CN103439159B - 一种梨果实石细胞木质素组织分布的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种梨果实石细胞木质素组织分布检测方法，先用盐酸浸泡处理梨果实切片，S-木质素组织分布的检测用1％-2%的KMnO4溶液染色，染色后氨水封片；G/S-木质素组织分布的检测用％间苯三酚溶液染色，染色后盐酸封片；本发明先用盐酸浸泡处理梨果实切片，使梨果实切片的石细胞通透性增加，有利于染色剂对木质素单体着色。由于梨石细胞中G,S型木质素相互交联沉积在石细胞壁纤维素上，不易被区别开来，但是先用盐酸处理后，增加了梨果实切片石细胞的通透性，从而使木质素单体更容易着色，利用不同的染色技术能够很好的区别开总木质素与S-木质素单体的分布状况。
Description
技术领域
本发明涉及木质素检测方法，尤其是一种通过对不同类型木质素单体染色，分析梨果实石细胞木质素不同单体分布的方法。
背景技术
木质素一般分为紫丁香基木质素(S-木质素)、愈创木基木质素(G-木质素)和对羟基苯基木质素(H-木质素)。一般裸子植物为G-木质素；被子植物为GS-木质素；禾本植物为GSH-木质素。而梨属于被子植物。木质素在梨果实薄壁细胞的细胞壁上沉积引起细胞壁发生次生加厚形成石细胞。梨果实果肉中石细胞木质素的分布以及不同木质素单体的分布都对梨果实品质产生影响。因此，需要有一种准确、简便、快速的方法来检测梨果实果肉中的木质素及不同木质素单体的分布。
目前梨果实果肉石细胞木质素分布的分析方法主要是采用吴少华等方法切片观察，该方法很难从整体上观察梨果实果肉中石细胞木质素整体的分布，由于梨果实中不同类型木质素相互交联在一起，也不能将梨果实石细胞中不同类型的木质素单体区分开来。本发明通过分析梨果实石细胞木质素的特性和其在梨果实中分布的特性，以及不同木质素单体结构的差异性，选择了一种可以快速、准确的检测梨果肉中石细胞木质素的分布，同时可以很好的区分开来不同类型木质素在果实中分布的方法。
发明内容
本发明为了避免现有技术存在的不足之处，提供一种梨果实石细胞木质素组织分布及不同类型木质素单体组织分布的检测方法，通过分析梨果实中的木质素的分布以及不同类型木质素单体分布的差别，来辅助筛选石细胞、木质素含量低的高品质酥梨品种。
本发明解决技术问题采用如下方案：
一种梨果实石细胞木质素组织分布检测方法，其特征在于，按如下步骤进行：
(1)S-木质素组织分布的检测：将待测梨果实切片在2mol/L-2.5mol/L的盐酸中浸泡5min，蒸馏水冲洗3次，然后用质量分数1％-2%的KMnO4溶液染色3min-5min，染色后用2mol/L-2.5mol/LHCl里浸泡1min，蒸馏水清洗3次，蒸馏水清洗后用体积浓度25％氨水封片；
(2)G/S-木质素组织分布的检测：将待测梨果实切片在2mol/L-2.5mol/L的盐酸中浸泡5min-7min，然后用体积分数2％间苯三酚溶液染色3min-5min，然后用6.5mol/L-7.5mol/LHCl封片。
所述切片是指果实的横切片，即横切方向与果实上下方向相垂直。
与已有技术相比，本发明有益效果体现在：
本发明通过染色法检测梨果实中石细胞木质素分布，通过木质素的分布来辅助筛选石细胞含量少的高品质酥梨品种。
本发明先用盐酸浸泡处理梨果实切片，使梨果实切片的石细胞通透性增加，有利于染色剂对木质素单体着色。从而解决了以前梨石细胞不易着色的问题。由于梨石细胞中G,S型木质素相互交联沉积在石细胞壁纤维素上，不易被区别开来，但是先用盐酸处理后，增加了梨果实切片石细胞的通透性，从而使木质素单体更容易着色，利用不同的染色技术能够很好的区别开总木质素与S-木质素单体的分布状况。
附图说明
图1是实施例1按本发明方法获得的总木质素染色效果及木质素分布图。
图2是实施例1对照试验方法获得总木质素染色效果及木质素分布图。
图3是实施例2按本发明方法获得的S木质素染色效果及木质素分布图。
以下结合附图通过具体实施方式对本发明技术方案做进一步解释说明。
具体实施方式
以下实施例中所使用的试剂有：2.2mol/L和7mol/L盐酸，1.5%KMnO4溶液，25％氨水，2％间苯三酚溶液（无水乙醇配制）。
实施例1G/S-木质素（总木质素）组织分布的检测
(1)将待测梨果实切片在2-2.5mol/L的盐酸中浸泡5-7min，然后用体积分数2％间苯三酚溶液染色3-5min，然后用6.5-7.5mol/LHCl封片，染色后结果如图1所示。
(2)对照方法：梨果实切片先用2％间苯三酚(无水乙醇配制)溶液染色3.5min，然后在6.5-7.5mol/LHCl封片，染色结果如图2所示。
实施例2S-木质素组织分布的检测
(1)将待测梨果实切片在2-2.5mol/L的盐酸中浸泡5min，蒸馏水冲洗3次，然后用质量分数1-2％的KMnO4溶液染色3-5min，2-2.5mol/LHCl里浸泡1min，蒸馏水清洗3次，蒸馏水清洗后用体积浓度25％氨水封片，染色结果如图3所示。
Claims (1)
1.一种梨果实石细胞木质素组织分布检测方法，其特征在于，按如下步骤进行：
(1)S-木质素组织分布的检测：将待测梨果实切片在2mol/L-2.5mol/L的盐酸中浸泡5min，增加梨果实切片石细胞的通透性，然后蒸馏水冲洗3次，然后用质量分数1％-2％的KMnO4溶液染色3min-5min，染色后用2mol/L-2.5mol/LHCl里浸泡lmin，蒸馏水清洗3次，蒸馏水清洗后用体积浓度25％氨水封片；
(2)G/S-木质素组织分布的检测：将待测梨果实切片在2mol/L-2.5mol/L的盐酸中浸泡5min-7min，增加梨果实切片石细胞的通透性，然后用体积分数2％间苯三酚溶液染色3min-5min，然后用6.5mol/L-7.5mol/LHCl封片。
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