CN103301206A - 肉苁蓉多种有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成技术 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种肉苁蓉多种有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法。其集成方法包括肉苁蓉有效成分粗提与浓缩；粗提物的分离精制；肉苁蓉总浸膏制取；蒸馏精油制取；脂溶性提取物制取；甘露醇浸膏制取；苯乙醇苷浸膏制取；生物碱浸膏制取；多糖类浸膏制共取九个阶段。优点在于，使1个总浸膏和6个单浸膏(包括2个脂类提取物)能在同一个工艺和同一套设备中一并完成生产，并且总工艺过程得到了优化，可减少生产中设备、原辅材料、能源动力的投入；通过产出不同主要成分的浸膏产品，用于不同功能的成药、食品、化妆品之中，可解决当前肉苁蓉提取物生产中部分有效成分被丢失浪费的问题，提高对珍贵药材的利用率。

Description

肉苁蓉多种有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成技术

技术领域

本发明涉及制药工业及精细化工业领域，具体地，涉及肉苁蓉有效成分联合提取及多种浸膏的制取技术。 

背景技术

肉苁蓉(Herba Cistanches)是多年寄生草本植物，喜寄生于荒漠、沙地、盐碱地植物的根部；药用部位为未开花前埋于沙土中的肥厚肉质茎。《神农本草经》将肉苁蓉列为上品，具有益精血、补肾助阳、润肠通便和延缓衰老等功效。现代研究进一步表明，肉苁蓉含很多种不同种类的有效成分，包括苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、木脂素苷类、甘露醇、多糖类、黄酮类、生物碱类等物质，各种有效成分都有其药理作用。苯乙醇苷类化具有抗衰老和神经保护功能；甘露醇具有润肠抗便秘功能；多糖类具有提高免疫力功能；脂溶性提取物具有抗癌细胞功能；生物碱具有护肝抗氧化功能。当前对苯乙醇苷类研究较为深入，《中国药典》2010年版把松果菊苷及毛蕊花糖苷单体物含量规定为肉苁蓉的质量指标性成分。研究提取分离苁蓉的各种有效成分的综合技术，对提高珍贵药材肉苁蓉的利用率有重要意义。 

在当前国内肉苁蓉制药产业中，肉苁蓉产品包括肉苁蓉药材、肉苁蓉饮片、肉苁蓉标准提取物和肉苁蓉成药四大类。其中肉苁蓉标准提取物是现代植物化学技术的应用产物，是可以与国际植物药市场接轨的产 品形式，最具有发展潜力，也是开发热点。能够按照制定的规范化操作规程进行生产、且产出品的质量标符合标准的中药传统浸膏产品，属于这种标准提取物范畴。当以达到含有较高浓度的某一类成分(如肉苁蓉总苷类、肉苁蓉多糖类、肉苁蓉生物碱类)为目标时制取的浸膏，可以称之为单浸膏；而以含有较全面的有效成分(如肉苁蓉总有效成分浸膏)为目标时制取的浸膏，可以称之总浸膏。单浸膏用于特定功能植物药(如肉苁蓉总苷胶囊、肉苁蓉多糖口服液)的制药中间体，属于标准提取物类产品，是沿着国际植物药方向开发的产品形式，可直接在国际市场上销售；而总浸膏却是既要最大程度地提取出主要有效成分，又要尽量多地保留其它类别的有效成分，目的是发挥中药成分的整体性、互效性疗效，是沿着传统中药升级方向的开发的产品形式，主要用于国内制取中药配方颗粒(单味浓缩颗粒)，是传统饮片的升级替代物，属于饮片类产品(称为颗粒饮片)。单浸膏和总浸膏是两种不同用途的、各具优势的产品。 

在当前国内肉苁蓉提取技术领域内，研究最多的是苯乙醇苷类的提取物技术。受到《中国药典》肉苁蓉质量标准中的指标性成分一苯乙醇苷类的导向作用，提取技术总是以获取更高的苯乙醇苷得率为目标。这导致其它类别的有效成分部分丢失，比如多元醇类、环烯醚萜苷类、木脂素苷类、甘露醇、多糖类、生物碱类、氨基酸类等。这些被丢失的活性成分是总浸膏中需要的成分，是中药多层次、多靶点作用特色的物质基础，当前国内用于制取肉苁蓉饮片颗粒需要大量的这种总浸膏做原料，这种丢失是对珍贵肉苁蓉资源的浪费。此外，在当前国内生产实践中，总浸膏和多种单浸膏各自使用不同的制取技术和生产工艺路线，在不同的生产过程各自完成，这又造成了设备、溶剂及能源的浪费。 

为了高效、全面利用肉苁蓉中多种不同有效成分；也为了使总浸膏和多种单浸膏能在同一个工艺和一套设备中一起完成生产，减少投入， 我们发明了一种肉苁蓉总浸膏和多种单浸膏联合提取以及分类制作浸膏的集成技术。这一技术是在常规提取技术基础上，通过筛选所用提取溶剂的种类、整合单一的提取分离方法、优化原有的生产条件参数，使得总浸膏和单浸膏之间、各个单浸膏之间的制取工艺，互相衔接、前后匹配、共用设备，形成了一个集成的新技术；在该集成新技术下产出的浸膏产品，具有不同的用途：其中单浸膏用于国际植物提取物市场，总浸膏用于国内配方中药市场；这一技术既是肉苁蓉有效成分提取方法优化集成的新技术，又是肉苁蓉多种有效成分综合利用的新技术。 

