CN103381191A - 无糖型灵丹草合剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明是一种无糖型灵丹草合剂及其制备方法。无糖型灵丹草合剂的药物原料重量配比为：臭灵丹草450-550份、橙皮酊15-25份、甜菊素0.3份、苯甲酸钠2-4份。与现有产品相比，本发明无糖型制剂具有口感好、疗效佳、稳定性好的优点，本发明创新在于解决现有产品易滋生微生物增加龋齿，易恶性和肥胖发生率，降低产品内在品质的问题，避免含糖产品对药物疗效的不利影响，为糖尿病患者提供用药选择，扩大了适用人群；本发明显著增强了本产品清热解毒、抗菌消炎、祛痰镇咳之功，在治疗呼吸道炎症、急性扁桃体炎、咽喉炎、支气管炎、排痰不爽等方面疗效确切，安全可靠。

Description

无糖型灵丹草合剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及制药技术领域。

技术背景

中药臭灵丹草（Laggera Herba），别名狮子草、臭叶子、野辣烟、归经草、鱼富有等，系菊科六棱属植物，主要分布于长江流域以南及西南部，主产于我国云南省。灵丹草作为民间用药已有500多年的历史，《滇南本草》记载其：治风热积毒、痈疽、疮疖、疥癣”；<<云南思茅中草药选>>记载其：清热解毒、消脓拔肿、治疗咽喉炎、口腔炎、支气管炎、疟疾、烫烧伤、蛇咬伤；<<云南中草药>>记载其：治疗上呼吸道感染、扁桃体炎、口腔炎、防治流感；《中药大辞典》记载其：具有祛痰作用，治疗急性支气管炎。在云南民间及彝族地区，臭灵丹草被认为是一种抗菌消炎，清热解毒之良药。现代药理研究认为臭灵丹草中的倍半萜酸、倍半萜醇及黄酮类化合物等多种化学成分，具有消炎、镇痛之功，故其被广泛用于治疗感冒、咽喉炎、支气管炎、疟疾等，同时也可作为外敷药用来治疗疥疮、肿毒、烫烧伤、毒蛇咬伤等。

臭灵丹草已被开发出多种剂型应用于临床并且收到了较好的疗效，主要有灵丹草颗粒剂、灵丹草口服液、灵丹草胶囊剂、灵丹草片剂、臭灵丹注射液等。

中国专利申请200410023040.4公开了一种“灵丹草分散片及其制备方法”，主要组成成分为中药灵丹草，它是含有适量辅料的分散片；灵丹草分散片的制备方法是取灵丹草药材净选，去杂质，用水蒸气蒸馏法收集挥发油，蒸馏后的水溶液滤过，药渣加水煎煮二次，每次1小时，过滤，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，减压浓缩后干燥成干膏，粉碎成干膏粉；加入制粒辅料制粒后，加入压片辅料，混合均匀，喷入挥发油，压片，或压片后再外包衣，包衣材料为薄膜衣预混剂，即得灵丹草分散片。灵丹草分散片优点是口服后在水中3分钟内迅速地崩解成均匀分散的细微颗粒，有利于药物的溶出、吸收。

中国专利申请200910261202.0公开了一种“灵丹草油提取物、其制备方法、药物组合物及用途”，提供一种药效明确、结构清楚的灵丹草挥发油提取物，制备前述的灵丹草挥发油提取物的方法，用于治疗急、慢性咽炎的药物组合物以及所述的灵丹草挥发油提取物或所述的药物组合物的用途。本发明的提取物在制成喷雾剂时在治疗呼吸道疾病方面具有突出的优势，使药物直接到达作用部位，避免首过效应，提高了该药物的生物利用度，减少药物用量，减轻或避免药物不良反应。

