CN103263711B - 针头组件、注射装置 - Google Patents

Abstract

本申请公开了一种针头组件和注射装置，包括软管、第一针梗、注射套管以及与注射器相连的连接件，第一针梗由金属制成，注射套管为软胶管且包括第二针梗和第二针尖，软管连接第一针梗和连接件，第二针梗套设在第一针梗上。本申请还公开了一种小鼠模型的建立方法。本申请的针头组件由于第一针梗由金属制成，注射套管包括第二针梗和第二针尖，第二针梗套设在第一针梗上，注射套管为软胶管，便于手指捏持注射套管，使注射套管刺入胆囊内，降低了第二针尖在穿刺过程中造成的穿透胆囊所造成的胆汁外泄可能，通过小鼠胆囊逆行注射基因至肝脏，达到有效地进行靶器官的基因传送，增加目的基因的转染效率，同时本申请也降低了实验小鼠的死亡率。

Description

针头组件、注射装置

技术领域

本申请涉及针头组件、注射装置及小鼠模型的建立方法。

背景技术

肝脏是人体内最大的以代谢为主的实质性器官，其独特的形态组织结构和化学组成特点，赋予肝脏复杂多样的生物化学功能。肝由肝动脉和门静脉双重供血，使肝细胞获得充足的氧和营养成分；肝内亦存在肝静脉和胆道系统双重输出通道，可输出其代谢物质或其他组织利用物；肝内具有丰富的肝血窦，为肝细胞与血液进行物质交换提供有力场所；肝内也含有丰富的酶体系，使肝细胞除了正常代谢功能外，还具有特殊的代谢功能，如合成凝血因子、尿素及酮体等物质。

正常情况下，营养物质及酶类等在肝内参与氧化还原反应，但当肝实质细胞受损，如急慢性肝炎、肝硬化、肝癌的患者正常代谢途径就会受阻，导致肝内代谢合成途径受影响。如肝实质损伤直接影响肝生物转化酶类的合成，从而间接对其他重要器官也造成影响。

逆行胆管内注射（Rettograde Intrabiliary Infusion）最近发展成为更有效的通过肝靶向递送载体的给药途径，载体一般包括腺病毒、慢病毒、脂质复合物和高分子纳米复合物等。逆行胆管内注射优点是，可以更直接的将复合物载体通过胆小管转染至肝实质细胞，从而减少了被kupffer细胞非特异性吞噬的影响。kupffer细胞存在于肝血窦中，能够吞噬和清除大部分肝血窦中的细菌、异物及衰老的红细胞，以消除这些物质对机体的损伤。通过门静脉或者其他小静脉注射的方法传输DNA，首先要经过kupffer细胞进行清除，这样会导致靶器官的基因表达效率降低。由于大鼠与小鼠解剖学和生理学特点各不相同，现有资料表明胆管注射法主要面对的实验对象是大鼠，是由于大鼠具有体积大、生存能力强、无胆囊、手术易操作等特点。但是大鼠生存时间长，接触的环境因素比小鼠长，所以体内的遗传物质发生变化的概率要高。而小鼠作为普通常用实验动物，具有经济、易饲养控制、生产繁殖周期短及特殊生理特性等特点，更多的应用于实验研究。但是由于小鼠体积小，机体各器官也较小，给基因的靶向输送的提高了难度。

现有技术中，一般采用尾静脉注射的方法，将含有治疗性的外源基因载体直接导入实验用小鼠体内，使靶基因在目的细胞或组织中表达。但将含有DNA 的大体积溶液快速注射导致此溶液大量在小鼠的下腔静脉进行积累，短时间内，左心室无法将如此大体积的溶液进行动脉射血完成体内血液循环。在下腔静脉内产生了较高的静脉压，从而使带有注射溶液的肝门静脉的血液短时间倒流，迫使倒流的血液被冲击至毛细血管出口和小静脉之间。同时高压导致肝血窦孔径增大，肝细胞膜通透性增强，因此外源性DNA能够在肝脏内瞬时表达。但大体积高压注射，易使动物血液循环受阻，直接导致动物死亡。

发明内容

本申请提供一种针头组件、注射装置及小鼠模型的建立方法。

根据本申请的第一方面，本申请提供一种针头组件，包括软管、第一针梗、注射套管以及与注射器相连的连接件，所述第一针梗由金属制成，所述注射套管为软胶管且包括第二针梗和第二针尖，所述软管连接所述第一针梗和所述连接件，所述第二针梗套设在所述第一针梗上。

