所述送液流路从所述第一流路切换成第四流路的检体导入步骤，所述第四流路使所述第一洗提液经由在所述检体保持步骤中保持所述检体的检体保持流路而向所述吸附部流通。

在所述液相色谱分析方法中，在检体导入步骤中，将送液流路从第一流路切换成第四流路，由此利用第一洗提液将检体保持流路内部的检体压出而向吸附部导入。在将检体向吸附部导入之后，第一洗提液通过检体保持流路而被导入至吸附部，进行分析成分的洗提。

本发明第九方面涉及一种液相色谱分析程序，在液相色谱装置中，用于使计算机执行包括洗提步骤和分析步骤的处理，该液相色谱装置具备：吸附部，其对检体中的分析成分进行吸附；送液装置，其传送对由所述吸附部吸附的分析成分进行洗提的第一洗提液；送液流路，其将所述送液装置与所述吸附部连通；分析单元，其对由所述第一洗提液洗提后的分析成分进行分析；及计算机，其控制所述送液装置和所述分析单元，在所述洗提步骤中，利用所述送液装置的杆的一次的按压动作从筒部向吸附了检体中的分析成分的吸附部传送一个检体的分析所需的量以上的对所述分析成分进行洗提的第一洗提液，从而对所述分析成分进行洗提，在所述分析步骤中，利用所述分析单元对由所述洗提步骤洗提后的分析成分进行分析。

在所述液相色谱分析程序中，在洗提步骤中以利用一次的按压动作从筒部传送一个检体的分析所需的量以上的第一洗提液的方式，由计算机控制送液装置。因此，在一个检体的分析中不反复进行按压动作，因此，能够有效地抑制伴随着反复进行按压拉拽动作的脉动的产生，因而在液相色谱装置中，可以省略用于抑制脉动的缓冲器，能削减成本。而且，洗提液在送液流路中以一定的压力、流量流动，因此在分析步骤中，能抑制伴随着洗提液的压力、流量的变动的精度的下降。

【发明效果】

如以上说明那样，根据本发明，抑制在一个检体的分析中传送的洗提液的脉动，因此可以省略缓冲器，从而削减液相色谱装置的制造成本。

附图说明

图1是表示实施方式1的液相色谱装置的外观的立体图。

图2是表示实施方式1的液相色谱装置的内部结构的配管图。

图3是在实施方式1的液相色谱装置中，表示以将检体保持环中的检体向柱送液的方式切换检体阀的状态的配管图。

图4是在实施方式1的液相色谱装置中，表示以将洗提液保持环中的洗提液C向柱送液的方式切换第二切换阀的状态的配管图。

图5是在实施方式1的液相色谱装置中，表示以将洗提液保持环中的洗提液B向柱送液的方式切换第一切换阀的状态的配管图。

图6是从斜下方观察第一切换阀、第二切换阀、及检体阀得到的分解立体图。

图7中，图7（A）是表示在第一切换阀、第二切换阀、及检体阀中将第一洗提液保持环、第二洗提液保持环、及检体保持环从送液流路切离的状态的说明图，图7（B）是表示在第一切换阀、第二切换阀、及检体阀中将第一洗提液保持环、第二洗提液保持环、及检体保持环与送液流路连通的状态的说明图。

图8是表示实施方式1的液相色谱装置中的主泵、检体调制单元、检体阀、第一切换阀、第二切换阀、及测光单元与对它们进行控制的计算机的关系的框图。

图9是表示利用实施方式1的液相色谱装置对血液试料进行分析的次序的流程图。

图10是表示将洗提液按照A、C、B的顺序向柱送液时利用测光单元测定的色谱的一例的简图。

图11中，图11（A）是表示实施方式1的液相色谱装置中的洗提液C的向柱的送液流量的时间变化的说明图，图11（B）是表示以往的液相色谱装置中的洗提液C的向柱的送液流量v的时间变化t的说明图。

