CN103442566A - 治疗癌症的化合物 - Google Patents

治疗癌症的化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN103442566A
CN103442566A CN201180051231XA CN201180051231A CN103442566A CN 103442566 A CN103442566 A CN 103442566A CN 201180051231X A CN201180051231X A CN 201180051231XA CN 201180051231 A CN201180051231 A CN 201180051231A CN 103442566 A CN103442566 A CN 103442566A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
another embodiment
cancer
alkyl
haloalkyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201180051231XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN103442566B (zh
Inventor
J·T·多尔顿
D·D·米勒
李建民
安琁珠
陆燕
王昭
陈建军
李伟
C·杜克
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Tennessee Research Foundation
Oncternal Therapeutics Inc
Original Assignee
GTx Inc
University of Tennessee Research Foundation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/US2010/062418 external-priority patent/WO2011109059A1/en
Application filed by GTx Inc, University of Tennessee Research Foundation filed Critical GTx Inc
Publication of CN103442566A publication Critical patent/CN103442566A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103442566B publication Critical patent/CN103442566B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/64—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms, e.g. histidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/22—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/56—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached to ring carbon atoms
    • C07D233/60—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by oxygen or sulfur atoms, attached to ring nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D263/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by oxygen atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/08—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D263/10—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D263/14—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms with radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/30—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D263/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/24—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/28—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/42—Amino or imino radicals substituted by hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及具有抗癌活性的新型化合物、制备这些化合物的方法，以及它们用于治疗诸如黑素瘤、转移性黑素瘤、耐药性黑素瘤、前列腺癌和耐药性前列腺癌的癌症和耐药性肿瘤的用途。

