CN103242273B - 2-芳基苯并呋喃-7-甲酰胺类化合物、其制备方法及用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种如通式I所示的2-芳基苯并呋喃-7-甲酰胺化合物或其药理或生理上可接受的盐，其制备方法及它们在制备抗肿瘤药物中的用途，其中，R1和R2各自独立地为氢、C1-C4的直链或支链烷基、C3-C4的环烷基或者含有氧或氮的饱和五元或六元杂环基；或者R1和R2与N形成含有至少一个杂原子的未取代或取代的饱和的五元或六元杂环基，其中，所述杂原子为O、N和S，所述取代基为在N上的甲基；R3为氢原子或氯原子；R4为氢原子或氟原子；X为CH、CF或N；Y为CH、CF或N。

Description

2-芳基苯并呋喃-7-甲酰胺类化合物、其制备方法及用途
技术领域
本发明属于药物化学和药物治疗学领域。具体涉及一类2-芳基苯并呋喃-7-甲酰胺类化合物或其药理或生理上可接受的盐，其制备方法及它们在制备治疗与聚腺苷二磷酸核糖聚合酶相关的疾病如恶性肿瘤的药物中的应用。
背景技术
聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Poly(adenosine diphosphate[ADP]-ribose)polymerase，PARP)是一类存在于多数真核细胞中的细胞核酶。它的主要功能是以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+)为底物合成聚ADP核糖体(Poly(ADP-ribose)，PAR)并将其转移至受体蛋白，调控蛋白的功能。(参考文献：Schreiber，V.；Dantzer，F.；Ame，J.C.；de Murcia，G.Poly(ADPribose)：novel functions for an old molecule.Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2006，7，517-528.)。PARP家族已经有16种同系物被发现，但就严格的结构和功能标准来讲仅有6个成员具有聚ADP核糖聚合酶的作用，分别是：PARP1，PARP2，PARP3，PARP4(VPARP)，Tankyrase1和Tankyrase2，而其它家族成员很可能是作为单ADP核糖转移酶发挥作用(参考文献：Rouleau，M.；Patel，A.；Hendzel，M.J.；Kaufmann，S.H.；Poirier，G.G.PARP inhibition：PARP1 and beyond.Nat.Rev.Cancer 2010，10，293-301.)。在PARP家族中，仅PARP1和PARP2能够被DNA链的断裂激活并介导聚ADP核糖化，经由碱基切除修复(Base-excision repair，BER)途径参与DNA单链断裂损伤的修复。聚ADP核糖化引起损伤部位的染色质解聚，启动修复机制，加速DNA损伤的修复，从这一方面讲PARP1和PARP2在整个过程中起着检测DNA损伤和信号传感器的双重作用。人类PARP1是一条分子量为113kDa的多肽链，包含3个功能性结构域。位于N-末端的DNA结合结构域(DNA binding domain，DBD)包含两个锌指(Zinc finger)，识别DNA单链和双链断裂。自修饰结构域(Automodification domain)位于中间部分，PARP1通过该区与ADP核糖基结合，发生PARP自身聚腺苷二磷酸核糖基化。C-末端为催化结构域(Catalyticdomain)，是把NAD+转化为ADP核糖的基础，是PARP1发挥作用的活性结构。人类PARP2是一条分子量为62kDa的多肽链。PARP2的DNA结合结构域与PARP1有所不同，相应地它的主要功能是识别损伤链上由于核苷酸丢失而形成的空隙。PARP2 C-末端的催化结构域与PARP1的催化结构域基本相似，但其结构上细微的差别还是反应出它们所催化的目标蛋白的差异。PARP1和PARP2通过碱基切除修复在DNA损伤修复、基因组稳定性、细胞凋亡调节方面发挥重要作用，使其成为近年来最受关注的抗肿瘤药物研究靶点之一。(参考文献：Yelamos，J.；Farres，Jordi.；Llacuna，L.；Ampurdanes，C.；Caballero，J.M.PARP-1 and PARP-2：New players in tumour development.Am.J.Cancer Res.2011，1(3)，328-346.)。此外PARP在炎症发生、缺血再灌注等过程中发挥重要作用表明其在除恶性肿瘤之外疾病(如糖尿病、心血管疾病等)的治疗中也有潜在的应用价值。(参考文献：Peralta-Leal，A.；Rodriguez-Vargas，J.M.；Aguilar-Quesada，R.；Rodriguez，M.I.；Linares，J.L.；deAlmodovar，M.R.；Oliver，F.J.PARP inhibitors：new partners in the therapy ofcancer and inflammatory diseases.Free Radical Biol.Med.2009，47，13-26.)。
2005年，Nature杂志报道了单独使用PARP1/2抑制剂对BRCA1/2缺失的乳腺细胞有显著抑制作用(参考文献：Bryant，H.E.；Schultz，N.；Thomas，H.D.；Parker，K.M.；Flower，D.；Lopez，E.；Kyle，S.；Meuth，M.；Curtin，N.J.；Helleday，T.Specific killing of BRCA2-deficient tumours with inhibitors ofpoly(ADP-ribose)polymerase.Nature 2005，434，913-917.和Farmer，H.；McCabe，N.；Lord，C.J.；Tutt，A.N.；Johnson，D.A.；Richardson，T.B.；Santarosa，M.；Dillon，K.J.；Hickson，I.；Knights，C.；Martin，N.M.；Jackson，S.P.；Smith，G.C.；Ashworth，A.Targeting the DNA repair defect in BRCA mutant cells as atherapeutic strategy.Nature 2005，434，917-921.)，成为PARP1/2抑制剂单独应用于抗肿瘤治疗的突破性研究进展。DNA是不稳定的；暴露于恶劣的环境(例如：紫外辐射、离子辐射等)、正常的细胞代谢副产物、一些DNA化学键的断裂都会导致DNA损伤。为了维持基因组的完整稳定性，正常的人体细胞每天要进行成千上万次因各种因素造成的DNA损伤的修复。主要的DNA修复途径包括碱基切除修复、核苷酸切除修复(Nucleotide-excision repair，NER)、同源重组(Homologous recombination，HR)及非同源末端连接(Nonhomologous end joining，NHEJ)。其中PARP1/2参与的BER是最主要的DNA单链断裂修复途径，HR是最主要的DNA双链断裂修复途径。(参考文献：Hoeijmakers，J.H.Genome maintenance mechanisms for preventing cancer.Nature 2001，411，366-74.)。BRCA1/2是著名的抑癌基因，是HR途径的关键修复因子。BRCA1/2缺陷增加DNA的不稳定性，导致恶性肿瘤的发生；这种细胞难以通过HR途径进行DNA双链断裂的修复，断裂最终导致细胞死亡。在BRCA1/2缺陷的肿瘤细胞中，抑制PARP1/2将导致DNA单链断裂蓄积增加；当于行进中的复制叉碰撞时，DNA单链断裂将被转化为致死性双链断裂，最终导致细胞死亡。BRCA1/2缺陷与PARP1/2抑制共同杀伤细胞的这种现象称为协同致死(synthetic lethality)，利用协同致死现象为恶性肿瘤的治疗提供了新策略和新思路，并因此开启了PARP1/2抑制剂作为高选择性新型抗肿瘤药物研发的新时代(参考文献：Kaelin，W.G.，Jr.The concept ofsynthetic lethality in the context of anticancer therapy.Nat.Rev.Cancer 2005，5，689-698；He JX，Yang CH，Miao ZH.PARP inhibitors as promising cancertherapeutics.Acta Pharmacol.Sin.2010，31，1172-1180.)。
第一代的PARP1/2抑制剂产生于30年前，大多为烟酰胺类似物，但缺乏选择性和有效性。第二代的PARP1/2抑制剂发展于20世纪90年代，建立了明确的构效关系，由此使PARP1/2抑制剂有了更明确的结构特征。这些特征包括电荷丰富的芳环结构；至少含有一个游离氢的甲酰胺基团利于形成氢键；相对于甲酰胺药效团的3-位必须存在一个不易断裂的化学键等等。(参考文献：Zaremba，T.；Curtin，N.J.PARP inhibitor development for systemiccancer targeting.Anti-Cancer Agents Med.Chem.2007，7，515-523.)。目前至少已有7种PARP1/2抑制剂作为新型抗肿瘤药进入临床试验，并在进一步进行中。(参考文献：C.Toulmonde1，U.M.；Bonnefoi，H.A review of PARPinhibitors：from bench to bedside.Annals of Oncology 2011，22(2)，268-79；Ferraris，D.V.Evolution of Poly(ADP-ribose)Polymerase-1(PARP-1)Inhibitors.From Concept to Clinic.J.Med.Chem.2010，53，4561-4584；和He JX，YangCH，Miao ZH.PARP inhibitors as promising cancer therapeutics.Acta Pharmacol.Sin.2010，31，1172-1180.)，但这些抑制剂依然存在许多缺点，如口服生物利用度较低，对除PARP1/2以外的PARP亚型缺乏选择性等。