具体实施方式

1.实施方式1

以下，使用附图，详细说明液相色谱装置的一例。

<结构>

如图1及图2所示，实施方式1的液相色谱装置1具有：装置主体2，其形成有工作台20和固定部21，该工作台20设置有由支架10保持的采血管11，该固定部21设置有对作为第一洗提液的洗提液A进行收容的洗提液包12A、对作为第二洗提液的洗提液B进行收容的洗提液包12B、及对作为第三洗提液的洗提液C进行收容的洗提液包12C；及箱体3，其在装置主体2中内置后述的洗提液切换单元4、检体调制单元5、分离吸附单元6、及测光单元7。在箱体3的前表面设有操作面板30及显示面板31，该操作面板30具有多个操作按钮32。

在此，在本实施方式中，构成为通过一次的测定进行一根采血管11的分析，但并不局限于此，也可以使用能够保持多个采血管11的支架，连续地进行测定。

如图2所示，液相色谱装置1具有：检体调制单元5，其从采血管11中的血液试料13调制检体；分离吸附单元6，其对由检体调制单元5调制后的检体的分析成分进行吸附、洗提；测光单元7，其作为对于由分离吸附单元6洗提的分析成分进行光学性的分析的分析单元；及洗提液切换单元4，其向分离吸附单元6供给洗提液B及洗提液C。

检体调制单元5具备对采血管11中的血液试料13进行吸引的试料吸嘴51、及对检体进行调制的稀释槽52，在适当的时点，从检体调制单元5经由检体阀61将血液试料向柱60送液。

分离吸附单元6具备：柱60，其作为对由检体调制单元5调制后的检体中的糖血红蛋白A1c等分析成分进行吸附的吸附部；主泵63，其作为朝向柱60传送洗提液A的送液装置；送液流路，其将主泵63与柱60连通；及检体阀61，其用于将检体向送液流路注入。

如图2所示，送液管路由将主泵63与第一切换阀41连通的管路64、将第一切换阀41与第二切换阀43连通的管路65、将第二切换阀43与检体阀61连通的管路66、及将检体阀61与柱60连通的管路67构成。需要说明的是，在柱60的出口侧连接有管路68的一端，并且测光单元7设置在管路68上。管路68的另一端与废液罐18连接。

另外，在管路64与主泵63之间设有三通阀45，并且在三通阀45上经由管路14A而连接有洗提液包12A。

如图2～图5所示，主泵63是柱塞泵，其具有工作缸63B（筒部）、在工作缸63B内往复移动的柱塞63A（杆）、使柱塞63A往复移动的滚珠丝杠63D、使滚珠丝杠63D的螺纹轴63E旋转的步进电动机63C。滚珠丝杠63D具有前述的螺纹轴63E和与螺纹轴63E螺合且固定在柱塞63A的末端的螺母63F。

如图2～图5所示，在步进电动机63C的作用下例如螺纹轴63E向顺时针方向旋转时，螺母63F向从步进电动机63C远离的方向移动，柱塞63A被朝向工作缸63B压出。反之，当滚珠丝杠63D向逆时针方向旋转时，螺母63F向接近步进电动机63C的方向移动，柱塞63A从工作缸63B被拉下。

在本实施方式中，主泵63具有如下的容量：通过柱塞63A的一次的拉拽动作，能够将对于一个检体进行由测定开始处理（柱60的平衡化）、检体的分级（利用洗提液对由柱60吸附的分析成分进行洗提）、测定处理、柱60的清洗、及测定后处理（清洗后的柱60的平衡化）构成的一连串的分析动作所需的充分的量的洗提液A向工作缸63B引入，通过一次的按压动作换言之通过一行程从工作缸63B送出能够对一个检体进行分析的量的洗提液。在此，从避免以往装置中的泵的脉动对测定精度造成坏影响的问题且不使用缓冲器而确保必要的精度的观点出发，主泵送液的洗提液A的量只要是对于一个检体至少进行检体的分级及测定处理所需的充分的量即可。即，主泵送液的洗提液A的量可以是进行检体的分级及测定处理所需的充分的量，而且，也可以是进行检体的分级及测定处理所需的充分的量加上进行测定开始处理、柱60的清洗及测定后处理中的至少一个处理所需的量而得到的量。即，在本发明中，一个检体的分析所需的量例如是至少进行检体的分级及测定处理所需的充分的量。而且一个检体的分析所需的量也可以是例如进行检体的分级及测定处理所需的充分的量加上进行测定开始处理、柱60的清洗、及测定后处理中的至少一个处理所需的量而得到的量。

