CN103222963A - 生长抑素冻干粉针剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生长抑素冻干粉针剂。具体地说，本发明涉及一种冻干粉针剂，其中包含生长抑素和甘露醇，其中包含的物料以每0.75重量份的生长抑素计，甘露醇的量为5～200重量份。本发明还涉及制备本发明冻干粉针剂的方法。本发明冻干粉针剂具有良好的特点。

Description

生长抑素冻干粉针剂

技术领域

本发明属医药技术领域，涉及一种冻干粉针剂，特别是涉及一种包含生长抑素的冻干粉针剂，以及其在制备用于预防和治疗严重急性食道静脉曲张出血、严重急性胃或十二指肠溃疡出血、急性糜烂性胃炎或出血性胃炎、胰腺外科术后并发症、胆或肠瘘、糖尿病酮症酸中毒等疾病的药物中的应用。本发明的冻干粉针剂具有期望的良好性质。

背景技术

生长抑素(somatostatin)是一种存在于胃黏膜、胰岛、胃肠道神经、垂体后叶和中枢神经系统中的肽激素，其可抑制胃分泌和蠕动，以及在下丘脑/垂体中抑制促生长素的释放。

生长抑素为十四肽，其氨基酸顺序、分子式、分子量如下：

生长抑素是由D细胞分泌的一种环状多肽类激素，主要分布在胃肠道及中枢神经系统，其中胃肠道占70%，主要作用是抑制胃肠道粘膜的增殖、分泌和吸收，抑制胃泌素、胰泌素、胰高血糖素和生长激素的释放，称之为内分泌激素的总开关。Itztu等用免疫组化法发现大肠癌粘膜中存在D细胞，认为大肠粘膜中D细胞对其它激素的分泌可能有局部调节作用，如抑制G细胞中胃泌素mRNA的转录，从而抑制胃泌素的合成及释放。

生长抑素可抑制胃和胰液的分泌、刺激粘液分泌、降低门静脉压力、松弛胆道口括约肌(Oddi括约肌)、刺激单核巨噬细胞系统而减轻内毒素血症、抑制血小板活化因子的释放、直接或间接调节细胞因子链产生细胞保护作用等，可用于消化道出血、食管静脉曲张破裂出血、急性胰腺炎及胰腺术后并发症、胰、胆和肠瘘的治疗。由于生长抑素具有十分广泛的生物学作用，作为一种治疗药物其临床前景十分广阔。

生长抑素可抑制胃泌素和胃酸以及胃蛋白酶的分泌，从而治疗上消化道出血，可以明显减少内脏器官的血流量，而又不引起体循环动脉血压的显著变化，因而在治疗食道静脉曲张出血方面有显著的临床价值。

生长抑素还可以减少胰腺的内分泌和外分泌，用以预防和治疗胰腺外科手术后并发症。

生长抑素作为一种具有多种生理功能的多肽类激素，人们已经成功地将其开发成人用药品，其适应症包括：1．严重急性食道静脉曲张出血；2．严重急性胃或十二指肠溃疡出血，或并发急性糜烂性胃炎或出血性胃炎；3．胰腺外科术后并发症的预防和治疗；4．胰、胆和肠瘘的辅助治疗；5．糖尿病酮症酸中毒的辅助治疗。

另外，Itztu等用免疫组化法发现大肠癌粘膜中存在D细胞，认为可能与肿瘤的发生与发展有关。生长抑素抗肿瘤作用的机理是：生长抑素与癌细胞膜上特异性的生长抑素受体结合，产生直接的抗增殖效应，包括磷酸酪氨酸磷酸酶的激活，抑制cAMP及基因转录，抑制胃泌素、蛙皮素、表皮生长因子等的合成、释放及作用而具有间接的抗增殖作用，还能抑制与肿瘤有关的血管形成。已经有多篇文献报道用生长抑素治疗肝癌和神经内分泌肿瘤如胰岛肿瘤等。

综上所述，生长抑素有非常广泛的应用前景。

CN 100336557C(中国专利号ZL200510102990.0，双鹭)公开了一种生长抑素的水溶液制剂、其制备方法及其在制备用于预防和治疗严重急性食道静脉曲张出血、急性胃或十二指肠溃疡出血、急性糜烂性胃炎或出血性胃炎、胰腺外科术后并发症等疾病的药物中的应用。该制剂由生长抑素、药用辅料和水组成。其中生长抑素的规格可以是0.1-1000mg/支，单位制剂体积可以是0.1-500ml。辅料可以选用但不仅限于甘露醇或者聚乙二醇等碳水化合物、各种环糊精、甘氨酸等20种人体氨基酸、低分子右旋糖酐、泊洛沙姆、磷酸盐或者醋酸盐等缓冲盐类等等。该制剂的制备方法包括配液、除菌、分装、压塞和包装等步骤。该水溶液制剂具有稳定性好、制备方便的特点，能很好保持生长抑素的结构和活性，在制备用于预防和治疗严重急性食道静脉曲张出血、严重急性胃或十二指肠溃疡出血、急性糜烂性胃炎或出血性胃炎、胰腺外科术后并发症、胆或肠瘘、糖尿病酮症酸中毒等疾病的药物中应用前景广泛。

