CN103275239B - 非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，是通过基团保护技术，利用空间位组较大的保护基保护多糖伯羟基，区域选择性合成了非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖，拓展了圆头蒿多糖作为天然活性物质的应用范围。本发明所制备的非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖的取代度和分子量可以通过硫酸化试剂的比例调节优化，以满足不同领域要求。另外，本发明不需要特殊设备，简单可控，适合推广应用。
Description
技术领域
本发明属化学合成领域，涉及一种硫酸化多糖的合成方法，尤其涉及一种通过基团保护合成非伯羟基取代的硫酸化多糖的方法。
技术背景
硫酸化多糖（sulfated polysaccharide），亦称多糖硫酸酯（polysaccharide sulfate），是多糖大分子链中单糖分子上的某些羟基被硫酸根所取代而形成的一种化学结构复杂、生物活性多样、构效关系鲜明的多糖衍生物。自Yoshida等发现含硫酸基多糖具有体内抗肿瘤作用（Yoshida et al. Biochemical Pharmacology 15,3, 2887-2895）以及美国国家癌症研究所（National Cancer Institute）对海洋无脊椎动物提取物中的硫酸多糖研究显示出较强的抗艾滋病病毒（HIV）活性（Ito et al. Antiviral Research 7, 361-367）等研究成果报道以来，引起了糖领域研究者的极大兴趣。此后，研究者对许多原来不具备生物活性的或生物活性较低的多糖进行了人工硫酸化修饰，得到的多糖在某些方面的生物活性大大增强（Yang et al. International Journal of Biological Macromolecules 2012 50, 3, 768-772），由此极大的推动了人工合成硫酸酯多糖的研究。除已经发现的抗肿瘤、抗凝血作用外，近年来不断发现合成的多糖硫酸酯具有多种生物应答调节功能，如抗氧化、增强机体免疫功能、抗病毒活性等，使多糖的硫酸化修饰成为多糖研究和抗肿瘤药物开发领域的一个热点。
CN 1232040A公开了果聚糖硫酸酯、合成方法及其应用，其平均分子量为708~5838道尔顿，含硫重量百分比为4~21%。CN 1583800A公开了抗肿瘤活性茯苓菌核葡聚糖硫酸酯及其制备方法和用途，其重均分子量为0.8×104~16.4×104道尔顿，硫酸酯基团取代度为0.66~1.21。CN 1651466A公开了一种多糖的硫酸酯化衍生物及其制法和用途，其分子量为45×104~64×104道尔顿，硫酸基团取代度为0.13~1.3。CN 1985592A公开了一种硫酸酯多糖或寡糖抗植物病毒剂及其制备方法。CN 1544477A公开了硫酸酯化生漆多糖及其制备的方法和用途。
现有文献和专利主要集中在使用硫酸化试剂直接对多糖进行衍生化，而硫酸化多糖中硫酸根的取代位置和数目对其生物活性有着重要的作用。Alban等报道硫酸化葡聚糖抗凝血活性的提高取决于2，3，4（6）位的葡萄糖单体上是否有硫酸基取代（Alban et al. Carbohydrate Polymer 2002, 47, 267-276）。天然硫酸化多糖卡拉胶中硫酸根的数目和位置也对其抗病毒、抗凝血活性有着显著影响，如λ-卡拉胶中α-D-半乳糖2，6位的两个硫酸根在其抗凝血活性中起决定作用（Miller. et al. Carbohydrate Research 1998, 309, 1, 39-43）。在对硫酸化甲壳质和硫酸化羧甲基甲壳质研究中发现，O-硫酸化壳聚糖具25%的肝素活性，N-硫酸化壳聚糖无活性；C-6-硫酸化-N-羧甲基化壳聚糖具45%的肝素活性，可见，C-6位上的硫酸根可显著提高其活性（Nie et al. International Journal of Biological Macromolecules, 2006, 39, 228-233）。因此，对多糖进行区域选择性硫酸化可能得到活性不同的多糖衍生物，但是多糖分子量一般较高，空间位阻效应较强，天然活性多糖的区域选择性硫酸化难度较大。