需要说明的是，主泵63进行的洗提液A的1行程时的送液压力优选为0.1MPa，而且，可以是0.15MPa～7.5MPa，而且，也可以0.2MPa～5MPa，此外，还可以是0.5MPa～3MPa。

另外，主泵63进行的洗提液A的1行程时的送液量在多个检体的连续测定和单一个检体的单一测定的情况下可以不同。即，若单一测定的情况的1行程时的送液量为1，则在连续测定中，能够以主泵63不传送单一测定的情况的1行程时的送液量（=1）的最后的几成而在原封不动地保持的状态下向下一测定用的拉拽动作转移的方式，使主泵63动作。在此，主泵63进行的洗提液A的送液量优选为0.5ml～10ml/1测定，可以是1ml～8ml/1测定，而且也可以是1ml～6ml/1测定。

根据本实施方式1的测定装置，作为经过柱的平衡化→检体分级→测定处理→柱清洗→测定后处理这一连串的处理而完成数据输出所需的测定时间，可以实现38秒～10分钟，而且，可以实现38秒～7分钟，此外可以实现38秒～6分钟。

作为第三切换单元的检体阀61是六通阀，如图2、图6、及图7（A）所示，具有：形成有每隔60度而等间隔地沿着逆时针方向排列的口61a、61b、61c、61d、61e、61f的圆板状的主体61B；及具有与主体61B相同的直径并相对于主体61B能够旋转且同心地配置的圆板状的阀芯61A。如图6所示，将口61a～61f中的相邻的两个连通的大小的圆弧状的三个流路61g、61h、61i每隔60度而等间隔地形成在阀芯61A的与主体61B相对置的一侧的面上。

主体61B的隔着中心点相对置的两个口61c和口61f通过作为检体保持流路的检体保持环62而连通。而且，口61a与构成送液流路的一部分的管路66连通，口61b与构成送液流路的另一部分的管路67连通。另一方面，口61d经由管路55而与检体调制单元5的稀释槽52连通，口61e经由管路56而与泵54连通。

检体阀61在未将检体向柱60注入时，如图2及图7（A）所示，阀芯61A相对于主体61B处于口61a与口61b由流路61g连通、口61c与口61d由流路61h连通、及口61e与口61f由流路61i连通的位置关系，因此管路66与管路67由流路61g连通，但检体保持环62处于从送液流路切离的状态。因此，送液流路构成与检体保持环62未连通的第一流路。

另一方面，在将检体向柱60注入时，如图3～图5及图7（B）所示，阀芯61A相对于主体61B从图2的状态开始向逆时针方向旋转60度，口61b与口61c由流路61g连通，口61d与口61e由流路61h连通，口61f与口61a由流路61i连通。由此，管路66及管路67分别经由流路61i及流路61g而与检体保持环62连通。由此，送液流路构成与检体保持环62连通的第四流路。

如图2所示，洗提液切换单元4具备作为第一切换单元的第一切换阀41和作为第二切换单元的第二切换阀43。

第一切换阀41是六通阀，如图2、图6、及图7（A）所示，具有：形成有每隔60度而等间隔地沿着逆时针方向排列的口41a、41b、41c、41d、41e、41f的主体41B；及具有与主体41B相同的直径并相对于主体41B能够旋转且同心地配置的圆板状的阀芯41A。如图6所示，将口41a～41f中的相邻的两个连通的大小的圆弧状的3个流路41g、41h、41i每隔60度而等间隔地形成在阀芯41A的与主体41B相对置的一侧的面上。

主体41B的隔着中心点相对置的两个口41c与口41f由作为第一保持流路的第一洗提液保持环42连通。口41a与构成送液流路的一部分的管路64连通，口41b与构成送液流路的另一部分的管路65连通。另一方面，口41d经由管路15B而与泵16连通，口41e经由管路14B而与洗提液包12B连通。

第一切换阀41在未将洗提液B向柱60注入时，如图2～图4及图7（A）所示，阀芯41A相对于主体41B处于口41a与口41b由流路41g连通、口41c与口41d由流路41h连通、口41e与口41f由流路41i连通的位置关系，因此管路64与管路65由流路41g连通，但第一洗提液保持环42处于从送液流路切离的状态。因此，送液流路构成与第一洗提液保持环42未连通的第一流路。