Description

治疗癌症的化合物
发明领域
本发明涉及具有抗癌活性的新型化合物、制备这些化合物的方法，以及它们用于治疗癌症、治疗耐药性肿瘤、耐药性癌症、转移性癌症、转移性黑素瘤、耐药性黑素瘤、前列腺癌和耐药性前列腺癌的用途。
发明背景
癌症在美国是第二种最常见的致死原因，仅次于心脏病。在美国，癌症占每4例死亡中的1例。在1996-2003年诊断的所有癌症患者的5年相对存活率由1975-1977年的50％增加至66％(Cancer Facts &Figures American Cancer Society：Atlanta，GA(2008))。存活率的这一改善反映早期诊断的进步和治疗的改善。发现低毒性的高效抗癌剂是癌症研究的主要目的。
微管是由αβ-微管蛋白异源二聚体组成的细胞支架微丝并且涉及大量细胞功能，包括形状维持、囊泡转运、细胞运动和分化。微管蛋白是微管的主要结构组分并且是多种十分成功的抗癌药物的充分验证的靶。能够干扰细胞中微管-微管蛋白平衡的化合物有效地治疗癌症。能够干扰细胞中微管-微管蛋白平衡的类似泰素和长春碱的抗癌药物广泛用于癌症化学疗法。有三类主要的抗有丝分裂剂。结合完全形成的微管并且防止微管蛋白亚单位的解聚的微管-稳定剂的代表为紫杉烷和埃博霉素。其它两类药剂为微管-去稳定剂，其结合微管蛋白二聚体以及抑制它们聚合至微管内。诸如长春碱的长春花生物碱结合长春花位点(vinca site)，并代表这些种类之一。秋水仙碱和秋水仙碱-位点结合剂在微管蛋白上的不同位点处相互作用，并界定抗有丝分裂剂的第三类。
紫杉烷和长春花生物碱均广泛用于治疗人癌症，但目前尚无秋水仙碱-位点结合剂被批准用于癌症化学疗法。然而，类似考布他汀(combretastatin)A-4(CA-4)和ABT-751(图19)的秋水仙碱结合剂作为潜在新化疗剂正在进行临床研究(Luo，Y.；Hradil，V.P.；Frost，D.J.；Rosenberg，S.H.；Gordon，G.B.；Morgan，S.J.；Gagne，G.D.；Cox，B.F.；Tahir，S.K.；Fox，G.B.，ABT-751，″A novel tubulin-binding agent，decreases tumor perfusion and disrupts tumor vasculature″.AnticancerDrugs 2009，20(6)，483-92.；Mauer，A.M.；Cohen，E.E.；Ma，P.C.；Kozloff，M.F.；Schwartzberg，L.；Coates，A.I.；Qian，J.；Hagey，A.E.；Gordon，G.B.，″A phase II study of ABT-751in patients with advancednon-small cell lung cancer″.J Thorac Oncol 2008，3(6)，631-6.；Rustin，G.J.；Shreeves，G.；Nathan，P.D.；Gaya，A.；Ganesan，T.S.；Wang，D.；Boxall，J.；Poupard，L.；Chaplin，D.J.；Stratford，M.R.；Balkissoon，J.；Zweifel，M.，″A Phase Ib trial of CA4P(combretastatin A-4 phosphate)，carboplatin，and paclitaxel in patients with advanced cancer″.Br JCancer 2010，102(9)，1355-60.)。
不幸的是，在临床使用中与微管相互作用的抗癌药物均具有两个主要问题，抗性和神经毒性。多重耐药性(MDR)的常见机制，即ATP结合盒(ABC)转运蛋白介导的药物流出限制它们的功效(Green，H.；Rosenberg，P.；Soderkvist，P.；Horvath，G.；Peterson，C.，″beta-Tubulinmutations in ovarian cancer using single strand conformationanalysis-risk of false positive results from paraffin embedded tissues″.Cancer Letters 2006，236(1)，148-54.；Wang，Y.；Cabral，F.，″Paclitaxelresistance in cells with reduced beta-tubulin″.Biochimica et BiophysicaActa，Molecular Cell Research 2005，1744(2)，245-255.；Leslie，E.M.；Deeley，R.G.；Cole，S.P.C.，″Multidrug resistance proteins：role ofP-glycoprotein，MRP1，MRP2，and BCRP(ABCG2)in tissue defense″.Toxicology and Applied Pharmacology 2005，204(3)，216-237.)。
P-糖蛋白(P-gp，由MDR1基因编码)为ABC超家族的重要成员。通过增加许多癌症药物流出癌细胞，以及促进肝、肾，或肠清除途径，P-gp预防它们的细胞内累积。尝试共同施用P-gp调节剂或抑制剂以通过阻断P-gp的作用来增加细胞利用度的成效有效(Gottesman，M.M.；Pastan，I.，″The multidrug transporter，adouble-edged sword″.J Biol Chem 1988，263(25)，12163-6.；Fisher，G.A.；Sikic，B.I.，″Clinical studies with modulators of multidrug resistance″.Hematology/Oncology Clinics of North America 1995，9(2)，363-82)。
与许多生物活性天然产物一样，紫杉烷的另一主要问题是其亲油性以及在水性体系中溶解性差。这导致在临床制剂中使用类似聚氧乙烯蓖麻油EL(Cremophor EL)和吐温80的乳化剂。已经描述大量与这些药物配制媒介物相关的生物效应，包括急性过敏性反应和周围神经病(Hennenfent，K.L.；Govindan，R.，″Novel formulations of taxanes：areview.Old wine in a new bottle？″Ann Oncol 2006，17(5)，735-49.；tenTije，A.J.；Verweij，J.；Loos，W.J.；Sparreboom，A.，″Pharmacologicaleffects of formulation vehicles：implications for cancer chemotherapy″.Clin Pharmacokinet 2003，42(7)，665-85.)。
与结合紫杉醇-或长春花生物碱结合位点的化合物相比，秋水仙碱-结合剂通常表现出相对简单的结构。因此，通过结构优化其提供口服生物利用率的更好机会以改善溶解性和药物代谢动力学(PK)参数。此外，这些药物中许多似乎阻止P-gp-介导的MDR。因此，这些新型靶向秋水仙碱结合位点的化合物作为治疗剂具有更大前景，特别是由于它们具有改善的水溶性并且克服P-gp介导的MDR。
前列腺癌是在美国男性中最常诊断出的非皮肤性癌症之一，并且其是第二最常见的癌症死亡原因，有超过180,000例新病例，今年预期约有29,000例死亡。具有晚期前列腺癌的患者通常通过促黄体素释放激素(LHRH)激动剂或者通过双侧睾丸切除术来进行雄激素阻断治疗(ADT)。雄激素阻断治疗不仅降低睾酮，也使雌激素水平更低，因为雌激素是由睾酮的芳构化所衍生，而睾酮水平通过ADT而大大降低。雄激素阻断治疗-诱导的雌激素缺乏导致显著副作用，其包括热潮红、男性乳房发育症和乳腺痛、骨丢失(bone loss)、骨质量和强度的降低、骨质疏松和危及生命的骨折、有害的脂质改变和更多心血管疾病以及心肌梗塞和抑郁症以及其它情绪改变。
醋酸亮丙瑞林
Figure BDA00003093994900041
是天然存在的促性腺激素-释放激素(GnRH或LHRH)的合成九肽类似物。醋酸亮丙瑞林是最终通过垂体抑制LH分泌的LHRH超激动剂。醋酸亮丙瑞林用作促性腺激素分泌的强效抑制剂，导致遏制卵巢和睾丸类固醇生成。在人类中，醋酸亮丙瑞林的施用导致促黄体生成激素(LH)和促滤泡激素(FSH)的循环水平初始增加，导致性腺甾体类(在男性中睾酮和二氢睾酮；以及在绝经前妇女中雌酮和雌二醇)的水平的瞬间增加。然而，醋酸亮丙瑞林的连续施用导致LH和FSH的水平降低。在男性中，睾酮降低至去势水平(低于50ng/dL)。在绝经前妇女中，雌激素降低至绝经后水平。睾酮是前列腺癌细胞的已知刺激物。遏制睾酮分泌或抑制睾酮的作用因而是前列腺癌治疗的必要组成部分。醋酸亮丙瑞林可用于LH遏制，即血清睾酮减少和降低至去势水平以治疗前列腺癌。
恶性黑素瘤是皮肤癌中最危险的形式，占皮肤癌死亡的约75％。在西方国家人口中黑素瘤的发生率持续增加。在过去20年中病例数目翻倍。每年全世界诊断出约160,000例新的黑素瘤病例，并且在男性和高加索人种中更常见。根据WHO报告，每年发生约48,000例与黑素瘤相关的死亡。
当前，尚无有效方法治疗转移性黑素瘤。它对目前的化学疗法、放射疗法和免疫疗法高度耐受。转移性黑素瘤预后很差，其具有6个月的生存中值以及小于5％的5年存活率。在过去30年中，达卡巴嗪(DTIC)是唯一由FDA批准用于转移性黑素瘤的药物。然而，它仅提供在患者中小于5％的完全缓解。近年来，为对抗转移性黑素瘤付出巨大努力。DTIC与其它化学疗法药物(例如，顺铂、长春碱和卡莫司汀)的组合或者添加干扰素-α2b至DTIC均未显示超出单独的DTIC治疗的存活率优势。最近，使用抗体和疫苗治疗转移性黑素瘤的临床试验也未得到令人满意的功效。
与其它肿瘤类型相比，黑素瘤细胞具有更低水平的体内自发细胞凋亡，并且它们相对而言耐受药物诱导的体外细胞凋亡。黑素细胞的天然作用是保护器官免受UV光、强效DNA破坏剂。因此，黑素瘤细胞可具有特异性DNA损坏修复体系以及增强的存活性能，这不足为奇。而且，最近研究显示，在黑素瘤进展中，它需要复杂的遗传改变(导致流出泵的超活化的)、解毒酶，以及存活和细胞凋亡途径的多因素改变。提出所有这些以介导黑素瘤的多重耐药性(MDR)表型。随着该疾病的快速增加的发生率以及当前治疗剂的高抗性，开发能有效地阻止MDR的用于晚期黑素瘤和其它癌症类型的更加有效的药物将为癌症患者提供显著的益处。
发明概要
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900051
其中
X是键、NH或S；
Q是O、NH或S；并且
A是取代或未取代的单环、稠环或多环、芳香或(杂)环环状系统；取代或未取代的、饱和或不饱和的N-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的S-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的O-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的环烃；或者取代或未取代的或饱和或不饱和的混合的杂环；
其中所述A环被独立地为以下的1-5个取代基任选取代：O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；并且
i是介于0-5之间的整数；
其中如果Q是S，则X不是键。
在一个实施方案中，本发明涉及由式VIII的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900061
R4、R5和R6独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
Q是S、O或NH；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-3之间的整数。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI(b)的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900071
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI(c)的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900081
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI(e)的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900082
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数。
在另一实施方案中，本发明涉及以下化合物：(2-(苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5a)、(2-(对甲苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5b)、(2-(对氟苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5c)、(2-(4-氯苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5d)、(2-(苯基氨基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5e)、2-(1H-吲哚-3-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(17ya)，以及(2-(1H-吲哚-5-基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(55)。
在另一实施方案中，本发明的化合物是其同分异构体、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物，或其组合。
在一个实施方案中，本发明涉及包含本发明的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。
在一个实施方案中，本发明涉及以下方法：(a)治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制癌症；(b)治疗一种或多种耐药性肿瘤；以及(c)破坏癌细胞，其包括施用本发明的化合物。在另一实施方案中，癌症选自前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌、黑素瘤、肺癌、结肠癌、白血病、肾癌、CNS癌症及其组合。
附图简述
被视为本发明的主题在说明书的结束部分特别说明和清楚要求。然而，当阅读附图时最好通过参照以下详细描述来理解关于组织和操作方法的本发明及其目的、特征和优势，其中：
图1示出不同B-环模板：噁唑的合成。试剂和条件：(a)MeOH，CH3COCl，83％；(b)苯甲亚胺酸乙酯，CH2Cl2，Et3N，96％；(c)LiOH，MeOH，H2O，65％；(d)EDCI，HOBt，NMM，CH3OCH3NH·HCl，61％；(e)3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁，THF，48％-71％；(f)CBrCl3，DBU，CH2Cl2，56％。
图2示出不同B-环模板的合成。试剂和条件：(a)EDCI，HOBt，NMM，CH3OCH3NH·HCl，CH2Cl2，51-95％；(b)3，4，5-三甲氧基苯基-溴化镁，THF，48-78％；(c)LAH，-78℃，THF，85％；(d)戴斯-马丁试剂(Dess-Martin reagent)，CH2Cl2，81％；(e)EDCI，HOBt，NMM，3，4，5-三甲氧基苯甲酸，CH2Cl2，58％。
图3示出本发明的化合物的合成方案。试剂和条件：(a)MeOH/pH＝6.4磷酸盐缓冲液，RT；(b)EDCI，HOBt，NMM，HNCH3OCH3；(c)CBrCl3，DBU，CH2Cl2；(d)3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁，THF；(e)异丙基三苯基碘化膦，n-BuLi，THF；(f)LAH，THF；(g)用于2e-顺式和2e-反式，NH2OH·HCl，C2H5OH，H2O，NaOH；用于2g和2h，NH2OMe·HCl，吡啶；(h)TsCl，NaH，碱性Al2O3；(i)NH2NH2·xH2O，CH2Cl2，t-BuOH；(j)氰甲基磷酸二乙酯，n-BuLi，THF；(k)双-三甲基甲硅烷基碳二亚胺，TiCl4，CH2Cl2；(l)EDCI，HOBt，Et3N，3，4，5-三甲氧基苯胺，CH2Cl2。
图4示出本发明的化合物的合成方案。试剂和条件：(a)溴，EtOH；(b)硫代苯甲酰胺，EtOH，回流；(c)EDCI，HOBt，NMM，HNCH3OCH3，CH2Cl2；(d)CBrCl3，DBU，CH2Cl2；(e)LAH，THF；(f)5-(溴甲基)-1，2，3-三甲氧基苯，Ph3P，THF；(g)n-BuLi，THF；(h)(1)HCl，H2O；(2)NaNO2，H2O，0℃；(i)乙基黄原酸钾；(j)KOH/EtOH；(k)H2O，HCl；(l)5-碘-1，2，3-三甲氧基苯，CuI，t-BuONa；(m)2当量或1当量m-CPBA，CH2Cl2；(n)3，4，5-三甲氧基苯胺，NEt3，DMF。
图5示出本发明的化合物的合成方案。试剂和条件：(a)L-半胱氨酸，EtOH，65℃；(b)EDCI，HOBt，NMM，HNCH3OCH3，CH2Cl2；(c)TBDMSCl，咪唑，THF；(d)3，4，5-三甲氧基溴苯，BuLi，THF；(e)TBAF，THF；(f)SOCl2，Et2O；(g)NH3，MeOH；(h)POCl3；(i)PhSO2Cl，Bu4NHSO4，甲苯，50％NaOH；(j)1N NaOH，EtOH，回流；(k)Boc2O，1N NaOH，1，4-二噁烷；(l)CBrCl3，DBU，CH2Cl2；(m)在1，4-二噁烷中4N HCl；(n)NaH，DMF，MeI；(o)HCHO，NaBH3CN，Et3N。
图6示出本发明的化合物的合成方案。试剂和条件：(a)EtOH，65℃；(b)NaOH，C2H5OH，回流；(c)EDCI，HOBt，NMM，HNCH3OCH3，CH2Cl2；(d)3，4，5-三甲氧基溴苯，BuLi，THF；(e)在1，4-二噁烷中2NHCl。
图7示出制备本发明的芳基-苯甲酰基-咪唑(ABI)化合物的合成方案。试剂和条件：(a)t-BuOH，I2，乙二胺，K2CO3，回流；(b)PhI(OAc)2，K2CO3，DMSO；(c)DBU，CBrCl3，DMF；(d)NaH，PhSO2Cl，THF，0℃-RT；(e)t-BuLi，经取代的苯甲酰氯，THF，-78℃；(f)Bu4NF，THF，RT。
图8示出制备本发明的芳基-苯甲酰基-咪唑(ABI)化合物的合成方案。试剂和条件：(a)NH4OH，乙二醛，乙醇，RT；(b)NaH，PhSO2Cl，THF，0℃-RT；(c)t-BuLi，经取代的苯甲酰氯，THF，-78℃；(d)Bu4NF，THF，RT；(e)BBr3，CH2Cl2；(f)c-HCl，AcOH，回流。
图9示出制备本发明的芳基-苯甲酰基-咪唑(ABI)化合物的合成方案。试剂和条件：(a)NaH，经取代的苯甲酰氯，THF。
图10示出化合物12dc、12fc、12daa、12dab、12cba的合成方案。(a)AlCl3，THF，回流；(b)用于12dab和12cba的NaH、CH3I和用于12daa的BnBr，THF，回流。
图11示出化合物11gaa、12la的合成方案。(a)NH4OH，乙醇，乙二醛，RT；(b)NaH，经取代的PhSO2Cl，THF，0℃-RT；(c)t-BuLi(在戊烷中1.7M)，经取代的苯甲酰氯，THF，-78℃；(d)Bu4NF，RT。
图12示出化合物15xaa和12xa的合成方案。(a)1.KOH，乙醇；2.PhSO2Cl，丙酮；(b)NH4OH，乙二醛，乙醇，RT；(c)NaH，PhSO2Cl，THF，0℃-RT；(d)t-BuLi(在戊烷中1.7M)，苯甲酰氯，THF，-78℃；(e)NaOH，乙醇，H2O，回流。
图13示出17ya的合成方案。(a)1.KOH，乙醇，2.PhSO2Cl，丙酮，RT；(b)NH4OH，乙二醛，乙醇，RT；(c)NaH，PhSO2Cl，THF，0℃-RT；(d)t-BuLi(在戊烷中1.7M)，苯甲酰氯，THF，-78℃；(e)NaOH，乙醇，H2O，回流。
图14示出12fa的合成方案。(a)NH4OH，乙二醛，乙醇，RT；(b)NaH，PhSO2Cl，THF，0℃-RT；(c)t-BuLi，3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯，THF，-78℃；(d)Bu4NF，THF，RT。
图15示出化合物55的合成方案。
图16示出基于异喹啉和喹啉的化合物的合成方案。图16A示出异喹啉衍生物的合成方案。试剂和条件：a)芳基硼酸(1当量)，Pd(PPh3)4(0.01当量)，K2CO3，H2O，DMF，5h；b)芳基硼酸(2.4当量)，Pd(PPh3)4(0.04当量)，K2CO3，H2O，DMF，16h；c)芳基硼酸(1.2当量)，Pd(PPh3)4(0.04当量)，K2CO3，H2O，DMF，16h。图16B示出化合物41和44的合成方案。试剂和条件：a)对氟苯磺酰氯，吡啶，吡啶，80℃，3h；b)5-吲哚硼酸(1.2当量)，Pd(PPh3)4(0.02当量)，K2CO3，H2O，DMF，16h。图16C示出异喹啉衍生物6d的合成方案。图16D示出异喹啉衍生物6c的合成方案。图16E示出异喹啉衍生物6b的合成方案。
图17示出ABI化合物12ga(溶解在乙腈中)的标准溶解性曲线。X轴是化合物的量，y轴是m/z峰面积。
图18示出抗-微管蛋白化合物1h、1c、66a、2r-HCl、5a和5c的测定的水溶性。
图19示出秋水仙碱-结合位点微管蛋白抑制剂的结构。
图20示出抗-微管蛋白化合物1h、1c、2j、66a和5a体外抑制微管蛋白聚合(图20a)以及5c(图20b)和5Hc结合秋水仙碱位点(图20c)的能力。
图21示出与其它抗癌药物和化合物相比2-芳基-4-苯甲酰基-咪唑化合物(ABI)对多重耐药性黑素瘤细胞系(MDR细胞)和相匹配的敏感母细胞系(正常黑素瘤细胞)的剂量-反应曲线。紫杉醇、长春碱和秋水仙碱的两曲线之间的大距离表明它们是P-糖蛋白(P-gp)的底物。各ABI化合物的重叠的两曲线表明ABI化合物不是P-gp的底物，并且克服多重耐药性。
图22展示ABI化合物对体外微管蛋白聚合的作用。将微管蛋白(0.4mg/测定)暴露于10μM ABI化合物(媒介物对照，5％DMSO)。在37℃下15min内每分钟监控在340nm下的吸光度，并证实ABI化合物12da、12db和12cb抑制体外微管蛋白聚合。
图23示出在软琼脂中B16-F1黑素瘤集落形成测定，其显示ABI化合物以浓度依赖性方式抑制集落形成。图23A示出在100nM下对照和各测试的化合物(12cb、12da和12fb)的代表性图片。各孔的直径为35mm。图23B示出各测试的化合物(12cb、12da和12fb)的测定结果的定量表示。通过GraphPad Prism软件使用学生t检验与对照比较来计算P值。柱代表三次平行测定的平均值；条代表SD。
图24示出ABI化合物的体内研究。图24A示出在C57/BL小鼠中12cb针对B16-F1黑素瘤肿瘤的体内活性。图24B示出在C57BL/6小鼠和SHO裸小鼠中12fb针对B16-F1黑素瘤的体内活性。结果显示12fb以剂量依赖性方式抑制黑素瘤肿瘤生长。具有B16-F1黑素瘤同种异体移植物的C57BL/6小鼠(n＝5/组)。通过皮下注射至侧腹使各小鼠接受0.5x106细胞。当肿瘤尺寸达到～100mm3时，开始每日30μL i.p.处理。图24C示出12fb针对A375人黑素瘤异种移植物的体内活性。具有A375人黑素瘤异种移植物的SHO裸小鼠(n＝5/组)。通过皮下注射至侧腹使各小鼠接受2.5x106细胞。当肿瘤尺寸达到～150mm3时，开始每日30μL i.p.处理。对照代表仅媒介物溶液；点代表平均值；条代表SD。DTIC代表(5-(3，3，-二甲基-1-三氮烯基)-咪唑-4-甲酰胺，达卡巴嗪。
图25示出竞争性秋水仙碱结合测定。图25A示出[3H]-秋水仙碱竞争结合闪炼接近测定，其显示竞争性结合微管蛋白秋水仙碱结合位点的12cb。图25B示出使用流式细胞术的细胞周期分析的代表性图，其显示在24h孵育之后ABI化合物(12da和12fb显示的实例)阻滞在G2/M期中A375细胞。效果和效能类似于秋水仙碱的那些。图25C显示细胞周期分析的定量图形描绘。所有测试的化合物(12cb、12da和12fb显示的实例)以剂量依赖性方式阻滞在G2/M期中A375细胞。ABI12da显示比秋水仙碱更高效能。图25D示出在使用不同浓度的12cb、12da和12fb孵育24h之后使用A375细胞的流式细胞术的细胞周期分析。从50nM开始，秋水仙碱阻滞在G2/M期中大部分细胞。分别从200、50和200nM开始，12cb、12da和12fb也阻滞在G2/M期中大部分细胞。
图26示出17ya和55对微管蛋白聚合的作用。化合物17ya和55结合在微管蛋白上的秋水仙碱-结合位点，并且抑制微管蛋白聚合。图26A，竞争性质量结合。使用不同浓度的鬼臼毒素(podophylltoxin)、长春碱、化合物17ya和55来孵育微管蛋白(1mg/mL)和秋水仙碱(1.2μM)。N＝3；平均值±SD。鬼臼毒素和长春碱分别用作阳性和阴性对照。图26B，对微管蛋白聚合的作用。将微管蛋白(0.4mg)暴露于测试化合物(5μM)。将秋水仙碱用作阳性对照。图26C和26D，17ya和55增强在24h处在PC-3(C)和PC-3/TxR(D)细胞中细胞质DNA-组蛋白复合物形成(细胞凋亡)的能力(N＝3)；平均值±SD。将多西他赛用作阳性对照。
图27示出体内抗癌功效。图27A，在第1和9天使用多西他赛(i.v.，10或20mg/kg)来处理具有PC-3肿瘤的裸小鼠。(N＝5-6)。条，SE。图27B，在第1和9天使用多西他赛(i.v.，10或20mg/kg)来处理具有PC-3/TxR肿瘤的裸小鼠；每日一次、一周五天化合物17ya处理(p.o.，6.7mg/kg)。(N＝4-5)。条，SE。图27C，在第一周中四天内每日两次使用化合物17ya(PO，3.3mg/kg)来处理具有PC-3/TxR肿瘤的裸小鼠，然后第2-4周内每周五天每日一次给药(N＝7)，四周内每周五天每日两次使用化合物55处理(p.o.，10或30mg/kg)(N＝7)。条，SE。图27D，四周内每周三次使用化合物17ya(PO，10mg/kg)来处理具有PC-3/TxR肿瘤的裸小鼠(N＝5)。条，SE。
图28示出化合物1h、2k和2l通过结合在微管蛋白上的秋水仙碱结合位点来抑制微管蛋白聚合。(图28A)1h(-H)、2k(-F)和2l(-OH)的结构。(图28B)化合物对微管蛋白聚合的作用。将微管蛋白(0.4mg)暴露于化合物1h、2k和2l(10μM)。在15min内每分钟监控在340nm下的吸光度。(图28C)使用质谱竞争结合测定法来测定1h竞争在微管蛋白上的水仙碱、长春碱和紫杉醇结合位点的能力(n＝3)；条代表SD。
图29示出化合物1h、2k和2l阻滞细胞进入G2/M期以及诱导细胞凋亡。(图29A)在化合物处理24h之后对PC-3和A375细胞的细胞周期分析的代表性图。(图29B)在24h处理之后在PC-3和A375细胞中通过1h、2k和2l诱导的G2/M比例的改变。(图29C)1h、2k和2l在24h中增强细胞质DNA-组蛋白复合物的能力(n＝3)；条代表SD。将秋水仙碱和长春碱用作阳性对照。
图30示出在小鼠和大鼠中腹腔内(i.p.)施用的1h、2k和2l的药物代谢动力学研究。(图30A)在ICR小鼠中SMART化合物的浓度-时间曲线(n＝3)；条代表SD。通过尾静脉注射静脉施用15mg/kg的SMART化合物。(图30B)在SD大鼠(n＝4)中1h和2k的浓度-时间曲线；条代表SD。使用配制物DMSO/PEG300(1/4)以2.5mg/kg静脉给药Spague-Dawley大鼠。
图31展示在小鼠中SMART化合物的体内抗癌功效(腹腔内施用)以及神经毒性。(图31A)SMART化合物对异种移植物在裸小鼠上的PC-3前列腺肿瘤的功效(n＝6-8)。(图31B)长春碱对异种移植物在裸小鼠上的PC-3前列腺肿瘤的功效(n＝8)。将这用作阳性对照。(图31C)1h和2k在具有A375黑素瘤异种移植物的裸小鼠的体内功效(n＝10)。使裸小鼠接种2.5x106PC-3或A375细胞，并在肿瘤形成(150-200mm3)之后每日腹腔内给药(SMART化合物)和q2d(长春碱)。各点表示各组中动物的平均肿瘤体积。(图31D)在ICR小鼠中1h的体内神经毒性(旋转试验)(n＝7或8)。每日腹腔内给予1h(5和15mg/kg)、长春碱(0.5mg/kg)和媒介物，并将长春碱用作阳性对照。在第31天停止给药。*，p＜0.05。条，SE。
图32示出靶向在秋水仙碱结合位点中微管蛋白的ABI化合物的分子模型。图32A和32B分别示出化合物12cb和11cb的分子模型。
图33示出在WM-164黑素瘤细胞中免疫荧光标记的微管的显微图像，其显示在化合物处理18h之后微管形态被显著改变。这提供ABI化合物靶向微管蛋白以及破坏功能微管形成的视觉证据。
图34示出6b和6c在腹腔内注射之后在异种移植物模型中的功效和耐受性。图34A.使用媒介物(qd)、6b(40mg/kg，qd)，或6c(40mg/kg，qd)3周来处理PC-3异种移植物。给药媒介物由在吐温80中20％Captex200组成。将肿瘤体积(mm3)对比时间绘图，该肿瘤体积是八只动物的平均值±SD。肿瘤体积显示于左图中，而体重显示于右图中。图34B.在3周处理之后测定各裸小鼠的肝尺寸(g)。图34C.由从3周处理之后的动物收集的全血计数白细胞数目。
图35-化合物17ya显示强效内皮细胞生长抑制。通过SRB研究在多种细胞系中研究多柔比星(图35A)和化合物17ya(图35B)的细胞生长抑制。HUVEC-活性和HUVEC-非活性的定义分别表示加有生长因子和不加生长因子的内皮细胞培养物。
图36-通过17ya对预成型的毛细管的破坏。使装载到基质胶(Matrigel)上的HUVEC细胞制备管16h并将预成型的管经测试化合物处理。在药物处理之后至多25h计数管(A、B和C)和结点(node)(D、E和F)的数目。图A和D是在CA4存在的条件下，图B和E是在多柔比星存在的条件下，而图C和F是在17ya存在的条件下。
图37-内皮毛细管形成的抑制和预成型的毛细管的破坏。使用在15h CA4(A和D)、DOX(B和E)和17ya(C和F)处理之后的HUVEC细胞体外研究来比较毛细管形成的抑制(●)和预成型的毛细管的破坏(○)。箭头显示在HUVEC细胞生长抑制中各化合物的IC50值。
图38-17ya和55增加内皮细胞单层的通透性。将汇合的HUVEC单层暴露于测试化合物中。通过在接收器中在λ＝485nm激发和λ＝530nm发射下相对荧光测定值来评估通过单层的FITC-共轭的葡聚糖的渗漏以测定暴露之后单层通透性的变化。
应理解，为了说明简便和清楚，在图中所示的要素不一定按比例描绘。例如，为清楚起见，一些要素的尺寸相对其它要素可能放大。而且，在认为合适处，在各图之间可重复使用附图标记以表示对应或类似要素。
发明详述
在一个实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物
Figure BDA00003093994900171
其中
A和C各自独立地为取代或未取代的单环、稠环或多环芳香或(杂)环环状系统；取代或未取代的、饱和或不饱和的N-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的S-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的O-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的环烃；或者取代或未取代的、饱和或不饱和的混合的杂环；
B是
Figure BDA00003093994900181
R10和R11独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
X是键、NH、C1至C5烃、O，或S；
Y是键、-C＝O、-C＝S、-C＝N-NH2、-C＝N-OH、-CH-OH、-C＝CH-CN、-C＝N-CN、-CH＝CH-、-C＝C(CH3)2、-C＝N-OMe、-(C＝O)-NH、-NH-(C＝O)、-(C＝O)-O、-O-(C＝O)、-(CH2)1-5-(C＝O)、(C＝O)-(CH2)1-5、-(SO2)-NH-、-NH-(SO2)-、SO2、SO或S；
其中所述A和C环被独立地为以下的1-5个取代基任选取代：O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是介于0-5之间的整数；
l是介于1-2之间的整数；
其中
如果B是苯环、噻吩环、呋喃环或吲哚环，则X不是键或CH2，并且A不是吲哚；
如果B是吲哚，则X不是O；并且
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，如果式I的B是噻唑环，则X不是键。
在一个实施方案中，在式I的化合物中A是吲哚基。在另一实施方案中，A是2-吲哚基。在另一实施方案中，A是苯基。在另一实施方案中，A是吡啶基。在另一实施方案中，A是萘基。在另一实施方案中，A是异喹啉。在另一实施方案中，在式I的化合物中C是吲哚基。在另一实施方案中，C是2-吲哚基。在另一实施方案中，C是5-吲哚基。在另一实施方案中，在式I的化合物中B是噻唑。在另一实施方案中，在式I的化合物中B是噻唑；Y是CO并且X是键。式I的化合物的非限制性实例选自：(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(1H-吲哚-2-基)甲酮(8)和(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(1H-吲哚-5-基)甲酮(21)。
在一个实施方案中，本发明涉及式(Ia)的化合物
Figure BDA00003093994900201
其中
A是取代或未取代的单环、稠环或多环、芳香或(杂)环环状系统；取代或未取代的、饱和或不饱和的N-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的S-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的O-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的环烃；或者取代或未取代的、饱和或不饱和的混合的杂环；
B是
R1、R2和R3独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
R10和R11独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
X是键、NH、C1至C5烃、O，或S；
Y是键、-C＝O、-C＝S、-C＝N-NH2、-C＝N-OH、-CH-OH、-C＝CH-CN、-C＝N-CN、-CH＝CH-、-C＝C(CH3)2、-C＝N-OMe、-(C＝O)-NH、-NH-(C＝O)、-(C＝O)-O、-O-(C＝O)、-(CH2)1-5-(C＝O)、(C＝O)-(CH2)1-5、-(SO2)-NH-、-NH-(SO2)-、SO2、SO或S；
其中所述A环被独立地为以下的1-5个取代基任选取代：O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是介于0-5之间的整数；
l是介于1-2之间的整数；
m是介于1-3之间的整数；
其中
如果B是苯环、噻吩环、呋喃环或吲哚环，则X不是键或CH2并且A不是吲哚；
如果B是吲哚，则X不是O；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，如果式Ia的B是噻唑环，则X不是键。
在一个实施方案中，本发明涉及式(II)的化合物：
Figure BDA00003093994900221
其中
B是
Figure BDA00003093994900222
Figure BDA00003093994900231
R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
R10和R11独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
X是键、NH、C1至C5烃、O，或S；
Y是键、-C＝O、-C＝S、-C＝N-NH2、-C＝N-OH、-CH-OH、-C＝CH-CN、-C＝N-CN、-CH＝CH-、C＝C(CH3)2、-C＝N-OMe、-(C＝O)-NH、-NH-(C＝O)、-(C＝O)-O、-O-(C＝O)、-(CH2)1-5-(C＝O)、(C＝O)-(CH2)1-5、-(SO2)-NH-、-NH-(SO2)-、SO2、SO或S；
i是介于0-5之间的整数；
l是介于1-2之间的整数；
n是介于1-3之间的整数；并且
m是介于1-3之间的整数；
其中
如果B是吲哚，则X不是O；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，如果式II的B是噻唑环，则X不是键。
在一个实施方案中，本发明涉及式(III)的化合物
Figure BDA00003093994900241
其中
B是
Figure BDA00003093994900242
Figure BDA00003093994900251
R4、R5和R6独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；并且
R10和R11独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
X是键、NH、C1至C5烃、O，或S；
Y是键、-C＝O、-C＝S、-C＝N-NH2、-C＝N-OH、-CH-OH、-C＝CH-CN、-C＝N-CN、-CH＝CH-、C＝C(CH3)2、-C＝N-OMe、-(C＝O)-NH、-NH-(C＝O)、-(C＝O)-O、-O-(C＝O)、-(CH2)1-5-(C＝O)、(C＝O)-(CH2)1-5、-(SO2)-NH-、-NH-(SO2)-、SO2、SO或S；
i是介于0-5之间的整数；
l是介于1-2之间的整数；并且
n是介于1-3之间的整数；
其中
如果B是吲哚，则X不是O；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，如果式III的B是噻唑环，则X不是键。
在一个实施方案中，本发明涉及式(IV)的化合物
Figure BDA00003093994900261
其中环A是吲哚基；
B是
Figure BDA00003093994900262
Figure BDA00003093994900271
R1和R2独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
R10和R11独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
X是键、NH、C1至C5烃、O，或S；
Y是键、C＝O、-C＝S、-C＝N-NH2、-C＝N-OH、-CH-OH、-C＝CH-CN、-C＝N-CN、-CH＝CH-、C＝C(CH3)2、-C＝N-OMe、-(C＝O)-NH、-NH-(C＝O)、-(C＝O)-O、-O-(C＝O)、-(CH2)1-5-(C＝O)、(C＝O)-(CH2)1-5、-(SO2)-NH-、-NH-(SO2)-、SO2、SO或S；
其中所述A被以下任选取代：O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；并且
i是介于0-5之间的整数；
l是介于1-2之间的整数；并且
m是介于1-4之间的整数；
其中
如果B是苯环、噻吩环、呋喃环或吲哚环，则X不是键或CH2；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，如果式IV的B是噻唑环，则X不是键。
在另一实施方案中，式IV的环A的吲哚基的其1-7位之一附接X或者如果X是键(即，无)，则直接连接B。
在一个实施方案中，本发明涉及式IV(a)的化合物
Figure BDA00003093994900281
B是
Figure BDA00003093994900282
Figure BDA00003093994900291
R1、R2、R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；；并且
R10和R11独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
X是键、NH、C1至C5烃、O，或S；
Y是键或C＝O、-C＝S、-C＝N-NH2、-C＝N-OH、-CH-OH、-C＝CH-CN、-C＝N-CN、-CH＝CH-、C＝C(CH3)2、-C＝N-OMe、-(C＝O)-NH、-NH-(C＝O)、-(C＝O)-O、-O-(C＝O)、-(CH2)1-5-(C＝O)、(C＝O)-(CH2)1-5、-(SO2)-NH-、-NH-(SO2)-、SO2、SO或S；
i是介于0-5之间的整数；
l是介于1-2之间的整数；
n是介于1-2之间的整数；并且
m是介于1-4之间的整数；
其中
如果B是苯环、噻吩环、呋喃环或吲哚环，则X不是键或CH2；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，如果式IVa的B是噻唑环，则X不是键。
在一个实施方案中，本发明涉及式(V)的化合物
Figure BDA00003093994900301
B是
Figure BDA00003093994900302
R4、R5和R6独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
R10和R11独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是介于1-5之间的整数；
l是介于1-2之间的整数；并且
n是介于1-3之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在另一实施方案中，式V的B不是噻唑
Figure BDA00003093994900321
在另一实施方案中，式V的B不是噁唑。在另一实施方案中，式V的B不是噁唑啉。在另一实施方案中，式V的B不是咪唑。在另一实施方案中，式V的B不是噻唑、噁唑、噁唑啉或咪唑。
在一个实施方案中，本发明涉及以下化合物：
Figure BDA00003093994900322
Figure BDA00003093994900331
Figure BDA00003093994900341
在一个实施方案中，本发明涉及式(VI)的化合物
其中
R4、R5和R6独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；并且
Y是键或C＝O、-C＝S、-C＝N-NH2、-C＝N-OH、-CH-OH、-C＝CH-CN、-C＝N-CN、-CH＝CH-、C＝C(CH3)2、-C＝N-OMe、-(C＝O)-NH、-NH-(C＝O)、-(C＝O)-O、-O-(C＝O)、-(CH2)1-5-(C＝O)、(C＝O)-(CH2)1-5、-(SO2)-NH-、-NH-(SO2)-、SO2、SO或S；
n是介于1-3之间的整数；并且
i是介于1-5之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及以下化合物：
Figure BDA00003093994900351
Figure BDA00003093994900361
在一个实施方案中，本发明涉及化合物3a：
在一个实施方案中，本发明涉及化合物3b：
Figure BDA00003093994900371
在一个实施方案中，本发明涉及式(VII)的化合物
Figure BDA00003093994900372
其中
Y是键或C＝O、-C＝S、-C＝N-NH2、-C＝N-OH、-CH-OH、-C＝CH-CN、-C＝N-CN、-CH＝CH-、C＝C(CH3)2、-C＝N-OMe、-(C＝O)-NH、-NH-(C＝O)、-(C＝O)-O、-O-(C＝O)、-(CH2)1-5-(C＝O)、(C＝O)-(CH2)1-5、-(SO2)-NH-、-NH-(SO2)-、SO2、SO或S；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及以下化合物：
Figure BDA00003093994900373
Figure BDA00003093994900381
在一个实施方案中，本发明涉及式(VIII)的化合物
Figure BDA00003093994900382
其中
R4、R5和R6独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
Q是S、O或NH；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-3之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及以下化合物：
在一个实施方案中，本发明涉及式(IX)的化合物
Figure BDA00003093994900392
其中
R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-(O)NH2或NO2；
A’是卤素；取代或未取代的单环、稠环或多环、芳香或(杂)环环状系统；取代或未取代的、饱和或不饱和的N-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的S-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的O-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的环烃；或者取代或未取代的、饱和或不饱和的混合的杂环；其中所述A’环被独立地为以下的1-5个取代基任选取代：O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是介于1-5之间的整数；并且
n是介于1-3之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式IX的化合物通过以下化合物的结构表示：
Figure BDA00003093994900401
Figure BDA00003093994900411
在另一实施方案中，式IX的A′是卤素。在一个实施方案中，式IX的A′是苯基。在另一实施方案中，式IX的A′是取代的苯基。在另一实施方案中，A′的取代基是卤素。在另一实施方案中，取代基是4-F。在另一实施方案中，取代基是3，4，5-(OCH3)3。在另一实施方案中，式IX的A′是取代或未取代的5-吲哚基。在另一实施方案中，式IX的A′是取代或未取代的2-吲哚基。在另一实施方案中，式IX的A′是取代或未取代的3-吲哚基。在另一实施方案中，式IX的化合物展示在图16A中。
在一个实施方案中，本发明涉及式(IXa)的化合物
Figure BDA00003093994900412
其中
R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-(O)NH2或NO2；
A’是卤素；取代或未取代的单环、稠环或多环、芳香或(杂)环环状系统；取代或未取代的、饱和或不饱和的N-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的S-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的O-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的环烃；或者取代或未取代的、饱和或不饱和的混合的杂环；其中所述A’环被独立地为以下的1-5个取代基任选取代：O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是介于1-5之间的整数；并且
n是介于1-3之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在另一实施方案中，式IXa的A′是卤素。在一个实施方案中，式IXa的A’是苯基。在另一实施方案中，式IXa的A′是经取代的苯基。在另一实施方案中，A′的取代基是卤素。在另一实施方案中，取代基是4-F。在另一实施方案中，取代基是3，4，5-(OCH3)3。在另一实施方案中，式IXa的A’是取代或未取代的5-吲哚基。在另一实施方案中，式IXa的A’是取代或未取代的2-吲哚基。在另一实施方案中，式IXa的A’是取代或未取代的3-吲哚基。
在另一实施方案中，式IXa的化合物是1-氯-7-(4-氟苯基)异喹啉。在另一实施方案中，式IXa的化合物是7-(4-氟苯基)-1-(1H-吲哚-5-基)异喹啉。在另一实施方案中，式IXa的化合物是7-(4-氟苯基)-1-(3，4，5-三甲氧基苯基)异喹啉。在另一实施方案中，式IXa的化合物是1，7-双(4-氟苯基)异喹啉(40)。在另一实施方案中，式IXa的化合物是1，7-双(3，4，5-三甲氧基苯基)异喹啉。在另一实施方案中，式IXa的化合物是1-(4-氟苯基)-7-(3，4，5-三甲氧基苯基)异喹啉。在另一实施方案中，式IXa的化合物是1-(1H-吲哚-5-基)-7-(3，4，5-三甲氧基苯基)异喹啉。在另一实施方案中，式IXa的化合物是1-氯-7-(3，4，5-三甲氧基苯基)异喹啉。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900431
其中
X是键、NH或S；
Q是O、NH或S；并且
A是取代或未取代的单环、稠环或多环芳香或(杂)环环状系统；取代或未取代的、饱和或不饱和的N-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的S-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的O-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的环烃；或者取代或未取代的、饱和或不饱和的混合的杂环；其中所述A环被独立地为以下的1-51-5个取代基任选取代：O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；并且
i是0-5的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，如果式XI的Q是S，则X不是键。
在一个实施方案中，式XI的化合物的A是Ph。在另一实施方案中，式XI的化合物的A是经取代的Ph。在另一实施方案中，取代基是4-F。在另一实施方案中，取代基是4-Me。在另一实施方案中，式XI的化合物的Q是S。在另一实施方案中，式XI的化合物的X是NH。式XI的化合物的非限制性实例选自：(2-(苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5a)、(2-(对甲苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5b)、(2-(对氟苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5c)、(2-(4-氯苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5d)、(2-(苯基氨基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5e)、(2-(苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(5Ha)、(2-(对甲苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(5Hb)、(2-(对氟苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(5Hc)、(2-(4-氯苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(5Hd)、(2-(苯基氨基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(5He)。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI(a)的结构表示的化合物：
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI(b)的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900451
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI(c)的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900461
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI(d)的结构表示的化合物：
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及由式XI(e)的结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900471
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在另一实施方案中，式XI的化合物通过化合物55的结构表示：
Figure BDA00003093994900481
在另一实施方案中，式XI的化合物通过化合物17ya的结构表示：
Figure BDA00003093994900482
在一个实施方案中，本发明提供通过以下结构表示的化合物：
Figure BDA00003093994900483
Figure BDA00003093994900491
Figure BDA00003093994900501
Figure BDA00003093994900511
Figure BDA00003093994900521
Figure BDA00003093994900531
Figure BDA00003093994900541
Figure BDA00003093994900551
应充分理解，在氮原子具有小于3个键的本发明存在的结构中，存在H原子以完成氮的化合价。
在一个实施方案中，式I、I(a)、IV、IX、IX(a)和XI的A、A′和/或C基团独立地为经取代和未经取代的呋喃基、吲哚基、吡啶基、苯基、联苯基、三苯基、二苯基甲烷、金刚烷-基、芴-基，以及其它杂环类似物，例如，吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、四嗪基、吡咯嗪基(pyrrolizinyl)、吲哚基、异喹啉基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、吲唑基、喹嗪基、噌啉基、喹唑啉基(quinalolinyl)、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、环氧乙烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、二噁烷基、呋喃基、吡喃鎓(pyrylium)、苯并呋喃基、苯并间二氧杂环戊烯基(benzodioxolyl)、硫杂环丙基(thiranyl)、硫杂环丁基(thietanyl)、四氢噻吩-基、二硫环戊基(dithiolanyl)、四氢噻喃基、噻吩-基、硫杂
Figure BDA00003093994900561
基(thiepinyl)、硫茚基、氧硫杂环戊基(oxathiolanyl)、吗啉基、噻噁烷基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基(oxadiaziolyl))。
在一个实施方案中，A、A′和/或C基团是经取代和未经取代的苯基。在另一实施方案中，A、A’和/或C基团是被Cl、F或甲基取代的苯基。在一个实施方案中，A、A′和/或C基团是经取代和未经取代的异喹啉基。在一个实施方案中，A、A′和/或C基团包括经取代和未经取代的吲哚基；最优选地，经取代和未经取代的3-吲哚基和5-吲哚基。
在一个实施方案中，式I、I(a)、IV、IX、IX(a)和XI的A、A’和/或C基团可以经取代或未经取代。因此，尽管在前述段落中示例性基团未经取代，但本领域技术人员应理解，这些基团可被一个或多个、两个或多个、三个或多个，以及甚至至多五个取代基(除氢外)取代。
在一个实施方案中，最优选的A、A’和/或C基团被3，4，5-三甲氧基苯基取代。在另一实施方案中，A、A’和/或C基团被烷氧基取代。在另一实施方案中，A、A’和/或C基团被甲氧基取代。在另一实施方案中，A、A’和/或C基团被烷基取代。在另一实施方案中，A、A’和/或C基团被甲基取代。在另一实施方案中，A、A’和/或C基团被卤素取代。在另一实施方案中，A、A’和/或C基团被F取代。在另一实施方案中，A、A’和/或C基团被Cl取代。A、A’和/或C环被Br取代。
式I、I(a)、IV、IX、IX(a)和XI的这些A、A’和/或C基团的取代基独立地选自氢(例如，在特定位置无取代)；羟基；脂肪族直或支链C1至C10烃；烷氧基；卤代烷氧基；芳氧基；硝基；氰基；烷基-CN；卤代(例如，F、Cl、Br、I)；卤代烷基；二卤代烷基；三卤代烷基；COOH；C(O)Ph；C(O)-烷基；C(O)O-烷基；C(O)H；C(O)NH2；-OC(O)CF3；OCH2Ph；氨基；氨基烷基；烷基氨基；甲磺酰氨基；二烷基氨基；芳基氨基；酰氨基；NHC(O)-烷基；脲；烷基-脲；烷基酰氨基(例如，乙酰胺)；卤代烷基酰氨基；芳基酰氨基；芳基；和C5至C7环烷基；芳基烷基；及其组合。单个取代基可存在于邻位、间位，或对位。当存在两个或多个取代基时，尽管非必要，但优选它们之一位于对位。
在一个实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团选自取代或未取代的-噻唑、噻唑烷、噁唑、噁唑啉、噁唑烷、苯、嘧啶、咪唑、吡啶、呋喃、噻吩、异噁唑、哌啶、吡唑、吲哚和异喹啉，其中所述B环通过环中任意两位置连接至X和Y或者直接连接至A和/或C环。
在一个实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团未经取代。在另一实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团是：
Figure BDA00003093994900571
Figure BDA00003093994900581
在另一实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团被取代。在另一实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团是：
Figure BDA00003093994900582
其中R10和R11独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2。
在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900583
(噻唑)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900591
(噻唑)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900592
(噻唑烷)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900593
(噁唑)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900594
(噁唑啉)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900595
(噁唑烷)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900596
(苯)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900597
(苯)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900598
(嘧啶)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA00003093994900599
(咪唑)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA000030939949005910
(吡啶)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA000030939949005911
(呋喃)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA000030939949005912
(噻吩)。在另一实施方案中，B基团是(异噁唑)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA000030939949005914
哌啶)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA000030939949005915
(哌啶)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA000030939949005916
(吡唑)。在另一实施方案中，B基团是(吲哚)。在另一实施方案中，B基团是
Figure BDA000030939949005918
(异喹啉)。
在一个实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团被R10和R11取代。在另一实施方案中，R10和R11均为氢。在另一实施方案中，R10和R11独立地为O-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为O-卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为F。在另一实施方案中，R10和R11独立地为Cl。在另一实施方案中，R10和R11独立地为Br。在另一实施方案中，R10和R11独立地为I。在另一实施方案中，R10和R11独立地为卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为CF3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为CN。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-CH2CN。在另一实施方案中，R10和R11独立地为NH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为羟基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iNHCH3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iNH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iN(CH3)2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-OC(O)CF3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链的卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链烷基氨基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链的氨基烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-OCH2Ph。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-NHCO-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为COOH。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-C(O)Ph。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C(O)O-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C(O)H。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-C(O)NH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为NO2。
在另一实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团是
Figure BDA00003093994900601
(噻唑)，其中R10和R11独立地为H并且l是1。在另一实施方案中，R10和R11独立地为O-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为O-卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为F。在另一实施方案中，R10和R11独立地为Cl。在另一实施方案中，R10和R11独立地为Br。在另一实施方案中，R10和R11独立地为I。在另一实施方案中，R10和R11独立地为卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为CF3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为CN。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-CH2CN。在另一实施方案中，R10和R11独立地为NH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为羟基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iNHCH3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iNH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iN(CH3)2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-OC(O)CF3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链的卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链烷基氨基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链的氨基烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-OCH2Ph。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-NHCO-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为COOH。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-C(O)Ph。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C(O)O-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C(O)H。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-C(O)NH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为NO2。
在另一实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团是
Figure BDA00003093994900611
(咪唑)，其中R10和R11独立地为H并且l是1。在另一实施方案中，R10和R11独立地为O-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为O-卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为F。在另一实施方案中，R10和R11独立地为Cl。在另一实施方案中，R10和R11独立地为Br。在另一实施方案中，R10和R11独立地为I。在另一实施方案中，R10和R11独立地为卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为CF3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为CN。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-CH2CN。在另一实施方案中，R10和R11独立地为NH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为羟基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iNHCH3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iNH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iN(CH3)2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-OC(O)CF3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链的卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链烷基氨基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链的氨基烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-OCH2Ph。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-NHCO-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为COOH。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-C(O)Ph。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C(O)O-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C(O)H。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-C(O)NH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为NO2。
在另一实施方案中，式I、I(a)、II、III、IV、IVa和V的B基团是
Figure BDA00003093994900621
(异喹啉)，其中R10和R11独立地为H并且l是1。在另一实施方案中，R10和R11独立地为O-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为O-卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为F。在另一实施方案中，R10和R11独立地为Cl。在另一实施方案中，R10和R11独立地为Br。在另一实施方案中，R10和R11独立地为I。在另一实施方案中，R10和R11独立地为卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为CF3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为CN。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-CH2CN。在另一实施方案中，R10和R11独立地为NH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为羟基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iNHCH3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iNH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-(CH2)iN(CH3)2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-OC(O)CF3。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链的卤代烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链烷基氨基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C1-C5直链或支链的氨基烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-OCH2Ph。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-NHCO-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为COOH。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-C(O)Ph。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C(O)O-烷基。在另一实施方案中，R10和R11独立地为C(O)H。在另一实施方案中，R10和R11独立地为-C(O)NH2。在另一实施方案中，R10和R11独立地为NO2。
在一个实施方案中，式I、Ia、II、III、IV、IVa和XI的X桥是键。在另一实施方案中，X桥是NH。在另一实施方案中，X桥是C1至C5烃。在另一实施方案中，X桥是CH2。在另一实施方案中，X桥是-CH2-CH2-。在另一实施方案中，X桥是O。在另一实施方案中，X桥是S。
在一个实施方案中，式I、Ia、II、III、IV、IVa、VI和VII的Y桥是C＝O。在另一实施方案中，Y桥是C＝S。在另一实施方案中，Y桥是C＝N(NH2)-。在另一实施方案中，Y桥是-C＝NOH。在另一实施方案中，Y桥是-CH-OH。在另一实施方案中，Y桥是-C＝CH-(CN)。在另一实施方案中，Y桥是-C＝N(CN)。在另一实施方案中，Y桥是-C＝C(CH3)2。在另一实施方案中，Y桥是-C＝N-OMe。在另一实施方案中，Y桥是-(C＝O)NH-。在另一实施方案中，Y桥是-NH(C＝O)-。在另一实施方案中，Y桥是-(C＝O)-O。在另一实施方案中，Y桥是-O-(C＝O)。在另一实施方案中，Y桥是-(CH2)1-5-(C＝O)。在另一实施方案中，Y桥是-(C＝O)-(CH2)1-5。在另一实施方案中，Y桥是S。在另一实施方案中，Y桥是SO。在另一实施方案中，Y桥是SO2。在另一实施方案中，Y桥是-CH＝CH-。在另一实施方案中，Y桥是-(SO2)-NH-。在另一实施方案中，Y桥是-NH-(SO2)-。
在一个实施方案中，式Ia、II、III、IV、IV(a)、V、VI、VIII、IX、IX(a)、XI(a)、XI(b)、XI(c)、XI(d)和XI(e)的R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为氢。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为O-烷基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为O-卤代烷基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为F。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为Cl。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为Br。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为I。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为卤代烷基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为CF3。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为CN。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-CH2CN。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为NH2。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为羟基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-(CH2)iNHCH3。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-(CH2)iNH2。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-(CH2)iN(CH3)2。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-OC(O)CF3。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为C1-C5直链或支链烷基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为卤代烷基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为烷基氨基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为氨基烷基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-OCH2Ph。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-NHCO-烷基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为COOH。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-C(O)Ph。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为C(O)O-烷基。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为C(O)H。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为-C(O)NH2。在另一实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地为NO2。
在一个实施方案中，本发明涉及式XII的化合物：
Figure BDA00003093994900641
其中，
P和Q独立地为H或
Figure BDA00003093994900642
W是C＝O、C＝S、SO2或S＝O；
其中Q或P中至少一者不是氢；
R1和R4独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、C(O)O-烷基或C(O)H；其中R1和R4中至少一者不是氢；
R2和R5独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
m是介于1-4之间的整数；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及式XIII的化合物：
Figure BDA00003093994900651
其中
Z是O或S；
R1和R4独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；其中R1和R4中至少一者不是氢；
R2和R5独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
m是介于1-4之间的整数；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，本发明涉及式XIV的化合物：
Figure BDA00003093994900661
其中R1和R4独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；其中R1和R4中至少一者不是氢；
R2和R5独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
m是介于1-4之间的整数；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R1是OCH3。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R1是4-F。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R1是OCH3以及m是3。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R4是4-F。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R4是OCH3。在另一实施方案中，式XIV的化合物的R4是CH3。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R4是4-Cl。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R4是4-N(Me)2。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R4是OBn。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R4是4-Br。在另一实施方案中，式XII、XIII和XIV的化合物的R4是4-CF3。式XIV的化合物的非限制性实例选自：(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12aa)、(4-氟苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12af)、(2-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ba)、(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ca)、(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12cb)、(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12da)、(4-氟苯基)(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12db)、(4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12dc)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12fa)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12fb)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)甲酮(12fc)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ga)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12gb)、(2-(3，4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ha)、(2-(4-(苄氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12jb)、(2-(4-溴苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12la)、(2-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12pa)。
