CN103315968A

CN103315968A - 一种注射用粉针剂及其制备方法

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Publication number: CN103315968A
Application number: CN2013102595623A
Authority: CN
Inventors: G·毕安祺; P·费拉里; 李小羿; 戴向荣; 张国辉
Original assignee: CVIE THERAPEUTICS Co Ltd
Current assignee: CVIE THERAPEUTICS Co Ltd
Priority date: 2013-06-26
Filing date: 2013-06-26
Publication date: 2013-09-25
Anticipated expiration: 2033-06-26
Also published as: CN103315968B

Abstract

本发明涉及药物制剂领域，特别涉及一种注射用粉针剂及其制备方法。该注射用粉针剂包括如式I所示化合物和冻干保护剂，如式I所示化合物与冻干保护剂的质量比为(20～50):(100～250)。本发明提供的注射用粉针剂质量稳定，可有效治疗伴左心室收缩功能减退的心衰恶化，治疗安全性高；该注射用粉针剂的制备工艺简便、可控，适于工业化生产；

式I。

Description

一种注射用粉针剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，特别涉及一种注射用粉针剂及其制备方法。

背景技术

进入21世纪后，随着我国居民生活方式的改变，以心血管疾病为首的慢性病已成为严重威胁我国居民健康的主要疾病。心力衰竭(HF)是各种心血管疾病的最后阶段，其是在静脉回流正常情况下，由各种原发心血管疾病如冠心病等导致心脏损伤，从而引起心排血量减少而满足不了组织代谢需要的一种综合征，临床表现为肺淤血、咳嗽、咳痰、咯血、疲劳、乏力、神志异常、少尿、肾功能损害等。引发心力衰竭的病因主要包括原发性心肌损害、高血压、瓣膜狭窄、心脏瓣膜关闭不全、血液返流、左右心分流、动静脉分流或全身血容量增加等，其中，高血压是导致老年心衰患者最重要的原因之一。据统计，心力衰竭影响着我国1%～2%的人群，老年人群中甚至达到10%，且该比例有进一步增长趋势。心力衰竭严重威胁着患者的生命，预后较差，如不进行有效的治疗，不仅使患者的生存质量下降，同时也给患者家庭及社会带来沉重的经济负担。

心力衰竭虽然属于慢性疾病，终身无法治愈，但通过合理的治疗，可以缓解症状，改善心肌功能，对提高患者的生活质量具有积极的作用。目前已出现大量的治疗心力衰竭的药物，如利尿剂、ACE抑制剂、醛固酮受体拮抗剂、β-阻滞剂、强心剂等。虽然这些药物在心力衰竭的治疗中起到了积极的作用，但均会引发诸多不良反应。其中，利尿剂可引发电解质紊乱、神经内分泌激活、低血压、氮质血症等；ACE抑制剂易引发低血压、高钾、咳嗽、血管性水肿等；醛固酮受体拮抗剂易引发血钾升高；β-阻滞剂易产生心动过缓、低血压、心功能恶化等副作用；正性肌力药物地高辛作为强心剂的一种，是最常用的洋地黄强心苷类药物，可明显改善心肌性能，它通过抑制Na,K-ATPase的活性，增加Na⁺-Ca²⁺交换，从而使心排血量增加，达到治疗目的，但洋地黄类药物具有致心律失常的副作用。因此，开发新型的治疗心力衰竭的药物依然是目前药学研究的热点。

Istaroxime是新近开发的治疗心力衰竭的药物，它的化学名称为(E,Z)-3-[(2-氨基乙氧基)亚胺]雄甾烷-6,17-二酮盐酸盐，分子式为C₂₁H₃₂N₂O₃HCl，分子量为396.95，结构式如式I所示，其是一种Na,K-ATPase抑制剂和心肌肌浆网钙泵(SERCA2)拮抗剂，与强心苷无化学联系，但能够抑制Na,K-ATPase并同时增加心脏收缩力。多种试验环境下证实其具有正性收缩和正性舒张双重特性。作为一种新型正性肌力药物，Istaroxime能增强心肌收缩，增强心排血功能，而不会降低血压和加快心率。目前，该药物还尚未有相应的注射用粉针剂产品上市，因此开发一种Istaroxime注射用粉针剂及其制备方法具有重要的现实意义。