众所周知，2-芳基苯并呋喃类化合物在天然产物中广泛存在，由于具有良好的生物活性和潜在的药用价值，一直以来受到科研工作者的密切关注。一方面天然产物学家不断从天然产物中提取分离出结构新颖的2-芳基苯并呋喃类化合物，并对其生物活性进行考察开发(参考文献：Halabalaki，M.；Aligiannis，N.；Papoutsi，Z.；Mitakou，S.；Moutsatsou，P.；Sekeris，C.；Skaltsounis，A.-L.Three New Arylobenzofurans from Onobrychis ebenoides and Evaluation ofTheir Binding Affinity for the Estrogen Receptor.J.Nat.Prod.2000，63，1672-1674；和Tsai，I.L.；Hsieh，C.-F.；Duh，C.-Y.Additional CytotoxicNeoligants From Perseaobovatifolia.Phytochemistry 1998，48，1371-1375.)，另一方面化学家投入极大的精力发展优化一系列构建2-芳基苯并呋喃类化合物的方法(参考文献：Ziegert，R.E.；Torang，J.Knepper，K.；Brase，S.The RecentImpact of Solid-Phase Synthesis on Medicinally Relevant BenzoannelatedOxygen Heterocycles.J.Comb.Chem.2005，7，147-169.和Chen，C.Y.；Dormer，P.G.Synthesis of Benzo[b]furans via CuI-Catalyzed Ring Closure.J.Org.Chem.2005，70，6964-6967.和Liang，Z.D.；Hou，W.Z.；Du，Y.F.；Zhang，Y.L.；Pan，Y.；Mao，D.；Zhao，K.Oxidative Aromatic C-O Bond Formation：Synthesis of3-Functionalized Benzo[b]furans by FeCl3-Mediated Ring Closure of α-ArglKetones.Org.Lett.2009，21，4978-4981.等)。已报道的2-芳基苯并呋喃类化合物显示了多种活性，例如视黄酸受体(retinoic acid receptor，RAR)的激动剂(参考文献：Santín，E.P.；Khanwalkar H.；Voegel，J.；Collette，P.；Mauvais，P.；Gronemeyer，H.；A.R.de Lera.Highly Potent Naphthofuran-Based Retinoic AcidReceptor Agonists.ChemMedChem.2009，4，780-791.)、微管蛋白聚合(TubulinPolymerization)的抑制剂(参考文献：Flynn，B.L.；Hamel E.；Jung，M.K.One-Pot Synthesis of Benzo[b]furan and Indole Inhibitors of TubulinPolymerization.J.Med.Chem.2002，45，2670-2673.)、金属蛋白酶(Metalloproteinase)的抑制剂(参考文献：Nakatani，S.；Ikura，M.；Yamamoto，S.；Nishita，Y.；Itadani，S.；Habashita，H.；Sugiura，T.；Ogawa，K.；Ohno，H.；Takahashi，K.；Nakai，H.；Toda，M.Design and synthesis of novelmetalloproteinase inhibitors.Bioorg.Med.Chem.2006，14，5402-5422.)以及抗菌剂(参考文献：S.；Karayildirim，T.；Anil，H.Synthesis ofegonol derivatives and their antimicrobial activities.Bioorg.Med.Chem.2011，18，1179-1188.)等等。其中一些化合物由于其良好的生物活性和潜在的巨大医药市场价值，已被申请知识产权保护，例如治疗前列腺素E2受体(prostaglandin E2 receptor)相关疾病的用途(专利号：WO 2008/098978)、治疗大麻受体(cannabinoid receptor)相关疾病的用途(专利号：WO2011/022679)、治疗雌激素受体(estrogen receptor)相关疾病的用途(专利号：WO 2009/124968)、抗细菌和真菌感染的用途(专利号：WO 2005/047275)、治疗膀胱肌肉反射性收缩疾病的用途(专利号：EP 0306226A2)等等。以上所述已报道的2-芳基苯并呋喃均未覆盖和涉及本发明所述的化合物及其作为PARP1/2抑制剂的内容。
基于以上原因，发明人设计合成了一类新型高选择性2-芳基苯并呋喃-7-甲酰胺类PARP1/2抑制剂。本发明所涉及化合物具有明确的构效关系，部分化合物如5b对PARP1/2具有高度的选择性，而且有很好的生物利用度(大鼠灌胃给予5b 10mg/kg后的绝对生物利用度为58.9％，而II期临床试验化合物AZD2281的大鼠口服生物利用度仅为11.1％)。该类新型PARP1/2抑制剂有望成为新型抗肿瘤药物。
发明内容
本发明的目的是提供一类通式I所示的2-芳基苯并呋喃-7-甲酰胺化合物或其药理或生理上可接受的盐，
其中，
R1和R2各自独立地为氢、C1-C4的直链或支链烷基、C3-C4的环烷基或者含有氧或氮的饱和五元或六元杂环基；
或者R1和R2与N形成含有至少一个杂原子的未取代或取代的饱和的五元或六元杂环基，其中，所述杂原子为O、N和S，所述取代基为在N上的甲基；
R3为氢原子或氯原子；
R4为氢原子或氟原子；
X为CH、CF或N；
Y为CH、CF或N，
优选地，
R1为氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、哌啶-4-基或(R)四氢呋喃-3-基；
R2为氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、哌啶-4-基或(R)四氢呋喃-3-基；
或者R1和R2与N形成未取代或取代的吗啉基、哌嗪基、高哌嗪基、硫代吗啉基、哌啶基或四氢吡咯基，其中，所述取代基为在N上的甲基；
R3为氢原子；
R4为氟原子；
X为CH、CF或N；
Y为CH、CF或N，
更优选地，
R1为氢或甲基；
R2为甲基、异丙基、环丙基、哌啶-4-基或(R)四氢呋喃-3-基；
或者R1和R2与N形成未取代或取代的吗啉基、哌嗪基、高哌嗪基、硫代吗啉基、哌啶基或四氢吡咯基，其中，所述取代基为在N上的甲基；
R3为氢原子；
R4为氟原子；
X为CH、CF或N；
Y为CH、CF或N。
最优选地，本发明提供了如下表1所示的化合物：
优选的，所述药理或生理上可接受的盐为盐酸盐。
本发明的另一目的是提供通式I所示化合物的制备方法，合成路线如方案1所示：
方案1
a)使5-位取代的水杨酸1发生酯化反应生成化合物2；
b)使化合物2发生碘代反应生成化合物3；
c)使化合物3与化合物取代芳香炔8先发生Sonogashira反应再关环生成化合物4；
d)使化合物4发生卤代反应生成化合物6；
e)使化合物4或6发生氨解反应分别生成化合物5或I(或7)；所述步骤a)的条件为：催化量酸存在下如浓硫酸存在下以甲醇为溶剂回流；
所述步骤b)的条件为：以N，N-二甲基甲酰胺为溶剂，与N-碘代丁二酰亚胺氮气保护下室温搅拌至薄层色谱法检测反应完全；
所述步骤c)的条件为：以N，N-二甲基甲酰胺为溶剂，二氯二三苯基膦钯、碘化亚铜为催化剂，二异丙基乙胺做碱，氮气保护下先室温反应2-3小时，再在50～90℃反应至薄层色谱法检测反应完全；
所述步骤d)的条件为：以四氢呋喃为溶剂，与N-氯代丁二酰亚胺氮气保护下室温搅拌至薄层色谱法检测反应完全；
所述步骤e)的条件为：以氨气的饱和甲醇溶液做溶剂，封管70～120℃反应过夜；也可直接与浓氨水封管70～120℃反应搅拌过夜；
其中所涉及化合物取代芳香炔8的结构式如下：
其中，R1、R2、R3、R4、X和Y的定义如上所述。
本发明提供了化合物取代芳香炔8不同的制备方法，合成路线为如下所示的路线一或路线二：
路线一
路线二
f)使化合物9发生胺取代反应生成化合物10；
g)使化合物10或12发生Sonogashira反应分别生成化合物11或13；
h)使化合物11或13脱去保护基分别生成化合物8或14；
i)使化合物14发生还原胺化分别生成化合物8；
所述步骤f)的条件为：以C1-C4的烷基胺或者含有一个杂原子(氧/氮/硫)的五元或六元仲胺的饱和醇溶液作溶剂室温搅拌；
所述步骤g)的条件为：以四氢呋喃为溶剂，二氯二三苯基膦钯、碘化亚铜为催化剂，二异丙基乙胺做碱，氮气保护下与三甲基硅乙炔回流反应；
所述步骤h)的条件为：以甲醇做溶剂，碳酸钾做碱室温搅拌反应；
所述步骤i)的条件为：以甲醇做溶剂，氰基硼氢化钠做还原剂，与不同的胺室温搅拌反应；
其中，R1、R2、X和Y的定义如上所述。
本发明的再一目的是提供通式I所示化合物或其药理或生理上可接受的盐在制备抗肿瘤、抗炎等与PARP相关疾病药物上的用途。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明所涉及化合物的结构和制备方法及体内外抑制PARP1/2的活性作进一步阐述，但不限制本发明。
所有实施例中，5-氟水杨酸由上海毕得(书亚)医药科技有限公司供应，二氯二三苯基膦钯由上海奥普迪诗化学科技有限公司供应，三甲基硅基乙炔由大连化工研究设计院供应，4-溴苯甲醛由上海邦成化工有限公司供应，N-碘代丁二酰亚胺由上海达瑞化学有限公司供应，除特殊说明外的起始试剂、溶剂、材料均为国药试剂集团供应；微波反应使用CEM NULL型微波反应仪进行；1HNMR由BrucherAM-400型或GEMINI-300型核磁共振仪记录，化学位移以δ(ppm)表示；质谱由Finnigan MAT-95质谱仪或者Agilent1200-6110型单四极杆液相色谱质谱联用仪记录。熔点用Buchi 510熔点仪测定，温度未经校正。分离用硅胶为青岛海洋化工厂生产200-300目柱层析硅胶。其中英文缩写所代表的化学试剂如下：
NBS N-溴代丁二酰亚胺
NIS N-碘代丁二酰亚胺
NCS N-氯代丁二酰亚胺
DMF N，N-二甲基甲酰胺
DIPEA二异丙基乙胺
THF四氢呋喃
化合物的制备与合成
实施例1
5-氟水杨酸甲酯(化合物2a)的制备：
250毫升圆底烧瓶，加入搅拌磁子。将10克(0.064mol)5-氟水杨酸溶解于60mL甲醇置于其中，冰浴下滴加浓硫酸5mL，滴毕于80℃油浴锅冷凝回流反应过夜。次日降至室温，旋转蒸发仪减压蒸去甲醇，加入乙酸乙酯60mL，有机层分别用饱和碳酸氢钠溶液50mL、饱和氯化钠溶液50mL洗，无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝150∶1)分离得浅色液体10.0克，油泵抽净后固化为条形结晶状固体，收率92％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.51(s，1H)，7.50(dd，J＝3.3，8.7Hz，1H)，7.22-7.15(m，1H)，6.94(q，J＝4.5Hz，1H)，3.96(s，3H)；MS(EI)M+：m/z(％)170(50)。
5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)的制备：
100毫升圆底烧瓶，加入搅拌磁子。将7克(0.041mol)5-氟水杨酸甲酯(化合物2a)溶解于40mL DMF置于其中，加入11.1克(0.049mol，1.2当量)NIS，氮气保护下室温搅拌反应过周末。反应完毕，加入乙酸乙酯80mL，有机层用饱和氯化钠溶液50mL洗两次，无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝150∶1)分离得白色絮状固体10.8克，收率89％。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ11.37(s，1H)，7.70(dd，J＝3.3，7.8Hz，1H)，7.56(dd，J＝3.3，8.7Hz，1H)，3.98(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)297.0(55)。
