CN103251689A - 维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用 - Google Patents
维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及
NGS
黄酮医药技术领域，是一种维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用，本发明的
NGS
黄酮对由慢性阻塞性肺病引起的慢性支气管炎症具有较稳定的抗慢性炎症作用，同时能够有效改善慢性阻塞性肺病引起的肺支气管痉挛症状，
阻止形成肺大泡和肺气肿。
其作用机制涉及抑制肺支气管平滑肌
M
胆碱受体、减少肺支气管组织炎症细胞和炎症细胞因子的功能，在目前国内外研究中尚属首次。
Description
技术领域
本发明涉及NGS黄酮医药技术领域，是一种维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用。
背景技术
慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一种慢性气道阻塞性疾病的统称，主要指具有不可逆性气道阻塞的慢性支气管炎和肺气肿两种疾病。COPD患者预后不良，最终死于呼吸衰竭和肺源性疾病，是造成人类死亡的第四大疾病。COPD发病机制主要是肺支气管慢性炎症，导致支气管痉挛状态的持续存在，组织蛋白酶功能亢进，长期作用使肺支气管组织结构损伤。目前还没有药物能够改变肺功能进行性下降这一趋势。COPD对症治疗的化学药物包括：糖皮质激素、支气管扩张剂、抗氧化剂、抗菌剂、祛痰剂等，但由于化学药物副作用较大，不宜长期服用（钟南山，姚婉贞，徐永健. 慢性阻塞性肺疾病.第一版.北京大学医学出版社.2007：497-508）；市场上尚无针对治疗COPD的中成药；传统中药汤剂服用不便，降低了病人的依从性。因而，寻找新的治疗COPD药物势在必行。
黑种草属植物属于毛茛科植物金莲花亚科，其中有3个种，分别是：瘤果黑种草（nigella glandulifera Preyn），又名腺毛黑种草；果黑种草（Nigella sativa），又名家黑种草；以及黑种草(Nigella damascena L)。瘤果黑种草的种子呈三棱状卵形，长2．5—3mm，宽约1.5mm。表面黑色，粗糙，顶端较狭而尖，下端稍钝，有不规则的突起，质坚硬，断面灰色，有油性(疆植物志编辑委员会．新疆植物志。第2卷，第1分册[M]．乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1993：231．)。果黑种草（sativa）广泛分布在地中海地区（埃及、巴基斯坦等地），古伊朗医学书籍中记载对哮喘和呼吸困难有治疗作用；黑种草（damascena）主要分布在欧洲地区；瘤果黑种草（glandulifera）是新疆特有的植物资源，为我国新疆维吾尔族常用药材。维吾尔医多以瘤果黑种草子（nigella glandulifera seeds，NGS）外用于生发、乌发、止痛、止痒等，内服用于治疗感冒等，如用黑种草子浸葡萄醋后，研成细粉，吸入鼻内(国家中医药管理局.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，1999：364)。已研究的NGS化学成分包括：脂肪酸化学成分、挥发性化学成分、生物碱化学成分、以常春藤为主的皂苷类和以山奈酚为主的黄酮类等【(刘玉明,杨峻山孙，刘庆华. 瘤果黑种草子化学成分的研究. 中国中药杂［J］.2005，7（30）980-982)；（倪君君，吴兆华，高慧媛，王喆星，吴立军.瘤果黑种草子的化学成分.沈阳药学大学学报［J］.2007,24（4）：215-217）；（信学雷，汪汉卿，阿吉艾克拜尔·艾萨. 维药瘤果黑种草籽化学成分研究. 天然产物研究与开发［J］. 2012，24：892-896，899）】
目前国外有报道果黑种草（sativa）子改善呼吸系统紊乱的少量体外研究，尚未报道NGS对COPD作用的研究资料。
发明内容
本发明提供了一种维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决目前国内外尚无利用NGS黄酮改善呼吸系统紊乱的问题, 本发明中NGS黄酮能有效治疗慢性阻塞性肺病引起的慢性支气管炎症，同时能够有效改善慢性阻塞性肺病引起的肺支气管痉挛症状，阻止形成肺大泡和肺气肿。
本发明的技术方案是通过以下措施来实现的：一种维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用。