发明内容

本发明公开了一种肉苁蓉多种有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，该集成方法包括：(1)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段；(2)粗提物的分离精制；(3)肉苁蓉总浸膏制取；(4)蒸馏精油的制取；(5)脂溶性提取物制取；(6)甘露醇浸膏制取；(7)苯乙醇苷浸膏制取；(8)生物碱浸膏制取；(9)多糖类浸膏制取共九个阶段。其浸膏产品包括：肉苁蓉总浸膏、脂溶性提取物、蒸馏精油、甘露醇浸膏、苯乙醇苷浸膏、生物碱浸膏和多糖类浸膏共7个用途不同提取物。 

本发明的优点在于，使1个总浸膏和6个单浸膏(注：其中的蒸馏精油、脂溶性提取物严格意义上不属于浸膏类产品，为叙述方便此处统称为浸膏，下同)能在同一个工艺和同一套设备中一起完成生产，并且总工艺过程得到了优化，可减少生产中设备、原辅材料、能源动力的投入；通过产出不同主要成分的浸膏产品，用于不同功能的成药、食品、化妆品之中，可解决当前肉苁蓉提取物生产中部分有效成分被丢失浪费的问题，提高对珍贵药材的利用率。 

具体地，各个阶段包括： 

(1)有效成分粗提与浓缩阶段 

a.药材前处理：选取肉苁蓉茎块、饮片或粉末，若是茎块需经药材净化前处理、热润、切片。 

b.备料与投料：称取的肉苁蓉饮片(5～100kg)，投入带有蒸馏物回收功能的多功能提取罐内。同时取85～95％的乙醇水溶液(v/v，下同)备用。 

c.醇提：采用90％乙醇水溶液回流热浸提法在多功能提取罐中进行。将药材量8(6～10)倍量(w/v)的90％(85～95％)乙醇溶液，投入罐内，在50～60℃水浴下浸提取4(2～8)小时，经滤网放出浸体液，再用药材用量4(2～6)倍量浸提液同样条件重复浸提4(2～8)小时放出浸体液。两次所得滤液泵入浓缩罐中合并，在50～60℃水浴下减压至沸腾，浓缩回收乙醇，浓缩到浓缩物与原药材量的重量比为：1∶2(重量比)，得醇提浓缩物(2.5～50L)；滤渣饮片留作下一部继续提取使用；多功能提取罐的蒸馏收集器中的挥发油收集物取出备用。 

d.水煎浸提：采用水煎法在多功能提取罐中进行。在(1)c的滤渣饮片中，加入8(6～10)倍量(w/v)的水，在100℃水浴下煎煮2(1～3)小时，经滤网放出煎液，再用药材用量4(2～6)倍量的水，同样条件重复煎煮2(1～3)小时放出煎液。两次所得滤液泵入浓缩罐中，在80℃(60℃～90℃)水浴下减压至沸腾，蒸掉水分浓缩煎液，浓缩到浓缩物比重为1.05～1.10g/ml，得水提浓缩物(5～100L)。滤渣饮片排出罐外；多功能提取罐的蒸馏收集器中的蒸馏收集物取出备用。 

(2)成分分离阶段 

a.挥发油的萃取分离 

将来自(1)c.和(1)d.浸提过程中，多功能提取罐挥发油收集器中收集的精油合并，在干燥器中干燥，脱去水份，分离出挥发油粗品。 

b.醇提浓缩物的分离 

将(1)c中醇浸提所得的醇提浓缩物加水(5～200L)进行水沉，加水至乙醇含量降低到10％(5～15％)，离心，分出沉淀物(0.25～10kg)，水沉淀物收集留作后面使用；上清液用石油醚萃取，按1∶1(v/v)量泵入液-液连续萃取塔内，得萃取液和萃取余液。萃取液为含脂溶物的石油醚溶液，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收石油醚，得脂溶性油状液体，备用。萃取余液为富甘露醇和单糖等的10％(5～15％)乙醇溶液，泵入储液罐内，用于制作甘露醇浸膏。 

c.水提浓缩物的分离 

将(1)d中水煎浸提所得的水提浓缩物(5～100L)加90％的乙醇进行醇沉，至乙醇含量为80％(75～85％)，离心(4000r/min)，分离沉淀物，沉淀物为醇沉滤渣(1～40kg)，留作后面待用；上清液为富含醇溶物的80％(75～85％)乙醇溶液(50～500L)，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收乙醇，浓缩至无乙醇味道，得水溶性浓缩液(5～100L)，待过大孔树脂柱使用。 

d.过大孔树脂中分离 

取来自上面(2)c.的水溶性浓缩液(5～100L)，投入大孔树脂(AB-8型)柱顶端，先用水洗脱，再用95％乙醇洗脱。水洗脱液泵入强酸性阳离子树脂柱顶端内；95％乙醇洗脱液泵入真空浓缩罐中，制取苯乙醇苷浸膏用。 

e.过强酸性阳离子树脂柱分离 

取来自(2)d.中的水洗脱液，投入强酸性阳离子树脂(001X7)柱顶端，先用水洗脱，再用2mol/L的HCL洗脱。水洗脱液收集储存，于下一步使用；盐酸洗脱液，泵入真空浓缩罐中用于制作肉苁蓉生物碱浸膏产品。 

f.合并液脱蛋白脱色分离 

将来自(2)a.的水沉滤渣、(2)b.醇沉滤渣以及(2)d.的水洗脱物(即图1中E、F、G项)三项合并，用Sevag法除去蛋白质，再加入5％活性炭脱去色素，过滤，丢弃去渣滓，保留上清液用于制作多糖类浸膏产品。 