在一个实施方案中，本发明涉及式XIVa的化合物：
Figure BDA00003093994900681
其中R1和R4独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；其中R1和R4中至少一者不是氢；
R2和R5独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
R9是H；直链或支链的、取代或未取代的烷基；取代或未取代的芳基；CH2Ph；经取代的苄基；卤代烷基；氨基烷基；OCH2Ph；取代或未取代的SO2-芳基；取代或未取代的-(C＝O)-芳基或OH；
其中取代基独立地选自：氢(例如，在特定位置无取代)；羟基；脂肪族直或支链C1至C10烃；烷氧基；卤代烷氧基；芳氧基；硝基；氰基；烷基-CN；卤代(例如，F、Cl、Br、I)；卤代烷基；二卤代烷基；三卤代烷基；COOH；C(O)Ph；C(O)-烷基；C(O)O-烷基；C(O)H；C(O)NH2；-OC(O)CF3；OCH2Ph；氨基；氨基烷基；烷基氨基；甲磺酰氨基；二烷基氨基；芳基氨基；酰氨基；NHC(O)-烷基；脲；烷基-脲；烷基酰氨基(例如，乙酰胺)；卤代烷基酰氨基；芳基酰氨基；芳基；和C5至C7环烷基；芳基烷基；及其组合；
m是介于1-4之间的整数；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XIVa的化合物的R9是CH3。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R9是CH2Ph。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R9是(SO2)Ph。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R9是(SO2)-Ph-OCH3。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R9是H。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R4是H。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R4是CH3。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R4是OCH3。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R4是OH。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R4是4-Cl。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R4是4-N(Me)2。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R4是OBn。在另一实施方案中，式XIVa的化合物的R1是OCH3；m是3并且R2是H。在另一实施方案中式XIVa的化合物的R1是F；m是1并且R2是H。式XIVa的化合物的非限制性实例选自：(4-氟苯基)(2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11af)、(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11cb)、(4-氟苯基)(1-(苯基磺酰基)-2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11db)、(2-(4-氯苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11fb)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11ga)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11gb)、(2-(3，4-二甲氧基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11ha)、(2-(4-(苄氧基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11jb)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-((4-甲氧基苯基)磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12gba)、(1-苄基-2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12daa)、(1-甲基-2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12dab)、(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12cba)。
在一个实施方案中，本发明涉及式XV的化合物：
Figure BDA00003093994900701
其中R4和R5独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XV的化合物的R4是H。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是F。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是Cl。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是Br。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是I。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是N(Me)2。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是OBn。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是OCH3。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是CH3。在另一实施方案中，式XV的化合物的R4是CF3。式XV的化合物的非限制性实例选自：(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12aa)、(2-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ba)、(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ca)、(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12da)、(3，4，5-三甲氧基苯基)(2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ea)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12fa)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ga)、(2-(3，4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ha)、(2-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ia)、(2-(4-(苄氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ja)、(2-(4-羟基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ka)、(2-(4-溴苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12la)、(2-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12pa)。
在一个实施方案中，本发明涉及式XVI的化合物：
其中R4和R5独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
R3是I、Br、Cl，或F；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分并构体。
在一个实施方案中，式XVI的化合物的R3是卤素。在另一实施方案中，R3是F。在另一实施方案中，R3是Cl。在另一实施方案中，R3是Br。在另一实施方案中，R3是I。在另一实施方案中，R4是H。在另一实施方案中，R4是OCH3。在另一实施方案中，R4是OCH3；n是3并且R5是H。在另一实施方案中，R4是CH3。在另一实施方案中，R4是F。在另一实施方案中，R4是Cl。在另一实施方案中，R4是Br。在另一实施方案中，R4是I。在另一实施方案中，R4是N(Me)2。在另一实施方案中，R4是OBn。在另一实施方案中，R3是F；R5是氢；n是1并且R4是4-Cl。在另一实施方案中，R3是F；R5是氢；n是1并且R4是4-OCH3。在另一实施方案中，R3是F；R5是氢；n是1并且R4是4-CH3。在另一实施方案中，R3是F；R5是氢；n是1并且R4是4-N(Me)2。在另一实施方案中，R3是F；R5是氢；n是1并且R4是4-OBn。式XVI的化合物的非限制性实例选自：(4-氟苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12af)、(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12cb)、(4-氟苯基)(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12db)、4-氟苯基)(2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12eb)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12fb)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12gb)、(2-(4-(苄氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12jb)。
在一个实施方案中，本发明涉及式XVII的化合物：
Figure BDA00003093994900721
其中R4是H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
其中R1和R2独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
以及
m是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XVII的化合物的R4是卤素。在另一实施方案中，R4是F。在另一实施方案中，R4是Cl。在另一实施方案中，R4是Br。在另一实施方案中，R4是I。在另一实施方案中，R4是OCH3。在另一实施方案中，R4是CH3。在另一实施方案中，R4是N(Me)2。在另一实施方案中，R4是CF3。在另一实施方案中，R4是OH。在另一实施方案中，R4是OBn。在另一实施方案中，式XVII的化合物的R1是卤素。在另一实施方案中，式XVII的化合物的R1是F。在另一实施方案中，式XVII的化合物的R1是Cl。在另一实施方案中，式XVII的化合物的R1是Br。在另一实施方案中，式XVII的化合物的R1是I。在另一实施方案中，式XVII的化合物的R1是OCH3。在另一实施方案中，式XVII的化合物的R1是OCH3，m是3并且R2是H。在另一实施方案中，式XVII的化合物R1是F，m是1并且R2是H。在另一实施方案中，R4是F；R2是氢；n是3并且R1是OCH3。在另一实施方案中，R4是OCH3；R2是氢；n是3并且R1是OCH3。在另一实施方案中，R4是CH3；R2是氢；n是3并且R1是OCH3。在另一实施方案中，R4是Cl；R2是氢；n是3并且R1是OCH3。在另一实施方案中，R4是N(Me)2；R2是氢；n是3并且R1是OCH3。在一个实施方案中，式XVII的化合物的R4是卤素，R1是H并且R2是卤素。在一个实施方案中，式XVII的化合物的R4是卤素，R1是卤素并且R2是H。在一个实施方案中，式XVII的化合物的R4是烷氧基，R1是卤素并且R2是H。在一个实施方案中，式XVII的化合物的R4是甲氧基，R1是卤素并且R2是H。式XVII的化合物的非限制性实例选自：(2-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ba)、(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ca)、(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12cb)、(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12da)、(4-氟苯基)(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12db)、(4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12dc)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12fa)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12fb)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三羟基苯基)甲酮(13fa)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ga)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12gb)、(2-(4-(苄氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12jb)、(2-(4-羟基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ka)、(2-(4-溴苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12la)、(2-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12pa)。
在另一实施方案中，式XVII的化合物由式12fb的结构表示：
在另一实施方案中，式XVII化合物由式12cb的结构表示：
Figure BDA00003093994900742
在一个实施方案中，本发明涉及式XVIII的化合物：
其中
W是C＝O、C＝S、SO2或S＝O；
R4和R7独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
R5和R8独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
n是介于1-4之间的整数；
i是介于0-5之间的整数；并且
q是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XVIII的化合物的W是C＝O。在另一实施方案中，式XVIII的化合物的W是SO2。在另一实施方案中，式XVIII的化合物的R4是H。在另一实施方案中，式XVIII的化合物的R4是NO2。在另一实施方案中，式XVIII的化合物的R4是OBn。在另一实施方案中，式XVIII的化合物的R7是H。在另一实施方案中，式XVIII的化合物的R7是OCH3。在另一实施方案中，式XVIII的化合物的R7是OCH3并且q是3。式XVII的化合物的非限制性实例选自：(4-甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-1-基)甲酮(12aba)、(2-苯基-1H-咪唑-1-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12aaa)、2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10a)、2-(4-硝基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10x)、2-(4-(苄氧基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10j)。
在一个实施方案中，本发明涉及式XIX的化合物：
Figure BDA00003093994900761
其中
W是C＝O、C＝S、SO2、S＝O；
R1、R4和R7独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
R2、R5和R8独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
m是介于1-4之间的整数；
n是介于1-4之间的整数；
i是介于0-5之间的整数；并且
q是1-4；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XIX的R1、R4和R7独立地为H。在另一实施方案中，式XIX的R1、R4和R7独立地为O-烷基。在另一实施方案中，式XIX的R1、R4和R7独立地为卤素。在另一实施方案中，式XIX的R1、R4和R7独立地为CN。在另一实施方案中，式XIX的R1、R4和R7独立地为OH。在另一实施方案中，式XIX的R1、R4和R7独立地为烷基。在另一实施方案中，式XIX的R1、R4和R7独立地为OCH2Ph。在一个实施方案中，式XIX的R2、R5和R8独立地为H。在另一实施方案中，式XIX的R2、R5和R8独立地为O-烷基。在另一实施方案中，式XIX的R2、R5和R8独立地为卤素。在另一实施方案中，式XIX的R2、R5和R8独立地为CN。在另一实施方案中，式XIX的R2、R5和R8独立地为OH。在另一实施方案中，式XIX的R2、R5和R8独立地为烷基。在另一实施方案中，式XIX的R2、R5和R8独立地为OCH2Ph。在另一实施方案中，式XIX的R5、R2和R8为H，R4是4-N(Me)2，R1是OCH3，m是3并且R7是OCH3。在另一实施方案中，式XIX的R5、R2、R7和R8为H，R4是4-Br，R1是OCH3，并且m是3。在另一实施方案中，W是SO2。在另一实施方案中，W是C＝O。在另一实施方案中，W是C＝S。在另一实施方案中，W是S＝O。式XIX的化合物的非限制性实例选自：(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-((4-甲氧基苯基)磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11gaa)、(2-(4-溴苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11la)、(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11cb)、(2-(4-氯苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11fb)、(4-氟苯基)(2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11af)、(4-氟苯基)(1-(苯基磺酰基)-2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11db)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11ga)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11gb)、(2-(3，4-二甲氧基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11ha)、(2-(4-(苄氧基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11jb)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-((4-甲氧基苯基)磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12gba)。
在另一实施方案中，式XIX的化合物由式11cb的结构表示：
Figure BDA00003093994900781
在另一实施方案中，式XIX的化合物由式11fb的结构表示：
Figure BDA00003093994900782
在一个实施方案中，本发明涉及式XX的化合物：
Figure BDA00003093994900791
其中
R4是H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；并且
i是介于0-5之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XX的化合物的R4是H。在另一实施方案中，式XX的化合物的R4是卤素。在另一实施方案中，R4是F。在另一实施方案中，R4是Cl。在另一实施方案中，R4是Br。在另一实施方案中，R4是I。在另一实施方案中，R4是烷基。在另一实施方案中，R4是甲基。式XX的化合物的非限制性实例选自：(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12aa)、(2-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ba)、(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ca)、(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12da)、(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12fa)、(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ga)、(2-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ia)、(2-(4-(苄氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ja)、(2-(4-羟基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ka)、(2-(4-溴苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12la)、(2-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12pa)。
在另一实施方案中，式XX的化合物由式12da的结构表示：
Figure BDA00003093994900801
在另一实施方案中，式XX的化合物由式12fa的结构表示：
在一个实施方案中，本发明涉及式XXI的化合物：
Figure BDA00003093994900803
其中
A是吲哚基；
Q是NH、O或S；
R1和R2独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；并且
其中所述A被以下任选取代：取代或未取代的O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、取代或未取代的-SO2-芳基、取代或未取代的C1-C5直链或支链烷基、取代或未取代的卤代烷基、取代或未取代的烷基氨基、取代或未取代的氨基烷基、-OCH2Ph、取代或未取代的-NHCO-烷基、COOH、取代或未取代的-C(O)Ph、取代或未取代的C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2、NO2或其组合；
i是介于0-5之间的整数；并且
m是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XXI的化合物的R1是OCH3；m是3并且R2是氢。在另一实施方案中，R1是F；m是1并且R2是氢。在一个实施方案中，式XXI的Q是O。在另一实施方案中，式XXI的Q是NH。在另一实施方案中，式XXI的Q是S。
在一个实施方案中，式XXI的化合物的A环是经取代的5-吲哚基。在另一实施方案中，取代基是-(C＝O)-芳基。在另一实施方案中，芳基是3，4，5-(OCH3)3-Ph。
在另一实施方案中，式XXI的化合物的A环是3-吲哚基。在另一实施方案中，式XXI的化合物的A环是5-吲哚基。在另一实施方案中，式XXI的化合物的A环是2-吲哚基。式XXI的化合物的非限制性实例选自：(5-(4-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-1H-咪唑-2-基)-1H-吲哚-2-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(15xaa)；(1-(苯基磺酰基)-2-(1-(苯基磺酰基)-2-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(16xaa)；2-(1H-吲哚-3-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(17ya)；(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(62a)；以及(2-(1H-吲哚-5-基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(66a)。
在一个实施方案中，本发明涉及式XXIa的化合物：
Figure BDA00003093994900821
其中
W是C＝O、C＝S、SO2、S＝O；
A是吲哚基；
R1和R2独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
R7和R8独立地为H、O-烷基、I、Br、Cl、F、烷基、卤代烷基、氨基烷基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、OCH2Ph、OH、CN、NO2、-NHCO-烷基、COOH、C(O)O-烷基或C(O)H；
其中所述A被以下任选取代：取代或未取代的O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、取代或未取代的-SO2-芳基、取代或未取代的C1-C5直链或支链烷基、取代或未取代的卤代烷基、取代或未取代的烷基氨基、取代或未取代的氨基烷基、-OCH2Ph、取代或未取代的-NHCO-烷基、COOH，取代或未取代的-C(O)Ph、取代或未取代的C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2、NO2或其组合；
i是介于0-5之间的整数；并且
m是介于1-4之间的整数；
q是介于1-4之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XXIa的化合物的R1是OCH3；m是3并且R2是氢。在另一实施方案中，R1是F；m是1并且R2是氢。在另一实施方案中，式XXIa的化合物的A环是经取代的5-吲哚基。在另一实施方案中，式XXIa的化合物的A环是3-吲哚基。式XXIa的化合物的非限制性实例选自：(1-(苯基磺酰基)-2-(1-(苯基磺酰基)-2-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(16xaa)；(1-(苯基磺酰基)-2-(1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(17yaa)。
在一个实施方案中，本发明涉及式XXII的化合物：
Figure BDA00003093994900831
其中
A是吲哚基；
其中所述A被以下任选取代：取代或未取代的O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3，取代或未取代的-SO2-芳基、取代或未取代的C1-C5直链或支链烷基、取代或未取代的卤代烷基、取代或未取代的烷基氨基、取代或未取代的氨基烷基、-OCH2Ph、取代或未取代的-NHCO-烷基、COOH，取代或未取代的-C(O)Ph、取代或未取代的C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2、NO2或其组合；
i是介于0-5之间的整数；
或其药学上可接受的盐、水合物、多晶型物、代谢物、互变异构体或同分异构体。
在一个实施方案中，式XXII的化合物的A环是经取代的5-吲哚基。在另一实施方案中，取代基是-(C＝O)-芳基。在另一实施方案中，芳基是3，4，5-(OCH3)3-Ph。
在另一实施方案中，式XXII的化合物的A环是3-吲哚基。式XXII的化合物的非限制性实例选自：(5-(4-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-1H-咪唑-2-基)-1H-吲哚-2-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(15xaa)；(2-(1H-吲哚-3-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(17ya)。
在另一实施方案中，式XXI或XXII的化合物由式17ya的结构表示：
Figure BDA00003093994900841
在一个实施方案中，式XII的化合物的Q是H并且P是
Figure BDA00003093994900851
在另一实施方案中，式XII的化合物的P是H并且Q是在另一实施方案中，式XII的化合物的P是
Figure BDA00003093994900853
并且Q是SO2-Ph。在一个实施方案中，式XII的化合物的Q是H并且P是
Figure BDA00003093994900854
其中W是C＝O。在另一实施方案中，式XII、XVIII、XIX，或XXIa的W是C＝O。在另一实施方案中，式XII、XVIII、XIX，或XXIa的W是SO2。在另一实施方案中，式XII、XVIII、XIX，或XXIa的W是C＝S。在另一实施方案中，式XII、XVIII、XIX，或XXIa的W是S＝O。
在一个实施方案中，式XIII的化合物的Z是氧。在另一实施方案中，式XIII的化合物的Z是硫。
在一个实施方案中，式XII-XVI、XVIII，或XIX的化合物的R5是氢，n是1并且R4是在对位。
在一个实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是烷基。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是H。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是甲基(CH3)。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是O-烷基。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是OCH3。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是I。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是Br。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是F。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是Cl。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是N(Me)2。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是OBn。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是OH。在另一实施方案中，式XII-XX的化合物的R4是CF3。
在一个实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R2是氢；R1是OCH3并且m是3。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R2是氢；m是1并且R1是在对位。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R2是氢；m是1并且R1是I。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R2是氢；m是1并且R1是Br。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R2是氢；m是1并且R1是F。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R2是氢；m是1并且R1是Cl。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R1是I。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R1是Br。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R1是Cl。在另一实施方案中，式XII、XIII、XIV、XIVa、XVII、XIX、XXI或XXIa的化合物的R1是F。
在一个实施方案中，式XII的化合物的Q是H并且P是
Figure BDA00003093994900861
其中W是C＝O。式XII-XVII和XX-XXII的化合物的非限制性实例选自：(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12aa)；(4-甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ab)；(3-甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ac)；(3，5-二甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ad)；(3，4-二甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ae)；(4-氟苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12af)；(3-氟苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ag)；(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(对甲苯基)甲酮(12ah)；(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(间甲苯基)甲酮(12ai)；(2-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ba)；(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ca)；(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12cb)；(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12da)；(4-氟苯基)(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12db)；(4-氟苯基)(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮盐酸盐(12db-HCl)；(4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12dc)；(3，4，5-三甲氧基苯基)(2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ea)；(4-氟苯基)(2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12eb)；(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12fa)；(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12fb)；(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)甲酮(12fc)；(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ga)；(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12gb)；(2-(3，4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ha)；(2-(3，4-二甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12hb)；(2-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ia)；(4-氟苯基)(2-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ib)；(2-(4-(苄氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ja)；(2-(4-(苄氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12jb)；(2-(4-羟基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12ka)；(2-(4-(羟基苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12kb)；(2-(4-溴苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12la)；(2-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12pa)；(3，4，5-三羟基苯基)(2-(3，4，5-三羟基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(13ea)；(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三羟基苯基)甲酮(13fa)；以及2-(3，4-二羟基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三羟基苯基)甲酮(13ha)。
在一个实施方案中，式XII的化合物的P是
Figure BDA00003093994900871
并且Q是SO2-Ph。其中式XII的化合物的P是
Figure BDA00003093994900872
并且Q是SO2-Ph的式XII的化合物的非限制性实例选自：(4-甲氧基苯基)(2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11ab)；(3-甲氧基苯基)(2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11ac)；(2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(对甲苯基)甲酮(11ah)；(4-氟苯基)(2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11af)；(3-氟苯基)(2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11ag)；(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11cb)；(1-(苯基磺酰基)-2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11da)；(4-氟苯基)(1-(苯基磺酰基)-2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11db)；(1-(苯基磺酰基)-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11ea)；(4-氟苯基)(1-(苯基磺酰基)-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11eb)；(2-(4-氯苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11fb)；(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11ga)；(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11gb)；(2-(3，4-二甲氧基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11ha)；(2-(3，4-二甲氧基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11hb)；(1-(苯基磺酰基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11ia)；(1-(苯基磺酰基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11ib)；和(2-(4-(苄氧基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11jb)；(2-(4-溴苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11la)；(1-(苯基磺酰基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11pa)。
在一个实施方案中，式XIII-XVI的化合物的R4和R5是氢。其中R4和R5是氢的式XIII-XVI的化合物的非限制性实例选自：(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12aa)；(4-甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ab)；(3-甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ac)；(3，5-二甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ad)；(3，4-二甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ae)；(4-氟苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12af)；(3-氟苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12ag)；(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(对甲苯基)甲酮(12ah)；以及(2-苯基-1H-咪唑-4-基)(间甲苯基)甲酮(12ai)。
在一个实施方案中，式XII的化合物的P是H并且Q是
Figure BDA00003093994900881
在另一实施方案中，W是C＝O。在另一实施方案中，式XVIII的化合物的W是C＝O。其中W是C＝O的式XVIII的化合物的非限制性实例选自(4-甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-1-基)甲酮(12aba)和(2-苯基-1H-咪唑-1-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12aaa)。
在另一实施方案中，式XVIII的化合物的W是SO2。其中W是SO2的式XVIII的化合物的非限制性实例选自2-苯基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10a)；2-(4-硝基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10x)和2-(4-(苄氧基)苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10j)。
如本文所使用，“单环、稠环或多环、芳香或(杂)环环状系统”可以为任意这种环，包括但不限于苯基、联苯基、三苯基、萘基、环烷基、环烯基、环二烯基、芴、金刚烷等。
“饱和或不饱和的N-杂环”可以为这些包含N的杂环，包括但不限于氮杂-和二氮杂-环烷基，例如氮丙啶基、氮杂环丁基、重氮烷基(diazatidinyl)、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和氮杂环辛烷基(azocanyl)、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、四嗪基、吡咯嗪基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、吲唑基、喹嗪基、噌啉基、喹诺酮基(quinololinyl)、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基等。
“饱和或不饱和的O-杂环”可以为任意这些包含O的杂环，包括但不限于环氧乙烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、二噁烷基、呋喃基、吡喃鎓、苯并呋喃基、苯并间二氧杂环戊烯基等。
“饱和或不饱和的S-杂环”可以为任意这些包含S的杂环，包括但不限于硫杂环丙基、硫杂环丁基、四氢噻吩-基、二硫戊环基、四氢噻喃基、噻吩-基、硫杂
Figure BDA00003093994900891
基、硫茚基等。
“饱和或不饱和的混合的杂环”可以为任意含有两个或多个S-、N-，或O-杂原子的杂环，包括但不限于氧硫杂环戊基、吗啉基、噻噁烷基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基等。
如本文所使用，“脂肪族直链或支链烃”是指含有单个碳和至多所定义所限的亚烷基，以及含有两个碳至至多上限的烯基和炔基，无论碳是否存在于单链或支链上。除非具体说明，烃可包括至多约30个碳，或者至多约20个碳，或这多约10个碳。烯基和炔基可以为单不饱和或多不饱和。在另一实施方案中，烷基包括C1-C6碳。在另一实施方案中，烷基包括C1-C8碳。在另一实施方案中，烷基包括C1-C10碳。在另一实施方案中，烷基是C1-C12碳。在另一实施方案中，烷基是C1-C5碳。
如本文所使用，除非另有说明，术语“烷基”可以为含有至多约30个碳的任意直链或支链烷基。在另一实施方案中，烷基包括C1-C6碳。在另一实施方案中，烷基包括C1-C8碳。在另一实施方案中，烷基包括C1-C10碳。在另一实施方案中，烷基是C1-C12碳。在另一实施方案中，烷基是C1-C20碳。在另一实施方案中，环烷基具有3-8个碳。在另一实施方案中，支链烷基是被1至5个碳的烷基支链取代的烷基。
烷基可以为唯一取代基或者它可以为例如在烷氧基、卤代烷基、芳基烷基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基酰氨基、烷基脲等中的较大取代基的组成部分。优选的烷基为甲基、乙基和丙基，以及卤代甲基、二卤代甲基、三卤代甲基、卤代乙基、二卤代乙基、三卤代乙基、卤代丙基、二卤代丙基、三卤代丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、芳基甲基、芳基乙基、芳基丙基、甲氨基、乙基氨基、丙基氨基、二甲氨基、二乙基氨基、甲基酰氨基、乙酰氨基、丙酰氨基、卤代甲酰氨基、卤代乙酰氨基、卤代丙酰氨基、甲基-脲、乙基-脲、丙基-脲等。
如本文所使用，术语“芳基”是指直接键合另一基团的任意芳香环。芳基可以为唯一取代基，或者芳基可以为例如在芳基烷基、芳基氨基、芳基酰氨基等中的较大取代基的组成部分。示例性芳基包括但不限于苯基、甲苯基、二甲苯基、呋喃基、萘基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩-基、吡咯基、苯基甲基、苯基乙基、苯基氨基、苯基酰氨基等。
如本文所使用，术语“氨基烷基”是指被如上所述的烷基取代的胺基。氨基烷基是指单烷基胺、二烷基胺或三烷基胺。氨基烷基的非限制性实例是-N(Me)2、-NHMe、-NH3。
在另一实施方案中，“卤代烷基”是指如上所定义的烷基，其被诸如F、Cl、Br或I的一个或多个卤素原子所取代。卤代烷基的非限制性实例是CF3、CF2CF3、CH2CF3。
在一个实施方案中，本发明提供本发明的化合物或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物，或晶体或其组合。在一个实施方案中，本发明提供本发明的化合物的同分异构体。在另一实施方案中，本发明提供本发明的化合物的代谢物。在另一实施方案中，本发明提供本发明的化合物的药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明提供本发明的化合物的药物产品。在另一实施方案中，本发明提供本发明的化合物的互变异构体。在另一实施方案中，本发明提供本发明的化合物的水合物。在另一实施方案中，本发明提供本发明的化合物的N-氧化物。在另一实施方案中，本发明提供本发明的化合物的多晶型物。在另一实施方案中，本发明提供本发明的化合物的晶体。在另一实施方案中，本发明提供包含如本文所述的本发明的化合物的组合物；或者在另一实施方案中，本发明的化合物的同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物，或晶体的组合。
在一个实施方案中，术语“同分异构体”包括但不限于光学异构体和类似物、结构异构体和类似物、构象异构体和类似物等。
在一个实施方案中，本发明的化合物是纯(E)-异构体。在另一实施方案中，本发明的化合物是纯(Z)-异构体。在另一实施方案中，本发明的化合物是(E)和(Z)异构体的混合物。在一个实施方案中，本发明的化合物是纯(R)-异构体。在另一实施方案中，本发明的化合物是纯(S)-异构体。在另一实施方案中，本发明的化合物是(R)和(S)异构体的混合物。
本发明的化合物也可以含有基本上等量的立体异构体的外消旋混合物的形式存在。在另一实施方案中，使用已知程序可制备或者分离本发明的化合物以制备基本上没有其对应立体异构体的立体异构体(即，基本上纯)。所谓基本上纯，其旨在表示立体异构体为至少约95％纯，更优选为至少约98％纯，最优选为至少约99％纯。
本发明的化合物也可以为水合物形式，其表示化合物进一步包括通过非共价分子间力结合的化学计量或非化学计量的水。
本发明的化合物可以一种或多种可能互变异构体的形式存在，并且取决于特定条件，有可能将一些或所有互变异构体分离为单个不同的实体。应理解，在此涵盖包括所有另外的烯醇和酮基互变异构体的所有可能互变异构体和/或同分异构体。例如，包括但不限于以下互变异构体。
咪唑环的互变异构化
Figure BDA00003093994900921
本发明包括本发明的化合物的“药学上可接受的盐”，其可通过本发明的化合物与酸或碱反应制备。某些化合物、特别是具有酸或碱性基团的那些也可以为盐的形式，优选为药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的盐”是指保留游离碱或游离酸的生物效应和性质的那些盐，其不是生物的或者非期望的。使用诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等的无机酸，以及诸如乙酸、丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、肉铁质酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、N-乙酰半胱胺酸等的有机酸来形成盐。本领域技术人员已知其它盐，并且依照本发明可容易地使其适于使用。
可由无机酸或由有机酸制备本发明化合物的胺类的合适的药学上可接受的盐。在一个实施方案中，胺类的无机盐的实例是硫酸氢盐、硼酸盐、溴化物、氯化物、半硫酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、2-羟基乙基磺酸盐(羟基乙磺酸盐)、碘酸盐、碘化物、异硫代硫酸盐(isothionate)、硝酸盐、过硫酸盐、磷酸盐、硫酸盐、氨基磺酸盐、磺胺酸盐、磺酸类(烷基磺酸盐、芳基磺酸盐、卤素取代的烷基磺酸盐、卤素取代的芳基磺酸盐)、磺酸盐和硫氰酸盐。
在一个实施方案中，胺类的有机盐的实例可以选自脂肪族、环脂肪族、芳香族、芳脂族、杂环、有机酸的羧酸和磺酸类，其实例为乙酸盐、精氨酸盐、天冬氨酸盐、抗坏血酸盐、己二酸盐、邻氨基苯甲酸盐、海藻酸盐、链烷羧酸盐、经取代的链烷羧酸盐、藻酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、碳酸氢盐、洒石酸氢盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环己基氨基磺酸盐、环戊丙酸盐、依地酸钙、右旋樟脑磺酸盐(camsylate)、碳酸盐、克拉维酸钾盐、肉桂酸盐、二羧酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基磺酸盐、二盐酸盐、癸酸盐、庚酸盐(enanthuate)、乙磺酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、硫酸月桂酸盐(estolate)、乙磺酸盐、富马酸盐、甲酸盐、氟化物、半乳糖醛酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、葡萄糖酸盐(glucorate)、葡萄糖庚酸盐、甘油磷酸盐、葡庚糖酸盐、乙醇酰基对氨基苯砷酸盐(glycollylarsanilate)、戊二酸盐、谷氨酸盐、庚酸盐、己酸盐、羟基马来酸盐、羟基羧酸类、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、羟基苯甲酸盐、羟基萘甲酸盐、氢氟酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、亚甲基双(β-萘酚酸盐)、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲烷磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基磺酸盐、马来酸单钾盐、粘酸盐、单羧酸盐、萘磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、萘磺酸盐、N-甲基葡糖胺、草酸盐、辛酸盐、油酸盐、扑酸盐、苯乙酸盐、苦味酸盐、苯基苯甲酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、邻苯二甲酸盐、苯乙酸盐、果胶酸盐(pectinates)、苯基丙酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、聚半乳糖醛酸盐(polygalacturates)、丙酮酸盐、奎尼酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硬脂酸盐、磺胺酸盐、碱式醋酸盐、酒石酸盐、茶碱醋酸盐、对甲苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)、三氟醋酸盐、对苯二甲酸盐、鞣酸盐、茶氯酸盐、三卤醋酸盐、三乙基碘、三羧酸盐、十一酸盐和戊酸盐。
在一个实施方案中，羧酸类或羟基类的无机盐的实例可以选自铵；包括锂、钠、钾、铯的碱金属；包括钙、镁、铝的碱土金属；锌；钡；胆碱；季铵。
在另一实施方案中，羧酸类或羟基类的有机盐的实例选自精氨酸；包括脂肪族有机胺、脂环族有机胺、芳香族有机胺的有机胺类；苄星青霉素；叔丁胺；苯乙苄胺(N-苄基苯乙胺)；二环己胺；二甲胺；二乙醇胺；乙醇胺；乙二胺；海巴明；咪唑；赖氨酸；甲胺；蜜胺(meglamine)；N-甲基-D-葡糖胺；N，N’-二苄基乙二胺；烟酰胺；有机胺；鸟氨酸；吡啶；甲基吡啶(picoly)；哌嗪；普鲁卡因；三(羟基甲基)甲胺；三乙胺；三乙醇胺；三甲胺；氨丁三醇和脲。
在一个实施方案中，通过常规方法可形成盐，例如通过在盐不溶解于其中的溶剂或介质中或者在诸如水(在真空中，或冷冻干燥去除)的溶剂中使产品的游离碱或游离酸形式与一个或多个当量的合适酸或碱反应，或通过将现有盐的离子交换为另一离子，或者合适的离子交换树脂。
在一些实施方案中，本发明提供制备本发明的化合物的方法。在一个实施方案中，通过使适当取代苯甲醛与乙二胺反应以构建咪唑啉环，随后通过氧化剂氧化咪唑啉至相应咪唑来制备芳基-咪唑。在另一实施方案中，氧化剂是二乙酰氧基碘苯、溴三氯甲烷和1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、碳-O2体系或钯-碳体系。在另一实施方案中，通过在碘和碳酸钾的存在下使适当取代的苯甲醛与乙二胺反应以构建咪唑啉环、随后通过二乙酰氧基碘苯、溴三氯甲烷和1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、碳-O2体系或钯-碳体系催化将咪唑啉环氧化至相应的咪唑来制备芳基-咪唑。在另一实施方案中，通过在碘和碳酸钾的存在下使适当取代的苯甲醛与乙二胺反应以构建咪唑啉环、随后通过二乙酰氧基碘苯催化将咪唑啉环氧化至相应的咪唑来制备芳基-咪唑。在另一实施方案中，通过在碘和碳酸钾的存在下使适当取代的苯甲醛与乙二胺反应以构建咪唑啉环、随后通过溴三氯甲烷和1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化将咪唑啉环氧化至相应的咪唑来制备芳基-咪唑。在一个实施方案中，通过使在乙醇中合适的苯甲醛与乙二醛和氢氧化铵反应以构建咪唑环状系统来制备芳基-咪唑。
在一个实施方案中，通过保护芳基-咪唑、随后与经适当取代的苯甲酰氯偶联、随后去除保护基团来制备本发明的芳基-苯甲酰基-咪唑化合物。在另一实施方案中，保护基团是苯基磺酰基、苯邻二甲酰亚胺、二碳酸二叔丁酯(Boc)、芴甲氧羰基(Fmoc)、苄氧基羰基(Cbz)，或单甲氧基三苯甲基(MMT)。在另一实施方案中，使用苯基磺酰基来保护芳基-咪唑以得到N-磺酰基保护的芳基-咪唑。在另一实施方案中，通过在THF中使芳基-咪唑与苯基磺酰氯和氢化钠反应来制备保护的芳基-咪唑化合物。在另一实施方案中，根据图7和8来制备保护的芳基-咪唑。
在一个实施方案中，使保护的芳基-咪唑与适当取代的苯甲酰氯偶联以获得保护的芳基-苯甲酰基咪唑。在另一实施方案中，在叔丁基锂的存在下使芳基-咪唑与适当取代的苯甲酰氯偶联以获得芳基-苯基磺酰基(2-芳基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮。在另一实施方案中，根据图7和8步骤e和c来分别制备(2-芳基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮。
在一个实施方案中，通过去除芳基-苯甲酰基-咪唑的保护基团来制备芳基-苯甲酰基-咪唑。在另一实施方案中，保护基团的去除取决于使用的保护基团以及已知条件可去除，该条件为本领域所已知。在另一实施方案中，通过在THF中四丁基氟化铵来去除苯基磺酰基保护基团。在另一实施方案中，根据图7和8来去除苯基磺酰基。
在一个实施方案中，根据图1来制备式I、Ia、II、III、V和XI的化合物。在另一实施方案中，根据图2来制备式I、Ia、II、III、V、VI、VII和XI的化合物。在另一实施方案中，根据图3来制备式I、Ia、II、III、V和VI的化合物。在另一实施方案中，根据图4来制备式I、Ia、II、III、V和VI的化合物。在另一实施方案中，根据图5来制备式I、Ia、II、III、IV、IVa、V、VI和XI的化合物。在另一实施方案中，根据图6来制备式I、Ia、II、III、VIII和XI的化合物。
在一个实施方案中，根据图9来制备式XII和XVIII的化合物。在另一实施方案中，根据图10来制备式XII、XIII、XIV、XIVa、XV、XVI、XVII、XIX和XX的化合物。在另一实施方案中，根据图11来制备式XIVa和XIX的化合物。在另一实施方案中，根据图12来制备式I、Ia、IV、IVa、XI、XXI、XXIa和XXII的化合物。在另一实施方案中，根据图13来制备式I、Ia、IV、IVa、XI、XIb、XXI、XXIa和XXII的化合物。在另一实施方案中，根据图14来制备式I、Ia、II、III、V、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVII、XIX和XX的化合物。在另一实施方案中，根据图15来制备式I、Ia、II、IV、IVa、XI和XIc的化合物。
在一个实施方案中，根据图16来制备式IX和IXa的化合物。
药物组合物
本发明的另一方面涉及药物组合物，其包含药学上可接受的载体和根据本发明的方面的化合物。药物组合物可含有一种或多种本发明上述化合物。通常，本发明的药物组合物包括本发明的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。术语“药学上可接受的载体”是指任何合适的佐剂、载体、赋形剂，或稳定剂，并且可以为固体或液体形式，例如，片剂、胶囊、粉末、溶液、混悬物，或乳剂。
通常，组合物含有约0.01至99％、优选约20至75％的活性化合物，以及佐剂、载体和/或赋形剂。尽管个别需求可变化，但各组分的有效量最佳范围的确定在本领域的技术内。通常剂量包括约0.01至约100mg/kg体重。优选剂量包括约0.1至约100mg/kg体重。最优选的剂量包括约1至约100mg/kg体重。通过本领域普通技术人员也可容易地确定本发明化合物的施用的治疗方案。即，通过常规最佳化可建立施用频率和剂量大小，优选同时最小化任何副作用。
固体单位剂型可具有常见类型。固体形式可以为胶囊等，例如含有本发明的化合物和诸如润滑剂的载体以及诸如乳糖、蔗糖，或玉米淀粉的惰性填料的常见明胶类型。在另一实施方案中，联合类似阿拉伯胶、玉米淀粉，或明胶的粘合剂；诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉，或藻酸的崩解剂；以及类似硬脂酸或硬脂酸镁的润滑剂，使用诸如乳糖、蔗糖，或玉米淀粉的常见片剂基料来压片这些化合物。
片剂、胶囊等也可含有诸如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉，或明胶的粘合剂；诸如磷酸二钙的赋形剂；诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸的崩解剂；诸如硬脂酸镁的润滑剂；以及诸如蔗糖、乳糖，或糖精的甜味剂。当剂量单位形式为胶囊时，除了以上类型的材料之外，它可含有诸如脂肪油的液体载体。
各种其它材料可用作包衣或者用于改变剂量单位的物理形态。例如，可使用虫胶、糖，或两者将片剂包衣。除了活性成分之外，糖浆剂可含有蔗糖作为甜味剂、尼泊金甲酯和丙酯作为防腐剂、染料，以及诸如樱桃和橙子味道的调味剂。
对于口服治疗施用，可将这些活性化合物并入赋形剂以及以片剂、胶囊、酏剂、混悬剂、糖浆剂等形式使用。这些组合物和制剂应当含有至少0.1％的活性化合物。在这些组合物中化合物的百分比当然可以变化并且可方便地介于约2％至约60％单位重量之间。在这些治疗可使用的组合物中活性化合物的量为使得可获得合适的剂量。制备根据本发明的优选组合物，使得口服剂量单位含有介于约1mg至800mg之间的活性化合物。
例如使用惰性稀释剂，或使用可吸收食用的载体可口服本发明的活性化合物；或者可将它们包入硬或软壳胶囊中；或者可将它们压制成片；或者可将它们直接并入膳食内。
适于注射使用的药物剂型包括无菌水性溶液或分散体以及用于临时制备无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。在所有情况下，剂型应当无菌并且应当具有易于注射的流动性。在制备和储存的条件下它应当稳定并且应当针对诸如细菌和真菌的微生物污染作用而防腐。载体可以为含有诸如水、乙醇、二醇(例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、其合适的混合物，以及植物油的溶剂或分散介质。
也可通过在具有药物佐剂、载体或赋形剂的生理上可接受的稀释剂中这些材料的溶液或混悬物以可注射剂量施用本发明的化合物或药物组合物。这些佐剂、载体和/或赋形剂包括但不限于加入或未加入表面活性剂和其它药学上和生理上可接受的组分的诸如水和油的无菌液体。示意性油类是石油、动物、植物或合成来源的那些，例如，花生油、大豆油，或矿物油。通常，水、盐水、水性右旋糖和相关糖溶液，以及诸如丙二醇或聚乙二醇的二醇为优选的液体载体，特别是对于可注射溶液。
也可胃肠外施用这些活性化合物。在与诸如羟基丙基纤维素的表面活性剂适当混合的水中可制备这些活性化合物的溶液或混悬物。也可在甘油、液体聚乙二醇及其在油中混合物中制备分散体。示意性油类是石油、动物、植物，或合成来源的那些，例如，花生油、大豆油，或矿物油。通常，水、盐水、水性右旋糖和相关糖溶液，以及诸如丙二醇或聚乙二醇的二醇是优选的液体载体，特别是对于可注射溶液。在储存和使用的普通条件下，这些制剂含有防腐剂以防止微生物生长。
对于用作气溶胶，可将在溶液或混悬物中本发明的化合物连同诸如类似丙烷、丁烷，或异丁烷的烃推进剂的合适的推进剂以及常见佐剂包装在加压的气溶胶容器中。也可将本发明的材料以非加压形式施用，例如在喷雾器或雾化器中。
在一个实施方案中，联合抗癌剂来施用本发明的化合物。在一个实施方案中，抗癌剂是单克隆抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体用于诊断、监控，或治疗癌症。在一个实施方案中，单克隆抗体针对癌细胞上特异性抗原反应。在一个实施方案中，单克隆抗体作为癌症细胞受体拮抗剂。在一个实施方案中，单克隆抗体增强患者的免疫应答。在一个实施方案中，单克隆抗体针对细胞生长因子作用，因此阻断癌症细胞生长。在一个实施方案中，使抗癌单克隆抗体结合或连接抗癌药物、放射性同位素、其它生物应答修饰剂、其它毒素，或其组合。在一个实施方案中，如本文以上所述，使抗癌单克隆抗体结合或连接本发明的化合物。
本发明的又一方面涉及治疗癌症的方法，其包括选择需要治疗癌症的受试者，以及在有效地治疗癌症的条件下向受试者施用包含根据本发明的第一方面的化合物以及药学上可接受的载体的药物组合物。
当施用本发明的化合物时，可将它们系统地施用，或者可选择地，可将它们直接施用至存在癌细胞或癌前细胞的特异性位点。因此，可以任何有效递送化合物或药物组合物至癌细胞或癌前细胞的方式来完成施用。施用的示例性方式包括但不限于口服、局部、经皮、胃肠外、皮下、静脉内、肌肉内、腹腔内、通过鼻内滴注、通过腔内或膀胱内滴注、眼内、动脉内、病灶内，或通过应用至诸如鼻、喉，以及支气管的粘膜来施用化合物或组合物。
生物活性
在一个实施方案中，本发明提供用于本发明的任意方法中包括本文所述的任何实施方案的化合物和组合物。在一个实施方案中，如通过本领域熟练技术人员所理解，本发明的化合物或包含其的组合物的用途具有在受试者中抑制、遏制、增强或刺激所需应答的功用。在另一实施方案中，组合物可进一步包含另外的活性成分，其活性用于待施用本发明的化合物的特定应用中。
在一个实施方案中，本发明涉及治疗、遏制、降低严重程度、降低发展为癌症的风险或抑制癌症的方法，其包括在有效地治疗癌症的条件下向罹患癌症的受试者施用本发明的化合物。
耐药性是癌症化学疗法失败的主要原因。多重耐药性的一个主要原因是P-糖蛋白(P-gp)的过表达。该蛋白是属于细胞膜转运蛋白的ATP-结合盒家族的临床重要转运蛋白。它可通过ATP依赖性机制泵送包括抗癌药物的底物排出肿瘤细胞。
在一个实施方案中，本发明提供以下方法：a)治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制耐药性肿瘤；b)治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制转移性癌症；c)治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制耐药性癌症；d)治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制耐药性癌症，其中癌症是黑素瘤；e)治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制耐药性癌症的方法，其中癌症是前列腺癌；f)治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制转移性黑素瘤的方法；g)治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制前列腺癌的方法；h)在受试者中治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制癌症，其中受试者之前经化学疗法、放射疗法，或生物疗法治疗；其包括向所述受试者施用本发明的化合物和/或所述化合物的同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物，或晶体，或其任意组合的步骤。
本发明的化合物用于治疗、降低严重程度、降低风险，或抑制癌症、转移性癌症、耐药性肿瘤、耐药性癌症和癌症的各种形式。在优选的实施方案中，癌症是前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌(例如，黑素瘤)、肺癌、结肠癌、白血病、淋巴瘤、头颈癌、胰腺癌、食管癌、肾癌或CNS癌症(例如，神经胶质瘤、胶质母细胞瘤)。这些不同癌症的治疗受本文的实施例支持。而且，基于所认为的作为微管蛋白抑制剂的它们的作用方式，据认为，向患者施用本发明的化合物或组合物也可治疗或预防癌症的其它形式。本发明的优选化合物可选择性破坏癌细胞，导致癌细胞(而有利地不是正常细胞)消融。重要的是，因为在更低浓度的本发明的化合物下癌细胞更易破坏，所以对正常细胞的损害最低化。
在一些实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、多晶型物、晶体、N-氧化物、水合物或其任意组合用于在受试者中治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制癌症的用途。在另一实施方案中，癌症是肾上腺皮质癌、肛门癌、膀胱癌、脑肿瘤、脑干肿瘤、乳腺癌、神经胶质瘤、小脑星形细胞瘤、星形细胞瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、原始性神经外胚层瘤(supratentorial primitiveneuroectodermal)、松果体瘤、下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、类癌瘤、癌、子宫颈癌、结肠癌、中枢神经系统(CNS)癌症、子宫内膜癌、食管癌、肝外胆管癌、尤文氏家族肿瘤(Ewing′s family of tumors)(Pnet)、颅外生殖细胞瘤、眼癌、眼内黑素瘤、胆囊癌、胃癌、生殖细胞瘤、性腺外、妊娠滋养细胞瘤、头颈癌、下咽癌、胰岛细胞癌、喉癌、白血病、急性淋巴母细胞性、白血病、口腔癌、肝癌、肺癌、非小细胞肺癌、小细胞、淋巴瘤、AIDS相关的淋巴瘤、中枢神经系统(原发性)、淋巴瘤、皮肤T-细胞、淋巴瘤、霍奇金氏病(Hodgkin′s disease)、非霍奇金氏病、恶性间皮瘤、黑素瘤、Merkel细胞癌、转移性鳞状癌、多发性骨髓瘤、浆细胞瘤、蕈样真菌病、骨髓增生异常综合征、脊髓增生病、鼻咽癌、成神经细胞瘤、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低度潜在恶性肿瘤(ovarian low malignantpotential tumor)、胰腺癌、外分泌、胰腺癌、胰岛细胞癌、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、嗜铬细胞瘤、垂体癌、浆细胞瘤、前列腺癌、横纹肌肉瘤、直肠癌、肾癌、肾细胞癌、涎腺癌、塞扎里综合征(Sezary syndrome)、皮肤癌、皮肤T细胞淋巴瘤、皮肤癌、卡波济氏肉瘤(Kaposi′s sarcoma)、皮肤癌、黑素瘤、小肠癌、软组织肉瘤、软组织肉瘤、睾丸癌、胸腺瘤、恶性、甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、肉瘤、儿童罕见癌、阴道癌、外阴癌、肾母细胞瘤(Wilms′tumor)，或其任意组合。在另一实施方案中，之前已经使用化学疗法、放射疗法或生物疗法来治疗受试者。
在一些实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、多晶型物、晶体、N-氧化物，水合物或其任意组合用于在受试者中治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制转移性癌症的用途。在另一实施方案中，癌症是肾上腺皮质癌、肛门癌、膀胱癌、脑肿瘤、脑干肿瘤、乳腺癌、神经胶质瘤、小脑星形细胞瘤、星形细胞瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、原始性神经外胚层瘤、松果体瘤、下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、类癌瘤、癌、子宫颈癌、结肠癌、中枢神经系统(CNS)癌、子宫内膜癌、食管癌、肝外胆管癌、尤文氏家族肿瘤(Pnet)、颅外生殖细胞瘤、眼癌、眼内黑素瘤、胆囊癌、胃癌、生殖细胞瘤、性腺外、妊娠滋养细胞瘤、头颈癌、下咽癌、胰岛细胞癌、喉癌、白血病、急性淋巴母细胞性、白血病、口腔癌、肝癌、肺癌、非小细胞肺癌、小细胞、淋巴瘤、AIDS相关的淋巴瘤、中枢神经系统(原发性)、淋巴瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏病、恶性间皮瘤、黑素瘤、Merkel细胞癌、转移性鳞状癌、多发性骨髓瘤、浆细胞瘤、蕈样真菌病、骨髓增生异常综合征、脊髓增生病、鼻咽癌、成神经细胞瘤、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低度潜在恶性肿瘤、胰腺癌、外分泌、胰腺癌、胰岛细胞癌、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、嗜铬细胞瘤、垂体癌、浆细胞瘤、前列腺癌、横纹肌肉瘤、直肠癌、肾癌、肾细胞癌、涎腺癌、塞扎里综合征、皮肤癌、皮肤T细胞淋巴瘤、皮肤癌、卡波济氏肉瘤、皮肤癌、黑素瘤、小肠癌、软组织肉瘤、软组织肉瘤、睾丸癌、胸腺瘤、恶性甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、肉瘤、儿童罕见癌、阴道癌、外阴癌、肾母细胞瘤，或其任意组合。
在一些实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、多晶型物、晶体、N-氧化物、水合物或其任意组合用于在受试者中治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制耐药性癌症或抗性癌症的用途。在另一实施方案中，癌症是肾上腺皮质癌、肛门癌、膀胱癌、脑肿瘤、脑干肿瘤、乳腺癌、神经胶质瘤、小脑星形细胞瘤、星形细胞瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、原始性神经外胚层瘤、松果体瘤、下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、类癌瘤、癌、子宫颈癌、结肠癌、中枢神经系统(CNS)癌、子宫内膜癌、食管癌、肝外胆管癌、尤文氏家族肿瘤(Pnet)、颅外生殖细胞瘤、眼癌、眼内黑素瘤、胆囊癌、胃癌、生殖细胞瘤、性腺外、妊娠滋养细胞瘤、头颈癌、下咽癌、胰岛细胞癌、喉癌、白血病、急性淋巴母细胞性、白血病、口腔癌、肝癌、肺癌、非小细胞肺癌、小细胞、淋巴瘤、AIDS相关的淋巴瘤、中枢神经系统(原发性)、淋巴瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏病、恶性间皮瘤、黑素瘤、Merkel细胞癌、转移性鳞状癌、多发性骨髓瘤、浆细胞瘤、蕈样真菌病、骨髓增生异常综合征、脊髓增生病、鼻咽癌、成神经细胞瘤、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低度潜在恶性肿瘤、胰腺癌、外分泌、胰腺癌、胰岛细胞癌、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、嗜铬细胞瘤、垂体癌、浆细胞瘤、前列腺癌、横纹肌肉瘤、直肠癌、肾癌、肾细胞癌、涎腺癌、塞扎里综合征、皮肤癌、皮肤T细胞淋巴瘤、皮肤癌、卡波济氏肉瘤、皮肤癌、黑素瘤、小肠癌、软组织肉瘤、软组织肉瘤、睾丸癌、胸腺瘤、恶性甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、肉瘤、儿童罕见癌、阴道癌、外阴癌、肾母细胞瘤，或其任意组合。
在一个实施方案中，“转移性癌症”是指由其初始位置扩展(转移)至身体的另外位置的癌症。几乎所有癌症均可能扩展。转移是否发展取决于许多肿瘤细胞因素的复杂作用，包括癌症类型、肿瘤细胞的成熟(分化)程度、癌症存在位置和存在时间长短，以及其它尚未完全理解的因素。转移以三种方式扩展-通过由肿瘤局部扩展至周围组织；通过血流至远端位置或者通过淋巴系统至周围或远处淋巴节。各种癌症可具有扩展的常见途径。肿瘤通过原发位置来命名(例如，扩展至脑的乳腺癌称为转移至脑部的转移性乳腺癌)。
在一个实施方案中，“耐药性癌症”是指对化学疗法获得抗性的癌细胞。癌细胞可通过一系列机制来获得对化学疗法的抗性，包括药物靶的突变或过表达；药物的失活；或从细胞中消除药物。在对化学疗法初始应答之后复发的癌症可对多种药物产生抗性(它们为多药抗性)。按照常见的耐药性观点，在肿瘤群体中一个或多个细胞获得赋予耐药性的遗传改变。因此，耐药性的原因尤其为：a)通过化学疗法突变(改变)不能杀死以及对药物产生抗性的一些细胞。一旦它们繁殖，则可有比对化学疗法敏感的细胞更多的抗性细胞；b)基因扩增。癌症细胞可产生成百上千的特定基因的拷贝。该基因触发致使抗癌药物无效的蛋白的过度产生；c)使用称为p-糖蛋白的分子，癌细胞可泵送药物如它进入时一样快地输出细胞；d)癌细胞可停止摄入药物，由于转运药物穿过细胞壁的蛋白停止工作；e)癌细胞可学会如何修复由一些抗癌药物所导致的DNA断裂；f)癌细胞可形成使药物失活的机制。多重耐药性的一个主要原因是P-糖蛋白(P-gp)的过表达。该蛋白是属于细胞膜转运蛋白的ATP-结合盒家族的临床重要转运蛋白。它可通过ATP依赖性机制泵送包括抗癌药物的底物排出肿瘤细胞。因此，对在化学疗法中使用的抗癌剂的抗性是在恶性疾患中治疗失败的主要原因，引发肿瘤产生抗性。耐药性是癌症化学疗法失败的主要原因。
在一个实施方案中，“抗性癌症”是指如本文以上所述的耐药性癌症。在另一实施方案中，“抗性癌症”是指对诸如化学疗法、放射疗法或生物疗法的任何治疗获得抗性的癌细胞。
在一个实施方案中，本发明涉及在受试者中治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制癌症，其中之前已经使用化学疗法、放射疗法或生物疗法来治疗受试者。
在一个实施方案中，“化学疗法”是指用于癌症的化学治疗，例如直接杀死癌细胞的药物。这些药物称为“抗癌”药物或“抗肿瘤药物”。今天的治疗使用超过100种药物来治疗癌症。用于治愈具体癌症。当不可能治愈时，将化学疗法用于控制肿瘤生长；在手术或放射疗法之前收缩肿瘤；用于缓解症状(例如疼痛)；以及在通过手术去除已知肿瘤之后用于破坏可存在的微观癌细胞(称为辅助疗法)。给予辅助疗法以预防可能的癌症复发。
在一个实施方案中，“放射疗法”是指用于治疗疾病的高能量x-射线和类似射线(例如电子)。将放射疗法作为许多患有癌症的人治疗的一部分。使用x-射线可由身体外部作为外部放射疗法或者在身体内作为内部放射疗法来进行放射疗法。放射疗法通过在治疗区域中破坏癌细胞来工作。尽管通过放射疗法也可破坏正常细胞，但它们通常可自我修复。放射疗法治疗可治愈一些癌症，并也可降低术后癌症复发的几率。它可用于降低癌症症状。
在一个实施方案中，“生物疗法”是指在身体中天然存在的破坏癌细胞的物质。有多种类型的治疗，包括：单克隆抗体、癌症生长抑制剂、疫苗和基因治疗。生物疗法也称为免疫疗法。