下面是对上述发明技术方案的进一步优化或/和改进：
上述NGS黄酮按下述方法得到：称取NGS非油脂部分，向NGS非油脂中加入重量是NGS非油脂重量6倍至12倍体积浓度是30%至60%的乙醇,回流提取2次至4次、每次0.5小时至2小时,合并提取液，在温度为60℃至80℃条件下常压浓缩至无醇味得到NGS黄酮。
上述所用的乙醇的体积浓度为40%,回流提取3次、每次1.5小时。
上述NGS黄酮按下述方法进行纯化：按大孔树脂吸附进行纯化，NGS黄酮上样液浓度为4.90 mg.ml-1，通过AB-8大孔树脂的层析柱，用体积浓度为30%至50%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，挥干溶剂，得棕黄色粉末；将粉末用水溶解，上聚酰胺柱，先用水洗脱，再用4倍柱体积体积浓度为30%至50%的乙醇以2柱体积/h进行洗脱，收集洗脱液，挥干溶剂，得精制NGS黄酮。
本发明的NGS黄酮对由慢性阻塞性肺病引起的慢性支气管炎症具有较稳定的抗慢性炎症作用，同时能够有效改善慢性阻塞性肺病引起的肺支气管痉挛症状，阻止形成肺大泡和肺气肿，其作用机制涉及抑制肺支气管平滑肌M胆碱受体、减少肺支气管组织炎症细胞和炎症细胞因子的功能，在目前国内外研究中尚属首次。
附图说明
附图1为本发明正常大鼠肺组织切片（HE×100）。
附图2为本发明肺部炎症肺气肿大鼠模型病理肺组织切片（HE×100）。
附图3为本发明NGS黄酮低剂量治疗组肺组织切片（HE×100）。
附图4为本发明NGS黄酮高剂量治疗组肺组织切片（HE×100）。
附图5为本发明NGS黄酮中山萘酚的HPLC色谱图，其中，图中的A为对照品的山奈酚峰值。
附图6为本发明NGS黄酮中山萘酚的HPLC色谱图，其中，图中的B为样品的山奈酚峰值。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。
下面结合实施例及附图对本发明作进一步描述：
实施例1，该维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用。
可根据实际需要，对上述维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用作进一步优化或/和改进：
实施例2，作为上述是实施例的优选，该NGS黄酮按下述方法得到：称取NGS非油脂部分，向NGS非油脂中加入重量是NGS非油脂重量6倍至12倍体积浓度是30%至60%的乙醇,回流提取2次至4次、每次0.5小时至2小时,合并提取液，在温度为60℃至80℃条件下常压浓缩至无醇味得到NGS黄酮。
实施例3，作为上述是实施例的优选，所用的乙醇的体积浓度为40%,回流提取3次、每次1.5小时。
实施例4，作为上述是实施例的优选，该NGS黄酮按下述方法进行纯化：按大孔树脂吸附进行纯化，NGS黄酮上样液浓度为4.90 mg.ml-1，通过AB-8大孔树脂的层析柱，用体积浓度为30%至50%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，挥干溶剂，得棕黄色粉末；将粉末用水溶解，上聚酰胺柱，先用水洗脱，再用4倍柱体积体积浓度为30%至50%的乙醇以2柱体积/h进行洗脱，收集洗脱液，挥干溶剂，得精制NGS黄酮。
1.NGS黄酮的质量控制：
紫外分光光度法（ultraviolet spectrum，UV）测定NGS总黄酮和高效液相色谱法（high performance liquid chroma- tography，HPLC）测定NGS中山奈酚的含量。
（1）UV测定NGS总黄酮：在方法学验证的基础上，以芦丁为对照品，甲醇溶解对照与供试品，乙醇为添加溶媒，加入1%AlCl3试剂，最大吸收波长为271nm，测定结果代入建立的标准曲线回归方程，计算出NGS非油脂中黄酮含量为1.52%。
（2）HPLC测定NGS中山奈酚的含量：在系统适应性和方法学考察的基础上，以山奈酚为对照品，选择色谱柱为Diamonsil C18，流动相为甲醇∶0.4%磷酸（52∶48），检测波长为370nm，见附图5和附图6，测定结果代入建立的标准曲线回归方程，计算NGS中黄酮含量为0.33mg.g－1。
2.NGS黄酮药理作用研究：
2.1 NGS黄酮的肺支气管解痉效应
2.1.1小鼠组胺引喘实验：
将小鼠分为对照组和给药组，对照组包括：阴性对照组（即生理盐水组）、阳性对照组（即氨茶碱组）和NGS水煎液组，给药组包括：NGS黄酮低剂量组和NGS黄酮高剂量组。