式I

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种注射用粉针剂及其制备方法。该注射用粉针剂质量稳定，可有效治疗伴左心室收缩功能减退的心衰恶化，治疗安全性高；该注射用粉针剂的制备工艺简便、可控，适于工业化生产。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种注射用粉针剂，其包括如式I所示化合物和冻干保护剂，如式I所示化合物与冻干保护剂的质量比为(20～50):(100～250)；

式I。

作为优选，冻干保护剂选自乳糖一水合物、葡萄糖、甘露醇、右旋糖酐、甘氨酸或聚乙烯吡咯烷酮。

优选地，冻干保护剂为乳糖一水合物。

作为优选，在注射用粉针剂中还包括pH调节剂。

作为优选，pH调节剂选自氢氧化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、碳酸氢钠、枸橼酸钠、乳酸钠、醋酸钠、酒石酸钠或马来酸钠。

优选地，pH调节剂为氢氧化钠。

在本发明提供的一些实施例中，注射用粉针剂在使用前用0.9%NaCl溶液溶解。

作为优选，注射用粉针剂的给药方式为静脉注射。

本发明还提供了一种本发明中的注射用粉针剂的制备方法，包括如下步骤：

步骤A：取冻干保护剂与第一注射用水混合，获得冻干保护剂溶液；

步骤B：将如式I所示化合物、冻干保护剂溶液与第二注射用水混合，获得第一混合溶液，加入第三注射用水，获得第二混合溶液，经过滤、冷冻、干燥，即得；

第一注射用水占第二混合溶液的体积百分含量为30%～60%；

第二注射用水占第二混合溶液的体积百分含量为20%～25%；

第三注射用水的加入量以补足至第二混合溶液的体积为准；

式I。

作为优选，在本发明提供的注射用粉针剂中，以mg/mg/mL计，如式I所示化合物、冻干保护剂与第二混合溶液的质量体积比为(20～50):(100～250):10；

式I。

优选地，冻干保护剂为乳糖一水合物。

作为优选，步骤A和步骤B之间还包括调节冻干保护剂溶液的pH值的步骤。

在本发明提供的一些实施例中，调节冻干保护剂溶液pH值至5.25～5.75。

作为优选，调节冻干保护剂溶液pH值的试剂选自氢氧化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、碳酸氢钠、枸橼酸钠、乳酸钠、醋酸钠、酒石酸钠或马来酸钠。

优选地，调节冻干保护剂溶液pH值的试剂为氢氧化钠。

作为优选，步骤B中的冷冻为在温度-50℃～-40℃的条件下冷冻2.5h～3.5h。

作为优选，步骤B中的干燥包括初级干燥和次级干燥。

在本发明提供的一些实施例中，初级干燥为在温度为10℃～20℃、压强为200μbar的条件下干燥12.5h～13.5h。

在本发明提供的一些实施例中，次级干燥为在温度为20℃～30℃、压强为200μbar的条件下干燥9.5h～10.5h。

本发明提供了一种注射用粉针剂及其制备方法。该注射用粉针剂包括如式I所示化合物和冻干保护剂，如式I所示化合物与冻干保护剂的质量比为(20～50):(100～250)。通过稳定性检测试验，结果显示本发明提供的注射用粉针剂在货架期条件下可稳定储存24个月；在加速条件下储存6个月后，各项检测结果仍在标准范围内，表明该注射用粉针剂具有良好的稳定性；通过左心室功能的效应研究，结果显示本发明提供的注射用粉针剂可显著改善晚期心力衰竭犬的LV收缩和舒张功能；通过对急性左心室机能障碍麻醉犬的血液动力学效应研究，结果表明本发明提供的注射用粉针剂可显著改善各项血液动力学参数；通过对轻度心力衰竭麻醉豚鼠的收缩和舒张功能研究，结果表明本发明提供的注射用粉针剂可改善心脏的收缩和舒张功能；通过血液动力学临床效应研究，结果表明本发明提供的注射用粉针剂可降低患者的PCWP、RAP、DBP，可增加SBP、心输出量、左心做功指数，但对心率、舒张压和体循环血管阻力的影响较小，可改善患者左心室舒张功能，可在不降低DBP或体循环血管阻力的条件下改善肺充血情况，无显著的舒血管作用；可有效治疗伴左心室收缩功能减退的心衰恶化，且安全性高；该注射用粉针剂的制备方法简单，便于控制。由此可见，本发明提供的注射用粉针剂质量稳定，可有效治疗伴左心室收缩功能减退的心衰恶化，治疗安全性高；该注射用粉针剂的制备工艺简便、可控，适于工业化生产。

