CN103250666A - 一种三疣梭子蟹家系选育方法 - Google Patents

Abstract

一种三疣梭子蟹家系选育方法，包括以下步骤：收集我国不同地理群体的三疣梭子蟹构建基础群体，并进行遗传多样性综合评估；不同群体中分别挑选亲蟹，按完全双列杂交模式建立家系，标准化育苗和养殖，计算杂交优势率；利用具有明显杂交优势的交配组合，通过室内人工定向交尾，构建家系，标准化育苗与养殖，通过两次筛选留种家系；将留种家系室内养殖的亲本组已交尾雌蟹进行越冬；次年春天每个家系选择抱卵良好的亲蟹，进行标准化育苗与养殖，利用上述选育方法继续筛选家系；本发明以生长速度、成活率2个指标，进行三疣梭子蟹家系选育，综合评价家系经济性状，选育结果既提高收获时梭子蟹规格，又提高养殖成活率，从而大幅度提高养殖效益，同时避免单一性状选育造成的偏差。

Description

一种三疣梭子蟹家系选育方法

技术领域

本发明属于水产育种领域，具体地涉及一种三疣梭子蟹家系选育方法。

背景技术

三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)是一种重要的海洋经济动物，目前养殖面积50万亩，产量达10万吨，已成为我国海洋养殖主导种类之一。目前，三疣梭子蟹养殖业主要还是依靠捕捞野生蟹来满足生产育苗的需要，这种状态限制了其发展。一方面，这些捕捞的野生三疣梭子蟹可能携带感染性病毒，导致养殖成活率极低（5～10%），给产业和区域经济的发展造成重大损失；另一方面，生长速度是重要的经济性状，大规格三疣梭子蟹的经济价值明显要高。因此培育生长速度快、成活率高的优良品种是实现三疣梭子蟹产业的可持续性发展的重要保障。传统群体选育无法兼顾生长速度和成活率两个性状，由于梭子蟹没有合适的个体标记，也无法通过评估个体育种值进行选育。根据物种特性及目前研究进展，采用家系的选育方式效果更佳，但由于个体标记没有解决，家系不能混养，必须在不同的网格或池塘中单独养殖，在养殖过程中，密度是一个动态变化值，而养殖密度对生长速度影响较大，因此以生长速度为单一选育指标，结果不科学；如果以成活率为单一选育指标，结果可能导致选育的成品蟹规格小，经济价值低。因此以单一性状为选育指标进行家系选育，结果可能会导致较差的选育效果或较低的经济效益。目前国内外尚无三疣梭子蟹生长速度、成活率复合性状选育的相关报道。另外我国北方梭子蟹养殖至120日龄时，雌蟹完成生殖蜕壳与交尾，而180日龄时收获上市，由于交尾与收获时间的不同步，给家系的构建与生长性状的精确评估带来很大困难。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种三疣梭子蟹家系选育方法，本选育方法，以生长速度、成活率2个经济性状为指标，结合商品蟹规格与市场价格的经验值，分别加权65%、35%；120日龄时进行家系经济性状评估，根据结果进行初步选育，并完成室内人工定向交尾，收获时再次评估家系经济性状，对选育结果进行修正，选育效果得到显著提高，大幅度提高养殖效益。

本发明是按照以下操作技术方案完成的：

一种三疣梭子蟹家系选育方法，包括以下步骤：

（1）收集我国不同地理群体的三疣梭子蟹构建基础群体，并进行遗传多样性综合评估；

（2）不同群体中分别挑选亲蟹，按完全双列杂交模式建立家系，标准化育苗和养殖，计算杂交优势率；

（3）利用具有明显杂交优势的交配组合，通过室内人工定向交尾，构建家系，标准化育苗与养殖，每个家系设置亲本组和备份组，各组养殖面积、放养密度完全相同，养殖环境一致；亲本组作为构建家系的材料，120日龄时进行体重测量、成活率统计，计算家系选育综合提高值R=65%×（B_家系体重-B_{野生对照体重}）/B_{野生对照体重}+35%（S_{家系成活率}-S_{野生对照成活率}）/S_{野生对照成活率}，对R大于零的家系挑选优良个体，进行室内人工定向交尾，交尾成功雌蟹，进行物理标记，室内继续养殖；备份组室外养殖至180日龄时收获，测量体重，统计成活率，重新计算各家系R，然后备份组所有个体上市，对120日龄留种结果进行修正，选择两次R均大于零的家系留种；将留种家系室内养殖的亲本组已交尾雌蟹进行越冬；