CN1415378A(中国专利申请号02138477.0，南京长澳)公开了一种生长抑素冻干粉针及其制备工艺。生长抑素冻干粉针由下列组分制备而成：生长抑素:250mg或3000mg、赋形剂:5000-20000mg、pH调节剂:0-100ml、注射用水至:600ml。其制备工艺包括下述步骤:(1)将赋形剂置于灭菌过的烧杯中,加入注射用水，搅拌并溶解后，加入0.1-0.3%针用活性炭，20-60℃下搅拌20-80分钟；(2)将生长抑素加入用经灭菌的0.6μm滤膜脱炭中,充分搅拌使溶解，以pH调节剂调节溶液pH值至4.0～6.0，加注射用水至600ml刻度，以0.22μm滤膜过滤除菌；(3)按每瓶0.6ml的装量分装于玻璃管制瓶中，送入冷冻干燥机冻干，加盖，贴标签即得。据信该发明处方及生产工艺简单，便于操作，适合大规模生产，明显改善成型外观。

CN1559396A(中国专利申请号200410008108.1，宁夏沙赛)公开了一种注射用生长抑素制剂及其制备工艺，该技术采用超滤技术制取注射用生长抑素制剂，可避免现有技术中采用活性炭吸附后将活性炭微粒引入制剂中而造成对人体的伤害，提高制剂纯度，同时可保证制剂中有效成分的稳定性、成品的溶解性，易成型。据信该发明的处方及生产工艺十分简单，便于生产操作和控制，适合大规模生产，并通过试验证实所生产的各批样品质量均符合质量标准，批间稳定，质量可靠。

然而，现有市售的生长抑素特别是其粉针剂，通常有效期为24个月，但规定在冷处(2-10℃)保存，中国药典2010年版二部收载的生长抑素原料药和粉针剂，也要求在冷处保存。可见这种制剂的稳定性是存在不足的。因此本领域需要有新的方法提供一种具有良好性质例如稳定性的生长抑素制剂特别是粉针剂。

发明内容

本发明目的在于提供一种具有某些/某种良好性质的包含生长抑素的冻干粉针剂，期待其具有一种或多种良好的药学性能。本发明人令人意外地发现，具有特定配方的包含生长抑素的冻干粉针剂具有令人期望的良好特征。本发明因此而得以完成。

因此，本发明第一方面提供了一种冻干粉针剂，其中包含生长抑素。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还包含甘露醇。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还包含麦芽糖醇。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含的物料以每0.75重量份的生长抑素计，甘露醇的量为5～200重量份、例如10-150重量份、例如10-100重量份。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含的物料以每0.75重量份的生长抑素计，麦芽糖醇的量为1～20重量份、例如1-15重量份、例如1-10重量份。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含生长抑素、甘露醇和麦芽糖醇。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中包含生长抑素、甘露醇和麦芽糖醇，以每0.75重量份的生长抑素计，甘露醇的量为5～200重量份、例如10-150重量份、例如10-100重量份，麦芽糖醇的量为1～20重量份、例如1-15重量份、例如1-10重量份。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还包含酸碱调节剂。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂的用量调节该冻干粉针剂在冷冻干燥前的溶液pH值在4.5～6.5范围内的量，例如是pH值在5.0～6.0范围内的量。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

众所周知，经低温冷冻-真空干燥而获得的冷冻干燥粉针剂(通常简称为冻干粉针剂或冻干粉针)，其是首先将各物料用溶剂溶解(通常而言是用水溶解)，配制成一溶液，然后使该溶液进行低温冷冻，再进行抽真空、升华、干燥而获得的一种基本无水(通常而言水含量低于5%，特别是通常低于3%)的粉末状物或块状物。因此，该固体冻干物的酸碱度通常通过配制过程调节溶液的pH值来控制；或者可以通过处方调整以使获得的固体冻干物在规定的溶解/稀释程度下控制该溶解/稀释液的pH值来控制(此称为控制固体冻干物的酸碱度)；后一方式通常更为普遍使用，例如药典中所载的诸多冻干粉针剂均以此方式控制制品的酸碱度，而这种方式控制产品的酸碱度通常可以不具体规定酸碱调节剂的处方量，而仅规定终产品的酸碱度即可。同样适用于本发明的是，根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中所述任选的酸碱调节剂的量是，使所述冻干粉针剂用注射用水溶解成含生长抑素0.5mg/ml浓度的溶液时该溶液的pH值在4.5～6.5范围内的量，例如是pH值在5.0～6.0范围内的量。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其基本上是按包括如下的步骤制备的：