附图说明

图1示心衰恶化伴左心室收缩功能减退患者输注如式I所示化合物后的肺毛细血管楔压(PCWP)随时间变化曲线；其中，0～6h为持续输注给药时间，药物的剂量为0.5μg/kg/min(累积剂量180μg/kg)；

图2示心衰恶化伴左心室收缩功能减退患者输注如式I所示化合物后的肺毛细血管楔压(PCWP)变化曲线；其中，0～6h为持续输注给药时间，药物的剂量为1.0μg/kg/min(累积剂量360μg/kg)；

图3示心衰恶化伴左心室收缩功能减退患者输注如式I所示化合物后的肺毛细血管楔压(PCWP)变化曲线；其中，0～6h为持续输注给药时间，药物的剂量为1.5μg/kg/min(累积剂量540μg/kg)；

图4示心衰恶化伴左心室收缩功能减退患者输注安慰剂(注射用生理盐水)后的肺毛细血管楔压(PCWP)变化曲线；其中，0～6h为持续输注给药时间。

具体实施方式

本发明公开了一种注射用粉针剂及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明提供的注射用粉针剂及其制备方法中所用原料药或辅料均可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1注射用粉针剂的制备

称取100mg的乳糖一水合物，加入3mL的注射用水，使其溶解。称取50mg如式I所示化合物，加入上述乳糖一水合物溶液中，同时补充2mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-50℃的条件下冷冻2.5h；在温度为10℃、压强为200μbar的条件下初级干燥13.5h；在温度为20℃、压强为200μbar的条件下次级干燥10.5h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例2注射用粉针剂的制备

称取250mg的葡萄糖，加入6mL的注射用水，使其溶解。使用0.1mol/LNaOH溶液调节pH值至5.25～5.75。称取20mg如式I所示化合物，加入上述葡萄糖溶液中，同时补充2.5mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-40℃的条件下冷冻3.5h；在温度为20℃、压强为200μbar的条件下初级干燥12.5h；在温度为30℃、压强为200μbar的条件下次级干燥9.5h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例3注射用粉针剂的制备

称取200mg的甘露醇，加入4mL的注射用水，使其溶解。使用0.1mol/L磷酸氢二钠溶液调节pH值至5.25～5.75。称取40mg如式I所示化合物，加入上述甘露醇溶液中，同时补充2.2mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-45℃的条件下冷冻3h；在温度为15℃、压强为200μbar的条件下初级干燥13h；在温度为25℃、压强为200μbar的条件下次级干燥10h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例4注射用粉针剂的制备

称取240mg的右旋糖酐，加入5mL的注射用水，使其溶解。使用0.1mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至5.25～5.75。称取45mg如式I所示化合物，加入上述右旋糖酐溶液中，同时补充2mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-45℃的条件下冷冻3h；在温度为15℃、压强为200μbar的条件下初级干燥13h；在温度为25℃、压强为200μbar的条件下次级干燥10h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例5注射用粉针剂的制备

称取150mg的甘氨酸，加入4mL的注射用水，使其溶解。使用0.1mol/L碳酸氢钠溶液调节pH值至5.25～5.75。称取30mg如式I所示化合物，加入上述甘氨酸溶液中，同时补充2mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-45℃的条件下冷冻3h；在温度为15℃、压强为200μbar的条件下初级干燥13h；在温度为25℃、压强为200μbar的条件下次级干燥10h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例6注射用粉针剂的制备