近年来随着我国人民生活水平提高，加之膳食结构不合理，大量高能量食物摄取，尤其是糖分过量摄取，导致糖尿病患病比例快速增加，特别是患糖尿病的儿童数量急剧上升，目前我国18岁以下青少年肥胖人群已达1.2亿，12至18岁的孩子中1.9%患有糖尿病，相当于美国同龄人(0.5%)的四倍，中国有170万青少年饱受糖尿病之苦，另外还有2770万人被认为是糖尿病前期。由于历史、经济原因，我国早期开发的一些疗效显著的药物中因含有乳糖、蔗糖等糖分含量高的辅料，导致糖尿病患者不能服用该类药物，同时，糖分的过量摄入，对人体健康及炎症的治疗也有不利影响。世界卫生组织曾调查了23个国家人口的死亡原因，得出结论：嗜糖之害甚于吸烟，长期食用含糖量高的食物会使人的寿命明显缩短，并提出了“戒糖”的口号。研究发现，经常过量食糖的女性易患多种疾病，常见病阴道炎就是其一。因此，如何使含糖量高的药物换代升级，使之成为每位患者都能安全、放心使用的药品，已成为制药工作者义不容辞的责任和义务。原灵丹草合剂（国家药品标准：WS-10741(ZD-0741)-2002-2012Z）主要以蔗糖为矫味剂，限制了糖尿病患者、肥胖患者及龋齿易感人群对该药的使用。

蔗糖是微生物及细菌的良好培养基，其富含的碳源是微生物、细菌生长发育必不可少的营养物质。液体制剂特别是以水为溶剂的液体制剂，易被微生物污染而发霉变质，尤其是含有糖类、蛋白质等营养物质的液体制剂，更容易引起微生物的滋长和繁殖。污染微生物的液体制剂会引起理化性质的变化，严重影响制剂质量，有时还会产生细菌毒素危害人体，导致出现药品质量事故。

在现有产品中，由于含有蔗糖，其清热解毒消炎镇痛的功能受到较大程度的影响，限制了药物有效的治疗作用。卫生部、国家医药管理局于1988就联合发出“关于抓紧研究降低部分药品含糖比例的通知”[（88）卫药字第29号]，认为某些药品以大量食糖作为矫味剂和赋形剂，是完全不必要的，在临床治疗上使许多老年和禁糖患者的用药受到限制。用蔗糖作矫味剂，在实践中也发现有诸多弊病：⑴中药口服液多呈酸性，而蔗糖在酸性条件下，稳定性差，甜味降低，从而导致蔗糖的用量大，成本增高。⑵蔗糖对中药口服液是有选择性的，在补益药剂中较易显出甜味，而在清热解毒、抗菌消炎类药剂中则效果甚微。⑶中医药认为蔗糖本身就是一味对人体有影响的药物，不能忽略它的药理作用，多食令人心痛，损齿。（4）蔗糖能同某些中药的蛋白质、鞣酸等成分起化学变化，产生有害物质，也能分解某些药中的有效成分，同时还能干扰矿物质和维生素在人体肠道的消化吸收。

发明内容

本发明的目的是提供一种临床应用效果好、安全性好、稳定性好、避免含糖产品对药物疗效的不利影响，同时适合儿童口感、防龋齿并可供糖尿病患者使用的无糖型灵丹草合剂。

本发明的另一目的是提供这种合剂的制备方法。

本发明所述的无糖型灵丹草合剂的成分的重量配比为：臭灵丹草450-550份，橙皮酊15-25份，甜菊素0.3份，苯甲酸钠2-4份，纯化水加至1000份。

优选的无糖型灵丹草合剂的成分的重量配比为：臭灵丹草500份，橙皮酊18.4份，甜菊素1.4份，苯甲酸钠3.5份，纯化水加至1000份。

甜菊素为我国批准使用的合成类低热量、非营养性高倍甜味剂，谓无热量之代糖产品，它具有甜度高，用量少，能量值为0或几乎为0，防龋齿，不引起肥胖等优点，是糖尿病患者饮食或瘦身食品常用的甘味料。

本发明所述的无糖型灵丹草合剂的制备方法由以下步骤组成：

一、取臭灵丹草，用水蒸气蒸馏收集挥发油，蒸馏后的水溶液滤过，滤液备用；药渣加水煎煮二次，每次1小时，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，减压浓缩至800份，加入甜菊素，搅拌均匀，静置24小时，滤过，滤液备用；