所述注射套管由聚乙烯制成，所述第一针梗由不锈钢制成。

所述注射套管的外径小于等于1mm。

所述连接件包括第三针梗以及与所述注射器连接的针栓。

根据本申请的第二方面，本申请提供一种的注射装置，包括注射器，还包括软管、第一针梗、注射套管以及与所述注射器相连的连接件，所述第一针梗由金属制成，所述注射套管为软胶管且包括第二针梗和第二针尖，所述软管连接所述第一针梗和所述连接件，所述第二针梗套设在所述第一针梗上。

所述注射套管由聚乙烯制成，所述第一针梗由不锈钢制成。

所述注射套管的外径小于等于1mm。

所述连接件包括第三针梗以及与所述注射器连接的针栓。

还包括与所述注射器连接的微量泵。

根据本申请的第三方面，本申请提供一种小鼠模型的建立方法，包括以下步骤：

取实验用BALB/c小鼠，6周龄-8周龄；

使用上述注射装置，进行逆行胆管注射。

由于采用了以上技术方案，使本申请具备的有益效果在于：

在本申请的具体实施方式中，由于针头组件包括软管、第一针梗、注射套管以及与注射器相连的连接件，第一针梗由金属制成，注射套管包括第二针梗和第二针尖，第二针梗套设在第一针梗上，注射套管为软胶管，便于手指捏持注射套管，使注射套管刺入胆囊内，降低了第二针尖在穿刺过程中造成的穿透 胆囊所造成的胆汁外泄可能，通过小鼠胆囊逆行注射基因至肝脏，达到有效地进行靶器官的基因传送，增加目的基因的转染效率，同时本申请也降低了实验小鼠的死亡率。

附图说明

图1为本申请针头组件在一种实施方式中的结构示意图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式结合附图对本申请作进一步详细说明。

实施例一： 

如图1所示，本申请的针头组件，其一种实施方式，包括软管11、第一针梗12、注射套管13和连接件14，连接件14与注射器相连，第一针梗12由金属制成，注射套管13为软胶管，注射套管13包括第二针梗和第二针尖，软管11连接第一针梗12和连接件14，第二针梗套设在第一针梗12上。注射套管13的长度为4～6mm，第二针尖的长度为2～3mm。

在一种实施方式中，注射套管13由聚乙烯制成，第一针梗12由不锈钢制成。

在一种实施方式中，注射套管13的外径小于等于1mm，注射套管13的内径大于等于0.61mm。在本实施方式中，注射套管13的外径可以为1mm，内径为0.61mm。

在一种实施方式中，连接件14可以是针头，具体可使用27号针头。连接件14可以包括第三针梗以及与注射器连接的针栓。

实施例二： 

如图1所示，本申请的注射装置，其一种实施方式，包括注射器（图未示）、软管11、第一针梗12、注射套管13和连接件14，连接件14与注射器相连，第一针梗12由金属制成，注射套管13为软胶管，注射套管13包括第二针梗和第二针尖，软管11连接第一针梗12和连接件14，第二针梗套设在第一针梗12上。注射套管13的长度为4～6mm，第二针尖的长度为2～3mm。

在一种实施方式中，注射套管13由聚乙烯制成，第一针梗12由不锈钢制成。

在一种实施方式中，注射套管13的外径小于等于1mm。注射套管13的内径大于等于0.61mm。在本实施方式中，注射套管13的外径可以为1mm，内径为 0.61mm。

在一种实施方式中，连接件14可以是针头，具体可使用27号针头。连接件14可以包括第三针梗以及与注射器连接的针栓。

在一种实施方式中，本申请的注射装置还可以包括微量泵（图未示），微量泵与注射器连接。

实施例三： 

本申请的小鼠模型的建立方法，其一种实施方式，包括以下步骤：

步骤202：取实验用BALB/c小鼠，6周龄-8周龄；

步骤204：使用本申请的注射装置，进行逆行胆管注射。

本申请的小鼠模型的建立方法，基于小鼠的肝靶向性基因传递技术，通过小鼠胆囊逆行注射载体及DNA，载体及DNA可改变成临床常用化疗药物或其他治疗药物。

本申请的小鼠模型的建立方法，其一种应用例包括以下步骤：

步骤302：取实验用BALB/c小鼠，6周龄-8周龄。术前12h实验用鼠禁食，自由饮水。制备穿刺用胶管针：使用外径为0.61mm、内径为0.28mm、长度为300mm的聚乙烯材料软胶管（Intramedic,Sparks,MD,PE10），将27G1/2针头（BD,USA,NO.305109）剪断，前半段针头与软胶管头部相连，使用低温不干胶连接使其紧密；由于针头尖锐，需使用约5mm同样材质及内外径的聚乙烯材料软胶管(Intramedic,Sparks,MD,PE20)套入针头部，针头被软管包裹，以确保手术穿刺过程中针头不会穿透胆囊壁造成胆汁外泄。后半段针头与软胶管尾部相连。针头后半部分连入1ml-2.5ml普通注射器（螺旋头），使用前需在75%乙醇中浸泡。