称取180mg的聚乙烯吡咯烷酮，加入5mL的注射用水，使其溶解。使用0.1mol/L枸橼酸钠溶液调节pH值至5.25～5.75。称取35mg如式I所示化合物，加入上述聚乙烯吡咯烷酮溶液中，同时补充2mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-45℃的条件下冷冻3h；在温度为15℃、压强为200μbar的条件下初级干燥13h；在温度为25℃、压强为200μbar的条件下次级干燥10h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例7注射用粉针剂的制备

称取220mg的乳糖一水合物，加入6mL的注射用水，使其溶解。使用0.1mol/L乳酸钠溶液调节pH值至5.25～5.75。称取45mg如式I所示化合物，加入上述乳糖一水合物溶液中，同时补充2.5mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-45℃的条件下冷冻3h；在温度为15℃、压强为200μbar的条件下初级干燥13h；在温度为25℃、压强为200μbar的条件下次级干燥10h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例8注射用粉针剂的制备

称取160mg的葡萄糖，加入3mL的注射用水，使其溶解。使用0.1mol/L醋酸钠溶液调节pH值至5.25～5.75。称取30mg如式I所示化合物，加入上述葡萄糖溶液中，同时补充2mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-45℃的条件下冷冻3h；在温度为15℃、压强为200μbar的条件下初级干燥13h；在温度为25℃、压强为200μbar的条件下次级干燥10h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例9注射用粉针剂的制备

称取120mg的甘露醇，加入4mL的注射用水，使其溶解。使用0.1mol/L酒石酸钠与马来酸钠的混合溶液调节pH值至5.25～5.75。称取25mg如式I所示化合物，加入上述甘露醇溶液中，同时补充2mL的注射用水，搅拌10min，使其溶解，用注射用水定容至10mL，经双重过滤后灌装，预加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥过程为：在温度-45℃的条件下冷冻3h；在温度为15℃、压强为200μbar的条件下初级干燥13h；在温度为25℃、压强为200μbar的条件下次级干燥10h。干燥结束后加塞，即得；

式I。

实施例10注射用粉针剂的稳定性检测

取实施例1制备的注射用粉针剂，在货架期条件(25℃±2℃、60%±5%相对湿度RH)下分别在1、3、6、9、18、24个月从倒置和直立放置的瓶中取样检测。加速条件(40℃±2℃、75%±5%RH)下分别在1、3、6个月从倒置和直立放置的瓶中取样检测。在每个检测点，检测每瓶的性状、成分、含量、纯度和有关物质、E/Z比、水分、微粒。此外，加速条件下储存6个月后检测无菌和细菌内毒素。在货架期条件下储存24个月和加速条件下储存6个月的检测结果如表1所示。

表1注射用粉针剂的稳定性检测结果

由上述试验结果可知，本发明实施例1提供的注射用粉针剂在货架期条件下可稳定储存24个月；在加速条件下储存6个月后，各项检测结果仍在标准范围内。由此可见，本发明实施例1提供的注射用粉针剂具有良好的稳定性。

取实施例2～9制备的注射用粉针剂进行稳定性检测，试验结果与实施例1的注射用粉针剂的稳定性相近，表明实施例2～9制备的注射用粉针剂同样具有良好的稳定性。

由此可见，本发明提供的注射用粉针剂具有良好的稳定性。

实施例11注射用粉针剂对晚期心力衰竭犬左心室功能的效应研究

通过连续多次使用聚苯乙烯胶乳微球形成冠状动脉栓塞产生慢性LV功能障碍和衰竭。通常的麻醉和无菌条件下，在心脏插管术过程中进行冠状动脉微栓塞。通过盐酸羟吗啡酮(0.22mg/kg)和地西泮(0.2～0.6mg/kg)的联合静脉注射给药诱导麻醉。整个研究中使用1%～2%的异氟烷维持麻醉的程度。通过股动脉切开术和静脉切开放血术进行左右心脏插管。LV射血分数约为25%时，停止进行冠状动脉微栓塞。末次微栓塞后给予2周的时间，确保末次微栓塞产生的梗塞完全愈合，研究前建立的心衰模型可靠。

