CN103262861B

CN103262861B - 一种基于乳过氧化物酶体系的植物杀菌剂组合物

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Publication number: CN103262861B
Application number: CN201310183218.0A
Authority: CN
Inventors: 梁兴慧; 邓青; 贺倩; 杜进平; 周震
Original assignee: BEIJING ECOMAN BIOTECH Co Ltd
Current assignee: BEIJING ECOMAN BIOTECHNOLOGY CO., LTD.
Priority date: 2013-05-17
Filing date: 2013-05-17
Publication date: 2015-04-29
Anticipated expiration: 2033-05-17
Also published as: CN103262861A

Abstract

本发明公开了一种基于乳过氧化物酶体系的植物杀菌剂组合物，属于植物病害防治领域。本发明按照以下组分以及质量百分比组成：36-50%生物杀菌剂底物组合物，36-50%氧化剂组合物以及8-25%杀菌助剂组合物。本发明将生物杀菌剂底物组合物中添加乳过氧化物酶保护剂，氧化剂组合物中添加碳酸钠稳定剂，并添加合适的杀菌助剂作为植物杀菌剂组合物的重要物质，实现了组合物中各种有效成分的协同增效，显著提高了本发明对植物病原微生物防治效果，具有杀菌力强、杀菌效果好、持效期长、不易受环境影响的特点，满足植物病害防治领域的实际需求。

Description

一种基于乳过氧化物酶体系的植物杀菌剂组合物

技术领域：

本发明属于植物病害防治领域，具体涉及一种基于乳过氧化物酶体系的植物杀菌剂组合物。

背景技术：

乳过氧化物酶体系作为一种新兴的杀菌剂，主要包括：乳过氧化物酶、卤化物或类卤化物(X-，SCN-、Cl-除外)、过氧化氢(H₂0₂ ) 三部分。其杀菌机理为，乳过氧化物酶（LPO）催化H₂0₂氧化SCN-生成OSCN-或者HOSCN。OSCN-与HOSCN分别通过形成二硫键破坏细胞膜结构或者渗透细胞膜、氧化胞内蛋白的功能基团等方式影响新陈代谢而达到抑菌的目的。同时，乳过氧化物酶也能催化H₂0₂氧化I-生成IO-，与植物病原菌体成分反应，从而抑制细胞的生长。乳过氧化物酶作为体系中杀菌的核心成分，属蛋白酶的一类，和众多的蛋白酶一样，对环境敏感性高，极易在某些物理或化学的作用下造成其特定空间构象的改变而导致理化性质的改变以及生物活性的丧失。

由于乳过氧化物酶的环境敏感性，目前乳过氧化物酶体系在杀菌方面的应用还主要局限于环境单一的领域。例如：公开号为CN1350428的专利，将过氧化物酶体系与抗微生物性脂肪酸或脂肪酸衍生物结合，产生了一种协同性抗微生物性组合物，用于食品、化妆品类产品，虽然通过添加脂肪酸增加杀菌活性，但是杀菌能力仍然有限，不适用于植物病害的防治。公开号为CN101198255的专利中将乳过氧化物酶、过氧化氢或过氧化物源的过氧化物、卤化物或硫氰酸盐、铵源分别或以组合的形式加到要处理的含水体系或基质中控制微生物生长，但对重要杀菌物质过氧化物的稳定、持续释放的方式尚未有阐述。公开号为CN101626779的专利提供了含有乳过氧化物酶、葡萄糖氧化酶、葡萄糖和pH调节剂成份用作口腔内杀菌剂和食品添加剂用于预防或治疗口腔内微生物引起的口腔疾病，将各种杀菌作用成分物质直接混一起，但并未对有环境有要求物质进行特殊保护来保证其高效的杀菌能力。

综上，乳过氧化物酶体系由于主要成分乳过氧化物酶和过氧化氢来源稳定性差、杀菌能力弱、对环境适应性差、持效期短等因素所限不能满足植物病害防治的需求。因此需要一种新型的含乳过氧化物酶体系的杀菌剂，并结合使用方法，来补充现有技术之不足，实现以乳过氧化物酶体系为基础的杀菌剂在植物病害防治领域中广泛应用，满足农业生产中植物病害绿色防治、高效防治的实际需求。