(3)肉苁蓉总浸膏制取阶段 

a.将来自(1)c.的醇提浓缩物和来自(1)d.的水提浓缩物一并混合，真空(60℃)下浓缩成稠膏状，再加入提取罐挥发油收集器中收集的精油(即图1中A、B、C三项合并)，即为肉苁蓉总浸膏。 

b.总浸膏得率为20～40％，呈黑色稠膏状，水分＜60％。高效液相色谱检测，指标性成分为：松果菊苷＞5.0％、毛蕊花糖苷＞2.0％、甘露醇含量大于2.5％、甜菜碱含量＞2.0％，多糖含量大于8.0％。可用于制作肉苁蓉颗粒饮片(肉苁蓉浓缩颗粒)使用。 

(4)蒸馏精油制取阶段 

a.来自(2)a的精油经干燥器干燥直接制得肉苁蓉蒸馏精油。 

b.肉苁蓉蒸馏精油的得率为0.01～0.1％，为淡黄色油状液体，有芳香味道，可用于研发试验材料、抗肿瘤新药物的开发原料。 

(5)脂溶性提取物制取阶段 

a.将来自(2)b.的浓缩脂状物，在干燥器中脱水，即成脂溶性提取物。 

b.脂溶性提取物得率为1.0～3.0％，为灰色浓稠液体，可用于研发试验材料、新药物开发原料。 

(6)甘露醇浸膏制取阶段 

a.将来自(2)b.富含甘露醇和单糖等的10％乙醇溶液，真空干燥，即得甘露醇浸膏产品 

b.甘露醇浸膏产品得率为3.0～8.0％，灰褐色稠膏状，甘露醇含量大于50％，水分小于60％，可用润肠药物等的研发材料。 

(7)苯乙醇苷浸膏制取阶段 

a.将上述(2)d.中的95％乙醇洗脱液，泵入浓缩罐中，在60℃(55℃～65℃)水浴下降压至沸腾，回收乙醇、蒸掉水分，浓缩至比重1.10，得稠浸膏，稠浸膏进入烘干箱内，常温干燥，粉碎，成干浸膏粉，即肉苁蓉苯乙醇苷类浸膏产品。 

b.苯乙醇苷浸膏得率为4～8％，为灰色干粉，水分含量小于12％，高效液相色谱检测，指标性成分为松果菊苷＞20.0％、毛蕊花苷＞5.0％。 

(8)生物碱浸膏制取阶段 

a.将上述(2)e.中的H盐酸洗脱液，泵入浓缩罐中，在60℃(55℃～65℃)水浴下降压至沸腾，蒸掉水分，浓缩至稠浸膏，稠浸膏进入烘干箱内，常温干燥，粉碎，成干浸膏粉，即生物碱浸膏干粉产品。 

b.生物碱浸膏干粉得率为10～15％，产品为灰色干粉状，水分含量小于12％，比色法检测，指标性成分为甜菜碱含量＞50％，可用于保肝药开发。 

(9)多糖类浸膏制取阶段 

a.将上述(2)f.中的上清液，加入95％的乙醇至乙醇含量80％(75％～85％)，离心(3000r/min)15min，收取沉淀物，干燥至稠膏，即得肉苁蓉多糖类浸膏产品。 

b.肉苁蓉多糖类浸膏得率为1～5％，产品为灰色，水分含量小于60％，苯酚-硫酸法检测，多糖含量大于90％。 

本发明的优点在于： 

本发明的优点在于，使总浸膏和各个单浸膏能在同一个工艺和同一套设备中一并完成生产，并且生产工艺得以最优化选择，可减少生产中设备、原辅材料、能源动力的投入；通过产出不同主要成分的浸膏产品，用于不同功能的成药、食品、化妆品之中，可解决当前肉苁蓉提取物生产中部分有效成分被丢失浪费的问题，提高对珍贵药材的利用率。 

与当前通用的植物有效成分溶剂提取法相比较，这一技术的发明创新点是(1)所用提取溶剂进行了优化选择：从常用的10溶剂中选择了4种药用三类安全溶剂，避开了危险和有害溶剂的使用，保证了操作中安全可靠、无毒害残留、容易回收；(2)所用提取方法进行了优化选择：从常用的5种方法中选择了在多功能提取罐中回流热浸提法和水煎法，高效而实用；(3)所用分离精制方法进行了优化选择：从常用的30多种方法种选用了萃取、沉淀、大孔树脂柱法、强酸性阳离子交换树脂法4种方法，具有生产可行性和节能低耗性；(4)所用整体技术路线和具体生产参数值(包括处理浓度、温度、时间、料液比率，物料品质、数量，设备参数设定等)进行了优化选择。当前植物提取技术领域的研究进展总结如下表1、表2、表3。虽然已有的植物有效成分提取技术种类很多，但由于溶剂的危险性、设备的产能小、技术的不成熟等限制，仅用限于在实验室内使用，在生产领域大多数技术不能应用。 

表1：当前通用的植物有效成分提取所用溶剂种类选择 

表2：当前通用的植物有效成分溶剂提取方法种类选择 

表3：当前通用的植物有效成分分离精制方法种类选择 

与当前已有的肉苁蓉单类成分提取方法，即水-醇溶液浸提法或水提醇沉法相比较的优点是：(1)在浸提方法选择上：首次使用醇提水沉和水提醇沉组合法，而以往是水提醇沉、或醇-水溶液浸提、或其它溶剂提取，本方法扩展了可提取的成分范围，使肉苁蓉中从强亲脂性到强亲水性的有效成分大都在覆盖的范围内。例如，单纯的醇提水沉时，部分水难溶物(如挥发油、脂肪、蜡质、脂溶性色素、甾醇类、脂溶性苷类、脂溶性萜类)会在水沉过程中丢失；而单纯的水提醇沉时，部分醇难溶物(如多糖、盐型生物碱)会在醇沉过程中丢失；单一的醇水溶液提取时，部分脂极难容物(如大分子烷烃)和醇极难溶物(如大分子多糖)会在过滤分离中被丢失；(2)在提取方法选择上：选用了在多功能提取罐中乙醇回流热浸提法和水煎法分别进行，以及提取液各自分别浓缩的方法，该法与后面分类制膏的工艺相呼应；(3)在提取设备上：选用了在多功能提取罐，既满足了回流热浸提法和水煎的要求，又能收集到蒸馏中的挥发油；(4)在分离精制方法选择上：具有前后物料对接、上下工艺匹配，使总体工艺具有整体化、最优化，是肉苁蓉提取技术的技术集成创新。 