实施例2
N，N-二甲基-1-(4-碘苯基)甲胺(化合物10a)的制备：
250毫升圆底烧瓶，加入100mL二甲胺水溶液，分三批加入12g(40mmol)对碘苄基溴(化合物9)，室温搅拌过夜。次日乙酸乙酯萃取三次，有机层用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)分离得黄色液体8.4克，收率80％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.63(d，J＝8.1Hz，2H)，7.05(d，J＝8.1Hz，2H)，3.35(s，2H)，2.22(s，6H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)262.0(100)。
N，N-二甲基-1-{4-[(三甲基硅基)乙炔基]苯基}-甲胺(化合物11a)的制备：
250毫升圆底烧瓶，加入9.03g(34.5mmol)N，N-二甲基-1-(4-碘苯基)甲胺(化合物10a)、6.86g(70mmol)三甲基硅乙炔、300mg(0.35mmol)二氯二三苯基膦钯、133mg(0.7mmol)碘化亚铜、10mL三乙胺、100mL THF，抽真空换氮气三次后，80℃油浴回流反应过夜。次日降至室温，旋转蒸发仪减压蒸去大部分溶剂，直接加硅胶拌样柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)分离得棕色油状物6.8克，收率85％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.44(d，J＝8.1Hz，2H)，7.22(d，J＝8.1Hz，2H)，3.39(s，2H)，2.21(s，6H)，0.24(s，9H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)232.0(100)。
N，N-二甲基-1-(4-乙炔基苯基)-甲胺(化合物8a)的制备：
250毫升圆底烧瓶，将8g(34.6mmol)N，N-二甲基-1-{4-[(三甲基硅基)乙炔基]苯基}-甲胺(化合物11a)溶于甲醇80mL置于其中、加入2.46g(17.3mmol)碳酸钾，抽真空换氮气三次后，室温反应两小时。反应毕旋转蒸发仪减压蒸去大部分溶剂，加入乙酸乙酯80mL，有机层用饱和氯化钠溶液50mL洗，无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2∶1)分离得黄色液体4.8克，收率87％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝8.1Hz，2H)，7.25(d，J＝8.1Hz，2H)，3.40(s，2H)，3.05(s，1H)，2.21(s，6H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)160.2(100)。
2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4a)的制备：
100毫升两口圆底烧瓶，加入3.4g(21.4mmol)N，N-二甲基-1-(4-乙炔基苯基)-甲胺(化合物8a)、3.16g(10.7mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)、750mg(1.07mmol)二氯二三苯基膦钯、203mg(1.07mmol)碘化亚铜、2.16g(21.4mmol)三乙胺、10mL DMF，抽真空换氮气三次后，先室温反应两小时，再70℃油浴反应过夜。次日加入乙酸乙酯60mL，有机层用饱和氯化钠溶液50mL洗，无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝60∶1)分离得棕色油状物1.7克，收率48％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.90(d，J＝8.7Hz，2H)，7.64(dd，J＝3.0，9.3Hz，1H)，7.54(d，J＝8.1Hz，2H)，7.43(dd，J＝3.0，8.1Hz，1H)，7.04(s，1H)，4.05(s，3H)，3.73(s，2H)，2.44(s，6H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)328.2(100)。
2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5a)的制备：
100毫升封管，加入1.65g(5mmol)2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4a)和氨气的饱和甲醇溶液50mL，80℃油浴反应过夜。次日降至室温，静置待析出针状结晶过滤，甲醇洗，得浅黄色针状结晶固体1.18克，收率75％。
1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.98-7.60(m，3H)，7.89(br s，1H)，7.66(dd，J＝3.0，8.7Hz，1H)，7.49-7.43(m，4H)，3.45(s，2H)，2.17(s，6H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)313.2(100)。
实施例3
N-甲基-1-(4-碘苯基)甲胺(化合物10b)的制备：
20g(67mmol)对碘苄基溴(化合物9)为原料，参照化合物10a制备过程得黄色液体13.8克，收率83％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.63(d，J＝8.1Hz，2H)，7.06(d，J＝8.1Hz，2H)，3.68(s，2H)，2.43(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)248(61)。
N-甲基-1-{4-[(三甲基硅基)乙炔基]苯基}-甲胺(化合物11b)的制备：
13g(52.6mmol)N-甲基-1-(4-碘苯基)甲胺(化合物10b)为原料，参照化合物11a制备过程得棕色固体9.1克，收率80％。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)218.2(87)。
N-甲基-1-(4-乙炔基苯基)-甲胺(化合物8b)的制备：
8g(36.8mmol)N-甲基-1-{4-[(三甲基硅基)乙炔基]苯基}-甲胺(化合物11b)为原料，参照化合物8a制备过程得棕色液体4.6克，收率86％。
1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.41(d，J＝8.1Hz，2H)，7.32(d，J＝8.1Hz，2H)，4.10(s，1H)，3.64(br s，2H)，2.24(br s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)146.1(10)。
2-{4-[(甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4b)的制备：
3.19g(22mmol)N-甲基-1-(4-乙炔基苯基)-甲胺(化合物8b)、5.92g(20mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状物3.2克，收率51％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.86(d，J＝8.7Hz，2H)，7.62(dd，J＝2.7，9.6Hz，1H)，7.44-7.41(m，3H)，7.00(s，1H)，4.05(s，3H)，3.82(s，2H)，3.48(s，1H)，2.49(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)314.1(30)。
2-{4-[(甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5b)的制备：
2.7g(8.6mmol)2-{4-[(甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4b)为原料，参照化合物5a制备过程得米黄色粒状固体1.81克，收率70％。
1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.97-7.94(m，3H)，7.88(br s，1H)，7.64(dd，J＝2.7，8.4Hz，1H)，7.50-7.42(m，4H)，3.70(s，2H)，2.28(s，3H)；MS(EI)(M)：m/z(％)298(100)。
实施例4
N-甲基-1-(4-乙炔基苯基)-甲胺(化合物8b)的制备：
100毫升圆底烧瓶，将238mg(1.5mmol)4-乙炔基苯甲醛溶于甲醇10mL置于其中，加入101mg(1.5mmol)甲胺盐酸盐、142mg(2.25mmol)氰基硼氢化钠，室温反应三小时。反应毕加水用稀氢氧化钠溶液调PH至10，加入乙酸乙酯50mL萃取，有机层用饱和氯化钠溶液30mL洗，无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1∶1)分离得棕色液体133毫克，收率61％。
1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.41(d，J＝8.1Hz，2H)，7.32(d，J＝8.1Hz，2H)，4.10(s，1H)，3.64(br s，2H)，2.24(br s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)146.1(10)。
实施例5
2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟-3-氯苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物6a)的制备：
100毫升两口圆底烧瓶，将500mg(1.53mmol)2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4a)溶于20mL四氢呋喃，冰浴下滴加350mg(2.6mmol)NCS的四氢呋喃溶液20mL，十五分钟滴毕后抽真空换氮气三次，室温反应过夜。次日加入乙酸乙酯50mL，有机层用饱和碳酸氢钠溶液50mL洗，饱和硫代硫酸钠溶液50mL洗，无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝80∶1)分离得黄色粉末170毫克，收率31％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.12(d，J＝8.1Hz，2H)，7.70(dd，J＝2.7，9.3Hz，1H)，7.47-7.44(m，3H)，4.04(s，3H)，3.50(s，2H)，2.27(s，6H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)362.1(100)，364.1(33)。