圆头蒿多糖来源于菊科蒿属植物圆头蒿（Artemisia sphaerocephala），其种子中多糖类胶体含量约为20％，具有不同于其他生物胶体的特殊性能：115℃以上高温不变性，粘度是明胶的1800倍，自身吸水60倍，不溶于热的稀酸、稀碱和一般溶剂，可均匀分散于水中呈有限吸水溶胀状态。ZL200510002228.5报道了一种降糖的沙蒿多糖制备方法及其应用，天然沙蒿多糖可用于治疗化学性糖尿病，降低血糖，显著减缓糖尿病引起的体重下降，并能减少糖尿病对肝、肾的损伤，降低血液中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮的含量。因此，对圆头蒿多糖进行区域选择性硫酸化可改变其物理化学性质和生物活性。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术中存在的问题，提供一种非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法。
本发明非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，包括以下工艺步骤：
（1）圆头蒿多糖溶液的制备：将圆头蒿多糖加入到无水甲酰胺中，室温下搅拌（500~1200转/分钟）4~6小时，得到均一的圆头蒿多糖溶液；
圆头蒿多糖与无水甲酰胺的重量体积为0.03~0.04g/mL。
（2）圆头蒿多糖伯羟基的保护：将三苯基氯甲烷溶于吡啶中，加入到上述圆头蒿多糖溶液中，N2保护下于70℃~80℃反应8~12h；反应结束降至室温，加蒸馏水洗涤，再用无水乙醇洗涤后，于0.06~0.08MPa下抽滤，滤饼在40~60℃干燥10~14小时，得到伯羟基保护的圆头蒿多糖；然后加入无水甲酰胺，搅拌（500~1200转/分钟）2~4小时，得伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液；
所述三苯基氯甲烷与吡啶的重量体积比为0.2~0.4 g/mL；所述伯羟基保护的圆头蒿多糖与甲酰胺的重量体积比为0.03～0.04g/mL。
（3）硫酸化试剂的制备：在0~5℃下，将氯磺酸以0.4~0.6 mL/分钟的速度滴加到吡啶中，滴加完毕再反应20～30分钟，得到硫酸化试剂；吡啶与氯磺酸的体积比为4:1~2:1。
（4）硫酸化反应：将硫酸化试剂加入到伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液中，N2保护下，于40~50℃反应1~3小时，冷却至0~5℃，用0~5℃的氢氧化钠溶液中和至pH=7~8，于室温、0.06~0.08MPa下抽滤；滤液装入截流量为8000~12000道尔顿的透析袋中，依次于流水中透析36~72小时，去离子水透析18~36小时；透析袋内液体在50~60℃、0.06~0.08MPa下减压浓缩至原体积的1/20~1/40；再在浓缩液中加入乙醇进行沉淀，然后在3500~4500转/分钟下离心10~15分钟，下层固体在-60~-50℃、1~5Pa的条件下冷冻干燥30~36小时，得硫酸化圆头蒿多糖；
所述硫酸化试剂与伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液的体积比为2:1~4:1；
所述氢氧化钠溶液浓度为1~2 mol/L；
所述去离子水透析过程中，每2～5小时换水一次；
所述乙醇的加入量为：乙醇含量占总体积的75~80%。
（5）硫酸化圆头蒿多糖保护基的脱除：将硫酸化圆头蒿多糖加入二氯乙酸中，在室温下搅拌反应30~60分钟后，用无水乙醇沉淀后在3500~4500转/分钟的条件下离心10~15分钟；下层固体在-60~-50℃、1~5Pa的条件下冷冻干燥30~36小时，得非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖；
所述硫酸化圆头蒿多糖与二氯乙酸的重量体积比为0.01~0.025 g/mL；
所述无水乙醇的用量为二氯乙酸体积的2.5~5倍。
下面通过红外光谱图、13C NMR谱图、元素分析、分子量分布等对本发明合成的硫酸化多糖的结构、性能等进行分析说明。
1、红外光谱图分析
图1为本发明制备的伯羟基保护的圆头蒿多糖及反应之前的红外光谱图。图1中，伯羟基保护的圆头蒿多糖中糖环母体吸收峰并未发生变化。3060.6 cm-1处的三峰为单取代芳环=C-H的特征峰。1741.1 cm-1处为芳环=C-H面外弯曲振动，由于此处的吸收强度较基频弱得多，无法估计取代类型。1606.2 cm-1、1490.0 cm-1和1445.6 cm-1这一区域是芳环C=C整体的伸缩振动产生的，是归属芳环骨架振动的特征峰，说明伯羟基保护的圆头蒿多糖中确实存在苯核。1606.2 cm-1处说明苯振动骨架有偶极矩的改变，属于单取代。758.8 cm-1和703.8 cm-1处为苯环C-H面外弯曲振动，都属于单取代。由此说明，糖环上部分羟基已被三苯基所取代。