对7只体重为22.6～27.0kg的雄犬进行剂量递增研究。基线血液动力学、血管造影和超声心动图测定后，取本发明实施例1提供的注射用粉针剂，以0.5μg/kg/min(0.2mL/min)速率进行一小时连续静脉输注。一小时输注结束时，剂量增加至1.0μg/kg/min(0.383mL/min)，持续一小时。依此类推，以后每隔一小时剂量分别增加至2.0μg/kg/min(0.783mL/min)、3.0μg/kg/min(1.17mL/min)、5.0μg/kg/min(1.95mL/min)。对每只犬进行活性药物和安慰剂(生理盐水，采用相同的输注速率和给药方式)的两种给药。活性药物和安慰剂的给药顺序不定，两种给药之间间隔1周。

每小时输注结束时，测定所有犬的以下参数：1)平均主动脉压(mAoP)和LV压；2)等容收缩(最大+dP/dt)和舒张(最大-dP/dt)过程中LV压变化的最大速率；3)LV舒张末期压(LVEDP)。完成血液动力学测定后进行左心室造影，计算LV收缩末期容积(LVESV)和LV舒张末期容积(LVEDV)、LV射血分数(EF)、每搏输出量(SV)和心输出量(CO)。进行心肌耗氧量(MVO₂)、心电图、超声心动图和多普勒测定。结果如表2所示。

表2血液动力学和血管造影数据测定结果

对犬给予安慰剂时，除平均主动脉压(mAoP)和总LV冠状动脉血流量(CBF)外，所有其他的参数均无显著变化。本发明实施例1提供的注射用粉针剂对心率(HR)无影响；显著降低了LV舒张末期压(LVEDP)，呈剂量依赖性模式；显著增加了心输出量(CO)、每搏输出量(SV)和最大LV+dP/dt，亦呈剂量依赖性模式；但未显著增加最大LV-dP/dt；显著降低了LVEDV和LVESV，显著增加了LV射血分数(EF)，呈剂量依赖性模式。在不增加心肌耗氧量(MVO₂)的情况下，改善了LV收缩功能。研究结果表明，本发明实施例1提供的注射用粉针剂显著改善了晚期心力衰竭犬的LV收缩和舒张功能。与传统的cAMP依赖性正性肌力试剂不同，该注射用粉针剂在改善收缩和舒张状态的同时不增加心肌耗氧量。另外，观察到的该注射用粉针剂对收缩和舒张功能的显著改善与任何变时性和致心律失常活性的表观增加无关，该注射用粉针剂可用于晚期失代偿性心力衰竭患者的治疗。

取实施例2～9制备的注射用粉针剂进行左心室功能的效应研究，试验结果与实施例1的注射用粉针剂的效应相近，表明本发明实施例2～9制备的注射用粉针剂同样可显著改善晚期心力衰竭犬的LV收缩和舒张功能。

由此可见，本发明提供的注射用粉针剂可显著改善晚期心力衰竭犬的LV收缩和舒张功能。

实施例12注射用粉针剂对急性左心室机能障碍麻醉犬的血液动力学效应研究

该研究在6只长期监测的雄性Beagle犬中展开，包括6个连续步骤：1)基线；2)微球的冠状动脉内注射；3)以2.5μg/kg/min的速率输注盐酸多巴酚丁胺注射液【规格为2mL:20mg(按多巴酚丁胺计)，成都力思特制药股份有限公司生产】；4)以5μg/kg/min的速率输注盐酸多巴酚丁胺注射液；5)恢复到给药前水平，即清除；6)以50μg/kg的剂量静脉推注本发明实施例1提供的注射用粉针剂，随后以5μg/kg/min的速率输注给药，持续进行药物输注直到达到稳态。

通过回波描记术测定EF和每搏输出量(SV)，并在心电图(ECG)中测定心率(HR)；通过在左心室中植入压力传感器来测定左心室压(LVP)；计算±dP/dt_max和双积(DP=LVP*HR)，试验结果如表3所示。