发明内容

本发明根据植物用杀菌剂的杀菌对象、杀菌能力以及应用的环境需求，开发出一种新型植物病害杀菌剂。其目的是为了克服上述现有技术存在的问题及缺点，提供一种新型的含乳过氧化物酶体系的杀菌剂。本发明还根据不同杀菌成分对环境的需求差异分别添加保护剂进行保护，以实现各种有效成分的协同增效，提高对植物病原微生物的防治效果，具有杀菌力强、见效快、持效期长、不易受环境影响的优势。

本发明的技术方案如下：

（1）一种基于乳过氧化物酶体系的植物杀菌剂组合物，主要包括：生物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物以及杀菌助剂组合物；其特征在于：生物杀菌剂底物组合物包括乳过氧化物酶保护剂，氧化剂组合物包括过碳酸钠稳定剂。

由于乳过氧化物酶受环境影响大，在不利条件下容易失活，因此添加乳过氧化物酶保护剂可提高乳过氧化物酶的稳定性，保证其杀菌效果。氧化剂组合物添加过碳酸钠稳定剂是根据过碳酸钠极在液体制剂中极易分解的缺点，特添加相应的稳定剂来保证过氧化物源的稳定性，以确保杀菌剂的持效期。

（2）根据技术方案（1）所述的植物杀菌剂组合物，其特征在于，所述的生物杀菌剂底物组合物还包括：乳过氧化物酶、盐类组合；其中，盐类组合为硫氰化钾与碘化钾的组合物。

选择硫氰化钾与碘化钾组合物，有以下优点：首先通过两个物质的组合获得了叠加效果，增强了盐类物质在乳过氧化物体系中的杀菌作用；其次满足了植物生长中对钾的需求，增强植物营养，更避免了添加常规钠盐物质造成的盐害。

（3）根据技术方案（1）所述的乳过氧化物酶保护剂，其特征在于：其组成成分包括甘油、吐温-20、葡聚糖、海藻糖、乙二醇、氯化钙、山梨酸钾。

乳过氧化物酶容易受酸碱度、金属离子等影响而失去活性，因此酶的稳定性问题成为LPs应用的一个重要的限制因素。本发明通过增加酶保护剂组合而增强酶的稳定性，其主要的优势在于此酶保护剂组合可以提高溶液的粘度；能与乳过氧化物酶形成分子内键,与酶分子的活性位点有效交联或固定,从而维持酶的活性空间构型；并防止微生物污染；为乳过氧化物酶提供适宜保存的酸碱度。在氯化钙、葡聚糖、海藻糖三者协同作用下，一方面通过其玻璃态转变可以有效防止乳过氧化物酶发生三维结构的变化，保持一定的结构，提高酶的适应能力和稳定性；另一方面其大量的羟基能代替水分子与乳过氧化物酶分子表面部分结合，对酶形成保护，从而提高稳定性。

（4）根据技术方案（1）所述的生物杀菌剂底物组合物，其特征在于：其组成成分按生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：0.01%-3%乳过氧化物酶、0.05%-5%硫氰化钾、0.1%-10%碘化钾、0.01%-4%甘油、0.01%-2%吐温-20、0.01-5%葡聚糖、1%-15%海藻糖、0.01-3%乙二醇、0.1-6%氯化钙、0.01-2%山梨酸钾、其余部分为水；所述生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整PH值为7-9。

该组合物构成比例，是依据用作植物杀菌剂的最佳有效杀菌成分浓度，以及保护乳过氧化物酶结构的最佳稳定剂浓度而筛选出的最好的组合。经试验，加入保护剂后能将保存24个月后的杀菌效果由8%提高到91%。选择磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整PH值为7-9，一方面可以为酶提供稳定的碱性环境，减少酶活性的损失，延长杀菌剂的货架期，另一方面磷酸氢二钾、磷酸二氢钾中的磷和钾可以做为植物营养元素被吸收，避免普通PH调节剂造成植物盐害问题。

（5）根据技术方案（1）所述的植物杀菌剂组合物，其特征在于：所述的氧化剂组合物还包括过碳酸钠。

常规使用的过氧化氢来源主要为液体过氧化氢或者葡萄糖和葡萄糖氧化酶反应体系，但是在使用中存在很多不足，例如：液体过氧化氢不仅在运输和存储过程中是高危险品，而且光照就可致其分解，自然条件下活性损失率高；而葡萄糖和葡萄糖氧化酶的反应提供过氧化氢，需要同时满足乳过氧化物酶和葡萄糖氧化酶两种酶时的稳定性，成本显著提高，影响在农业上的应用推广价值。与其他氧化剂相比，本专利中选择过碳酸钠作为提供过氧化氢的氧化剂，其具备运输方便、成本低、存储环境要求较低、自然条件下活性损失率小的优点，解决了目前常规使用的过氧化氢来源的成本及稳定性问题。