采用喷氯化乙酰胆碱及磷酸组胺混合物能兴奋气管平滑肌，引发支气管痉挛，引起小鼠喘咳症状，观察各组对小鼠引喘潜伏期长短的影响。
结论：氯茶碱是目前公知的改善呼吸功能的药物，它能够有效松弛支气管平滑肌，尽管NGS水煎液组较生理盐水组引喘潜伏期延长，但是NGS黄酮低剂量组和NGS黄酮高剂量组，均较水煎液组引喘潜伏期明显延长，说明NGS黄酮可以减轻支气管痉挛症状。实验结果见表1。
表1 NGS黄酮对小白鼠平喘实验的影响（
，n =10）
| 组别 | 剂量（mg/kg） | 潜伏期（s） |
| 生理盐水组 | - | 81.9±4.28 |
| 氨茶碱组 | 100 | 150.5±7.84**▲▲ |
| 水煎液组 | 900 | 103.2±6.34** |
| NGS黄酮低剂量组 | 100 | 108.8±5.90** |
| NGS黄酮高剂量组 | 400 | 133.9±12.55**▲▲ |
注：与生理盐水组比较 **P<0.01, *P<0.05 与水煎液组比较▲▲P<0.01, ▲P<0.05 ，与氨茶碱组比较■■P<0.01, ■P<0.05
2.1.2豚鼠肺灌流实验：
取体重400-500g的豚鼠36只，随机分为组胺模型组、异丙肾上腺素组，水煎液组、NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮中剂量组和NGS黄酮高剂量组；实验时，组胺模型组和异丙肾上腺素组重复做6只豚鼠肺支气管灌流，水煎液组重复做6只豚鼠肺支气管灌流；每次在组胺影响下，NGS黄酮按低中高剂量顺序用6只豚鼠重复实验6次。根据灌流量的变化，评估NGS黄酮作用。
结论：异丙肾上腺素是目前公知的治疗支气管哮喘的药物，尽管水煎液和NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮中剂量组、NGS黄酮高剂量组均较组胺模型组明显增加肺支气管灌流量，但是，NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮中剂量组、NGS黄酮高剂量组较水煎液组增加肺支气管灌流量明显，且NGS黄酮低中高剂量组间有剂量依赖趋势。说明NGS黄酮具有支气管扩张作用。结果见表2。
表2 NGS黄酮对豚鼠肺灌流实验的影响（
,n=6）
| 组别 | 剂量（mg/ml） | 灌流量（ml/min） |
| 基础流量 | 25 | |
| 组胺模型组 | 10 | 6.78±0.19 |
| 异丙肾上腺素组 | 50 | 16.30±0.69**▲▲ |
| 水煎液组 | 27 | 8.70±0.21* |
| NGS黄酮低剂量组 | 6 | 8.20±0.55* |
| NGS黄酮中剂量组 | 12 | 9.33±0.98** |
| NGS黄酮高剂量组 | 24 | 10.90±0.81**▲▲ |
注：与模型（生理盐水）组比较，** P<0.01，* P<0.05；与水煎液组比较，▲▲ P<0.01，▲ P<0.05。
2.1.3豚鼠离体回肠实验：
取豚鼠36只，将豚鼠猛击头部致死，迅速剖腹，取近盲肠部约10cm回肠，置于盛有冷台氏液之器皿中，沿肠壁剪去肠系膜，将肠管剪成1.5～2cm的小段备用。调节恒温平滑肌槽，使水温保持在(37±05)℃。将压力换能器与BL420生物机能实验系统连接。取回肠一段,两端各穿一线,其中一线固定于L型通气管上，放入有20mLbotting液的浴漕内，溶液pH=7.3，溶液呈无色透明，固定L型通气管,并调节恒温平滑肌槽，缓慢通入气泡(2个气泡/s)。肠管另一端与压力换能器相连，加1g负荷，打开BL_420生物机能实验系统,待肠管运动恢复正常后，记录一段肠管正常活动曲线，开始滴加给药，给药量同豚鼠肺灌流实验。
结论：硫酸阿托品是目前公知的解除平滑肌的痉挛的的药物，与水煎液对照组比较，NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮中剂量组、NGS黄酮高剂量组均可使豚鼠离体回肠收缩振幅降低明显，并且有统计学意（P<0.01），与硫酸阿托品组比较，NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮中剂量组、NGS黄酮高剂量组可使豚鼠离体回肠收缩振幅降低明显，并且有统计学意义（P<0.01），说明NGS黄酮是通过抗M胆碱受体作用发挥解除支气管平滑肌痉挛效应（解痉效应）。结果见表3。
表3 NGS黄酮对豚鼠离体回肠运动的影响（
,n=6）
| 组别 | 剂量（mg/ml） | 张力（g）给药前 | 张力（g）给药后 | 收缩幅度降低/g |