在一个实施方案中，本发明提供治疗患有前列腺癌、转移性前列腺癌、抗性前列腺癌或耐药性前列腺癌的受试者的方法，其包括以在受试者中有效地治疗前列腺癌的量向所述受试者施用本发明的化合物，或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体或其任意组合，或者包含其的组合物的步骤。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在一个实施方案中，本发明提供用于在受试者中遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制前列腺癌、转移性前列腺癌、抗性前列腺癌或耐药性前列腺癌的方法，其包括向受试者施用本发明的化合物和/或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体或其任意组合，或者包含其的组合物的步骤。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在一个实施方案中，本发明提供治疗患有乳腺癌、转移性乳腺癌、抗性乳腺癌或耐药性乳腺癌的受试者的方法，其包括向所述受试者施用本发明的化合物，或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体或其任意组合，或者包含其的组合物的步骤。在另一实施方案中，受试者是雄性(男性)或雌性(女性)。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在一个实施方案中，本发明提供在受试者中遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制乳腺癌、转移性乳腺癌、抗性乳腺癌或耐药性乳腺癌的方法，其包括向所述受试者施用本发明的化合物，或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体或其任意组合，或者包含其的组合物的步骤。在另一实施方案中，受试者是雄性(男性)或雌性(女性)。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体或其任意组合用于在受试者中治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或者抑制卵巢癌、转移性卵巢癌、抗性卵巢癌或耐药性卵巢癌的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在一个实施方案中，本发明提供在受试者中治疗、遏制、降低严重程度、降低风险或抑制黑素瘤、转移性黑素瘤、抗性黑素瘤或耐药性黑素瘤的方法，其包括向受试者施用本发明的化合物和/或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体或其任意组合。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体或其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制肺癌、转移性肺癌、抗性肺癌或耐药性肺癌的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制非小细胞肺癌、转移性小细胞肺癌、抗性小细胞肺癌或耐药性小细胞肺癌的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制结肠癌、转移性结肠癌、抗性结肠癌或耐药性结肠癌的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制白血病、转移性白血病、抗性白血病或耐药性白血病的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制淋巴瘤、转移性淋巴瘤、淋巴瘤或耐药性淋巴瘤的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制头颈癌、转移性头颈癌、抗性头颈癌或耐药性头颈癌的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制胰腺癌、转移性胰腺癌、抗性胰腺癌或耐药性胰腺癌的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制食管癌、转移性食管癌、抗性食管癌或耐药性食管癌的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制肾癌、转移性肾癌、抗性肾癌或耐药性肾癌的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物、多晶型物、晶体、其任意组合用于治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、延缓进展，或抑制CNS癌症、转移性CNS癌症、抗性CNS癌症或耐药性CNS癌症的用途。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在一些实施方案中，本发明提供如本文所述的化合物，或其同分异构体、代谢物、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、多晶型物、晶体、N-氧化物、水合物或其任意组合用于在受试者中治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制一种或多种耐药性癌症肿瘤的用途。在另一实施方案中，癌症是肾上腺皮质癌、肛门癌、膀胱癌、脑肿瘤、脑干肿瘤、乳腺癌、神经胶质瘤、小脑星形细胞瘤、星形细胞瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、原始性神经外胚层瘤、松果体瘤、下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、类癌瘤、癌、子宫颈癌、结肠癌、中枢神经系统(CNS)癌、子宫内膜癌、食管癌、肝外胆管癌、尤文氏家族肿瘤(Pnet)、颅外生殖细胞瘤、眼癌、眼内黑素瘤、胆囊癌、胃癌、生殖细胞瘤、性腺外、妊娠滋养细胞瘤、头颈癌、下咽癌、胰岛细胞癌、喉癌、白血病、急性淋巴母细胞性、白血病、口腔癌、肝癌、肺癌、非小细胞肺癌、小细胞、淋巴瘤、AIDS相关的淋巴瘤、中枢神经系统(原发性)、淋巴瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏病、恶性间皮瘤、黑素瘤、Merkel细胞癌、转移性鳞状癌、多发性骨髓瘤、浆细胞瘤、蕈样真菌病、骨髓增生异常综合征、脊髓增生病、鼻咽癌、成神经细胞瘤、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低度潜在恶性肿瘤、胰腺癌、外分泌、胰腺癌、胰岛细胞癌、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、嗜铬细胞瘤、垂体癌、浆细胞瘤、前列腺癌、横纹肌肉瘤、直肠癌、肾癌、肾细胞癌、涎腺癌、塞扎里综合征、皮肤癌、皮肤T细胞淋巴瘤、皮肤癌、卡波济氏肉瘤、皮肤癌、黑素瘤、小肠癌、软组织肉瘤、软组织肉瘤、睾丸癌、胸腺瘤、恶性甲状腺癌、尿道癌、子宫癌、肉瘤、儿童罕见癌、阴道癌、外阴癌、肾母细胞瘤，或其任意组合。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，肿瘤是前列腺癌肿瘤。在另一实施方案中，肿瘤是卵巢癌肿瘤。在另一实施方案中，肿瘤是黑素瘤肿瘤。在另一实施方案中，肿瘤是多重耐药性(MDR)黑素瘤肿瘤。
在一个实施方案中，本发明涉及破坏癌细胞的方法，其包括：提供本发明的化合物以及在有效地破坏接触的癌细胞的条件下使癌细胞接触化合物。根据破坏癌细胞的各种实施方案，待破坏的细胞可位于体内或离体(即，在培养物中)。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
在另一实施方案中，癌症选自前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌、黑素瘤、肺癌、结肠癌、白血病、肾癌、CNS癌症及其组合。
本发明的又一方面涉及治疗或预防癌症病症的方法，其包括：提供本发明的化合物，然后以有效地治疗或预防癌症病症的方式向患者施用有效量的化合物。
根据一个实施方案，待治疗的患者的特征在于癌前病症的存在，并且化合物的施用有效地预防癌前病症发展为癌症病症。这可以通过在进一步发展为癌症状态之前或同时破坏癌前细胞来进行。
根据另一实施方案，待治疗的患者的特征在于癌症病症的存在，并且化合物的施用有效地导致癌症病症的退化或者抑制癌症病症的进展，即，完全停止其生长或者降低生长速率。无论在患者体内什么位置，这可以通过破坏癌细胞而有利地发生。即，无论癌细胞是否位于初始肿瘤位置或者无论癌细胞是否转移以及在患者体内产生继发肿瘤。
如本文所使用，受试者或患者是指任何哺乳动物患者，包括但不限于人和其它灵长类、犬、猫、马、牛、羊、猪、大鼠、小鼠和其它啮齿类。在一个实施方案中，受试者是雄性(男性)。在另一实施方案中，受试者是雌性(女性)。但在一些实施方案中，如本文所述的方法可用于治疗雄性(男性)或雌性(女性)。
当施用本发明的化合物时，可将它们系统地施用，或者可选择地，可将它们直接施用至存在癌细胞或癌前细胞的特异性位点。因此，可以任何有效递送化合物或药物组合物至癌细胞或癌前细胞的方式来完成施用。施用的示例性方式包括但不限于口服、局部、经皮、胃肠外、皮下、静脉内、肌肉内、腹腔内、通过鼻内滴注、通过腔内或膀胱内滴注、眼内、动脉内、病灶内，或通过应用至诸如鼻、喉，以及支气管的粘膜来施用化合物或组合物。
本发明的化合物用于治疗或预防癌症的各种形式，特别是前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌(例如，黑素瘤)、肺癌、结肠癌、白血病、肾癌和CNS癌症(例如，神经胶质瘤、胶质母细胞瘤)。这些不同癌症的治疗受本文的实施例支持。而且，基于所认为的作为微管蛋白抑制剂的它们的作用方式，据认为，向患者施用本发明的化合物或组合物也可治疗或预防癌症的其它形式。本发明的优选化合物可选择性破坏癌细胞，导致癌细胞(而有利地不是正常细胞)消融。重要的是，因为在更低浓度的本发明的化合物下癌细胞更易破坏，所以对正常细胞的损害最低化。
本发明的化合物用于治疗、降低严重程度、降低风险，或抑制癌症、转移性癌症、抗性癌症或耐药性癌症。在另一实施方案中，癌症是前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌(例如，黑素瘤)、肺癌、结肠癌、白血病、淋巴瘤、头颈癌、胰腺癌、食管癌、肾癌或CNS癌症。这些不同癌症的治疗受本文的实施例支持。而且，基于所认为的作为微管蛋白抑制剂的它们的作用方式，据认为，向患者施用本发明的化合物或组合物也可治疗或预防癌症的其它形式。本发明的优选化合物可选择性破坏癌细胞，导致癌细胞(而有利地不是正常细胞)消融。重要的是，因为在更低浓度的本发明的化合物下癌细胞更易破坏，所以对正常细胞的损害最低化。在另一实施方案中，化合物是化合物12db。在另一实施方案中，化合物是化合物11cb。在另一实施方案中，化合物是化合物11fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12da。在另一实施方案中，化合物是化合物12fa。在另一实施方案中，化合物是化合物12fb。在另一实施方案中，化合物是化合物12cb。在另一实施方案中，化合物是化合物55。在另一实施方案中，化合物是化合物6b。在另一实施方案中，化合物是化合物17ya。
如本文所使用，受试者或患者是指任何哺乳动物患者，包括但不限于人和其它灵长类、犬、猫、马、牛、羊、猪、大鼠、小鼠和其它啮齿类。但在一些实施方案中，如本文所述的方法可用于治疗雄性(男性)或雌性(女性)。
在一个实施方案中，通过单独或联合其它试剂施用如本文所述的化合物来联合抗癌剂施用化合物。
当将本发明的化合物或药物组合物施用以治疗、遏制、降低严重程度、降低风险，或抑制癌症病症时，药物组合物也可含有当前已知或随后开发用于治疗各种类型癌症的其它治疗剂或治疗方案，或者可连同该其它治疗剂或治疗方案一起施用。其它治疗剂或治疗方案的实例包括但不限于放射治疗、免疫疗法、化学疗法、手术干预及其组合。
展示以下实例以更完整示出本发明的优选实施方案。然而，不应以任意方式将它们理解为对本发明的广泛范围的限制。
实施例
以下示出的实施例仅用于示意，并不以任何方式旨在限制本发明的范围。
材料和方法：
概述。所有试剂购自Sigma-Aldrich Chemical Co.，Fisher Scientific(Pittsburgh，PA)，AK Scientific(Mountain View，CA)，Oakwood Products(West Columbia，SC)等，并在未进一步纯化下使用。在氩气氛下进行湿敏性反应。通过Yoshino等所报道方法来制备ABT-75126。在铝背(aluminum backed)Uniplate(Analtech，Newark，DE)上进行常规薄层色谱(TLC)。使用Fisher-Johns熔点装置(未校准)来测定熔点。在BrukerAX 300(Billerica，MA)光谱仪或Varian Inova-500(Vernon Hills，Illinois)光谱仪上获得NMR光谱。化学位移记录为相对在CDCl3中TMS的百万分之一(ppm)。在Bruker ESQUIRE电喷雾/离子阱仪器上以正离子模式和负离子模式收集质谱数据。由Atlantic Microlab Inc.进行元素分析。
前列腺癌和黑素瘤的细胞培养和细胞毒性测定。所有细胞系均获自ATCC(美国模式培养物保藏所(American Type Culture Collection)，Manassas，VA，USA)，而细胞培养供应物购自Cellgro Mediatech(Herndon，VA，USA)。我们检查在四种人前列腺癌细胞系(LNCaP、DU145、PC-3和PPC-1)和两种人黑素瘤细胞系(A375和WM-164)中我们的抗-微管蛋白化合物的抗增殖活性。将人卵巢细胞系OVCAR-8及其过表达P-gp(NCI/ADR-RES)的抗性细胞系用作MDR模型。两卵巢细胞系均购自美国国家癌症研究所(National Cancer Institute)(NCI)。所有细胞系经ATCC或NCI测试并认证。将所有前列腺癌和卵巢癌细胞系在补充有10％胎牛血清(FBS)的RPMI1640中培养。将黑素瘤细胞在补充有5％FBS、1％抗生素/抗霉菌混合物(Sigma-Aldrich，Inc.，St.Louis，MO，USA)和牛胰岛素(5μg/mL；Sigma-Aldrich)的DMEM中培养。在处理96h之后使用磺酰罗丹明B(SRB)测定法来评估抗-微管蛋白化合物的细胞毒性可能性。
水溶性。通过联用LC-MS/MS的Multiscreen溶解性滤板(Millipore Corporate，Billerica，MA)来测定药物的溶解性。简言之，将198μL的磷酸盐缓冲盐水(PBS)缓冲液(pH7.4)装载至96-孔板内，并在RT下轻微振荡1.5h(200-300rpm)，将2μL的10mM测试化合物(在DMSO中)分散并混合(N＝3)。将板在800g下离心5min，并通过如下所述的LC-MS/MS将滤液用于测定其浓度和测试化合物的溶解性。
药物代谢动力学研究。雌性Sprague-Dawley大鼠(n＝3或4；254±4g)购自Harlan Inc.(Indianapolis，IN)。大鼠胸廓颈静脉导管购自Braintree Scientific Inc.(Braintree，MA)。在放入动物设施之后，在任何处理之前使动物在具有12h光照/黑暗循环的温度受控的房间(20-22℃)中适应3天。以2.5mg/kg(在DMSO/PEG300，2/8中)的剂量将化合物1h静脉内(i.v.)施用至颈静脉导管内，而以5mg/kg(在DMSO/PEG300，1/9中)来给药5Ha和5Hc。注射等量的肝素化盐水以替代取出的血液，并在10、20、30min和1、2、4、8、12、24h下通过颈静脉导管来收集血液样本(250μL)。以10mg/kg(在吐温80/DMSO/H2O，2/1/7中)灌胃(p.o.)给予化合物1h、5Ha和5Hc。在30、60、90min、120min、150min、180min、210min、240min和8、12、24h下通过颈静脉导管收集在口服施用之后所有血液样本(250μL)。在收集血液之前准备肝素化注射器和小瓶。通过在8,000g下离心血液样品5min来准备血浆样品。将所有血浆样品立即保存在-80℃下直至分析。
使用含有200nM内标((3，5-二甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮)的200μL的乙腈由100μL的血浆中提取分析物。将样品充分混合、离心，并将有机提取物转移至自动进样器以用于LC-MS/MS分析。扫描m/z356→188(化合物1h)、m/z371→203(化合物5Ha)、m/z389→221(化合物5Hc)和m/z309→171(内标)的多反应监测(MRM)模式用于获得最敏感信号。使用非隔室分析来测定药物代谢动力学参数(WinNonlin，Pharsight Corporation，MountainView，CA)。
分析方法。将样品溶液(10μL)进样至Agilent系列HPLC系统内(Agilent1100系列Agilent1100 Chemstation，Agilent Technology Co，Ltd)。在窄孔C18柱(Alltech Alltima HP，2.1×100mm，3μm，Fisher，FairLawn，NJ)上分离所有分析物。使用两种梯度模式。使用在300μL/min的流速下流动相A[含有0.1％甲酸的ACN/H2O(5％/95％，v/v)]和流动相B[含有0.1％甲酸的ACN/H2O(95％/5％，v/v)]的混合物将梯度模式用于获得分析物的分离。从0至1min使用15％流动相A，随后在6min内通过线性程序化梯度至100％的流动相B，在快速上升至15％流动相A之前，维持100％的流动相B0.5min。用流动相A继续另外12min直至分析结束。
体外微管蛋白聚合测定。将牛脑微管蛋白(0.4mg，＞97％纯)(Cytoskeleton，Denver，CO)与10μM的测试化合物混合，并在pH6.9下在100μL的通用微管蛋白缓冲液(80mM PIPES、2.0mM MgCl2、0.5mM EGTA和1mM GTP)中孵育。通过SYNERGY4酶标仪(Microplate Reader)(Bio-Tek Instruments，Winooski，VT)在20min内每1min监控在340nm波长下的吸光度。将分光光度计设置在37℃下以用于微管蛋白聚合。
使用以电喷雾离子(TurboIonspray)源操作的三重四极杆质谱仪，API Qtrap 4000TM(Applied Biosystems/MDS SCIEX，Concord，Ontario，Canada)。正离子模式下将喷雾针电压设置为5kV。气帘气(Curtain gas)设置在10下；气体1和气体2设置为50。碰撞辅助离解(Collision-Assisted-Dissociation)(CAD)气体在介质中，源加热器探针温度为500℃。使用AnalystTM软件，版本1.4.1(Applied Biosystems)来完成数据采集和定量处理。
在安装光电二极管阵列检测器的Waters 2695 HPLC系统上通过RP-HPLC来测试最终化合物的纯度。在环境温度、0.7mL/min流速下使用Supelco AscentisTM5μM C-18柱(250x4.6mm)来进行两种RP-HPLC方法。HPLC1：梯度：溶剂A(水)和溶剂B(甲醇)：0-20min 40-100％B(线性梯度)，20-27min 100％B。HPLC2：梯度：溶剂A(水)和溶剂B(甲醇)：0-15min 40-100％B(线性梯度)，15-25min100％B。在254nm下进行UV检测。
根据图1-17来制备本发明的化合物。
实施例1
B环变型化合物的合成
根据图1和2来合成B环变型化合物。
噁唑B环：
(2-苯基-噁唑-4-基)-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-甲酮(36a)的合成(图 1)：
Figure BDA00003093994901191
(2R)-2-苯基-4，5-二氢-噁唑-4-羧酸甲酯(32a)。将乙酰氯(6.8mL)滴加至冰冷的甲醇(30mL)。在加入L-丝氨酸(0.48mmol)之后，将反应混合物升温至室温(RT)并搅拌过夜。将溶剂蒸发，得到白色固体(2R)-3-羟基-2-甲基-丙酸甲酯盐酸盐，在未纯化下将其用于下一步中。将三乙胺(11mL，72.3mmol)缓慢加入苯甲亚胺酸乙酯盐酸盐(11.6g，62.8mmol)在CH2Cl2(150mL)中的溶液。将反应混合物在RT下搅拌30min，然后将(2R)-3-羟基-2-甲基-丙酸甲酯盐酸盐(13.5g，79.6mmol)逐份加入。将所得混合物搅拌48h并减压浓缩。由快速柱分离化合物32a的黄色油状物(12.3g，95.9％)。1H NMR(CDCl3)δ7.99-7.38(m，5H)，4.97(dd，1H，J＝7.8Hz，J＝10.5Hz)，4.70(t，1H，J＝8.7Hz)，4.62(dd，1H，J＝8.7Hz，J＝10.5Hz)，3.82(s，3H)；MS(ESI)m/z206.1(M+H)+。
(2R)-2-苯基-4，5-二氢-噁唑-4-羧酸(33a)。在搅拌下向用冰冷却的32a在MeOH/H2O中的溶液中加入LiOH(2.5当量)。在1h内使混合物升温至RT，在真空下浓缩，然后将白色固体溶解在H2O中并使用1N HCl来酸化至pH2.0，用MgSO4萃取，过滤并在真空下浓缩以得到酸33a的白色固体(95.8％)。1H NMR(CDCl3)δ7.98(d，2H)，7.57-7.42(m，3H)，5.04(dd，1H，J＝7.8Hz，J＝10.8Hz)，4.80(t，1H，J＝8.7Hz)，4.70(dd，1H，J＝9.0Hz，J＝10.8Hz)；MS(ESI)m/z191.9(M+H)+，189.7(M-H)-，145.8(M-COOH)-。
(2R)-2-苯基-4，5-二氢-噁唑-4-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(34a)。向33a(5mmol)、EDCI(6mmol)、HOBt(5mmol)和Et3N(5mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物中加入HNCH3OCH3(5mmol)，然后在RT下连续搅拌6-8h。使用CH2Cl2(100mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品34a，经柱色谱将其纯化为白色固体(61.0％)。1H NMR(CDCl3)δ7.98-7.36(m，5H)，7.57-7.42(m，3H)，5.35(br，t，1H)，4.81(br，t，1H)，4.52(dd，1H，J＝8.7Hz，J＝10.2Hz)，3.90(s，3H)，3.27(s，3H)；MS(ESI)m/z257.0(M+H)+。
(2R)-(2-苯基-4，5-二氢-噁唑-4-基)-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-甲酮(35a)。在-78℃下向在8mL n-BuLi(1.6M，0.713mL)在THF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基溴苯(1.09mmol)在3mL THF中的溶液。将混合物搅拌2h，然后添加Weinreb酰胺34a(1.14mmol)在3mL THF中的溶液。在RT下使温度升高并搅拌过夜。使用饱和NH4Cl猝灭反应混合物，使用乙醚萃取，使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物35a的白色固体(47.9％)。1HNMR(CDCl3)δ7.97-7.94(m，2H)，7.62(s，2H)，7.54-7.37(m，3H)，5.61(q，1H，J＝7.5Hz，9.9Hz)，5.12(t，1H，J＝7.5Hz)，4.57(q，1H，J＝7.8Hz，9.9Hz)，3.96(s，6H)，3.95(s，3H)；MS(ESI)m/z364.1(M+Na)+，340.1(M-H)-。
(2-苯基-噁唑-4-基)-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-甲酮(36a)。将35a(1.48mmol)、CBrCl3(2.59mmol)和DBU(2.97mmol)在CH2Cl2(20mL)中的混合物搅拌过夜。将反应混合物吸附于硅胶上，然后经柱色谱纯化得到所需的纯36a(61.6％)。1H NMR(CDCl3)δ8.37(s，1H)，8.14-8.12(m，2H)，7.74(s，2H)，7.52-7.49(m，3H)，3.97(s，9H)；MS(ESI)m/z362.1(M+Na)+。
苯、嘧啶、吡啶、呋喃、噻吩、噻唑、吡唑和哌啶B环变型(图2)：由它们对应的酸(37a-37d，37k)来获得B环变型(1a-1d，1k)。使用快速柱在B环位置中具有噻吩的化合物1f不能由1f和偶联副产物3，4，5，3′，4′，5′-六甲氧基联苯基的格氏试剂的混合物中分离。所以使用替代方法来制备1f：将Weinreb酰胺38f转化为其对应的醛，使其进一步与3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁反应以得到醇40f，使用快速柱色谱可将其容易地由3，4，5，3′，4′，5′-六甲氧基联苯基分离。使用重铬酸吡啶鎓(PDC)或DMSO氧化无法由仲醇40f得到良好收率的1f。但使用戴斯马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane reagent)作为氧化剂成功形成所需酮化合物1f。使用类似方法由醇40e和40i来制备1e和1i。通过哌啶41g和3，4，5-三甲氧基苯甲酸的偶联反应来获得化合物1g。
苯B环：
联苯基-3-基(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1a)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901221
N-甲氧基-N-甲基联苯基-3-甲酰胺(38a)。向37a(5mmol)、EDCI(6mmol)、HOBt(5mmol)和NMM(11mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物加入HNCH3OCH3HCl盐(5mmol)，然后在RT下连续搅拌2h。使用CH2Cl2(100mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到无色油状物，将其用于下一步骤中(58.4％)。MS(ESI)m/z264.0(M+Na)+。
联苯基-3-基(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1a)。在0℃下向38a(图2)(0.174g，0.72mmoL)在5mL THF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(0.5N，1.08mmol)的THF溶液。将混合物搅拌30min，然后使用饱和NH4Cl猝灭，使用乙醚萃取，使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物1a的白色固体(43.8％)。1H NMR(CDCl3)δ8.02(t，1H)，7.84-7.74(m，2H)，7.64-7.38(m，6H)，7.11(s，2H)，3.95(s，3H)，3.88(s，6H)；MS(ESI)m/z371.1(M+Na)+。
嘧啶B环：
(6-苯基嘧啶-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1b)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901231
N-甲氧基-N-甲基-6-苯基嘧啶-4-甲酰胺(38b)。向37b(5mmol)、EDCI(6mmol)、HOBt(5mmol)和NMM(11mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物加入HNCH3OCH3HCl盐(5mmol)，然后在RT下连续搅拌过夜。使用CH2Cl2(100mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物38b的黄色固体(62.3％)。1H NMR(CDCl3)δ9.28(s，1H)，8.14-8.06(m，2H)，7.96(br，s，1H)，7.54-7.50(m，3H)，5.35(br，t，1H)，4.81(br，t，1H)，4.52(dd，1H，J＝8.7Hz，J＝10.2Hz)，3.79(s，3H)，3.42(s，3H)；MS(ESI)m/z266.0(M+Na)+。
(6-苯基嘧啶-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1b)。在0℃下向38b(0.243g，1mmoL)在5mL THF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(0.5N，5.6mL，1.4mmol)的THF溶液。将混合物搅拌30min，然后使用饱和NH4Cl猝灭，使用乙醚萃取，使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物1b(52.3％)。1H NMR(CDCl3)δ9.40(d，1H，J＝1.5Hz)，8.29(d，1H，J＝1.5Hz)，8.22-8.18，7.57-7.54(m，5H)，7.46(s，2H)，3.96(s，3H)，3.91(s，6H)；MS(ESI)m/z351.1(M+H)+。
吡啶B环：
(6-苯基吡啶-2-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1c)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901241
N-甲氧基-N-甲基-6-苯基吡啶酰胺(38c)。向37c(1.77mmol)、EDCI(2.12mmol)、HOBt(1.86mmol)和NMM(3.54mmol)在CH2Cl2(20mL)中的混合物加入HNCH3OCH3HCl盐(1.86mmol)，然后在RT下连续搅拌过夜。使用CH2Cl2(40mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物38c的无色油状物(51.2％)。1H NMR(CDCl3)δ8.02(d，1H，J＝7.0Hz)，7.86-7.81(m，2H)，7.55(br，1H)，7.48(t，2H)，7.44-7.41(m，1H)，3.82(s，3H)，3.44(s，br，3H)；MS(ESI)m/z265.0(M+Na)+。
(6-苯基吡啶-2-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1c)。在0℃下向38c(0.210g，0.86mmoL)在5mL THF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(0.5N，3.5mL，1.73mmol)的THF溶液。将混合物搅拌30min，然后使用水猝灭，使用乙酸乙酯萃取，并使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到醇1c的白色针状晶体(78％)。1H NMR(CDCl3)δ8.10(d，br，2H)，8.02-8.00(m，1H)，7.97-7.96(m，2H)，7.66(s，2H)，7.49-7.43(m，3H)，3.97(s，3H)，3.89(s，6H)；MS(ESI)m/z372.6(M+Na)+。
呋喃B环：
(5-苯基呋喃-2-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1d)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901251
N-甲氧基-N-甲基-5-苯基呋喃-2-甲酰胺(38d)。向37d(10mmol)、EDCI(12mmol)、HOBt(11mmol)和NMM(21mmol)在CH2Cl2(200mL)中的混合物加入HNCH3OCH3HCl盐(10.5mmol)，然后在RT下连续搅拌过夜。使用CH2Cl2(200mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物38d。(95.2％)。1HNMR(CDCl3)δ7.82(d，1H，J＝7.0Hz)，7.46-7.43(t，2H)，7.37-7.34(m，1H)，7.25(d，1H，J＝4.0Hz)，6.78(d，1H，J＝4.0Hz)，3.86(s，3H)，3.41(s，3H)；MS(ESI)m/z254.1(M+Na)+。
(5-苯基呋喃-2-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1d)。在0℃下向38d(0.231g，1mmoL)在5mL THF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(0.5N，4.0mL，2mmol)的THF溶液。将混合物搅拌30min，然后使用水猝灭，使用乙酸乙酯萃取，并使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物1d的白色晶体(35.5％)。1H NMR(CDCl3)δ7.85-7.82(m，1H)，7.48-7.36(m，4H)，7.35(s，2H)，7.25(d，1H，J＝4.0Hz)，6.86(d，1H，J＝4.2Hz)，3.96(s，3H)，3.95(s，6H)；MS(ESI)m/z339.1(M+H)+。
噻唑B环：
(2-苯基噻唑-5-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1e)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901261
(2-苯基噻唑-5-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲醇(40e)。在0℃下向2-苯基噻唑-5-甲醛38e(0.567g，3mmoL)在15mL THF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(0.5N，6.5mL，3.25mmol)的THF溶液。将混合物搅拌30min，然后使用饱和NH4Cl猝灭，使用乙醚萃取，使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物40e(72.9％)。1H NMR(CDCl3)δ7.90(m，2H)，7.64(s，1H)，7.41(m，3H)，6.69(s，br，2H)，6.04(s，1H)，3.86(s，6H)，3.85(s，3H)，1.57(d，1H，J＝5.5Hz)；MS(ESI)m/z358.1(M+Na)+。
(2-苯基噻唑-5-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1e)。向40e(0.357g，1mmoL)在40mL无水CH2Cl2中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(0.848g，2mmol)。将混合物搅拌30min，然后使用饱和Na2S2O3溶液猝灭，使用乙酸乙酯萃取，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物1e(80.1％)。1H NMR(CDCl3)δ8.33(s，1H)，8.04(m，2H)，7.51(m，3H)，7.18(s，2H)，3.96(s，3H)，3.93(s，6H)；MS(ESI)m/z378.1(M+H)+。
噻吩B环：
(5-苯基噻吩-3-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1f)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901271
N-甲氧基-N-甲基-5-苯基噻吩-3-甲酰胺(38f)。向37f(2.5mmol)、EDCI(2.9mmol)、HOBt(2.6mmol)和NMM(5.3mmol)在CH2Cl2(30mL)中的混合物加入HNCH3OCH3HCl盐(2.6mmol)，然后在RT下连续搅拌过夜。使用CH2Cl2(20mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物38f。(90.8％).1H NMR(CDCl3)δ8.28(d，1H，J＝1.5Hz)，7.69(d，1H，J＝1.5Hz)，7.64(d，2H，J＝7.0Hz)，7.44(t，2H，J＝7.0Hz)，7.35-7.32(m，1H)，6.78(d，1H，J＝4.0Hz)，3.86(s，3H)，3.41(s，3H)；MS(ESI)m/z270.0(M+Na)+。
(5-苯基噻吩-3-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲醇(40f)。在-78℃下，在氩气保护下向38f(2.5mmol)在5mL THF中的溶液中加入LiAlH4在THF(1N，1.42mL)中的溶液，并在-20℃下连续搅拌1h。将反应混合物置于冰浴上，然后用20％H2SO4溶液猝灭，使用乙酸乙酯萃取并经MgSO4干燥。在减压下将溶剂去除，然后经柱色谱纯化得到5-苯基噻吩-3-甲醛(未显示)(84.8％)。1H NMR(CDCl3)δ9.98(s，1H)，8.04(d，1H，J＝1.5Hz)，7.86(br，1H)，7.61-7.58(br，2H)，7.47-7.33(m，3H)，7.35-7.32(m，1H)，6.78(d，1H，J＝4.0Hz)；MS(ESI)m/z210.9(M+Na)+。在0℃下向5-苯基噻吩-3-甲醛(0.195g，1.04mmoL)在5mLTHF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(0.5N，2.3mL，1.14mmol)的THF溶液。将混合物搅拌30min，然后使用饱和NH4Cl猝灭，使用乙醚萃取，使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物40f。(70.5％).1H NMR(CDCl3)δ7.55-7.52(m，2H)，7.40-7.35(m，3H)，7.30(br，1H)，7.20(br，1H)，6.72(s，2H)，6.01(d，1H，J＝3.9Hz)，3.86(s，6H)，3.85(s，3H)，2.42(d，1H，J＝3.9Hz)；MS(ESI)m/z339.1(M-OH)-。
(5-苯基噻吩-3-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1f)。向40f(0.260g，0.73mmoL)在20mL无水CH2Cl2中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(0.465g，1.36mmol)。将混合物搅拌30min，然后使用饱和Na2S2O3溶液猝灭，使用乙酸乙酯萃取，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物1f的浅黄色晶体(60.9％)。1H NMR(CDCl3)δ7.97(d，1H，J＝1.5Hz)，7.82(d，1H，J＝1.5Hz)，7.59-7.57(m，2H)，7.45-7.34(m，3H)，7.19(s，2H)，3.95(s，3H)，3.93(s，6H)；MS(ESI)m/z355.1(M+H)+。
哌啶B环：
(4-苯基哌啶-1-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1g)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901281
(4-苯基哌啶-1-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1g)。向4-苯基哌啶41g(5mmol)、EDCI(6mmol)、HOBt(5.5mmol)和NMM(6mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物加入3，4，5-三甲氧基苯甲酸(5.3mmol)，然后在RT下连续搅拌过夜。使用CH2Cl2(100mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物1g.(57.9％)。1H NMR(CDCl3)δ7.35-7.21(m，5H)，6.66(s，2H)，4.84(br，1H)，3.95(br，1H)，3.88(s，6H)，3.86(s，3H)，3.20-2.87(br，2H)，2.85-2.74(tt，1H，J＝3.6Hz，J＝15.6Hz)1.92(br，2H)，1.70(br，2H)；MS(ESI)m/z378.1(M+Na)+。
异噁唑B环：
(5-苯基异噁唑-3-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1i)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901291
(5-苯基异噁唑-3-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲醇(40i)。在0℃下向5-苯基异噁唑-3-甲醛38i(0.365g，2.1mmol)在15mL THF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(0.5N，5.5mL，2.74mmol)的THF溶液。将混合物搅拌30min，然后使用饱和NH4Cl猝灭，使用乙醚萃取，使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物40i的白色固体。(48.8％)。1H NMR(CDCl3)δ7.78-7.77(m，2H)，7.48-7.46(m，3H)，6.74(s，2H)，6.45(s，1H)，5.98(d，1H，J＝3.5Hz)3.89(s，6H)，3.86(s，3H)，2.77(d，1H，J＝3.5Hz)；MS(ESI)m/z364.1(M+Na)+。
(5-苯基异噁唑-3-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1i)。向在8mL无水CH2Cl2中40i(0.110g，0.73mmoL)的溶液中加入戴斯-马丁试剂(0.274g，0.645mmol)。将混合物搅拌30min，然后使用饱和Na2S2O3溶液猝灭，使用乙酸乙酯萃取，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物1i(70.1％)。1H NMR(CDCl3)δ7.87-7.85(m，2H)，7.72(s，2H)，7.53-7.49(m，3H)，7.05(s，1H)，7.82(d，1H，J＝1.5Hz)，3.97(s，3H)，3.96(s，6H)；MS(ESI)m/z362.1(M+H)+。
吡唑B环：
(3-苯基-1H-吡唑-5-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1k)的合成(图2)
Figure BDA00003093994901301
使用如化合物1c中所使用的相同方法由3-苯基-1H-吡唑-5-羧酸来制备(3-苯基-1H-吡唑-5-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(1k)。1H NMR(500MHz，CDCl3δ10.97(br，1H)，7.77(s，br，2H)，7.48-7.38(m，5H)，7.14(s，br，1H)，3.96(s，3H)，3.94(s，6H)；MS(ESI)m/z361.1(M+Na)+，337.0(M-H)-。
实施例2
具有不同Y连接子的本发明化合物的合成
本发明的化合物具有不同Y连接子。根据图3和4来合成具有不同Y连接子的这些化合物。
通过之前所述三个步骤由2-苯基-4，5-二氢-噻唑-4-羧酸42a来合成化合物1h(Lu，Y.；Wang，Z.；Li，C.M.；Chen，J.；Dalton，J.T.；Li，W.；Miller，D.D.，Synthesis，in vitro structure-activity relationship，and invivo studies of 2-arylthiazolidine-4-carboxylic acid amides as anticanceragents.Bioorg Med Chem 2010，18，(2)，477-95，其以引用方式整体并入本文)。一旦与羟胺、NH2OH或NH2OCH3反应，则将1h转化为肟异构体2e-顺式、反式和2f-顺式、反式。基于如下所述的化学和光谱数据来进行归属。改良的贝克曼重排容易由两种几何立体异构体2e-顺式和2e-反式通过它们与甲苯磺酰氯以及随后与碱性氧化铝柱的反应制备酰胺2g和2h。通过在乙醇中与肼水合物混合1h并回流24h来制备酰肼衍生物2d-顺式和2d-反式。由1h与氰甲基磷酸二乙酯的维蒂希反应(Wittig reaction)来获得丙烯腈2c-反式、顺式。使用如通过Cuccia所述的程序来制备氰亚胺2j(Cuccia，S.J.；Fleming，L.B.；France，D.J.，A novel and efficient synthesis of4-phenyl-2-chloropyrimidines from acetophenone cyanoimines.SyntheticCommunications 2002，32，(19)，3011-3018.，其以引用方式整体并入本文)。如图3中所示也将化合物1h中的羰基还原为仲醇2b或者转化为烯烃(2a)。
尝试去除在1h中B和C环之间的羰基，导致形成如图4所示的化合物2i。引入顺式-和反式-双键至羰基位置内形成化合物(3a和3b)，其由与2-苯基噻唑-4-甲醛的维蒂希反应来合成。使用3-氨基联苯作为起始材料通过初始桑德迈尔反应(Sandmeyer reaction)以得到二硫代碳酸酯52a，随后通过CuI催化的偶联反应以及m-CPBA氧化来制备硫化物化合物4a、砜4b和亚砜4c。在DMF中NEt3的存在下由3-联苯基磺酰氯与3，4，5-三甲氧基苯胺的反应来制备连接磺酰胺的化合物4d。
(2-苯基-噻唑-4-基)-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-甲酮(1h)的合成[图3]
Figure BDA00003093994901311
(2-苯基-噻唑-4-基)-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-甲酮(1h)。将2-苯基-4，5-二氢噻唑-4-羧酸(5mmol)、EDCI(6mmol)和HOBt(5mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物搅拌10min。向该溶液中加入NMM(5mmol和HNCH3OCH3(5mmol)并在RT下连续搅拌6-8h。使用CH2Cl2(100mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到2-苯基-4，5-二氢噻唑-4-羧酸甲氧基甲酰胺。将2-苯基-4，5-二氢噻唑-4-羧酸甲氧基甲酰胺(1当量)在CH2Cl2中的溶液冷却至0℃，并加入蒸馏的DBU(2当量)。然后在10min内通过注射器滴加溴三氯甲烷(1.7当量)。将反应混合物升温至RT并搅拌过夜。使用饱和NH4Cl(2×50mL)水溶液洗涤后，使用EtOAc(3×50mL)萃取水相。在MgSO4上将合并的有机层干燥，过滤并在真空下浓缩。根据需要将残余物经快速色谱纯化得到2-苯基-噻唑-4-羧酸甲氧基甲酰胺(73.6％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，7.99-7.96(m，2H)，7.47-7.44(m，3H)，3.88(s，3H)，3.49(s，3H)。MS(ESI)m/z271.0(M+Na)+。在0℃下向3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(0.5N，3mL)在2mL THF中的溶液加入2-苯基-噻唑-4-羧酸甲氧基甲酰胺(1mmol)在3mL THF中的溶液。将混合物搅拌30min直至酰胺在TLC板上消失。使用饱和NH4Cl猝灭反应混合物，使用乙醚萃取，使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物1h。收率：27.3％.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.29(s，1H)，8.03(q，2H)，7.80(s，2H)，7.49-7.47(m，3H)，3.96(s，6H)，3.97(s，3H).MS(ESI)m/z378.1(M+Na)+。
4-(2-甲基-1-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-1-烯基)-2-苯基噻唑(2a)的合成[图3]
Figure BDA00003093994901331
4-(2-甲基-1-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-1-烯基)-2-苯基噻唑(2a)[图3]。在-78℃下，在Ar2保护下向在5mL的THF中223mg异丙基三苯基碘化膦(0.52mmol)的溶液滴加至0.4mL的在己烷中1.6Nn-BuLi。并在0℃下将混合物搅拌40min。在0℃下滴加在5mL的THF中140mg(0.39mmol)的1h溶液，并将混合物在RT下搅拌1h。使用饱和NH4C1溶液来处理反应混合物。在常规后处理之后，经柱色谱(硅胶，石油醚/乙酸乙酯)得到化合物2a(86mg，57.3％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.98-7.97(m，2H)，7.45-7.40(m，3H)，6.77(s，1H)，6.48(s，2H)，3.86(s，3H)，3.82(s，6H)，2.15(s，3H)，1.81(s，3H).MS(ESI)m/z404.1(M+Na)+。
(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲醇(2b)的合成[图3]
Figure BDA00003093994901332
2-苯基-4，5-二氢噻唑-4-羧酸(42a)。将苄腈(40mmol)与L-半胱氨酸(45mmol)合并在100mL的1∶1MeOH/pH6.4磷酸盐缓冲溶液中。在40℃下将反应搅拌3天。通过过滤将沉淀去除，然后使用旋转蒸发来去除MeOH。向剩余溶液中加入1M HCl以在0℃下调节pH＝2。将所得沉淀过滤以得到白色固体2-苯基-4，5-二氢噻唑-4-羧酸42a，在未纯化下将其直接用于下一步骤中。
2-苯基噻唑-4-甲醛(42b)。在-78℃下，向在THF中2-苯基-噻唑-4-羧酸甲氧基甲酰胺(1当量)的溶液中加入LiAlH4(1当量，在THF中1N)，然后在-20℃下搅拌1h。将反应混合物置于冰浴上，然后用20％H2SO4溶液猝灭，使用乙酸乙酯萃取并经MgSO4干燥。在减压下将溶剂去除，然后经柱色谱纯化得到42b(45.8％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.1(s，1H)，8.17(s，1H)，8.02-8.00(m，2H)，7.50-7.48(m，3H).MS(ESI)m/z244.1(M+Na+MeOH)+。
(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲醇(2b)[图3]。在0℃下，向在6mL THF中104mg42b(0.55mmol，1当量)溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯基溴化镁(在THF中0.5N，2.9mL)。将混合物搅拌30min直至醛在TLC板上消失。使用饱和NH4Cl猝灭反应混合物，使用乙醚萃取，使用MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物(2b)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.95-7.92(m，2H)，7.44-7.43(m，4H)，6.97(s，1H)，6.76(s，2H)，5.93(d，1H，J＝3.6Hz)，3.86(s，9H).MS(ESI)m/z402.1(M+Na)+。
(Z)-3-(2-苯基噻唑-4-基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙烯腈(2c-反式)和(E)-3-(2-苯基噻唑-4-基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙烯腈(2c-顺式)的合成[图3]
Figure BDA00003093994901341
(Z)-3-(2-苯基噻唑-4-基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙烯腈(2c-反式)。在0℃下在Ar2下向2.5N n-BuLi在0.4mL己烷中的溶液和10mLTHF中滴加177mg(1mmol)氰甲基磷酸二乙酯在5mL THF中溶液。将冰浴去除，然后在25℃下搅拌混合物40min。在0℃下滴加200mg(0.56mmol)1h在10mL THF中的溶液，然后将混合物在RT下搅拌1h。使用饱和NH4Cl溶液来处理反应混合物。在常规后处理之后，经柱色谱(硅胶，石油醚/乙酸乙酯)得到化合物2c-反式(83mg)和2c-顺式(76mg)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.01-7.99(m，2H)，7.44-7.40(m，3H)，7.21(s，1H)，6.74(s，2H)，6.67(s，1H)，3.93(s，3H)，3.89(s，6H).MS(ESI)m/z401.1(M+Na)+。
(E)-3-(2-苯基噻唑-4-基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙烯腈(2c-顺式)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.07-8.05(m，2H)，7.49-7.46(m，4H)，6.66(s，2H)，5.64(s，1H)，3.91(s，3H)，3.86(s，6H).MS(ESI)m/z401.1(M+Na)+。
(Z)-4-(亚肼基(3，4，5-三甲氧基苯基)甲基)-2-苯基噻唑(2d-顺式)和(E)-4-(亚肼基(3，4，5-三甲氧基苯基)甲基)-2-苯基噻唑(2d-反式)的合成[图3]
Figure BDA00003093994901351
(Z)-4-(亚肼基(3，4，5-三甲氧基苯基)甲基)-2-苯基噻唑(2d-顺式)。向1h(230mg，0.65mmol)在3mL CH2Cl2和3mL乙醇中的混合物加入肼水合物(2mL)。然后将混合物回流过夜。完成反应后，将残余物吸附于硅胶上，然后经柱色谱纯化得到化合物2d-顺式(80mg)和2d-反式(56mg)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.01-7.98(m，2H)，7.49-7.46(m，5H)，7.33(s，1H)，6.82(s，2H)，3.87(s，3H)，3.85(s，6H).MS(ESI)m/z370.1(M+H)+。
(E)-4-(亚肼基(3，4，5-三甲氧基苯基)甲基)-2-苯基噻唑(2d-反式)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.04-8.01(m，2H)，7.44-7.40(m，3H)，6.95(s，1H)，6.65(s，2H)，5.62(s，2H)，3.93(s，3H)，3.87(s，6H).MS(ESI)m/z370.1(M+H)+。
(Z)-(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮肟(2e-顺式)和(E)-(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮肟的合成(2e-反式)[图3]
Figure BDA00003093994901361
(Z)-(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮肟(2e-顺式)。向1h(210mg，0.59mmol)在10mL乙醇中的混悬物中加入盐酸羟胺(127mg，1.83mmol)的水溶液(2mL)。然后将2mL 1N NaOH滴加至反应混合物，并将混合物在55℃下搅拌3h。完成反应后，将残余物吸附于硅胶上并经柱色谱纯化得到化合物2e-顺式(85mg)和2e-反式(50mg)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.95(s，1H)，8.35(s，1H)，7.91-7.89(m，2H)，7.50-7.44(br，3H)，6.85(s，2H)，3.73(s，6H)，3.70(s，3H).MS(ESI)m/z393.1(M+Na)+；368.9(M-H)-。
(E)-(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮肟2e-反式)。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.49(s，1H)，7.92-7.89(m，2H)，7.64(s，1H)，7.51-7.49(m，3H)，7.34(s，1H)，6.75(s，2H)，3.75(s，6H)，3.72(s，3H).MS(ESI)m/z393.1(M+Na)+；368.9(M-H)-。
(Z)-(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮O-甲基肟(2f-顺式)和(E)-(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮O-甲基肟(2f-反式)的合成[图3]
Figure BDA00003093994901371
(Z)-(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮O-甲基肟(2f-顺式)。向1h(110mg，0.59mmol)在10mL吡啶中的混悬物中加入O-甲基盐酸羟胺(52mg，0.63mmol)，然后将混合物在60℃下搅拌过夜。使用1N HCl溶液猝灭反应，使用乙酸乙酯萃取，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物2f-顺式(41mg)和2f-反式(33mg)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.13(s，1H)，7.96-7.94(m，2H)，7.45-7.44(m，3H)，6.94(s，2H)，4.13(s，3H)，3.91(s，6H)，3.88(s，3H)。MS(ESI)m/z407.2(M+Na)+。
(E)-(2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮O-甲基肟(2f-反式)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.00-7.98(m，2H)，7.44-7.43(m，3H)，7.28(s，1H)，6.70(s，2H)，4.08(s，3H)，3.91(s，6H)，3.85(s，3H).MS(ESI)m/z407.0(M+Na)+。
2-苯基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺(2g)的合成[图3]
Figure BDA00003093994901381
2-苯基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺(2g)。向2e-顺式(21mg，0.06mmol)在5mL CH2Cl2中的溶液中加入对甲苯磺酰氯(23mg，0.12mmol)和NaH(5mg，在轻矿物油中60％)。然后将反应混合物搅拌20min。完成反应后，将残余物吸附于硅胶上，然后经Al2O3柱色谱纯化以得到化合物2g(15mg)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.22(s，1H)，8.19(s，1H)，8.02-7.99(m，2H)，7.52-7.50(m，3H)，7.07(s，2H)，3.92(s，6H)，3.85(s，3H)。MS(ESI)m/z371.1(M+H)+。
3，4，5-三甲氧基-N-(2-苯基噻唑-4-基)苯甲酰胺(2h)的合成[图3]
3，4，5-三甲氧基-N-(2-苯基噻唑-4-基)苯甲酰胺(2h)。向在5mLCH2Cl2中2e-反式(26mg，0.07mmol)的溶液中加入对甲苯磺酰氯(27mg，0.14mmol)和NaH(5mg，在轻矿物油中60％)。然后将反应混合物搅拌20min。完成反应后，将残余物吸附于硅胶上，并经Al2O3柱色谱纯化以得到化合物2h(15mg)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.88(s，1H)，7.94-7.91(m，2H)，7.83(s，1H)，7.48-7.46(m，3H)，7.18(s，2H)，3.97(s，6H)，3.94(s，3H).MS(ESI)m/z393.1(M+Na)+。
N-((2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)亚甲基)氨腈(2j)的合成[图3]
Figure BDA00003093994901391
N-((2-苯基噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)亚甲基)氨腈(2j)。将100mg 1h(0.28mmol，1当量)溶解在10mL二氯甲烷中。在0℃下滴加在二氯甲烷(1.0N，0.7mL，2.5当量)中的四氯化钛，然后搅拌30min。加入在2mL二氯甲烷中双-三甲基甲硅烷基碳二亚胺(2.4当量)，然后在防空气和水分下将反应搅拌过夜。使用冰水混合物来处理反应，然后使用二氯甲烷萃取。将有机相经硫酸镁干燥，通过硅藻土(celite)过滤，然后浓缩以得到粗品苯乙酮氰亚胺，经快速柱将其纯化为具有3∶7比率的同分异构体。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.72(br，0.3H)，8.63(s，0.7H)，8.09-8.07(m，1.4H)，7.99(br，0.6H)，7.58-7.56(br，3H)，7.26(s，1.4H)，7.18(s，0.6H)，3.84，3.83(s，s，6H)，3.82(s，3H).MS(ESI)m/z402.1(M+Na)+。
N-((4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)(2-苯基噻唑-4-基)亚甲基)氨腈(32)的合成。
Figure BDA00003093994901401
作为2j合成的副产物获得N-((4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)(2-苯基噻唑-4-基)亚甲基)氨腈(32)。1H NMR(500MHz，CDCl3δ8.23(s，1H)，8.02(m，2H)，7.92(s，2H)，7.55(m，3H)，6.02(s，1H)，3.99(s，6H).MS(ESI)m/z364.1(M+H)+。
(Z)-2-苯基-4-(3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)噻唑(3a)和(E)-2-苯基-4-(3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)噻唑(3b)的合成[图4]
Figure BDA00003093994901402
(Z)-2-苯基-4-(3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)噻唑(3a)。将三苯基膦(3.41g，13mmol)加入5-(溴甲基)-1，2，3-三甲氧基苯(2.61g，10mmol)在干燥THF(30mL)中的溶液。在搅拌下回流混合物6h。将所得白色固体过滤，然后使用乙醚/己烷洗涤以得到96.4％收率的产物3，4，5-三甲氧基苄基三苯基溴化鏻。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.77-7.73，7.65-7.61(m，15H)，6.44(d，2H，J＝1.5Hz)，5.37(d，2H，J＝14Hz)，3.76(s，3H)，3.51(d，6H)；MS(ESI)m/z443.1(M-Br]+。在-78℃下，将n-BuLi(0.42mL，在己烷中2.5N)加入3，4，5-三甲氧基苄基三苯基溴化鏻(500mg，0.96mmol)在10mL THF中的溶液。在RT下搅拌2h之后，加入在3mL THF中的醛42b(109mg，0.58mmol)，然后搅拌30min。使用饱和NH4C1溶液来处理反应混合物。在常规后处理之后，经柱色谱(硅胶，石油醚/乙酸乙酯)得到化合物3a(57mg)和3b(99mg)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.90-7.89(m，2H)，7.42-7.40(m，3H)，7.07(s，1H)，6.71(s，2H)，6.66(s，1H)，3.87(s，6H)，3.75(s，3H)；MS(ESI)m/z376.1(M+Na)+。
(E)-2-苯基-4-(3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)噻唑(3b)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.03-8.01(m，2H)，7.52(d，1H，J＝16Hz)，7.47-7.44(m，3H)，7.16(s，1H)，7.05(d，1H，J＝16Hz)，6.79(s，2H)，3.92(s，6H)，3.88(s，3H).MS(ESI)m/z354.1(M+H)+。
联苯基-3-基(3，4，5-三甲氧基苯基)硫烷(4a)，3-(3，4，5-三甲氧基苯基磺酰基)联苯(4b)和3-(3，4，5-三甲氧基苯基亚硫酰基)联苯(4c)的合成[图4]
S-联苯基-3-基O-乙基二硫代碳酸酯(52a)。在0℃下向1当量的联苯基-3-胺(1g，5.92mmol)在水(7.3mL)中的溶液中加入浓盐酸(1mL)。缓慢加入1.1当量的亚硝酸钠(450mg，6.5mmol)在水(3mL)中的冷溶液，然后搅拌15min。在45℃下缓慢加入冷重氮溶液1.3当量的乙基黄原酸钾(1.16g，1.3mmol)在水(1.3mL)中的溶液。将反应混合物在45℃下再搅拌30min，然后冷却至RT。使用乙醚(3x50mL)萃取反应混合物。使用1N NaOH溶液(100mL)、水(3x50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，经MgSO4干燥，过滤以及在减压下蒸发。在未进一步纯化下将所得粗品黄原酸酯52a直接用于下一步骤中。MS(ESI)m/z275.0(M+H)+。
联苯基-3-基(3，4，5-三甲氧基苯基)硫烷(4a)。向52a(1.1g，粗品化合物)在乙醇(8mL)中的溶液中加入氢氧化钾(2.1g，12mL)并加热回流过夜。将溶液冷却至RT，然后减压蒸发乙醇。将残余物溶解在水中并使用乙醚(10mL)洗涤。使用2N HCl来酸化水层并使用乙醚(3x50mL)萃取。使用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤有机萃取物，经MgSO4干燥，过滤并减压蒸发以得到0.85g(77.3％)的粗品联苯基-3-硫醇产物(全部，3步骤)。在磁力搅拌下，将0.1g(1.04mmol)的叔丁醇钠和83mg碘化亚铜(0.43mmol)放置于圆底烧瓶内。将反应容器密封后，通过隔膜注入3.0mL甲苯中的0.13g(0.71mmol)4-甲氧基苯硫醇和0.19g(0.65mmol)的5-碘-1，2，3-三甲氧基苯。将反应混合物在110℃下加热过夜。经快速色谱进行纯化，得到无定形固体(40％收率)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.54-7.52(m，3H)，7.44-7.41(m，3H)，7.37-7.33(m，2H)，7.23(s，br，1H)，6.69(s，2H)，3.86(s，3H)，3.80(s，6H).MS(ESI)m/z353.2(M+H)+。
3-(3，4，5-三甲氧基苯基磺酰基)联苯基(4b)。在3h内向60mg(0.17mmol)的化合物4a和5mL的二氯甲烷的溶液中非常缓慢地加入2当量的m-CPBA。通过薄层色谱来监控亚砜形成。使用快速色谱柱来进行纯化，得到(4b)的无定形粉末(73％收率)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.14(br，1H)，7.89(d，1H)，7.78(d，1H)，7.59-7.56(m，3H)，7.49-7.39(m，3H)，7.19(s，2H)，3.89(s，6H)，3.87(s，3H).MS(ESI)m/z385.0(M+Na)+。
3-(3，4，5-三甲氧基苯基亚硫酰基)联苯基(4c)。在0℃下，在3h内向500mg(1.42mmol)的化合物(4a)和5mL的二氯甲烷的溶液中非常缓慢地加入1当量的m-CPBA。通过薄层色谱来监控亚砜形成。使用快速色谱柱来进行纯化，得到(4c)的无定形粉末(87％收率)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.92(br，1H)，7.71(d，2H)，7.62-7.60(m，3H)，7.58-7.40(m，4H)，6.94(s，2H)，3.79(s，3H)，3.74(s，6H).MS(ESI)m/z369.1(M+H)+。
N-(3，4，5-三甲氧基苯基)联苯基-3-磺酰胺(4d)的合成[图4]
Figure BDA00003093994901431
N-(3，4，5-三甲氧基苯基)联苯基-3-磺酰胺(4d)。将65mg联苯基-3-磺酰氯(0.25mmol)、44mg3，4，5-三甲氧基苯胺(0.24mmol)和0.3mmol三乙胺在5mL DMF中的混合物搅拌过夜。使用水来处理反应混合物并使用乙酸乙酯萃取。在常规后处理之后，经柱色谱(硅胶，石油醚/乙酸乙酯)得到88mg化合物(4d)(91.7％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.96(t，1H，J＝1.8Hz)，7.81-7.74(m，2H)，7.57-7.40(m，6H)，6.33(s，2H)，3.86(s，3H)，3.80(s，6H).MS(ESI)m/z422.1(M+Na)+。
2-苯基-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)噻唑(2i)[图4]
Figure BDA00003093994901432
2-苯基-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)噻唑(2i)。在搅拌下将溴(160mg，1mmol)滴加至1-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酮(210mg，1mmol)在乙醇(30mL)中的溶液，然后将溶液在0℃下搅拌1h，并将其倾入水中以形成沉淀。将该沉淀由乙醇重结晶以得到溴苯乙酮(70％)并直接用于下一步中。将溴苯乙酮(288mg，1mmol)和硫代苯甲酰胺(137mg，1mmol)在乙醇中的混合物回流1h。将反应混合物在真空下浓缩，然后使用快速柱纯化以得到2i(167mg，51.1％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.05-8.03(m，2H)，7.48-7.44(m，3H)，7.41(s，1H)，7.22(s，2H)，3.97(s，6H)，3.89(s，3H).MS(ESI)m/z350.1(M+Na)+。
实施例3
具有不同“A”环和/或取代的“A”环的甲氧基苯甲酰基噻唑化合物的 合成
本发明的化合物具有不同的取代或未取代的A环，例如苯基或吲哚基。根据图5和6来合成这些化合物。
在苯基A-环的对位处引入羟基和氨基甲基，并使用5-吲哚环和2-吲哚环来替代苯基。使用芳香腈作为起始材料通过在图5中所示的程序来制备Weinreb酰胺57a、61a、65a和67a。根据标准程序来制备2-氰基-吲哚60a(Pletnev，A.A.；Tian，Q.；Larock，R.C.，Carbopalladation of nitriles：synthesis of 2，3-diarylindenones andpolycyclic aromatic ketones by the Pd-catalyzed annulation of alkynesand bicyclic alkenes by 2-iodoarenenitriles.J Org Chem 2002，67(26)，9276-87；其以引用方式整体并入本文)。在制备中使用对羟基(TBDMSCl)、吲哚基(PhSO2Cl)和氨基(Boc2O)基团的保护。使用TBAF/THF溶液以一步进行TBDMS的脱保护和由噻唑啉(58a)至噻唑(2l)的氧化。在噻唑啉Weinreb酰胺和格氏试剂的反应中同时发生该噻唑啉-噻唑氧化。在吲哚化合物62a和66a的制备中观察到相同现象。
在与3，4，5-三甲氧基苯基锂反应之后，无需进一步氧化将化合物62a分离为纯噻唑化合物。通过在热NaOH乙醇溶液中去除苯基磺酰基保护基团来获得化合物66a。由Weinreb酰胺58a和68a通过类似的格氏反应来获得在2l和2r的A环上的对-OH和NH2。将化合物2r进一步转化为盐酸盐(2r-HCl)，使用NaH/MeI条件转化为一甲胺2s-HCl的盐酸盐，而在HCHO/NaBH3CN条件下转化为二甲胺2u。
取代的A环：
(2-(4-羟基苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(2l)的合成[图5]
Figure BDA00003093994901451
使用如38d中所使用的相同方法来合成(R)-2-(4-羟基苯基)-N-甲氧基-N-甲基-4，5-二氢噻唑-4-甲酰胺(57a)。定量收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.56(d，2H，J＝8.5Hz)，6.84(br，1H)，6.73(d，2H，J＝8.5Hz)，5.64(t，br，1H)，3.87(s，3H)，3.30(s，3H).MS(ESI)m/z289.0(M+Na)+，264.9(M-H)-。
使用如(35a)中所使用的相同方法来合成(R)-(2-(4-(叔丁基二甲基甲硅氧基)苯基)-4，5-二氢噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(58a)-参见实施例1。67.0％收率。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.73(d，2H，J＝8.7Hz)，7.61(s，2H)，6.83(d，2H，J＝8.7Hz)，5.95(dd，1H，J＝8.1Hz，9.0Hz)，4.09，(dd，1H，J＝7.8Hz，11.1Hz)，3.95(s，3H)，3.94(s，6H)，3.55(dd，1H，J＝9.3Hz，11.1Hz)，0.97(s，9H)，0.19(s，6H).MS(ESI)m/z510.4(M+Na)+，486.0(M-H)-。
(2-(4-羟基苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(2l)。在0℃下，向58a(0.2mmol)在5mL CH2Cl2中的溶液中加入四丁基氟化铵在THF(1N，0.6mmol)中的溶液并在RT下搅拌约14h直至通过TLC监控完成反应。67.0％收率。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)
Figure BDA00003093994901461
10.1(s，1H)，8.51(s，1H)，7.85(d，2H，J＝8.50Hz)，7.62(s，2H)，6.91(d，2H，J＝8.5Hz)，3.86(s，6H)，3.79(s，3H).MS(ESI)m/z394.1(M+Na)+，369.9(M-H)-。
(2-(4-(氨基甲基)苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(2r或2r-HCl)[图5]
Figure BDA00003093994901462
(R)-4-(4-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)-4，5-二氢噻唑-2-基)苄基氨基甲酸叔丁酯(67a)。将4-(氨基甲基)苄腈(25.09g，0.149mol)和L-半胱氨酸(18.1g，0.149mol)混悬在500mL MeOH和pH6.4缓冲溶液(1∶1)中，然后在RT下搅拌3天。将三乙胺(30mL)加入混合物，并将Boc2O(68g，0.31mol)加入该混合物，然后搅拌2h。去除溶剂并过滤以得到白色固体(R)-2-(4-((叔丁氧基羰基氨基)甲基)苯基)-4，5-二氢噻唑-4-羧酸(38.4g，76.8％)。在进行如38d所使用的相同方法之后由该酸得到化合物67a。收率：84.4％.1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.75-7.77(d，2H，J＝7.5Hz)，7.27-7.26(d，2H，J＝7.5Hz)，7.23(s，1H)，5.62(br，1H)，4.87(br，1H)，4.30(br，2H)，3.86(s，3H)，3.78(t，J＝10.0Hz，1H)，3.48-3.4(m，1H)，3.25(s，3H)，1.42(s，9H).MS(ESI)m/z402.1(M+Na)+，378.0(M-H)-。
4-(4-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)噻唑-2-基)苄基氨基甲酸叔丁酯(68a)。将67a(2.5mmol)、CBrCl3(3.2mmol)和DBU(5.0mmol)在CH2Cl2(20mL)中的混合物搅拌过夜。将反应混合物吸附于硅胶上并经柱色谱纯化以得到中间体噻唑Weinreb酰胺。在0℃下向在THF中(3，4，5-三甲氧基苯基)溴化镁(0.5M，5.5mL)的溶液中加入在10mLTHF中中间体噻唑Weinreb酰胺(1.83mmol)的溶液，然后搅拌30min。使用饱和NH4Cl猝灭反应混合物，使用乙醚萃取，经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物的浅黄色固体(32.3％)。1H NMR(300M，CDCl3δ8.27(s，1H)，7.98(d，2H，J＝8.1Hz)，7.78(s，2H)，7.39(d，2H，J＝8.1Hz)，7.27-7.26(d，2H，J＝7.5Hz)，7.23(s，1H)，4.93(br，1H)，4.37(br，d，1H)，3.96(s，3H)，3.95(s，6H)，1.47(s，9H)；MS(ESI)m/z507.1(M+Na)+。
(2-(4-(氨基甲基)苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(2r或2r-HCl)。在0℃下，向68a(200mg)在10mL CH2Cl2中的溶液中加入HCl在1，4-二噁烷(4N，2mL)中的溶液，然后在RT下搅拌4h。过滤沉淀(2r)，并使用乙醚洗涤。收率：81.3％.1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.68(s，1H)，8.38(br，3H)，8.10(d，2H，J＝8.4Hz)，7.66(d，2H，J＝8.4Hz)，7.62(s，2H)，4.11(s，2H)，3.87(s，6H)，3.80(s，3H).MS(ESI)m/z385.1(M+H)+。
(2-(4-((二甲氨基)甲基)苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(2u或2u-HCl)[图5]
甲基(4-(4-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)噻唑-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(71a)。在0℃下，向化合物68a(100mg，0.2mmol)在5mL DMF中的溶液中加入氢化钠(10mg，0.2mmol)，然后将碘甲烷(77mg，0.4mmol)加入反应混合物，并在RT下搅拌过夜。使用饱和NaHCO3溶液猝灭混合物，使用乙酸乙酯萃取，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物71a。收率：61.3％.1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.30(s，1H)，8.02(d，2H，J＝8.0Hz)，7.82(s，2H)，7.36(br，2H)，4.50(s，2H)，4.00(s，3H)，3.98(s，6H)，2.90(d，br，3H)，1.50(s，9H).MS(ESI)m/z521.2(M+Na)+，496.9(M-H)-。
(2-(4-((甲氨基)甲基)苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(2s或2s-HCl)。在0℃下，向71a(60mg)在5mL CH2Cl2中的溶液中加入HCl在1，4-二噁烷(4N，2mL)中的溶液，然后在RT下搅拌过夜。将沉淀(2s-HCl)过滤，然后使用乙醚洗涤。收率：81.3％.1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.0(s，1H)，8.29(s，1H)，8.05(d，2H，J＝6.0Hz)，7.74(s，2H)，7.72(d，2H，J＝6.0Hz)，4.15(s，2H)，3.99(s，3H)，3.96(s，6H)，2.61(s，3H).MS(ESI)m/z399.1(M+H)+。
(2-(4-((二甲氨基)甲基)苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(2u或2u-HCl)。向在5mL CH2Cl2中2r(53mg，0.14mmol)的溶液中加入甲醛溶液(在H2O中37％，340mg，4.2mmol)和氰基硼氢化钠(34mg，0.55mmol)，将反应混合物吸附于硅胶上，然后在快速柱之后将游离碱纯化(41mg，70.9％)。在0℃下，向游离碱(41mg)在5mL CH2Cl2中的溶液中加入HCl在1，4-二噁烷(4N，2mL)中的溶液，然后在RT下搅拌过夜。将沉淀(2u)过滤，然后使用乙醚洗涤。收率：71.3％.1H NMR(500MHz，CDCl3)δ13.0(s，1H)，8.34(s，1H)，8.13(d，2H，J＝7.0Hz)，7.82(d，2H，J＝7.5Hz)，7.75(s，2H)，4.24(s，2H)，3.99(s，3H)，3.97(s，6H)，2.83(s，6H).MS(ESI)m/z413.1(M+H)+。
2-(4-(4-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)噻唑-2-基)苯基)乙腈(2n)
Figure BDA00003093994901491
由对苯二腈和半胱氨酸使用如化合物1h所使用的相同方法来制备2-(4-(4-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)噻唑-2-基)苯基)乙腈(2n)。1HNMR(500MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，8.04(d，2H)，7.76(s，2H)，7.46(d，2H)，3.97(s，3H)，3.95(s，6H)，3.83(s，2H)。
(2-(4-(二甲氨基)苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(2o)的合成
Figure BDA00003093994901492
由4-(二甲氨基)苄腈和半胱氨酸使用如化合物1h的相同方法来制备(2-(4-(二甲氨基)苯基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(2o)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.12(s，1H)，7.88(d，2H)，7.80(s，2H)，6.73(d，2H)，3.96(s，3H)，3.95(s，6H)，3.05(s，6H)；MS(ESI)m/z421.1(M+Na)+。
吲哚基A环：
(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(62a)的合成[图5]
Figure BDA00003093994901501
1H-吲哚-2-腈(60a)。向吲哚-2-羧酸(2.0g，12.4mmol)在60mL的无水Et2O中的冷却溶液中加入1.9mL的SOCl2(26mmol)。在RT下搅拌40min之后，在不超过35℃的温度下减压去除乙醚。将所得酰基氯溶解在40mL无水Et2O中，然后在搅拌下将所得溶液立即加入液氨在80ml Et2O中的溶液。将反应混合物在RT下搅拌24h。然后减压蒸发溶剂，并由50％EtOH水溶液重结晶白色吲哚-2-甲酰胺，在空气中干燥，此后将其溶解在POCl3中，然后在回流下加热5min。将冷却的溶液倾于碎冰上，然后加入NH4OH水溶液以维持碱性pH。使用Et2O萃取水性混合物，将萃取物经Na2SO4干燥，并蒸发。得到棕色吲哚-2-腈60a(由吲哚-2-羧酸的总收率为63.3％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)
Figure BDA00003093994901502
8.56(br，s，1H)，7.68(d，1H，J＝8.0Hz)，7.43-7.34(m，2H)，7.24-7.21(m，2H).MS(ESI)m/z144.0(M+H)+，140.8(M-H)-。
使用如38d所使用的相同方法来合成(R)-2-(1H-吲哚-2-基)-N-甲氧基-N-甲基-4，5-二氢噻唑-4-甲酰胺(61a)。67.1％收率。1H NMR(300MHz，CDCl3)
Figure BDA00003093994901511
9.06(s，br，1H)，7.64(d，2H，J＝8.1Hz)，7.36-7.24(m，2H)，7.12(dt，1H，J＝8.1Hz，1.2Hz)，6.95(d，1H，J＝1.8Hz)，5.60(t，br，1H，J＝8.7Hz)，3.86(s，3H)，3.78(t，1H，J＝10.2Hz)，3.58(dd，1H，J＝9.0Hz，10.2Hz)，3.30(s，3H).MS(ESI)m/z312.1(M+Na)+，287.9(M-H)-。
使用如35a所使用的相同方法由61a来合成(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(62a)。45.8％收率。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)
Figure BDA00003093994901512
9.26(s，1H)，8.11(s，1H)，7.66(d，1H，J＝8.0Hz)，7.46(s，2H)，7.42(d，1H，J＝8.0Hz)，7.29(t，1H，J＝7.5Hz)，7.16(t，1H，J＝7.5Hz)，7.10(s，1H)，3.97(s，3H)，3.93(s，6H).MS(ESI)m/z417.1(M+Na)+，392.9(M-H)-。
(2-(1H-吲哚-5-基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(66a)的合成[图5]
Figure BDA00003093994901513
(R)-2-(1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-5-基)-4，5-二氢噻唑-4-羧酸(64a)。由1H-吲哚-5-腈使用如42a所使用的相同方法来合成(R)-2-(1H-吲哚-5-基)-4，5-二氢噻唑-4-羧酸63a，并在未进一步纯化下使用。在0℃下在剧烈搅拌下向63a(1mmol)和四丁基硫酸氢铵(0.15mmol)在甲苯(10mL)中的溶液中加入50％氢氧化钠水溶液(10mL)和磺酰氯(2mmol)。将所得溶液在RT下搅拌6h。然后将1N HCl加入以酸化混合物至pH＝2，然后使用CH2Cl2萃取，分离并干燥(MgSO4)有机层；然后蒸干以得到64a，在未进一步纯化下将其用于随后步骤中。