图2为硫酸化圆头蒿多糖和非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖的红外光谱图。图2 中，新的吸收峰出现在1261.8 cm-1和820.7 cm-1处，分别对应S=O和C-O-S的特征吸收，说明硫酸化圆头蒿多糖的部分-OH被取代，已被硫酸酯化。经二氯乙酸脱保护后，非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖已没有任何苯基的特征吸收，说明-Tr已完全从多糖分子中除去。硫酸酯的特征吸收仍然存在。
2、13C NMR谱图分析
图3为圆头蒿多糖（A）和非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖（B）的13C NMR谱图。图中，非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖主要的变化在δ 70-80左右C-2至C-5区，δ73.8处Man的C-2峰强度明显降低，并且分裂为多个峰，新的碳化学位移出现在δ81.2处，为被取代的Man的C-2峰。Glc和Gal的C-2峰由于分裂的较为严重而难以准确归属。从δ 60-70处的化学位移看，在δ61.7、δ62.9和δ64.2处C-6的化学位移未发生变化。由以上可以推断，非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖中C-2发生了取代。
3、元素分析
采用元素分析仪（EA3000，Leeman）测定，本发明合成的硫酸化多糖的取代度为0.39~0.71，说明硫酸化多糖已成功合成。
4、分子量分析
采用凝胶色谱-动静态光散射联用测定，本发明合成的硫酸化多糖的重均分子量为3.203×104 Da ~3.983×104Da，分子量分布为2.54~3.55。说明本发明中硫酸化多糖的分子量可根据反应条件进行调节。
5、体外对HepG2肝癌细胞的抑制作用
取对数生长期的HepG-2细胞，用0.25%胰蛋白酶消化，并用含15%新生牛血清的DMEM培养基制成浓度3×105个/ml的单细胞悬液，不断摇动细胞悬液使细胞数均匀，以0.2 ml/孔接种于96孔培养板（板边缘封无菌水，空白组加3孔不含细胞的培养基），置CO2培养箱内在37℃、饱和湿度、5%CO2条件下培养。
培养24 h后细胞贴壁，换含药培养基，每孔加190 μl培养基和10 μl样品液（空白组和对照组加10 μl PBS液），药物终浓度为20，50，100，200，500，1000，5000 μg/ml，每浓度重复6孔，并设不加样品的对照组和空白调零组。置CO2培养箱内在37℃、饱和湿度、5%CO2条件下培养。
样品处理48 h后，每孔加入MTT溶液20 μl，37℃下继续培养4 h。小心弃去孔内上清液，并加入150 μl DMSO，振荡10 min，使紫色结晶完全溶解。用酶标仪在490 nm处测吸光值，对照组以空白组调零，并按下列公式计算抑制率：
抑制率（%）=（1-实验组平均OD值/对照组平均OD值）×100%
根据不同浓度样品的抑制率计算半数抑制浓度（IC50）。结果为：本发明制备的硫酸化多糖对HepG2肝癌细胞的IC50为20644~5.201mg/mL，较伯羟基取代的圆头蒿多糖有显著的体外抑制HepG2细胞的作用。
综上所述，本发明与现有技术相比具有如下优点：
1、本发明利用基团保护技术，区域选择性合成了非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖，较伯羟基取代的圆头蒿多糖有显著的体外抑制HepG2细胞的作用，拓展了圆头蒿多糖作为天然活性物质的应用范围。
2、本发明制备的非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖的取代度和分子量可以通过硫酸化试剂的比例调节优化，以满足不同领域要求；
3、本发明不需要特殊设备，简单可控，成本低，适合推广应用。
附图说明
图1为本发明制备的伯羟基保护的圆头蒿多糖及反应之前的红外光谱图；