| 生理盐水组 | — | 1.24±0.03 | 1.31±0.03 | 0.07±0.02 |
| 硫酸阿托品组 | 2.0 | 0.92±0.01 | 0.29±0.02 | 0.62±0.02**▲▲ |
| 水煎液组 | 27 | 3.47±0.75 | 3.34±0.03 | 0.13±0.06 |
| NGS黄酮低剂量组 | 3 | 1.37±0.16 | 1.16±0.01 | 0.21±0.02**▲▲ |
| NGS黄酮中剂量组 | 6 | 0.89±0.32 | 0.58±0.05 | 0.31±0.03**▲▲ |
| NGS黄酮高剂量组 | 9 | 1.59±0.49 | 1.02±0.03 | 0.57±0.03**▲▲ |
注：与生理盐水组比较 **P<0.01, *P<0.05 与水煎液组比较▲▲ P<0.01, ▲ P<0.05 ，与硫酸阿托品组比较■■ P<0.01, ■ P<0.05
2.2 NGS黄酮的抗慢性炎症效应
2.2.1大鼠棉球肉芽肿实验：
生理盐水组大鼠用0.3%戊巴比妥钠溶液麻醉（1ml/100g）后，腹部去毛消毒，在无菌操作下经腹部切口，将2个无菌棉球（每个棉球重50±1mg,高压灭菌，各加入氨苄青霉素1mg/0.1mg/个，50℃烘箱烤干）分别植入大鼠腹部两侧皮下，随即缝合皮肤，用碘液消毒后常规饲养备用。其他各试验组均同样造模。各给药组在手术次日给药，连续7天，第8天颈椎脱臼处死，取出棉球，在60℃烤箱放置12小时后称重，用此重量减去原棉球的重量，即为肉芽肿的净重。并比较各组差异。计算各组棉球肉芽抑制率，其棉球肉芽抑制率(%)=(正常对照组棉球肉芽平均净重-给药组棉球肉芽平均净重)/正常对照组棉球肉芽平均净重×100%。实验数据处理时，根据舍弃商法（Q-检验法）舍去异常值再以SPSS17.0统计软件进行检验分析，以
表示，检验水准为α=0.05和α =0.01。本实验结果发现NGS黄酮具有抑制大鼠肉芽增重的抗炎消肿作用。实验结果见表4。
表4 NGS提取物对大鼠棉球肉芽肿的影响（
，n =10）
| 组别组 | 剂量（mg/kg） | 肉芽肿净重（mg） | 肉芽抑制率（%） |
| 模型（生理盐水）组 | - | 131．0±22.1 | |
| 阿司匹林组 | 70 | 82.0±16.9**▲▲ | 37.4 |
| 水煎液组 | 650 | 106.2±16.3** | 18.9 |
| NGS黄酮低剂量组 | 71.5 | 99.6±15.4** | 24.0 |
| NGS黄酮高剂量组 | 286 | 102.2±16.1** | 22.0 |
注：与模型（生理盐水）组比较，** P<0.01，* P<0.05；与水煎液组比较，▲▲ P<0.01，▲ P<0.05。
2.2.2肺气肿模型大鼠的病理组织学改变
实验通过建立大鼠气管内注入脂多糖及木瓜蛋白酶( Papain) 吸入介导复制大鼠慢性炎症与肺气肿模型。建模后，分模型组、NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮高剂量组，灌胃给药15日。取左肺于10%甲醛固定, 常规脱水、石蜡包埋, 4um厚度连续切片2张,用于HE染色。正常对照组支气管黏膜上皮细胞排列整齐, 支气管黏膜下未见明显炎细胞浸润, 纤毛无损伤脱落; 肺泡结构连续,肺泡壁完整,肺泡腔无扩大, 且未见明显渗出；模型组支气管黏膜上皮变性坏死脱落, 局部有鳞状上皮化生, 杯状细胞增生, 管壁肌层断裂, 炎细胞浸润( 淋巴细胞为主) , 部分肺泡扩张融合, 肺泡腔、支气管腔有渗出物, 肺间质炎细胞浸润；NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮高剂量组较模型组病理变化改善明显，说明NGS黄酮通过降低肺支气管局部炎症，能够减轻肺组织的破坏。病理切片镜视图见图1、图2、图3、图4。
2.2.3肺气肿模型大鼠BALF炎性细胞检测
取材：以戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉后,打开胸腔分离出肺组织, 接扎左侧支气管, 将生理盐水由主支气管注入右肺，用手轻揉捏肺脏约30S,随后抽取灌洗液, 重复2次,回收灌洗液。灌洗液离心后细胞沉渣进行涂片，瑞士-吉姆萨染色，对炎性细胞进行分类。模型组与生理盐水组比较，氨茶碱组、水煎液组、NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮高剂量组均可使单核巨噬细胞比例降低，使淋巴细胞比例增高，并且有统计学意义（P<0.01）；与水煎液对照组比较，氨茶碱组、NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮高剂量组均可使单核巨噬细胞、比例降低，并且有统计学意义（P<0.01）；实验结果提示： NGS黄酮有降低炎症细胞的作用及有抗炎作用。结果见表5。
