CN111345917A - 小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法及装置 - Google Patents

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Abstract

本发明公开小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法及装置，采用注射装置将刚才填充好药物的微量注射器沿心肌纤维走形穿刺，穿刺点位于线栓结扎点下2‑3mm处，穿刺角度与心脏穿刺点切面成30‑45度，切口打开时间尽量短于30s,以避免形成开放性气胸，降低预后。本发明的技术方案能够提高造模后小鼠的生存率，并利用注射物的心肌保护效应来验证注射的成功与否。这个造模方法旨在减少小鼠其他非实验目的的损伤，更加接近真实世界，同时尽可能降低实验成本，提高模型的普及率。

Description

小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法及装置
技术领域
本发明属于心肌注射技术领域，更加具体地说，涉及小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法及装置。
背景技术
心血管疾病与当今相当高的疾病死亡率和发病率直接相关。心脏再生对于急性心肌梗死(AMI)后的治疗以及延缓心力衰竭的进展至关重要(Heidt T,et al.(2014)Differential contribution of monocytes to heart macrophages in steady-stateand after myocardial infarction. Circ Res 115(2):284-295.)。尽管心脏是一个脆弱的器官，与其他器官相比，它的再生能力有限，但最近干细胞的研究进展，使利用干细胞进行心肌梗死后早期修复与血管再生成为可能性(Matsuda K,et al.(2013)Adipose-derived stem cells promote angiogenesis and tissue formation for in vivotissue engineering.Tissue Eng Part A 19(11-12):1327-1335；Yao X, et al.(2015)Nitric oxide releasing hydrogel enhances the therapeutic efficacy ofmesenchymal stem cells for myocardial infarction.Biomaterials 60:130-140；SuT,et al.(2018)Cardiac Stem Cell Patch Integrated with Microengineered BloodVessels Promotes Cardiomyocyte Proliferation and Neovascularization afterAcute Myocardial Infarction.ACS Appl Mater Interfaces 10(39):33088-33096；LiuY,et al.(2013)Transplantation of parthenogenetic embryonic stem cellsameliorates cardiac dysfunction and remodelling after myocardialinfarction.Cardiovasc Res 97(2):208-218.)。然而，干细胞治疗在一定程度上受到移植和移植后存活率低的限制(Li Z,et al.(2009)Imaging survival and function oftransplanted cardiac resident stem cells.J Am Coll Cardiol 53(14):1229-1240)。因此高分子合成生物材料,例如, 水凝胶,被设计用来模拟体内的微环境，不仅可以提供了一个供干细胞锚定与活动的平台, 还可以提供一个龛(niche)以适合细胞移植(Yao X,etal.