2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟-3-氯苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物7a)的制备：
50mg(0.14mmol)2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟-3-氯苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物6a)为原料，参照化合物5a制备过程得米白固体粉末38mg，收率79％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.99(d，J＝8.7Hz，2H)，7.84(dd，J＝2.7，9.6Hz，1H)，7.47(d，J＝8.7Hz，2H)，743(dd，J＝2.7，7.2Hz，1H)6.28(s，1H)，3.50(s，2H)，2.28(s，6H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)347.1(100)，349.1(33)。
实施例6
5-[(三甲基硅基)乙炔基]吡啶-2-甲醛(化合物13a)的制备：
1.5g(8mmol)5-溴-吡啶-2-甲醛为原料，参照化合物11a制备过程得棕色粉末930毫克，收率57％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.05(s，1H)，8.80(s，1H)，7.89(s，2H)，0.28(s，9H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)204.1(64)。
5-乙炔基-吡啶-2-甲醛(化合物14a)的制备：
812mg(4mmol)5-[(三甲基硅基)乙炔基]吡啶-2-甲醛(化合物13a)为原料，参照化合物8a制备过程得淡黄色粉末377毫克，收率72％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.07(s，1H)，8.84(s，1H)，7.93(s，2H)，3.42(s，1H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)132.1(64)。
N-甲基-1-(5-乙炔基-2-吡啶基)甲胺(化合物8c)的制备：
196mg(1.5mmol)5-乙炔基-吡啶-2-甲醛(化合物14a)为原料，参照
实施例4制备过程得棕色液体135毫克，收率62％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.65(d，J＝1.5Hz，1H)，7.73(dd，J＝2.1，8.1Hz，1H)，7.27(d，J＝8.1Hz，1H)，3.87(s，2H)，3.18(s，1H)，2.46(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)147.1(100)。
2-{6-[(甲氨基)甲基]-3-吡啶基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4c)的制备：
82mg(0.56mmol)N-甲基-1-(5-乙炔基-2-吡啶基)甲胺(化合物8c)、166mg(0.56mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得浅黄色粉末10毫克，收率5.7％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.07(d，J＝1.8Hz，1H)，8.15(dd，J＝2.1，8.4Hz，1H)，7.66(dd，J＝2.1，8.4Hz，1H)，7.47-7.42(m，2H)，7.10(s，1H)，4.05(s，3H)，3.94(s，2H)，2.51(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)315.1(100)。
2-{6-[(甲氨基)甲基]-3-吡啶基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5c)的制备：
10mg(0.032mmol)2-{6-[(甲氨基)甲基]-3-吡啶基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4c)为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末5毫克，收率52.5％。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ9.09(s，1H)，8.32(dd，J＝2.1，8.1Hz，1H)，7.58-7.51(m，3H)，7.44(s，1H)，3.96(s，2H)，2.49(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)300.1(100)。
实施例7
6-[(三甲基硅基)乙炔基]吡啶-3-甲醛(化合物13b)的制备：
279mg(1.5mmol)6-溴-吡啶-3-甲醛为原料，参照化合物11a制备过程得黄色粉末222毫克，收率73％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.09(s，1H)，9.01(s，1H)，8.12(dd，J＝1.2，8.1Hz，1H)，7.59(d，J＝1.2Hz，1H)，0.28(s，9H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)204.1(22)。
6-乙炔基-吡啶-3-甲醛(化合物14b)的制备：
304mg(1.5mmol)6-[(三甲基硅基)乙炔基]吡啶-3-甲醛(化合物13b)为原料，参照化合物8a制备过程得白色絮状固体175毫克，收率89％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.12(s，1H)，9.04(d，J＝0.9Hz，1H)，8.15(dd，J＝2.1，8.1Hz，1H)，7.63(d，J＝8.1Hz，1H)，3.39(s，1H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)132.1(59)。
N-甲基-1-(6-乙炔基-3-吡啶基)甲胺(化合物8d)的制备：
196mg(1.5mmol)6-乙炔基-吡啶-3-甲醛(化合物14b)为原料，参照实施例4制备过程得棕色油状物76毫克，收率35％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.52(d，J＝2.1Hz，1H)，7.65(dd，J＝2.1，8.4Hz，1H)，7.45(d，J＝8.4Hz，1H)，3.77(s，2H)，3.12(s，1H)，2.45(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)147.1(100)。
2-{5-[(甲氨基)甲基]-2-吡啶基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4d)的制备：
73mg(0.50mmol)N-甲基-1-(6-乙炔基-3-吡啶基)甲胺(化合物8d)、148mg(0.50mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色粉末71毫克，收率45％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.62(s，1H)，7.99(d，J＝7.1Hz，1H)，7.81(dd，J＝1.8，7.1Hz，1H)，7.67(dd，J＝2.7，9.6Hz，1H)，7.49(dd，J＝2.4，8.7Hz，1H)，7.44(s，1H)，4.05(s，3H)，3.84(s，2H)，2.49(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)315.1(100)。
2-{5-[(甲氨基)甲基]-2-吡啶基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5d)的制备：
50mg(0.16mmol)2-{5-[(甲氨基)甲基]-2-吡啶基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4d)为原料，参照化合物5a制备过程得浅棕色粉末37毫克，收率78％。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ8.63(s，1H)，8.06(d，J＝8.4Hz，1H)，7.94(dd，J＝1.8，8.1Hz，1H)，7.67-7.58(m，3H)，3.82(s，2H)，2.43(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)300.1(100)。
实施例8
4-[(三甲基硅基)乙炔基]-2-氟苯甲醛(化合物13c)的制备：
1g(4mmol)3-氟-4-碘苯甲醛为原料，参照化合物11a制备过程得棕色油状物495毫克，收率56％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.32(s，1H)，7.79(t，J＝7.8Hz，1H)，7.32(d，J＝7.8Hz，1H)，7.24(m，1H)，0.26(s，9H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)221.0(10)。
4-乙炔基-2-氟苯甲醛(化合物14c)的制备：
440mg(2mmol)4-[(三甲基硅基)乙炔基]-2-氟苯甲醛(化合物13c)为原料，参照化合物8a制备过程得黄色固体208毫克，收率70％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.34(s，1H)，7.83(t，J＝7.8Hz，1H)，7.37(d，J＝7.8Hz，1H)，7.28(d，J＝7.8Hz，1H)，3.34(s，1H)。
N-甲基-1-(4-乙炔基-2-氟苯基)甲胺(化合物8e)的制备：
208mg(1.4mmol)4-乙炔基-2-氟苯甲醛(化合物14c)为原料，参照化合物实施例4制备过程得黄色油状物95毫克，收率42％。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)164.1(38)。
2-{4-[(甲氨基)甲基]-3-氟苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4e)的制备：
95mg(0.58mmol)N-甲基-1-(4-乙炔基-2-氟苯基)甲胺(化合物8e)、156mg(0.52mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得黄色粘稠液体58毫克，收率34％。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)332.1(100)。