表5各组大鼠肺泡灌洗液中炎性细胞分类（，n =7）
| 组别 | 剂量（mg/kg） | 炎性单核-巨噬细胞 | 炎性中性粒细胞 | 炎性淋巴细胞 |
| 生理盐水组 | — | 0.18±0.03 | 0.11±0.01 | 0.71±0.03 |
| 模型组 | — | 0.34±0.02 | 0.20±0.02 | 0.45±0.03 |
| 氨茶碱组 | 71.5 | 0.22±0.02**▲▲ | 0.15±0.02** | 0.63±0.02**▲▲ |
| 水煎液组 | 650 | 0.30±0.02* | 0.18±0.01 | 0.52±0.02** |
| NGS黄酮低剂量组 | 71,5 | 0.25±0.02**▲▲ | 0.15±0.01** | 0.60±0.03**▲▲ |
| NGS黄酮高剂量组 | 286 | 0.20±0.02**▲▲ | 0.14±0.02** | 0.67±0.01**▲▲ |
注：与模型组比较，** P<0.01，* P<0.05；与水煎液组比较，▲▲ P<0.01，▲ P<0.05；模型组与正常组比较，﹟P<0.01
2.2.4大鼠肺泡灌洗液中.部分炎症因子TNF-α、IL-8、NF-κB的含量测定
将灌洗液4℃下以1500 r / min离心15分钟, 留取上清液- 70 ℃冰冻，备检TNF-α、IL-8、NF-κB。模型组与正常组比较，TNF-α、IL-8、NF-κB的含量都有增加，并且有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较，氨茶碱组、NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮高剂量组均使TNF-α、IL-8、NF-κB的含量明显降低，并且有统计学意义（P<0.01）。实验结果提示：NGS黄酮可使炎症细胞因子含量明显降低，说明有抗炎作用。实验结果见表6。
表6 大鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-8、NF-κB的含量（
，n =7）
| 组别 | 剂量（mg/kg） | TNF-α(ng/ml) | IL-8(ng/ml) | NF-κB(ng/ml) |
| 正常组 | — | 0.23±0.02 | 0.49±0.07 | 0.40±0.03 |
| 模型组 | — | 0.37±0.05﹟ | 0.98±0.05﹟ | 0.86±0.24﹟ |
| 氨茶碱组 | 71.5 | 0.27±0.03** | 0.59±0.06**▲▲ | 0.52±0.13** |
| 水煎液组 | 650 | 0.33±0.05 | 0.83±0.10* | 0.65±0.13 |
| NGS黄酮低剂量组 | 71.5 | 0.30±0.04** | 0.68±0.09** | 0.60±0.13* |
| NGS黄酮高剂量组 | 286 | 0.28±0.02** | 0.61±0.12**▲▲ | 0.56±0.11** |
注：与模型（生理盐水）组比较，** P<0.01，* P<0.05；与水煎液组比较，▲▲ P<0.01，▲ P<0.05；模型组与正常组比较，﹟P<0.01
2.2.5人中性弹性蛋白酶的活性测定
对HNE的影响实验表明，黄酮和黄酮高低剂量组、非油脂低剂量组可以降低HNE 的活性（与模型组比）。说明黄酮和黄酮对于防止中性弹性蛋白酶对肺支气管壁弹性纤维的分解有一定作用。
取正常人及慢阻肺病人血，分为12组，为正常对照组、COPD对照组、氨茶碱组、水煎液组、NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮高剂量组。每管血液中加入各组化合物。经孵育、离心，取上清液，ELLSA法测定各组中性粒细胞弹性蛋白酶的含量。对HNE的影响实验表明，与模型组相比较，NGS黄酮低剂量组、NGS黄酮高剂量组可以降低HNE 的活性。说明NGS黄酮对于防止中性弹性蛋白酶对肺支气管壁弹性纤维的分解有一定作用。实验结果见表7。
表7 人中性粒细胞弹性蛋白酶的活性（，n =7）
| 组别 | 剂量（mg/ml） | HNE(ng /ml) |
| 正常人对照 | 0.40±0.03 | |