表3急性左心室功能不全的麻醉犬的血液动力学效应

注：bpm为每分钟搏动次数；dP/dt_max为左心室收缩指数；数据为平均值±S.E.M；对重复测定数据进行单因素ANOVA分析，随后展开Bonferronni检验；^ap<0.05，相较于基线；^bp<0.05相较于微栓塞化或清除期数据。

由上述试验结果显示，微栓塞化使所有参数明显降低；本发明实施例1提供的注射用粉针剂可使±dP/dt_max和LVP恢复至近基值，而不增加双积；对急性左心室机能障碍犬注射本发明实施例1提供的注射用粉针剂，各项血液动力学参数均得到明显改善，且作用优于盐酸多巴酚丁胺注射液。

取实施例2～9制备的注射用粉针剂进行血液动力学效应研究，试验结果与实施例1的注射用粉针剂的效应相近，表明本发明实施例2～9提供的注射用粉针剂同样可显著改善各项血液动力学参数。

由此可见，本发明提供的注射用粉针剂可显著改善各项血液动力学参数。

实施例13注射用粉针剂对轻度心力衰竭麻醉豚鼠的收缩和舒张功能研究

取本发明实施例1提供的注射用粉针剂，以110μg/kg/min的剂量向已3个月主动脉缩窄的尿烷麻醉豚鼠静脉输注，在活性药物和生理盐水输注前和输注期间评估动物的心脏功能。收缩功能的刺激通过缩短分数(FS)、最大心肌收缩速度、主动脉血流速度及周围纤维的缩短分数的增加得到阐述，测定结果如表4所示。

表4长期压力超负荷引发轻度心力衰竭的豚鼠静脉输注给药对心脏功能的影响(相较于基值的%)

缩写：FS为缩短分数；NA，不适用；数据为平均值±SEM；n为动物数目；运用配对t检验来比较各组给药前和给药后数据的差异；^ap<0.05；^bp<0.005。

由上述试验结果可知，本发明实施例1提供的注射用粉针剂可显著增加收缩【缩短分数(FS)、主动脉血流速度、最大心肌收缩速度、最大心房血流速度、周围纤维缩短速度】和舒张(等容舒张时间、最大心肌舒张速度)指数。试验结果表明，在肥大/衰竭心脏模型中，本发明实施例1提供的注射用粉针剂可改善心脏的收缩和舒张功能。更为重要的是，该注射用粉针剂还可通过增加最大心肌舒张速度和延长等容舒张时间改善舒张功能，与舒张性效应一致。

取实施例2～9制备的注射用粉针剂进行心脏的收缩和舒张功能研究，试验结果与实施例1的注射用粉针剂的功能相近，表明本发明实施例2～9提供的注射用粉针剂同样可改善心脏的收缩和舒张功能。

由此可见，本发明提供的注射用粉针剂可改善心脏的收缩和舒张功能。

实施例14注射用粉针剂血液动力学临床效应研究

该研究为一项随机、双盲、安慰剂对照、剂量扩大探索性II期研究，旨在评价心衰恶化伴左心室收缩功能减退住院患者中6小时静脉输注本发明实施例1提供的注射用粉针剂的血液动力学效应。

研究人群为心衰恶化患者，年龄在18～85岁之间，LVEF≤35%，不使用强心药和/或强心扩管药治疗，收缩期和舒张期血压分别≤150mmHg和90mmHg。共计120名患者入组并接受治疗(105男15女)。

共计120名患者随机平均分配至三个治疗队列，每队列40人，其中30人为试验组，10人为对照组，试验组患者输注相应剂量的活性药物注射液500mL，对照组患者输注安慰剂(注射用生理盐水)500mL，患者共接受6小时的静脉输注药物治疗。各队列采用剂量扩大设计，即队列1中试验组的药物剂量为0.5μg/kg/min(累积剂量180μg/kg)、队列2中试验组的药物剂量为1.0μg/kg/min(累积剂量360μg/kg)、队列3中试验组的药物剂量为1.5μg/kg/min(累积剂量540μg/kg)。