(2015)Nitric oxide releasing hydrogel enhances the therapeutic efficacy ofmesenchymal stem cells for myocardial infarction. Biomaterials 60:130-140；Christman KL,et al.(2004)Injectable fibrin scaffold improves cell transplantsurvival,reduces infarct expansion,and induces neovasculature formation inischemic myocardium.J Am Coll Cardiol 44(3):654-660)。然而，国际上关于高分子材料与心肌保护之间的研究寥寥无几。主要原因如下：1)高分子材料开发与合成困难；2)小鼠心梗模型以及心梗后心肌注射造模的成功率不高。
小鼠心梗模型以及心梗后心肌注射造模的成功率之所以不高，主要有两点原因：1) 小鼠因其体重远远少于其他模式动物与有效血容量极少的关系，造模容错率极低，尤其是对于心脏方面的造模成功能率就更低了。对于小鼠心肌梗死造模来说，线栓既不能太深也不能太浅，既不能太靠上也不能太靠下(Gao E,et al.(2010)Anovel and efficientmodel of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.CircRes 107(12):1445-1453)。太深会穿透心内膜，造成心室穿孔，太浅线栓结扎时可能会割断冠脉。线栓太靠上会增加小鼠的死亡风险，而太靠近心尖则会使造模效果大大降低。线栓结扎这一步需要大量的时间与精力去练习。2)心肌注射这一步成功率同样不高。首先，传统方法需要体视镜与呼吸机的辅助，这就淘汰掉了很大一部分小型实验室或者初建的实验室。其次，因为研究目的是心梗的损伤与修复，所以必须要减轻单纯由注射所带来的副损伤，而心肌的时刻搏动也给如何选取心肌注射的方式带来了挑战。因此，许多实验室更加倾向于用补片(patch)来研究大鼠心梗后修复(Tang J,et al.(2018) Cardiac cell–integratedmicroneedle patch for treating myocardial infarction.Sci Adv 4(11):eaat9365；Wendel JS,et al.(2015)Functional Effects of a Tissue-Engineered Cardiac PatchFrom Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes in a RatInfarct Model.Stem Cells Transl Med 4(11):1324-1332；Wendel JS,et al.(2014)Functional consequences of a tissue-engineered myocardial patch for cardiacrepair in a rat infarct model.Tissue Eng Part A 20(7-8):1325-1335)。然而，大鼠的品系远远少于小鼠品系，小鼠的某些细胞与细胞器的组织同源性与人更加相似，更有利于进行医学转化，尤其是对于心脏的免疫细胞，如心肌组织原位巨噬细胞(Hulsmans M,etal.(2017) Macrophages Facilitate Electrical Conduction in the Heart.Cell 169(3):510-522e520； Bajpai G,et al.(2018)The human heart contains distinctmacrophage subsets with divergent origins and functions.Nat Med 24(8):1234-1245)。而对于小鼠来说，如果研究补片与心梗后修复的关系(Shafiq M,et al.(2018)Insitu cardiac regeneration by using neuropeptide substance P and IGF-1Cpeptide eluting heart patches.Regen Biomater 5(5):303-316； Melhem M,et al.