2-{4-[(甲氨基)甲基]-3-氟苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5e)的制备：
58mg(0.17mmol)2-{4-[(甲氨基)甲基]-3-氟苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4e)为原料，参照化合物5a制备过程得浅黄色粉末24毫克，收率43％。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ7.83-7.76(m，2H)，7.64(t，J＝7.8Hz，1H)，7.57-7.50(m，2H)，7.41(s，1H)，4.22(s，2H)，2.71(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)317.2(100)。
实施例9
1-(4-乙炔基苄基)四氢吡咯(化合物8f)的制备：
50毫升圆底烧瓶，将130mg(1mmol)4-乙炔基苯甲醛溶于甲醇10mL置于其中，加入71mg(1mmol)四氢吡咯、126mg(2mmol)氰基硼氢化钠、120mg(2mmol)冰醋酸，室温反应三小时。反应毕加水用稀氢氧化钠溶液调PH至10，加入乙酸乙酯50mL萃取，有机层用饱和氯化钠溶液30mL洗，无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝30∶1)分离得无色液体130毫克，收率70％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.44(d，J＝7.5Hz，2H)，7.28(d，J＝8.4Hz，2H)，3.62(s，2H)，3.04(s，1H)，2.51(m，4H)，1.79(m，4H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)186.2(100)。
2-{4-[(1-四氢吡咯基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4f)的制备：
105mg(0.57mmol)1-(4-乙炔基苄基)四氢吡咯(化合物8f)、168mg(0.57mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状物14毫克，收率7％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.85(d，J＝6.3Hz，2H)，7.62(dd，J＝2.1，7.1Hz，1H)，7.45-7.41(m，3H)，7.00(s，1H)，4.05(s，3H)，3.67(s，2H)，2.54(m，4H)，1.80(m，4H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)354.2(100)。
2-{4-[(1-四氢吡咯基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物8f)的制备：
12mg(0.03mmol)2-{4-[(1-四氢吡咯基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4f)为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末6毫克，收率52％。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ7.92(d，J＝8.4Hz，2H)，7.47-7.56(m，4H)，7.30(s，1H)，3.73(s，2H)，2.62(m，4H)，1.86-1.82(m，4H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)339.2(100)。
实施例10
1-(4-乙炔基苄基)-4-甲基哌嗪(化合物8g)的制备：
156mg(1.2mmol)4-乙炔基苯甲醛、120mg(1.2mmol)N-甲基哌嗪为原料，参照化合物8f制备过程得黄色液体175毫克，收率68％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.42(d，J＝8.1Hz，2H)，7.26(d，J＝8.1Hz，2H)，3.49(s，2H)，3.05(s，1H)，2.44(br s，8H)，2.28(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)215.2(100)。
2-{4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4g)的制备：
83mg(o.39mmol)1-(4-乙炔基苄基)-4-甲基哌嗪(化合物8g)、115mg(0.39mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状物14毫克，收率9.4％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.84(d，J＝8.4Hz，2H)，7.62(dd，J＝2.4，9.6Hz，1H)，7.44-7.40(m，3H)，7.00(s，1H)，4.05(s，3H)，3.56(s，2H)，2.50(br s，8H)，2.30(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)383.2(100)。
2-{4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5g)的制备：
10mg(0.03mmol)2-{4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4g)为原料，参照化合物18制备过程得白色粉末7毫克，收率73％。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ7.90(d，J＝8.1Hz，2H)，7.56-7.45(m，4H)，7.29(s，1H)，3.58(s，2H)，2.52(br s，8H)，2.28(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)368.2(100)。
实施例11
1-(4-乙炔基苄基)哌啶(化合物8h)的制备：
156mg(1.2mmol)4-乙炔基苯甲醛、102mg(1.2mmol)哌啶为原料，参照化合物8f制备过程得黄色液体138毫克，收率58％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.42(d，J＝8.4Hz，2H)，7.27(d，J＝8.1Hz，2H)，3.46(s，2H)，3.04(s，1H)，2.36(m，4H)，1.60-1.53(m，4H)，1.46-1.40(m，2H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)200.2(100)。
2-{4-[(1-哌啶基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4h)的制备：
113mg(0.57mmol)1-(4-乙炔基苄基)哌啶(化合物8h)、140mg(0.47mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得无色油状物14毫克，收率6.7％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.85(d，J＝8.1Hz，2H)，7.62(dd，J＝2.7，9.0Hz，1H)，7.45-7.41(m，3H)，7.00(s，1H)，4.05(s，3H)，3.53(s，2H)，2.41(m，4H)，1.63-1.57(m，4H)，1.47-1.43(m，2H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)368.2(100)。
2-{4-[(1-哌啶基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5h)的制备：
12mg(0.03mmol)2-{4-[(1-哌啶基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4h)为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末6毫克，收率52％。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ7.75-7.66(m，3H)，7.44-7.35(m，3H)，7.03(s，1H)，3.52(s，2H)，2.41(m，4H)，1.63-1.57(m，4H)，1.47-1.43(m，2H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)353.2(100)。
实施例12
1-(4-乙炔基苄基)-4-甲基高哌嗪(化合物8i)的制备：
156mg(1.2mmol)4-乙炔基苯甲醛、137mg(1.2mmol)N-甲基高哌嗪为原料，参照化合物8f制备过程得黄色液体235毫克，收率86％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.42(d，J＝8.1Hz，2H)，7.30(d，J＝8.1Hz，2H)，3.62(s，2H)，3.04(s，1H)，2.71-2.57(m，8H)，2.35(s，3H)，1.84-1.78(m，2H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)229.2(100)。
2-{4-[(4-甲基-1-高哌嗪基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4i)的制备：
198mg(0.87mmol)1-(4-乙炔基苄基)高哌嗪(化合物8i)、257mg(0.87mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状物22毫克，收率6.4％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.84(d，J＝8.1Hz，2H)，7.62(dd，J＝2.4，9.3Hz，1H)，7.54-7.40(m，3H)，6.99(s，1H)，4.04(s，3H)，3.68(s，2H)，2.71-2.57(m，8H)，2.41(s，3H)，1.84-1.78(m，2H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)397.2(100)。
2-{4-[(4-甲基-1-高哌嗪基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5i)的制备：
