CN103343001A - 一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法 - Google Patents
一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103343001A CN103343001A CN2013102869820A CN201310286982A CN103343001A CN 103343001 A CN103343001 A CN 103343001A CN 2013102869820 A CN2013102869820 A CN 2013102869820A CN 201310286982 A CN201310286982 A CN 201310286982A CN 103343001 A CN103343001 A CN 103343001A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cellulose
- nano
- amino acid
- fluorescence response
- esterification
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 0 C=C*=C(CCCC1)C1O Chemical compound C=C*=C(CCCC1)C1O 0.000 description 1
- PJSNQCAWMYREAY-UHFFFAOYSA-N CC(OCC1c(cccc2)c2-c2ccccc12)=O Chemical compound CC(OCC1c(cccc2)c2-c2ccccc12)=O PJSNQCAWMYREAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
本发明公开了一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法,包括以下步骤:(1)氨基酸与纳米纤维素发生酯化反应;(2)在碱性条件下,脱去保护基,得到氨基酸酯化纳米纤维素;(3)以氨基酸作为连接臂,将纳米纤维素与羧基荧光素分子连接,制得pH荧光响应性纳米纤维素。本发明以氨基酸作为连接臂,可以有效地实现纳米纤维素与荧光素的连接,可避免使荧光素与纤维素分子相距太近而发生荧光淬灭,制备方法简单、成本低、条件温和。所制备的pH荧光响应性纳米纤维素发光性稳定,且具有较好的光响应性,可应用于药物缓释系统、光学生物成像和荧光示踪等生物医学领域。
Description
技术领域
本发明属于纤维素改性领域,具体涉及一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法。
背景技术
荧光分析技术作为一种高灵敏度、高选择性的分析方法,目前在药物分析、疾病诊断、细胞成像和荧光示踪等生物医学领域的应用十分广泛。但天然纤维素本身不含荧光基团,因此对纤维素进行荧光标记。常用的荧光标记物主要包括有机染料(如异硫氰酸荧光素、罗丹明类染料、菁染料、噻嗪类和噁嗪类近红外荧光染料及二氟化硼-二吡咯甲烷(BODIPY)荧光染料等)、荧光蛋白及荧光量子点等。但是由于荧光素通常具有较大的平面共轭结构,直接标记在纤维素上容易发生荧光淬灭,故需要在荧光素与纤维素分子间设计一种连接臂,该连接臂一端与荧光素连接,另一端可以与纤维素连接,这样就可以避免使荧光素与纤维素分子相距太近。氨基酸链长较为适中,能够满足连接臂链长要求,而且大多数氨基酸都同时含有羧基和氨基,能与荧光素羧基或巯基发生链接反应,然后再通过氨基酸羧基与纤维素分子连接,从而有效地实现了荧光试剂与纤维素之间的连接。本发明所述的制备方法简单、成本低、条件温和,可制得发光性稳定,pH响应性良好的荧光纳米纤维素。
发明内容
本发明的目的在于提供一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法,本发明以氨基酸作为连接臂,可以有效地实现纳米纤维素与荧光素的连接,可避免使荧光素与纤维素分子相距太近而发生荧光淬灭,制备方法简单、成本低、条件温和。所制备的pH荧光响应性纳米纤维素发光性稳定,且具有较好的光响应性。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法包括以下步骤:
(1)氨基酸与纳米纤维素(根据专利“应用酸性阳离子交换树脂制备纳米晶体纤维素I的方法(ZL201010123122.1)”制备得到)发生酯化反应;
(2)在碱性条件下,脱去保护基,得到氨基酸酯化纳米纤维素;
(3)以氨基酸作为连接臂,将纳米纤维素与羧基荧光素分子连接,制得pH荧光响应性纳米纤维素。
步骤(1)的具体工艺为:纳米纤维素与氨基酸在有机溶剂中发生酯化反应,以4-二甲氨基吡啶(DMAP)作为催化剂,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)为活化剂,芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl)为氨基保护剂,制得通式(I)的酯化纳米纤维素: ;其中R为氨基酸的侧链,所述的氨基酸为甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、丝氨酸中的一种,用量为纳米纤维素质量的1~2倍,所述的有机溶剂为N, N-二甲基甲酰胺(DMF)、甲酰胺或二甲基亚砜(DMSO)。