(2015)AHydrogel Construct and Fibrin-based Glue Approach to DeliverTherapeutics in a Murine Myocardial Infarction Model.J Vis Exp(100):e52562)，为了暴露补片操作的视野，势必会在其他方面进行一些妥协。例如在上述参考文献中，Shafiq M. 等开发了一种补片可以通过底部的微针管将其楔入固定在心脏表面，但是目前来说，由于心脏的自律搏动以及很高的血细胞渗透率，这种方法很难进行医学转化，原因在于楔入的地方只能是心内膜与心外膜，心内膜楔入容易诱发血栓形成，心外膜楔入虽然可以，但是心梗轻者只是保守治疗，重者如ECMO辅助的病人或搭桥的病人虽然会开胸，但是其炎症打击已经极其严重，应用该方法也许会对使心梗病人加重病情，诱发新的炎症风暴。而Melhem M.等虽然没有上述问题，补片以及其固定胶的治疗效果也很好，但是为了暴露手术视野，他们选择剪碎部分小鼠肋骨以扩张手术视野区域，这也许会导致骨内微环境剧烈改变，从系统医学角度来看，也许实验结果是骨与心脏共同作用的结果，从而可能会掩盖部分真实情况。所以目前急需一种更具有针对性的心梗造模及心梗后心肌注射方式来进行下一步深入的研究。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法及装置，以提高造模后小鼠的生存率，并利用注射进入心脏的注射物的心肌保护效应来验证注射的成功与否。这个造模方法旨在减少小鼠其他非实验目的的损伤，更加接近真实世界(real world)，同时尽可能降低实验成本，提高模型的普及率。
小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法，按照下述步骤进行：
步骤1，进行小鼠麻醉
小鼠取仰卧稍右侧卧位，左锁骨中线位于视野中央，对小鼠进行麻醉，待小鼠四肢牵拉无反应，观察呼吸节律规整，达到35-45次/分后进行下一步手术；
在步骤1中，使用气麻机进行气体麻醉，气麻机型号为英国MSS-3S，泵入的气体为含有体积百分数1.5-2％的异氟烷的预混空气，；通过调整异氟烷用量来调整呼吸节律
另外，在步骤1中，如果实验室没有气麻机，可以将棉球浸润于异氟烷中，置于50mL管中，用作麻醉设备予以替代。
步骤2，进行心梗手术造模
使用脱毛膏进行脱毛处理，脱毛范围左边界为左胸骨旁线，右边界为左腋前线，上界为左第二肋，下界为第五肋，脱毛后用手指指腹轻触确定心脏位置并进行消毒；根据触诊，确定手术切口位置，沿肋间平行剪开一斜形切口，沿肌间隙钝性分离胸浅肌与胸深肌，明确术野搏动最强点位置，于其稍内侧利用组织镊扎破肋间隙，利用弯止血钳钝性分离该肋间隙，与此同时，左手示指按压右锁骨中线与第二肋间交点处，左手拇指按压左腋中线与第五肋间交点，顺势将心脏挤出，利用线栓将左前降支进行永久结扎形成结扎点，之后将心脏放回胸腔，将气体挤出以免开放性气胸形成，使用止血钳进行夹闭；
在步骤2中，脱毛膏为薇婷，温和护肤型；避免使用刮毛刀或电动剃须刀进行脱毛，因为其会对心脏产生冲击，对心梗手术不利。
在步骤2中，选择使用碘伏对心脏位置进行消毒，消毒2—3遍。
在步骤2中，手术切口位置为左三四肋间，因具体心脏解剖关系而定。
在步骤2中，使用止血钳进行夹闭1-2s。
步骤3，进行心肌注射
使用皮镊将步骤3夹闭的切口打开并看见线栓结扎部位，将填充注射物的微量注射器沿心肌纤维走形穿刺，穿刺点位于线栓结扎点下2-3mm处，穿刺角度与心脏穿刺点切面成30-45度。
在步骤3中，切口打开时间尽量短于30s，以避免形成开放性气胸。
在步骤3中，使用呼吸机辅助小鼠生命支持，或者进行无呼吸支持下心梗手术与心肌注射均可。
在本发明中，进行小鼠与耗材的准备：体重25g左右，9周的C57Bl/6J小鼠购买于维通利华，于SPF级动物房(昼夜各12h)内饲养1周，状态稳定后进行手术造模；手术用带线缝合针(上海金环，1/2 6-0,3/8 3-0)；提前制备好水凝胶注射物，并于术前准备时使用特意制作的微量注射器抽吸20微升常温保存于手术台旁。