图2为硫酸化圆头蒿多糖和非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖的红外光谱图；
图3为圆头蒿多糖（A）和非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖（B）的13C NMR谱图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明硫酸化多糖的合成方法作进一步的说明。
实施例1
（1）圆头蒿多糖溶液的制备：称取0.45g圆头蒿多糖，室温下加入到15mL无水甲酰胺中，在磁力搅拌器上以1000转/分钟的转速搅拌5小时，得均一圆头蒿多糖溶液；
（2）圆头蒿多糖伯羟基的保护：称取2g三苯基氯甲烷，室温下溶于5mL吡啶中；然后加入到上述圆头蒿多糖溶液中，N2保护、80℃下反应9小时；反应结束降至室温后，加蒸馏水50mL洗涤，然后用100mL无水乙醇洗涤3遍，在0.07MPa下抽虑，滤饼在50℃干燥10小时；称取干燥滤饼0.4g，在室温下加入10mL无水甲酰胺，以800转/分钟的转速搅拌3小时，得伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液；
（3）硫酸化试剂的制备：在0℃下，将附有冷凝、搅拌和恒压漏斗装置的反应器置于0℃冰盐浴中，先将吡啶加入到反应器中，打开盛有氯磺酸的恒压漏斗的活塞，使其内的氯磺酸以0.6mL/分钟加速度滴加到反应器中，至氯磺酸和吡啶的体积比为2:1；滴加完毕再反应20分钟，得到硫酸化试剂；
（4）硫酸化反应：取20mL硫酸化试剂加入到10mL伯羟基的保护的圆头蒿多糖溶液中，下N2保护、50℃反应2小时，取出反应器，冷却至2℃，用5℃的2mol/L的氢氧化钠溶液中和至pH=7，室温、0.06MPa下抽滤，将滤液装入截流量为8000~12000道尔顿的透析袋中，依次于流水中透析36小时，去离子水透析24小时（每3小时换水一次），透析袋内液体在60℃、0.08MPa下减压浓缩至原体积的1/30；在浓缩液中加入乙醇进行沉淀（乙醇含量占总体积的75％），然后在3500转/分钟的条件下离心15分钟，取下层固体在-60℃、3Pa的条件下冷冻干燥36小时，得硫酸化圆头蒿多糖；
（5）硫酸化圆头蒿多糖保护基的脱除：称取0.5g硫酸化圆头蒿多糖加入20mL二氯乙酸，在室温下搅拌反应30分钟后，加入100mL无水乙醇进行沉淀，然后在4000转/分钟的条件下离心12分钟，取下层固体在-50℃、1Pa的条件下冷冻干燥30小时，得非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖。
该硫酸化多糖的取代度为0.71，重均分子量为3.203×104Da，分子量分布为3.55。对HepG2肝癌细胞的IC50为2.644mg/mL。
实施例2
（1）圆头蒿多糖溶液的制备：称取0.6g圆头蒿多糖，室温下加入到15mL无水甲酰胺中，在磁力搅拌器上以500转/分钟的转速搅拌6小时得均一圆头蒿多糖溶液；
（2）圆头蒿多糖伯羟基的保护：称取1g三苯基氯甲烷，室温下溶于5mL吡啶中，然后加入到上述圆头蒿多糖溶液中，N2保护，70℃下反应8小时；反应结束降至室温后，加蒸馏水40mL洗涤，然后用80mL无水乙醇洗涤3遍，在0.06MPa下抽虑，滤饼在60℃干燥13小时；称取干燥滤饼0.3g，在室温下加入10mL无水甲酰胺，以1200转/分钟的转速搅拌2小时得伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液；
（3）硫酸化试剂的制备：在3℃下，将附有冷凝、搅拌和恒压漏斗装置的反应器置于0℃冰盐浴中，先将吡啶加入到反应器中，打开盛有氯磺酸的恒压漏斗的活塞，使其内的氯磺酸以0.5mL/分钟加速度滴加到反应器中，至氯磺酸和吡啶的体积比为3:1；滴加完毕再反应30分钟，得到硫酸化试剂；
（4）硫酸化反应：将30mL硫酸化试剂加入到10mL伯羟基的保护的圆头蒿多糖溶液中，N2保护，40℃下反应3小时；取出反应器冷却至5℃，用0℃的1.5mol/L的氢氧化钠溶液中和至pH=8，室温下0.07MPa下抽滤，将滤液装入截流量为8000~12000道尔顿的透析袋中，依次于流水中透析72小时，去离子水透析18小时（每2小时换水一次）；透析袋内液体在50℃、0.07MPa下减压浓缩至原体积的1/40，在浓缩液中加入乙醇进行沉淀（乙醇含量占总体积的80％），然后在4000转/分钟的条件下离心10分钟，取下层固体在-50℃、2Pa的条件下冷冻干燥30小时，得硫酸化圆头蒿多糖；