（4）次年春天每个家系选择抱卵良好的亲蟹，进行标准化育苗与养殖，采用（3）的选育方法继续筛选家系；

（5）对筛选出的家系进行小规模示范养殖，确定和评价选育家系的养殖效益。

进一步，所述的步骤（2）具体为从备选亲蟹中挑选亲蟹，采用人工定向交尾技术按完全双列杂交模式建立家系交配组合，每种交配组合2组，雌雄比例为3:1，对建立的家系进行标准化育苗与养殖，各家系苗种培育密度、养殖密度相同，120日龄时随机测量各家系50个个体生长性状，采用SPSS计算杂交优势率。

进一步，所述的步骤（3）中对R大于零的家系挑选优良个体，进行室内人工定向交尾，其交尾方式为家系内自交，每个家系建立自交组合5-10个。

进一步，所述的步骤（4）中每个筛选家系的越冬亲蟹为雌蟹50-100只。

本发明与现有技术相比的有益效果：

1、本发明以生长速度、成活率2个指标，进行三疣梭子蟹家系选育，综合评价家系经济性状，选育结果既提高收获时梭子蟹规格，又提高养殖成活率，从而大幅度提高养殖效益，同时避免单一性状选育造成的偏差。

2、本发明在三疣梭子蟹选育过程中，每个家系设置亲本组和备份组，三疣梭子蟹养殖至120日龄时性成熟，评估此时家系生长性状，R大于零的家系亲本组进行室内人工定向交尾；180日龄（收获）时重新评估家系备份组生长性状，对选育结果进行修正，然后选择两次R均大于零的家系室内交尾雌蟹留种。该方法即避免收获时，个体完成交尾，不能选择优良雄蟹与雌蟹交尾，同时又避免120日龄时家系生长性状评估误差。另外可以为拟穴青蟹、中华绒螯蟹等个体标记未解决的甲壳类新品种培育提供一种新思路。

3、通过小规模示范养殖结果表明，筛选出的三疣梭子蟹家系具明显的高产出效果，具有良好的推广和应用价值，经小规模的示范测试和比较试验，可以获得高产，平均亩产量在80kg以上，上市时梭子蟹规格提高15-18%，养殖成活率提高20-22%。

具体实施方式

下面通过实施例详细叙述本发明的技术方法：

一种三疣梭子蟹家系选育方法，包括以下步骤：1、收集我国沿海三疣梭子蟹不同地理群体并进行遗传多样性综合评估；2、从不同群体中分别挑选亲蟹，按完全双列杂交模式建立家系，标准化育苗和养殖，计算杂交优势；3、利用具有杂交优势的组合，通过室内交尾建立家系，标准化育苗和养殖，分别测量各家系120日龄、180日龄（收获）时体重，统计成活率，计算综合选育提高值R，对两次R均大于零的家系进行留种；4、次年春天对留种家系进行标准化育苗及养殖，采用3方法再次筛选家系；5、对筛选出的家系进行小规模示范养殖，确定和评估其收益。

一种三疣梭子蟹家系选育方法，具体包括以下步骤：

（1）收集了莱州湾、鸭绿江口、海州湾、舟山4个三疣梭子蟹野生群体组建基础群，每个群体的雌、雄蟹数量均在80只以上。对4个群体的14项形态学指标进行测量，综合运用生物学性状、免疫酶学指标、同工酶电泳、AFLP分析等手段对4个不同地理群体进行群体间遗传分化研究，发现三疣梭子蟹遗传多样性较高，种质资源维护处于较好状态；选择体重＞250g的个体构建基础群体，备选亲蟹符合以下特征：健康、活力强、体表光洁、附肢齐全、无机械损伤的个体；

（2）从备选亲蟹中挑选优良个体，采用人工定向交尾技术按完全双列杂交模式建立家系交配组合，每种交配组合1-2组，雌雄比例为3:1，对建立的家系进行标准化育苗和养殖，120日龄时，测量体重，采用SPSS软件，计算杂交优势率。

（3）以具有杂交优势的组合（舟山♂×莱州湾♀、莱州湾♂×舟山♀、海州湾♂×莱州湾♀、莱州湾♂×海州湾♀），采用室内人工定向交尾技术建立家系，经过越冬，次年春天建立30个全同胞家系，同步建立野生对照，进行标准化苗种培育和养殖，苗种培育布池密度为3万尾/立方水体，养殖密度控制在3500尾/亩，每个家系通过围格养殖4份，亲本组、备份组各两份，每份1亩水面，养殖环境一致。家系的筛选共分二次进行：