使用如38d所使用的相同方法由64a来制备(R)-N-甲氧基-N-甲基-2-(1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-5-基)-4，5-二氢噻唑-4-甲酰胺(65a)。57.1％收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)
Figure BDA00003093994901521
7.92(m，2H)，7.77(m，3H)，7.51(d，1H，J＝3.0Hz)，7.46(t，1H)，7.35(t，1H)，6.61(d，1H)，5.58(br，t，1H)3.82(s，3H)，3.73(t，1H)，3.43(m，1H)，3.21(s，3H).MS(ESI)m/z452.1(M+Na)+。
(2-(1H-吲哚-5-基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(66a)。在-78℃下向n-BuLi(1.6M，1.7mL)在8mL THF中的溶液中加入3，4，5-三甲氧基溴苯(2.47mmol)在3mL THF中的溶液。将混合物搅拌2h，然后加入Weinreb酰胺65a(1.24mmol)在3mL THF中的溶液。在RT下使温度升高并搅拌过夜。使用饱和NH4Cl猝灭反应混合物，使用乙醚萃取，经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，将其在5mL乙醇溶液中1N NaOH中回流以得到脱保护的化合物66a，并经柱色谱纯化得到纯化合物的浅黄色固体(36.3％)。1H NMR(300M，CDCl3)δ8.36(br，s，1H)，8.31(s，1H)，8.21(s，1H)，7.92，7.89(dd，1H，J＝1.8，2.7Hz)，7.46(d，1H，)7.62(s，2H，J＝8.7Hz)，7.29(t，1H，J＝2.7Hz)，6.64(br，1H)，3.97(s，6H)，3.97(s，3H)；MS(ESI)m/z417.1(M+Na)+，392.9(M-H)-。
(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(1H-吲哚-2-基)甲酮(8)的合成
Figure BDA00003093994901522
由2-(1H-吲哚-2-基)-4，5-二氢噻唑-4-羧酸和半胱氨酸使用如化合物1h所使用的相同方法来制备(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(1H-吲哚-2-基)甲酮(8)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.39(s，1H)，8.54(s，1H)，8.46(s，1H)，8.06(s，1H)，8.03(dd，1H)，7.66(d，1H)，7.51(d，1H)，7.41(d，1H)，7.33(t，1H)，7.29(d，1H)，7.15(t，1H)，7.09(d，1H)，6.72(s，1H).MS(ESI)m/z366.1(M+Na)+，341.9(M-H)-。
(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(1H-吲哚-5-基)甲酮(21)的合成。
Figure BDA00003093994901531
由2-(1H-吲哚-2-基)-4，5-二氢噻唑-4-羧酸和半胱氨酸使用如化合物1h所使用的相同方法来制备(2-(1H-吲哚-2-基)噻唑-4-基)(1H-吲哚-5-基)甲酮(21)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.60(s，1H)，9.26(s，1H)，8.31(s，1H)，8.03(s，1H)，7.83(dd，1H)，7.69(d，1H)，7.53-7.49(m，2H)，7.41(t，1H)，7.33(t，1H)，7.21-7.18(m，2H)，7.13(s，1H).MS(ESI)m/z366.1(M+Na)+，341.9(M-H)-。
实施例4
具有氮连接子(X＝NH)的本发明化合物的合成
为了改善生物利用率，在A苯基和B噻唑环之间引入NH连接子。如图6中所示来合成该新系列化合物。在65℃下在乙醇中3-溴-2-氧代丙酸乙酯和芳基硫脲的反应产生高收率的2-(芳基氨基)-噻唑-4-羧酸73a-d。将这些酸转化为Weinreb酰胺74a-d，随后与3，4，5-三甲氧基苯基锂反应得到连接游离碱的苯胺5a-d，可将其转化为盐酸盐5Ha-d。
(2-(苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮衍生物(5a-d)及其盐酸盐的合成[图6]
Figure BDA00003093994901541
2-(芳基氨基)噻唑-4-羧酸(37a-d)的合成通用程序。将N-芳基硫脲(0.01mol)和溴代丙酮酸乙酯(0.011mol)溶解在3mL乙醇中，然后保持回流2h。将反应冷却，通过过滤收集结晶2-(取代的苯基氨基)噻唑-4-羧酸乙酯，然后使用乙醇洗涤。将乙酯与NaOH-乙醇溶液的混合物回流得到最终化合物73a-d，将其直接用于下一步骤中。
使用如38d(参见实施例1，图2)所使用的相同方法来合成N-甲氧基-N-甲基-2-(芳基氨基)噻唑-4-甲酰胺(74a-d)。
N-甲氧基-N-甲基-2-(苯基氨基)噻唑-4-甲酰胺(74a)。90.2％收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.39(s，2H)，7.38(br，1H)，7.36-7.33(m，br，4H)，7.09(t，br，1H)，3.77(s，3H)，3.43(s，3H)，2.33(s，3H).MS(ESI)m/z286.0(M+Na)+。
N-甲氧基-N-甲基-2-(对甲苯基氨基)噻唑-4-甲酰胺(74b)。93.3％收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.35(s，1H)，7.31(br，1H)，7.22(d，2H)，7.16(d，2H)，3.76(s，3H)，3.42(s，3H)，2.33(s，3H).MS(ESI)m/z278.0(M+H)+。
2-(4-氟苯基氨基)-N-甲氧基-N-甲基噻唑-4-甲酰胺(74c)。89.7％收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.36(s，1H)，7.36-7.31(m，2H)，7.07-7.04(m，6H)，3.76(s，3H)，3.42(s，3H).MS(ESI)m/z282.0(M+Na)+，280.8(M-H)-。
2-(4-氯苯基氨基)-N-甲氧基-N-甲基噻唑-4-甲酰胺(74d)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.66(s，br，1H)，7.41(s，1H)，7.34(d，2H)，7.29(d，2H)，3.76(s，3H)，3.42(s，3H).MS：295.8(M-1)-；320.0(M+Na)+。
(2-(芳基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5a-d)的合成的通用程序。在-78℃下，在Ar2保护下向5-溴-1，2，3-三甲氧基苯(1.235g，5.0mmol)在30mL THF中的溶液加入在己烷(2.5N，2.4mL，6mmol)中的n-BuLi，并搅拌10min。将在10mL THF中的Weinreb酰胺74a-d(1mmol)加入锂试剂，并将其在RT下搅拌2小时。使用饱和NH4Cl猝灭反应混合物，使用乙醚萃取，经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物(5a-d)。
(2-(苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5a)。33.3％收率。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)10.4(s，1H)，7.85(s，1H)，7.68(d，2H，J＝8.0Hz)，7.31(t，2H，J＝8.0Hz)，6.98(t，1H，J＝8.0Hz)，3.83(s，6H)，3.78(s，3H).MS(ESI)m/z393.1(M+H)+，368.9(M-H)-。
(2-(对甲苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5b)。40.6％收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.48(s，1H)，7.47(s，2H)，7.30(br，1H)，7.27(d，2H，J＝8.5Hz)，7.17(d，2H，J＝8.5Hz)，3.93(s，3H).3.90(s，6H)，2.34(s，3H).MS(ESI)m/z385.1(M+H)+，382.9(M-H)-。
(2-(对氟苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5c)。39.6％收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.52(br，1H)，7.49(s，1H)，7.45(s，2H)，7.40-7.37(q，2H，J＝4.5Hz)，7.08-7.04(t，2H，J＝8.0Hz)，3.93(s，3H)，3.89(s，6H).MS(ESI)m/z389.3(M+H)+，386.9(M-H)-。
由1-(4-氯苯基)硫脲和溴代丙酮酸乙酯使用如5a所使用的相同方法来制备(2-((4-氯苯基)氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5d)。熔点：165-166℃.1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.60(s，br，1H)，7.56(s，1H)，7.47(s，2H)，7.38(d，2H)，7.31(d，2H)，3.94(s，3H)，3.89(s，6H).MS：402.9(M-1)-；427.0(M+Na)+。
盐酸盐(5Ha-c)的合成的通用程序。在0℃下，向化合物5a-c(0.1mmol)在5mL CH2Cl2中的溶液中加入HCl在1，4-二噁烷(4N，2mL)中的溶液，然后在RT下搅拌过夜。收集沉淀5Ha-c，并使用乙醚洗涤。
(2-(苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(5Ha)。91.6％收率。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ12.9(br，1H)，7.49-7.46(m，2H)，7.42-7.40(m，2H)，7.37-7.34(m，br，2H)，7.11(s，2H)，3.94(s，3H)，3.92(s，6H).MS(ESI)m/z389.1(M+H)+。
(2-(对甲苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(5Hb)。39.6％收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.30-7.25(m，br，5H)，7.12(s，2H)，3.94(s，3H)，3.92(s，6H)，2.38(s，3H).MS(ESI)m/z389.1(M+H)+。
(2-(对氟苯基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮盐酸盐(5Hc)。89.3％收率。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.55(s，1H)，7.85(s，1H)，7.72-7.69(q，2H，J＝4.5Hz)，7.50(s，2H)，7.18-7.15(t，2H，J＝8.5Hz)，4.30(br，1H)，3.82(s，6H)，3.78(s，3H).MS(ESI)m/z389.3(M+H)+。
(2-(苯基氨基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5e)的合 成
Figure BDA00003093994901571
流程1：化合物5e的制备
2，2-二乙氧基-N-(亚氨基亚甲基)乙胺(a)。在RT下将氨基乙醛缩二乙醇(5.32g，40mmol)在乙醚(20mL)中的溶液中加入CNBr(4.22g，40mmol)在己烷(20mL)中的混悬物。将反应混合物在RT下搅拌过夜。通过过滤去除固体并使用乙醚洗涤。将合并的过滤物浓缩。将浓缩残余物经快速色谱得到2.82g(45％)的N-(2，2-二乙氧基乙基)碳二亚胺(a)。1H NMR(500MHz，CDCl3)：4.58(t，J＝5.5Hz，1H)，3.85(br s，1H)，3.73(m，2H)，3.56(m，2H)，3.16(J＝5.5Hz，2H)，1.23(t，J＝7.0Hz，3H)，MS：156.8(M-H)-；180.9(M+Na)+。
1-(2，2-二乙氧基乙基)-3-苯基胍(b)。将苯胺(1.66g，17.8mmol)溶解在乙醇(25mL)中，然后滴加N-(2，2-二乙氧基乙基)碳二亚胺(a)(2.82g，17.8mmol)。然后加入甲磺酸(1.71g，17.8mmol)，并在回流下将混合物升温24h。将反应混合物倾入NaOH(0.5M)中，然后使用CH2Cl2萃取。经干燥和浓缩得到产物，将其进行快速色谱以得到中间体胍(b)(3.3g，73.8％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ7.27-6.90(m，5H)，4.55(t，1H)，3.76-3.70(m，2H)，3.60-3.54(m，2H)，3.35-3.34(d，2H)，1.22(pent，6H).MS：249.8(M-H)-；252.1(M+H)+。
N-苯基-1H-咪唑-2-胺(c)。在0℃下将胍(b)溶解在HCl(5mL，6M)中，然后搅拌2h。在消耗起始材料之后，加入NaOH(25％)直至形成沉淀。将该混合物搅拌30min。将反应物倾入NaOH(0.5M)中，使用CH2Cl2萃取，干燥，并浓缩。经快速色谱得到(c)(0.95g，50％).1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.58(s，br，1H)，7.34-6.74(m，5H)，6.68(s，2H)，6.62(br，2H)，3.82(s，6H)，3.73(s，3H).MS：157.6(M-H)-；160.0(M+H)+。
N-苯基-1-三苯甲基-1H-咪唑-2-胺(d)。将三苯甲基氯(2.79g，10mmol)加入用冰冷却的苯基氨基咪唑(c)(1.59g，10mmol)和三乙胺(1.01g，10mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液。将反应混合物升温至RT并搅拌过夜。使用二氯甲烷来稀释混合物，依次使用H2O、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。过滤并蒸发溶剂，随后经色谱分离以得到产物(d)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.52-7.35(m，5H)，7.28-7.43(m，15H)，6.85(s，2H)，6.41(s，1H)，6.08(s，1H).MS：1399.8(M-H)-；402.8(M+H)+。
(2-(苯基氨基)-1-三苯甲基-1H-咪唑-4-基)(3，4，5三甲氧基苯基)甲酮(e)。在-78℃下，将在THF(1.7M，0.34mL，0.58mmol)中的t-BuLi中加入三苯甲基保护的化合物(d)(116mg，0.289mmol)在THF中的溶液。然后加入3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯(66.5mg，0.289mmol)并搅拌过夜。使用饱和NH4Cl猝灭反应混合物，并经MgSO4干燥。将溶剂过滤并蒸发，随后经色谱以得到化合物(e)(75mg，43.7％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.55-7.41(m，5H)，7.32(s，1H)，7.28-7.18(m，15H)，6.94(s，2H)，3.78(s，6H)，3.70(s，3H).MS：594.2(M-H)-；596.3(M+H、)+。
(2-(苯基氨基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(5e)。向三苯甲基保护的化合物(e)(50mg，0.084mmol)在乙醚中的溶液中加入在乙醚(1mL，1mmol)中2M HCl。将反应混合物搅拌过夜，然后使用饱和NaHCO3洗涤，并经MgSO4干燥。过滤并蒸发溶剂，随后经快速色谱以得到脱保护化合物5e(18mg，63％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ7.54(s，br，1H)，7.51-7.43(m，3H)，7.33(d，2H)，7.04(s，2H)，6.62(br，2H)3.82(s，6H)，3.73(s，3H).MS：352.1(M-H)-；354.3(M+H)+。
实施例5
选择的芳基-苯甲酰基-咪唑化合物的合成
Figure BDA00003093994901591
2-芳基-4，5-二氢-1H-咪唑14b、14c、14x的制备(图7)。
Figure BDA00003093994901592
向合适的苯甲醛8(b，c，x)(60mmol)在t-BuOH(300mL)中的溶液中加入乙二胺(66mmol)，然后在RT下搅拌30min。将碳酸钾(75mmol)和碘(180mmol)依次加入反应混合物，随后在70℃下搅拌3h。加入亚硫酸钠(Na2SO3)，然后用氯仿萃取混合物。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。通过速柱色谱(氯仿∶甲醇20∶1)纯化残余物以得到白色固体。收率：50-60％。
2-芳基-1H-咪唑(9a-j，p，x；图7和8)的制备
Figure BDA00003093994901601
方法A(仅9b，9x必需图7)：向2-芳基-4，5-二氢-1H-咪唑14b，x(35mmol)在DMSO(100mL)中的溶液中加入碳酸钾(38.5mmol)和二乙酰氧基碘苯(38.5mmol)。将反应混合物在黑暗处搅拌过夜。加入水，随后使用二氯甲烷萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物进行快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯3∶2)以得到白色固体。收率：30％-50％。
方法B(仅9c必需；图7)：向2-芳基-4，5-二氢-1H-咪唑14c(50mmol)在DMF(70mL)中的溶液中加入DBU(55mmol)和CBrCl3(55mmol)。将反应混合物搅拌过夜，并加入饱和NaHCO3(水性)溶液，随后使用二氯甲烷萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物进行快速柱色谱(氯仿∶甲醇50∶1)以得到白色固体。收率：7％。
方法C(9a，9d-j，9p必需；图8)：在0℃下向合适的苯甲醛(8a，8d-j，8p)(100mmol)在乙醇(350mL)中的溶液中加入40％乙二醛在水(12.8mL，110mmol)中的溶液以及29％氢氧化铵在水(1000mmol，140mL)中的溶液。在RT下搅拌2-3天之后，将反应混合物浓缩，然后使用二氯甲烷作为洗脱剂将残余物进行快速柱色谱以得到标题化合物的黄色粉末。收率：20％-40％。
2-芳基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10a-j，p，x；图7和8)的制备。
Figure BDA00003093994901602
在0℃下向2-芳基-1H-咪唑9a-j，p，x(20mmol)在无水THF(200mL)中的溶液中加入氢化钠(在矿物油中60％分散物，1.2g，30mmol)，然后搅拌30min。加入苯磺酰氯(2.82mL，22mmol)，然后将反应混合物搅拌过夜。用100mL饱和NaHCO3溶液(水性)稀释后，用乙酸乙酯(500mL)萃取反应混合物。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯2∶1)纯化残余物以得到灰色固体。收率：50％-70％。
芳基(2-芳基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11aa-ai、ba、ca、cb、da、db、ea、eb、fa、fb、ga、gb、ha、hb、ia、ib、ja、jb、pa；图7和8)的制备
Figure BDA00003093994901611
在-78℃下，向2-芳基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(6.0mmol)10a-j，p，x在无水THF(30mL)中的溶液中加入在戊烷(5.3mL，9.0mmol)中的1.7M叔丁锂，然后搅拌10min。在-78℃下加入适当取代的苯甲酰氯(7.2mmol)，然后搅拌过夜。使用100mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(200mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯4∶1)纯化以得到白色固体。收率：15％-40％。
芳基(2-芳基-1H-咪唑-4-基)甲酮(12aa-ai、ba、ca、cb、da、db、ea、eb、fa、fb、ga、gb、ha、hb、ia、ib、ja、jb、pa；图7和8)的制备的通用程序。
Figure BDA00003093994901621
向芳基(2-芳基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(2.0mmol)11aa-ai、ba、ca、cb、da、db、ea、eb、fa、fb、ga、gb、ha、hb、ia、ib、ja、jb、pa在THF(20.0mL)中的溶液中加入1.0M四丁基氟化铵(4.0mmol)并搅拌过夜。用50mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯3∶1)纯化或者由水和甲醇重结晶以得到白色固体。收率：80-95％。
(2-(4-羟基苯基)-1H-咪咪-4-基)(芳基)甲酮(12ka、12kb；图8)的制备。
Figure BDA00003093994901622
向(2-(4-(苄氧基)苯基)-1H-咪唑-4-基)(芳基)甲酮12ja或12jb，(1mmol)在AcOH(20mL)中的溶液中加入浓盐酸(2mL)，并回流过夜。在去除溶剂之后，由二氯甲烷重结晶残余物以得到标题化合物的黄色固体。收率：70-85％。
(2-芳基-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三羟基苯基)甲酮13ea、13fa、13ha的制备(图8)。
Figure BDA00003093994901623
向芳基(2-芳基-1H-咪唑-4-基)甲酮12ea、12fa或12ha(0.5mmol)在CH2Cl2(6.0mL)中的溶液中加入在CH2Cl2中1.0M的BBr3(2mmol)，然后在RT下搅拌1h。加入水以破坏过量的BBr3。将沉淀的固体过滤，并由MeOH重结晶以得到黄色固体。收率：60-80％。
芳基(2-芳基-1H-咪唑-4-基)甲酮-盐酸盐(12db-HCl)的制备。
Figure BDA00003093994901631
向12db(0.5mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中加入氯化氢(5mmol)在乙醚中的2M溶液，然后在RT下搅拌过夜。将反应混合物浓缩并用CH2Cl2洗涤残余物以得到标题化合物。收率：95％。
芳基(2-苯基-1H-咪唑-1-基)甲酮(12aba、12aaa；图9)的制备。
Figure BDA00003093994901632
在0℃下向2-苯基-1H-咪唑9a(10mmol)在THF(20mL)中的溶液中加入NaH(15mmol)和取代的苯甲酰氯(12mmol)。将反应混合物搅拌过夜，然后用饱和NaHCO3溶液稀释，随后使用乙酸乙酯萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(氯仿)纯化以得到白色固体。收率：12-16％。
1-取代的-(2-苯基-1H-咪唑-1-基)-芳基-甲酮(12dc、12fc、12daa、12dab、12cba、11gaa、12la；图10-11)的制备
Figure BDA00003093994901641
12dc、12fc和12daa、12dab和12cba的合成概述在图10中。根据以上和在图7和8中所述合成来合成化合物12da、12cb和12fa。使用氯化铝对12da和12fa处理得到3，5-二甲氧基完好的对位脱甲基的12dc，12fc。通过12da的N-1位置的苄基化来制备化合物12daa。但12da和12cb的N-1位置的甲基化分别得到化合物12dab和12cba。
12dc、12fc、12daa、12dab、12cba的合成：方法D(对于12dc和12fc)[图10]：
Figure BDA00003093994901642
R1＝CH3(12dc)
R1＝Cl(12fc)
向12da和12fa(200mg)在THF(20mL)中的溶液中加入氯化铝(10当量)。将反应混合物搅拌过夜。加入水，随后使用乙酸乙酯萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物进行快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯1∶1)以得到黄白色固体。收率：60％-80％。
12daa、12dab、12cba的合成，方法E：[图10]：
Figure BDA00003093994901651
R1＝Me；R2＝Bn；R3＝3，4，5-(OMe)3(12daa)
R1＝Me；R2＝CH3；R3＝3，4，5-(OMe)3(12dab)
R1＝OMe；R2＝CH3；R3＝F(12cba)
在冰浴中向12da和12cb(100mg)在THF(10mL)中的溶液中加入氢化钠(1.2当量)，随后加入甲基碘(对于12dab、12cba)或者苄基溴(对于12daa)(2当量)。在回流条件下将所得反应混合物搅拌5h。用50mL饱和NaHCO3溶液(水性)稀释后，用乙酸乙酯(100mL)萃取反应混合物。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯2∶1)纯化以得到白色固体。收率：50％-98％。
11gaa和12la的合成(图11)：
R1＝N(Me)2；R2＝(4-OMe)PhSO2(11gaa)
R1＝Br；R2＝H(12la)
在氢氧化铵和乙二醛的存在下将取代的苯甲醛化合物8(l，g)转化为化合物9(l，g)以构建咪唑骨架。通过合适的苯基磺酰基来保护化合物9(l，g)的咪唑环，随后与3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯偶联以得到化合物11(la，gaa)。使用叔丁基氟化铵来处理11la以去除保护基团，得到12la。
(1-苄基-2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12daa)的结构鉴定(图11)。
收率：92.8％；mp135-137℃。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ7.81(s，1H)，7.80(d，J＝6.5Hz，2H)，7.58(d，J＝8.0Hz，2H)，7.41-7.45(m，3H)，7.31-7.33(m，2H)，7.20(d，J＝7.0Hz，2H)，5.33(s，2H)，3.99(s，3H)，3.98(s，6H)，2.47(s，3H).MS(ESI)计算值C27H26N2O4442.2，测定值443.1[M+Na]+.HPLC1：tR4.28min，纯度＞99％。
(2-(4-(二甲氨基)苯基)-1-((4-甲氧基苯基)磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12gba)的结构鉴定。
Figure BDA00003093994901662
收率：34.1％；mp147-149℃。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ8.07(q，J＝8.5Hz，5.5Hz，2H)，7.78(d，J＝9.0Hz，2H)，7.41(d，J＝8.5Hz，2H)，7.39(s，1H)，7.23(t，J＝8.5Hz，2H)，6.91(d，J＝9.0Hz，2H)，6.68(d，J＝9.0Hz，2H)，3.89(s，3H)，3.08(s，3H).MS(ESI)计算值C25H22FN3O4S479.1，测定值502.1[M+Na]+.HPLC2：tR18.6min，纯度96.9％。
(2-(4-溴苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12la的合成(图11)
Figure BDA00003093994901671
9l，9g的合成：在0℃下向合适的苯甲醛(8l，和8g，100mmol)在乙醇(400mL)中的溶液中加入40％乙二醛(草醛)在水(1.1当量)中的溶液和29％氢氧化铵在水(10当量)中的溶液。在RT下搅拌2-3天之后，将反应混合物浓缩，然后使用二氯甲烷作为洗脱剂将残余物进行快速柱色谱以得到标题化合物的黄色粉末。收率：10％-30％。
10la，10gb的合成：在0℃下向咪唑(9l，9g)(10mmol)在无水THF(200mL)中的溶液中加入氢化钠(在矿物油中60％分散物，1.2当量)，并搅拌20min。加入4-甲氧基苯磺酰氯(对于10gb)或苯磺酰氯(对于其它)(1.2当量)，然后将反应混合物搅拌过夜。用200mL饱和NaHCO3溶液(水性)稀释后，用乙酸乙酯(600mL)萃取反应混合物。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯2∶1)纯化以得到灰色固体。收率：40％-95％。
11la，11gaa的合成：在-78℃下向2-芳基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10la，10gb)(5.0mmol)在无水THF(30mL)中的溶液中加入在戊烷(1.2当量)中的1.7M叔丁锂，并搅拌10min。在-78℃下加入3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯(1.2当量)并搅拌过夜。使用100mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(300mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯3∶1)纯化残余物以得到白色固体。收率：5％-45％。
12la的合成：向芳基(2-芳基-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11la)，2.0mmol)在THF(25.0mL)中的溶液中加入1.0M四丁基氟化铵(2当量)并搅拌过夜。用60mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物并用乙酸乙酯(150mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯4∶1)纯化或者由水和甲醇重结晶以得到白色固体。收率：80-98％。
(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(12cb)的合成(图7)。
Figure BDA00003093994901681
向(4-氟苯基)(2-(4-甲氧基苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)甲酮(11cb，872mg，2.0mmol)在THF(20.0mL)中的溶液中加入1.0M四丁基氟化铵(4.0mL，4.0mmol)并搅拌过夜。用50mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物由水和甲醇重结晶以得到白色固体。收率：90％；mp245-247℃。
(2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12da)的合成(图8)。
Figure BDA00003093994901682
向(1-(苯基磺酰基)-2-(对甲苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11da，492mg，1.0mmol)在THF(15.0mL)中的溶液中加入1.0M四丁基氟化铵(2.0mL，2.0mmol)并搅拌过夜。通过30mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(80mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物由水和甲醇重结晶以得到白色固体。收率：88.5％。
(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12fa)的合成(图8和14)。
Figure BDA00003093994901691
2-(4-氯苯基)-1H-咪唑(9f)：在0℃下向4-氯苯甲醛(8f)(100mmol)在乙醇(350mL)中的溶液中加入40％乙二醛在水(12.8mL，110mmol)中的溶液和29％氢氧化铵在水(1000mmol，140mL)中的溶液。在RT下搅拌2-3天之后，将反应混合物浓缩，然后使用二氯甲烷作为洗脱剂将残余物进行快速柱色谱以得到标题化合物的黄色粉末。收率：19.8％.1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ13.60(br，1H)，7.94(d，J＝8.5Hz，2H)，7.51(d，J＝8.0Hz，2H)，7.27(s，1H)，7.03(s，1H).MS(ESI)：计算值C9H7ClN2，178.0，测定值178.9[M+H]+。
2-(4-氯苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10f)：在0℃下向2-(4-氯苯基)-1H-咪唑(9f)(20mmol)在无水THF(200mL)中的溶液中加入氢化钠(在矿物油中60％分散物，1.2g，30mmol)，然后搅拌30min。加入苯磺酰氯(2.82mL，22mmol)，然后将反应混合物搅拌过夜。用100mL饱和NaHCO3溶液(水性)稀释后，用乙酸乙酯(500mL)萃取反应混合物。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯2∶1)纯化以得到灰色固体。收率：54.9％.1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝2.0Hz，1H)，7.58(t，J＝7.5Hz，1H)，7.43(d，J＝8.5Hz，2H)，7.38(t，J＝8.0Hz，2H)，7.34-7.36(m，4H)，7.12(d，J＝1.5Hz，1H).MS(ESI)：计算值C15H11ClN2O2S，318.0，测定值341.0[M+Na]+。
(2-(4-氯苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11fa)：在-78℃下向2-(4-氯苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑(10f)(6.0mmol)在无水THF(30mL)中的溶液中加入在戊烷(5.3mL，9.0mmol)中1.7M叔丁锂，并搅拌10min。在-78℃下加入3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯(7.2mmol)，然后搅拌过夜。使用100mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(200mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯4∶1)纯化以得到白色固体。收率：36.8％；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.05(d，J＝7.5Hz，2H)，7.77(t，J＝7.5Hz，1H)，7.62(t，J＝8.0Hz，2H)，7.48(s，1H)，7.44(d，J＝9.0Hz，2H)，7.39(d，J＝8.5Hz，2H)，7.37(s，2H).MS(ESI)：计算值C25H21ClN2O6S，512.1，测定值513.1[M+H]+。
(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(12fa)：向(2-(4-氯苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(11fa)(2.0mmol)在THF(20.0mL)中的溶液中加入1.0M四丁基氟化铵(4.0mmol)并搅拌过夜。用50mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯3∶1)纯化或者由水和甲醇重结晶以得到白色固体。收率：80-95％。收率：36.9％；mp193-195℃.1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.75(br，1H)，7.96(d，J＝8.5Hz，2H)，7.83(s，1H)，7.47(d，J＝9.0Hz，2H)，7.23(s，2H)，3.97(s，3H)，3.94(s，6H)，2.43(s，3H).MS(ESI)：计算值C19H17ClN2O4，372.1，测定值395.1[M+Na]+，370.9[M-H]-。HPLC梯度：溶剂A(水)和溶剂B(甲醇)：0-15min40-100％B(线性梯度)，15-25min100％B：tR16.36min，纯度＞99％。
(2-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(12fb)的合成(图8)。
Figure BDA00003093994901711
向(2-(4-氯苯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-4-基)(4-氟苯基)甲酮(11fb，440mg，1.0mmol)在THF(12.0mL)中的溶液中加入1.0M四丁基氟化铵(2.0mL，2.0mmol)并搅拌过夜。通过20mL饱和NaHCO3溶液(水性)来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(60mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物由水和甲醇重结晶以得到白色固体。收率：83.7％。
芳基-苯甲酰基-咪唑化合物和中间体的物理化学鉴定
Figure BDA00003093994901721
Figure BDA00003093994901751
Figure BDA00003093994901761
Figure BDA00003093994901771
Figure BDA00003093994901781
Figure BDA00003093994901791
Figure BDA00003093994901801
Figure BDA00003093994901811
Figure BDA00003093994901821
Figure BDA00003093994901841
Figure BDA00003093994901861
Figure BDA00003093994901871
Figure BDA00003093994901881
Figure BDA00003093994901891
Figure BDA00003093994901901
Figure BDA00003093994901911
Figure BDA00003093994901921
Figure BDA00003093994901931
Figure BDA00003093994901941
Figure BDA00003093994901951
Figure BDA00003093994901961
实施例6
选择的吲哚基-苯甲酰基-咪唑化合物的合成
15xaa的合成列于图12中。该路线初始设计用于合成12xa，但在吲哚-2和咪唑-4位置处苯甲酰化的非选择性导致形成15xaa，其是与11xaa紧密相关但更庞大的类似物。通过在吲哚NH上苯基磺酰基来保护吲哚-5-甲醛8x以得到中间体8xa。使8xa与乙二醛和氢氧化铵反应以生成2-芳基-咪唑9xa。使用苯基磺酰基来保护咪唑NH以得到中间体10xaa，使其与3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯偶联以得到16xaa。由16xaa去除保护基团以得到15xaa。
1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-5-甲醛(8xa)的合成。在室温下向吲哚-3-甲醛(100mmol)在乙醇(500mL)中的溶液中加入氢氧化钾(110当量)，将混合物搅拌直至全部溶解。在真空下将乙醇完全去除，并加入丙酮(250mL)，随后加入苯磺酰氯(110当量)。滤去沉淀，然后将滤液浓缩，并由甲醇重结晶以得到白色固体。收率：32.6％。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.17(s，1H)，8.25-8.39(m，2H)，7.97-8.09(m，3H)，7.69(t，J＝7.33Hz，1H)，7.59(t，J＝7.5Hz，2H)，7.39-7.54(m，2H).MS(ESI)计算值C15H11NO3S285.1，测定值286.0[M+H]+。
(5-(4-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-1H-咪唑-2-基)-1H-吲哚-2-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(15xaa)的合成：向在乙醇(20mL)中(1-(苯基磺酰基)-2-(1-(苯基磺酰基)-2-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(16xaa)(1mmol)的溶液中加入氢氧化钠(10当量)，并在黑暗中搅拌过夜。用50mL的水来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(250mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯3∶1)纯化或者由水和甲醇重结晶以得到白色固体。收率：30-95％。
5-(1H-咪唑-2-基)-1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚(9xa)。收率：12.0％。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.33(d，J＝2.9Hz，2H)，8.13(d，J＝7.8Hz，2H)，7.98-8.04(m，1H)，7.62-7.67(m，1H)，7.55(d，J＝7.82Hz，2H)，7.22-7.34(m，4H).MS(ESI)计算值C17H13N3O2S323.1，测定值324.0[M+H]+。
1-(苯基磺酰基)-5-(1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-2-基)-1H-吲哚(10xaa)。收率：23.6％。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.01(d，J＝8.5Hz，1H)，7.95(d，J＝7.5Hz，2H)，7.73(d，J＝1.0Hz，1H)，7.70(d，J＝4.0Hz，1H)，7.63-7.66(m，2H)，7.52-7.56(m，3H)，7.31-7.34(m，3H)，7.22(t，J＝8.5Hz，2H)，7.17(s，1H)，6.14(d，J＝3.5Hz，1H).MS(ESI)计算值C23H17N3O4S2463.1，测定值464.0[M+H]+。
(1-(苯基磺酰基)-2-(1-(苯基磺酰基)-2-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-1H-吲哚-5-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(16xaa)。收率：15.9％。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.18-8.25(m，3H)，8.04(d，J＝8.1Hz，2H)，7.70-7.78(m，2H)，7.61-7.69(m，3H)，7.55(t，J＝7.7Hz，3H)，7.50(s，1H)，7.38(s，2H)，7.34(s，2H)，6.94(s，1H)，3.99-4.06(m，12H)，3.94-3.99(m，6H).MS(ESI)计算值C43H37N3O12S2851.2，测定值852.1[M+H]+。
(5-(4-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-1H-咪唑-2-基)-1H-吲哚-2-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(15xaa)。收率：45.9％；mp239-241℃。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.45(s，1H)，9.44(s，1H)，8.41(s，1H)，8.04(d，J＝8.5Hz，1H)，7.86(s，1H)，7.61(d，J＝8.5Hz，1H)，7.29(s，2H)，7.26(s，2H)，3.99(s，3H)，3.95-3.97(m，15H).MS(ESI)计算值C31H29N3O8571.2，测定值572.2[M+H]+.PLC2：tR4.09min，纯度96.3％。
实施例7
(2-(1H-吲哚-3-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(17ya)的 合成(图13)
Figure BDA00003093994901991
1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-3-甲醛(8ya)的合成：在RT下向吲哚3-甲醛(8y)(100mmol)在乙醇(500mL)中的溶液中加入氢氧化钾(1.1当量)。将混合物搅拌直至全部溶解。将乙醇在真空下完全去除，然后将残余物溶解在丙酮(250mL)中，随后加入苯磺酰氯(1.1当量，110mmol)。将反应混合物搅拌半小时。滤去固体，然后将滤液浓缩，并由甲醇重结晶以得到白色固体。收率：33％。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.17(s，1H)，8.25-8.39(m，2H)，7.97-8.09(m，3H)，7.69(t，J＝7.33Hz，1H)，7.59(t，J＝7.5Hz，2H)，7.39-7.54(m，2H).MS(ESI)计算值C15H11NO3S285.1，测定值286.0[M+H]+。
3-(1H-咪唑-2-基)-1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚(9ya)的合成：在0℃下向1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-3-甲醛(8ya)(100mmol)在乙醇(400mL)中的溶液中加入40％乙二醛(草醛)在水(1.1当量，110mmol)中的溶液和29％氢氧化铵在水(10当量，1000mmol)中的溶液。在RT下搅拌2-3天之后，用水猝灭反应混合物，并用二氯甲烷萃取。通过真空来去除有机层，然后使用己烷/乙酸乙酯(4∶1-2∶1)作为洗脱剂将残余物进行快速柱色谱以得到标题化合物的黄色粉末。收率：12％.1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.33(d，J＝2.9Hz，2H)，8.13(d，J＝7.8Hz，2H)，7.98-8.04(m，1H)，7.62-7.67(m，1H)，7.55(d，J＝7.82Hz，2H)，7.22-7.34(m，4H).MS(ESI)计算值C17H13N3O2S323.1，测定值324.0[M+H]+。
1-(苯基磺酰基)-3-(1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-2-基)-1H-吲哚(10ya)的合成：在0℃下向3-(1H-咪唑-2-基)-1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚(9ya)(20mmol)在无水THF(300mL)中的溶液中加入氢化钠(在矿物油中60％分散物，1.2当量，24mmol)，然后搅拌20min。将苯磺酰氯(1.2当量，24mmol)加入，然后将反应混合物搅拌过夜。用200mL饱和NaHCO3溶液(水性)稀释后，用乙酸乙酯(600mL)萃取反应混合物。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯5∶1)纯化以得到白色固体。收率：40％。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.02-8.08(m，4H)，7.72(d，J＝1.5Hz，1H)，7.35-7.60(m，8H)，7.23(d，J＝1.5Hz，1H)，7.10-7.16(m，3H).MS(ESI)计算值C23H17N3O4S2463.1，测定值486.0[M+Na]+。
(1-(苯基磺酰基)-2-(1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(17yaa)的合成：在-78℃下向1-(苯基磺酰基)-3-(1-(苯基磺酰基)-1H-咪唑-2-基)-1H-吲哚(10ya)(5.0mmol)在无水THF(100mL)中的溶液中加入在戊烷(1.2当量，6.0mmol)中的1.7M叔丁锂，并搅拌10min。在-78℃下加入在THF中3，4，5-三甲氧基苯甲酰氯(1.2当量，6.0mmol)的溶液并搅拌过夜。使用100mL饱和NaHCO3溶液(水性)猝灭反应混合物，然后用乙酸乙酯(300mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯3∶1)纯化残余物以得到白色固体。收率：30％。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.09(d，J＝10Hz，1H)，8.04(d，J＝10Hz，2H)，7.91(s，1H)，7.76(d，J＝5Hz，2H)，7.65(t，J＝10Hz，1H)，7.55-7.58(m，5H)，7.40(s，2H)，7.33-7.36(m，3H)，7.25(t，J＝10Hz，1H)，4.05(s，3H)，4.03(s，6H).MS(ESI)计算值C33H27N3O8657.0，测定值680.1[M+Na]+。
(2-(1H-吲哚-3-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(17ya)的合成：向在乙醇(40mL)和水(4mL)中(1-(苯基磺酰基)-2-(1-(苯基磺酰基)-1H-吲哚-3-基)-1H-咪唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(17yaa)(1mmol)的溶液中加入氢氧化钠(10当量，10mmol)，然后在黑暗中在回流条件下搅拌过夜。用50mL的水来稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(200mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，并浓缩。将残余物经快速柱色谱(己烷∶乙酸乙酯1∶1)纯化以得到黄色固体。收率：60％。1HNMR(500MHz，CD3OD)δ8.31(d，J＝6.5Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.90(s，1H)，7.48-7.52(m，3H)，7.24-7.28(m，2H)，4.00(s，6H)，3.93(s，3H).MS(ESI)计算值C21H19N3O4377.1，测定值400.1[M+Na]+.Mp208-210℃。
实施例8
(2-(1H-吲哚-5-基氨基)噻唑-4-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮(化合物55) 的合成(图15)。
将5-硝基-1H-吲哚(11g，67.9mmol)和Pd/C(5％；1g)的混合物溶解在乙醇(50mL)中，在40psi下氢化3h。将反应混合物过滤，然后在减压下将过量的乙醇蒸发。将固体产物由己烷重结晶以得到纯化合物5-氨基吲哚(55-1)。收率：92.5％。1H NMR(500MHz，CDCl3)：δ7.96(br，1H)，7.20(d，1H)，7.13(s，1H)，6.95(s，1H)，6.67(dd，1H)，6.37(s，1H)，3.50(s，2H).MS(ESI)m/z133.0(M+H)+。
在RT下使5-氨基吲哚(8g，60.6mmol)在丙酮(150mL)中的溶液与苯甲酰基异硫氰酸酯(9.88g，60.mmol)反应约4h。将所得固体过滤，并使用在THF(120mL)中2N NaOH来处理。将混合物回流约6h，然后将其升温至RT。在真空下蒸除溶剂。使用水(20mL)来稀释残余物，然后使用1N HCl中和至pH7。将所得固体过滤，然后在真空下干燥以得到5-吲哚基硫脲(55-2)。将5-吲哚基硫脲(0.01mol)和溴代丙酮酸乙酯(0.011mol)溶解在3mL乙醇中，并保持回流2h。将反应冷却，通过过滤来收集结晶2-(1H-吲哚-5-基氨基)噻唑-4-羧酸乙酯(55-3)，并使用乙醇洗涤。经回流乙酯与NaOH-乙醇溶液的混合物得到2-(1H-吲哚-5-基氨基)噻唑-4-羧酸(55-4)，将其直接用于下一步中。向粗品酸(2.5mmol)、EDCI(2.9mmol)、HOBt(2.6mmol)和NMM(5.3mmol)在CH2Cl2(30mL)中的混合物中加入HNCH3OCH3盐酸盐(2.6mmol)，然后在RT下连续搅拌过夜。使用CH2Cl2(20mL)来稀释反应混合物，并依次使用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物2-(1H-吲哚-5-基氨基)-N-甲氧基-N-甲基噻唑-4-甲酰胺(55-5)(全部5步骤中45.6％收率)。在-78℃下，在Ar2保护下向5-溴-1，2，3-三甲氧基苯(1.235g，5.0mmol)在30mL THF中的溶液加入在己烷(2.5N，2.4mL，6mmol)中的n-BuLi，并搅拌10min，将在10mL THF中的Weinreb酰胺(1mmol)加入锂试剂，然后在RT下搅拌2h。使用饱和NH4Cl猝灭反应混合物，使用乙醚萃取，经MgSO4干燥。减压去除溶剂以得到粗品，经柱色谱将其纯化以得到纯化合物55(51.7％收率)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.29(br，1H)，7.68(d，1H)，7.46(s，2H)，7.39(s，1H)，7.36(s，1H)，7.28～7.26(m，1H)，7.15～7.12(m，1H)，6.55(m，1H)，3.93(s，3H)，3.89(s，6H).MS(ESI)m/z432.1(M+Na)+，408.0(M-H)-。
实施例9
喹啉-和异喹啉-芳基化合物的合成(图16)。
通过7-溴-1-氯异喹啉与各种芳基硼酸的Suzuki偶联来制备一系列化合物。
1-氯-7-(1H-吲哚-5-基)-异喹啉(6d)的合成(图16C)：
Figure BDA00003093994902021
将7-溴-1-氯异喹啉(0.50g，2.1mmol)、5-吲哚硼酸(0.40g，2.5mmol)、四(三苯基膦)钯(0.035g，0.08mmol)、碳酸钾(2.1mL，2M，4.1mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(11mL)的混合物搅拌，同时使用氩气吹扫顶空30min。然后在将其冷却至RT之前，将混合物回流16h。将混合物通过一层硅胶过滤，使用水(50mL)稀释，然后使用乙酸乙酯(50mL)萃取。分离有机层，然后使用NaOH(2x20mL，10％水溶液)、水(5x30mL，直至在有机-水界面处不再见到折射改变)和氯化铵(20mL，饱和)洗涤。然后将有机层吸附于硅胶上，然后经快速色谱(乙酸乙酯/己烷)得到0.14g(25％)的黄色固体。MS(ESI)：计算值C17H11ClN2，278.1，测定值301.0[M+Na]+.1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ6.56-6.58(m，1H)，7.44(t，J＝2.77Hz，1H)，7.57-7.59(m，2H)，7.93(m，1H)，8.04(s，1H)，8.13-8.20(m，1H)，8.27-8.31(m，2H)，8.43(m，1H)，11.25(brs，1H)。
1，7-双-(1H-吲哚-5-基)-异喹啉(6b)(图16E)：
Figure BDA00003093994902031
将7-溴-1-氯异喹啉(0.20g，2.1mmol)、5-吲哚硼酸(0.80g，5.0mmol)、四(三苯基膦)钯(0.19g，0.16mmol)、碳酸钾(2.1mL，2M，4.1mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(11mL)的混合物搅拌，同时使用氩气吹扫顶空30min。然后在将其冷却至RT之前，将混合物回流16h。将混合物通过一层硅胶过滤，用水(50mL)稀释，并使用乙酸乙酯萃取(50mL)。分离有机层，然后使用NaOH(2x20mL，10％水溶液)、水(5x30mL，直至在有机-水界面处不再见到折射改变)和氯化铵(20mL，饱和)洗涤。然后将有机层吸附于硅胶上，然后经快速色谱(乙酸乙酯/己烷)得到0.29g(39％)的黄色固体。MS(ESI)：计算值C25H17N3，359.1，测定值360.2[M+H]+382.1[M+Na]+，和358.0[M-H]-.1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δ6.46-6.50(m，1H)6.52-6.59(m，1H)7.34-7.36(m，1H)7.36-7.41(m，2H)7.42-7.52(m，3H)7.58(d，J＝8.30Hz，1H)7.81(dd，J＝5.49，5.00Hz，2H)7.92(s，1H)8.08-8.17(m，2H)8.33(s，1H)8.54(d，Ｊ＝5.61Hz，1H)11.18(br.s.，1H)11.30(br.s.，1H)ppm。
1-(4-氟-苯基)-7-(1H-吲哚-5-基)-异喹啉(6c)(图16D)：
Figure BDA00003093994902041
将6d(0.20g，0.72mmol)、4-氟苯基硼酸(0.12g，0.86mmol)、四(三苯基膦)钯(0.033g，0.03mmol)、碳酸钾(0.72mL，2M，1.4mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(22mL)的混合物搅拌，同时使用氩气吹扫顶空30min。然后将混合物回流16h之后将其冷却至RT。将混合物通过一层硅胶过滤，用水(50mL)稀释，并使用乙酸乙酯萃取(50mL)。分离有机层，然后使用NaOH(2x20mL，10％水溶液)、水(5x30mL，直至在有机-水界面处不再见到折射改变)和氯化铵(20mL，饱和)洗涤。然后将有机层吸附于硅胶上，然后经快速色谱(乙酸乙酯/己烷)得到0.038g(16％)的黄色固体。MS(ESI)：计算值C23H15FN2，338.12，测定值339.2[M+H]+和361.2[M+Na]+.1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ6.47-6.55(m，1H)，6.80(d，J＝9.16Hz，2H)，7.38-7.45(m，2H)，7.47-7.62(m，3H)，7.72(d，J＝8.85Hz，2H)，7.79-7.96(m，3H)，11.18(br.s.，1H)。
1，7-双-(4-氟-苯基)-异喹啉(40)(图16A)。
Figure BDA00003093994902042
MS(ESI)：计算值C21H13F2N，317.10，测定值318.1[M+H]+，340.1[M+Na]+，和315.9[M-H]-.1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ7.31(br.s.，1H)7.31-7.37(m，2H)7.39(br.s.，1H)7.41(t，J＝8.54Hz，2H)7.72-7.77(m，2H)7.78-7.84(m，2H)7.89(br.s.，1H)7.90-7.99(m，1H)8.09-8.19(m，3H)8.59(br.s.，1H)8.60-8.65(m，1H)。
7-溴-1-(4-氟-苯磺酰基)-1，2，3，4-四氢-喹啉(43)和1-(4-氟-苯磺酰基)-7-(1H-吲哚-5-基)-1，2，3，4-四氢喹啉(41)的合成。(图16B).
Figure BDA00003093994902051
将7-溴-1，2，3，4-四氢喹啉(0.60g，2.8mmol)与在吡啶(5mL)中的4-氟苯基磺酰氯(1.65g，8.49mmol)在80℃下搅拌3h。将混合物冷却，浓缩，残余物经色谱(在SiO2上EtOAc/己烷)得到845mg化合物43的棕色固体(81％)。C15H13BrFNO2S368.98，测定值394.0[M+Na]+和367.8[M-H]-。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.58-1.67(m，2H)2.41(t，J＝6.71Hz，2H)3.72-3.82(m，2H)6.89(d，J＝8.30Hz，1H)7.08-7.17(m，2H)7.18-7.24(m，1H)7.59-7.68(m，2H)7.92-8.01(m，1H)。
将43(0.46g，1.3mmol)、5-吲哚硼酸(0.26g，1.6mmol)、四(三苯基膦)钯(0.031g，0.03mmol)、碳酸钾(1.35mL，2-M，2.7mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(135mL)搅拌，同时使用氩气吹扫顶空30min。然后将混合物回流16h之后将其冷却至RT。将混合物通过一层硅胶过滤，用水(50mL)稀释，并使用乙酸乙酯萃取(50mL)。分离有机层，然后使用NaOH(2×20mL，10％水溶液)、水(5×30mL，直至在有机-水界面处不再见到折射改变)和氯化铵(20mL，饱和)洗涤。然后将有机层吸附于硅胶上，然后经快速色谱(乙酸乙酯/己烷)得到0.38g(77％)的化合物41白色晶体固体。MS(ESI)：计算值C23H19FN2O2S，406.12，测定值404.9[M-H]-和429.1[M+Na]+。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.56-1.66(m，2H)2.48(t，J＝6.59Hz，2H)3.76-3.86(m，2H)6.46-6.56(m，1H)7.14(m，J＝7.81Hz，1H)7.33-7.37(m，1H)7.38-7.45(m，4H)7.49(m，J＝8.54Hz，1H)7.66-7.74(m，2H)7.74-7.81(m，1H)7.85-7.94(m，1H)11.17(br.s.，1H)。
7-溴-2-(4-氟-苯磺酰基)-1，2，3，4-四氢-异喹啉(42)(图16B)。
Figure BDA00003093994902061
收率23％。C15H13BrFNO2S，369.0，测定值392.0[M+Na]+和367.7[M-H]-.1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ2.75-2.82(m，2H)3.32(t，J＝6.10Hz，2H)4.24(s，2H)7.07(d，J＝8.30Hz，1H)7.29-7.37(m，1H)7.37-7.43(m，1H)7.47(t，J＝8.79Hz，2H)7.87-7.93(m，2H)。
2-(4-氟-苯磺酰基)-7-(1H-吲哚-5-基)-1，2，3，4-四氢-异喹啉(44)。
收率77％。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ2.84-2.91(m，2H)3.35(t，J＝5.98Hz，2H)4.30(s，2H)6.44-6.48(m，1H)7.17(d，J＝7.81Hz，1H)7.32-7.40(m，2H)7.41-7.51(m，3H)7.75-7.79(m，1H)7.89-7.96(m，1H)11.13(br.s.，1H)。
实施例10
芳基-苯甲酰基-咪唑(ABI)化合物的水溶性(图17)
水溶性的测定。为了测定水溶性，将1mg各化合物混悬在1mL水中，然后在室温(RT)下振荡48h。在10,000rpm下将混悬物离心10min，并在0.22μm过滤器上过滤。通过由HP S1100 HPLC仪器(Agilent，Foster ceity，CA)和具有正离子模式的电喷雾/离子阱仪器(Bruker，Fremont，CA)的Bruker ESQUIRE MS检测器组成的LC-MS来测定各化合物的浓度。对于HPLC，使用反相Nova-pak C18柱(150mm×3.9mm，Waters，Milford，MA)。流动相由20∶80v/v水/乙腈组成。对于MASS，分别在382m/z(对于咪唑化合物)和399m/z(对于噻唑化合物)处提取峰。根据以下校准公式由MS峰面积来计算各化合物的浓度：y＝1.3295x+114.24(R2＝1.00)。为了得到由其衍生出公式的标准曲线(图17)，将在乙腈中50、100μL的各100μg/mL、10μg/mL的ABI化合物12ga及其对应的噻唑类似物，以及CA-4(结构参见图19)进样至HPLC内，然后通过质谱分析监控。将各进样量(ng)对比其相对质谱峰面积来绘图以生成图17中的标准曲线。
使用1mL/min流速的80/20甲醇/水流动相和反相柱来比较ABI化合物12ga的HPLC保留时间(1.5min)和其相应的噻唑类似物的保留时间(2.2min)，这表明咪唑衍生物比其相应的噻唑类似物更具亲水性。ABI化合物12ga和其相应的噻唑类似物的计算logP值分别约为2.9和4.4。化合物12ga的水溶性为13μg/mL，或者比其噻唑对应物(72ng/mL)高约200倍。
实施例11
本发明化合物的生物评价：
实施例11A：体外细胞生长抑制.
前列腺癌和黑素瘤的细胞培养和细胞毒性测定。所有细胞系均获自ATCC(美国模式培养物保藏所，Manassas，VA，USA)，而细胞培养供应物购自Cellgro Mediatech(Herndon，VA，USA)。我们检查在四种人前列腺癌细胞系(LNCaP、DU145、PC-3和PPC-1)和两种人黑素瘤细胞系(A375和WM-164)中我们的抗-微管蛋白化合物的抗增殖活性。将人卵巢细胞系OVCAR-8及其过表达P-gp(NCI/ADR-RES)的抗性细胞系用作MDR模型。两卵巢细胞系均购自美国国家癌症研究所(NCI)。所有细胞系经ATCC或NCI测试并认证。将所有前列腺癌和卵巢癌细胞系在补充有10％胎牛血清(FBS)的RPMI1640中培养。
将黑素瘤细胞在补充有5％FBS、1％抗生素/抗霉菌混合物(Sigma-Aldrich，Inc.，St.Louis，MO，USA)和牛胰岛素(5μg/mL；Sigma-Aldrich)的DMEM中培养。在处理96h之后使用磺酰罗丹明B(SRB)测定法来评估抗-微管蛋白化合物的细胞毒性可能性。
在小鼠黑素瘤细胞系B16-F1、人黑素瘤细胞系(A375和WM-164)以及前列腺癌细胞系(DU145、PC-3、LNCaP、PPC-1)中首先评估所有所报道的化合物。在测定中包括作为秋水仙碱位点结合剂的实例的化合物1h和ABT-751(E7010，Abbott Laboratories/Eisai Co Ltd)，其已经进入治疗具有不同癌症的患者的II期临床研究。对细胞生长抑制的IC50值显示于表1、2和3中。
结果：
表1.B环优化化合物的SAR
Figure BDA00003093994902081
表2.羰基连接子优化化合物的SAR
Figure BDA00003093994902082
Figure BDA00003093994902091
*ND＝未测定
表3.具有改善的水溶性的经修饰化合物的抗增殖活性
Figure BDA00003093994902092
*ND＝未测定
替代“B”环分子的SAR。使第一系列靶向噻唑“B”环的替代选择。相应地，检查一系列杂环“B”环。如表1中所示，噻唑的成功替代物是吡啶1c、呋喃1d和噻吩1f。IC50(针对前列腺癌的12nM～35nM)接近噻唑化合物1h。引入苯基(1a)、噁唑啉(35a)和噁唑(36a)维持数百纳摩尔范围的活性。但引入嘧啶(1b，IC50：3.7～8.3μM)，颠倒的2，5-噻唑和3，5-异噁唑(1e和1i，IC50：＞10μM)导致效能的显著丧失。“B”环修饰为哌啶(1g)的饱和环也完全使活性丧失(IC50＞20μM)。
替代连接子的SAR。体外肝代谢稳定性研究揭示：在SMART化合物中介于“B”和“C”环之间的羰基连接子导致短半衰期(5-17min)，这主要是由于羰基还原。为了阻断该酮还原为非活性羟基连接子化合物2b，修饰在第二系列的化合物中羰基连接子(表2)。使用双键(2a、3a和3b)、酰胺(2g、2h)、肟(2e-顺式、反式和2f-顺式、反式)、酰肼(2d-顺式、2d-反式)、丙烯腈(2c-反式、2c-顺式)、氰亚胺(2j)、磺酰基酰胺(4d)、硫醚(4a)、磺酰基和亚硫酰基化合物(4b、4c)来替代羰基连接子。也制备在“B”和“C”环之间没有任何连接子的直接连接化合物2i。在这些连接子修饰物中，与羰基化合物1h相比，仅氰亚胺连接(2j)显示有前景的潜能(20～60nM)，但体外代谢研究显示在人肝微粒体中2j的半衰期小于5min。这表明，尽管阻断酮还原，但它可能引入化合物2j的新代谢倾向。将含有双键、肟和酰肼的化合物的异构体对分离。设计模拟CA-4的结构的化合物3a(图19)，其含有介于两芳香环之间的顺式-C＝C，但可惜的是，在置换C＝O连接子之后，3a和其它异构体对失去活性。一个令人感兴趣的现象是，2e-顺式的顺式异构体(0.1～0.3μM)显示比它的反式异构体2e-反式(＞10μM)高10倍的活性。在人肝微粒体中2e-顺式的半衰期延长至35min，而化合物2d的半衰期可延长至55min。但2d的活性降低(～1μM)也会降低它的效能。
实施例11B：本发明化合物的水溶性
通过联用LC-MS/MS的Multiscreen溶解性滤板(MilliporeCorporate，Billerica，MA)来测定药物的溶解性。简言之，将198μL的磷酸盐缓冲盐水(PBS)缓冲液(pH7.4)装载至96-孔板内，并在RT下轻微振荡1.5h(200-300rpm)，将2μL的10mM测试化合物(在DMSO中)分散并混合(N＝3)。将板在800g下离心5min，并通过如下所述的LC-MS/MS将滤液用于测定其浓度和测试化合物的溶解性。
引入极性和可电离基团至抗-微管蛋白剂内。SMART试剂的一个主要限制是低水溶性。诸如吐温80的表面活性剂用于研究体内SMART表现，因而获得有利的结果。但这些表面活性剂为生物活性，并导致许多副作用。此外，据认为，1h的低水溶性导致低口服生物利用率(3.3％，表4)。在第三系列的化合物中，通过引入类似羟基和吲哚基的极性基团，在未影响效能下成功地增加水溶性。此外，也将类似氨基和烷基氨基的可电离基团引入“A”环对位内。如在图5和表3中所示，与4-OH化合物2l(76-116nM)相比，引入特别是5-吲哚基(66a，7～25nM)的吲哚基至“A”环增加效能。在“A”环对位处氨基甲基-CH2NH2也维持效能(2r，13-80nM)，但p-NHMe(2s)或p-NMe2(2u)使活性消失。如图18中所示，评估水溶性的分析测定显示：吲哚基化合物66a将在PBS中的溶解性由1.1μg/mL(化合物1h)增至3.8μg/mL。将氨基甲基化合物2r转化为盐酸盐，其使溶解性增加35倍以上(＞35μg/mL)。尽管化合物2r显示令人满意的水溶性，但药物代谢动力学研究显示：该化合物具有非常差的生物利用率(F％＝0.2％)。据认为，化合物2r在胃中被电离，因而不能吸收至循环系统内。
实施例11C：药物代谢动力学研究
药物代谢动力学研究。雌性Sprague-Dawley大鼠(n＝3或4；254±4g)购自Harlan Inc.(Indianapolis，IN)。大鼠胸廓颈静脉导管购自Braintree Scientific Inc.(Braintree，MA)。在放入动物设施之后，在任何处理之前使动物在具有12h光照/黑暗循环的温度受控的房间(20-22℃)中适应3天。以2.5mg/kg(在DMSO/PEG300，2/8中)的剂量将化合物1h静脉内(i.v.)施用至颈静脉导管内，而以5mg/kg(在DMSO/PEG300，1/9中)来给药5Ha和5Hc。注射等量的肝素化盐水以替代取出的血液，并在10、20、30min和1、2、4、8、12、24h下通过颈静脉导管来收集血液样本(250μL)。以10mg/kg(在吐温80/DMSO/H2O，2/1/7中)灌胃(p.o.)给予化合物1h、5Ha和5Hc。在30、60、90min、120min、150min、180min、210min、240min和8、12、24h下通过颈静脉导管收集在口服施用之后所有血液样本(250μL)。在收集血液之前准备肝素化注射器和小瓶。通过在8,000g下离心血液样品5min来准备血浆样品。将所有血浆样品立即保存在-80℃下直至分析。
使用含有200nM内标((3，5-二甲氧基苯基)(2-苯基-1H-咪唑-4-基)甲酮)的200μL的乙腈由100μL的血浆中提取分析物。将样品充分混合、离心，并将有机提取物转移至自动进样器以用于LC-MS/MS分析。扫描m/z356→188(化合物1h)、m/z371→203(化合物5Ha)、m/z389→221(化合物5Hc)和m/z309→171(内标)的多反应监测(MRM)模式用于获得最敏感信号。使用非隔室分析来测定药物代谢动力学参数(WinNonlin，Pharsight Corporation，MountainView，CA)。
结果：
表4.体内测试的化合物的药物代谢动力学参数。
Figure BDA00003093994902121
a大鼠数目。b全身清除率。c在静脉内给药之后分布容积。d在静脉内给药之后曲线下面积、相对时间的积分药物浓度以及口服给药之后相对时间的积分药物浓度。e进行静脉内给药之后最大血浆浓度。f口服生物利用率％。
修饰取代的甲氧基苯甲酰基芳基噻唑(SMART)分子以改善口服生物利用率。因为口服生物利用率低，类似紫杉烷和长春碱的许多已有微管蛋白靶向抗癌药物需要静脉内施用。口服生物利用率是涉及许多化学和物理过程的复杂参数，例如溶解性、通透性和代谢稳定性。通过如在5a-d(图6)中介于“A”和“B”环之间插入氨基连接子来改善微管蛋白抑制剂的溶解性，表3证实：NH桥接化合物(5a-c)具有如溶解性增加的1h的类似效能(对于5a和5c分别为15和19μg/mL(图18))，但比ABT-751的活性高20倍以上(表3和图19，对于ABT-751的结构)。
进行大鼠药物代谢动力学研究以研究与化合物1h(表4)相比这些新化合物是否表现出改善的生物利用率。数据明确显示：通过口服途径的5Hc(5c的盐酸盐)表现出如与1h相比增加4.3倍的暴露(AUC)，这表明通过氨基连接子改善的水溶性成功地改善口服生物利用率。此外，通过口服施用的5Ha和5Hc的最大浓度(Cmax)分别为814和1262ng/mL。而1h的Cmax仅为212ng/mL。总之，5Ha和5Hc的生物利用率由1h的3.3％分别增加至11％和21％(表4)。化合物5Hc表现出中等清除率、中等分布容积，以及可接受的口服生物利用率。该数据表明：这些新合成的连接氨基的化合物具有待开发为新类型的口服生物可利用抗微管蛋白剂的效能和PK性能。
实施例11D：通过本发明的化合物抑制体外微管蛋白聚合。
体外微管蛋白聚合测定。将牛脑微管蛋白(0.4mg，＞97％纯)(Cytoskeleton，Denver，CO)与10μM的测试化合物混合，并在pH6.9下在100μL通用微管蛋白缓冲液(80mM PIPES、2.0mM MgCl2、0.5mM EGTA和1mM GTP)中孵育。通过SYNERGY4酶标仪(Bio-Tek Instruments，Winooski，VT)在20min内每1min监控在340nm波长下的吸光度。将分光光度计设置在37℃下以用于微管蛋白聚合。
结果：
通过所有三种设计策略(替代B-环、新型连接子和增溶部分)来研究通过选择的强效化合物1c、2j、66a和5a对微管蛋白聚合的抑制，并将其与1h比较。将牛脑微管蛋白(＞97％纯)与单独的化合物(10μM)孵育以测试它们对微管蛋白聚合的作用(图20a)。在20min孵育之后，如与媒介物相比较，通过1h抑制47％微管蛋白聚合。在20min处1c和2j以不同抑制模式抑制64％的聚合。化合物5a和66a分别提供78％和81％的更好抑制。这些数据表明：这些化合物表现出非常符合其细胞毒性的强抗微管蛋白聚合活性。
图20b和20c中证实化合物5c通过结合秋水仙碱结合位点对微管蛋白聚合的抑制，并与化合物1h比较。
实施例11E：新型抗-微管蛋白化合物克服P-糖蛋白介导的多重 耐药性。
P-糖蛋白(P-gp)体系似乎是多重耐药性(MDR)的主要生理机制，其用作ATP-依赖性药物流出泵，活性去除多种结构不同的细胞毒性化合物。这些化合物的流出增加降低其细胞内累积，因而降低其细胞毒性。因此，不易受耐药性影响的新型化合物可具有高治疗价值和经济价值。除了P-gp之外，临床使用的抗微管蛋白剂具有其它抗性机制，例如已知限制紫杉烷的敏感性的微管动力学改变以及β-微管蛋白的突变。针对卵巢癌细胞系OVCAR-8(亲本)和P-gp过表达NCI/ADR-RES细胞系来测试本发明的抗-微管蛋白化合物(表5A、5B)。
结果：
表5A.针对P-gp过表达的MDR细胞系的选择的化合物的抗增殖活性。
Figure BDA00003093994902151
显然，本发明的抗-微管蛋白化合物证实针对OVCAR-8和NCI/ADR-RES细胞系的等效抗增殖作用，这表明它们不是P-gp底物并且它们以P-gp-非依赖性方式作用。该特征与NCI/ADR-RES细胞中紫杉醇、长春碱和秋水仙碱的特征不同。
表5B.选择的苯基-氨基噻唑化合物的抗增殖活性
Figure BDA00003093994902161
苯基氨基噻唑化合物5a、5Hb、5c和5d证实在大量前列腺癌细胞系中强效活性。出人意料的是，苯基氨基咪唑化合物5e证实在这些前列腺癌细胞系中无活性(在LNCaP、PC-3、DU-145和PPC-1中IC50＞1000nM)。该试验的阳性对照为55和17ya，其证实在相同细胞系中为介于7.5nM和24.1nM之间的IC50值(表5C)。
表5C
Figure BDA00003093994902162
已然发现在多重耐药性肿瘤细胞系中具有可接受口服生物利用率和等效活性的新系列的微管蛋白聚合抑制剂。药物化学努力由优化SMART化合物1h开始。基于针对体外癌细胞的生物评价来研究在“B”环和介于“B”和“C”环之间连接中不同取代的芳基的化学修饰。SAR研究揭示：最佳“B”环包括吡啶(1c)、噻吩(1f)和呋喃(1d)，其维持极好的体外效能。使用氰亚胺(2j)替代介于“B”和“C”环之间的羰基连接子将增加活性。进行增加水溶性和生物利用率的结构修饰。在“A”和“B”环之间引入氨基使我们得到化合物5a-c，其显示针对测试的癌细胞以及MDR(+)和MDR(-)细胞系的类似体外抗增殖效能，而且，溶解性和体内生物利用率与1h的那些相比显著改善。因此，这些新抗-微管蛋白化合物呈现可用于治疗癌症的化合物的新家族。
实施例12
本发明的化合物的抗增殖活性。
通过本发明的方法制备的类似物的抗增殖活性显示于表6和6A中。
Figure BDA00003093994902181
Figure BDA00003093994902191
Figure BDA00003093994902211
Figure BDA00003093994902221
Figure BDA00003093994902241
Figure BDA00003093994902271
Figure BDA00003093994902281
实施例13
本发明的异喹啉衍生物的生物评价
细胞培养
最初由ATCC(Rockville，MD)获得LNCaP、PC-3、DU-145、PPC-1、MES-SA和MES-SA/DX5。将所有获自ATCC的细胞扩增并冰冻，使得每2-3个月可由相同批次细胞的冷冻瓶重新开始所有细胞系。对于体内异种移植物研究，在研究之前四个月内在Research AnimalDiagnostic Laboratory(Columbia，MO)处验证PC-3。通过PCR来测试种间污染，并通过生成基因谱(genetic profile)来验证细胞系的同一性。将MES-SA和MES-SA/DX5保持在含有补充有10％胎牛血清(FBS)的2mML-谷氨酰胺的McCoy′s5A培养基中。将所有其它细胞保持在具有2mML-谷氨酰胺和10％FBS的RPMI-1640培养基中。
生长抑制测定
使用磺酰罗丹明B(SRB)测定法在多种细胞系中研究测试化合物的细胞毒性或抗增殖活性。将培养的细胞放置在96-孔板内并使用含有不同浓度的测试化合物的培养基来孵育96h。使用SRB溶液将细胞染色。在酶标仪(Dynex Technologies，Chantilly，VA)上测定在540nm下的光密度。将细胞生长的抑制％对比药物浓度作图，并使用WinNonlin软件(Pharsight Corporation，Cary，NC)通过非线性最小二乘回归来测定相对于未经处理对照抑制50％细胞生长的浓度(IC50)。
细胞周期分析.
通过碘化丙啶(PI)染色来测定细胞周期分布。使用PBS洗涤经处理的细胞，并使用70％冰冷的乙醇固定过夜。然后在37℃下在RNA酶A(300μg/mL)的存在下使用20μg/mL的PI将经固定的细胞染色。在田纳西大学健康科学中心(University of Tennessee Health ScienceCenter)，TN处荧光激活细胞分选(fluorescence-activated cellsorting)(FACS)分析核心服务来分析细胞周期分布。
体外代谢研究
对于I期，在65mM磷酸钾缓冲液(pH7.4)中孵育混合物均由1mg/mL肝微粒体蛋白、3mM NADPH和0.5μM测试化合物组成。甲醇(用于溶解底物)的浓度为1％(v/v)。孵育的总体积为200μL，将反应混合物在37℃下孵育。为了得到测试化合物的稳定性曲线，在剩余化合物的分析中，在10、20、30、60和90分钟处停止不同孵育。通过加入200μL冰冷的乙腈来停止所有反应。随后，然后将样品在3000g下离心5min，并通过LC-MS/MS来分析上清液。
在小鼠中的药物代谢动力学研究
使用雄性ICR小鼠(5-6周，20-25g)。对于6a、6b和6c，通过i.v.、i.p.和p.o.途径来施用5mg/kg的剂量。通过尾静脉来施用i.v.剂量。通过灌胃来施用口服剂量。在各时间点处，通过异氟烷(BaxterHealthcare，Deerfield，IL)来使三至四只小鼠安乐死，并由后腔静脉来取得血液样品(各只至多600μL)。在分析之前将血浆样品保存在-20℃下。通过将乙腈(150μL，含有内标)加入100μL小鼠血浆来沉淀血浆蛋白。将样品涡旋，然后在8000g下离心10min。将上清液转移至洁净的小瓶以用于进样至质谱仪中进行分析。
体内抗肿瘤功效研究
将PC-3细胞(2.5×106细胞/位置)加基质胶(BD biosciences，SanJose，CA)皮下注射至雌性裸小鼠(nu/nu mice)的两侧。每2-4天使用卡尺来测定肿瘤尺寸，并计算为V＝π/6×(长度)×(宽度)2。当肿瘤达到约100～150mm3的体积时，开始药物处理。使用媒介物(在吐温80中20％Captex200)来处理对照组。在处理期间，每2-4天测定肿瘤尺寸和体重。
白细胞计数
在功效研究结束时由裸小鼠获得全血。为了使用血细胞计数器来计数白细胞(WBC)，使用190μL的2％乙酸来稀释10μL的全血样品。在适当调节光线下，白血球在血细胞计数器上呈现为黑色斑点。在稀释后一小时之内计数各样品中WBC两次，并计算平均值。
结果
表7.在通过P-糖蛋白介导的不同癌细胞系和MDR细胞系中异喹啉化合物的抗癌功效
Figure BDA00003093994902311
注释：在MES-SA/DX5中P-gp过表达。抗性因子(RF)计算为抗性细胞亚系的IC50值与亲本细胞系的IC50值的比值。所有实验均至少重复三次。
                                                