表4：本技术中选取的溶剂种类、提取方法和分离精制方法的优点 

附图概要说明 

图1显示了本发明的一种技术工艺路线。 

具体实施方式：

实施例1：一种肉苁蓉多种有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成技术，其技术工艺过程包括九个阶段：(1)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段；(2)粗提物的分离精制；(3)肉苁蓉总浸膏制取；(4)蒸馏精油的制取；(5)脂溶性提取物制取；(6)甘露醇浸膏制取；(7)苯乙醇苷浸膏制取；(8)生物碱浸膏制取；(9)多糖类浸膏制取。其浸膏产品包括7个用途不同提取物：(1)肉苁蓉总浸膏；(2)脂溶性提取物；(3)蒸馏精油；(4)甘露醇浸膏；(5)苯乙醇苷浸膏；(6)生物碱浸膏和；(7)多糖类浸膏。 

(1)有效成分粗提与浓缩阶段 

a.药材前处理：选取肉苁蓉茎块、饮片或粉末，若是茎块需经药材净化前处理、热润、切片。 

b.备料与投料：称取的肉苁蓉饮片(5kg)，投入多功能提取罐内。同时取90％的乙醇水溶液(v/v，下同)备用。 

c.醇提：采用90％乙醇水溶液回流热浸提法在多功能提取罐中进行。将药材量6倍量(w/v)的90％乙醇溶液，投入罐内，在50℃水浴下浸提取4小时，经滤网放出浸体液，再用药材用量4倍量浸提液同样条件重复浸提4小时放出浸体液。两次所得滤液泵入浓缩罐中合并，在50℃水浴下减压至沸腾，浓缩回收乙醇，浓缩到浓缩物与原药材量的重量比为：1∶2(重量比)，得醇提浓缩物(2.5L)；滤渣饮片留作下一部继续提取使用；多功能提取罐的蒸馏收集器中的挥发油收集物取出备用。 

d.水煎浸提：采用水煎法在多功能提取罐中进行。在(1)c的滤渣饮片中，加入8倍量的水，在100℃水浴下煎煮2小时，经滤网放出煎液，再用药材用量4倍量的水，同样条件重复煎煮2小时放出煎液。两次所得滤液泵入浓缩罐中，在80℃水浴下碱压至沸腾，蒸掉水分浓缩煎液，浓缩到浓缩物比重为1.08g/ml，得水提浓缩物(5L)。滤渣饮片排出罐外；多功能提取罐的蒸馏收集器中的蒸馏收集物取出备用。 

(2)成分分离阶段 

a.挥发油的萃取分离 

将来自(1)c.和(1)d.浸提过程中，多功能提取罐挥发油收集器中收集的精油合并，在干燥器中干燥，脱去水份，分理处挥发油粗品。 

b.醇提浓缩物的分离 

将(1)c中醇浸提所得的醇提浓缩物加水(5L)进行水沉，加水至乙醇含量降低到10％，离心，分出沉淀物(0.25kg)，水沉淀物收集留作后面使用；上清液用石油醚萃取，按1∶1(v/v)量泵入液-液连续萃取塔内，得萃取液和萃取佘液。萃取液为含脂溶物的石油醚溶液，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收石油醚，得脂溶性油状液体，备用。萃取余液为富甘露醇和单糖等的10％乙醇溶液，泵入储液罐内，用于制作甘露醇浸膏。 

c.水提浓缩物的分离 

将(1)d中水煎浸提所得的水提浓缩物(5L)加90％的乙醇进行醇沉，至乙醇含量为80％，离心(4000r/min)，分离沉淀物，沉淀物为醇沉滤渣(1kg)，留作后面待用；上清液为富含醇溶物的80％乙醇溶液(50L)，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收乙醇，浓缩至无乙醇味道，得水溶性浓缩液(5L)，待过大孔树脂柱使用。 

d.过大孔树脂中分离 

取来自上面(2)c.的水溶性浓缩液(5L)，投入大孔树脂(AB-8型)柱顶端，先用水洗脱，再用95％乙醇洗脱。水洗脱液泵入强酸性阳离子树脂柱顶端内；95％乙醇洗脱液泵入真空浓缩罐中，制取苯乙醇苷浸膏用。 

e.过强酸性阳离子树脂柱分离 

取来自(2)d.中的水洗脱液，投入强酸性阳离子树脂(001X7)柱顶端，先用水洗脱，再用2mol/L的HCL洗脱。水洗脱液收集储存，于下一步使用；盐酸洗脱液，泵入真空浓缩罐中用于制作肉苁蓉生物碱浸膏产品。 

f.合并液脱蛋白脱色分离 

将来自(2)a.的水沉滤渣、(2)b.醇沉滤渣以及(2)d.的水洗脱物(即图1中E、F、G项)三项合并，用Sevag法除去蛋白质，再加入5％活性炭脱去色素，过滤，丢弃去渣滓，保留上清液用于制作多糖类浸膏产品。 