（5）硫酸化圆头蒿多糖保护基的脱除：称取0.4g硫酸化圆头蒿多糖，加入20mL二氯乙酸，在室温下搅拌反应40分钟后，加入50mL无水乙醇进行沉淀，然后在4500转/分钟的条件下离心10分钟，取下层固体在-55℃、5Pa的条件下冷冻干燥36小时，得非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖。
该硫酸化多糖的取代度为0.63，重均分子量为3.819×104Da，分子量分布为3.09。对HepG2肝癌细胞的IC50为3.839mg/mL。
实施例3
（1）圆头蒿多糖溶液的制备：称取0.6g圆头蒿多糖，室温下加入到15mL无水甲酰胺中，在磁力搅拌器上以1200转/分钟的转速搅拌4小时得均一圆头蒿多糖溶液；
（2）圆头蒿多糖伯羟基的保护：称取1g三苯基氯甲烷，室温下溶于5mL吡啶中，然后加入到上述圆头蒿多糖溶液中，N2保护，75℃下反应12小时；反应结束降至室温后，加蒸馏水60mL洗涤，然后用90mL无水乙醇洗涤3遍，在0.08MPa下抽虑，滤饼在40℃干燥14小时。称取干燥滤饼0.4g，在室温下加入10mL无水甲酰胺，以500转/分钟的转速搅拌4小时得伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液；
（3）硫酸化试剂的制备：在5℃下，将附有冷凝、搅拌和恒压漏斗装置的反应器置于0℃冰盐浴中，先将吡啶加入到反应器中，打开盛有氯磺酸的恒压漏斗的活塞，使其内的氯磺酸以0.4mL/分钟加速度滴加到反应器中，至氯磺酸和吡啶的体积比为4:1；滴加完毕再反应25分钟，得到硫酸化试剂；
（4）硫酸化反应：将40mL硫酸化试剂加入到10mL伯羟基的保护的圆头蒿多糖溶液中，N2保护，45℃下反应2小时；取出反应器冷却至4℃，用2℃的1mol/L的氢氧化钠溶液中和至pH=7，室温下0.08MPa下抽滤，将滤液装入截流量为8000~12000道尔顿的透析袋中，依次于流水中透析72小时，去离子水透析36小时（每4小时换水一次），透析袋内液体在55℃、0.06MPa下减压浓缩至原体积的1/20，在浓缩液中加入乙醇进行沉淀（乙醇含量占总体积的80%），然后在4500转/分钟的条件下离心10分钟，取下层固体在-55℃、5Pa的条件下冷冻干燥30小时，得硫酸化圆头蒿多糖；
（5）硫酸化圆头蒿多糖保护基的脱除：称取0.2g硫酸化圆头蒿多糖加入20mL二氯乙酸，在室温下搅拌反应30分钟后，加入80mL无水乙醇进行沉淀，然后在4500转/分钟的条件下离心15分钟，取下层固体在-60℃、3Pa的条件下冷冻干燥36小时，得非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖。
该硫酸化多糖的取代度为0.39，重均分子量为3.911×104Da，分子量分布为2.74。对HepG2肝癌细胞的IC50为5.201mg/mL。
实施例4
（1）圆头蒿多糖溶液的制备：称取0.45g圆头蒿多糖，室温下加入到15mL无水甲酰胺中，在磁力搅拌器上以800转/分钟的转速搅拌6小时得均一圆头蒿多糖溶液；
（2）圆头蒿多糖伯羟基的保护：称取2g三苯基氯甲烷室温下溶于5mL吡啶中，然后加入到上述15mL圆头蒿多糖溶液中，N2保护，70℃下反应10小时；反应结束降至室温后，加蒸馏水40mL洗涤，然后用100mL无水乙醇洗涤3遍，在0.07MPa下抽虑，滤饼在55℃干燥12小时；称取干燥滤饼0.3g，在室温下加入10mL无水甲酰胺，以1000转/分钟的转速搅拌2小时得伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液；
（3）硫酸化试剂的制备：在2℃下，将附有冷凝、搅拌和恒压漏斗装置的反应器置于0℃冰盐浴中，先将吡啶加入到反应器中，打开盛有氯磺酸的恒压漏斗的活塞，使其内的氯磺酸以0.5mL/分钟加速度滴加到反应器中，至氯磺酸和吡啶的体积比为4:1；滴加完毕再反应20分钟，得到硫酸化试剂；
（4）硫酸化反应：将20mL硫酸化试剂加入到10mL伯羟基的保护的圆头蒿多糖溶液中，N2保护，50℃下反应1小时；取出反应器冷却至5℃，用1℃的2mol/L的氢氧化钠溶液中和至pH=8，室温下0.07MPa下抽滤，将滤液装入截流量为8000~12000道尔顿的透析袋中，依次于流水中透析48小时，去离子水透析24小时（每5小时换水一次），透析袋内液体在55℃、0.08MPa下减压浓缩至原体积的1/30，在浓缩液中加入乙醇进行沉淀（乙醇含量占总体积的75％），然后在4000转/分钟的条件下离心15分钟，取下层固体在-60℃、5Pa的条件下冷冻干燥30小时，得硫酸化圆头蒿多糖；