15mg(0.04mmol)2-{4-[(1-四氢吡咯基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4i)为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末11毫克，收率76％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.78-7.72(m，3H)，7.47-7.36(m，4H)，7.02(s，1H)，6.66(br s，1H)，3.68(s，2H)，2.76-2.64(m，8H)，2.38(s，3H)，1.88-1.80(m，2H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)382.2(100)。
实施例13
1-(4-乙炔基苄基)吗啉(化合物8j)的制备：
156mg(1.2mmol)4-乙炔基苯甲醛、104mg(1.2mmol)吗啉为原料，参照化合物8f制备过程得黄色液体138毫克，收率57％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，7.28(d，J＝8.4Hz，2H)，3.70(t，J＝5.1Hz，4H)，3.48(s，2H)，3.05(s，1H)，2.43(t，J＝4.8Hz，4H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)202.1(100)。
2-{4-[(1-吗啉基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4j)的制备：
113mg(0.56mmol)1-(4-乙炔基苄基)吗啉(化合物8j)、166mg(0.56mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状混合物135毫克。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)370.2(100)。
2-{4-[(1-吗啉基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5j)的制备：
110mg 2-{4-[(1-吗啉基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4j)混合物为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末15毫克，两步为收率9.2％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.80-7.68(m，3H)，7.47-7.33(m，4H)，7.05(s，1H)，6.31(s，1H)，3.73(t，J＝4.8Hz，4H)，3.56(s，2H)，2.47(t，J＝4.8Hz，4H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)355.2(100)。
实施例14
1-(4-乙炔基苄基)硫代吗啉(化合物8k)的制备：
156mg(1.2mmol)4-乙炔基苯甲醛、124mg(1.2mmol)硫代吗啉为原料，参照化合物8f制备过程得黄色液体145毫克，收率56％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.43(d，J＝8.1Hz，2H)，7.26(d，J＝8.1Hz，2H)，3.50(s，2H)，3.05(s，1H)，2.67(br s，8H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)218.1(100)。
2-{4-[(1-硫代吗啉基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4k)的制备：
120mg(0.55mmol)1-(4-乙炔基苄基)硫代吗啉(化合物8k)、164mg(0.55mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状混合物170毫克。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)386.1(100)。
2-{4-[(1-硫代吗啉基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5k)的制备：
145mg2-{4-[(1-硫代吗啉基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4k)混合物为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末16毫克，两步为收率9.2％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.81-7.68(m，3H)，7.48-7.39(m，4H)，7.05(s，1H)，6.28(br s，1H)，3.57(s，2H)，2.74-2.68(m，8H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)371.1(100)。
实施例15
4-[(4-乙炔基苄基)氨基]-1-哌啶基甲酸叔丁酯(化合物8l)的制备：
156mg(1.2mmol)4-乙炔基苯甲醛、240mg(1.2mmol)4-氨基-1-哌啶基甲酸叔丁酯为原料，参照化合物8f制备过程得黄色液体330毫克，收率85％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.44(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26(d，J＝9.3Hz，2H)，4.00(m，2H)，3.82(s，2H)，3.05(s，1H)，2.79(t，J＝10.8Hz，2H)，2.64(m，1H)，1.83(m，2H)，1.45(s，9H)，1.28(m，2H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)315.2(54)。
4-[4-(7-甲氧羰基-5-氟-2-苯并呋喃基)苄基氨基]-1-哌啶基甲酸叔丁酯(化合物4l)的制备：
181mg(0.58mmol)4-[4-(7-甲氧羰基-5-氟-2-苯并呋喃基)苄基氨基]-1-哌啶基甲酸叔丁酯(化合物8l)、170mg(0.58mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状混合物44毫克。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)483.3(95)。
4-[4-(7-氨基甲酰基-5-氟-2-苯并呋喃基)苄基氨基]-1-哌啶基甲酸叔丁酯(化合物5la)的制备：
30mg4-[4-(7-甲氧羰基-5-氟-2-苯并呋喃基)苄基氨基]-1-哌啶基甲酸叔丁酯(化合物4l)混合物为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末15毫克，两步为收率8.1％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.79-7.74(m，3H)，7.46-7.38(m，4H)，7.04(s，1H)，6.31(br s，1H)，4.04(br s，2H)，3.89(s，2H)，2.81(t，J＝8.7Hz，2H)，2.70(m，1H)，1.88(m，2H)，1.45(s，9H)，1.32(m，2H)；MS(ESI)(M-99)+：m/z(％)368.2(100)。
2-{4-[(4-哌啶基)氨基甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5l)的制备：
15mg(0.03mmol)4-[4-(7-氨基甲酰基-5-氟-2-苯并呋喃基)苄基氨基]-1-哌啶基甲酸叔丁酯(化合物5la)置于10毫升反应瓶，加入2mL二氯甲烷和0.5mL三氟乙酸，室温搅拌两小时后旋转蒸发仪旋干溶剂，加水后用稀氢氧化钠溶液调PH至10，加入乙酸乙酯50mL萃取，有机层用饱和氯化钠溶液30mL洗，无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪蒸干，硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)分离得白色粉末6毫克，收率51％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.79-7.68(m，3H)，7.46-7.37(m，4H)，7.04(s，1H)，6.52(br s，1H)，3.88(s，2H)，3.11(m，2H)，2.61(m，3H)，1.92(m，2H)，1.32(br s，2H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)368.2(100)。
实施例16
(R)-N-(4-乙炔基苄基)-3-氨基四氢呋喃(化合物8m)的制备：
130mg(1mmol)4-乙炔基苯甲醛、124mg(1mmol)(R)-3-氨基四氢呋喃为原料，参照实施例4制备过程得黄色油状物108毫克，收率54％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.44(d，J＝6.0Hz，2H)，7.28(d，J＝6.0Hz，2H)，3.92(m，1H)，3.81-3.74(s，4H)，3.61(m，1H)，3.41(m，1H)，3.06(s，1H)，2.10(m，1H)，1.74(m，1H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)202.1(95)。
(R)-2-{4-[(3-四氢呋喃基氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4m)的制备：
98mg(0.49mmol)(R)-N-(4-乙炔基苄基)-3-氨基四氢呋喃(化合物8m)、144mg(0.49mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状混合物100毫克。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)370.2(95)。
(R)-2-{4-[(3-四氢呋喃基氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5m)的制备：
90mg(R)-2-{4-[(3-四氢呋喃基氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4m)混合物为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末7毫克，两步为收率4.5％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.80-7.74(m，3H)，7.45(d，J＝8.4Hz，2H)，7.40(m，2H)，7.04(s，1H)，6.37(s，1H)，4.00-3.92(m，1H)，3.85-3.75(m，4H)，3.69-3.64(m，1H)，3.50-3.43(m，1H)，2.20-2.08(m，1H)，1.85-1.78(m，1H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)355.2(100)。
实施例17
N-(4-乙炔基苄基)环丙胺(化合物8n)的制备：
253mg(1.95mmol)4-乙炔基苯甲醛、111mg(1.95mmol)环丙胺为原料，参照化合物8f制备过程得无色液体272毫克，收率79％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.44(d，J＝8.1Hz，2H)，7.26(d，J＝8.1Hz，2H)，3.83(s，2H)，3.05(s，1H)，2.16-2.09(m，1H)，0.46-0.33(m，4H)MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)172.2(30)。
2-[4-(环丙胺基甲基)苯基]-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4n)的制备：
83mg(0.49mmol)N-(4-乙炔基苄基)环丙胺(化合物8n)、144mg(0.49mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状混合物95毫克。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)340.2(60)。
2-[4-(环丙胺基甲基)苯基]-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5n)的制备：
95mg2-[4-(环丙胺基甲基)苯基]-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4n)混合物为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末12毫克，两步为收率7.6％。
1HNMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ7.75-7.68(m，3H)，7.41-7.35(m，3H)，7.02(s，1H)，3.84(s，2H)，2.16-2.09(m，1H)，0.48-0.35(m，4H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)325.2(52)。
实施例18
N-(4-乙炔基苄基)异丙胺(化合物8o)的制备：
260mg(2mmol)4-乙炔基苯甲醛、120mg(2mmol)环丙胺为原料，参照化合物8f制备过程得无色液体272毫克，收率79％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，2H)，3.77(s，2H)，3.04(s，1H)，2.89-2.78(m，1H)，1.08(d，J＝6.3Hz，6H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)174.2(73)。
2-[4-(异丙胺基甲基)苯基]-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4o)的制备：
110mg(0.63mmol)N-(4-乙炔基苄基)异丙胺(化合物8o)、188mg(0.63mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色油状混合物165毫克。
MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)342.2(100)。
2-[4-(异丙胺基甲基)苯基]-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5o)的制备：
160mg2-[4-(异丙胺基甲基)苯基]-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4o)混合物为原料，参照化合物5a制备过程得白色粉末13毫克，两步为收率6％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.74-7.72(m，3H)，7.43-7.35(m，4H)，7.02(s，1H)，6.36(s，1H)，3.82(s，2H)，2.85(m，1H)，1.09(d，J＝6.3Hz，6H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)327.(100)。
实施例19
4-[(三甲基硅基)乙炔基]-3-氟苯甲醛(化合物13d)的制备：
101mg(0.5mmol)3-氟-4-溴苯甲醛为原料，参照化合物11a制备过程得黄色固体102毫克，收率92％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.96(d，J＝1.2，1H)，7.61-7.54(m，3H)，0.28(s，9H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)221.1(100)。
4-乙炔基-3-氟苯甲醛(化合物14d)的制备：
440mg(2mmol)4-[(三甲基硅基)乙炔基]-3-氟苯甲醛(化合物13d)为原料，参照化合物8a制备过程得白色絮状固体260毫克，收率88％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.97(s，1H)，7.68-7.57(m，3H)，3.57(s，1H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)149.1(10)。
N-甲基-1-(4-乙炔基-3-氟苯基)甲胺(化合物8p)的制备：
222mg(1.5mmol)4-乙炔基-3-氟苯甲醛(化合物14d)为原料，参照实施例4制备过程得黄色油状物182毫克，收率74％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.42(d，J＝7.8Hz，1H)，7.09-7.04(m，2H)，3.74(s，2H)，3.27(s，1H)，2.43(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)164.1(26)。
2-{4-[(甲氨基)甲基]-2-氟苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4p)的制备：
82mg(0.50mmol)N-甲基-1-(4-乙炔基-3-氟苯基)甲胺(化合物8p)、148mg(0.50mmol)5-氟-3-碘水杨酸甲酯(化合物3a)为原料，参照化合物4a制备过程得棕色粉末15毫克，收率9％。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.05(t，J＝7.8Hz，1H)，7.64(dd，J＝2.7，9.3Hz，1H)，7.44(dd，J＝2.7，8.1Hz，1H)，7.24-7.12(m，3H)，4.04(s，3H)，3.80(s，2H)，2.47(s，3H)；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)332.1(10)。
2-{4-[(甲氨基)甲基]-2-氟苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5p)的制备：
10mg(0.03mmol)2-{4-[(甲氨基)甲基]-2-氟苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酸甲酯(化合物4p)为原料，参照化合物5a制备过程得浅棕色粉末6毫克，收率63％。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ8.03(t，J＝7.9Hz，1H)，7.55(m，2H)，7.34-7.24(m，3H)，3.77(s，2H)，2.40(s，3H；MS(ESI)(M+H)+：m/z(％)317.2(50)。
实施例20
2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺盐酸盐的制备：
250毫升反应瓶，置入937mg(3mmol)2-{4-[(二甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5a)，室温搅拌加甲醇至溶解。溶解后滴入235.5mg(3mmol)乙酰氯，搅拌半小时后旋干溶剂得白色粉末1.02克，收率98％，熔点232-234℃。
1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ10.96(br s，1H)，8.09(d，J＝8.1Hz，2H)，7.95(s，1H)，7.91(s，1H)，7.76-7.68(m，3H)，7.61(s，1H)，7.50(dd，J＝2.4，9.9Hz，1H)，4.33(d，J＝5.4Hz，2H)，2.70(d，J＝4.8Hz，6H)。
实施例21
2-{4-[(甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺盐酸盐的制备：
298mg(1mmol)2-{4-[(甲氨基)甲基]苯基}-5-氟苯并呋喃-7-甲酰胺(化合物5b)，室温搅拌加甲醇至溶解。溶解后滴入78.5mg(1mmol)乙酰氯，搅拌半小时后旋干溶剂得米黄色粉末330毫克，收率98％，熔点286-288℃。
1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.42(br s，2H)，8.07(d，J＝8.1Hz，2H)，7.94(s，1H)，7.91(s，1H)，7.72-7.67(m，3H)，7.59(s，1H)，7.50(dd，J＝2.7，9.9Hz，1H)，4.17(t，J＝5.4Hz，2H)，2.70(d，J＝5.1Hz，3H)。
实验例1
分子水平PARP1酶活性抑制实验：
实验方法：酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)(参照Decker P.发表文献记载的酶联免疫吸附法；参考文献：DeckerP，Miranda EA，de Murcia G，Muller S.An improved nonisotopic test to screen alarge series of new inhibitor molecules of Poly(ADP-ribose)Polymerase activityfor therapeutic applications.Clinical Cancer Research，5：1169-1172，1999.)。其原理是将底物组蛋白包被在吸附性的96孔板上，加入PARP1重组酶、底物NAD+、激活的DNA使PARP1发生酶反应，使组蛋白生成产物PAR(聚腺苷二磷酸核糖)，然后加入抗PAR(anti-PAR)的抗体，检测96孔板上所包被的组蛋白上的产物PAR的强度，就可以反映出PARP酶的活性。
具体方法如下：
1.组蛋白是PARP1公认的重要底物。将其用无钾离子的PBS(10mM磷酸钠缓冲液，150mM NaCl，pH 7.2-7.4)包被96孔酶标板，置37℃摇床过夜；弃去孔中液体。用120μL/孔的T-PBS(含0.1％Tween-20的PBS)洗板5次。于37℃烘箱中干燥。