步骤(3)的具体工艺为:将步骤(2)的氨基酸酯化纳米纤维素分散于溶剂中,加入羧基荧光素,N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC),于室温下避光磁力搅拌反应10~24 h,反应完成后,多次离心、洗涤脱去未反应试剂,纯化后制得通式(III)的pH荧光响应性纳米纤维素:;其中R1和R2分别选取氯基或乙酸基,所述的N-羟基琥珀酰亚胺和N,N’-二环己基碳二亚胺的用量是氨基酸酯化纳米纤维素质量的3~5倍,所述的溶剂为N, N-二甲基甲酰胺(DMF)、甲酰胺或二甲基亚砜(DMSO),所述的羧基荧光素为5(6)-羧基-2’,7’-二氯荧光素:或2', 7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素:。
本发明的显著优点在于:以氨基酸作为连接臂,可以有效地实现纳米纤维素与荧光素的连接,可避免使荧光素与纤维素分子相距太近而发生荧光淬灭,制备方法简单、成本低、条件温和。所制备的pH荧光响应性纳米纤维素发光性稳定,且具有较好的pH响应性。
附图说明
图1为本发明实施例1中纳米纤维素、氨基酸酯化纳米纤维素和所制得的pH荧光响应性纳米纤维素的X射线光电子能谱图。
图2为本发明实施例1中所制得的pH荧光响应性纳米纤维素在不同pH值溶液中的荧光光谱图。
图3为本发明实施例1中所制得的pH荧光响应性纳米纤维素在不同浓度时的荧光光谱图。
具体实施方式
实施例1
称取1 g 纳米纤维素干燥样品,0.08 g 4-二甲氨基吡啶(DMAP),1.5 g亮氨酸,1.25 g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl),0.75 g芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl),加入50 mL N, N-二甲基甲酰胺将反应物混合均匀,于室温下磁力搅拌反应15 h。反应完成后,在9000 rpm转速下离心脱去液体,然后先用去离子水多次洗涤留下的固体样品,再用乙醇溶液洗涤两次,得到Fmoc保护氨基纤维素样品。为脱去Fmoc保护,将Fmoc保护氨基纳米纤维素样品分散于20 mL 20 %(v/v)的哌啶/DMF溶液,搅拌20 min即可脱除Fmoc,得到氨基酸酯化纳米纤维素,在-53 °C真空冷冻干燥样品。
再称取0.1 g制备的氨基酸酯化纳米纤维素,0.01 g 5(6)-羧基-2’,7’-二氯荧光素(CDCF),0.5 g N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和0.5 g N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC),分散于50 mL DMF中,于室温下避光磁力搅拌反应15 h。反应完成后,多次离心、洗涤脱去未反应试剂,用紫外-可见分光光度计(UV-vis)在270 nm处检测离心上清液,直至在此波长下无吸收,说明已完全脱除未反应CDCF,纯化后样品即为具有pH荧光响应性的纳米纤维素,X射线光电子能谱图(XPS)如图1所示。图2和图3所示分别为pH荧光响应性纳米纤维素在不同pH和浓度条件下的荧光光谱图。
实施例2
称取1 g 纳米纤维素干燥样品,0.08 g 4-二甲氨基吡啶(DMAP),1.5 g缬氨酸,1.25 g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl),0.75 g芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl),加入50 mL N, N-二甲基甲酰胺将反应物混合均匀,于室温下磁力搅拌反应15 h。反应完成后,在9000 rpm转速下离心脱去液体,然后先用去离子水多次洗涤留下的固体样品,再用乙醇溶液洗涤两次,得到Fmoc保护氨基纤维素样品。为脱去Fmoc保护,将Fmoc保护氨基纳米纤维素样品分散于20 mL 20 % (v/v)的哌啶/DMF溶液,搅拌20 min即可脱除Fmoc,得到氨基酸酯化纳米纤维素,在-53℃真空冷冻干燥样品。
再称取0.1 g制备的氨基酸酯化纳米纤维素,0.01 g 5(6)-羧基-2’,7’-二氯荧光素(CDCF),0.5 g N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和0.5 g N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC),分散于50 mL DMF中,于室温下避光磁力搅拌反应15 h。反应完成后,多次离心、洗涤脱去未反应试剂,用紫外-可见分光光度计(UV-vis)在270 nm处检测离心上清液,直至在此波长下无吸收,说明已完全脱除未反应CDCF,纯化后样品即为具有pH荧光响应性的纳米纤维素。
实施例3
称取1 g 纳米纤维素干燥样品,0.08 g 4-二甲氨基吡啶(DMAP),1.0 g亮氨酸,1.25 g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl),0.75 g芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl),加入50 mL N, N-二甲基甲酰胺将反应物混合均匀,于室温下磁力搅拌反应15 h。反应完成后,在9000 rpm转速下离心脱去液体,然后先用去离子水多次洗涤留下的固体样品,再用乙醇溶液洗涤两次,得到Fmoc保护氨基纤维素样品。为脱去Fmoc保护,将Fmoc保护氨基纳米纤维素样品分散于20 mL 20 % (v/v)的哌啶/DMF溶液,搅拌20 min即可脱除Fmoc,得到氨基酸酯化纳米纤维素,在-53℃真空冷冻干燥样品。