（6）根据技术方案（1）所述的过碳酸钠稳定剂，其特征在于：其组成成分包括：EDTA、硫酸镁、硅酸钠、羧甲基纤维素钠、海藻酸以及苹果酸。

过碳酸钠在重金属离子和杂质存在或者高温环境条件下，具有不稳定、使用效率低等缺点，因此，本专利通过添加过碳酸钠稳定剂组合物，使过碳酸钠液体保持在稳定的酸性条件下，并利用海藻酸和苹果酸的共同作用，实现金属离子的螯合，截断自由基链分解反应，从而抑制重金属离子和其他杂质对其的催化活性；同时上述组合物可在过碳酸钠外表面形成一个保护涂层，避免过碳酸钠与其他杂质接触，保证过碳酸钠的稳定性。

（7）根据技术方案（1）的氧化剂组合物，其特征在于：其组成成分按氧化剂组合物质量百分比如下：0.1%-12%过碳酸钠、0.1-1.5%EDTA、0.1-1.5%硫酸镁、0.1%-2%硅酸钠、0.1%-2%羧甲基纤维素钠、0.05-0.2%海藻酸、0.1-2.5%的苹果酸，其余部分为水；将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值为4-6。

以上组合物中各种物质的比例是根据保证过碳酸钠的稳定性进行的筛选。经试验，此组合物比例为最佳的保证过碳酸钠稳定性的条件，使用添加此组合物的杀菌剂对病斑的修复能力持续上升，从12小时后的76%上升至24小时后的95%。同时将溶液的PH值保持在4-6的范围内，其酸性的环境可以形成保护膜，有效抑制H₂O₂分解为HOO-,而实现过氧化物源的稳定。

（8）根据技术方案（1）所述的植物杀菌剂组合物，其特征在于：所述杀菌助剂组合物包括菜籽油、甘油、丙二醇、乙氧基改性三硅氧烷、十二烷基苯磺酸钙以及黄原胶。

在上述几种物质的协同作用下，使该助剂组合物具备以下优点：1、与本发明的杀菌剂底物组合物稳定匹配，使用时混合后不影响酶的稳定性；2、与本发明的杀菌剂氧化剂组合物稳定匹配，混合后不会引起反应而使氧化剂无效；3、本发明杀菌剂组合物在发挥杀菌作用时需要保持一定的湿润环境，该助剂能有效防止药剂蒸发，保持反应时的湿度，经试验，加入该助剂的湿度保持时间是不加入该助剂的3.5倍，显著延长了本发明杀菌剂组合物的杀菌时间，并将防治效果由76%提高到90%；4、降低药剂表面张力，减少用水量，提高杀菌剂液滴的附着能力，增强杀菌剂耐雨水冲刷的能力。

（9）根据技术方案（8）所述的杀菌助剂，其特征在于：其组成成分按杀菌助剂质量百分比如下：60-70%菜籽油、15-25%甘油、1-10%丙二醇、1-15%乙氧基改性三硅氧烷、3-18%十二烷基苯磺酸钙以及0.1-3%黄原胶。

助剂相关比例确定是在研究本发明植物杀菌机理的基础上，根据杀菌剂所要求的杀菌剂持效期、保湿时间、存放时间等各因素进行助剂各组分的筛选和配比，以上成分以及相应比例可延长杀菌剂的持效期、保湿时间以及存放时间，增强杀菌剂在叶片上的扩散性能和附着能力，减少用药量。

（10）根据技术方案（1）所述的植物杀菌剂组合物，其特征在于：所述的生物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物以及杀菌助剂组合物为独立的试剂盒，在使用前，将生物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物以及杀菌助剂组合物进行混合；其中，各组合物按植物杀菌剂组合物的质量百分比如下：36-50%生物杀菌剂底物组合物，36-50%氧化剂组合物以及8-25%杀菌助剂组合物。