表8.在G2M期抑制PC-3细胞的化合物6a、6b和6c
G2M期抑制EC50(nM)
6a 53.4
6b 91.9
6c 23.3
表9.在小鼠、大鼠、仓鼠、兔、豚鼠、犬、猴和人肝微粒体中6a、6b和6c的半衰期(I期途径)的概述
Figure BDA00003093994902312
Figure BDA00003093994902321
表10.在小鼠中化合物6a、6b和6c的药物代谢动力学性质概述
Figure BDA00003093994902322
在i.p.注射之后在异种移植物模型中测定6b和6c的功效和耐受性(图34)。使用媒介物(qd)、6b(40mg/kg，qd，或6c(40mg/kg，qd)3周来处理PC-3异种移植物。给药媒介物由在吐温80中20％Captex200组成。将肿瘤体积(mm3)对比时间作图，该肿瘤体积是八只动物的平均值±SD。肿瘤体积和存活率或体重显示于图34A中。在3周处理之后测定各裸小鼠的肝尺寸(g)，并显示于图34B中。计数在3周处理之后收集动物的全血中白细胞的数目，并显示于图34C中。
实施例14
选择的本发明的ABI化合物的抗增殖活性 细胞培养细胞毒性测定
材料和方法
研究在三种黑素瘤细胞系(A375和WM-164，人黑素瘤细胞系；B16-F1，小鼠黑素瘤细胞系)和四种人前列腺癌细胞系(LNCaP、DU145、PC-3和PPC-1)中ABI化合物的抗增殖活性。除了PPC-1细胞系之外，所有三种细胞系均购自ATCC(美国模式培养物保藏所，Manassas，VA)。MDA-MB-435和MDA-MB-435/LCCMDR1细胞由乔治敦大学医学院(Georgetown University School of Medicine)，华盛顿特区的Dr.Robert Clarke友情提供。将黑素瘤细胞在DMEM(CellgroMediatech，Inc.，Herndon，VA)中培养，并将前列腺癌细胞在补充有10％FBS(Cellgro Mediatech)的RPMI1640(Cellgro Mediatech，Inc.，Herndon，VA)中培养。将培养物保持在37℃下含有5％CO2的潮湿气氛中。根据生长速率，以一式三至五份将1000至5000个细胞置于96-孔板的各孔内，并暴露于不同浓度的测试化合物48h(快速生长的黑素瘤细胞)或96h(缓慢生长的前列腺癌细胞)。通过磺酰罗丹明B(SRB)测定法来测定药物处理结束时的细胞数目。简言之，使用10％三氯乙酸来固定细胞，然后使用0.4％SRB来染色，并使用平板读取器(DYNEX Technologies，Chantilly，VA)来测定在540nm的吸光度。将细胞存活率％对比浓度作图，并使用GraphPad Prism(GraphPadSoftware，San Diego，CA)的非线性回归分析来获得IC50(抑制未经处理对照50％细胞生长的浓度)值。
结果
使用三种黑素瘤细胞系(一种鼠黑素瘤细胞系：B16-F1和两种人转移性黑素瘤细胞系：A375和WM-164)和四种人前列腺癌细胞系(LNCaP、PC-3、Du145和PPC-1)的本发明的化合物的体外抗增殖活性的结果概述于表11-13中。
Figure BDA00003093994902341
根据表11，化合物12aa-12ai显示具有在μM范围的IC50值(所有七种细胞系的平均值)的中等活性。该系列中最强效化合物为12aa，其具有160nM的平均IC50值。由在C环(12ad，12ae)上3，4，5-三甲氧基中去除一个甲氧基导致活性显著丧失(对于12ae，IC50＞10μM以及对于12ad，3.1μM的平均IC50)。在C环(12af)上具有4-氟的化合物也显示相对良好的活性(IC50＝0.91μM)，该发现具有重要意义，因为使用4-氟基团取代三甲氧基部分可提供良好活性以及改善的代谢稳定性。在C环上氟的位置对于活性是关键的，因为由4-氟迁移至3-氟导致活性完全丧失(与12af的0.91μM相比，12ag的IC50＞10μM)。该结果表明，可能氢键供体存在于接近该环的4-位。
如在表11中所明确表明，A和C环的位置是关键的。在咪唑环(B环)中C-环部分由4位简单迁移至1位导致活性的完全丧失(对于12aba、12aaa、10a、10x、10j，IC50＞10μM)。
Figure BDA00003093994902361
Figure BDA00003093994902371
Figure BDA00003093994902381
根据表12，在C环上具有3，4，5-三甲氧基和4-氟取代的化合物显示与在A环上不同取代的良好活性。这些化合物显示极好的抗增殖活性，其具有对WM164细胞系的低至8.0nM的IC50值(12da)。通常，如由12ca、12cb、12da、12db、12fa、12fb、12ga和12gb的活性(IC50＝7.9-110nM)可见，在A环的对位上并入单个取代基的化合物更加强效。与对应游离碱12db(IC50＝109nM)相比，12db-盐酸盐(IC50＝172nM)显示稍微降低的活性。在A和C环的对位中具有单个卤素取代基的化合物12fb(IC50＝63.7nM)显示强效并且没有甲氧基部分。在A环上具有3，4，5-三甲氧基取代基的化合物完全丧失活性(对于12ea、12eb，IC50＞10μM)，这表明靠近A环和C环处具有非常不同结合环境。由A-环上去除5-甲氧基取代基显著改善活性(对于12ha、12ea，分别为IC50＝330nM和＞10μM)。3，4，5-三甲氧基的脱甲基使活性由43nM(12fa)急剧降低至3.89μM(13fa)。由于在A或C环上取代基的脱甲基化，观察到13ea、12ka、12kb和13ha的类似结果。在A环上给电子基团(4-甲氧基、4-二甲氨基、4-甲基)和吸电子基团(4-氯、2-三氟甲基)未显示活性上的显著差别。在A环的邻位处引入三氟甲基导致活性的完全丧失(对于12ia、12ib，IC50＞10μM)。当与对位羟基化合物12kb(IC50＝33μM)相比，在A环的对位处苄氧基的存在(对于12jb，IC50＝75nM)导致活性440倍增加。值得注意的是，在C环中具有4-氟的化合物12jb具有比在C环中具有3，4，5-三甲氧基的它的对应物12ja更好的活性(对于12jb，IC50是75nM；对于12ja为7.3μM)。
Figure BDA00003093994902401
Figure BDA00003093994902411
根据表13，具有连接咪唑环的氮的苯基磺酰基保护基团的化合物(11cb、11db、11fb、11ga、11gb、11ha、11jb)活性也很高，其具有nM范围的IC50(表13)。通常，如通过比较11cb(43nM)、11db(111nM)、11fb(72nM)、11ga(285nM)、11gb(87nM)、11ha(268nM)和11jb(61nM)与它们对应的未受保护的对应物12cb(36nM)、12db(109nM)、12fb(64nM)、12ga(131nM)、12gb(72nM)、12ha(330nM)和12jb(75nM)的活性所例证，这些化合物与它们相应未受保护的对应物的活性相当。其它化合物(11ab-11ag、11ea、11eb、11hb、11ia和11ib，1-50μM)通常活性较低，这也与它们对应物(12ab-12ag、12ea、12eb、12hb、12ia和12ib，1-50μM)相一致。
实施例15
在耐药性黑素瘤细胞中芳基-苯甲酰基-咪唑(ABI)化合物的活性
P-糖蛋白(Pgp)-介导的药物流出是癌细胞防止有效细胞内抗癌药物浓度累积的主要机制。将ABI化合物的活性与多重耐药性(MDR)黑素瘤细胞(MDA-MB-435/LCCMDR1)及其亲本非抗性癌细胞(MDA-MB-435)进行比较。尽管MDA-MB-435最初称为乳腺癌细胞系，但最后显示它来源于M14黑素瘤细胞系。在MDR黑素瘤细胞系及其亲本黑素瘤细胞系中测定化合物12da、12fb、12cb、11cb和11fb连同其它微管蛋白靶向剂，包括秋水仙碱、紫杉醇和长春碱(表14A)。紫杉醇和长春碱为已知靶向细胞微管蛋白的临床使用的抗癌药物。尽管秋水仙碱不是经FDA批准的癌症治疗药物，但其前药ZD6126在实体瘤的临床研究中。硼替佐米是第一个治疗蛋白酶体抑制剂，于2003经FDA批准用于多发性骨髓瘤。已知ABT-751靶向微管蛋白秋水仙碱结合位点。它是用于小儿复发或难治成神经细胞瘤临床试验的有前景的药物候选物。化合物12da、12fb、12cb、11cb、11fb具有比秋水仙碱(65.8)、紫杉醇(69.3)和长春碱(27.5)好很多的抗性指数(12da为3.0；12fb为0.9；12cb为1.3；11cb为0.8；11fb为0.7)。尽管秋水仙碱、紫杉醇和长春碱显示对非抗性黑素瘤细胞系极好的活性(0.5-10nM)，对这些化合物对MDR黑素瘤细胞系(277-658nM)效能显著更低。相反，12cb、11cb、11fb对MDR(对于12da、12fb、12cb、11cb和11fb分别为15nM、38nM、30nM、30nM、35nM)和非抗性黑素瘤细胞系(对于12da、12fb、12cb、11cb和11fb分别为5nM、41nM、24nM、38nM、50nM)具有基本上等效效能。对于A375和WM-164细胞，化合物12da比紫杉醇和秋水仙碱的活性更高。
表14A.与其它抗癌药物相比，ABI化合物对多重耐药性黑素瘤细胞系(MDR细胞)和匹配敏感母细胞系(正常黑素瘤细胞)的体外生长抑制作用
Figure BDA00003093994902431
*通过将对多重耐药性细胞系MDA-MB-435/LCC6MDR1的IC50值除以对匹配敏感亲本细胞系MDA-MB-435的IC50值来计算抗性指数。缩写：N/A，数值不可用；ND，未测定。
表14B.在具有不同抗性机制的不同癌症和MDR细胞系中ABI的抗癌功效和秋水仙碱位点结合亲和力。ABI显示针对包括高转移性和多重耐药性细胞系的所有测试的黑素瘤细胞系的极好的功效。ABI对在微管蛋白中秋水仙碱结合位点的高结合亲和力证实其在细胞内的靶。
Figure BDA00003093994902441
注释*：亲本细胞系至耐药性细胞亚系；MDR1在MDA-MB-435/LCC6MDR1和NCI/ADR-RES中过表达；MRP1、MRP2和BCRP在HEK293-MRP1、HEK293-MRP2和HEK293-482R2中过表达。抗性指数(括号中数字)通过将对抗性细胞亚系的IC50值除以匹配亲本细胞系的IC50值来计算。+：由[3H]秋水仙碱竞争结合闪炼接近测定法来计算微管蛋白结合的IC50。++：在文献中报道的ABT-751的结合亲和力。缩写：N/A，不适用，因为它们在不同位点结合微管蛋白。
表14A的结果显示：细胞系MDA-MB-435/LCCMDR1非常耐受秋水仙碱、紫杉醇和长春碱。但本发明的ABI对耐药性细胞系和敏感亲本细胞系显示等同效能。该结果有力地表明：ABI不是P-gp的底物。因此，在MDA-MB-435/LCCMDR1细胞中对它们进行多重耐药性测定。对于12fb、12da和12cb，剂量响应曲线显示于图21中。表14B进一步探索如与ABI12cb、12da和12fb相比紫杉醇、SN-38、长春碱和秋水仙碱的抗性机制。MRP和BCRP具有对紫杉醇(抗性指数分别为4和6)、对长春碱(抗性指数分别为6和5)的中等抗性，而BCRP具有对SN-38(抗性指数为41)的显著抗性。然而，没有ABI易受MRP-或BCRP-介导的抗性影响(抗性指数范围为0.4至1.0)。类似于ABI，ABT-751不易受MDR1、MRP，或BCRP的影响。
实施例16
体外微管聚合测定
材料和方法
将牛脑微管蛋白(0.4mg)(Cytoskeleton，Denver，CO)与10μM的测试化合物混合，并在pH6.9下在110μL的通用微管蛋白缓冲液(80mM PIPES、2.0mM MgCl2、0.5mM EGTA和1mM GTP)中孵育。通过SYNERGY4酶标仪(Bio-Tek Instruments，Winooski，VT)在15min内每1min监控在340nm波长下的吸光度。将分光光度计设置在37℃下以用于微管蛋白聚合。
结果
检查通过芳基-苯甲酰基-咪唑(ABI)化合物对管蛋白聚合的抑制。使用10μM浓度的三种强效ABI化合物12cb、12da和12db来孵育牛脑微管蛋白(＞97％纯)，以测定这些ABI化合物对微管蛋白聚合的作用(图22)。通过化合物12da完全抑制微管蛋白聚合，而使用化合物12cb和12db在孵育中观察到～80％抑制。
该微管去稳定作用类似于秋水仙碱和长春碱的作用，但与紫杉醇的作用相反。结果不仅证实ABI可直接与微管蛋白相互作用，也表明它们可与秋水仙碱(或长春碱)共享相同结合位点。
实施例17
黑素瘤体外抑制
材料和方法
将B16-F1黑素瘤细胞置于在以集落形成密度(在六孔板上2000细胞/孔)的0.8％基底琼脂的顶部上。使细胞在37℃下在95％空气和5％CO2的氛围中在0.4％琼脂以及补充有胎牛血清和抗生素-抗霉菌溶液的DMEM培养基中生长。使用不同浓度(20、100和500nM)的化合物12da、12cb和12fb来处理细胞。将化合物加入来自1mMDMSO储液的培养基，并将DMSO的对应稀释物用作对照。使细胞生长14天。对板拍照，并通过Artek880自动集落计数器(AutomatedColony Counter)(Artek Systems Corporation，Farmingdale，NY)来测定集落数目。
结果
四张代表性照片显示于图23中。在孵育14天之后，在对照(未处理)中形成约130个可检测集落(大于100μm的直径)。
即使在最低测试浓度20nM(与对照相比，p＜0.05)下，化合物12cb和12da有效地抑制B16-F1黑素瘤集落形成。在100nM下，12fb显示有效的抑制。在0.5μM下，所有三种测试的化合物显示对集落形成的完全抑制，其进一步证实ABI的抗黑素瘤功效。
实施例18
体内抗肿瘤活性
材料和方法
动物：雌性C57/BL小鼠(4-6周龄)均购自Harlan Laboratories(Harlan Laboratories Inc.，Indianapolis，IN)。动物房符合国际实验动物评估和认可委员会(Association for Assessment and Accreditation andLaboratory Animal Care)规格。依照我们的动物使用与关爱委员会(Institutional Animal Care and Use Committee)的指南来进行所有程序。
体内功效评估。在5x106活细胞/mL的浓度下无FBS的DMEM培养基(Cellgro Mediatech)中制备小鼠黑素瘤B16-F1细胞。将细胞悬液(100μL)皮下注射至各小鼠的右侧背部。当肿瘤尺寸达到约100-150mm3时，在细胞接种之后约7天，基于肿瘤尺寸将所有荷瘤小鼠分成对照和处理组(n＝5/组)。各组具有类似的平均肿瘤尺寸。对照组中小鼠(阴性对照)每日一次腹腔内注射仅50μL媒介物溶液或60mg/kg的DTIC(阳性对照)。使用可追踪电子数字卡尺(Fisher Scientific，Inc.，Pittsburgh，PA)每2天测定肿瘤体积，并使用式a×b2×0.5来计算，其中a和b分别表示较大和较小直径。肿瘤体积表示为立方毫米。各组的数据表示为平均值±SE以及作为时间的函数来作图。使用式100-100×[(T-T0)/(C-C0)]来计算在试验结束(开始处理之后14天)时肿瘤降低％，其中T表示特定天数时处理组的平均肿瘤体积；T0表示在处理第一天时相同组的平均肿瘤体积；C表示在特定天时对照的平均肿瘤体积；C0表示在处理的第一天时相同组的平均肿瘤体积。在全部试验期中监控各组的动物活性和平均体重以评估化合物毒性。在处理结束之后，通过CO2来使所有小鼠安乐死，随后为颈脱位法，然后采取肿瘤以用于进一步研究。
结果
为了评估ABI类似物的体内功效，我们测试化合物12cb对小鼠黑素瘤B16-F1异种移植物的抗肿瘤活性。针对DTIC，在恶性黑素瘤治疗中金标准用作阳性对照(图24A)。将二十只雌性C57/BL小鼠分成四组：媒介物对照组、DTIC(60mg/kg)处理组、12cb(10mg/kg)处理组和12cb(30mg/kg)处理组。各小鼠皮下注射五十万个B16-F1黑素瘤细胞。在肿瘤接种七天之后，使用每日腹腔内注射的各化合物来开始处理(图24)。在14天的处理之后，对于12cb(10mg/kg)、DTIC(60mg/kg)和12cb(30mg/kg)，肿瘤体积分别显著(p＜0.05)降低47％、51％和73％。在处理期间未观察到任何处理组中显著体重降低。
选择12fb的两剂量水平，15和45mg/kg。将60mg/kg的DTIC用作阳性对照。首先选择在C57BL/6小鼠上B16-F1黑素瘤同种异体移植模型以用于研究。在处理13天之后(图24B)，15mg/kg的化合物12fb抑制32％的黑素瘤肿瘤生长(TGI值)，45mg/kg抑制82％。与对照相比45mg/kg的12fb的学生t检验p值小于0.001，这表示显著差异。与对照相比15mg/kg的12fb的t检验p值为0.08，这表明该剂量不是有效的。与60mg/kg的DTIC相比，45mg/kg的12fb具有51％的TGI，t检验p值为约0.001，这表明12fb具有比DTIC基本上更好的活性。对于对照和12fb15mg/kg处理组，在整个试验期间平均体重稍微增加。
为了进一步证实ABI的体内活性，使用SHO小鼠的A375人黑素瘤异种移植物模型，并在25mg/kg测试12fb。同样将60mg/kg的DTIC用作阳性对照。在处理31天之后(图24C)，12fb抑制黑素瘤肿瘤生长(TGI值)69％，而DTIC抑制生长52％。12fb相比对照的t检验p值小于0.001，这表明25mg/kg的12fb显著抑制黑素瘤肿瘤生长。相比DTIC，12fb处理的t检验p值小于0.05，这再次表明12fb具有比DTIC更好的活性。在整个试验周期中所有组的平均体重均稍微增加。小鼠的身体活动看起来也正常，这表明25mg/kg是SHO小鼠良好耐受的剂量。
实施例19
与秋水仙碱的结合
材料和方法
在G-PEM缓冲液(Cytoskeleton Inc.，Denver，CO)中以20×浓度来制备各测试化合物，随后移取10μL测试化合物至96-孔板内。将10微升的氚标记的秋水仙碱(Perkin-Elmer，Waltham，MA)加入各测试孔。随后，将180μL小珠/微管蛋白(GE Healthcare Bio-Sciences Corp.，Piscataway，NJ)混悬物加入各孔内。在通过Topcount NXT平板读取器(Perkin-Elmer，Waltham，MA)读取之前，将板在37℃下孵育45min。因为紫杉醇结合微观蛋白的不同位点并且不会竞争秋水仙碱结合位点，所以将非放射性标记的“冷”秋水仙碱作为阳性对照，并将紫杉醇作为阴性对照。使用GraphPad Prism软件来处理数据。
细胞周期分析
进行流式细胞术分析以研究细胞周期时相分布。将A375细胞在10-cm组织培养皿中培养，直至汇合为约80％，然后在生长培养基中使用0、10、50、200和1000nM的秋水仙碱、12da、12fb和12cb处理细胞24h。使用含有50μg/mL碘化丙啶和100μg/mL RNA酶A的PBS将细胞DNA染色。使用BD LSR-II血细胞计数器(BDBiosciences，San Jose，CA)来测定细胞周期，其记录10,000个细胞。分析数据并使用Modfit2.0程序(Verity Software House，Topsham，ME)来得到图谱。
结果
已经报道了在微管蛋白α/β-异源二聚体中三个配体结合位点：紫杉醇结合位点、长春碱结合位点和秋水仙碱结合位点。使用3H-标记的秋水仙碱和竞争结合闪烁接近测定法(SPA)来测定化合物12cb的亲和力。结果证实12cb的强结合，其具有3.4±1.5μM的结合亲和力(图25A)。在这些条件下秋水仙碱结合微管蛋白，IC50值为1.8±0.5μM。这些结果明确表明ABI化合物有效地抑制微管蛋白聚合。
结合图谱(图25A)明确显示ABI可竞争性结合微管蛋白秋水仙碱结合位点。当三种测试化合物的浓度由0.03μM增加至100μM时，将增加的氚化秋水仙碱由微管蛋白竞争性去除，并由其发出较低SPA计数。阴性对照、紫杉醇仅给出平的线条，这是因为理论上它不应结合微管蛋白上的秋水仙碱结合位点。其次，ABI具有对微管蛋白秋水仙碱结合位点的相对高的结合亲和力。GraphPad Prism计算的对结合的IC50值显示12da具有最高结合亲和力。结合亲和力与体外抗黑素瘤活性正相关；结合亲和力越高，则抗黑素瘤活性越高。
通过细胞周期分析显示，ABI阻滞细胞在G2/M期中，这表明它们靶向微管蛋白。在A375细胞上测试化合物12da、12fb和12cb以及作为阳性对照的秋水仙碱(图25B)。选择各化合物的四种不同浓度-10、50、200和1000nM以显示剂量作用(图25C和25D)。对于没有干扰的对照(未处理)，约16％的A375细胞分布在G2/M期中。对于秋水仙碱处理组，当浓度由10nM增加至50nM时，在G2/M期中分布的细胞百分比由14％增加至85％。对于A375细胞，ABI具有类似结果，以剂量依赖性方式将它们阻滞在G2/M期中。阻滞细胞在G2/M期中不同浓度的效能与体外活性正相关。
实施例20
化合物17ya、12fa和55的体外和体内药理作用
材料和方法
前列腺癌的细胞培养和细胞毒性测定。所有前列腺癌细胞系(LNCaP、PC-3和DU145、PPC-1)获自ATCC(美国模式培养物保藏所，Manassas，VA，USA)。人PC-3_TxR对紫杉醇耐受，并且使用与PC-3比较的MDR模型。细胞培养供应物购自Cellgro Mediatech(Herndon，VA，USA)。所有细胞系用于通过磺酰罗丹明B(SRB)测定法来测试化合物17ya、12fa和55的抗增殖活性。将所有癌细胞系保持在具有2mM谷氨酰胺和10％胎牛血清(FBS)的RPMI1640培养基中。
体外微管聚合测定。将猪脑微管蛋白(0.4mg)(Cytoskeleton，Denver，CO)与1和5μM的测试化合物或媒介物(DMSO)混合，然后将其在100μL的缓冲液(80mM PIPES、2.0mM MgCl2、0.5mM EGTA，pH6.9和1mM GTP)中孵育。在15min内每分钟监控在340nm波长下的吸光度(SYNERGY4酶标仪，Bio-Tek Instruments，Winooski，VT)。将分光光度计保存于37℃下以用于微管蛋白聚合。
代谢孵育。通过在37℃下在振荡的水浴中孵育含有在反应缓冲液[0.2M的磷酸盐缓冲液溶液(pH7.4)、1.3mM NADP+、3.3mM葡萄糖-6-磷酸和0.4U/mL葡萄糖-6-磷酸脱氢酶]中1mg/mL微粒体蛋白的1mL总反应体积的0.5μM的测试化合物来进行代谢稳定性研究。NADPH再生系统(溶液A和B)获自BD Biosciences(Bedford，MA)。对于葡萄苷酸化研究，使用8mM MgCl2、在去离子水中25μg的阿拉霉素(alamethicin)(Sigma，St.Louis，MO)和如之前所述的NADPH再生溶液(BD Biosciences，Bedford，MA)来孵育去离子水中的2mMUDP-葡萄糖醛酸(Sigma，St.Louis，MO)辅因子。在反应溶液中总DMSO浓度为约0.5％(v/v)。在5、10、20、30、60和90min下取样用于测定代谢稳定性的来自反应混合物的等份(100μL)。加入含有200nM内标的乙腈(150μL)以猝灭反应并沉淀蛋白。然后在RT下在4,000g下离心样品30min，然后经LC-MS/MS来直接分析上清液。
分析方法。将样品溶液(10μL)进样至Agilent系列HPLC系统内(Agilent1100系列Agilent1100 Chemstation，Agilent Technology Co，Ltd)。在窄孔C18柱(Alltech Alltima HP，2.1×100mm，3μm，Fisher，FairLawn，NJ)上分离所有分析物。使用两种梯度模式。对于代谢稳定性研究，使用在300μL/min的流速下流动相A[含有0.1％甲酸的ACN/H2O(5％/95％，v/v)]和流动相B[含有0.1％甲酸的ACN/H2O(95％/5％，v/v)]的混合物将梯度模式用于获得分析物的分离。从0至1min使用10％流动相A，随后在4min内通过线性程序化梯度至100％的流动相B，在快速上升至10％流动相A之前，维持100％的流动相B0.5min。用流动相A继续另外10min直至分析结束
使用以电喷雾离子源操作的三重四极杆质谱仪，API Qtrap4000TM(Applied Biosystems/MDS SCIEX，Concord，Ontario，Canada)。正离子模式下将喷雾针电压设置为5kV。气帘气设置在10下；气体1和气体2设置为50。碰撞辅助离解(CAD)气体在介质中，源加热器探针温度为500℃。扫描m/z378→210(17ya)、m/z373→205(12fa)、m/z410→242(55)和m/z309→171(内标)的多反应监测(MRM)模式用于获得最敏感信号。使用AnalystTM软件，版本1.4.1(AppliedBiosystems)来完成数据采集和定量处理。
水溶性。通过联用LC-MS/MS的Multiscreen溶解性滤板(MilliporeCorporate，Billerica，MA)来测定药物的溶解性。简言之，将198μL的磷酸盐缓冲盐水(PBS)缓冲液(pH7.4)装载至96-孔板内，并在RT下轻微振荡1.5h(200-300rpm)，将2μL的10mM测试化合物(在DMSO中)分散并混合(N＝3)。将板在800g下离心10min，并通过如前所述的LC-MS/MS将滤液用于测定其浓度和测试化合物的溶解性。
药物代谢动力学研究。6至8周龄的雄性ICR小鼠(n＝3/组)购自Harlan Inc.，并用于检查17ya、12fa和55的药物代谢动力学(PK)。将所有化合物(10mg/kg)溶解在DMSO/PEG300(1/9)中并通过单次静脉内(i.v.)注射(50μL)来施用至尾静脉内。在i.v.施用之后5、15和30min、1、1.5、2、3、4、8、12和24h下收集血液样品。通过灌胃20mg/kg(在吐温80/DMSO/H2O，2/2/6中)各测试化合物来给予小鼠以评估它们的口服生物利用率。在p.o.施用之后在0.5、1、1.5、2、3、4、8、12和24h下收集血液样品。
雌性Sprague-Dawley大鼠(n＝3；254±4g)购自Harlan Inc.(Indianapolis，IN)。大鼠胸廓颈静脉导管购自Braintree Scientific Inc.(Braintree，MA)。在放入动物设施之后，在任何处理之前使动物在具有12h光照/黑暗循环的温度受控的房间(20-22℃)中适应3天。以5mg/kg(在DMSO/PEG300，1/9中)的剂量将化合物17ya、12fa和55静脉内施用至胸廓颈静脉内。注射等量的肝素化盐水以替代取出的血液，并在10、20、30min和1、2、4、8、12、24h下通过颈静脉导管来收集血液样本(250μL)。以10mg/kg(在吐温80/DMSO/H2O，2/2/6中)的各测试化合物灌胃(p.o.)给予大鼠以评估它们的口服生物利用率。在30、60、90min、120min、150min、180min、210min、240min和8、12、24h下通过颈静脉导管收集在口服施用之后所有血液样本(250μL)。在收集血液之前准备肝素化注射器和小瓶。通过在8,000g下离心血液样品5min来准备血浆样品。将所有血浆样品立即保存在-80℃下直至分析。
使用含有200nM内标的200μL的乙腈由100μL的血浆中提取分析物。将样品充分混合、离心，并将有机提取物转移至自动进样器以用于LC-MS/MS分析。
PC-3_TxR异种移植物研究。在含有10％FBS的RPMI1640生长培养基中制备PC-3_TxR细胞(10×107/mL)，并将其与基质胶(BDBiosciences，San Jose，CA)以1∶1比率混合。通过皮下(s.c.)注射100μL的混合物(5×106细胞/动物)至6-8周龄的雄性无胸腺裸小鼠的侧腹内来形成肿瘤。测定肿瘤的长度和宽度，并通过公式π/6×L×W2来计算肿瘤体积(mm3)，其中长度(L)和宽度(W)以mm来测定。当肿瘤体积达到300mm3时，则使用媒介物[吐温80/DMSO/H2O(2/2/6)]，或17ya(10mg/kg)灌胃处理具有PC-3_TxR肿瘤的动物。给药方案为四周内每周三次。
结果
17ya和55在包括多重耐药性细胞的细胞中表现出广泛细胞毒性。使用SRB测定法(表15)来评估17ya和55抑制癌细胞系生长的能力。两化合物抑制包括五种前列腺和一种神经胶质瘤癌症细胞系的多种人癌症细胞系的生长，其具有低纳摩尔范围的IC50值。在这些细胞系中17ya表现出比55高1.7-4.3倍的效能。过表达P-糖蛋白(P-gp)的紫杉醇抗性PC-3(PC-3/TxR)细胞系用于研究17ya和55的耐药性作用以及用于与其亲本PC-3细胞比较。在PC-3和PC-3/TxR细胞中，多西他赛的IC50值分别为1.2±0.1nM和17.7±0.7nM。17ya和55对亲本PC-3和PC-3/TxR等效，而紫杉醇和多西他赛分别表现出85-和15-倍的相对抗性。这些数据表明17ya和55均防止P-gp-介导的耐药性。
表15.17ya和55的细胞毒性数据
Figure BDA00003093994902541
在96h处理之后测定IC50值(平均值±SD)(N＝3)。将紫杉醇用作阳性对照。括号中的数据表示当比较PC-3和PC-3/TxR的IC50值时的抗性因子。NR，未记录。
17ya和55结合在微管蛋白上的秋水仙碱-结合位点、抑制微管蛋白聚合以及诱导细胞凋亡(图26)。进行竞争性质量结合测定以研究小分子抑制剂与微管蛋白的相互作用。在该研究中，将不同浓度的17ya或55用于竞争秋水仙碱-微管蛋白结合。两化合物有效地与秋水仙碱竞争微管蛋白结合(图26A)；然而，当与已知的强效秋水仙碱位点结合配体鬼臼毒素比较时，在较高浓度下它们的竞争性结合曲线基本上偏离零。这表明17ya和55表现出比鬼臼毒素更低亲和力或者它们部分结合秋水仙碱-结合位点。阴性对照长春碱未抑制秋水仙碱-微管蛋白结合，这成功地证实该竞争性质量结合测定的特异性。
使用猪脑微管蛋白(＞97％纯)来孵育17ya或55(5μM)以测试它们对微管蛋白聚合的作用(图26B)。在15min处17ya和55分别抑制微管蛋白聚合47％和40％。将5μM的秋水仙碱用作阳性对照并且抑制微管蛋白聚合32％。这些数据表明，17ya和55具有比秋水仙碱稍微更高的对微管蛋白聚合的抑制。因此，这些化合物的分子机制是结合秋水仙碱-结合位点；抑制微管蛋白聚合；以及诱导细胞毒性。
将PC-3和PC-3/TxR细胞暴露于0.8至600nmol/L的17ya、55，或多西他赛24h。DNA-组蛋白复合物的水平用于表示细胞凋亡。17ya和55在24h中对在PC-3(图26C)和PC-3/TxR(图26D)中诱导细胞凋亡等效。然而，多西他赛强效诱导PC-3细胞的细胞凋亡，但由于P-gp的过表达，它对PC-3/TxR细胞作用较弱。
17ya和55表现出有利的类药性。检查17ya和55的诸如代谢稳定性、通透性、水溶性和药物-药物相互作用的类药性(表16A)。17ya表现出比55更高代谢稳定性和水溶性。两化学物质表现出足够大的通透性值，这表明它们可以口服使用的潜能。此外，在CYP酶抑制测定中17ya和55显示微摩尔范围的高IC50值，这表明两化合物可避免通过主要CYP肝酶的药物-药物相互作用。总之，两化合物表现出有利的类药性。
表16A.化合物17a和55的类药性。评估代谢稳定性、通透性、溶解性和可能药物-药物相互作用。各值表示为重复研究的平均值。
Figure BDA00003093994902561
如在表16B中所示，17ya通过I期反应具有80min的半衰期，这表明17ya在I期代谢过程中稳定。在UDP-葡萄糖醛酸存在下的半衰期(90min)与其不存在下所观察到的半衰期类似。这些数据表明17ya在人肝微粒体中稳定，并且其有望在人类中获得低清除率和长半衰期。另一方面，当存在和不存在UDP-葡萄糖醛酸时，55分别表现出30和43min的半衰期。化合物12fa在I期中显示具有44的半衰期。这些数据表明，所有三种化合物显示在人肝微粒体中可接受的稳定性，并且17ya比12fa和55更高稳定性。当研究它们的代谢时，观察到12fa和55表现出更高水平的酮-还原(未显示数据)，这表明12fa和55比17ya更加不稳定。
化合物17ya表现出更高水溶性，12fa和55显示可接受的溶解性。
化合物17ya含有咪唑环，并且该环改善水溶性，这导致＞75μg/mL水溶性(表16A)。化合物12fa和55表现出更差水溶性，并分别具有12和19μg/mL。总之，17ya显示高水溶性，而12fa和55显示可接受的水溶性，并且改善远超过1h。12fa的较大溶解性转化为相比1h的极大改善的口服生物利用率(在大鼠中35％比3.3％)。对于17ya和55，类似地，水溶性与如下讨论的极大改善的口服生物利用率相关(表17)。
在小鼠、大鼠和犬中17ya和55的药物代谢动力学研究。在ICR小鼠、Sprague-Dawley大鼠和比格犬中单次(i.v.或p.o.)给药的17ya和55的药物代谢动力学参数概述在表17中。17ya表现出在小鼠和大鼠中低清除率，这表明17ya在这些种属中具有代谢稳定性和最低首过代谢。此外，17ya在小鼠和大鼠中具有中等分布容积，这表明它可适当分布至包括肿瘤的组织内。令人惊讶的是，不同于小鼠和大鼠，在犬中17ya的总清除率高。在犬血浆中两种大量代谢物(氢化代谢物和具有亲本的+34m/z的未知代谢物(未显示数据))与在犬肝微粒体中那些测定值相一致。总之，与55相比，17ya在犬中获得较高清除率和较低口服暴露，但在小鼠和大鼠中并非如此。此外，17ya仅在犬肝微粒体中具有大量代谢物，而在小鼠、大鼠，或人肝微粒体中没有(未显示数据)。17ya在大鼠、小鼠和犬中分别显示可接受的21％、36％和50％口服生物利用率。同时，55在大鼠中具有低清除率，在小鼠和犬中具有中等清除率。与17ya类似，55在这些种属中具有中等分布容积。55在三个种属中具有恒定口服生物利用率(24％-36％)。这些性质表明17ya和55均为潜在可口服利用的微管蛋白抑制剂。
表17.化合物17ya和55在小鼠、大鼠和犬中的药物代谢动力学研究。
17ya和55抑制紫杉醇抗性前列腺(PC-3/TxR)异种移植物生长。将PC-3(图27A)和紫杉醇-抗性前列腺癌(PC-3/TxR)(图27B)细胞接种在裸小鼠中，并使肿瘤体积达到约150-300mm3。将临床用于前列腺癌的多西他赛(10或20mg/kg)用于体内评估它在P-gp-介导的耐药性的模型中的作用。测定到PC-3/TxR肿瘤快速生长以及在研究终止时体积达到1500-2500mm3。虽然10和20mg/kg静脉内施用的多西他赛表现出在两模型中剂量响应(图27A和27B)，但当以10mg/kg静脉内给药时，肿瘤生长抑制(TGI)作用由在PC-3肿瘤中84％TGI降低至在PC-3/TxR肿瘤中14％TGI(表18)。此外，在较高剂量(20mg/kg)下，多西他赛引起PC-3肿瘤的部分退化(＞100％TGI)，但在PC-3/TxR肿瘤中仅56％TGI。当与在PC-3肿瘤中作用比较时，多西他赛在PC-3/TxR肿瘤中的作用显著降低，这表明通过P-gp-介导的耐药性降低功效，并且这些结果与我们体外细胞毒性或细胞凋亡数据相当一致。与多西他赛在PC-3/TxR肿瘤中没有功效相反，口服施用的17ya(6.7mg/kg)显示超过100％TGI，而对它们的体重没有作用(图27B和表18)。此外，每4只具有PC-3/TxR肿瘤的裸小鼠中有2只在第19天没有肿瘤(未显示数据)。
进一步利用PC-3/TxR异种移植物模型来评估17ya(在其它给药方案中)和55的功效。当四天内每次一次口服给药时，测定的17ya的最大耐受剂量(体重降低＞20％)为10mg/kg；或者五天内每日两次(b.i.d.)给药时为3.3mg/kg(未显示数据)。如在图27C中所示，在第一周第一个连续四天内每日两次给药3.3mg/kg的17ya，然后将方案改变为在第2至4周内每日一次。结果显示：在4-19天中获得部分退化，而TGI为97％，并且在第26天时七分之一的小鼠没有肿瘤。17ya的较低给药频率(q2d)的较高剂量(10mg/kg)(图27D)引起在第13至29天的部分退化。这些数据表明，具有最佳剂量和给药方案的方案将有利于17ya成功地抑制PC-3/TxR肿瘤。在第1至4周之间每周五次将55以10或30mg/kg b.i.d.向裸小鼠口服施用。如在图27C中所示，抑制曲线表现出在PC-3/TxR肿瘤中的剂量响应。对于具有较低剂量(10mg/kg)的处理组，TGI值为59％。而且，较高剂量(30mg/kg)在第19天至研究终止(第26天)开始显示部分退化(＞100％TGI)。部分由于癌症恶病质，在媒介物组中一些小鼠在结束时降低体重。相反，使用17ya(3.3mg/kg)或55(30mg/kg)处理的小鼠增重(表18)，这表明17ya或55的最佳剂量可得到较好耐受以及预防癌症恶病质。
表18.化合物17ya和55对比伴随评价的多西他赛的体内抗肿瘤活性。
Figure BDA00003093994902621
给药方案：qd×5/w＝每周连续五天给药一次；b.i.d.×5/w＝每周连续五天给药两次；或者q2d×3/w＝每隔一天施用或者一周三次。
a给药方案为第一周连续四天给药两次，并在第二至四周将给药方案改变(因为毒性)为每周连续五天给药一次。
在裸小鼠中17ya和55的脑渗透。测定在口服施用20mg/kg17ya或55之后在1h和4h处在裸小鼠中全脑浓度(表19)。测定和比较在裸小鼠中多西他赛的脑与血浆浓度的比率。55表现出比17ya和多西他赛的更高脑渗透。17ya仅在1和4h处表现出比多西他赛稍微更高的脑/血浆浓度比率。在1h和4h处55的脑浓度分别达到14至19％的血浆浓度，这显示与多西他赛相比在1h和4h处高3.2倍的脑/血浆比率。这些数据表明，55表现出治疗神经胶质瘤的潜在更有利性能，这是由于它具有在神经胶质瘤细胞中更高脑渗透和更高效能(22nM，表15)。
表19.化合物17ya和55的血脑屏障(BBB)研究。在施用多西他赛(IP，10mpk)、17ya(PO，20mpk)和55(PO，20mpk)之后测定在1和4h处在裸小鼠中脑和血浆浓度。各值均由3只裸小鼠的平均值±SD表示。
Figure BDA00003093994902631
实施例21
本发明的化合物的药物代谢动力学
表20.
Figure BDA00003093994902632
Figure BDA00003093994902641
实施例22
4-取代的甲氧基苯甲酰基-芳基噻唑(SMART)化合物1h、2k和2l的 生物活性：活性微管抑制剂
材料和方法
体外微管聚合测定。将牛脑微管蛋白(0.4mg)(Cytoskeleton，Denver，CO)与10μM的测试化合物或媒介物(DMSO)混合，并在100μl的缓冲液(80mM PIPES、2.0mM MgCl2、0.5mM EGTA，pH6.9和1mM GTP)中孵育。在15min内每分钟监控在340nm波长下的吸光度(SYNERGY4酶标仪，Bio-Tek Instruments，Winooski，VT)。将分光光度计保存在37℃下以用于微管蛋白聚合。
MS竞争结合测定。在37℃下将秋水仙碱、长春碱和紫杉醇(各1.2μM)与微管蛋白(1.2mg/mL)在孵育缓冲液(80mM PIPES、2.0mMMgCl2、0.5mM EGTA，pH6.9)中孵育1hr。分别检查1h(0.5-125μM)与秋水仙碱-、长春碱-和紫杉醇-竞争结合微管蛋白。使用30k Da的分子截断尺寸的超滤方法(微型浓缩器)(Microcon，Bedford，MA)来由微管蛋白或微管分离游离形式的配体。通过LCMS/MS方法来测定秋水仙碱、长春碱和紫杉醇。1h抑制配体结合的能力表示为在没有任何竞争剂下对照结合的百分比。各反应一式三份进行。
前列腺和黑素瘤癌症的细胞培养和细胞毒性测定。所有前列腺和黑素瘤细胞系均获自ATCC(美国模式培养物保藏所，Manassas，VA，USA)，而细胞培养供应物购自Cellgro Mediatech(Herndon，VA，USA)。检查在四种人前列腺癌细胞系(LNCaP、DU145、PC-3和PPC-1)和两种人黑素瘤细胞系(A375和WM-164)中化合物的抗增殖活性。将人卵巢细胞系OVCAR-8及其过表达P-gp的抗性细胞系NCI/ADR-RES用作MDR模型。两卵巢细胞系均获自美国国家癌症研究所(NCI)。使用10％胎牛血清(FBS)来培养所有前列腺癌细胞系。
细胞周期分析.进行流式细胞术以研究化合物对细胞周期分布的作用。将PC-3和A375细胞在具有指定浓度的化合物1h、2k、2l的生长培养基中处理24h。使用在PBS中100μg/mL碘化丙啶和100μg/mL RNA酶A将细胞DNA染色，并进行流式细胞术以测定细胞的细胞周期分布。
通过ELISA的细胞凋亡检测。按照生产商说明书将在细胞质中单和寡核小体的富集量化用于测定化合物诱导细胞凋亡的能力(细胞死亡检测ELISA PLUS，Roche，Germany)。
药物代谢动力学研究。由Harlan Inc.购买6至8周龄的雄性ICR小鼠(n＝3或4/组)，并将其用于检测化合物的药物代谢动力学(PK)。将1h、2k、2l(15mg/kg)溶解在PEG300/DMSO(1/4)中，并通过单次静脉注射来施用至尾静脉内。在施用之后2、5、15和30min、1、2、4、8、16和24hr收集血液样品。雄性Sprague-Dawley大鼠(n＝4；
Figure BDA00003093994902651
Figure BDA00003093994902652
)购自Harlan Inc.(Indianapolis，IN)。将1h、2k以2.5mg/kg(在DMSO/PEG300，1/4中)静脉内施用至颈静脉导管内。收集在10、20、30min和1、2、4、8、12、24、48h时的血液样品(250μL)。将蛋白沉淀方法用于样品制备。将等份(200μL)的乙腈(ACN)加入100μL的血浆，然后彻底形成涡旋15s。在离心之后，通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)来分析上清液。使用非隔室分析来测定PK参数(WinNonlin，Pharsight Corporation，Mountain View，CA)。
PC-3和A375肿瘤异种移植物研究。在含有10％FBS的无酚红的生长培养基中制备PC-3和A375细胞(5×107/mL)，并与基质胶(BDBiosciences，San Jose，CA)以1∶1比率混合。通过皮下(s.c.)注射100μL的混合物(2.5×106细胞/动物)至6-8周龄雄性无胸腺裸小鼠的侧腹来形成肿瘤。测定肿瘤的长度和宽度，并通过公式
Figure BDA00003093994902653
来计算肿瘤体积(mm3)，其中长度(L)和宽度(W)以mm来测定。当肿瘤体积达到150mm3时，使用媒介物[Captex200/吐温80(1/4)]、1h(5和15mg/kg)、2k(5和15mg/kg)和2l(50mg/kg)腹腔内处理具有PC-3肿瘤的动物21天。将长春碱(0.5mg/kg)用作阳性对照，并使用媒介物[DMSO/PEG300(1/9)]q2d给药。另一方面，使用媒介物[Captex200/吐温80(1/4)]、1h(20mg/kg)或2k(15mg/kg)来处理具有A375肿瘤的小鼠34天。基于在ICR小鼠(n＝2/组)中1h和2k的急性毒性研究来选择剂量，其显示在腹腔内给药至多30mg/kg和15mg/kg的剂量连续4天之后均未导致大于10％的体重减轻。
体内抗肿瘤活性[肿瘤生长抑制(T/C％)、肿瘤生长延缓(T-C值)和肿瘤细胞杀伤(总对数细胞杀伤)]。通过以下参数来描述药物作用的证据：
Figure BDA00003093994902661
T-C值(肿瘤生长延缓)基于对照(T)和对照组(C)肿瘤达到预计尺寸(在该研究中为600mm3)所需的中值时间(以天计)。然后将这些值按照以下公式用于量化肿瘤细胞杀伤：
Figure BDA00003093994902662
Figure BDA00003093994902663
Td是以天计的肿瘤体积倍增时间。在该研究中，我们定义的倍增时间为肿瘤由300增加至600mm3所需的时间。
旋转试验。使ICR小鼠在两天内接受每天三次的训练以使它们能够在12rpm的旋转杆上停留＞120秒。然后通过它们可在旋转杆上停留的时间长度将小鼠随机分成7-8只小鼠/组。通过腹腔内注射来施用在Captex200/吐温80(1/4)中5或15mg/kg剂量的1h。在相同条件下将0.5mg/kg/天的剂量的长春碱用作阳性对照。每周两次进行旋转试验。在第31天停止处理，并在终止处理之后在第1、2和4周进行处理后观察。在5min的时间段内杆速由59rpm增加至40rpm。按小鼠可在旋转杆上停留的时间长度来测定性能。
体内耐药性研究。在PC-3异种移植物研究结束时，将来自对照和1h处理(15mg/kg)组的实体瘤移除，并使用0.1％胶原酶(I型)和50mg/mL DNA酶(Worthington Biochemical Corp.，Freehold，NJ)来消化。将分散的细胞接种在RPMI培养基+10％FBS中，然后在37℃和5％CO2下孵育24hr以使其附着。比较1h的抗增殖作用以测定在PC-3异种移植物中剩余的肿瘤细胞是否保留对药物的敏感性。将获自ATCC的PC-3细胞用作体外对照。使用简单t检验来进行统计分析。
结果
基于结构-活性关系研究，选择三种化合物(图28A)用于生物学鉴定。尽管1h和2k为具有低纳摩尔细胞毒性的高效能分子，但2l(其通常被认为是具有改善的溶解性的可能代谢物)具有最低效能抗增殖作用(表21)。
表21.化合物对前列腺、黑素瘤和耐药性细胞系的体外功效(n＝3，平均值±SE)。将紫杉醇、长春碱和秋水仙碱用作之前所报道的阳性对照。
在表21中SMART-H是1h；在表21中SMART-F是2k；在表21中SMART-OH是2l。
SMART通过结合在微管蛋白上的秋水仙碱结合位点来抑制微管聚合
使用牛脑微管蛋白(＞97％纯)来孵育单独的化合物(10μM)以测试它们对微管蛋白聚合(图28B)的作用。尽管1h和2k抑制微管蛋白聚合90％，但2l仅抑制聚合55％。之前研究证实通过1h对微管蛋白聚合的浓度依赖性抑制。此外，在相同试验条件下，1h的IC50(4.23μM)类似于秋水仙碱的IC50(4.91μM)。这些数据表明，化合物表现出与它们的细胞毒性对应较好的强抗微管蛋白聚合活性(表21)。使用在我们实验室开发的新型MS竞争结合测定法来测定化合物竞争在微管蛋白上的已知结合位点的能力。将对应在微管蛋白上的三个结合位点的三种微管蛋白配体：秋水仙碱、长春碱和紫杉醇用于这些竞争结合研究。据测定，在0.1-125μM的浓度范围内，1h特异性竞争结合微管蛋白的秋水仙碱，但它不竞争结合微管蛋白的长春碱或紫杉醇(图28C)。
SMART化合物抑制多重耐药性癌症细胞系的生长。
使用SRB测定法来评估化合物抑制癌细胞系生长的能力。如表21中所示，化合物抑制包括四种前列腺癌细胞系和两种黑素瘤细胞系的多种人癌症细胞系的生长，其具有低纳摩尔范围的IC50值。在三种化合物中，2l是最低效的(IC5076～116nM)。2k表现出在前列腺癌和黑素瘤细胞系中最好抗增殖作用，其具有介于6和43nM之间的IC50值。此外，也评估在OVCAR-8和NCI/ADR-RES细胞系中化合物的作用(表21)。化合物针对MDR细胞(NCI-ADR-RES)和母细胞系(OVCAR-8)等效。紫杉醇、长春碱和秋水仙碱分别表现出1333、149和65倍的相对抗性值(表21)。这些数据表明化合物阻止P-gp-介导的耐药性。
SMART化合物阻滞在细胞周期的G2/M期中PC-3(前列腺)和A375(黑素瘤)细胞并诱导细胞凋亡。将PC-3和A375细胞暴露于10、50、200和1000nM的化合物24h。使用SMART化合物处理导致在G2/M期中PC-3和A375细胞的浓度依赖性积累，伴随在G0/G1期中细胞百分比的降低(图29A和29B)。当使用50至200nM的1h、2k、2l处理时，在G2/M期中细胞的比例显著增加。然后在24h处理之后通过测定在PC-3和A375细胞中细胞质DNA-组蛋白复合物的水平来检查细胞凋亡。SMART化合物的增加的浓度增加了在PC-3和A375细胞中细胞质DNA-组蛋白复合物的水平(图29C)。在A375细胞中作用比在PC-3细胞中更加显著，但在两细胞类型中细胞凋亡均明显。在50nM的浓度下1h和2k诱导中等细胞凋亡，但2l仅在大于或等于200nM的浓度下诱导细胞凋亡。
SMART化合物的体内PK性能。通过尾静脉注射向ICR小鼠施用各化合物(15mg/kg)的单剂量弹丸以鉴定它们的药物代谢动力学(图30A)。1h和2k表现出类似PK性质，但2l表现出比1h和2k略高的AUC，2l的特征在于较低清除率(表22)。2l也具有比1h和2k高2-3倍的Vss。所有三种化合物的清除率值等于或高于90mL/min/kg(在小鼠中的肝血流速)，这表明除了肝去除之外，在化合物的消除中可涵盖其它代谢途径。在大鼠中也检查1h和2k(2.5mg/kg)的药物代谢动力学(图30B)。令人感兴趣的是，通过两化合物获得低清除率值和肝提取速率，这表明这些化合物表现出清除率上种属差异性。在大鼠中，当静脉内施用时1h表现出有利的药物代谢动力学性质，其为低清除率(6mL/min/kg)、中等分布容积(7.6L/kg)、长半衰期(24hr)，以及高暴露(AUC，5.8hr*μg/mL)(表22)。
表22.SMART化合物的药物代谢动力学参数。在小鼠和大鼠中分别静脉内施用15mg/kg和2.5mg/kg的SMART。
Figure BDA00003093994902701
NA、不可用
在表22中SMART-H是1h；在表22中SMART-F是2k；在表22中SMART-OH是2l。
SMART化合物抑制前列腺和黑素瘤异种移植物生长，而没有神经毒性。使在小鼠中前列腺癌PC-3和黑素瘤A375肿瘤达到150mm3的体积，然后使用SMART化合物来处理荷瘤小鼠。如在图31A中所示，在21天研究持续期内在对照组中肿瘤体积增加至680mm3。在1h处理组中到第21天肿瘤体积增加至370mm3(5mg/kg处理)和176mm3(15mg/kg处理)，这表明该化合物的强抗肿瘤活性。在2k-处理的动物中肿瘤增加至269mm3(5mg/kg处理)和292mm3(15mg/kg处理)，而在2l(50mg/kg)处理组中在第21天时动物具有331mm3的肿瘤。一旦停用SMART化合物，则肿瘤体积的该降低逆转(未显示数据)。表23概述SMART化合物的体内功效(T/C％、T-C值和对数细胞杀伤)。
表23.SMART化合物(i.p.施用)对前列腺(PC-3)、黑素瘤(A375)的体内功效。概述T/C％、T-C值和对数细胞杀伤。黑素瘤异种移植物的倍增时间为4.6d。将长春碱用作阳性对照。国家癌症研究所(National Cancer Institute)标准T/C％≤42％被认为中等活化。NA，不可用。
Figure BDA00003093994902711
在表23中SMART-H是1h；在表23中SMART-F是2k；在表23中SMART-OH是2l。
在5和15mg/kg处理(所有给药均为腹腔内(i.p.))下1h肿瘤分别引起T/C％＝29％和4％，而在5和15mg/kg处理下2k分别引起21％和24％的T/C％。2l的高剂量(50mg/kg)表现出34％的T/C％。长春碱、阳性对照显示在第22天处在PC-3异种移植物中29％的T/C％(图31B)。用于监控毒性的体重测量值表明：仅八分之一的经1h(15mg/kg)处理的小鼠和七分之二的经2k(15mg/kg)处理的小鼠减少多于15％的体重。除了化合物对PC-3前列腺肿瘤的抗肿瘤作用之外，1h(20mg/kg)和2k(15mg/kg)证实显著降低A375肿瘤。如在图31C中所示，对照组的肿瘤体积增加至2183mm3，而在1h和2k处理组中14体积分别增加至775mm3和722mm3。1h和2k处理分别引起28％和29％的T/C％。进行旋转试验以检测1h的体内神经毒性作用。基于体内功效试验的结果，选择5或15mg/kg[i.p.施用，Captex200/吐温80(1/4)]的1h以研究对运动协调的作用。将在相同条件下使用0.5mg/kg长春碱处理用作阳性对照。如图31D中所示，长春碱逐渐降低小鼠在旋转杆上可停留的时间(以秒计)，并在第27和31天得到与媒介物组相比的显著性(p＜0.05)。然而，在1h处理组中未观察到显著差异，这表明在与抗肿瘤作用相关的剂量下1h未导致在ICR小鼠中的神经毒性。
1h未在具有PC-3肿瘤的小鼠中形成耐药性。在使用媒介物(n＝3)或15mg/kg1h(n＝3)处理21天之后，我们由裸小鼠中切除PC-3肿瘤。如切片方法中所述来消化实体瘤，并分散至细胞内。将来自ATCC(美国模式培养物保藏所，Manassas，VA，USA)的PC-3细胞系用作对照。在来自ATCC的PC-3细胞中，IC50值为29.1±1.1、29.1±0.8和30.4±0.5nM，并分别由媒介物和1h处理肿瘤中离解细胞。这些数据证实：在21天连续1h处理之后，1h不会诱导在PC-3肿瘤中的耐药性。
实施例23
分子模型
方法
使用在Dell Linux工作站上运行的
Figure BDA00003093994902721
MolecularModeling Suite 2008(
Figure BDA00003093994902722
LLC，New York，NY)来进行所有分子模型研究。因为ABI化合物的尺寸更加接近ABT-751、而不是DAMA-秋水仙碱的尺寸，所有我们选择具有ABT-751(PDB编码：3KHC)的微管蛋白复合物作为我们模型体系。使用Ligprep模块来构建和准备ABI，并使用
Figure BDA00003093994902723
Suite中的Glide模块将它们对接至ABT-751位置内。将最好对接的复合物进行限制性分子动力学研究以使用具有OPLS-2005力场的Macromodel模块来释放任何应力。使在15
Figure BDA00003093994902731
内配体及其周围残基可自由移动，而在15
Figure BDA00003093994902732
半径之外的残基保持刚性。
结果
研究在微管蛋白中结合ABI化合物的分子模型。可在PDB数据库中获得配体-微管蛋白复合物的多种晶体结构，其中最近一篇来自Dorleans等。通常，秋水仙碱结合袋(binding pocket)耐受各种分子结构，其可指示配体结合之后大量构象改变。实际上，Dorleans等解析了空微管蛋白二聚体和配体-微管蛋白复合物的晶体结构。他们观察到，在没有配体存在下，在β-单体中环7(T7，残基244-251，图32)折叠以占据结合袋，但当配体结合之后它会翻转出来。一旦配体结合，则相关的螺旋体7(H7，残基224-243)和螺旋体8(H8，残基252-260)被移位。可以想象到，T7移位的程度取决于单独的配体尺寸。该柔性导致在未解析实际晶体结构时很难理解单独配体的精确结合方式。然而，对可能结合方式的仔细分析可提供结合至不同配体内的一些见解。
12cb和11cb(条形模型)的结合方式显示于图32A和32B中。为进行比较，展示图32A中ABT-751和DAMA-秋水仙碱(线型模型)的晶体结构复合物以及ABI-12cb/微管蛋白复合物。为清楚起见，仅在图32A中显示形成在β-微管蛋白中结合袋的相关二级结构。12cb、ABT-751和DAMA-秋水仙碱的全部结构在结合袋中重叠很好。识别出在化合物12cb和微管蛋白之间多种可能氢键合相互作用。在12cb中羰基足够接近以形成与H8中的Leu-252的主链NH和微管蛋白β-单体的T7中的Asp-251的侧链的两个氢键相互作用。在C-环中对位氟取代基接近在T7中Cys241和在S6中Tyr202的侧链，其可能形成一个或两个氢键。咪唑质子非常接近微管蛋白α-单体的T5环(残基173-182)中的Thr179，并可能形成氢键(图32A)。连同芳香环所提供的疏水性相互作用，这些可能形成的氢键有助于与微管蛋白二聚体的高结合亲和力，从而导致高抗增殖效能。
可设想到，11cb的结合方式更不明确，因为三个芳香环中两个可占据β-单体中的结合袋，而第三环可向α/β-单体的界面延伸，这类似于DAMA-秋水仙碱的侧链结合方式。我们的模型显示，保护基团可能延伸至微管蛋白二聚体界面，而11cb的A、C环占据如12cb的类似结合袋和方向(图32B)。这可解释在两种化合物之间的类似活性，尽管11cb具有额外的环状系统。由图32A和32B所示分子模型研究，氢键供体可能是在α/β-微管蛋白二聚体中β-亚单位的环7中Cys-241的硫醇基团。
建模ABI12fb的结合方式(未显示)，并与α/β-微管蛋白异源二聚体中的DAMA-秋水仙碱(秋水仙碱的结构参见图19)比较。12fb和DAMA-秋水仙碱的全部结构重叠很好。对氟苯基部分与三甲氧基苯基部分重叠，该三甲氧基苯基部分与在β-亚单位中T7环相互作用。类似地，对氯苯基部分占据袋的另一侧，其中DAMA-秋水仙碱的七元环具有占据袋(在袋中甲氧基部分相互作用)的氯原子。
实施例24
微管显像
材料和方法
将Cellomics Cytoskeleton重排试剂盒(Thermo Scientific，Rockford，IL)用于得到与细胞内微管蛋白相互作用的ABI的视觉可感知证据。使用胶原涂覆的96-孔板(Becton Dickinson Labware，Bedford，MA)以一式两份将各化合物处理WM-164黑素瘤细胞18h。然后用4％低聚甲醛(Thermo Scientific，Rockford，IL)固定细胞并使用来自试剂盒的透化缓冲液供应物来透化。随后将微管蛋白的一抗和荧光标记的二抗加入细胞。通过DAPI将细胞核染色。也将全细胞染绿(WholeCell Stain Green)施加至所有细胞。使用具有微管蛋白(红色)、核(蓝色)和全细胞(绿色)的单独显像重叠的Olympus IX71倒置荧光显微镜(Olympus Corp.，Tokyo，Japan)来获得所有显像。为进行比较，将紫杉醇、秋水仙碱和ABT-751以及ABI包括在内。
结果
检查在细胞内与微管蛋白相互作用的ABI的视觉证据。在使用不同化合物处理之后在人黑素瘤WM-164细胞中微管排布展示在图33中。微管显像清晰显示：所有五种测试的化合物均导致细胞骨架重排。在紫杉醇和其它四种化合物(秋水仙碱、ABT-751、12cb和12da)之间有显著差别。使用紫杉醇处理导致与对照相比有序位于核周围的微管聚集，这与它稳定微管的作用机制一致。相反，使用秋水仙碱、ABT-751、12cb和12da处理具有对微管的类似作用，因而导致一定程度的微管分裂，这与其常见的使微管不稳定的作用机制一致。这些结果也证实：ABI共享与秋水仙碱相同的细胞靶，并诱导相同的细胞作用。
实施例25
化合物17ya和55的血管阻断活性
方法
细胞。将HUVEC(人脐静脉内皮细胞)在EGM-2BulletKit(Lonza，目录号CC-3162)中培养和生长，其含有包括氢化可的松、具有肝素的碱性人成纤维细胞生长因子(hFGF-B)、血管内皮生长因子(VEGF)、R3-胰岛素样生长因子1(IGF-1)、抗坏血酸、肝素、胎牛血清、人表皮生长因子(hEGF)和内皮细胞基础培养基-2中的GA-1000(庆大霉素和两性霉素B)的生长补充物。将第三和第五通道之间的细胞用于实验。将PC-3人前列腺癌细胞和T47D人乳腺癌细胞在具有5％胎牛血清的RPMI-1640培养基中培养。
细胞生长抑制研究。使用磺酰罗丹明B(SRB)测定法来研究在多种细胞系中测试化合物的细胞毒性或抗增殖活性。将培养的细胞放置在96-孔板内，并将其孵育在含有不同浓度的测试化合物的培养基中24h或48h。使用磺酰罗丹明B(SRB)溶液将细胞染色。在酶标仪(Dynex Technologies，Chantilly，VA)上测定在540nm下的光密度。将细胞生长的抑制％对比药物浓度作图，并使用WinNonlin软件(Pharsight Corporation，Cary，NC)通过非线性最小二乘回归来测定相对于媒介物对照抑制细胞生长50％的浓度(IC50)。
毛细管形成和破坏测定。通过在基质胶层(BD Biosciences)上接种12,000细胞/孔的HUVEC来在96-孔板中进行毛细管形成测定。为了评估抗-毛细管作用，在加入测试化合物或媒介物对照之前，在16h时间段内使形成毛细管。此外，在形成毛细管之前，通过使用测试化合物处理HUVEC细胞来研究测试化合物的毛细管形成抑制作用。在加入化合物之后、暴露于测试化合物5、10、15和25h之后立即获得显像。通过计数具有至少三边的管和结点的数目来量化毛细管形成。
内皮单层通透性测定。在细胞小室(transwell)体系中评估内皮细胞单层的通透性。以在EGM-2培养基中24孔板的2×106细胞/插入接种HUVEC，并将其孵育72h以达到100％汇合。将测试化合物稀释在EGM-2培养基中，然后加入装置的上室。在孵育1、2和4h之后，将化合物移除并将75μg/mL FITC-共轭的葡聚糖(MW40,000)加入5分钟。在485nm下激发之后进行下室的荧光测定，并使用BioTekSynergy4酶标仪来在520nm下测定发射。
结果
17ya和55表现出针对内皮细胞的高抗增殖活性。评估17ya和55针对加有生长因子的内皮细胞和不加生长因子的内皮细胞培养物的细胞毒性活性。将考布他汀A-4(CA4)和多柔比星分别用作阳性和阴性对照。对于活性增殖内皮细胞，化合物17ya表现出比化合物55更高的效能(表24和图35)。17ya和55均表现出对内皮细胞的选择性，其显示与前列腺癌细胞之一相比更低的IC50值。CA4、17ya和55对内皮细胞比对癌细胞的活性分别高8、5和3倍，而多柔比星对内皮细胞是非特异的(表24和图35)。然而，使用这些化合物在静止和活跃内皮细胞之间并未观察到选择性(未显示数据)。
表24.17ya和55的内皮细胞生长抑制。N＝3
Figure BDA00003093994902771
*为了获得在癌细胞和HUVEC细胞之间的选择比，使用在PC3和T47D细胞中测试化合物的平均IC50(nM)值。
17ya破坏内皮毛细管形成，但未破坏预成型的毛细管。研究17ya对在毛细管形成中占用的内皮细胞的体外活性。将内皮细胞置于基质胶基质上，并观察在存在或不存在化合物(CA4、多柔比星和17ya)下毛细管的形成和构建。
为了避免在管形成的早期阶段和管构建的破坏之间混淆，将在药物处理下在基质上HUVEC细胞孵育15h。然后通过计数在各处理组中管和结点的数目来测定毛细管破坏。另一方面，为了评估测试化合物在预成型的毛细管中作用，使在基质上HUVEC细胞形成毛细管16h，并使用测试化合物来处理毛细管。
结果，由于缺乏营养或者通过HUVEC细胞消耗掉，管和结点的数目逐渐减少(图36)。在各药物处理组均观察到该趋势(图36)。为了检查在未经处理和预先处理的毛细管之间的差别，比较15h孵育组(图36)。
暴露于接种在基质胶基质上各种浓度的17ya(0至50μM)的内皮细胞导致以剂量依赖方式抑制管形成。与媒介物对照相比，在细胞生长抑制研究中具有5nM的近似IC50值的17ya抑制超过50％的管形成(图37)。在10nM下17ya完全抑制管形成(图37)。然而，在预成型的毛细管中，到15h时10nM 17ya处理组不会破坏毛细管结构(图36)。这些结果表明：17ya显著抑制内皮毛细管形成，但对破坏预成型的毛细管效果较差。在CA4处理组中观察到类似结果(图37)。然而，在毒性浓度下多柔比星不会影响毛细管构建。
17ya和55增加内皮细胞单层的通透性。抗微管蛋白剂通过靶向内皮细胞的细胞骨架可改变作为血管衬膜的内皮细胞的完整性。因此，已知抗微管蛋白剂的血管破坏作用增加血管的通透性，因而可导致蛋白渗漏以及高血粘度。这可导致血流量减少，从而导致由于缺氧和营养耗竭的随后肿瘤死亡。
使用汇合HUVEC单层的细胞小室体系的体外研究来评估17ya和55对血管通透性的作用。在1、2和4h的药物处理之后通过葡聚糖(MW40,000)的渗漏来测定通过测试化合物对通透性的改变。将CA4用作阳性对照。CA4、17ya和55导致通透性增加，并且在1h孵育下作用更加显著(未显示数据)。17ya显示类似CA4的效能(图38)。多柔比星不会诱导内皮细胞单层的通透性的任何改变(图38)。
可将本文所述的所有特征(包括任何所附权利要求、摘要和附图)和/或所公开的任何方法或程序的所有步骤联合在任意组合中上述任意方面，其中至少一些这类特征和/或步骤相互排除的组合除外。尽管在本文中详细示出和描述优选的实施方案，但对相关领域技术人员来说，显然在未违背本发明的精神下可进行各种修改、添加、替代等，并因而将其认定为在如所附权利要求中所限定的本发明的范围内。