(3)肉苁蓉总浸膏制取阶段 

a.将来自(1)c.的醇提浓缩物和来自(1)d.的水提浓缩物一并混合，真空(60℃)下浓缩成稠膏状，再加入提取罐挥发油收集器中收集的精油(即A、B、C三项合并)，即为肉苁蓉总浸膏。 

b.总浸膏得率为25％，呈黑色稠膏状，水分55％。高效液相色谱检测，指标性成分为：松果菊苷＞5.8％、毛蕊花糖苷＞2.8％、甘露醇含量2.3％、甜菜碱含量2.5％，多糖含量8.1％。可用于制作肉苁蓉颗粒饮片(肉苁蓉浓缩颗粒)使用。 

(4)蒸馏精油制取阶段 

a.来自(2)a的精油直接制得肉苁蓉蒸馏精油。 

b.肉苁蓉蒸馏精油的得率为0.06％，为淡黄色油状液体，有芳香味道，可用于研发试验材料、抗肿瘤新药物的开发原料。 

(5)脂溶性提取物制取阶段 

a.将来自(2)b.的浓缩脂状物，在干燥器中脱水，即成脂溶性提取物。 

b.脂溶性提取物得率为1.3％，为灰色浓稠液体，可用于研发试验材料、新药物开发原料。 

(6)甘露醇浸膏制取阶段 

a.将来自(2)b.富含甘露醇和单糖等的10％乙醇溶液，真空干燥，即得甘露醇浸膏产品 

b.甘露醇浸膏产品得率为3.6％，灰褐色稠膏状，甘露醇含量55％，水分52％，可用润肠药物等的研发材料。 

(7)苯乙醇苷浸膏制取阶段 

a.将上述(2)d.中的95％乙醇洗脱液，泵入浓缩罐中，在60℃水浴下降压至沸腾，回收乙醇、蒸掉水分，浓缩至比重1.10，得稠浸膏，稠浸膏进入烘干箱内，常温干燥，粉碎，成干浸膏粉，即肉苁蓉苯乙醇苷类浸膏产品。 

b.苯乙醇苷浸膏得率为4.8％，为灰色干粉，水分含量11％，高效液相色谱检测，指标性成分为松果菊苷＞24.0％、毛蕊花苷＞5.2％。 

(8)生物碱浸膏制取阶段 

a.将上述(2)e.中的H盐酸洗脱液，泵入浓缩罐中，在60℃水浴下降压至沸腾，蒸掉水分，浓缩至稠浸膏，稠浸膏进入烘干箱内，常温干燥，粉碎，成干浸膏粉，即生物碱浸膏干粉产品。 

b.生物碱浸膏干粉得率为13％，产品为灰色干粉状，水分含量11％，比色法检测，指标性成分为甜菜碱含量56％，可用于保肝药开发。 

(9)多糖类浸膏制取阶段 

a.将上述(2)f.中的上清液，加入95％的乙醇至乙醇含量80％，离心(3000r/min)15min，收取沉淀物，干燥至稠膏，即得肉苁蓉多糖类浸膏产品。 

b.肉苁蓉多糖类浸膏得率为2.1％，产品为灰色，水分含量55％，苯酚-硫酸法检测，多糖含量92％。 

实施例2：本发明公开了一种肉苁蓉多种有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成技术，其技术工艺过程包括九个阶段：(1)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段；(2)粗提物的分离精制；(3)肉苁蓉总浸膏制取；(4)蒸馏精油的制取；(5)脂溶性提取物制取；(6)甘露醇浸膏制取；(7)苯乙醇苷浸膏制取；(8)生物碱浸膏制取；(9)多糖类浸膏制取。其浸膏产品包括7个用途不同提取物：(1)肉苁蓉总浸膏；(2)脂溶性提取物；(3)蒸馏精油；(4)甘露醇浸膏；(5)苯乙醇苷浸膏；(6)生物碱浸膏和；(7)多糖类浸膏。 

(1)有效成分粗提与浓缩阶段 

a.药材前处理：选取肉苁蓉茎块、饮片或粉末，若是茎块需经药材净化前处理、热润、切片。 

b.备料与投料：称取的肉苁蓉饮片(50kg)，投入多功能提取罐内。同时取90～95％的乙醇水溶液(v/v，下同)备用。 

c.醇提：采用90％乙醇水溶液回流热浸提法在多功能提取罐中进行。将药材量8倍量(w/v)的90％乙醇溶液，投入罐内，在50℃水浴下浸提取4小时，经滤网放出浸体液，再用药材用量4倍量(w/v)浸提液同样条件重复浸提4小时放出浸体液。两次所得滤液泵入浓缩罐中 合并，在50℃水浴下减压至沸腾，浓缩回收乙醇，浓缩到浓缩物与原药材量的重量比为：1∶2(重量比)，得醇提浓缩物(25L)；滤渣饮片留作下一部继续提取使用；多功能提取罐的蒸馏收集器中的挥发油收集物取出备用。 

d.水煎浸提：采用水煎法在多功能提取罐中进行。在(1)c的滤渣饮片中，加入8倍量(w/v)的水，在100℃水浴下煎煮2小时，经滤网放出煎液，再用药材用量4倍量(w/v)的水，同样条件重复煎煮2小时放出煎液。两次所得滤液泵入浓缩罐中，在80℃水浴下碱压至沸腾，蒸掉水分浓缩煎液，浓缩到浓缩物比重为1.10g/ml，得水提浓缩物(50L)。滤渣饮片排出罐外；多功能提取罐的蒸馏收集器中的蒸馏收集物取出备用。 