在本发明技术方案中，整体采用现有技术的微量注射器，改进之处在于针头和针尖部位；针头，整体为圆柱形，具有针眼和针尖，针眼为轴向贯穿圆柱中心的孔，针尖为针头的前端，由针尖尖端，针尖斜面，针尖弧面和针尖背面组成，针尖背面和针尖斜面相汇合并形成针尖尖端，针尖斜面和针尖弧面相汇合，针尖背面和针尖弧面分别与针头相连接为一体。针尖斜面与针尖背面的夹角(即针尖尖端)为10—30度，优选15—20 度；针尖弧面对应的中心角度为5—20度，优选10—15度。
在针尖的轴向横截面来看，针尖斜面，针尖弧面向针尖背面的投影长度为1：(1—2)，优选1：1，如附图5中间附图结构所示。
以往的文献中，手术造模通过小切口，将左冠状动脉定位、缝合、结扎在距离左冠状动脉起始位置约3mm处，导致小鼠左心室缺血约50％。在本发明中进行了改良，注射的模式动物选择成年雄性小鼠(9-11周，25-30g)。为了制造中度心肌梗死模型，小鼠通过吸入空气中异氟醚(1-1.5％，MSS-3S，英国)。在小鼠进入放松状态，无呼吸抑制和烦躁后，在左胸切一小块皮肤(1.0cm左右)，暴露心脏跳动最剧烈的部位(第四或第五肋间隙)，即用组织镊在肋间隙上开一个小孔，止血钳插入孔中，微微打开，心脏平稳、轻柔地“弹出”孔，用6-0细丝线(上海金环)在离心脏起点3.5-4mm处(冠状动脉中段) 永久结扎。结扎的针头穿入心脏肌层，但不能进入左心室腔，但同时注意不要太浅，因为缝线会产生切割作用，太浅会切割血管，穿透心室壁。缝合打4个结，结扎后立即将心脏放回胸腔内，人工排气，关闭肌肉和皮肤。通过观察心肌由红色变成苍白色和心电图ST升高，心梗模型制作则认为成功。
本发明技术方案可以有效地造成小鼠下壁心梗，而非常规方法所形成的广泛前壁心梗，提高了小鼠成活率的同时又可以兼顾成模率，减少了大量的时间、经济与精力成本，即使存在心肌注射副损伤的情况下，心肌注射组的治疗效果仍旧优于单纯心梗组，这就说明了本方法能在注射成功的前提下减少心肌副损伤的发生。而且下壁心梗又是在临床中最好发的ST段抬高型心肌梗死，本发明技术可以为心梗后治疗提供新的解决方案。另外，本方法不限于单纯注射高分子材料，只要是需要注射到心肌肌层的物质都可以使用本方法进行心肌注射。当然这需要进行数只小鼠心肌注射进行预实验，以确定实验用物质的表面张力是否适用于小鼠心肌注射。
附图说明
图1是本发明中小鼠心梗造模与造模后心肌注射的图片，其中A为已合成的注射用高分子材料，需避光保存；B为气体麻醉机，使用异氟烷进行麻醉，浓度5％用于诱导箱内麻醉，1.5-2％用于面罩麻醉维持；C为小鼠切口选择位置，其与肋间平行的切口；D为心肌注射用的特定皮镊。
图2是本发明中心梗造模与心肌注射1月后小鼠超声心动评价图，其中A为两组的M型超声检查图像；B为心梗组(MI)与心肌注射组(Injection)两组造模1月后左心室射血分数(EF)与缩短分数(FS)的比较，**P<0.01CSNO组与MI组进行比较。
图3为本发明中心梗组(MI)与心梗后心肌注射组(Injection)1月后Masson染色评价照片，其中A为箭头处为注射针头残留痕迹，B和C分别为MI组(B)与CSNO组(C) 1月后切片Masson染色结果，箭头示为梗死灶。
图4为本发明中使用微量注射器结构示意图(1)。
图5为本发明中使用微量注射器结构示意图(2)。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本发明的技术方案。
在验证心梗造模以及心肌注射该方法有效之前，我们人工合成了一款高分子材料(Zhao Q,et al.(2013)Polysaccharide-based biomaterials with on-demand nitricoxide releasing property regulated by enzyme catalysis.Biomaterials 34(33):8450-8458)，它可以增强心肌细胞与内皮细胞损伤后的耐受能力以及修复能力，以提高心梗急性能损伤的预后。
首先进行小鼠与耗材的准备：体重25g左右，9周的C57Bl/6J小鼠购买于维通利华，于SPF级动物房(昼夜各12h)内饲养1周，状态稳定后进行手术造模；手术用带线缝合针(上海金环，1/2 6-0,3/8 3-0)；提前制备好注射用物质(如图1A)，避光保存，并于术前准备时使用特意制作的微量注射器抽吸20微升常温保存于手术台旁。本实验的各项操作均符合天津医科大学与天津市第三中心医院的动物伦理规范。