再称取0.1 g制备的氨基酸酯化纳米纤维素,0.01 g 2', 7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素,0.5 g N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和0.5 g N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC),分散于50 mL二甲基亚砜(DMSO)中,于室温下避光磁力搅拌反应15 h。反应完成后,多次离心、洗涤脱去未反应试剂,纯化后样品即为具有pH荧光响应性的纳米纤维素。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰,皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (6)
1.一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)氨基酸与纳米纤维素发生酯化反应;
(2)在碱性条件下,脱去保护基,得到氨基酸酯化纳米纤维素;
(3)以氨基酸作为连接臂,将纳米纤维素与羧基荧光素分子连接,制得pH荧光响应性纳米纤维素。
3.根据权利要求1所述的pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法,其特征在于:步骤(2)的具体工艺为:将步骤(1)的酯化纳米纤维素在体积分数为10~20%的哌啶/N, N-二甲基甲酰胺溶液中搅拌10~25 min,得到通式(II)的氨基酸酯化纳米纤维素:。
4.根据权利要求1所述的pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法,其特征在于:步骤(3)的具体工艺为:将步骤(2)的氨基酸酯化纳米纤维素分散于溶剂中,加入羧基荧光素,N-羟基琥珀酰亚胺和N,N’-二环己基碳二亚胺,于室温下避光磁力搅拌反应10~24 h,反应完成后,多次离心、洗涤脱去未反应试剂,纯化后制得通式(III)的pH荧光响应性纳米纤维素:;其中R1和R2分别选取氯基或乙酸基,所述的N-羟基琥珀酰亚胺和N,N’-二环己基碳二亚胺的用量是氨基酸酯化纳米纤维素质量的3~5倍,所述的溶剂为N, N-二甲基甲酰胺、甲酰胺或二甲基亚砜,所述的羧基荧光素为5(6)-羧基-2’,7’-二氯荧光素或2', 7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素。
5.一种如权利要求1所述的方法制得的pH荧光响应性纳米纤维素。
6.一种如权利要求1所述的方法制得的pH荧光响应性纳米纤维素的应用,其特征在于:所述的pH荧光响应性纳米纤维素应用于药物缓释系统、光学生物成像和荧光示踪。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2013102869820A CN103343001A (zh) | 2013-07-10 | 2013-07-10 | 一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2013102869820A CN103343001A (zh) | 2013-07-10 | 2013-07-10 | 一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103343001A true CN103343001A (zh) | 2013-10-09 |
Family
ID=49277831
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2013102869820A Pending CN103343001A (zh) | 2013-07-10 | 2013-07-10 | 一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103343001A (zh) |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105968215A (zh) * | 2016-03-31 | 2016-09-28 | 北京理工大学 | 一种纳米纤维素接枝氨基酸的方法 |
CN106706576A (zh) * | 2016-11-16 | 2017-05-24 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种pH响应型可逆荧光探针及其制备方法 |
CN108559485A (zh) * | 2018-02-27 | 2018-09-21 | 南京林业大学 | 一种检测金属离子的纳晶纤维素荧光探针及其制备方法 |
CN109342382A (zh) * | 2018-11-23 | 2019-02-15 | 复旦大学 | 一种带有pH响应荧光探针的脱酸功能纸的制备方法 |
CN109608556A (zh) * | 2018-12-13 | 2019-04-12 | 福建农林大学 | 一种光响应肉桂酸衍生物接枝纳米纤维素的制备方法 |
CN109632755A (zh) * | 2019-01-18 | 2019-04-16 | 闽江学院 | 一种检测氯离子的纳米纤维素探针的制备方法 |
CN109762073A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-05-17 | 闽江学院 | 荧光纤维素纳米纤维的制备方法 |
CN111116760A (zh) * | 2018-10-31 | 2020-05-08 | 航天特种材料及工艺技术研究所 | 荧光纳米纤维素及其制备方法 |
CN111172752A (zh) * | 2020-02-21 | 2020-05-19 | 江南大学 | 一种棉织物无甲醛无强力损失的抗皱整理方法 |
CN113603797A (zh) * | 2021-08-06 | 2021-11-05 | 齐鲁工业大学 | 一种氨基纳米纤维素及其制备方法 |