按照剂量由低到高的顺序进行研究，前一队列的研究结束后，研究者认为合适的情况下方可进行下一队列的研究。试验期间测定患者的肺毛细血管楔压(PCWP)，结果如图1～4所示。输注给药结束时各血液动力学指标较基线变化的HR、SBP、DBP、RAP、肺动脉DBP、体循环阻力、心输出量和左心做功指数数据见表5。输注给药结束时超声心动图指标较基线变化的数据见表6。

对注射用粉针剂的疗效进行评价，疗效评价标准为：

无效：与对照组比较，试验组相应指标无统计学显著性变化(p<0.05时具有显著性差异)；

有效：与对照组比较，试验组相应指标具有统计学显著性变化(p<0.05时具有显著性差异)。

根据疗效评价标准评价本发明实施例1提供的注射用粉针剂的疗效，并观察患者用药后是否出现不良反应，不良反应包括注射部位疼痛、呕吐、恶心和肢端疼痛等症状，统计不良事件数目。

表5输注给药结束时各血液动力学指标较基线变化

注：N=患者数；HR=心率；bpm=次每分；SBP=收缩压；DBP=舒张压；RAP=右房压；mmHg=毫米汞柱；数据以均值(SD)形式表示。

表6输注给药结束时超声心动图指标较基线变化

注：N=患者数；Sa=收缩期二尖瓣环速度；Ea=舒张早期二尖瓣环速度；^aP=0.032；^bP=0.021；^cP=0.042；^dP＜0.001；^eP=0.057；^fp=0.056；数据以均值(SD)形式表示。

由图1～4可知，相较于对照组，0.5μg/kg/min和1.0μg/kg/min剂量组患者在输注给药开始时的平均PCWP较高，1.5μg/kg/min剂量组的平均PCWP与对照组基本相当。自输注给药开始后30分钟至输注给药结束后2小时的时间段内试验组患者的PCWP均低于对照组；各试验组在6h时较基线(输注给药开始前即时)PCWP差异相较于对照组尤为显著(0.5μg/kg/min剂量组：差异-3.21mmHg；P=0.025；1.0μg/kg/min剂量组：差异-3.33mmHg；P=0.006；1.5μg/kg/min剂量组：差异-4.73mmHg；P＜0.001)。结果表明，试验组的三种剂量水平下，整个输注给药过程以及之后2小时内，本发明实施例1提供的注射用粉针剂可降低患者的PCWP。

由表5可知，各项指标的变化与PCWP的变化一致，各试验组患者的平均右心房压(RAP)和肺动脉舒张压(DBP)均有所降低，而对照组患者则无此变化；相较于对照组，各试验组患者的平均肺动脉舒张压降低程度有统计显著性差异(0.5、1.0和1.5μg/kg/min剂量组：P＜0.001、P＜0.006和P＜0.016)。各试验组患者在6小时输注给药过程中心率(HR)倾向于降低，但输注给药结束时这种变化差异仍未能达到统计学显著性水平。与对照组不同，各试验组患者的收缩压(SBP)呈剂量依赖性的增高表现，1.5μg/kg/min剂量组中这种增高表现达到了统计学显著性水平。同时，患者的心输出量也有增高趋势。患者的舒张压和体循环血管阻力并无变化，表明药物无显著舒血管效应。各试验组患者的左心做功指数有剂量依赖性改善，1.5μg/kg/min剂量组中这种改善作用达到了统计学显著性水平(P=0.020)。由此可见，本发明实施例1提供的注射用粉针剂可降低RAP、DBP，可增加SBP、心输出量、左心做功指数，但对心率、舒张压和体循环血管阻力的影响较小。

由表6可知，研究中超声心动图指标表明患者的收缩期和舒张期左心室容积有缩小趋势，同时左心室的射血分数却并无显著变化。相较于对照组，1.0μg/kg/min剂量组患者的左心室收缩末期容积变化(P=0.032)和1.5μg/kg/min剂量组患者的左心室舒张末期容积变化(P=0.021)有统计学显著性差异。多普勒超声心动图和组织多普勒成像表明各试验组患者的E波减速时间有延长表现，1.5μg/kg/min剂量组此种变化达到统计学显著水平(P=0.042)。0.5μg/kg/min和1.5μg/kg/min剂量组患者的Sa指标(收缩期二尖瓣环速度)有统计学显著性的改善(P＜0.001)，而Ea指标(舒张早期二尖瓣环速度)则有临界统计学显著性的改善(P=0.057和P=0.056)。结果表明，本发明实施例1提供的注射用粉针剂可改善患者左心室舒张功能，可在不降低DBP或体循环血管阻力的条件下改善肺充血情况，无显著的舒血管作用。另一值得注意的发现是，本发明实施例1提供的注射用粉针剂并不会提高患者的心率，且能轻微降低SBP，这与其他的血管活性药物不同。