另一方面，在将洗提液B向柱60注入时，如图5及图7（B）所示，阀芯41A相对于主体41B从图2的状态沿着逆时针方向旋转60度，口41b与口41c由流路41g连通，口41d与口41e由流路41h连通，口41f与口41a由流路41i连通。由此，管路64及管路65分别经由流路41i及流路41g而与第一洗提液保持环42连通。由此，送液流路构成与第一洗提液保持环42连通的第二流路。

同样地，第二切换阀43也是六通阀，如图2、图6、及图7（A）所示，具有：形成有每隔60度而等间隔地沿着逆时针方向排列的口43a、43b、43c、43d、43e、43f的主体43B；具有与主体43B相同的直径并相对于主体43B能够旋转且同心地配置的圆板状的阀芯43A。如图6所示，将口43a～43f中的相邻的两个连通的大小的圆弧状的3个流路43g、43h、43i每隔60度而等间隔地形成在阀芯43A的与主体43B相对置的一侧的面上。

在主体43B中隔着中心点相对置的两个口43c与口43f由作为第二保持流路的第二洗提液保持环44连通。口43a与构成送液流路的一部分的管路65连通，口43b与构成送液流路的另一部分的管路66连通。另一方面，口43d经由管路15C而与泵17连通，口43e经由管路14C而与洗提液包12C连通。

第二切换阀43在未将洗提液C向柱60注入时，如图2、图3及图7（A）所示，阀芯43A相对于主体43B处于口43a与口43b由流路43g连通、口43c与口43d由流路43h连通、口43e与口43f由流路43i连通的位置关系，因此虽然管路65与管路66由流路43g连通，但第二洗提液保持环44处于从送液流路切离的状态。送液流路构成与第二洗提液保持环44未连通的第一流路。

另一方面，在将洗提液C向柱60注入时，如图4、图5、及图7（B）所示，阀芯43A相对于主体43B从图2的状态开始沿着逆时针方向旋转60度，口43b与口43c由流路43g连通，口43d与口43e由流路43h连通，口43f与口43a由流路43i连通。由此，管路65及管路66分别经由流路43i及流路43g而与第二洗提液保持环44连通。由此，送液流路构成与第二洗提液保持环44连通的第三流路。

需要说明的是，在液相色谱装置1中，如图8所示，主泵63、检体泵61、第一切换阀41、第二切换阀43、及检体调制单元5由计算机100控制，并将测光单元7的测定结果向计算机100输入。

<作用>

以下，说明液相色谱装置1的作用。

在测定开始时，如图2及图7（A）所示，无论关于第一切换阀41、第二切换阀43、及检体阀61中的哪个，阀芯41A、43A、61A相对于主体41B、43B、61B处于如下位置关系：管路64～67连通而构成送液流路，但第一洗提液保持环42、第二洗提液保持环44、及检体保持环62均从送液流路切离。

在该状态下，如图9所示，实施洗提液吸引步骤S2，三通阀45被切换而管路14A与主泵63连通，并且在主泵63中，柱塞63A相对于工作缸63B被拉下，进行由测定开始处理、检体的分级、测定处理、柱60的清洗、及测定后处理构成的一连串的分析动作所需的充分的量的洗提液A从洗提液包12A被吸引到工作缸63B的内部。在此，如前述那样，从避免以往装置中的泵的脉动对测定精度造成坏影响的问题且不使用缓冲器而确保必要的精度的观点出发，主泵送液的洗提液A的量只要是对于一个检体至少进行检体的分级及测定处理所需的充分的量即可。即，主泵送液的洗提液A的量既可以是进行检体的分级及测定处理所需的充分的量，而且，也可以是进行检体的分级及测定处理所需的充分的量加上进行测定开始处理、柱60的清洗及测定后处理中的至少一个处理所需的量而得到的量。