（5）硫酸化圆头蒿多糖保护基的脱除：称取0.5g硫酸化圆头蒿多糖加入20mL二氯乙酸，在室温下搅拌反应60分钟后，加入70mL无水乙醇进行沉淀，然后在3500转/分钟的条件下离心10分钟，取下层固体在-50℃、1Pa的条件下冷冻干燥30小时，得非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖。
该硫酸化多糖的取代度为0.47，重均分子量为3.983×104Da，分子量分布为2.54。对HepG2肝癌细胞的IC50为4.966mg/mL。
比较例
（1）圆头蒿多糖溶液的制备：称取0.45g圆头蒿多糖，室温下加入到15mL无水甲酰胺中，在磁力搅拌器上以1000转/分钟的转速搅拌5小时，得均一圆头蒿多糖溶液；
（2）硫酸化试剂的制备：在0℃下，将附有冷凝、搅拌和恒压漏斗装置的反应器置于0℃冰盐浴中，先将吡啶加入到反应器中，打开盛有氯磺酸的恒压漏斗的活塞，使其内的氯磺酸以0.6mL/分钟加速度滴加到反应器中，至氯磺酸和吡啶的体积比为2:1；滴加完毕再反应20分钟，得到硫酸化试剂；
（3）硫酸化反应：取20mL硫酸化试剂加入到10mL伯羟基的保护的圆头蒿多糖溶液中，下N2保护、50℃反应2小时，取出反应器，冷却至2℃，用5℃的2mol/L的氢氧化钠溶液中和至pH=7，室温、0.06MPa下抽滤，将滤液装入截流量为8000~12000道尔顿的透析袋中，依次于流水中透析36小时，去离子水透析24小时（每3小时换水一次），透析袋内液体在60℃、0.08MPa下减压浓缩至原体积的1/30；在浓缩液中加入乙醇进行沉淀（乙醇含量占总体积的75％），然后在3500转/分钟的条件下离心15分钟，取下层固体在-60℃、3Pa的条件下冷冻干燥36小时，得硫酸化圆头蒿多糖；
该硫酸化多糖的取代度为0.86，重均分子量为4.443×104Da，分子量分布为3.02。对HepG2肝癌细胞的IC50为8.336mg/mL。对HepG2肝癌细胞的抑制率相对本发明非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖较低。
Claims (10)
1.非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，包括以下工艺步骤：
（1）圆头蒿多糖溶液的制备：将圆头蒿多糖加入到无水甲酰胺中，室温下搅拌4～6小时，得到均一的圆头蒿多糖溶液；
（2）圆头蒿多糖伯羟基的保护：将三苯基氯甲烷溶于吡啶中，加入到上述圆头蒿多糖溶液中，N2保护下于70℃～80℃反应8～12h；反应结束降至室温，加蒸馏水洗涤，再用无水乙醇洗涤，0.06～0.08MPa下抽滤，滤饼在40～60℃干燥10～14小时，得到伯羟基保护的圆头蒿多糖；然后加入无水甲酰胺，搅拌2～4小时，得伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液；
（3）硫酸化试剂的制备：在0～5℃下，将氯磺酸以0.4～0.6 mL/分钟的速度滴加到吡啶中，滴加完毕再反应20～30分钟，得到硫酸化试剂；吡啶与氯磺酸的体积比为4:1～2:1；
（4）硫酸化反应：将硫酸化试剂加入到伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液中，N2保护下，于40～50℃反应1～3小时，冷却至0～5℃，用0～5℃的氢氧化钠溶液中和至pH=7～8，于室温、0.06～0.08MPa下抽滤；滤液装入截流量为8000～12000道尔顿的透析袋中，依次于流水中透析36～72小时，去离子水透析18～36小时；透析袋内液体在50～60℃、0.06～0.08MPa下减压浓缩至原体积的1/20～1/40；再在浓缩液中加入乙醇进行沉淀，然后在3500～4500转/分钟下离心10～15分钟，下层固体在-60～-50℃、1～5Pa的条件下冷冻干燥30～36小时，得硫酸化圆头蒿多糖；
（5）硫酸化圆头蒿多糖保护基的脱除：将硫酸化圆头蒿多糖加入二氯乙酸中，在室温下搅拌反应30～60分钟后，用无水乙醇沉淀后在3500～4500转/分钟的条件下离心10～15分钟；下层固体在-60～-50℃、1～5Pa的条件下冷冻干燥30～36小时，得非伯羟基取代的硫酸化圆头蒿多糖。