二、将收集的挥发油备用；

三、将苯甲酸钠用纯化水溶解，备用；

四、将挥发油、苯甲酸钠溶液、橙皮酊分别加入到步骤（一）的滤液中，加纯化水至1000份，搅匀，灭菌，灌装，即得。

本发明的技术方案是基于云南民间特色药物—臭灵丹草与现代制剂研究成果组方而成。方中臭灵丹草，为傣族常用草药，性辛、苦、寒，味微苦，具有清热解毒，止咳祛痰，用于风热感冒，咽喉肿痛，肺热咳嗽；陈皮酊芳香健胃，为芳香性苦补健胃良药；甜菊素亦称甜菊糖苷，是从多年生草本植物—甜叶菊中提取而得的新型甜味剂，具有甜味持久，甜度相当于蔗糖的200-300倍，它不会产生任何碳水化合物或血糖负荷,可帮助糖尿病患者调节血糖和胰岛素水平，本发明具有口感好、疗效佳、稳定性好的优点，解除了糖尿病患者用药的局限性，提高了药效、扩大了适用人群；本发明产品具有清热解毒、抗菌消炎、祛痰镇咳之功，在治疗呼吸道炎症、急性扁桃体炎、咽喉炎、支气管炎、排痰不爽等方面疗效确切，安全可靠。

本申请所述的无糖型灵丹草合剂与原灵丹草合剂（国家药品标准：WS-10741(ZD-0741)-2002-2012Z）相比，具有以下优势：

①扩大了药品使用的适用人群。糖尿病患者可放心服用无糖型灵丹草合剂治疗相关疾病，而含蔗糖的原灵丹草合剂对糖尿病患者而言应慎用。

②口感气味更好。无糖型灵丹草合剂用橙皮酊初矫口味，用甜菊素复矫口味，使之口感柔顺香甜，气味清新怡人。

③制剂的稳定性更高。蔗糖能为微生物提供碳源，有利于其生长繁殖，而用甜菊素替代蔗糖则可避免这种情况发生，有效提高制剂抗微生物污染的稳定性。

④疗效更佳。诸多实验证实无糖型灵丹草合剂新在整体疗效，特别是在抗菌消炎方面要优于原灵丹草合剂。

本发明有关的试验：

一、蔗糖替代品选择条件、使用量及处方确定

⒈蔗糖替代品选择

选择标准：

①糖尿病人、肥胖儿童可用；

②甜度高，用量少；

③口感令人愉悦。

通过筛选及评估，我们选择甜菊素，因甜菊素甜度高、甜味持久，低热值，不会造成龋齿，且完全满足上述条件。

⒉蔗糖替代品选择试验配方

表1

品名	原配方	配方1	配方2	配方3
					臭灵丹草	500g	500g	500g	500g
橙皮酊	18.4g（20ml）	18.4g（20ml）	18.4g（20ml）	18.4g（20ml）
					蔗糖	170g	-------	-------	-------
苯甲酸钠	4g	4g	3.5g	3g
					甜菊素	-------	1.8g	1.4g	1.0g
纯化水	加至1000ml	加至1000ml	加至1000ml	加至1000ml

⒊蔗糖替代试验结果

按新、老灵丹草合剂的制备方法将2中各配方制成成品，进行口感及性状比较，并测定相关质量指标，结果见表2。

表2

由上表结果可知，用甜菊素替代蔗糖，在甜度与原配方相当的情况下，可明显减少制剂的沉淀物，提高有效成分总黄酮含量。其中配方2中甜菊素用量为1.4g时，甜度甚好，又不影响本品的清爽气味。按此用量进行小试。

二、无糖型灵丹草合剂的质量稳定性考察

按新确定的配方连续试制三批，对样品的性状、相对密度、PH值、总黄酮含量进行6个月考察，评价其质量稳定性。并与原配方制备的灵丹草合剂作对照进行试验

表3

从上表可知，按原配方制得的灵丹草合剂外观质量存在一定缺陷，贮存过程中有沉淀现象。本发明无糖型灵丹草合剂因采用新型矫味剂甜菊素，使用量大为减少，致使成品澄清度较好，无沉淀物，质量稳定性优于原灵丹草合剂；由于辅料用量减少，对制剂中有效成分影响降低，使得药剂中总黄酮含量有所提高。