同时，在检体调制单元5中，实施检体调制步骤S4，在稀释槽52中将血液试料13调制作为检体。

在调制了检体之后，实施检体保持步骤S6，管路55、检体保持环62、及管路56的内部的溶液由泵54吸引。由此，检体保持环62由稀释槽52中的检体填充。

接下来，实施洗提液保持步骤S8，管路14B、第一洗提液保持环42、及管路15B内部的溶液由泵16吸引，第一洗提液保持环42由洗提液B填充。

并且，管路14C、第二洗提液保持环44、及管路15C内部的溶液由泵17吸引，第二洗提液保持环44由洗提液C填充。

检体保持环62、第一洗提液保持环42、及第二洗提液保持环44分别由检体、洗提液B、洗提液C填充之后，切换三通阀45而使主泵63与管路64连通，以一定的速度将柱塞63A向工作缸63B压出，开始洗提液A的送液。从主泵63送出的洗提液A经由管路64、管路65、管路66、管路67而向柱60送液，柱60实现平衡化。

在柱60实现了平衡化之后，按照以下的次序实施洗提步骤S10。首先，如图3及图7（B）所示，在检体阀61中，使阀芯61A相对于主体61B从图2及图7（A）所示的位置沿着逆时针旋转60度，在检体阀61中，将送液流路从与检体保持环62未连通的第一流路切换成经由管路66和管路67而与检体保持环62连通的第四流路。在此，管路66、检体保持环62、管路67由于内径细至多个种类的液体相互不混合而通过的程度，因此保持在检体保持环62内部的检体几乎与通过管路66的洗提液A不混合，而由洗提液A朝向管路67压出，向柱60送液。在柱60中，吸附检体中的分析成分。

由检体保持环62保持的检体朝向柱60压出之后，洗提液A通过检体保持环62而向柱60送液。由此，如图10所示，在柱60中被吸附的分析成分由洗提液A洗提。并且，与洗提步骤S10同时地实施分析步骤S12，由洗提液A洗提的分析成分在测光单元7中检测。

在基于洗提液A的分析成分的洗提结束之后，实施第二流路切换步骤S14。即，如图4及图7（B）所示，在第二切换阀43中，使阀芯43A相对于主体43B从图2及图7（A）所示的位置沿着逆时针旋转60度，在第二切换阀43中，将送液流路从与第二洗提液保持环44未连通的第一流路切换成经由管路65和管路66而与第二洗提液保持环44连通的第三流路。在此，管路66也如前述那样内径细至多个种类的液体相互不混合而通过的程度，因此由第二洗提液保持环44保持的洗提液C不与洗提液A混合，而经由管路66、检体保持环62、及管路67向柱60送液。

如图10所示，当将洗提液C向柱60送液时，在柱60中吸附的分析成分中的未由洗提液A洗提的部分由洗提液C洗提，由测光单元7检测。

在基于洗提液C的分析成分的洗提结束之后，实施第一流路切换步骤S16。如图5及图7（B）所示，在第一切换阀41中，使阀芯41A相对于主体41B从图2及图7（A）所示的位置沿着逆时针旋转60度，在第一切换阀41中，将送液流路从与第一洗提液保持环42未连通的第一流路切换成经由管路64和管路65而与第一洗提液保持环42连通的第二流路。在此，管路65也如前述那样内径细至多个种类的液体相互未混合而通过的程度，因此由第一洗提液保持环42保持的洗提液B不会与洗提液A混合，而经由管路65、管路66、检体保持环62、及管路67向柱60送液。

如图10所示，当将洗提液B向柱60送液时，在柱60中吸附的分析成分中的未由洗提液A及洗提液C洗提的部分由洗提液B洗提，由测光单元7检测。需要说明的是，在由洗提液C及洗提液B洗提的分析成分不是测定的对象时，基于洗提液C及洗提液B的洗提相当于柱60的清洗。

在基于洗提液B的分析成分的洗提结束之后，将检体阀61、第一切换阀41、及第二切换阀43保持在图5及图7（B）所示的位置，继续洗提液A的送液。由此，进行测定后处理（清洗后的柱60的平衡化）。