乳过氧化酶体系在其他领域中的应用一般为所有成分直接混合，但因各成分的特点及适用的环境不同，所有成分直接混合后易发生反应，可造成杀菌剂产品货架期的缩短。而本专利中将底物组合物、氧化剂组合物、杀菌助剂组合物分为独立的试剂盒，避免了由各成分直接混入而造成杀菌能力在短时间内迅速下降、货架期很短的缺陷，解决了乳过氧化酶体系在植物病害领域中复杂环境的条件下的应用难题。经试验，独立试剂盒的植物杀菌剂货架期可从2个月延长至24个月，在保存24个月后防治效果仍能达91%。本发明中底物组合物、氧化剂组合物及杀菌助剂的混合比例为依据杀菌效果最强而进行的筛选，经测试防治效果最佳可至92%。

综上所述，本发明提供了一种基于乳过氧化物酶体系的植物杀菌剂组合物，根据植物杀菌剂使用时的环境特征，通过将杀菌剂的各种有效成分分类、独立保存，并在独立保存的基础上添加有效的助剂和选择各成分适合的比例，解决了乳过氧化物酶稳定性差、过氧化物易分解、乳过氧化物酶体系易受环境影响不适用于植物病害防治领域等一系列问题。本发明具有杀菌力强、见效快、持效期长、方便保存、不易受环境影响的特点，防治效果可达到90%以上，防治持效期长，能够满足不同环境下植物病害防治的需求。

具体实施方式

通过实施例对本发明作进一步的说明，实施例不应该当作对本发明的限制。

实施例一

植物杀菌剂1：各组合物占植物杀菌剂1的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为36%，氧化剂组合物为50%，杀菌助剂组合物为14%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：3%乳过氧化物酶、5%硫氰化钾、10%碘化钾、4%甘油、2%吐温-20、5%葡聚糖、15%海藻糖、3%乙二醇、6%氯化钙、2%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至9。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：12%过碳酸钠、1.5%EDTA、1.5%硫酸镁、2%硅酸钠、2%羧甲基纤维素钠、0.2%海藻酸、2.5%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至6。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：70%菜籽油、15%甘油、10%丙二醇、1%乙氧基改性三硅氧烷、3%十二烷基苯磺酸钙以及1%黄原胶。

将生物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物、杀菌助剂组合物分别放置于独立的试剂盒，在使用前按上述比例进行混合。

处理1-1：与植物杀菌剂1不同的是：植物杀菌剂底物组合物仅为3%乳过氧化物酶、5%硫氰化钾、10%碘化钾，不包含乳过氧化物酶保护剂，其余组分均相同。

将本实施例植物杀菌剂1与处理1-1分别存放6个月、12个月、18个月以及24个月后用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治番茄霜霉病。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。

药效计算方法如下：

病情指数=[Σ(各级病叶数×相对级数值)/调查总叶数×9]×100；

防治效果(%)= [1-(清水处理区施药前病情指数×处理区施药后病情指数)／(清水处理区施药后病情指数×处理区施药前病情指数)]×100

实施例一对番茄霜霉病的防治效果如表1，植物杀菌剂1与处理1-1相比，含有乳过氧化物酶保护剂的植物杀菌剂1可有效的防治番茄霜霉病，酶保护剂可保持乳过氧化物酶稳定，延长杀菌剂的货架期，保存24个月后对番茄霜霉病的防治效果仍能保持91%。

表1 番茄霜霉病防治效果

实施例二

植物杀菌剂2：各组合物占植物杀菌剂2的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为43%，氧化剂组合物为36%，杀菌助剂组合物为21%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：0.01%乳过氧化物酶、0.05%硫氰化钾、0.1%碘化钾、0.01%甘油、0.01%吐温-20、2.5%葡聚糖、7.5%海藻糖、1.5%乙二醇、3%氯化钙、1%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至8。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：0.1%过碳酸钠、0.1%EDTA、0.1%硫酸镁、1%硅酸钠、1%羧甲基纤维素钠、0.1%海藻酸、1.3%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至5。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：60%菜籽油、25%甘油、1%丙二醇、5%乙氧基改性三硅氧烷、6%十二烷基苯磺酸钙以及3%黄原胶。

处理2-1：与植物杀菌剂2不同的是植物杀菌剂底物组合物中不含葡聚糖，其余成分及含量均相同。

处理2-2：与植物杀菌剂2不同的是植物杀菌剂底物组合物中不含海藻糖，其余成分及含量均相同。

处理2-3：与植物杀菌剂2不同的是植物杀菌剂底物组合物中不含氯化钙，其余成分及含量均相同。

将本实施例植物杀菌剂1与处理2-1、2-2、2-3分别存放6个月、12个月、18个月以及24个月后用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治番茄叶霉病。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。

