CN103394102B - 一种脂质微/奈米气泡、及其优化的制备方法及制备装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种制备微/奈米气泡的方法，包括：制备一混合脂质材料，混合脂质材料包含一种/一种以上具有不同主要相转变温度的脂质、一具有链结亲水聚合物的脂质或一种/一种以上具有穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子；将混合脂质材料进行机械乳化直到一透明脂质载体溶液形成；将脂质载体装在一封闭容器，再将封闭容器抽真空并填入卤代烷烃气体；调整脂质载体的温度接近于脂质载体的主要相转变温度或通过调整脂质载体主要相转变温度以适应后续采取的力学震荡方式与操作温度；对于在封闭容器的脂质载体进行力学震荡并形成微气泡于封闭容器中。此方法可形成材料使用效率优化的微气泡或用以控制最终形成微气泡的粒径。
Description
【技术领域】
本发明关于一种脂质微/奈米气泡的备制有关，特别是一种可形成材料使用效率优化的微/奈米气泡或控制气泡粒径的备制方法。
【背景技术】
微奈米气泡的常见应用为超聲波对比剂(显影剂)，此类超聲波对比微气泡为一种可被生物分解材质外壳所包覆的微小气泡，粒径约1~5μm ，能安全循环于血液中并提供超聲波造影的功能，故可作为超聲波对比剂。超聲波对比微气泡的工作原理为利用空气相较血液较低的密度，造成声波阻抗的不匹配，使声波在触及微气泡时能绝大部分被反射，因而可以增加血管内的散射讯号强度大约20~40dB，让血管更易观察到。
超聲波对比微气泡也可以应用于超聲波标靶治疗。利用将特定药物装入微气泡中，然后将微气泡送入血管中，等到微气泡吸附累积于欲治疗的目标区域时，使用超聲波震碎气泡，并因为超聲波机械效应增加血管壁的通透性，因而促进药物的吸收，此称为超聲波驱动的药物释放(ultrasound-triggered drug release)。此治疗方法可以减少特定药物的使用，另外也能替代传统化疗药物并减少其所带来的副作用。
然而，在应用超聲波对比微气泡时，为了要定位微气泡于目标区域，必须针对微气泡进行标靶分子的修饰，而这类标靶分子的价位通常十分昂贵，因此，若能在定量材料下制造出尽可能大量的微气泡，则可以有效地降低备制成本，此外，也能节省备制微气泡时所需要的药物。
有鉴于此，提供一种可形成材料使用效率优化的超聲波对比微气泡的备制方法，是目前超聲波对比微气泡的研究与发展上很重要的课题之一。
【发明内容】
有鉴于此，本发明提供一种脂质微/奈米气泡的备制方法(不仅限于应用在超聲波对比微气泡的备制上)，通过调整备制材料的成份比例，以调控经特殊制程形成脂质载体的主要相转变温度或脂质膜的流动性，并使脂质载体在接近其主要相转变温度(或可认定为接近其于水溶液中的溶点)的温度下经过力学(mechanical)震荡后可形成材料使用效率优化的微气泡，因而有效降低备制微气泡时所需要的备制成本。
本发明所揭露的一种制备脂质微/奈米气泡的方法，包括以下步骤：制备一混合脂质材料，混合脂质材料包含一种/一种以上具有不同主要相转变温度的脂质、一具有链结亲水聚合物的脂质或一具有穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子、一非水溶剂；其中脂质材料具有长度范围在8~30个碳原子的单一股碳链或双股碳链，而具有链结亲水聚合物的脂质具有上述脂质的碳链结构，并额外链结一亲水性的聚合物长链，且聚合物长链分子量介于200至200000；将混合脂质材料溶入一水溶液；对水溶液进行机械乳化，直到一透明的脂质载体溶液形成；将脂质载体装在一封闭容器；将封闭容器抽真空，并填入卤代烷烃气体或疏水性化合物；调整脂质载体的温度，使其温度接近于脂质载体的主要相转变温度或通过调整脂质载体主要相转变温度以适应后续采取的力学震荡方式与操作温度；以及对于在封闭容器的脂质载体进行力学(mechanical)震荡，并形成超聲波对比微气泡于所述封闭容器中。
对应于前述的备制方式，本发明另外揭露一种脂质混合物，包括一种 /一种以上具有不同主要相转变温度的脂质、一具有链结亲水聚合物的脂质或/及一具有穿透脂质模并降低脂质分子间凡德瓦力的分子。具有不同主要相转变温度的脂质具有长度范围在8~30个碳原子的碳烷基链，且碳烷基链包含烯基的烷基链、炔基的烷基链、氟化碳烷基链、或以碳烷基长链为主体的分支(branched)结构。具有链结亲水聚合物的脂质具有上述脂质的碳链结构，并额外链结一亲水性的聚合物长链，且所述聚合物长链分子量介于200至200000。
另外，对应于前述的备制方式，本发明揭露一种用以制备脂质微/奈气泡的装置，是对一混合脂质材料进行处理。混合脂质材料内含有一种 /一种以上具有不同主要相转变温度的脂质、一具有链结亲水聚合物的脂质或一种/一种以上具有穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子。其中脂质具有长度范围在8~30个碳原子的单一股碳链或双股碳链，而具有链结亲水聚合物的脂质具有上述脂质的碳链结构，并额外链结一亲水性的聚合物长链，且聚合物长链分子量介于200至200000。并将所述混合脂质材料溶入一水溶液。用以制备脂质微/奈气泡的装置包括机械震荡单元以及温度控制单元。
机械震荡单元用以对水溶液进行机械乳化，直到一透明的脂质载体溶液形成。温度控制单元用以调整脂质载体的温度，使其温度接近于脂质载体的主要相转变温度。机械震荡单元更对置于一封闭容器，并且温度已接近主要相转变温度的脂质载体进行力学(mechanical)震荡，并形成脂质微/奈米气泡于封闭容器中。
本发明的功效在于，通过调整适当成份比例的脂质混合物，可调控由脂质混合物形成的一脂质载体的主要相转变温度或脂质膜的流动性，以使脂质载体在接近主要相转变温度的温度下经过力学(mechanical) 震荡后可形成材料使用效率优化的微气泡，因此有效地降低微气泡的备制成本，以及节省备制微气泡时所需要的特定药物。
此外，调整脂质混合物的成份比例或备制温度，将可以改变脂质膜的流动性进而调整微气泡的粒径，可以依照医疗或美容需求调整出所要粒径的微气泡。对于超聲波造影的应用，将可通过控制粒径有效调整微气泡的共振频率，以使微气泡在非线性造影(non-linear imaging)的造影能力获得提升。
针对使脂质载体在接近主要相转变温度的温度下经过力学(mechanica l)震荡后可形成材料使用效率优化的微气泡，本发明另外提示可能的温度调控方式，调控方式包含在进行力学震荡前利用水浴法或干热法将脂质载体温度提升、降低至接近脂质载体的主要相转变温度的温度后再行将脂质载体以力学震荡的方式形成材料使用效率优化的微气泡，或将一具有加热或冷却功能的机械单元与力学震荡机构相结合，而使得所述力学震荡机构具有调整脂质载体温度的功能，并可在运作此力学震荡机构的过程中将脂质载体的温度调整至接近脂质载体的主要相转变温度或所需脂质膜流动性。
有关本发明的特征、实作与功效，兹配合图示做最佳实施例。
【附图说明】
图1为本发明所揭露的一种用以制备脂质微/奈气泡的装置的一实施例。
图2为本发明所揭露的一种用以制备脂质微/奈气泡的装置的俯视剖面图。
图3为本发明所揭露的机械震荡单元的一实施例的示意图。
图4为图3所揭露的机械震荡单元应用于用以制备脂质微/奈气泡的装置的示意图。
图5为本发明所揭露的温度控制单元的一实施例的正面剖面图。
图6为本发明所揭露的用以制备脂质微/奈气泡的装置的底部仰视图。
图7为本发明所揭露的用以制备脂质微/奈气泡的装置的正面视图。
主要组件符号说明：
100 用以制备脂质微/奈气泡的装置 122 第二风扇组
110 机械震荡单元 123 加热线圈
111 夹具 130 殻体
112 力臂 131 上盖