由疗效结果可知，0.5、1.0和1.5μg/kg/min剂量组治疗有效的患者数分别为25(有效率为86.2%)、27(有效率为90.0%)、28(有效率为93.3%)；研究中患者报告的不良事件全部为轻至中度事件，未发生死亡事件。试验组中，共有7名患者(7.9%)报告8例轻度不良事件，5名患者(5.6%)报告5例中度不良事件。对照组中各有2名患者(6.5%)报告3例轻度不良事件和2例中度不良事件，结果表明本发明实施例1提供的注射用粉针剂可有效治疗伴左心室收缩功能减退的心衰恶化，且安全性高。

取实施例2～9制备的注射用粉针剂进行临床效应研究，试验结果与实施例1的注射用粉针剂的临床效应相近，表明本发明实施例2～9提供的注射用粉针剂同样可降低患者的PCWP；可降低RAP、DBP，可增加SBP、心输出量、左心做功指数，但对心率、舒张压和体循环血管阻力的影响较小；可改善患者左心室舒张功能，可在不降低DBP或体循环血管阻力的条件下改善肺充血情况，无显著的舒血管作用；可有效治疗伴左心室收缩功能减退的心衰恶化，且安全性高。

由此可见，本发明提供的注射用粉针剂可降低患者的PCWP；可降低RAP、DBP，可增加SBP、心输出量、左心做功指数，但对心率、舒张压和体循环血管阻力的影响较小；可改善患者左心室舒张功能，可在不降低DBP或体循环血管阻力的条件下改善肺充血情况，无显著的舒血管作用；可有效治疗伴左心室收缩功能减退的心衰恶化，且安全性高。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种注射用粉针剂，其特征在于，其包括如式I所示化合物和冻干保护剂，所述如式I所示化合物与所述冻干保护剂的质量比为(20～50):(100～250)；

式I。

2.根据权利要求1所述的注射用粉针剂，其特征在于，所述冻干保护剂选自乳糖一水合物、葡萄糖、甘露醇、右旋糖酐、甘氨酸或聚乙烯吡咯烷酮。

3.根据权利要求1所述的注射用粉针剂，其特征在于，还包括pH调节剂。

4.根据权利要求1所述的注射用粉针剂，其特征在于，所述pH调节剂选自氢氧化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、碳酸氢钠、枸橼酸钠、乳酸钠、醋酸钠、酒石酸钠或马来酸钠。

5.如权利要求1至4中任一项所述的注射用粉针剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤B：将如式I所示化合物、所述冻干保护剂溶液与第二注射用水混合，获得第一混合溶液，加入第三注射用水，获得第二混合溶液，经过滤、冷冻、干燥，即得；

所述第一注射用水占所述第二混合溶液的体积百分含量为30%～60%；

所述第二注射用水占所述第二混合溶液的体积百分含量为20%～25%；

所述第三注射用水的加入量以补足至所述第二混合溶液的体积为准；

式I。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，以mg/mg/mL计，所述如式I所示化合物、所述冻干保护剂与所述第二混合溶液的质量体积比为(20～50):(100～250):10；

式I。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤A和步骤B之间还包括调节所述冻干保护剂溶液的pH值的步骤。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻为在温度-50℃～-40℃的条件下冷冻2.5h～3.5h。

9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述干燥包括初级干燥和次级干燥。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述初级干燥为在温度为10℃～20℃、压强为200μbar的条件下干燥12.5h～13.5h。

11.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述次级干燥为在温度为20℃～30℃、压强为200μbar的条件下干燥9.5h～10.5h。