三、无糖型灵丹草合剂的体外抗菌活性试验

1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌株金黄色葡萄球菌（26001）、大肠杆菌（44110）、沙门氏菌（50094）、绿脓杆菌（10102）、均购自云南省食品药品检定所，由本公司微生物检验室冻干保存。

1.1.2药物无糖型灵丹草合剂（每1ml含原药材0.5g），由云南名扬药业有限公司提供；原含糖灵丹草合剂（每1ml含原药材0.5g），由云南名扬药业有限公司提供；

1.1.3培养基  普通肉汤培养基，北京三药科技开发公司提供。

1.2方法

1.2.1菌液的制备  上述菌株分别接种于肉汤培养基中传5代，取纯种再接种于普通琼脂培养基，置37℃培养24h，取菌苔制成相应试验菌悬液，用标准比浊管调整细菌浓度为10⁵/ml备用。

1.2.2药液的配制  用相应培养液将试验药物溶解。无糖型灵丹草合剂配成每ml含原药材0.20g；含糖灵丹草合剂配成每ml含原药材0.20g；经55.16kPa20min高压蒸汽灭菌后备用。

1.2.3抗菌实验  ①药液稀释：在4排试验管中以相应的培养液将原液作对倍稀释至第10管，每管总量为1ml，各排第11管只加相应的培养液1ml作为对照管。②抑菌试验：上述4排药物稀释管中，分别依次加入大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌菌液10⁵/ml，每管0.05ml，混匀，置37℃培养24h，观察结果见表四及表五。③结果判断：肉眼观察凡对照管出现混浊、沉淀现象者表示有菌生长，实验有效。同排各试验管，凡培养基清彻透亮者为抑菌试验阳性。

表4无糖型灵丹草合剂对病原菌的抑菌试验结果

表5含糖型灵丹草合剂对病原菌的抑菌试验结果

2结果

体外抗菌试验表明，无糖型灵丹草合剂对4种菌的最小抑菌浓度分别为金黄色葡萄球菌0.781g/L、大肠杆菌1.563g/L绿脓杆菌6.25g/L沙门氏菌1.563g/L；含糖型灵丹草合剂对4种菌的最小抑菌浓度分别为金黄色葡萄球菌12.5g/L、大肠杆菌25g/L绿脓杆菌50g/L沙门氏菌25g/L。

3讨论

实验表明本发明专利无糖型灵丹草合剂对上述4种病原菌都有较强的抗菌能力，其抗菌能力显著强于含糖型灵丹草合剂，以金黄色葡萄球菌为例，无糖型灵丹草合剂最小抑菌浓度是含糖型灵丹草合剂的16倍。

四、无糖型灵丹草合剂对大鼠急性咽炎模型的影响

1.试验用具

样品与试剂：无糖型灵丹草合剂（每1ml含原药材0.5g）、原灵丹草合剂（每1ml含原药材0.5g），由云南名扬药业有限公司提供。蔗糖，嘉兴市白浪淀粉制品有限公司提供，用水配成17%蔗糖溶液。氨水：500ml瓶装，浓度25%～28%。

试验动物：Wistar大鼠，由昆明医科大学动物中心提供。

仪器：手柄式喉头喷雾器：L56-03型，显微镜：奥林巴斯BX-51。医用额镜、压舌板。病理检查设备。

2.实验方法：

⑴动物模型

选用Wister大鼠50只，体重160～200g，雌雄各半。随机分成5组，即空白对照组、模型组、安慰剂组（蔗糖水溶液）、阳性药对照组（灵丹草合剂）、无糖型灵丹草合剂试验组，每组10只。除空白对照组外，其余4组动物上午8时及下午4时各用25%氨水喷其咽部1次，连续喷3天造模，每日观察记录动物外观状态及动物咽部情况。造模后第4天起，各组动物按下述给药剂量开始灌胃给药，每日1次，连续给药5天。给药剂量分别为，阳性药组（灵丹草合剂）：8.4ml/kg体重；无糖型灵丹草合剂试验组：8.4ml/kg体重；空白对照组及模型组：蒸馏水8.4ml/kg体重。安慰剂组:17%蔗糖溶液8.4ml/kg体重。末次给药45分钟后，拉椎处死动物，摘取各组动物咽部黏膜及其下组织用10%福尔马林溶液固定，切片，进行病理组织学检查。