（a)养殖至120日龄时，每个家系收获2份亲本组，随机测量50只个体体重，统计成活率，计算综合选育提高值R，R=65%×（B_家系体重-B_{野生对照体重}）/B_{野生 对照体重}+35%（S_{家系成活率}-S_{野生对照成活率}）/S_{野生对照成活率}，R＞0的家系共18个，采用室内人工定向交尾技术，进行家系自交，亲蟹特征同步骤（1），每个家系建立5-10组，每组雌雄比例为3:1。

（b）养殖至180日龄时，每个家系收获2份备份组，随机测量50只个体体重，统计成活率，计算综合选育提高值R。R＞0的家系共22个，对120日龄留种结果进行修正，选择两次R均大于零的家系留种，共计15个，然后备份组所有个体上市。对留种家系室内已交尾的亲本组235只雌蟹进行越冬。

（4）次年春天，每个家系挑选抱卵良好的亲蟹2-3只，单独进行标准化育苗，共建立35个全同胞家系，同步建立野生对照，养殖及选育同步骤（3）。最终筛选出性状优良家系25个进行留种。留种家系按照步骤（3）中的方式进行亲蟹交尾、越冬，每个家系越冬亲蟹为雌蟹50-100只。

对越冬成功的亲蟹单独进行苗种培育，分别在中国水产科学研究院下营增殖实验站、青岛市宝荣水产科技发展有限公司、即墨祥瑞水产有限公司、日照开航水产有限公司四个地区进行小规模养殖示范，采用普通商品苗种作为对照组。其中中国水产科学研究院下营增殖实验站示范面积200亩，平均亩产82kg，实现产值131.2万元，与对照组相比经济效益提高32%；青岛市宝荣水产科技发展有限公司示范养殖面积120亩，收获时平均亩产79kg，实现产值76.80万元，与对照组相比经济效益提高25%；即墨祥瑞水产有限公司示范养殖面积180亩，收获时平均亩产84kg，实现产值120.96万元，与对照组相比经济效益提高28%；日照开航水产有限公司示范养殖面积280亩，收获时平均亩产86kg，实现产值192.64万元，与对照组相比经济效益提高36%。

Claims (4)

1.一种三疣梭子蟹家系选育方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）收集我国不同地理群体的三疣梭子蟹构建基础群体，并进行遗传多样性综合评估；

（2）不同群体中分别挑选亲蟹，按完全双列杂交模式建立家系，标准化育苗和养殖，计算杂交优势率；

（3）利用具有明显杂交优势的交配组合，通过室内人工定向交尾，构建家系，标准化育苗与养殖，每个家系设置亲本组和备份组，各组养殖面积、放养密度完全相同，养殖环境一致；亲本组作为构建家系的材料，120日龄时进行体重测量、成活率统计，计算家系选育综合提高值R=65%×（B_家系体重-B_{野生对照体重}）/B_{野生对照体重}+35%（S_{家系成活率}-S_{野生对照成活率}）/S_{野生对照成活率}，对R大于零的家系挑选优良个体，进行室内人工定向交尾，交尾成功雌蟹，进行物理标记，室内继续养殖；备份组室外养殖至180日龄时收获，测量体重，统计成活率，重新计算各家系R，然后备份组所有个体上市，对120日龄留种结果进行修正，选择两次R均大于零的家系留种；将留种家系室内养殖的亲本组已交尾雌蟹进行越冬；

（4）次年春天每个家系选择抱卵良好的亲蟹，进行标准化育苗与养殖，采用（3）的选育方法继续筛选家系；

（5）对筛选出的家系进行小规模示范养殖，确定和评价选育家系的养殖效益。

2.根据权利要求1所述的一种三疣梭子蟹家系选育方法，其特征在于所述的步骤（2）具体为从备选亲蟹中挑选亲蟹，采用人工定向交尾技术按完全双列杂交模式建立家系交配组合，每种交配组合2组，雌雄比例为3:1，对建立的家系进行标准化育苗与养殖，各家系苗种培育密度、养殖密度相同，120日龄时随机测量各家系50个个体生长性状，采用SPSS计算杂交优势率。

3.根据权利要求1所述的一种三疣梭子蟹家系选育方法，其特征在于所述的步骤（3）中对R大于零的家系挑选优良个体，进行室内人工定向交尾，其交尾方式为家系内自交，每个家系建立自交组合5-10个。

4.根据权利要求1所述的一种三疣梭子蟹家系选育方法，其特征在于所述的步骤（4）中每个筛选家系的越冬亲蟹为雌蟹50-100只。