(2)成分分离阶段 

a.挥发油的萃取分离 

将来自(1)c.和(1)d.浸提过程中，多功能提取罐挥发油收集器中收集的精油合并，在干燥器中干燥，脱去水份，分理处挥发油粗品。 

b.醇提浓缩物的分离 

将(1)c中醇浸提所得的醇提浓缩物加水(50L)进行水沉，加水至乙醇含量降低到10％，离心，分出沉淀物(2.5kg)，水沉淀物收集留作后面使用；上清液用石油醚萃取，按1∶1(v/v)量泵入液-液连续萃取塔内，得萃取液和萃取余液。萃取液为含脂溶物的石油醚溶液，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收石油醚，得脂溶性油状液体，备用。萃取余液为富甘露醇和单糖等的10％乙醇溶液，泵入储液罐内，用于制作甘露醇浸膏。 

c.水提浓缩物的分离 

将(1)d中水煎浸提所得的水提浓缩物(50L)加90％的乙醇进行醇沉，至乙醇含量为80％，离心(4000r/min)，分离沉淀物，沉淀物为醇沉滤渣(20kg)，留作后面待用；上清液为富含醇溶物的80％乙醇溶液 (250L)，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收乙醇，浓缩至无乙醇味道，得水溶性浓缩液(50L)，待过大孔树脂柱使用。 

d.过大孔树脂中分离 

取来自上面(2)c.的水溶性浓缩液(50L)，投入大孔树脂(AB-8型)柱顶端，先用水洗脱，再用95％乙醇洗脱。水洗脱液泵入强酸性阳离子树脂柱顶端内；95％乙醇洗脱液泵入真空浓缩罐中，制取苯乙醇苷浸膏用。 

e.过强酸性阳离子树脂柱分离 

取来自(2)d.中的水洗脱液，投入强酸性阳离子树脂(001X7)柱顶端，先用水洗脱，再用2mol/L的HCL洗脱。水洗脱液收集储存，于下一步使用；盐酸洗脱液，泵入真空浓缩罐中用于制作肉苁蓉生物碱浸膏产品。 

f.合并液脱蛋白脱色分离 

将来自(2)a.的水沉滤渣、(2)b.醇沉滤渣以及(2)d.的水洗脱物(即图1中E、F、G项)三项合并，用Sevag法除去蛋白质，再加入5％活性炭脱去色素，过滤，丢弃去渣滓，保留上清液用于制作多糖类浸膏产品。 

(3)肉苁蓉总浸膏制取阶段 

a.将来自(1)c.的醇提浓缩物和来自(1)d.的水提浓缩物一并混合，真空(60℃)下浓缩成稠膏状，再加入提取罐挥发油收集器中收集的精油(即A、B、C三项合并)，即为肉苁蓉总浸膏。 

b.总浸膏得率为32％，呈黑色稠膏状，水分52％。高效液相色谱检测，指标性成分为：松果菊苷6.2％、毛蕊花糖苷2.2％、甘露醇含量2.5％、甜菜碱含量2.2％，多糖含量大于8.0％。可用于制作肉苁蓉颗粒饮片(肉苁蓉浓缩颗粒)使用。 

(4)蒸馏精油制取阶段 

a.来自(2)a的精油直接制得肉苁蓉蒸馏精油。 

b.肉苁蓉蒸馏精油的得率为0.05％，为淡黄色油状液体，有芳香味道，可用于研发试验材料、抗肿瘤新药物的开发原料。 

(5)脂溶性提取物制取阶段 

a.将来自(2)b.的浓缩脂状物，在干燥器中脱水，即成脂溶性提取物。 

b.脂溶性提取物得率为1.3％，为灰色浓稠液体，可用于研发试验材料、新药物开发原料。 

(6)甘露醇浸膏制取阶段 

a.将来自(2)b.富含甘露醇和单糖等的10％乙醇溶液，真空干燥，即得甘露醇浸膏产品 

b.甘露醇浸膏产品得率为3.8％，灰褐色稠膏状，甘露醇含量55％，水分56％，可用润肠药物等的研发材料。 

(7)苯乙醇苷浸膏制取阶段 

a.将上述(2)d.中的95％乙醇洗脱液，泵入浓缩罐中，在60℃水浴下降压至沸腾，回收乙醇、蒸掉水分，浓缩至比重1.10，得稠浸膏，稠浸膏进入烘干箱内，常温干燥，粉碎，成干浸膏粉，即肉苁蓉苯乙醇苷类浸膏产品。 

b.苯乙醇苷浸膏得率为5％，为灰色干粉，水分含量小于11％，高效液相色谱检测，指标性成分为松果菊苷＞22.0％、毛蕊花苷＞5.2％。 

(8)生物碱浸膏制取阶段 

a.将上述(2)e.中的H盐酸洗脱液，泵入浓缩罐中，在60℃水浴下降压至沸腾，蒸掉水分，浓缩至稠浸膏，稠浸膏进入烘干箱内，常温干燥，粉碎，成干浸膏粉，即生物碱浸膏干粉产品。 

b.生物碱浸膏干粉得率为12％，产品为灰色干粉状，水分含量11％，比色法检测，指标性成分为甜菜碱含量56％，可用于保肝药开发。 

(9)多糖类浸膏制取阶段 

a.将上述(2)f.中的上清液，加入95％的乙醇至乙醇含量80％， 

离心(3000r/min)15min，收取沉淀物，干燥至稠膏，即得肉苁蓉多糖类浸膏产品。 

b.肉苁蓉多糖类浸膏得率为4％，产品为灰色，水分含量50％，苯酚-硫酸法检测，多糖含量92％。 

Claims (24)