<液相色谱分析程序>

在计算机100安装有液相色谱分析程序，该液相色谱分析程序用于使计算机100执行<作用>中叙述的包括洗提液吸引步骤S2、检体调制步骤S4、检体保持步骤S6、洗提液保持步骤S8、洗提步骤S10、分析步骤S12、第二流路切换步骤S14、第一流路切换步骤S16的处理。需要说明的是，洗提液保持步骤S8包括利用洗提液B对第一洗提液保持环42进行填充的第一洗提液保持步骤、及利用洗提液C填充第二洗提液保持环44的第二洗提液保持步骤。而且，所述液相色谱分析程序也可以先实施第一洗提液保持步骤和第二洗提液保持步骤中的任一者。

安装在计算机100中的液相色谱分析程序也可以是比前述的液相色谱分析程序简化的程序。作为这样的程序，例如，存在有洗提液保持步骤S8为不包含第一洗提液保持步骤且不执行第一流路切换步骤S16的步骤、及洗提液保持步骤S8为不包含第二洗提液保持步骤且不执行第二流路切换步骤S14的步骤等。而且，所述液相色谱分析程序也可以省略检体调制步骤S4及检体保持步骤S6。此外，所述液相色谱分析程序是用于使计算机100执行包括洗提步骤S10及分析步骤S12的处理的程序。需要说明的是，计算机100具有控制部，该控制部构成包括对装置整体进行控制的CPU、存储有程序等的ROM、一次性地存储测定结果的RAM、及输入输出口，例如，能够基于从操作按钮、键盘输入的命令而控制液相色谱装置1。

在实施方式1的液相色谱装置1中，在将主泵63中分析一个检体所需的一连串的分析动作的实施所需的量或其以上的洗提液A由工作缸63B吸引之后，在所述一连串的分析动作全部结束之前，将柱塞63A以一定速度向工作缸63B压出而继续送液。因此，洗提液A在所述一连串的分析动作开始起至全部结束之前，以一定的压力及流量向柱60送液，因此能够抑制柱塞反复进行拉拽动作及按压动作所引起的脉动的发生。因此，不需要用于消除洗提液流的脉动的缓冲器。而且，通过了柱60的洗提液实质上以一定的压力、一定的流量通过测光单元7，因此能够抑制洗提液的压力及流量的变动引起的测定误差的产生。

另外，液相色谱装置1在第一切换阀41及第二切换阀43中对流路进行切换，由此使第一洗提液保持环42及第二洗提液保持环44依次与送液流路连通。由此，在使第二洗提液保持环44与送液流路连通时，由第二洗提液保持环44保持的洗提液C几乎与洗提液A不混合而压出并向柱60送液。而且，使第一洗提液保持环42与送液流路连通而传送洗提液B的情况也同样。相对于此，由切换阀等依次切换从收容有洗提液A的包、收容有洗提液B的包、及收容有洗提液C的包到柱的配管，由此进行洗提液的切换，并且在利用泵的往复动作进行送液的以往方式的液相色谱装置中，如图11（B）所示，最初以一定的流量传送洗提液C，但随着送液的进展而洗提液C的流量下降。具体而言，在以往方式的液相色谱装置中，在泵的按压动作时，泵内压一定，但在拉拽动作时，泵内压成为负压，因此洗提液的送液量发生变动。即，在以往方式的装置中，为了解决该问题，使用了缓冲器，但根据本发明的结构，由于不会产生这样的问题，因此不需要缓冲器。

需要说明的是，在液相色谱装置1中，根据洗提液B及洗提液C的组成，反之，也可以在切换第一切换阀41而将洗提液B向柱60送液之后，切换第二阀43而将洗提液C向柱60送液。而且，在色谱测定的原理上，关于对一个检体实施的一连串的分析动作，该一连串的分析动作包含的各个处理有时无法与其前后的处理明确地划分。即，例如，在测定处理的最后使用的液体与在柱60的清洗中使用的液体重复的情况下，到哪个时刻为止对应于测定处理，无法划分。在其他的处理间也存在同样的情况。即，根据这样的情况，本实施方式并未限定为上述记载的分析动作形态。

而且，实施方式1的色谱装置1将检体调制单元5、测光单元7、分离吸附单元6收容在一个箱体3的内部，但也可以是检体调制单元、测光单元、洗提液送液单元、及分离吸附单元各自分体构成，并将它们连结的系统。

Claims (9)