CN116640546A (zh) * | 2023-05-30 | 2023-08-25 | 南通市乐佳涂料有限公司 | 一种保温抗菌聚氨酯黏合剂材料及其制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008004529A1 (fr) * | 2006-07-04 | 2008-01-10 | National University Corporation Okayama University | Nouveau dérivé fluorescent d'acide aminé et son procédé de production |
CN102414277A (zh) * | 2009-03-20 | 2012-04-11 | Fp创新研究中心 | 具有新颖性质的纤维素材料 |
-
2013
- 2013-07-10 CN CN2013102869820A patent/CN103343001A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008004529A1 (fr) * | 2006-07-04 | 2008-01-10 | National University Corporation Okayama University | Nouveau dérivé fluorescent d'acide aminé et son procédé de production |
CN102414277A (zh) * | 2009-03-20 | 2012-04-11 | Fp创新研究中心 | 具有新颖性质的纤维素材料 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
J. VINCENT EDWARDS等: "Immobilization of lysozyme-cellulose amide-linked conjugates on cellulose I and II cotton nanocrystalline preparations", 《CELLULOSE》, vol. 19, no. 2, 20 December 2011 (2011-12-20), pages 495 - 506, XP035017005, DOI: doi:10.1007/s10570-011-9637-5 * |
SHUPING DONG等: "Fluorescently Labeled Cellulose Nanocrystals for Bioimaging Applications", 《JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY》, vol. 129, no. 45, 19 October 2007 (2007-10-19), pages 13810 - 13811 * |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105968215A (zh) * | 2016-03-31 | 2016-09-28 | 北京理工大学 | 一种纳米纤维素接枝氨基酸的方法 |
CN106706576B (zh) * | 2016-11-16 | 2019-04-23 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种pH响应型可逆荧光探针及其制备方法 |
CN106706576A (zh) * | 2016-11-16 | 2017-05-24 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种pH响应型可逆荧光探针及其制备方法 |
CN108559485A (zh) * | 2018-02-27 | 2018-09-21 | 南京林业大学 | 一种检测金属离子的纳晶纤维素荧光探针及其制备方法 |
CN111116760A (zh) * | 2018-10-31 | 2020-05-08 | 航天特种材料及工艺技术研究所 | 荧光纳米纤维素及其制备方法 |
CN109342382A (zh) * | 2018-11-23 | 2019-02-15 | 复旦大学 | 一种带有pH响应荧光探针的脱酸功能纸的制备方法 |
CN109608556A (zh) * | 2018-12-13 | 2019-04-12 | 福建农林大学 | 一种光响应肉桂酸衍生物接枝纳米纤维素的制备方法 |
CN109762073A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-05-17 | 闽江学院 | 荧光纤维素纳米纤维的制备方法 |
CN109632755A (zh) * | 2019-01-18 | 2019-04-16 | 闽江学院 | 一种检测氯离子的纳米纤维素探针的制备方法 |
CN109632755B (zh) * | 2019-01-18 | 2021-03-26 | 闽江学院 | 一种检测氯离子的纳米纤维素探针的制备方法 |
CN111172752A (zh) * | 2020-02-21 | 2020-05-19 | 江南大学 | 一种棉织物无甲醛无强力损失的抗皱整理方法 |
CN111172752B (zh) * | 2020-02-21 | 2021-03-30 | 江南大学 | 一种棉织物无甲醛无强力损失的抗皱整理方法 |
CN113603797A (zh) * | 2021-08-06 | 2021-11-05 | 齐鲁工业大学 | 一种氨基纳米纤维素及其制备方法 |