其次进行小鼠麻醉：小鼠取仰卧稍右侧卧位，左锁骨中线位于视野中央。利用气麻机(MSS-3S，英国)进行气体麻醉(异氟烷，1.5-2％，空气)(如图1B)，待小鼠四肢牵拉无反应，观察呼吸节律规整，频率稍快(40次/分左右，如35—45次/分)后，进行下一步手术；如果呼吸节律稍慢，可适当下调异氟烷输出比例；若无气麻机，也可以将棉球与异氟烷置于50mL管中，制作成简易气麻机。
第三步进行心梗手术造模：使用脱毛膏(如薇婷，温和护肤型)进行脱毛处理，需要注意的是大部分实验人员更愿意使用刮毛刀或电动剃须刀进行脱毛，这样虽然快，但是对心脏是一次冲击，对接下来的心梗手术不利，脱毛范围左边界为左胸骨旁线，右边界为左腋前线，上界为左第二肋，下界为第五肋。脱毛后用手指指腹轻触确定心脏大体位置，之后进行碘伏消毒2遍。根据触诊，确定手术切口位置(左三四肋间视情况而定)。沿肋间平行剪开一斜形切口(如图1C)，沿肌间隙钝性分离胸浅肌与胸深肌(无血术野，否则小鼠难以下手术台)。明确术野搏动最强点位置，于其稍内侧利用组织镊扎破肋间隙，利用弯止血钳钝性分离该肋间隙，与此同时，左手示指按压右锁骨中线与第二肋间交点处，左手拇指按压左腋中线与第五肋间交点，顺势将心脏挤出。利用线栓将左前降支进行永久结扎(结扎点)，之后将心脏放回胸腔，将气体挤出以免开放性气胸形成，使用止血钳进行夹闭1-2s。
第四步进行心肌注射：使用特定皮镊将刚才夹闭的切口打开(充当拉钩)(如图1D)，此时可以看见线栓结扎部位，将刚才填充好注射用物质的微量注射器沿心肌纤维走形穿刺，穿刺点位于线栓结扎点下2-3mm处，穿刺角度与心脏穿刺点切面成30-45度，穿刺注射成功后缝合皮肤，最后将小鼠放在加热毯上保持体温。切口打开时间尽量短于30s，以避免形成开放性气胸，降低预后。如操作人员对该操作不熟悉，可先使用呼吸机辅助小鼠生命支持，操作熟练后，可进行无呼吸支持下心梗手术与心肌注射。
对心梗后心肌注射组与单纯心肌梗死组在造模1个月后进行超声心动检查(如图2)，之后进行组织石蜡包埋及Masson染色观察其修复情况(如图3)以判断注射成功与否以及注射效果。
如附图2所示，小鼠心脏超声图片，进行的是胸骨旁长轴切面进行成像，A为其M 型超声图像，取二尖瓣切面进行成像，为该点心肌收缩舒张运动情况，其中城垛样的波浪越剧烈，表示该处心肌收缩舒张情况越好。而心梗可以使心功能受损，所以A图中上面一张心梗组图片城垛样波浪不明显，而注射组则相对心功能较好，证明心梗后存在早期修复，同时也证明了注射手段有效，注射成功；B图则为城垛样波浪线的数值评价手段，射血分数＝(舒张期内径3-收缩期内径3)/舒张期内径3，缩短分数＝(舒张期内径- 收缩期内径)/)舒张期内径，二者均为评价心功能的超声指标，越高表示心功能越好，注射组明显好于单纯心梗组，间接证明了注射手段有效，注射成功。
如附图3所示，心梗组(MI)与心梗后心肌注射组(Injection)1月后Masson染色评价。A.箭头处为注射针头残留痕迹。BC.MI组(B)与Injection组(C)1月后切片 Masson染色结果，箭头示为梗死灶，可见Injection组的梗死灶明显小于MI组。图中BC 为心脏切片进行胶原染色的图片，二者结扎部位相同，即心梗模型均一性好。蓝色为胶原染色，红色为心肌染色。胶原为心肌梗死后进行修复的证据，因为成年小鼠的心肌是不可再生的，所以修复只能通过成纤维细胞进行瘢痕修复，即胶原沉积。而胶原的大小可以看做是损伤程度的指标，B图蓝色区域大，C图胶原沉积少，证明C图心脏在心肌坏死修复前存在某种物质可以令该处心肌早期修复，减缓由左前降支梗阻导致的心肌氧化应激反应以及梗死情况，增强由内皮细胞源性的成血管作用，间接证明了注射手段有效，注射成功。
上述实验证明本发明技术方案可以有效地造成小鼠下壁心梗，而非常规方法所形成的广泛前壁心梗，提高了小鼠成活率的同时又可以兼顾成模率，减少了大量的时间、经济与精力成本。而且下壁心梗在临床诊疗中又是最好发的ST段心肌梗死。另外，本方法不限于单纯注射水凝胶,只要是需要注射到心肌肌层的物质，特别是高分子材料物质，都可以使用本方法进行心肌注射。但这就需要进行1-2只小鼠心肌注射的预实验，以确定实验用物质的表面张力是否适用于小鼠心肌注射。
需要说明的是在本发明技术方案中，使用的微量注射器如附图4和5所示，1为筒身， 2为针头，3为推进塞，整体采用现有技术的微量注射器，改进之处在于针头和针尖部位2-1。针头2，整体为圆柱形，具有针眼2-2和针尖2-1，针眼为轴向贯穿圆柱中心的孔，针尖为针头的前端，由针尖尖端2-1-1，针尖斜面2-1-2，针尖弧面2-1-3和针尖背面2-1-4 组成，针尖背面和针尖斜面相汇合并形成针尖尖端，针尖斜面和针尖弧面相汇合，针尖背面和针尖弧面分别与针头相连接为一体，在进行穿刺时，使用针尖尖端进行操作，由于针尖斜面，针尖弧面和针尖背面的复合设计，能够减小创面并方便进行穿刺。