| COPD对照 | 0.66±0.08 | |
| 氨茶碱 | 65 | 0.49±0.04** |
| 水煎液 | 300 | 0.59±0.31 |
| NGS黄酮低剂量组 | 65 | 0.57±0.06* |
| NGS黄酮高剂量组 | 270 | 0.53±0.03** |
综上可知，NGS黄酮可使肺组织中单核巨噬细胞比例降低、减少炎症细胞浸润，抑制炎症因子释放；阻止肉芽肿性慢性炎症过程；能够防止中性弹性蛋白酶对肺支气管壁弹性纤维的分解，说明NGS黄酮对由慢性阻塞性肺病引起的慢性支气管炎症具有较稳定的抗慢性炎症作用，同时能够通过阻断M胆碱受体作用，有效改善慢性阻塞性肺病引起的肺支气管痉挛症状，发挥解痉效应，从而阻止形成肺大泡和肺气肿。
3．NGS黄酮安全性评价：
因为毒性很小，实际进行的是NGS黄酮的最大耐受量实验。将NGS黄酮按口服容量0.5ml·10g-1，浓度按1:0.5配成相应的溶液。
NGS黄酮： 1:0.5配成: 0.4g·kg-1、0.8g·kg-1、1.6g·kg-1、3.2 g·kg-1、5.4g·kg-1 分为五个梯度剂量进行预试验，48小时小鼠均无死亡。根据预试验结果，取40只昆明小鼠，体重18.0～22.0g，雌雄各半。取昆明小鼠40只，体重18.0～22.0g，雌雄各半。口服剂量为5.4g·kg-1，间隔2小时后再给一次，，即总口服量为10.8g·kg-1，经24小时至7天观察，动物无任何异常表现，无死亡，故10.8 g·kg-1剂量为小鼠对NGS黄酮的最大耐受量。
Claims (4)
1.一种维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用。
2.根据权利要求1所述的维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用，其特征在于该NGS黄酮按下述方法得到：称取NGS非油脂部分，向NGS非油脂中加入重量是NGS非油脂重量6倍至12倍体积浓度是30%至60%的乙醇,回流提取2次至4次、每次0.5小时至2小时,合并提取液，在温度为60℃至80℃条件下常压浓缩至无醇味得到NGS黄酮。
3.根据权利要求2所述的维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用，其特征在于所用的乙醇的体积浓度为40%,回流提取3次、每次1.5小时。
4.根据权利要求2或3所述的维药瘤果黑种草子黄酮在制备治疗慢性阻塞性肺病药物的应用，其特征在于该NGS黄酮按下述方法进行纯化：按大孔树脂吸附进行纯化，NGS黄酮上样液浓度为4.90 mg.ml-1，通过AB-8大孔树脂的层析柱，用体积浓度为30%至50%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，挥干溶剂，得棕黄色粉末；将粉末用水溶解，上聚酰胺柱，先用水洗脱，再用4倍柱体积浓度为30%至50%的乙醇以2倍柱体积/h进行洗脱，收集洗脱液，挥干溶剂，得精制NGS黄酮。
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Citations (1)
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|---|---|---|---|---|
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Patent Citations (1)
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 潘兰等: "瘤果黑种草化学成分的初步研究", 《新疆农业科学》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104825586A (zh) * | 2014-07-17 | 2015-08-12 | 兰州大学 | 从提取玫瑰精油后的废液中提取黄酮的方法 |
| CN106539891A (zh) * | 2016-11-02 | 2017-03-29 | 新疆医科大学 | 一种黑种草子破壁提取总黄酮的方法 |
| CN107362208A (zh) * | 2017-07-24 | 2017-11-21 | 中国人民解放军新疆军区药品仪器检验所 | 瘤果黑种草子提取物作为制备治疗佐剂性关节炎药物的应用 |
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