113 马达装置 310 进气气流
120 温度控制单元 320 出气气流
121 第一风扇组
【具体实施方式】
本发明的制备脂质微/奈米气泡的方法乃使用力学(mechanical)震荡法，其对于具有脂质膜的混合脂质材料进行震荡，使脂质膜结构被破坏后，重新组织结构时充入所欲包覆的气体而形成微气泡。脂质膜的流动性(membrane fluidity)主要表示磷脂质(phospholipids)分子在脂质膜上的运动能力，对于力学震荡法所能形成的微气泡影响甚大，不但会显著影响微气泡的最终产量，也会大幅度地影响生成微气泡的粒径大小与粒径大小分布。超聲波对比微气泡在应用时，其粒径不可以大于8μm，不然易于造成肺部微血管栓塞，对于人体有害，因此控制微气泡的粒径大小对于最终生成的适用微气泡的产量有非常大的影响。相较部份其他备制方法，其对于生成微气泡的粒径与膜流动性较无法控制，备制完微气泡后必须再除去粒径过大的气泡，且导致材料在备制时较难成功重新组织结构而转变成微气泡，本发明的备制方法通过调整脂质膜溶液的成份比例，调整脂质膜的流动性并于微气泡制备时调控环境温度至其适合范围，能有效控制生成微气泡的粒径大小以及微气泡的最终产量，因而形成材料使用效率优化的微气泡。
本发明实施例的一种制备超聲波对比微气泡的方法，包括以下步骤：
一、制备一混合脂质材料，混合脂质材料包含一种/一种以上具有不同主要相转变温度的脂质、以及一具有链结亲水聚合物的脂质或一种/一种以上具有穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子。此外亦可加入一非水溶剂，以加强脂质与水份的结合。脂质为具有长度范围在 8~30个碳原子的单一股碳链或双股碳链，而碳链可以为但不限定于选自碳烷基链、烯基的烷基链、炔基的烷基链、氟化碳烷基链、以碳烷基长链为主体的分支(branched)结构及前述成分任意混合的所成群组组合，更详细地说，脂质可以为但不限定于选自为1,2-二肉荳蔻酰-S n-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholin e，DMPC)、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺 (1,2-dimyrist oyl-sn-glycero-3- phosphoethanolamine，DMPE)、1,2-二肉荳蔻酰 -Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油) (1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3 -phospho-(1'-rac-glycerol)，DMPG)、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3- 磷酸丝胺酸(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3- phosphserine，DMPS )、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸(1,2- dimyristoyl-sn-glycer o-3-phosphate，DMPA)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-di palmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DPPC)、1,2-二棕榈酰-S n-甘油-3-磷酸(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphate，DPPA)、 1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero -3-phosphserine，DPPS)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac- 甘油)(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-rac-glycerol) ，DPPG)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine，DPPE)、1, 2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-ph osphocholine，DSPC)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油 )( 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-rac-glycerol)，D SPG)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-distearoyl-sn-gl ycero-3-phosphoethanolamine，DSPE)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphate，DSPA)、1,2-二硬脂酰 -Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸(1,2- distearoyl-sn-glycero-3-phosphse rine，DSPS)、1,2-二油酰-3-三甲基-丙烷(1,2-dioleoyl-3-trimeth ylammonium-propane，DOTAP)、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱(1, 2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DOPC)、1,2-二油酰-Sn -甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanola mine，DOPE) 、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸(1,2-dioleoyl-sn-gly cero-3-phosphate，DOPA) 、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac -甘油) (1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-rac-glycerol) ，DOPG) 、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸(1,2-dioleoyl-sn-g lycero-3-phosphserine，DOPS)、1,2-二棕榈酰-3-三甲基-丙烷(1,2 -dipalmitoyl-3-trimethylammonium-propane，DPTAP)、1,2-二硬脂酰-3-三甲基-丙烷(1,2- distearoyl-3-trimethylammonium-propan e，DSTAP)、溴化二甲基二十八烷基铵(dimethyldioctadecylammoniu m bromide，DMDDA)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-二乙三胺五乙酸(1,2- dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamin e-N-diethylenetriaminepen taacetic acid，DPPE-DTPA)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺 -N-二乙三胺五乙酸(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanol amine-N-diethylenetriaminepentaacetic acid，DSPE-DTPA)、肉荳蔻酸(myristic acid)、棕榈酸(palmitic acid)、硬脂酸(stearic acid)、油酸(oleic acid)、生育醇(tocopherols)、三烯生育醇( tocotrienols) 、抗坏血酸棕榈酸酯(ascorbyl palmitate) 、SP AN®系列产品、Loxiol®系列产品、Atlas™系列产品、Arlacel™系列商品及Emcol®系列商品所成的群组组合；在本实施例中使用1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosp hocholine，DPPC)和1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-rac-glycerol)，DSP G)两种脂质，DPPC的(固态转液态的)主要相转变温度为摄氏41度，DS PG的(固态转液态的)主要相转变温度为摄氏55度，搭配一较高相转变温度的脂质材料将有助于最终微气泡形成时降低粒径与增加稳定性。具有链结亲水聚合物的脂质具有上述脂质的碳链结构，并额外链结一亲水性的聚合物长链，且聚合物长链分子量介于200至200000，具有链结亲水聚合物的脂质的亲水性的聚合物长链可以为但不限定于选自聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)、聚丙二醇(polypropylene g lycol)、聚氧乙烯(polyoxyethylene)、聚乙烯醇(polyvinylalcohol)、聚乙烯吡咯烷酮和相关共聚合的物质(polyvinylpyrrolidone an d relatedcopolymers)及长链蛋白质(peptide) 、脱氧核醣核酸 (DNA)、核糖核酸(RNA) 所成的群组组合；具有链结亲水聚合物的脂质的脂质长链可以为但不限定于选自1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000] (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy (polyethylene glycol)-3000]，DPPE-PEG2000)、1,2-二棕榈酰-Sn -甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000] (1,2-dipalmito yl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-3000]，DPPE-PEG3000)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000] (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3- phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethyleneglycol)-3000]， DPPE-PEG5000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000] (1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolam ine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-5000]，DSPE-PEG2000)、1 ,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000] (1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy( polyethylene glycol)-5000]，DSPE-PEG3000)、1,2-二硬脂酰-Sn- 甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000] (1,2-distearoyl -sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene g lycol)-5000]，DSPE-PEG5000)、不同分子量聚乙二醇化脂质(PEG-yl ated lipids) 、聚氧乙烯硬脂酸(polyoxyethylenestearates)、聚乙二醇硬脂酸(polyethylene glycol stearates)、TWEEN®系列产品、Myrj™系列产品、Atlas™系列产品、D-α-生育酚聚乙二醇10 00琥珀酸单酯(d-alphatocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate，Vitamin E TPGS)及经抗体(antibody-conjugated)或肽(peptide-conjugated)或脱氧核醣核酸(DNA-conjugated)或核醣核酸(RNA-conjugated)或生物素(biotin-modified) 或马来酰亚胺(maleimide-modified)或胺基(amine-modified)修饰的聚乙二醇化脂质(PEG-ylated lipids)所成的群组组合；在本实施例中使用聚乙二醇硬脂酸酯(polyethylene glycol 40 stearate，PEG40S)。穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子可以为但不限定于选自聚乙二醇(polyethylene glycol)、肽(peptide)、白蛋白( albumin)、胺基酸(amino acid)、糖醇类(sugar alcohols)、1,2- 戊二醇(pentane-1,2-diol)、新戊二醇(2,2-dimethyl-1,3-propaned iol)、1,3-丁二醇(butane-1,3-diol)、丙三醇(propane-1,2,3-trio l)、1,2-丙二醇(propane-1,2-diol)、1,3-丙二醇(propane-1,3-dio l)、1-丙醇(propan-1-ol)、乙二醇(ethane-1,2-diol)、乙醇(ethan ol)、甲醇(methanol)及二甲基亚砜(dimethylsulfoxide) 所成的群组组合，在本实施例中使用丙三醇(甘油)，用于增加脂质膜的流动性，以提高脂质膜重新组织的能力，所列部分分子(例如：甲醇、乙醇 )甚至可使脂质混合物在极低于其主要相转变温度的情况下大幅提高最终形成的微气泡浓度。
二、将混合脂质材料溶入一水溶液。在本实施例中，水溶液为重量百分浓度1%丙三醇(甘油)的磷酸盐缓冲食盐水溶液(Phosphate Buffer Saline，PBS)。前述三种脂质化合物将形成脂质膜并溶于水溶液中，其中具有链结亲水聚合物的脂质可以适当增加脂质膜的流动性，因而使混合脂质膜的结构更容易被破坏并重新组织，而大幅增加微气泡的最终产量，具有穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子亦具有类似的功能，而较高主要相转变温度的脂质材料，本实施例为DSPG ，则具有降低脂质膜的流动性与稳定最终形成的微气泡的功能。
三、对水溶液进行机械乳化，直到一透明的脂质载体溶液形成。机械乳化可使用但不限定为超聲波震荡、高速搅拌、高压乳化或是加压薄膜过滤(membrane filter method)。在本实施例中，本步骤在摄氏 60度进行，而机械乳化为使用超聲波震荡器(bathsonicator)，且在透明的脂质载体溶液形成后，将脂质载体溶液的浓度调整为3mg/mL且冷却到摄氏20度。此步骤的乳化可以将溶于水溶液中的脂质膜震散，降低脂质载具的粒径大小，以便于微气泡的备制。
四、将脂质载体溶液装在封闭容器。在本实施例中，取1mL脂质载体溶液装在1.8mL的封闭小瓶。适合的范围为在1.8mL的封闭小瓶中装入0. 5 ~ 1mL的脂质载体溶液。
五、将封闭容器抽真空，并填入欲填充的气体，可以是但不限定于选自卤代烷烃气体、惰性气体、六氟化硫、氮气、氧气、空气 所成的群组组合，或疏水性化合物。其中疏水性化合物可以是但不限定于打算装入微气泡而用于医疗的特定药物，而欲填充的气体或疏水性化合物在微气泡形成时将装入微气泡中。填充气体的方式也可优先于一更大的密死循环境中将气体置换成欲填充的气体，并于此环境中对密闭容器进行封装。
六、调整脂质载体的温度，使其温度接近所述脂质载体的主要相转变温度。此步骤也可以有效地使脂质膜脂流动性增加、提高脂质载体重新组织的能力，而增加微气泡的最终产量，举例来说，若脂质载体中 DPPC：DSPG：PEG40S质量比为1:1:1，其主要相变化温度为摄氏46度，则在摄氏43度进行下一步骤所产生微气泡的产量超过在摄氏20度进行下一步骤所产生微气泡的产量的三倍。本实施例以水浴法将脂质载具由室温加热至摄氏43度。因此，通过适当调整脂质载体的温度，本发明的备制方法可形成材料使用效率优化的微气泡。由于后续的不同力学(mechanical)震荡过程可能本身即为一加温或降温的过程，故部分实施状况需优先将脂质载体的温度调整至高于所述脂质载体的主要相转变温度，以适应所采用的力学震荡方式并利于后续微气泡的形成，举例来说，若脂质载体中DSPC:DSPE-PEG2000质量比为10:2，其主要相变化温度为摄氏 56度，而所使用的力学震荡过程若仅能将脂质载体维持在摄氏50度，则必须将脂质载体优先加热至摄氏60度才能获得效率优化的微气泡(上述实施例的最高浓度可达4×1010 bubbles/mL)。
七、对于在封闭容器的脂质载体进行力学(mechanical)震荡，并形成超聲波对比微气泡于封闭容器中。此步骤的力学震荡可使用但不限定于超聲波震荡、手摇晃动、机械震荡、微流道挤压(microfluidic d evice/T-focusing)或是同轴电流体雾化(co-axialelectrohydrody namic atomisation (CEHDA) microbubbling)。在本实施例中使用机械震荡机以4550rpm进行45秒的震荡，机械震荡可以有效地控制生成微气泡的粒径以及粒径大小分布，而本实施例中生成的微气泡超过95 %粒径小于8μm。本发明的备制方法可以有效地控制生成微气泡的粒径，下表列出由不同比例的化合物组合所生成的微气泡平均粒径，其中由第1组、第2组和第3组所组成的群组或第4组、第5组和第6组所组成的群组可以看出PEG40S越多，则粒径会有显著地增加，而对比第1组、第2组和第3组所组成的群组与第4组、第5组和第6组所组成的群组，可以发现DSPG显著地降低生成微气泡的粒径，也就是说，PEG40S增加脂质膜的流动性，因而粒径增加，而DSPG减少脂质膜的流动性，因而粒径减少。于本实施例中，通过调控PEG40S与DSPG的比例，可以有效地控制生成微气泡的粒径。
| 组别 | DPPC:DSPG:PEG40S的质量比 | 平均粒径(μm) |
| 第1组 | 10:4:1 | 0.931±0.007 |
| 第2组 | 10:4:2 | 1.083±0.006 |
| 第3组 | 10:4:3 | 1.171±0.114 |
| 第4组 | 14:0:2 | 1.814±0.015 |
| 第5组 | 14:0:4 | 2.368±0.061 |
| 第6组 | 14:0:6 | 2.861±0.046 |
对应于前述的备制方式，本发明另外提供一种脂质混合物，包括一种 /一种以上具有不同主要相转变温度的脂质、一具有链结亲水聚合物的脂质或/及一种/一种以上具有穿透脂质模并降低脂质分子间凡德瓦力的分子。具有不同主要相转变温度的脂质具有长度范围在8~30个碳原子的碳烷基链，且碳烷基链包含烯基的烷基链、炔基的烷基链、氟化碳烷基链、或以碳烷基长链为主体的分支(branched)结构，更明确地说，具有不同主要相转变温度的脂质可以但不限于选自1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoch oline，DMPC)、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺 (1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3- phosphoethanolamine，DMPE)、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油) (1,2-dimyristoyl-sn-glyce ro-3-phospho-(1'-rac-glycerol)，DMPG)、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油 -3-磷酸丝胺酸(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphserine，D MPS)、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸(1,2- dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphate，DMPA)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2 -dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DPPC)、1,2-二棕榈酰 -Sn-甘油-3-磷酸(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphate，DPPA )、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸(1,2-dipalmitoyl-sn-glyc ero-3-phosphserine，DPPS)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-r ac-甘油)(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-rac-glycer ol)，DPPG)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero -3-phosphoethanolamine，DPPE)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DSPC)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)( 1,2-distearoyl-sn-glyc ero-3-phospho-(1'-rac-glycerol)，DSPG)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油 -3-磷酸乙醇胺(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamin e，DSPE)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸(1,2-distearoyl-sn-glyc ero-3-phosphate，DSPA)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸(1, 2- distearoyl-sn-glycero-3-phosphserine，DSPS)、1,2-二油酰- 3-三甲基-丙烷(1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium-propane，DOTA P)、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3- phosphocholine，DOPC)、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-d ioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine，DOPE) 、1,2-二油酰 -Sn-甘油-3-磷酸(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphate，DOPA) 、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油) (1,2-dioleoyl-sn- glycero-3-phospho-(1'-rac-glycerol)，DOPG) 、1,2-二油酰-Sn- 甘油-3-磷酸丝胺酸(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphserine，DO PS)、1,2-二棕榈酰-3-三甲基-丙烷(1,2-dipalmitoyl-3-trimethyla mmonium-propane，DPTAP)、1,2-二硬脂酰-3-三甲基-丙烷(1,2- distearoyl-3-trimethylammonium-propane，DSTAP)、溴化二甲基二十八烷基铵(dimethyldioctadecylammonium bromide，DMDDA)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-二乙三胺五乙酸(1,2- dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-diethylenetri aminepentaacetic acid，DPPE-DTPA)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-二乙三胺五乙酸(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosph oethanolamine-N-diethylenetriaminepentaacetic acid，DSPE-DT PA)、肉荳蔻酸(myristic acid)、棕榈酸(palmitic acid)、硬脂酸 (stearic acid)、油酸(oleic acid)、生育醇(tocopherols)、三烯生育醇(tocotrienols) 、抗坏血酸棕榈酸酯(ascorbyl palmitate ) 、SPAN®系列产品、Loxiol®系列产品、Atlas™系列产品、Arla cel™系列商品及Emcol®系列商品所成的群组组合。具有链结亲水聚合物的脂质具有上述脂质的碳链结构，并额外链结一亲水性的聚合物长链，且所述聚合物长链分子量介于200至200000，更明确地说，具有链结亲水聚合物的脂质的所述亲水性的聚合物长链可以但不限于选自聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)、聚丙二醇(polypropylene glycol)、聚氧乙烯(polyoxyethylene)、聚乙烯醇(polyvinylalcoho l)、聚乙烯吡咯烷酮和相关共聚合的物质(polyvinylpyrrolidone and related copolymers)及长链蛋白质(peptide)、脱氧核醣核酸( DNA)、核糖核酸(RNA)所成的群组组合，而具有链结亲水聚合物的脂质的脂质长链可以但不限于选自1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺 -N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000] (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-ph osphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-3000]，DP PE-PEG2000)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000] (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolami ne-N-[methoxy(polyethyleneglycol)-3000]，DPPE-PEG3000)、1, 2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000] (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-ph osphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-3000]，DP PE-PEG5000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000] (1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamin e-N-[methoxy(polyethylene glycol)-5000]，DSPE-PEG2000)、1,2 -二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000] (1 ,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(po lyethylene glycol)-5000]，DSPE-PEG3000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000] (1,2-distearoyl-s n-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene gly col)-5000]，DSPE-PEG5000)、不同分子量聚乙二醇化脂质(PEG-ylat ed lipids) 、聚氧乙烯硬脂酸(polyoxyethylene stearates)、聚乙二醇硬脂酸(polyethylene glycol stearates)、TWEEN®系列产品、Myrj™系列产品、Atlas™系列产品、D-α-生育酚聚乙二醇1000 琥珀酸单酯(d-alpha tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate，Vitamin E TPGS)及经抗体(antibody-conjugated)或肽 (peptide-conjugated)或脱氧核醣核酸(DNA-conjugated)或核醣核酸 (RNA-conjugated)或生物素(biotin-modified)或马来酰亚胺(maleim ide-modified)或胺基(amine-modified)修饰的聚乙二醇化脂质(PEG- ylatedlipids)所成的群组组合。具有穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子可以为但不限于选自聚乙二醇(polyethylene glyco l)、肽(peptide)、白蛋白(albumin)、胺基酸(amino acid)、糖醇类 (sugar alcohols)、1,2-戊二醇(pentane-1,2-diol)、新戊二醇(2,2-dimethyl-1,3-propanediol)、1,3-丁二醇(butane-1,3-diol)、丙三醇(propane-1,2,3-triol)、1, 2-丙二醇(propane-1,2-diol)、1,3-丙二醇(propane-1,3-diol)、1- 丙醇(propan-1-ol)、乙二醇(ethane-1,2-diol)、乙醇(ethanol)、甲醇(methanol)及二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide) 所成的群组组合。
其中通过调整脂质混合物的成分比例，可调控脂质混合物经上述备制方法形成的一脂质载体的主要相转变温度或脂质膜的流动性，以使脂质载体在接近其主要相转变温度的温度下经过各种乳化方式或力学震荡后可形成材料使用效率优化的微气泡或制造出所要粒径的微气泡。
针对使脂质载体在接近主要相转变温度的温度下经过力学(mechanica l)震荡(包含超聲波震荡、手摇晃动、机械震荡、高速搅拌、微流道挤压(microfluidic device/T-focusing)或是同轴电流体雾化(co-axi al electrohydrodynamic atomisation (CEHDA)microbubbling )后可形成材料使用效率优化的微气泡，本发明另外提示可能的温度调控方式，调控方式包含在进行力学震荡前利用水浴法或干热法将脂质载体温度提升、降低至接近脂质载体的主要相转变温度的温度后再行将脂质载体以力学震荡的方式形成材料使用效率优化的微气泡，或将一具有加热或冷却功能的机械单元与力学震荡机构相结合，而使得所述力学震荡机构具有调整脂质载体温度的功能，并可在运作此力学震荡机构的过程中将脂质载体的温度调整至接近脂质载体的主要相转变温度或所需脂质膜流动性。
图1为本发明所揭露的一种用以制备脂质微/奈气泡的装置100的一实施例。装置100对一混合脂质材料进行处理。混合脂质材料内含有一种/ 一种以上具有不同主要相转变温度的脂质、一具有链结亲水聚合物的脂质或一种/一种以上具有穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子。其中脂质具有长度范围在8~30个碳原子的单一股碳链或双股碳链，而具有链结亲水聚合物的脂质具有上述脂质的碳链结构，并额外链结一亲水性的聚合物长链，且聚合物长链分子量介于200至200000。并将混合脂质材料溶入一水溶液中。
图2为本发明所揭露的一种用以制备脂质微/奈气泡的装置100的俯视剖面图。用以制备脂质微/奈气泡的装置100包括机械震荡单元110以及温度控制单元120。机械震荡单元110用以对水溶液进行力学震荡。温度控制单元120用以调整脂质载体的温度，使其温度接近于所述脂质载体的主要相转变温度。
进一步说明，机械震荡单元110更对一置于夹具上的封闭容器（图中未示），并且温度已接近主要相转变温度的脂质载体进行力学(mechani cal)震荡，并形成脂质微/奈米气泡于封闭容器中。
图3为本发明所揭露的机械震荡单元110的一实施例的示意图。机械震荡单元110可以更进一步包含夹具111、力臂112、马达装置113以及一固定装置，所述固定装置链接于力臂尾段用以限制力臂运动模式的装置(图中未示)。夹具111用以夹制封闭容器或装有所述溶液的容器。力臂112连接于夹具111，力臂112与夹具111形成一可供震荡的机构，并在受到固定装置的限制下使力臂能于马达的驱动下形成一稳定的往复式运动模式。马达装置113连接于力臂112，马达装置113是用以产生一往复的运动以对夹具111以及力臂112进行震荡，以进行前述的机械乳化或是力学震荡的动作。图4为图3所揭露的机械震荡单元110应用于用以制备脂质微/奈气泡的装置100的示意图。其中夹具111可以设置于温度控制单元120的上方，以利温度控制单元120对夹具111所夹制的容器进行优化的温度控制。例如当马达装置113对夹具111以及力臂112进行震荡时，夹具111是产生水平方向的往复动作(包含线性或八字型运动 )，且往复动作的幅度是使夹具111所夹制的容器一直位于温度控制单元120的上方，因此能得到优化的温度控制效果。
再者，如图1以及图2所示，用以制备脂质微/奈气泡的装置100可以更进一步包括一殻体130，用以形成密闭空间并容置所述的水溶液或封闭容器。且殻体130可以进一步包含一上盖131，用以方便替换水溶液或封闭容器，且装置100在上盖131关上时，形成所述的密闭空间。图5为本发明所揭露的温度控制单元120的一实施例的正面剖面图。温度控制单元120可以更进一步包括第一风扇组121、第二风扇组122、加热线圈 123以及温度传感器（图中未示）。温度传感器可设置于130与131所形成的密闭空间内或在111、112两者其中的一上。图6为本发明所揭露的用以制备脂质微/奈气泡的装置100的底部仰视图。由图6可观察到温度控制单元120位于殻体130的底部的相对位置。
第一风扇组121用以产生由殻体130之外流向殻体130之内的一进气气流 310。第二风扇组122用以产生由殻体130之内流向殻体130之外的一出气气流320。加热线圈123用以对进气气流310进行加热。温度传感器则用以感测密闭空间的温度。
其中，当对密闭空间进行升温至一目标温度时，开启第一风扇组121以及加热线圈123，直到温度传感器侦测到目标温度；进行升温时可以选择性地开启第二风扇组122，以增加进气气流310与出气气流320的对流速度而增加升温的速度。而当对密闭空间进行降温至另一目标温度时，开启第二风扇组122，直到温度传感器侦测到另一目标温度；进行降温时亦可以选择性地开启第一风扇组121，以增加进气气流310与出气气流320的对流速度而增加降温的速度。图7为本发明所揭露的用以制备脂质微/奈气泡的装置100的正面视图，可观察到进气气流310与出气气流320的示意。
另外，在本发明所揭露的一种用以制备脂质微/奈气泡的装置的另一实施例中，装置对一混合脂质材料进行处理。混合脂质材料内含有一种/一种以上具有不同主要相转变温度的脂质、一具有链结亲水聚合物的脂质或一种/一种以上具有穿透脂质膜并降低脂质分子间凡德瓦力的分子。其中脂质具有长度范围在8~30个碳原子的单一股碳链或双股碳链，而具有链结亲水聚合物的脂质具有上述脂质的碳链结构，并额外链结一亲水性的聚合物长链，且聚合物长链分子量介于200至200000。并将混合脂质材料溶入一水溶液。而用以制备脂质微/奈气泡的装置包括机械震荡单元以及温度传感器。机械震荡单元及其所具有的夹具、力臂以及马达装置，可参考图1以及图2中机械震荡单元110的相关说明。温度控制单元用以调整脂质载体的温度，使其温度接近于所述脂质载体的主要相转变温度温度传感器，温度控制单元更包含一温度传感器，设置于力臂或夹具上，用以侦测封闭容器的温度。例如当机械震荡单元对封闭容器进行力学震荡时，封闭容器由于其内部的水溶液或脂质载体受到强烈摇晃而造成温度的上升，此时温度传感器即侦测封闭容器的温度是否达到一目标温度，而进行相对应的处理，例如停止力学震荡或继续一小段时间的力学震荡的动作。
再者，本实施例中更可包括一干热式加热片，设置于力臂或夹具上，通过与封闭容器直接接触来对封闭容器进行加温，使封闭容器的温度可以更快速地上升。
本发明的功效在于，通过调整适当成份比例的脂质混合物，可调控由脂质混合物经本发明的备制方法形成的一脂质载体的主要相转变温度或脂质膜的流动性，以使脂质载体在接近主要相转变温度的温度下经过力学(mechanical)震荡后可形成材料使用效率优化的微气泡，如此便能有效地降低微气泡的备制成本，以及节省备制微气泡时所需要的特定药物。
此外，调整脂质混合物的成份比例或备制温度，将可以改变脂质膜的流动性进而调整微气泡的粒径，可以依照医疗或美容需求调整出所要粒径的微气泡。
虽然本发明的实施例揭露如上所述，然并非用以限定本发明，任何熟习相关技艺者，在不脱离本发明的精神和范围内，举凡依本发明申请范围所述的形状、构造、特征及数量当可做些许的变更，因此本发明的专利保护范围须视本说明书所附的申请专利范围所界定者为准。
Claims (28)
1.一种制备脂质微米/纳米气泡的方法，所述方法包括以下步骤：
制备脂质混合物，所述脂质混合物包含具有不同主要相转变温度的一种或多种第一脂质、具有链结亲水聚合物部分的第二脂质、以及任选的能够穿透脂质膜并降低脂质分子间范德华力的一种或多种分子；其中所述一种或多种第一脂质中的每一种包括C8-C30单碳链或双碳链，而所述亲水聚合物部分具有分子量为200至200000的长链；
将所述脂质混合物溶入水溶液；对所述水溶液进行机械乳化，以形成透明的脂质载体溶液且然后将所述透明的脂质载体溶液调整至摄氏20度；
将所述透明的脂质载体溶液置于封闭容器中，所述封闭容器包含欲填充的气体或疏水性化合物；并且
将所述透明的脂质载体溶液的温度从摄氏20度升高至接近于所述透明的脂质载体溶液的主要相转变温度，同时对容纳有所述透明的脂质载体溶液的所述封闭容器进行机械震荡，以在所述封闭容器中形成所述脂质微米/纳米气泡。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述碳链是选自由碳烷基链、烯基的烷基链、炔基的烷基链、氟化碳烷基链、以碳烷基长链为主体的分支结构及它们的组合组成的组。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种第一脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二油酰-3-三甲基铵-丙烷、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二棕榈酰-3-三甲基铵-丙烷、1,2-二硬脂酰-3-三甲基铵-丙烷、溴化二甲基二十八烷基铵、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-二乙三胺五乙酸、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-二乙三胺五乙酸、肉荳蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、生育醇、三烯生育醇、抗坏血酸棕榈酸酯、系列产品、系列产品、AtlasTM系列产品、ArlacelTM系列商品及系列商品。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述一种或多种第一脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸和1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述一种或多种第一脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、和1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲水聚合物部分的长链选自由以下各项组成的组中：聚乙二醇、聚丙二醇、聚氧乙烯、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮和相关的共聚物、长链蛋白质、DNA、RNA以及它们的组合。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DPPE-PEG3000)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DPPE-PEG5000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DSPE-PEG3000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DSPE-PEG5000)、不同分子量聚乙二醇化脂质、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚乙二醇硬脂酸酯、系列产品、MyrjTM系列产品、AtlasTM系列产品、D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯及经抗体共轭的或肽共轭的或DNA共轭的或RNA共轭的或生物素改性的或马来酰亚胺改性的或胺改性的聚乙二醇化脂质，以及它们的组合。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述第二脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000]、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000]、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000]、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000]、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000]、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000]、聚氧乙烯硬脂酸酯和聚乙二醇硬脂酸酯。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述第二脂质是1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000]、聚氧乙烯硬脂酸酯或聚乙二醇硬脂酸酯。
10.根据权利要求1所述的方法，其中所述能够穿透脂质膜并降低脂质分子间范德华力的一种或多种分子选自由以下各项组成的组中：聚乙二醇、肽、白蛋白、胺基酸、糖醇类、1,3-丁二醇、丙三醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、1-丙醇、1,2-乙二醇、乙醇、甲醇、二甲基亚砜，以及它们的组合。
11.根据权利要求1所述的方法，其中所述水溶液为生理食盐水或磷酸盐缓冲食盐水溶液。
12.根据权利要求1所述的方法，其中对所述水溶液进行机械乳化，以形成透明的脂质载体溶液的步骤中，使用超声波震荡、高速搅拌、高压乳化或是加压薄膜过滤对所述水溶液进行机械乳化。
13.根据权利要求1所述的方法，其中所述欲填充的气体选自由卤代烷烃气体、惰性气体、六氟化硫、氮气、氧气、空气或它们的组合组成的组中。
14.根据权利要求1所述的方法，其中通过超声波震荡、手摇晃动、高速机械震荡、微流道挤压或同轴电流体雾化微起泡实现机械震荡。
15.一种制备脂质微米/纳米气泡的方法，所述方法包括以下步骤：
制备脂质混合物，所述脂质混合物包含具有不同主要相转变温度的一种或多种第一脂质、具有链结亲水聚合物部分的第二脂质、以及任选的能够穿透脂质膜并降低脂质分子间范德华力的一种或多种分子；其中所述一种或多种第一脂质中的每一种包括C8-C30单碳链或双碳链，而所述亲水聚合物部分具有分子量为200至200000的长链；
将所述脂质混合物溶入水溶液；对所述水溶液进行机械乳化，以形成透明的脂质载体溶液；
将所述透明的脂质载体溶液置于封闭容器中，所述封闭容器包含欲填充的气体或疏水性化合物；并且
将所述透明的脂质载体溶液的温度升高至接近于所述透明的脂质载体溶液的主要相转变温度，同时对容纳有所述透明的脂质载体溶液的所述封闭容器进行机械震荡，以在所述封闭容器中形成所述脂质微米/纳米气泡。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述碳链是选自由碳烷基链、烯基的烷基链、炔基的烷基链、氟化碳烷基链、以碳烷基长链为主体的分支结构及它们的组合组成的组。
17.根据权利要求15所述的方法，其中所述一种或多种第一脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二肉荳蔻酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二油酰-3-三甲基铵-丙烷、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二棕榈酰-3-三甲基铵-丙烷、1,2-二硬脂酰-3-三甲基铵-丙烷、溴化二甲基二十八烷基铵、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-二乙三胺五乙酸、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-二乙三胺五乙酸、肉荳蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、生育醇、三烯生育醇、抗坏血酸棕榈酸酯、系列产品、系列产品、AtlasTM系列产品、ArlacelTM系列商品及系列商品。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述一种或多种第一脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸酯、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸丝胺酸和1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述一种或多种第一脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱、和1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)。
20.根据权利要求15所述的方法，其中所述亲水聚合物部分的长链选自由以下各项组成的组中：聚乙二醇、聚丙二醇、聚氧乙烯、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮和相关的共聚物、长链蛋白质、DNA、RNA以及它们的组合。
21.根据权利要求15所述的方法，其中所述第二脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DPPE-PEG3000)、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DPPE-PEG5000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DSPE-PEG3000)、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DSPE-PEG5000)、不同分子量聚乙二醇化脂质、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚乙二醇硬脂酸酯、系列产品、MyrjTM系列产品、AtlasTM系列产品、D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯及经抗体共轭的或肽共轭的或DNA共轭的或RNA共轭的或生物素改性的或马来酰亚胺改性的或胺改性的聚乙二醇化脂质，以及它们的组合。
22.根据权利要求21所述的方法，其中所述第二脂质选自由以下各项组成的组中：1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000]、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000]、1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000]、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000]、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000]、1,2-二硬脂酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000]、聚氧乙烯硬脂酸酯和聚乙二醇硬脂酸酯。
23.根据权利要求22所述的方法，其中所述第二脂质是1,2-二棕榈酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000]、聚氧乙烯硬脂酸酯或聚乙二醇硬脂酸酯。
24.根据权利要求15所述的方法，其中所述能够穿透脂质膜并降低脂质分子间范德华力的一种或多种分子选自由以下各项组成的组中：聚乙二醇、肽、白蛋白、胺基酸、糖醇类、1,3-丁二醇、丙三醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、1-丙醇、1,2-乙二醇、乙醇、甲醇、二甲基亚砜，以及它们的组合。
25.根据权利要求15所述的方法，其中所述水溶液为生理食盐水或磷酸盐缓冲食盐水溶液。
26.根据权利要求15所述的方法，其中对所述水溶液进行机械乳化，以形成透明的脂质载体溶液的步骤中，使用超声波震荡、高速搅拌、高压乳化或是加压薄膜过滤对所述水溶液进行机械乳化。
27.根据权利要求15所述的方法，其中所述欲填充的气体选自由卤代烷烃气体、惰性气体、六氟化硫、氮气、氧气、空气或它们的组合组成的组中。
28.根据权利要求15所述的方法，其中通过超声波震荡、手摇晃动、高速机械震荡、微流道挤压或同轴电流体雾化微起泡实现机械震荡。
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