2.加入NAD+(终浓度8μM/孔)，DNA(100ng/孔)，PARP1(10ng/孔)(用PARP1酶反应缓冲液稀释，缓冲液含50mM Tris(三羟甲基氨基甲烷)，2mM MgCl2，pH 8.0)，每孔加入一定稀释浓度(终浓度从10μM开始，10倍稀释6个梯度)10μL的抑制剂(阳性对照化合物为AZD2281，商品名Olaparib，购自LC Laboratories公司)，每个浓度设置2个重复，反应体系共100μL/孔(用前述PARP1酶反应缓冲液补足)，37℃摇床反应1h，设置空白、阳性、阴性对照(以不加酶孔为空白对照孔，不加抑制剂孔为阴性对照孔，以加入阳性抑制剂孔为阳性对照孔)。启动反应，置37℃摇床反应1小时。
3.用PBS-T洗板三遍，加入一抗anti-PAR MAb10H(1∶4000，用含5μg/mL BSA的PBS-T稀释)，100μL/孔，37℃摇床孵育1h；
4.用PBS-T洗板三遍，加入过氧化物酶标记的二抗(抗小鼠抗体)(1∶2000，用含5μg/mL BSA的PBS-T稀释)，100μL/孔，37℃摇床反应30分钟；
5.加入2mg/mL的OPD(O-Phenylenediamine Dihydrochloride)显色液100μL/孔(用含有0.03％H2O2的0.1M柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH＝5.4)稀释)，25℃避光反应15分钟(OPD溶解时需用超声，显色液需现配现用)。
6.用50μL/孔的2M H2SO4终止反应，用Molecular Devices酶标仪(购自美国分子仪器公司(MDC)，型号为SpectraMax 190 Microplate Reader(90Vto 240V))读数，波长490nm测OD值。
按照以下公式计算药物对PARP酶活性的抑制程度：抑制率(％)＝(OD对照孔-OD给药孔)/OD对照孔×100％，并据此按Logit法计算达到50％抑制率时的药物浓度，即IC50值。实验重复三次，计算平均值和标准差。
实验例2
体外细胞增殖抑制实验：
细胞株：中国仓鼠肺成纤维细胞株VC8(BRCA2-/-)和野生型细胞株V79(由荷兰莱顿大学Malgorzata Z.Zdzienicka教授赠送)。
实验方法：MTT比色法(参照Mosman T.发表的MTT比色法，参考文献：Mosmann T.Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival applicationto proliferation and cytotoxicity assasys.Journal of Immunological Methods65(1-2)：55-63，1983.)。MTT全称为3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑盐(3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-Diphenyltetrazolium bromide)。其原理是活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。三联液能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在570nm波长处可间接反映活细胞数量，从而计算细胞抑制率。
具体方法如下：将处于对数生长期的细胞按V79细胞2000个/孔，VC8细胞4000个/孔的密度接种至96孔培养板，每孔100μL，培养过夜后，加入不同浓度(终浓度从10μM开始，5倍稀释6个梯度)的药物作用72h，每个浓度设三复孔，并设相应浓度的生理盐水溶媒对照及无细胞调零孔。作用结束后，加入20μL MTT(5mg/mL)，于37℃培养4h后加入100μL三联液(10％SDS-5％异丁醇-0.01M HCl)，37℃放置过夜，570nm波长下测定OD值。按照以下公式计算药物对细胞增殖抑制程度：抑制率(％)＝(OD对照孔-OD给药孔)/OD对照孔×100％，并据此按Logit法计算达到50％抑制率时的药物浓度，即IC50值。实验重复三次，计算平均值和标准差。
本发明优选化合物的分子水平和细胞水平生物活性结果见表2。
表2：优选化合物分子水平和细胞水平活性的活性。
从表2可以看出，本发明化合物对PARP1有良好的抑制活性，其在分子水平上与阳性对照在同一数量级。体外细胞增殖抑制实验表明本发明化合物对中国仓鼠肺成纤维细胞株VC8(BRCA2-/-)具有良好的抑制活性；而对野生型无缺陷(BRCA2+/+)的中国仓鼠肺细胞株V79半抑制浓度超过10μM，表明所设计化合物对BRCA缺陷的细胞具有高度的选择性，所测结果与其作用机制相符。
实验例3
分子水平PARP家族酶活性抑制实验：
实验方法：酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA。其原理是将底物组蛋白包被在吸附性的96孔板上，加入PARP1重组酶、底物NAD+、激活的DNA使PARP1发生酶反应，使组蛋白生成产物PAR(聚腺苷酸核糖)，然后加入抗PAR(anti-PAR)的抗体，检测96孔板上所包被的组蛋白上的产物PAR的强度，就可以反映出PARP酶的活性。
具体方法如下：
1.将酶反应底物组蛋白用无钾离子的PBS(10mM磷酸钠缓冲液，150mM NaCl，pH 7.2-7.4)包被96孔酶标板，置37℃摇床过夜；弃去孔中液体。用120μL/孔的T-PBS(含0.1％Tween-20的PBS)洗板5次，于37℃烘箱中干燥。
2.加入50μL酶反应缓冲液(Tris.HCl，pH 8.0)，含有NAD+(2.5μM)，生物素NAD+(2.5μM)，激活DNA(100ng/孔)，PARP酶(具体见表4)，以及一定稀释浓度的(终浓度为0.3nM-10μM)抑制剂，每个浓度设置2个重复，室温反应1h(TNKSs反应温度为30℃)。设置空白、阳性、阴性对照。
3.用PBS洗板三遍，加入50过氧化物酶标记的亲和素(Strep-HRP)，室温孵育30分钟。
4.加入100μL的显色液，用微孔板酶标仪BioTek SynergyTM 2读荧光(Luminescence)数值。按照以下公式计算化合物对酶的抑制程度：抑制率(％)＝(L对照孔-L给药孔)/L对照孔×100％，并据此按Logit法计算达到50％抑制率时的化合物浓度，即IC50值。实验重复三次，计算平均值和标准差。
化合物5b针对PARP家族6种最主要的同工酶体外分子水平抑制结果如表3：
表3：化合物5b对PARP家族酶抑制作用结果。
从表3可以看出，与阳性对照AZD2281相比，本发明化合物5b对除了PARP1/2以外的亚型抑制活性较弱，对PARP1/2与家族其他同工酶的抑制活性相差至少400倍，说明化合物5b对PARP1/2具有高选择性，是PARP1/2的高选择性抑制剂，5b对其他亚型的选择性优于阳性对照AZD2281。
表4.ELISA反应的酶和底物的浓度
本发明对优选化合物5b进行了初步的药代动力学实验，其方法和结果如下：
1.给药方案
健康SD大鼠(由上海西普尔-必凯实验动物有限公司(Shanghai Sippr-BKLab.Animal Co.Ltd)提供，实验动物生产许可证号：SCXK(沪))，雄性，体重200-220g，随机分组，分别灌胃。化合物以生理盐水配制。
试验前禁食12h，自由饮水。给药后2h统一进食。
采血时间点及样品处理：灌胃给药，给药后分别在0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，5.0，7.0，9.0，24h经大鼠眼球后静脉丛取静脉血0.3mL，置肝素化试管中，11000rpm离心5min，分离血浆，于-20℃冰箱中冷冻。
2.实验结果
灌胃给予10mg/kg化合物5b后，大鼠体内血浆浓度达峰时间Tmax为3.5±2.4h，达峰浓度Cmax为92.5±33.2ng/mL，血浆浓度-时间曲线下面积AUC0-t为452±103ng·h/mL，消除半衰期t1/2为1.75±0.94h，平均驻留时间MRT为3.94±1.13小时。大鼠灌胃给予10mg/kg化合物5b后的绝对生物利用度为58.9％。
表5：大鼠灌胃给予10mg/kg化合物5b后的药动学参数。
3.结果分析
初步的药代动力学实验表明化合物5b在体内清除速度适中，生物利用度高，大鼠灌胃给予5b 10mg/kg后的绝对生物利用度为58.9％，在体内吸收、分布、代谢表现良好，而II期临床试验化合物AZD2281的大鼠口服生物利用度仅为11.1％。

Claims (8)

1.如通式Ⅰ所示的2-芳基-苯并呋喃-7-甲酰胺化合物或其药理或生理上可接受的盐，
其中，
R1和R2各自独立地为氢、C1-C4的直链或支链烷基、C3-C4的环烷基或者含有氧或氮的饱和五元或六元杂环基；
或者R1和R2与N形成含有至少一个杂原子的未取代或取代的饱和的五元或六元杂环基，其中，所述杂原子为O、N和S，所述取代基为在N上的甲基；
R3为氢原子；
R4为氢原子或氟原子；
X为CH、CF或N；
Y为CH、CF或N。
2.如通式Ⅰ所示的2-芳基-苯并呋喃-7-甲酰胺化合物或其药理或生理上可接受的盐，
其中，
R1为氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、哌啶-4-基或(R)四氢呋喃-3-基；
R2为氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、哌啶-4-基或(R)四氢呋喃-3-基；
或者R1和R2与N形成未取代或取代的吗啉基、哌嗪基、高哌嗪基、硫代吗啉基、哌啶基或四氢吡咯基，其中，所述取代基为在N上的甲基；
R3为氢原子；
R4为氟原子；
X为CH、CF或N；
Y为CH、CF或N。
3.根据权利要求2所述的化合物或其药理或生理上可接受的盐，其中，
R1为氢或甲基；
R2为甲基、异丙基、环丙基、哌啶-4-基或(R)四氢呋喃-3-基；
或者R1和R2与N形成未取代或取代的吗啉基、哌嗪基、高哌嗪基、硫代吗啉基、哌啶基或四氢吡咯基，其中，所述取代基为在N上的甲基；
R3为氢原子；
R4为氟原子；
X为CH、CF或N；
Y为CH、CF或N。
4.根据权利要求3所述的化合物或其药理或生理上可接受的盐，其中，所述化合物分别为如下所示化合物：
5.根据权利要求1-4之一所述的化合物或其药理或生理上可接受的盐，其中所述药理或生理上可接受的盐为盐酸盐。
6.根据权利要求1-4之一所述化合物的制备方法，该方法的合成路线如方案1所示：
a)使5-位取代的水杨酸1发生酯化反应生成化合物2；
b)使化合物2发生碘代反应生成化合物3；
c)使化合物3与化合物取代芳香炔8先发生Sonogashira反应再关环生成化合物4；
d)使化合物4发生卤代反应生成化合物6；
e)使化合物4或6发生氨解反应分别生成化合物5或I；
其中所涉及化合物取代芳香炔8的结构式如下：
其中，R1、R2、R3、R4、X和Y的定义分别如权利要求1-4中任一项所述。
7.权利要求1-5之一所述化合物或其药理或生理上可接受的盐在制备与PARP相关疾病药物上的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其中，所述与PARP相关疾病药物为抗肿瘤、抗炎药物。
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