Claims (36)

1.一种由式XI的结构表示的化合物：
Figure FDA00003093994800011
其中
X是键、NH或S；
Q是O、NH或S；并且
A是取代或未取代的单环、稠环或多环、芳香或（杂）环环状系统；取代或未取代的、饱和或不饱和的N-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的S-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的O-杂环；取代或未取代的、饱和或不饱和的环烃；或者取代或未取代的或饱和或不饱和的混合的杂环；
其中所述A环被独立地为以下的1-5个取代基任选取代：O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；并且
i是介于0-5之间的整数；
其中如果Q是S，则X不是键。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物由式VIII的结构表示：
R4、R5和R6独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
Q是S、O或NH；
i是介于0-5之间的整数；并且
n是介于1-3之间的整数。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物由式XI(b)的结构表示：
Figure FDA00003093994800031
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物由式XI(c)的结构表示：
Figure FDA00003093994800032
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中所述化合物是通过以下结构表示的化合物55：
Figure FDA00003093994800041
6.根据权利要求2所述的化合物，其中所述化合物是(2-(苯基氨基)噻唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(5a)、(2-(对甲苯基氨基)噻唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(5b)、(2-(对氟苯基氨基)噻唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(5c)、(2-(4-氯苯基氨基)噻唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(5d)，或者(2-(苯基氨基)-1H-咪唑-4-基)(3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(5e)。
7.根据权利要求1所述的化合物或其同分异构体、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物，或其组合。
8.一种药物组合物，其包含根据权利要求7所述的化合物和药学上可接受的载体。
9.一种治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、抑制癌症的方法，其包括在有效地治疗癌症的条件下向患有癌症的受试者施用根据权利要求1所述的化合物。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述癌症选自前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌、黑素瘤、肺癌、结肠癌、白血病、肾癌、CNS癌症及其组合。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述癌症是黑素瘤癌症。
12.根据权利要求10所述的方法，其中所述癌症是转移性黑素瘤。
13.根据权利要求10所述的方法，其中所述癌症是前列腺癌。
14.根据权利要求10所述的方法，其中所述癌症是卵巢癌。
15.根据权利要求10所述的方法，其中联合另一癌症疗法来进行所述施用。
16.一种治疗一种或多种耐药性肿瘤的方法，其包括在有效地治疗所述一种或多种耐药性肿瘤的条件下向罹患癌症的受试者施用根据权利要求1所述的化合物。
17.根据权利要求15所述的方法，其中所述肿瘤是黑素瘤癌症肿瘤。
18.根据权利要求15所述的方法，其中所述肿瘤是转移性黑素瘤肿瘤。
19.根据权利要求16所述的方法，其中所述肿瘤是前列腺癌肿瘤。
20.根据权利要求16所述的方法，其中所述肿瘤是卵巢癌肿瘤。
21.根据16所述的方法，其中联合另一癌症疗法来进行所述施用。
22.一种破坏癌细胞的方法，其包括在有效地杀死所述癌细胞的条件下提供根据权利要求1所述的化合物并使所述癌细胞接触所述化合物。
23.一种由式XI(e)的结构表示的化合物：
Figure FDA00003093994800061
其中R4和R5独立地为氢、O-烷基、O-卤代烷基、F、Cl、Br、I、卤代烷基、CF3、CN、-CH2CN、NH2、羟基、-(CH2)iNHCH3、-(CH2)iNH2、-(CH2)iN(CH3)2、-OC(O)CF3、C1-C5直链或支链烷基、卤代烷基、烷基氨基、氨基烷基、-OCH2Ph、-NHCO-烷基、COOH、-C(O)Ph、C(O)O-烷基、C(O)H、-C(O)NH2或NO2；
i是0-5的整数；并且
n是介于1-4之间的整数。
24.根据权利要求23所述的化合物，其中所述化合物是通过以下结构表示的化合物17ya：
Figure FDA00003093994800071
25.根据权利要求23所述的化合物或其同分异构体、药学上可接受的盐、药物产品、互变异构体、水合物、N-氧化物，或其组合。
26.一种药物组合物，其包含根据权利要求25所述的化合物和药学上可接受的载体。
27.一种治疗、遏制、降低严重程度、降低风险、抑制癌症的方法，其包括在有效地治疗癌症的条件下向患有癌症的受试者施用根据权利要求23所述的化合物。
28.根据权利要求27所述的方法，其中所述癌症选自前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌、黑素瘤、肺癌、结肠癌、白血病、肾癌、CNS癌症及其组合。
29.根据权利要求27所述的方法，其中联合另一癌症疗法来进行所述施用。
30.一种治疗一种或多种耐药性肿瘤的方法，其包括在有效地治疗所述一种或多种耐药性肿瘤的条件下向罹患癌症的受试者施用根据权利要求23所述的化合物。
31.根据权利要求30所述的方法，其中所述肿瘤是黑素瘤癌症肿瘤。
32.根据权利要求30所述的方法，其中所述肿瘤是转移性黑素瘤肿瘤。
33.根据权利要求30所述的方法，其中所述肿瘤是前列腺癌肿瘤。
34.根据权利要求30所述的方法，其中所述肿瘤是卵巢癌肿瘤。
35.根据30所述的方法，其中联合另一癌症疗法来进行所述施用。
36.一种破坏癌细胞的方法，其包括在有效地杀死所述癌细胞的条件下提供根据权利要求23所述的化合物并使所述癌细胞接触所述化合物。
CN201180051231.XA 2010-08-24 2011-08-24 治疗癌症的化合物 Active CN103442566B (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US37667510P 2010-08-24 2010-08-24
US61/376,675 2010-08-24
PCT/US2010/062418 WO2011109059A1 (en) 2010-03-01 2010-12-29 Compounds for treatment of cancer
USPCT/US2010/062418 2010-12-29
PCT/US2011/048980 WO2012027481A1 (en) 2010-08-24 2011-08-24 Compounds for treatment of cancer