药效评价方法参考实施例一。

表2 番茄叶霉病防治效果

如表2所示：植物杀菌剂2与处理2-1、2-2、2-3相比，含有葡聚糖、海藻糖、氯化钙的植物杀菌剂2对番茄叶霉病和防治效果最好，加入葡聚糖、海藻糖、氯化钙有利于提高植物杀菌剂底物组合物的稳定性，延长货架期，保存24个月后对番茄霜霉病的防治效果仍能保持90%，缺少葡聚糖、海藻糖、氯化钙其中的任一一种成分都会缩短植物杀菌剂的货架期，其中海藻糖对植物杀菌剂的影响较大。

实施例三

植物杀菌剂3：各组合物占植物杀菌剂3的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为50%，氧化剂组合物为42%，杀菌助剂组合物为8%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：1.5%乳过氧化物酶、2.5%硫氰化钾、5%碘化钾、2%甘油、1%吐温-20、3.75%葡聚糖、11%海藻糖、2.25%乙二醇、4.5%氯化钙、1.5%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至7。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：3%过碳酸钠、0.8%EDTA、0.8%硫酸镁、0.1%硅酸钠、0.1%羧甲基纤维素钠、0.05%海藻酸、0.1%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至4。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：65%菜籽油、20%甘油、5%丙二醇、1.9%乙氧基改性三硅氧烷、8%十二烷基苯磺酸钙以及0.1%黄原胶。

处理3-1：与植物杀菌剂3不同的是用5.2%葡聚糖、0.9%海藻糖、6.5%氯化钙代替乳过氧化物酶保护剂中的葡聚糖、海藻糖、氯化钙，其它成分及含量都相同。

将本实施例植物杀菌剂1与处理3-1分别存放6个月、12个月、18个月以及24个月后用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治草莓白粉病。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。药效评价方法参考实施例一。

草莓白粉病的防治效果如表3，植物杀菌剂3与处理3-1相比：葡聚糖、海藻糖以及氯化钙的浓度不同对植物杀菌剂的影响也不同，特别是随着保存时间的延长，其稳定性具有明显的差异，由此可知：具有合适浓度的葡聚糖、海藻糖、氯化钙的杀菌剂，其稳定性、持效期以及杀菌能力显著优于葡聚糖、海藻糖、氯化钙在非合适浓度下的杀菌剂。

表3 草莓白粉病防治效果

实施例四

植物杀菌剂4：各组合物占植物杀菌剂4的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为37%，氧化剂组合物为38%，杀菌助剂组合物为25%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：0.76%乳过氧化物酶、1.3%硫氰化钾、2.5%碘化钾、1%甘油、0.5%吐温-20、0.01%葡聚糖、1%海藻糖、0.01%乙二醇、0.1%氯化钙、0.01%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至7.5。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：1.5%过碳酸钠、0.45%EDTA、0.4%硫酸镁、1.5%硅酸钠、1.5%羧甲基纤维素钠、0.15%海藻酸、1.9%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至4.5。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：62%菜籽油、17%甘油、2%丙二醇、15%乙氧基改性三硅氧烷、3.5%十二烷基苯磺酸钙以及0.5%黄原胶。

处理4-1：与植物杀菌剂4不同的是：氧化剂组合物不含EDTA、硫酸镁、硅酸钠、羧甲基纤维素钠、海藻酸以及苹果酸等过碳酸钠稳定剂，其它成分及含量均相同。

将本实施例植物杀菌剂4与处理4-1用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治黄瓜霜霉病。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。

效果评价方法：

治疗效果用病斑修复效果评价，病斑修复效果=(施药前病斑面积占整个叶面积-施药后病斑面积占整个叶面积)/施药前病斑面积占整个叶面积*100%。

防治效果计算方法参考实施例一。

对黄瓜霜霉病的防治效果如表4，含有过碳酸钠稳定剂的植物杀菌剂4，其病斑修复效果高于处理4-1，并且喷药24小时后其病斑修复效果显著高于处理4-1，达95%。由此可知：过碳酸钠稳定剂能使过碳酸钠稳定、使用时缓慢释放，以实现植物病害的持久防效和病斑的高效修复。