1.一种肉苁蓉多种有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其特征在于：该集成方法包括如下九个阶段：(1)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段；(2)粗提物的分离精制；(3)肉苁蓉总浸膏制取；(4)蒸馏精油的制取；(5)脂溶性提取物制取；(6)甘露醇浸膏制取；(7)苯乙醇苷浸膏制取；(8)生物碱浸膏制取；(9)多糖类浸膏制取。

2.根据权利要求1所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(1)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段，具体包括步骤：

a.药材前处理：选取肉苁蓉茎块、饮片或粉末；

b.备料与投料：称取的肉苁蓉饮片，投入带有蒸馏物回收功能的多功能提取罐内；

c.醇提：采用醇溶液回流热浸提法在多功能提取罐中进行；

d.水煎浸提：采用水煎法在多功能提取罐中进行。

3.根据权利要求2所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(1)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段的具体步骤包括：

c.醇提：将药材量6～10倍量(w/v)的85～95％乙醇溶液，投入罐内，在50～60℃水浴下浸提取2～8小时，经滤网放出浸体液，再用药材用量2～6倍量浸提液(w/v)同样条件重复浸提2～8小时放出浸体液，两次所得滤液泵入浓缩罐中合并，在50～60℃水浴下减压至沸腾，浓缩回收乙醇，浓缩到浓缩物与原药材量的重量比为1∶2(重量比)，得醇提浓缩物；滤渣饮片留作下一部继续提取使用；多功能提取罐的蒸馏收集器中的挥发油收集物取出备用；

d.水煎浸提：在(1)c的滤渣饮片中，加入6～10倍量的水，在100℃水浴下煎煮1～3小时，经滤网放出煎液，再用药材用量2～6倍量的水，同样条件重复煎煮1～3小时放出煎液。两次所得滤液泵入浓缩罐中，在60℃～90℃水浴下减压至沸腾，蒸掉水分浓缩煎液，浓缩到浓缩物比重为1.05～1.10g/ml，得水提浓缩物；滤渣饮片排出罐外；多功能提取罐的蒸馏收集器中的蒸馏收集物取出备用。

4.根据权利要求3所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(1)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段的具体步骤包括：

c.醇提：将药材量8倍量(w/v)的90％乙醇溶液，投入罐内，在50～60℃水浴下浸提取4小时，经滤网放出浸体液，再用药材用量4倍量浸提液同样条件重复浸提4小时放出浸体液。两次所得滤液泵入浓缩罐中合并，在50～60℃水浴下减压至沸腾，浓缩回收乙醇，浓缩到浓缩物与原药材量的重量比为1∶2(重量比)，得醇提浓缩物；滤渣饮片留作下一部继续提取使用；多功能提取罐的蒸馏收集器中的挥发油收集物取出备用；

d.水煎浸提：采用水煎法在多功能提取罐中进行。在(1)c的滤渣饮片中，加入8的水，在100℃水浴下煎煮2小时，经滤网放出煎液，再用药材用量4倍量的水，同样条件重复煎煮2小时放出煎液；两次所得滤液泵入浓缩罐中，在80℃水浴下减压至沸腾，蒸掉水分浓缩煎液，浓缩到浓缩物比重为1.05～1.10g/ml，得水提浓缩物；滤渣饮片排出罐外；多功能提取罐的蒸馏收集器中的蒸馏收集物取出备用。

5.根据权利要求1-4任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(2)成分分离阶段，具体包括步骤：

a.挥发油的萃取分离；

b.醇提浓缩物的分离；

c.水提浓缩物的分离；

d.过大孔树脂中分离；

e.过强酸性阳离子树脂柱分离；

f.合并液脱蛋白脱色分离。

6.根据权利要求5所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(2)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段的具体步骤为：

a.挥发油的萃取分离

将来自(1)c.和(1)d.浸提过程中，多功能提取罐挥发油收集器中收集的精油合并，在干燥器中干燥，脱去水份，分离出挥发油粗品。

b.醇提浓缩物的分离

将(1)c中醇浸提所得的醇提浓缩物加水进行水沉，加水至乙醇含量降低到5～15％，离心，分出沉淀物，水沉淀物收集留作后面使用；上清液用石油醚萃取，按1∶1(v/v)量泵入液-液连续萃取塔内，得萃取液和萃取余液；萃取液为含脂溶物的石油醚溶液，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收石油醚，得脂溶性油状液体，备用；萃取余液泵入储液罐内，用于制作甘露醇浸膏。

c.水提浓缩物的分离

将(1)d中水煎浸提所得的水提浓缩物加90％的乙醇进行醇沉，至乙醇含量为75～85％，离心，分离沉淀物，沉淀物为醇沉滤渣，留作后面待用；上清液为富含醇溶物的75～85％乙醇溶液，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收乙醇，浓缩至无乙醇味道，得水溶性浓缩液，待过大孔树脂柱使用；

d.过大孔树脂中分离

取来自上面(2)c.的水溶性浓缩液，投入大孔树脂柱顶端，先用水洗脱，再用95％乙醇洗脱；水洗脱液泵入强酸性阳离子树脂柱顶端内；95％乙醇洗脱液泵入真空浓缩罐中，制取苯乙醇苷浸膏用；

e.过强酸性阳离子树脂柱分离

取来自(2)d.中的水洗脱液，投入强酸性阳离子树脂柱顶端，先用水洗脱，再用2mol/L的HCL洗脱；水洗脱液收集储存，于下一步使用；盐酸洗脱液，泵入真空浓缩罐中用于制作肉苁蓉生物碱浸膏产品；

f.合并液脱蛋白脱色分离

将来自(2)a.的水沉滤渣、(2)b.醇沉滤渣以及(2)d.的水洗脱物三项合并，除去蛋白质，脱去色素，过滤，丢弃去渣滓，保留上清液用于制作多糖类浸膏产品。

7.根据权利要求6所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(2)肉苁蓉有效成分粗提与浓缩阶段的具体步骤为：