⑵观察指标及判定标准

表6黏膜上皮增生程度病理评分表

⑶实验记录及数据

咽部组织病理检查结果，空白对照组大鼠咽部组织的黏膜上皮为鳞状上皮结构，层次清晰，黏膜下组织、腺体正常。模型组大鼠咽部组织的黏膜上皮片状坏死、脱落，黏膜上皮及黏膜下组织大量炎细胞弥漫性浸润，黏膜下组织明显血管扩张充血、出血，部分腺体萎缩。表明急性咽炎模型复制成功。原灵丹草合剂对照组、无糖型灵丹草合剂组大鼠咽部组织的黏膜上皮增生程度积分及炎细胞浸润程度积分与模型组比较均有所降低，无糖型灵丹草合剂降低更明显。安慰剂制剂大鼠咽部组织的黏膜上皮片状坏死、脱落，黏膜上皮及黏膜下组织大量炎细胞弥漫性浸润，黏膜下组织明显增生，血管扩张充血、出血，部分腺体萎缩。提示无糖型灵丹草合剂对氨水所致的急性咽炎模型咽部黏膜上皮增生程度及炎症细胞浸润程度的缓解作用强于原灵丹草合剂；蔗糖有加重咽炎症状的趋势。

表8各试验组动物急性咽炎病理变化的比较

⑷实验结论

上述实验表明：①原灵丹草合剂阳性药对照组、无糖型灵丹草合剂组大鼠咽部组织的黏膜上皮增生程度积分及炎细胞浸润程度积分与模型组比较均明显降低，说明其具有较强的抗炎药理作用；②蔗糖安慰剂组对氨水所致的急性咽炎无任何效果，反而有加重病情的趋势；③同等剂量下，原灵丹草合剂由于含有蔗糖的影响，对氨水所致急性咽炎治疗效果远不及无糖型灵丹草合剂好。

五、无糖型灵丹草合剂对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响

1.试验用具

样品与试剂：无糖型灵丹草合剂（每1ml含原药材0.5g）、原灵丹草合剂（每1ml含原药材0.5g），由云南名扬药业有限公司提供。二甲苯，由天津化学试剂厂提供。

试验动物：SD小鼠，由昆明医科大学动物中心提供。

2.试验方法

取体重27-30g小鼠30只，雌雄各半，随机分为成三组，即无糖型灵丹草合剂试验组、原灵丹草合剂对照组及空白对照组，每组10只，灌胃给药，试验组给无糖型灵丹草合剂：10ml/kg体重；对照组给原灵丹草合剂：10ml/kg体重；空白对照组给等容量蒸馏水，每日灌胃给药1次，连续3d，末次给药后1h，将0.3ml二甲苯涂于小鼠右耳廓前后两面，30min后将小鼠处死，用直径9mm打孔器在相同的部位去下左、右耳片，称重，以左、右耳片重量差为肿胀度，结果见表。

表9无糖型灵丹草合剂对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响

3.实验结论

①无糖型灵丹草合剂和原灵丹草合剂对二甲苯所致的引起的耳廓肿胀均有抑制作用，与空白对照组比较P＜0.01。②同等剂量下，原灵丹草合剂由于所含蔗糖的影响，抑制效果不及无糖型灵丹草合剂，P＜0.05。

六、无糖型灵丹草合剂对体内感染金黄色葡萄球菌的小鼠保护作用观察。

1.试验用具

样品：无糖型灵丹草合剂（每1ml含原药材0.5g）、原灵丹草合剂（每1ml含原药材0.5g），由云南名扬药业有限公司提供。

金黄色葡萄球菌（CC25922）：来源于中国药品生物制品检定研究院。

水解酪蛋白琼脂（MH）培养基：北京三药生物科技有限公司提供。

试验动物：SD小鼠，由昆明医科大学动物中心提供。

2.试验方法

2.1菌液的制备将金黄色葡萄球菌定量接种于适宜的MH肉汤中，放孵箱37℃增菌6小时，取此菌液0.1m1转种于10m1MH肉汤中，放孵箱37℃孵育18小时，该菌为原菌液，适当稀释后，用5%灭菌胃膜素配制成感染动物所需浓度菌液，备用。