表4 黄瓜霜霉病防治效果

实施例五

植物杀菌剂5：各组合物占植物杀菌剂5的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为40%，氧化剂组合物为40%，杀菌助剂组合物为20%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：2.25%乳过氧化物酶、3.75%硫氰化钾、7.5%碘化钾、3%甘油、1.5%吐温-20、1.26%葡聚糖、3.8%海藻糖、0.75%乙二醇、1.5%氯化钙、0.57%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至8.5。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：4.5%过碳酸钠、1.2%EDTA、1.1%硫酸镁、0.52%硅酸钠、0.6%羧甲基纤维素钠、0.08%海藻酸、0.7%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至5.5。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：61%菜籽油、15.5%甘油、1.5%丙二醇、3.2%乙氧基改性三硅氧烷、18%十二烷基苯磺酸钙以及0.8%黄原胶。

处理5-1：与植物杀菌剂2不同的是氧化剂组合物中不含海藻酸，其余成分及含量均相同。

处理5-2：与植物杀菌剂2不同的是氧化剂组合物中不含苹果酸，其余成分及含量均相同。

将本实施例植物杀菌剂5与处理5-1、5-2分别存放6个月、12个月、18个月以及24个月后用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治辣椒炭疽病。

对辣椒炭疽病的防治效果如表5所示：对于试剂保存6个月以及更长时间，植物杀菌剂的防治效果明显优于处理5-1、5-2，存放24个月以后，植物杀菌剂5的防治效果仍能达90%以上，而处理5-1、处理5-2其防治效果仅为66%、64%。由此可知：作为过碳酸钠稳定剂重要组成海藻酸、苹果酸对保证过碳酸钠的存储稳定性不可或缺，缺少任意一种会直接影响到植物杀菌剂的存放期，从而影响杀菌剂的防治效果。

表5 辣椒炭疽病的防治效果

实施例六

植物杀菌剂6：各组合物占植物杀菌剂6的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为45%，氧化剂组合物为43%，杀菌助剂组合物为12%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：0.4%乳过氧化物酶、0.67%硫氰化钾、1.3%碘化钾、0.5%甘油、0.3%吐温-20、4.4%葡聚糖、13%海藻糖、2.62%乙二醇、5.25%氯化钙、1.8%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至9。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：0.8%过碳酸钠、0.23%EDTA、0.3%硫酸镁、0.28%硅酸钠、1.7%羧甲基纤维素钠、0.18%海藻酸、2.2%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至5.7。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：63%菜籽油、21%甘油、3%丙二醇、2%乙氧基改性三硅氧烷、9%十二烷基苯磺酸钙以及2%黄原胶。

处理6-1：与植物杀菌剂6不同的是生物杀菌剂底物组合物的PH调整至9.5，其余成分及含量均相同。

处理6-2：与植物杀菌剂6不同的是氧化剂组合物的PH调整至3.5，其余成分及含量均相同。

将本实施例植物杀菌剂6与处理6-1、处理6-2分别用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治番茄灰霉病。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。

药效评价方法参考实施例四。

如表6所示，植物杀菌剂6对番茄灰霉病的防治效果最好，并且具有持续的杀菌效果，施药后12小时病斑修复效果还能持续上升，从76%上升至94%，通过与处理6-1、处理6-2比较，说明生物杀菌剂底物组合物和氧化剂组合物中的PH值直接影响杀菌剂的杀菌能力以及对病害防治效果。

表6 番茄灰霉病防治效果

实施例七

植物杀菌剂7：各组合物占植物杀菌剂7的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为38%，氧化剂组合物为44%，杀菌助剂组合物为18%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：2.6%乳过氧化物酶、4.3%硫氰化钾、9%碘化钾、3.5%甘油、1.76%吐温-20、0.6%葡聚糖、2.4%海藻糖、0.38%乙二醇、0.8%氯化钙、0.29%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至7.3。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：9%过碳酸钠、1%EDTA、0.6%硫酸镁、0.84%硅酸钠、1.25%羧甲基纤维素钠、0.13%海藻酸、1.6%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至5.7。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：64%菜籽油、15%甘油、3.2%丙二醇、4.5%乙氧基改性三硅氧烷、12%十二烷基苯磺酸钙以及1.3%黄原胶。