a.挥发油的萃取分离

将来自(1)c.和(1)d.浸提过程中，多功能提取罐挥发油收集器中收集的精油合并，在干燥器中干燥，脱去水份，分离出挥发油粗品；

b.醇提浓缩物的分离

将(1)c中醇浸提所得的醇提浓缩物加水进行水沉，加水至乙醇含量降低到10％，离心，分出沉淀物，水沉淀物收集留作后面使用；上清液用石油醚萃取，按1∶1(v/v)量泵入液-液连续萃取塔内，得萃取液和萃取余液。萃取液为含脂溶物的石油醚溶液，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收石油醚，得脂溶性油状液体，备用；萃取余液泵入储液罐内，用于制作甘露醇浸膏；

c.水提浓缩物的分离

将(1)d中水煎浸提所得的水提浓缩物加90％的乙醇进行醇沉，至乙醇含量为80％，4000r/min离心，分离沉淀物，沉淀物为醇沉滤渣，留作后面待用；上清液为富含醇溶物的80％乙醇溶液，泵入浓缩罐中，负压浓缩回收乙醇，浓缩至无乙醇味道，得水溶性浓缩液，待过大孔树脂柱使用。

d.过大孔树脂中分离

取来自上面(2)c.的水溶性浓缩液，投入AB-8型大孔树脂柱顶端，先用水洗脱，再用95％乙醇洗脱；水洗脱液泵入强酸性阳离子树脂柱顶端内；95％乙醇洗脱液泵入真空浓缩罐中，制取苯乙醇苷浸膏用；

e.过强酸性阳离子树脂柱分离

取来自(2)d.中的水洗脱液，投入001X7强酸性阳离子树脂柱顶端，先用水洗脱，再用2mol/L的HCL洗脱；水洗脱液收集储存，于下一步使用；盐酸洗脱液，泵入真空浓缩罐中用于制作肉苁蓉生物碱浸膏产品。

f.合并液脱蛋白脱色分离

将来自(2)a.的水沉滤渣、(2)b.醇沉滤渣以及(2)d.的水洗脱物三项合并，用Sevag法除去蛋白质，再加入5％活性炭脱去色素，过滤，丢弃去渣滓，保留上清液用于制作多糖类浸膏产品。

8.根据权利要求1-7任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(3)肉苁蓉总浸膏制取阶段，具体包括步骤：

将来自(1)c.的醇提浓缩物和来自(1)d.的水提浓缩物一并混合，真空(60℃)下浓缩成稠膏状，再加入提取罐挥发油收集器中收集的精油，即为肉苁蓉总浸膏。

9.根据权利要求1-8任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(4)蒸馏精油制取阶段，具体包括步骤：

来自(2)a的精油经干燥器干燥直接制得肉苁蓉蒸馏精油。

10.根据权利要求1-9任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(5)脂溶性提取物制取阶段，具体包括步骤：

将来自(2)b.的浓缩脂状物，在干燥器中脱水，即成脂溶性提取物。

11.根据权利要求1-10任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(6)甘露醇浸膏制取阶段，具体包括步骤：

将来自(2)b.富含甘露醇和单糖等的10％乙醇溶液，真空干燥，即得甘露醇浸膏产品。

12.根据权利要求1-11任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(7)苯乙醇苷浸膏制取阶段，具体包括步骤：

将上述(2)d.中的95％乙醇洗脱液，泵入浓缩罐中，在55℃～65℃水浴下降压至沸腾，回收乙醇、蒸掉水分，浓缩至比重1.10，得稠浸膏，稠浸膏进入烘干箱内，常温干燥，粉碎，成干浸膏粉，即肉苁蓉苯乙醇苷类浸膏产品。

13.根据权利要求12所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中阶段(7)苯乙醇苷浸膏制取阶段所述的水浴温度为60℃。

14.根据权利要求1-13任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(8)生物碱浸膏制取阶段，具体包括步骤：

将上述(2)e.中的H盐酸洗脱液，泵入浓缩罐中，在55℃～65℃水浴下降压至沸腾，蒸掉水分，浓缩至稠浸膏，稠浸膏进入烘干箱内，常温干燥，粉碎，成干浸膏粉，即生物碱浸膏干粉产品。

15.根据权利要求14所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中所述阶段(8)生物碱浸膏制取阶段所述的水浴温度为60℃。

16.根据权利要求1-15任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(9)多糖类浸膏制取阶段，具体包括步骤：

将上述(2)f.中的上清液，加入95％的乙醇至乙醇含量75％～85％，离心15min，收取沉淀物，干燥至稠膏，即得肉苁蓉多糖类浸膏产品。

17.根据权利要求1-16任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法，其中，所述阶段(9)多糖类浸膏制取阶段，具体包括步骤：

将上述(2)f.中的上清液，加入95％的乙醇至乙醇含量80％，3000r/min离心15min，收取沉淀物，干燥至稠膏，即得肉苁蓉多糖类浸膏产品。

18.根据权利要求1-17任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法制得的肉苁蓉总浸膏。

19.根据权利要求1-17任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法制得的脂溶性提取物。

20.根据权利要求1-17任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法制得的蒸馏精油。

21.根据权利要求1-17任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法制得的甘露醇浸膏。

22.根据权利要求1-17任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法制得的苯乙醇苷浸膏。

23.根据权利要求1-17任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法制得的生物碱浸膏。

24.根据权利要求1-17任一所述的一种肉苁蓉不同类有效成分联合提取及分类制作浸膏的集成方法制得的多糖类浸膏。

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