1.一种液相色谱装置，其具备：

吸附部，其对检体中的分析成分进行吸附；

送液装置，其利用一次的杆的按压动作从筒部传送一个检体的分析所需的量以上的第一洗提液，所述第一洗提液对由所述吸附部吸附的分析成分进行洗提；

送液流路，其将所述送液装置与所述吸附部连通；及

分析单元，其对由所述第一洗提液洗提后的分析成分进行分析。

2.根据权利要求1所述的液相色谱装置，所述液相色谱装置还具备：

第一保持流路，其保持与所述第一洗提液不同的第二洗提液；及

第一切换单元，其将所述送液流路切换成第一流路和第二流路中的任一者，该第一流路使所述第一洗提液从所述送液装置向所述吸附部流通，该第二流路使所述第一洗提液从所述送液装置通过所述第一保持流路而向所述吸附部流通。

3.根据权利要求2所述的液相色谱装置，所述液相色谱装置还具备：

第二保持流路，其保持与所述第一及第二洗提液不同的第三洗提液；及

第二切换单元，其将所述送液流路切换成所述第一流路和第三流路中的任一者，所述第三流路使所述第一洗提液从所述送液装置通过所述第二保持流路而向所述吸附部流通。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的液相色谱装置，所述液相色谱装置还具备：

检体保持流路，其保持检体；及

第三切换单元，其将所述送液流路切换成所述第一流路和第四流路中的任一者，所述第四流路使所述第一洗提液从所述送液装置通过所述检体保持流路而向所述吸附部流通。

5.一种液相色谱分析方法，其具有如下步骤：

洗提步骤，在具备筒部和杆的送液装置中，利用一次的杆的按压动作从筒部向吸附了检体中的分析成分的吸附部传送一个检体的分析所需的量以上的对所述分析成分进行洗提的第一洗提液，从而对所述分析成分进行洗提；及

分析步骤，利用分析单元对由所述洗提步骤洗提后的分析成分进行分析。

6.根据权利要求5所述的液相色谱分析方法，其中，

具有将与所述第一洗提液不同的第二洗提液保持于第一保持流路的第一洗提液保持步骤，并且，

所述洗提步骤具有将连通所述送液装置和所述吸附部的送液流路从第一流路切换成第二流路的第一流路切换步骤，所述第一流路使所述第一洗提液从所述送液装置向所述吸附部流通，所述第二流路使所述第一洗提液经由在所述第一洗提液保持步骤中保持所述第二洗提液的第一保持流路而向所述吸附部流通。

7.根据权利要求6所述的液相色谱分析方法，其中，

具有将与所述第一及第二洗提液不同的第三洗提液保持于第二保持流路的第二洗提液保持步骤，并且，

所述洗提步骤还具有将所述送液流路从所述第一流路切换成第三流路的第二流路切换步骤，所述第三流路使所述第一洗提液经由在所述第二洗提液保持步骤中保持所述第三洗提液的第二保持流路而向所述吸附部流通。

8.根据权利要求5～7中任一项所述的液相色谱分析方法，其中，

具有将检体保持于检体保持流路的检体保持步骤，并且，

所述洗提步骤具有将所述送液流路从所述第一流路切换成第四流路的检体导入步骤，所述第四流路使所述第一洗提液经由在所述检体保持步骤中保持所述检体的检体保持流路而向所述吸附部流通。

9.一种液相色谱分析程序，在液相色谱装置中，用于使计算机执行包括洗提步骤和分析步骤的处理，

该液相色谱装置具备：

吸附部，其对检体中的分析成分进行吸附；

送液装置，其传送对由所述吸附部吸附的分析成分进行洗提的第一洗提液；

送液流路，其将所述送液装置与所述吸附部连通；

分析单元，其对由所述第一洗提液洗提后的分析成分进行分析；及

计算机，其控制所述送液装置和所述分析单元，

在所述洗提步骤中，利用所述送液装置的杆的一次的按压动作从筒部向吸附了检体中的分析成分的吸附部传送一个检体的分析所需的量以上的对所述分析成分进行洗提的第一洗提液，从而对所述分析成分进行洗提，

在所述分析步骤中，利用所述分析单元对由所述洗提步骤洗提后的分析成分进行分析。

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