处理7-1：与植物杀菌剂7不同的是不含杀菌助剂组合物，其余成分及含量均相同。

将本实施例植物杀菌剂7与处理7-1分别用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治白菜黑斑病。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。

药效评价方法参考实施例四。

如表7所示：植物杀菌剂7对于白菜黑斑病的病斑修复效果、24小时防治效果、保湿时间以及亩用水量明显优于处理7-1。由此可知：杀菌助剂组合物更容易将试剂中主要杀菌成分的效果发挥出来，对主要杀菌成分具有显著杀菌增效作用，同时延长保湿时间，并且减少亩用水量。

表7 白菜黑斑病防治效果

实施例八

植物杀菌剂8：各组合物占植物杀菌剂8的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为48%，氧化剂组合物为42%，杀菌助剂组合物为10%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：1.1%乳过氧化物酶、1.9%硫氰化钾、3.76%碘化钾、1.5%甘油、1.25%吐温-20、4.0%葡聚糖、9%海藻糖、1.2%乙二醇、2.3%氯化钙、0.8%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至8.7。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：7.5%过碳酸钠、0.62%EDTA、0.7%硫酸镁、1.2%硅酸钠、0.8%羧甲基纤维素钠、0.07%海藻酸、1%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至4.3。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：66%菜籽油、15.4%甘油、6%丙二醇、6.5%乙氧基改性三硅氧烷、4%十二烷基苯磺酸钙以及2.1%黄原胶。

处理8-1：与植物杀菌剂8不同的是不含菜籽油，其余成分及含量均相同。

处理8-2：与植物杀菌剂8不同的是不含甘油，其余成分及含量均相同。

处理8-3：与植物杀菌剂8不同的是不含丙二醇，其余成分及含量均相同。

处理8-4：与植物杀菌剂8不同的是不含乙氧基改性三硅氧烷，其余成分及含量均相同。

处理8-5：与植物杀菌剂8不同的是不含十二烷基苯磺酸钙，其余成分及含量均相同。

处理8-6：与植物杀菌剂8不同的是不含黄原胶，其余成分及含量均相同。

将本实施例植物杀菌剂8与处理8-1、处理8-2、处理8-3、处理8-4、处理8-4、处理8-5、处理8-6分别用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治番茄早疫病。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。

药效评价方法参考实施例四。

如表8所示，植物杀菌剂8对番茄早疫病的病斑修复效果和防治效果最好，24小时的防治效果和病斑修复效果均达90%以上，明显高于其它处理。由此可知：杀菌助剂组合物作为一个整体，缺少任何一种成分都会直接影响其杀菌作用的发挥。

表8 番茄早疫病的防治效果

实施例九

植物杀菌剂9：各组合物占植物杀菌剂9的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为43%，氧化剂组合物为43%，杀菌助剂组合物为14%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：1.9%乳过氧化物酶、3.1%硫氰化钾、6.25%碘化钾、2.5%甘油、0.72%吐温-20、0.5%葡聚糖、5.3%海藻糖、1%乙二醇、3.9%氯化钙、1.2%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至8.2。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：10.5%过碳酸钠、0.15%EDTA、1.25%硫酸镁、1.8%硅酸钠、0.3%羧甲基纤维素钠、0.06%海藻酸、1.9%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至4.8。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：60.5%菜籽油、23%甘油、7%丙二醇、3%乙氧基改性三硅氧烷、4.7%十二烷基苯磺酸钙以及1.8%黄原胶。

处理9-1：与植物杀菌剂9不同的是将植物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物和杀菌助剂组合物按以下比例进行混合：35%生物杀菌剂底物组合物，35%氧化剂组合物以及30%杀菌助剂组合物。

将本实施例植物杀菌剂9与处理9-1分别用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治辣椒叶霉病，在一个生长季里分别以7天/次、14天/次和21天/次喷施。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。

药效评价方法参考实施例一。

如表9所示，植物杀菌剂9对辣椒叶霉病的防治效果显著优于处理9-1，即使在21天/次的频率，其防治效果仍达92%，仍然远高于处理9-1的防治效果的41%。由此可知：植物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物和杀菌助剂组合物的质量百分比直接影响植物杀菌剂防治效果以及持效期，三种组合物比例的选择十分重要。