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103442566A true CN103442566A (zh) 2013-12-11
CN103442566B CN103442566B (zh) 2015-12-09

Family

ID=45723794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201180051231.XA Active CN103442566B (zh) 2010-08-24 2011-08-24 治疗癌症的化合物

Country Status (11)

Country Link
EP (1) EP2608671B1 (zh)
JP (2) JP5997156B2 (zh)
KR (1) KR101806255B1 (zh)
CN (1) CN103442566B (zh)
AU (1) AU2011293353B2 (zh)
CA (2) CA3030689C (zh)
ES (1) ES2718637T3 (zh)
IL (1) IL224863B (zh)
MX (1) MX336761B (zh)
RU (2) RU2609018C2 (zh)
WO (1) WO2012027481A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111253336A (zh) * 2014-05-06 2020-06-09 Gtx公司 治疗癌症的化合物
CN119409641A (zh) * 2024-11-05 2025-02-11 杭州电子科技大学 一种磺酰基衍生物和用途

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9447049B2 (en) 2010-03-01 2016-09-20 University Of Tennessee Research Foundation Compounds for treatment of cancer
US11084811B2 (en) 2010-03-01 2021-08-10 Oncternal Therapeutics, Inc. Compounds for treatment of cancer
RU2609018C2 (ru) * 2010-08-24 2017-01-30 Джи Ти Икс, ИНК. Соединения для лечения рака
WO2016077648A1 (en) * 2014-11-11 2016-05-19 Neymeyer Calvin E Method of treating pre-cancerous lesion with glyphosate, and compositions thereof
JP2018531924A (ja) 2015-09-24 2018-11-01 ファイザー・インク テトラヒドロピラノ［３，４−ｄ］［１，３］オキサジン誘導体、およびｂａｃｅ阻害剤としてのその使用
WO2019188456A1 (ja) * 2018-03-26 2019-10-03 学校法人 川崎学園 新規抗腫瘍剤
WO2019222392A1 (en) * 2018-05-15 2019-11-21 University Of Tennessee Research Foundation Compounds for treatment of pancreatic cancer
KR20210020022A (ko) 2018-05-15 2021-02-23 유니버시티 오브 테네시 리서치 파운데이션 삼중 음성 유방암 및 난소암 치료용 화합물

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003016338A1 (en) * 2001-08-15 2003-02-27 Parker Hughes Institute Crystal structure of the btk kinase domain
US6706717B2 (en) * 2000-12-21 2004-03-16 Bristol-Myers Squibb Company Thiazolyl inhibitors of Tec family tyrosine kinases
US20090326020A1 (en) * 2008-06-16 2009-12-31 University Of Tennessee Research Foundation Compounds for treatment of cancer
CN102883607A (zh) * 2010-03-01 2013-01-16 Gtx公司 用于治疗癌的化合物

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2276276A1 (en) * 1997-11-06 1999-05-20 Pharmaceutical Research Center Cancer treatment drug
US6818663B2 (en) * 2002-05-17 2004-11-16 Hoffmann-La Roches Diaminothiazoles
CN102335163A (zh) * 2005-07-18 2012-02-01 彼帕科学公司 癌症的治疗
US20090246291A1 (en) * 2008-03-27 2009-10-01 Angelika Burger Method and compositions for treatment of cancer
RU2609018C2 (ru) * 2010-08-24 2017-01-30 Джи Ти Икс, ИНК. Соединения для лечения рака

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6706717B2 (en) * 2000-12-21 2004-03-16 Bristol-Myers Squibb Company Thiazolyl inhibitors of Tec family tyrosine kinases
WO2003016338A1 (en) * 2001-08-15 2003-02-27 Parker Hughes Institute Crystal structure of the btk kinase domain
US20090326020A1 (en) * 2008-06-16 2009-12-31 University Of Tennessee Research Foundation Compounds for treatment of cancer
CN102883607A (zh) * 2010-03-01 2013-01-16 Gtx公司 用于治疗癌的化合物

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111253336A (zh) * 2014-05-06 2020-06-09 Gtx公司 治疗癌症的化合物
CN111253336B (zh) * 2014-05-06 2023-11-21 Gtx公司 治疗癌症的化合物
CN119409641A (zh) * 2024-11-05 2025-02-11 杭州电子科技大学 一种磺酰基衍生物和用途

Also Published As

Publication number Publication date
EP2608671B1 (en) 2018-12-12
MX2013002155A (es) 2013-08-01
CA2809256C (en) 2019-03-05
AU2011293353A1 (en) 2013-03-14
JP5997156B2 (ja) 2016-09-28
KR101806255B1 (ko) 2017-12-07
JP2017008091A (ja) 2017-01-12
KR20130119912A (ko) 2013-11-01
RU2013112871A (ru) 2014-09-27
CA3030689C (en) 2021-03-02
RU2609018C2 (ru) 2017-01-30
MX336761B (es) 2016-01-29
WO2012027481A9 (en) 2013-10-10
RU2762111C1 (ru) 2021-12-15
JP2013538213A (ja) 2013-10-10
AU2011293353B2 (en) 2015-02-26
IL224863B (en) 2019-02-28
CA3030689A1 (en) 2012-03-01
CN103442566B (zh) 2015-12-09
CA2809256A1 (en) 2012-03-01
WO2012027481A1 (en) 2012-03-01
ES2718637T3 (es) 2019-07-03
EP2608671A1 (en) 2013-07-03
EP2608671A4 (en) 2013-08-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102883607B (zh) 用于治疗癌的化合物
CN103442566B (zh) 治疗癌症的化合物
US11465987B2 (en) Compounds for treatment of cancer
US8822513B2 (en) Compounds for treatment of cancer
US12187720B2 (en) Compounds for treatment of cancer
AU2015227531A1 (en) Compounds for treatment of cancer
AU2015202828B2 (en) Compounds for treatment of cancer
HK1229689A1 (zh) 用於治療癌症的化合物
HK1180965B (zh) 用於治療癌的化合物
HK1180965A (zh) 用於治療癌的化合物
HK1228297A1 (zh) 用於治療癌症的化合物

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant