CN103393095A - 复合菌丝粉的加工方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种复合菌丝粉的加工方法，其解决了现有灵芝培养方法营养易流失的技术问题，其包括制备培养基、活化菌种、接种及培养、烘干、膨化、粉碎、灭菌及装袋步骤，制备培养基的步骤包括：A:谷物培养基的制备；B:斜面培养基的制备；C:摇瓶培养基的制备；D:发酵罐培养基的制备。本发明可广泛用于复合菌丝粉的加工中。
Description
技术领域
本发明涉及一种菌类食品的加工方法，具体是指一种复合菌丝粉的加工方法。
背景技术
灵芝是一种具有极高药用价值的高等大型真菌，自古便是中医讲究扶正固本的珍品，具有抗肿瘤、抗辐射、降血压、抗氧化、防衰老等多种保健价值。
根霉在自然界分布很广，用途广泛，其淀粉酶活性很强，是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉（即阿明诺法）生产酒精。根霉能生产延胡索酸、乳酸等有机酸，还能产生芳香性的酯类物质。根霉亦是转化甾族化合物的重要菌类。
在医药工业中，酵母及其制品用于治疗某些消化不良症，并能提高和调整人体的新陈代谢机能。因此，药用酵母的生产在酵母工业中占有重要的地位。
目前，灵芝的加工主要是对灵芝子实体、复合菌丝粉和灵芝孢子进行培育、深加工或提取。灵芝菌丝体是由灵芝孢子萌发形成的，是灵芝子实体养分贮藏的部位，营养含量高于灵芝子实体。
现阶段，多数企业采用以灵芝为菌种液体深层发酵法并提取浓缩液的方法对其进行生产和利用，而这种方法在操作过程中会造成营养成分和微量元素的流失，使灵芝的价值不能得到充分的利用。
目前尚未见有关采用灵芝、根霉菌、酵母菌等制备复合菌丝粉的公开文献。
发明内容
本发明就是为了解决现有灵芝培养方法营养易流失的技术问题，提供一种方法简便、产物营养丰富的复合菌丝粉生产方法。
本发明提供的方法包括以下步骤：制备培养基、活化菌种、接种及培养、烘干、膨化、粉碎、灭菌及装袋，制备培养基的步骤包括：
其包括以下步骤：制备培养基、活化菌种、接种及培养、烘干、膨化、粉碎、灭菌及装袋，制备培养基的步骤包括：
A:谷物培养基的制备
将小麦、玉米、小米、黄豆按质量份数比1:1.5～2:0.6～1:1～1.2，加水至含水量质量百分比35～40%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；灭菌结束后，待培养基温度降至27～35℃时，放入无菌接种室待接种用；
B:斜面培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖15～20%、黄豆粉15～17%、玉米粉10～12%、小麦粉10～13%、磷酸二氢钾0.3～0.8%、硫酸镁0.2～1%、琼脂3～5%、蛋白胨3～7%、余为红薯提取液的比例配置，pH调至7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；灭菌结束10～15min后取出试管，摆成斜面，将斜面培养基转移至28～36℃培养箱中恒温培养18～20h，无菌落长出方可取出备用；
C:摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖16～21%、黄豆粉15～17%、玉米粉10～12%、小麦粉10～13%、磷酸二氢钾0.3～0.8%、硫酸镁0.2～1%、蛋白胨3～7%、余为红薯提取液的比例配置，pH6.8～7.2，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；
D:发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉450～500g/kg、淀粉250～300g/kg、葡萄糖100～180g/kg、磷酸二氢钾5～10g/kg、硫酸镁2～8g/kg、蛋白胨30～70g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至60～70℃后，依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至100～105℃时，进行一次排气，继续升温至121～123℃时关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在121～123℃、0.15～0.17MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热系统使混合培养基降温至25～28℃保温待用；
所述红薯提取液的制备步骤包括：将红薯洗净去皮，放到蒸煮锅中用水煮，红薯煮至糜烂，用纱布过滤，取其滤液，即为红薯提取液；
所述活化菌种步骤包括：
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
所述接种及培养步骤中，将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在25～30℃下避光培养16～22天。
烘干：将培养好的菌丝体从固体培养基中挖出，利用热风干燥机对其进行烘干处理，至水分含量低于2%止。
膨化：将烘干后的菌丝置入混合搅拌机中加水搅拌，当水含量达到15-20%时进行膨化，膨化温度为115-125℃。
粉碎：用超微粉碎机将膨化的复合菌丝粉进行粉碎，得到粒径为200目的灵芝菌丝超微粉。然后进行灭菌、装袋，制得成品。
本发明的优点在于：
1、首次采用小麦、玉米、黄豆、小米红薯提取液为混合真菌发酵底物，材料来源广、成本低、效果好，推广价值高；
2、本发明的生产方法在生产中易操作、得率高；
3、本发明提供的生产方法环保卫生，生产过程中无三害物质产生；
4、本发明提供的生产方法制备的复合菌丝粉完整保留了相关的功效活性成分，产品的多糖、三萜、微量元素等的活性成分含量高,其中多糖含量≥20%，三萜含量≥1.5%，有机硒含量≥0.03mg/kg；
5、首次采用灵芝、根霉、酵母菌等菌种混合培养，菌种成活率高、菌丝品质高、抗杂菌能力强。
具体实施方式
以下实施例中的菌种来源如下：多孔菌科真菌赤芝（Ganodermaluncidum），山东省鱼台县微生物食用菌研究所制造；
选根霉（甜酒曲），（安琪酵母股份有限公司制造）；
子囊菌科酵母菌（啤酒酵母），（安琪酵母股份有限公司制造）。
实施例1
1、培养基的制备
（1）谷物培养基的制备
将100kg小麦、玉米、小米、黄豆按1:1.5：0.6：1的质量比进行挤压破碎和混合后，加水至含水量37%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121℃，40min，灭菌结束后待培养基温度降至27℃时，放入无菌接种室待接种用；
（2）斜面培养基的制备
红薯提取液的制备：将红薯洗净去皮，按照红薯：水=1:0.8的比例加入到蒸煮锅中，煮开后小火保持微沸15分钟，红薯煮至糜烂，过4层纱布过滤，取其滤液，即为红薯提取液。以下同。
按照质量百分比葡萄糖15%、黄豆粉15%、玉米粉10%、小麦粉13%、磷酸二氢钾0.8%、硫酸镁1%、琼脂5%、蛋白胨7%、余为红薯提取液的比例配置，pH7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121℃，40min；灭菌结束10min后取出试管，趁热摆成斜面，将斜面培养基转移至36℃培养箱中恒温培养18h，无菌落长出方可取出备用；
（3）摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖16%、黄豆粉36%、玉米粉10%、小麦粉10%、磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.5%、蛋白胨7%、余为红薯提取液的比例配置，pH6.8，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121℃，40min；
（4）发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉475g/kg，淀粉300g/kg，葡萄糖150g/kg，磷酸二氢钾10g/kg，硫酸镁5g/kg，蛋白胨70g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至60℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至100℃时进行一次排气，继续升温至121℃时关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在121℃、0.15MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热系统使混合培养基降温至26℃保温待用；
2、菌种的活化
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
3、接种及培养
将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在27℃下避光培养16天；
4、烘干
将培养好的菌丝体从固体培养基中挖出，利用热风干燥机对其进行烘干处理，至水分含量低于2%止；
5、膨化
将烘干后的菌丝置入混合搅拌机中加水搅拌，当水含量达到16%时进行膨化，膨化温度为116℃；
6、粉碎
用超微粉碎机将膨化的复合菌丝粉进行粉碎，得到粒径为200目的灵芝菌丝超微粉；
7、灭菌、装袋。
实施例2
1、培养基的制备
（1）谷物培养基的制备
将100kg小麦、玉米、小米、黄豆按1:1.8：0.8：1.1的质量比进行挤压破碎和混合后，加水至含水量38%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121℃，40min，灭菌结束后待培养基温度降至30℃时，放入无菌接种室待接种用；
（2）斜面培养基的制备
按质量百分比葡萄糖20%、黄豆粉40%、玉米粉11%、小麦粉12%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.2%、琼脂3%、蛋白胨6.5%、余为红薯提取液的比例配置，pH7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：122℃，50min；灭菌结束13min后取出试管，趁热摆成斜面，将斜面培养基转移至32℃培养箱中恒温培养19h，无菌落长出方可取出备用；
（3）摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖21%、玉米粉11%、小麦粉12%、黄豆粉40%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.7%、蛋白胨3%、余为红薯提取液的比例配置，pH7.0，混匀后高温灭菌，灭菌条件：122℃，50min；
（4）发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉450g/kg，淀粉300g/kg，葡萄糖180g/kg，磷酸二氢钾6g/kg，硫酸镁4g/kg，蛋白胨70g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至65℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至103℃时进行一次排气，继续升温至122℃时关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在122℃、0.16MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热系统使混合培养基降温至27℃保温待用；
2、菌种的活化
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
3、接种及培养
将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在28℃下避光培养19天；
4、烘干
将培养好的菌丝体从固体培养基中挖出，利用热风干燥机对其进行烘干处理，至水分含量低于2%止；
5、膨化
将烘干后的菌丝置入混合搅拌机中加水搅拌，当水含量达到17%时进行膨化，膨化温度为115℃；
6、粉碎
用超微粉碎机将膨化的复合菌丝粉进行粉碎，得到粒径为200目的灵芝菌丝超微粉；
7、灭菌、装袋。
实施例3
1、培养基的制备
（1）谷物培养基的制备
将100kg小麦、玉米、小米、黄豆按1:2：1：1.2的质量比进行挤压破碎和混合后，加水至含水量40%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：123℃，60min，灭菌结束后待培养基温度降至35℃时，放入无菌接种室待接种用；
（2）斜面培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖18%、玉米粉12%、小麦粉13%、黄豆粉38%、磷酸二氢钾0.8%、硫酸镁0.2%、琼脂4%、蛋白胨7%、余为红薯提取液的比例配置，pH7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：123℃，60min；灭菌结束15min后取出试管，趁热摆成斜面，将斜面培养基转移至36℃培养箱中恒温培养20h，无菌落长出方可取出备用；
（3）摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖20%、玉米粉12%、小麦粉13%、黄豆粉38%、磷酸二氢钾0.8%、硫酸镁0.2%、蛋白胨3%、余为红薯提取液的比例配制，pH7.2，混匀后高温灭菌，灭菌条件：123℃，60min；
（4）发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉500g/kg，淀粉270g/kg，葡萄糖180g/kg，磷酸二氢钾10g/kg，硫酸镁5g/kg，蛋白胨35g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至70℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至105℃时进行一次排气，继续升温至123℃时关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在123℃、0.17MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热系统使混合培养基降温至28℃保温待用；
2、菌种的活化
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
3、接种及培养
将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在30℃下避光培养16-22天；
4、烘干
将培养好的菌丝体从固体培养基中挖出，利用热风干燥机对其进行烘干处理，至水分含量低于2%止；
5、膨化
将烘干后的菌丝置入混合搅拌机中加水搅拌，当水含量达到20%时进行膨化，膨化温度为125℃；
6、粉碎
用超微粉碎机将膨化的复合菌丝粉进行粉碎，得到粒径为200目的灵芝菌丝超微粉；
7、灭菌、装袋。
Claims (1)
1.一种复合菌丝粉的生产方法，其包括以下步骤：制备培养基、活化菌种、接种及培养、烘干、膨化、粉碎、灭菌及装袋，其特征在于，所述制备培养基的步骤包括：
A:谷物培养基的制备
将小麦、玉米、小米、黄豆按质量份数比1:1.5～2:0.6～1:1～1.2，加水至含水量质量百分比35～40%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；灭菌结束后，待培养基温度降至27～35℃时，放入无菌接种室待接种用；
B:斜面培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖15～20%、黄豆粉15～17%、玉米粉10～12%、小麦粉10～13%、磷酸二氢钾0.3～0.8%、硫酸镁0.2～1%、琼脂3～5%、蛋白胨3～7%、余为红薯提取液的比例配置，pH调至7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；灭菌结束10～15min后取出试管，摆成斜面，将斜面培养基转移至28～36℃培养箱中恒温培养18～20h，无菌落长出方可取出备用；
C:摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖16～21%、黄豆粉15～17%、玉米粉10～12%、小麦粉10～13%、磷酸二氢钾0.3～0.8%、硫酸镁0.2～1%、蛋白胨3～7%、余为红薯提取液的比例配置，pH6.8～7.2，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；
D:发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉450～500g/kg、淀粉250～300g/kg、葡萄糖100～180g/kg、磷酸二氢钾5～10g/kg、硫酸镁2～8g/kg、蛋白胨30～70g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至60～70℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至100～105℃时进行一次排气，继续升温至121～123℃时,关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在121～123℃、0.15～0.17MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热系统使混合培养基降温至25～28℃保温待用；
所述红薯提取液的制备步骤包括：将红薯洗净去皮，放到蒸煮锅中用水煮，红薯煮至糜烂，用纱布过滤，取其滤液，即为红薯提取液；
所述活化菌种步骤包括：
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
所述接种及培养步骤中，将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在25～30℃下避光培养16～22天。
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