2.2最小致死量(MLD)实验将原菌液用5%胃膜素进行递次稀释“选健康小鼠60只，雌雄各半，分别腹腔注射不同浓度的菌液，进行金黄色葡萄球菌的最小致100%动物死亡测试，测得金黄色葡萄球菌MLD为1.1×10⁵CFU/m1”。

2.3体内保护实验将小鼠随机分为3组，即无糖型灵丹草合剂试验组；灵丹草合剂阳性对照组；空白对照组（给水），每组小鼠20只。取培养18小时的金黄色葡萄球菌，用5%胃膜素稀释为MLD的菌悬液，每鼠腹腔注射0.5m1，于感染后1h；12h；24h；48h；72h；84h；96h；108h灌胃给药，给药体积10ml/kg体重，记录小鼠死亡数。

3.体内抑菌作用试验结论

①各组动物感染细菌后30min出现怠动，继而出现卧位，精神萎靡，呼吸急促，死亡多发生在48h之内。②无糖型灵丹草合剂试验组和灵丹草合剂对照组随着用药次数的增加感染死亡时间延迟。空白对照组小鼠死亡率为95%；无糖型灵丹草合剂试验组小鼠死亡率为15%，灵丹草合剂对照组小鼠死亡率为50%，与空白组对照差异具有统计学意义（p<0.05）。③从小鼠死亡率分析，无糖型灵丹草合剂对体内感染金黄色葡萄球菌的保护作用明显强于原灵丹草合剂（P＜0.05）。

本发明无糖型灵丹草合剂适用于风热犯表所致的咽喉肿痛，肺热咳嗽，急性咽炎、扁桃体炎，上呼吸道感染等证候患者；对风寒束表所致的鼻塞流涕、发热畏寒、咳嗽等亦有效。其使用安全、简便、质量稳定，可供糖尿病患者、青少年肥胖患者使用。

具体实施方式：

实施例：

1、无糖型灵丹草合剂的成分重量配比为：臭灵丹草500份，橙皮酊18.4份，甜菊素1.4份，苯甲酸钠3.5份。纯化水加至1000份。

无糖型灵丹草合剂的制备方法为：

1）取臭灵丹草，用水蒸气蒸馏收集挥发油，蒸馏后的水溶液滤过，滤液备用；药渣加水煎煮二次，每次1小时，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，减压浓缩至约800份，加入甜菊素，搅拌均匀，静置24小时，滤过，滤液备用。

2）将收集的挥发油备用。

3）将苯甲酸钠用适量纯化水溶解，备用。

4）将挥发油、苯甲酸钠溶液、橙皮酊分别加入到1）项下的臭灵丹草-甜菊素药液中，加水至1000份,搅匀，灭菌，灌装，即得。

Claims (3)

1.一种无糖型灵丹草合剂，其特征在于无糖型灵丹草合剂的药物原料的重量配比为：臭灵丹草450-550份、橙皮酊15-25份、甜菊素0.3份、苯甲酸钠2-4份，纯化水加至1000份。

2.根据权利要求1所述的无糖型灵丹草合剂，其特征在于无糖型灵丹草合剂的药物原料的重量配比为：臭灵丹草500份，橙皮酊18.4份，甜菊素1.4份，苯甲酸钠3.5份，纯化水加至1000份。

3.根据权利要求1所述的无糖型灵丹草合剂的制备方法，其特征在于由以下步骤组成：

（一）、取臭灵丹草，用水蒸气蒸馏收集挥发油，蒸馏后的水溶液滤过，滤液备用；药渣加水煎煮二次，每次1小时，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，减压浓缩至800份，加入甜菊素，搅拌均匀，静置24小时，滤过，滤液备用；

（二）、将收集的挥发油备用；

（三）、将苯甲酸钠用纯化水溶解，备用；

（四）、将挥发油、苯甲酸钠溶液、橙皮酊分别加入到步骤（一）的滤液中，加纯化水至1000份，搅匀，灭菌，灌装，即得。