步骤304：50mg/kg戊巴比妥钠进行小鼠腹腔注射麻醉后，使用75%无水乙醇擦拭小鼠，随后将小鼠固定于解剖台上，使用脱毛膏进行腹部脱毛，随后使用生理盐水进行清洗，碘酒擦拭2遍。

步骤306：无菌条件下行上腹部正中切口，分层剪开皮肤、肌肉、韧带等。其中，剑突两侧韧带可稍微剪开一些，可充分暴露手术部位。

步骤308：暴露小鼠肝脏、胆囊及十二指肠，使用医用止血钳夹住剑突将其向上固定，使用动物手术撑开器分别撑开两侧肌肉，辨别胆囊与肝脏及十二指肠相对位置。

步骤310：辨别胆总管走向，使用小动脉夹夹闭胆总管与十二指肠连接处；同时将打松结的6号丝线置于小鼠胆囊周围备用，左手使用普通眼科镊（无齿） 提拉胆囊（胆囊柔韧，动作需轻），右手捏住特制穿刺用胶管针，以针头紧贴胆囊壁垂直刺入胆囊内（胆囊壁较滑，需谨慎为之）。由于胆囊壁有一定韧性，已套入软胶管的针头硬度刚好可以穿透胆囊。穿刺后可使用1ml注射器抽取胆汁，移除。

步骤312：穿刺后，需使用小动脉夹夹闭胆囊壁与针头软管，同时使用预置的丝线结扎胆囊壁与针头软管连接处（不可移除小动脉夹）。

步骤314：穿刺成功后，注射器可接微量泵，稳定匀速地进行药物注射。注射药物前可不用生理盐水进行清洗，由于肝脏质地脆，反复注入多量液体易损伤，发生腹腔内出血等后果。

步骤316：待药物注射完毕后，可将针头留置于胆囊内1min，确保和的液体充分吸收不至于外流。另取适当长度6号丝线预置于结扎丝线下方结扎胆囊。提起胆囊上部边缘，取下胆囊部小动脉夹，拔出针头。取下胆总管与十二指肠连接处小动脉夹。手术过程中，时刻观察小鼠的呼吸频率和心率，有条件者可使用小动物生理监测仪进行监测。

步骤318：手术完毕后，确认胆囊已结扎并无胆汁外漏后清洗黏连部位后逐层关闭腹部。术后注射复方乳酸钠葡萄糖溶液及适量抗生素（可不注射），同时进行术后护理，适宜温度、湿度、清洁饲养术后小鼠。

以上内容是结合具体的实施方式对本申请所作的进一步详细说明，不能认定本申请的具体实施只局限于这些说明。对于本申请所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换。

Claims (9)

1.一种针头组件，其特征在于，包括软管、第一针梗、注射套管以及与注射器相连的连接件，所述第一针梗由金属制成，所述注射套管为软胶管且包括第二针梗和第二针尖，所述软管连接所述第一针梗和所述连接件，所述第二针梗套设在所述第一针梗上。

2.如权利要求1所述的针头组件，其特征在于，所述注射套管由聚乙烯制成，所述第一针梗由不锈钢制成。

3.如权利要求2所述的针头组件，其特征在于，所述注射套管的外径小于等于1mm。

4.如权利要求1所述的针头组件，其特征在于，所述连接件包括第三针梗以及与所述注射器连接的针栓。

5.一种的注射装置，包括注射器，其特征在于，还包括软管、第一针梗、注射套管以及与所述注射器相连的连接件，所述第一针梗由金属制成，所述注射套管为软胶管且包括第二针梗和第二针尖，所述软管连接所述第一针梗和所述连接件，所述第二针梗套设在所述第一针梗上。

6.如权利要求5所述的注射装置，其特征在于，所述注射套管由聚乙烯制成，所述第一针梗由不锈钢制成。

7.如权利要求6所述的注射装置，其特征在于，所述注射套管的外径小于等于1mm。

8.如权利要求5所述的注射装置，其特征在于，所述连接件包括第三针梗以及与所述注射器连接的针栓。

9.如权利要求5所述的注射装置，其特征在于，还包括与所述注射器连接的微量泵。