CN116640546A (zh) * | 2023-05-30 | 2023-08-25 | 南通市乐佳涂料有限公司 | 一种保温抗菌聚氨酯黏合剂材料及其制备方法 |
CN116640546B (zh) * | 2023-05-30 | 2023-10-20 | 南通市乐佳涂料有限公司 | 一种保温抗菌聚氨酯黏合剂材料及其制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103343001A (zh) | 一种pH荧光响应性纳米纤维素的制备方法 | |
Wu et al. | Pyrene derivative emitting red or near-infrared light with monomer/excimer conversion and its application to ratiometric detection of hypochlorite | |
Myochin et al. | Development of a series of near-infrared dark quenchers based on Si-rhodamines and their application to fluorescent probes | |
CN108559485A (zh) | 一种检测金属离子的纳晶纤维素荧光探针及其制备方法 | |
Zhao et al. | Fluorescent strips of electrospun fibers for ratiometric sensing of serum heparin and urine trypsin | |
Prusty et al. | A fluorogenic reaction based on heavy-atom removal for ultrasensitive DNA detection | |
CN108033907A (zh) | 一种七甲川菁类活性荧光探针及其制备方法与应用 | |
Yu et al. | Self-assembled nanostructures based on activatable red fluorescent dye for site-specific protein probing and conformational transition detection | |
CN108473505B (zh) | 聚芴并[4,5-cde]氧杂环庚三烯偶联物及其在分析物检测方法中的用途 | |
Ding et al. | Influence of binding mechanism on labeling efficiency and luminous properties of fluorescent cellulose nanocrystals | |
CN109608414A (zh) | 检测过氧亚硝酸根的荧光探针及其制备方法和应用 | |
Li et al. | Pyrophosphate-triggered nanoaggregates with aggregation-induced emission | |
CN106908495A (zh) | 一种基于碳纳米管负载聚合物胶束制备柔性分子印迹传感器的方法 | |
Li et al. | A unique approach to development of a multiratiometric fluorescent composite probe for multichannel bioimaging | |
CN101838344B (zh) | 具有荧光标记性质的壳聚糖纳米粒子及其制备方法 | |
Hu et al. | Self-assembled nanodot actuator with changeable fluorescence by π–π stacking force based on a four-armed foldable phthalocyanine molecule and its supersensitive molecular recognition | |
CN106243244B (zh) | 一种具有聚集诱导发光特性的羧化壳聚糖纳米荧光探针及其制备方法 | |
CN104497236A (zh) | 一种pH响应的共聚物修饰的荧光碳纳米颗粒 | |
Shao et al. | Monofunctional carbocyanine dyes for bio-and bioorthogonal conjugation | |
CN109320537A (zh) | 一种用于面粉和活体内过氧苯甲酰检测的可溶性双光子荧光探针及其制备方法和应用 | |
Wang et al. | Constructing a novel near-infrared fluorescent probe with a large Stokes shift for detection of RNA in the cancer cells | |
CN108342190A (zh) | 一种比值式检测hno的纳米荧光探针及其制备方法和应用 | |
CN103333211A (zh) | 一类双波长发射、双异核金属配合物及其制备方法和应用 | |
Chen et al. | Nanostructure formation-induced fluorescence turn-on for selectively detecting protein thiols in solutions, bacteria and live cells | |
CN106117525B (zh) | pH敏感嵌段聚合物、FRET复合物及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20131009 |