2.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（1）中，圆头蒿多糖与无水甲酰胺的重量体积比为0.03～0.04g/mL。
3.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（2）中，所述三苯基氯甲烷与吡啶的重量体积比为0.2～0.4 g/mL。
4.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（2）中，所述伯羟基保护的圆头蒿多糖与甲酰胺的重量体积比为0.03～0.04g/mL。
5.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（1）、（2）中的搅拌转速为500～1200转/分钟。
6.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（4）中，所述硫酸化试剂与伯羟基保护的圆头蒿多糖溶液的体积比为2:1～4:1。
7.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（4）中，所述氢氧化钠溶液浓度为1～2 mol/L。
8.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（4）中，所述去离子水透析过程中，每2～5小时换水一次。
9.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（5）中，所述硫酸化圆头蒿多糖与二氯乙酸的重量体积比为0.01～0.025 g/mL。
10.如权利要求1所述非伯羟基取代的硫酸化多糖的合成方法，其特征在于：步骤（5）中，所述无水乙醇的用量为二氯乙酸体积的2.5～5倍。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0497988A1 (en) * | 1990-08-23 | 1992-08-12 | Dainippon Ink And Chemicals, Inc. | Antiviral agent |
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|---|---|---|---|---|
| EP0497988A1 (en) * | 1990-08-23 | 1992-08-12 | Dainippon Ink And Chemicals, Inc. | Antiviral agent |
| CN1651466A (zh) * | 2004-12-31 | 2005-08-10 | 中国药科大学 | 一种多糖的硫酸酯化衍生物及其制法和用途 |
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Non-Patent Citations (4)
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|---|
| "Regioselective Esterification and Etherification of Cellulose: A Review";S.CarterFox等;《Biomacromolecules》;20110427;第12卷(第6期);第1956-1972页 * |
| "多糖的硫酸酯化研究探要";何智键等;《中医药学刊》;20031231;第21卷(第12期);第2087-2088页 * |
| "多糖硫酸化修饰和多糖硫酸酯的研究进展";黄小燕等;《天然产物研究与开发》;20070430;第19卷(第2期);第328-332页 * |
| Junlong Wang等."Sulfated modification,characterization and structure–antioxidant relationships of Artemisia sphaerocephala polysaccharides".《Carbohydrate Polymers》.2010,第81卷(第4期),第897-905页. * |
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