表9 辣椒叶霉病防治效果

实施例十

植物杀菌剂10：各组合物占植物杀菌剂10的质量百分比分别为：生物杀菌剂底物组合物为41%，氧化剂组合物为48%，杀菌助剂组合物为11%。其中，

生物杀菌剂底物组合物的各成分占生物杀菌剂底物组合物的质量百分比如下：0.2%乳过氧化物酶、4.6%硫氰化钾、0.5%碘化钾、0.8%甘油、1.9%吐温-20、3%葡聚糖、10%海藻糖、2%乙二醇、4%氯化钙、0.5%山梨酸钾，其余部分为水。将生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整 PH值至7.8。

氧化剂组合物的各成分占氧化剂组合物质量百分比如下：0.8%过碳酸钠、0.5%EDTA、0.9%硫酸镁、0.5%硅酸钠、0.4%羧甲基纤维素钠、0.09%海藻酸、2%的苹果酸，其余部分为水。将氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整 PH值至5.2。

杀菌助剂组合物的各成分占杀菌助剂组合物的质量百分比如下：60%菜籽油、15%甘油、7.5%丙二醇、10%乙氧基改性三硅氧烷、5%十二烷基苯磺酸钙以及2.5%黄原胶。

处理10-1：与植物杀菌剂10不同的：生物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物、杀菌助剂组合物未单独试剂盒放置，直接按照上述比例混合。

将本实施例植物杀菌剂10与处理10-1分别存放1个月、2个月、12个月、24个月后用清水稀释1000倍，清水作为对照，分别用于防治西葫芦白粉病。

每个处理4个重复，24小时后调查防治效果。

药效评价方法参考实施例一。

本实施例对西葫芦白粉病的防治效果如表10，通过植物杀菌剂10与处理10-1比较，为独立试剂盒的植物杀菌剂10对西葫芦白粉病的防治效果好，货架期长，保存24个月后防治效果仍能达91%；而处理10-1随着保存时间的延长，防治效果下降很快，保存1个月后防治效果下降到50%，2个月后完全丧失杀菌效果。

表10 西葫芦白粉病的防治效果

Claims

1.一种基于乳过氧化物酶体系的植物杀菌剂组合物，主要包括：生物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物以及杀菌助剂组合物；其特征在于：各组合物按植物杀菌剂组合物的质量百分比如下：36-50％生物杀菌剂底物组合物，36-50％氧化剂组合物以及8-25％杀菌助剂组合物；其中，所述生物杀菌剂底物组合物包括乳过氧化物酶、乳过氧化物酶保护剂，所述的乳过氧化物酶保护剂，其组成成分包括甘油、吐温-20、葡聚糖、海藻糖、乙二醇、氯化钙、山梨酸钾，所述生物杀菌剂底物组合物组成成分以及相应成分按生物杀菌剂底物组合物的质量百分比分别如下：0.01％-3％乳过氧化物酶、0.05％-5％硫氰化钾、0.1％-10％碘化钾、0.01％-4％甘油、0.01％-2％吐温-20、0.01-5％葡聚糖、1％-15％海藻糖、0.01-3％乙二醇、0.1-6％氯化钙、0.01-2％山梨酸钾、其余部分为水；所述氧化剂组合物包括过碳酸钠稳定剂，氧化剂组合物组成成分以及相应成分按氧化剂组合物质量百分比分别如下：0.1％-12％过碳酸钠、0.1-1.5％EDTA、0.1-1.5％硫酸镁、0.1％-2％硅酸钠、0.1％-2％羧甲基纤维素钠、0.05-0.2％海藻酸、0.1-2.5％的苹果酸，其余部分为水；所述杀菌助剂组成成分以及相应成分按杀菌助剂质量百分比分别如下：60-70％菜籽油、15-25％甘油、1-10％丙二醇、1-15％乙氧基改性三硅氧烷、3-18％十二烷基苯磺酸钙以及0.1-3％黄原胶。

2.根据权利要求1所述的植物杀菌剂组合物，其特征在于：所述生物杀菌剂底物组合物用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾进行酸碱度调节，调整pH值为7-9。

3.根据权利要求1所述的植物杀菌剂组合物，其特征在于：所述氧化剂组合物用柠檬酸进行酸碱度的调节，调整pH值为4-6。

4.根据权利要求1所述的植物杀菌剂组合物，其特征在于：所述的生物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物以及杀菌助剂组合物为独立的试剂盒，在使用前，将生物杀菌剂底物组合物、氧化剂组合物以及杀菌助剂组合物进行混合。