以上对本发明做了示例性的描述，应该说明的是，在不脱离本发明的核心的情况下，任何简单的变形、修改或者其他本领域技术人员能够不花费创造性劳动的等同替换均落入本发明的保护范围。

Claims (10)

1.小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法，其特征在于，按照下述步骤进行：
步骤1，进行小鼠麻醉
小鼠取仰卧稍右侧卧位，左锁骨中线位于视野中央，对小鼠进行麻醉，待小鼠四肢牵拉无反应，观察呼吸节律规整，达到35-45次/分后进行下一步手术；
步骤2，进行心梗手术造模
使用脱毛膏进行脱毛处理，脱毛范围左边界为左胸骨旁线，右边界为左腋前线，上界为左第二肋，下界为第五肋，脱毛后用手指指腹轻触确定心脏位置并进行消毒；根据触诊，确定手术切口位置，沿肋间平行剪开一斜形切口，沿肌间隙钝性分离胸浅肌与胸深肌，明确术野搏动最强点位置，于其稍内侧利用组织镊扎破肋间隙，利用弯止血钳钝性分离该肋间隙，与此同时，左手示指按压右锁骨中线与第二肋间交点处，左手拇指按压左腋中线与第五肋间交点，顺势将心脏挤出，利用线栓将左前降支进行永久结扎形成结扎点，之后将心脏放回胸腔，将气体挤出以免开放性气胸形成，使用止血钳进行夹闭；
步骤3，进行心肌注射
使用皮镊将步骤3夹闭的切口打开并看见线栓结扎部位，将已经备好的微量注射器沿心肌纤维走形穿刺，穿刺点位于线栓结扎点下2-3mm处，穿刺角度与心脏穿刺点切面成30-45度。
2.根据权利要求1所述的小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法，其特征在于，在步骤1中，使用气麻机进行气体麻醉，气麻机型号为英国MSS-3S，泵入的气体为含有体积百分数1.5-2％的异氟烷的预混空气，通过调整异氟烷用量来调整呼吸节律。
3.根据权利要求1所述的小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法，其特征在于，在步骤1中，将棉球浸润于异氟烷中，置于50mL管中，用作备用麻醉设备。
4.根据权利要求1所述的小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法，其特征在于，在步骤2中，脱毛膏为薇婷，温和护肤型；选择使用碘伏对心脏位置进行消毒，消毒2—3遍。
5.根据权利要求1所述的小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法，其特征在于，在步骤2中，手术切口位置为左三四肋间，使用止血钳进行夹闭1-2s以减少气胸的发生率。
6.根据权利要求1所述的小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法，其特征在于，在步骤3中，切口打开时间尽量短于30s，以避免形成开放性气胸。
7.根据权利要求1所述的小鼠心肌梗死后的心肌注射造模方法，其特征在于，在步骤3中，使用呼吸机辅助小鼠生命支持，或者进行无呼吸支持下心梗手术与心肌注射均可。
8.小鼠心肌梗死后的心肌注射造模装置，其特征在于，整体采用微量注射器，针头整体为圆柱形，具有针眼和针尖，针眼为轴向贯穿圆柱中心的孔，针尖为针头的前端，由针尖尖端，针尖斜面，针尖弧面和针尖背面组成，针尖背面和针尖斜面相汇合并形成针尖尖端，针尖斜面和针尖弧面相汇合，针尖背面和针尖弧面分别与针头相连接为一体；针尖斜面与针尖背面的夹角为10—30度，针尖弧面对应的中心角度为5—20度，在针尖的轴向横截面来看，针尖斜面，针尖弧面向针尖背面的投影长度为1：(1—2)。
9.根据权利要求8所述的小鼠心肌梗死后的心肌注射造模装置，其特征在于，针尖斜面与针尖背面的夹角为15-20度；针尖弧面对应的中心角度为10-15度。
10.根据权利要求8所述的小鼠心肌梗死后的心肌注射造模装置，其特征在于，在针尖的轴向横截面来看，针尖斜面，针尖弧面向针尖背面的投影长度为1：1。
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