(a)称取处方量的生长抑素和任选的甘露醇、任选的麦芽糖醇，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至每1ml溶液中含有的生长抑素量为0.1～20mg(特别是0.1～10mg)，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸碱调节剂调节至4.5～6.5，例如至5.0～6.0；

(c)将药液除菌过滤，灌装于玻璃瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，密封，即得。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量为3～20%(w/v)，优选3～15%(w/v)，再更优选3～10%。

根据本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂，其中还任选地包含其它药学可接受的赋形剂。所述赋形剂例如但不限于甘露醇、乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、甘氨酸、右旋糖苷、氯化钠、及其组合。

进一步地，本发明第二方面提供了制备本发明第一方面任一实施方案所述的冻干粉针剂的方法，其基本上包括以下步骤：

(a)称取处方量的生长抑素和任选的甘露醇、任选的麦芽糖醇，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至每1ml溶液中含有的生长抑素量为0.1～20mg(特别是0.1～10mg)，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸碱调节剂调节至4.5～6.5，例如至5.0～6.0；

(c)将药液除菌过滤，灌装于玻璃瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，密封，即得。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量是为3～20%(w/v)，优选3～15%(w/v)，再更优选3～10%。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(a)所述适量注射用水是注射用水处方量的约70～90%。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.02%～0.5%(w/v)，优选0.05%～0.2%。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(b)中所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。这些水溶液的浓度是本领域技术人员公知的，例如1～10%，例如2%～5%。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(d)中除去水份后所得冷冻干燥物料中水份含量低于10%，优选低于8%，优选低于5%，更优选低于3%。

在本发明上述制备方法的步骤中，虽然其描述的具体步骤在某些细节上或者语言描述上与下文具体实施方式部分的制备例中所描述的步骤有所区别，然而，本领域技术人员根据本发明全文的详细公开完全可以概括出以上所述方法步骤。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

根据本发明的冻干粉针剂，其中的活性成分是具有以下氨基酸序列的化合物：

其化学结构示意如下：

其在本发明中可称为式I化合物。

根据本发明，术语“赋形剂”亦可称为辅料、填充剂等。

本文所用的“药学可接受的赋形剂”指的是可用于配制药物的赋形剂，其对生物体基本上没有不良影响，并且通常是生物体可耐受的。

在本发明中，优选的本发明冻干粉针剂在用水制成每1ml中含式I化合物0.5mg的溶液后，再根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法即pH值测定法测定，其具有4.5～6.5，例如5.0～6.0的pH值。

虽然本领域技术人员理解，本发明的赋形剂可以是任一种可用于冷冻干燥的赋形剂，特别是甘露醇、乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、甘氨酸、右旋糖苷、氯化钠、及其组合。然而在本发明中，出人意料地发现特别优选的赋形剂是甘露醇和麦芽糖醇二者的组合。

冷冻干燥粉针剂的制备过程是本领域技术人员公知的制药工艺，例如如下冻干曲线A和冻干曲线B所示的两种示意性的冻干曲线：

在下文制备冷冻干燥粉针剂中的具体实例中，如未另外特别说明，所用的冻干曲线是冻干曲线A。

冷冻干燥粉针剂中的水含量是一般在8%以下，优选低于5%，更优选低于3%。水分控制可通过适当调整冷冻干燥程序来控制。该冷冻干燥粉针剂中的水分含量可根据许多已知方法来测定，例如干燥失重法。

在本发明中，为了在必要时调节药液的pH值，可以向组合物中加入适当的pH调节剂。尽管本发明人仅用不具缓冲能力的强酸或强碱溶液例如氢氧化钠水溶液和盐酸水溶液进行调节，然而，本领域技术人员理解，如果用这种不具缓冲能力的pH调节剂处理能满足体系的pH要求，则具有缓冲能力的pH调节剂将更加能够实现本发明目的，因此这些缓冲剂不但能够调节pH值，而且能稳定pH值。因此本发明所列任一pH调节剂或其组合均包括在本发明精神和范围内。

在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中，固形物含量是为3～20%(w/v)，优选3～15%(w/v)，再更优选3～10%。由于冻干粉针剂通常是在管状西林瓶中进行冷冻干燥得到，本领域技术人员理解这种产品在获得成品甚至在供医生使用之前，通常均呈现一个圆饼状，尽管该圆饼的体积理论上讲会比原有水溶液的体积少(稍有缩小)，然而通常这种缩小通常不会缩小到原水溶液体积50%，通常会在原水溶液体积的80-120%之间，更通常在原水溶液体积的90-100%之间，而从终产品西林瓶内可观察到原水溶液液面痕迹(主体饼状物因冻干缩小后残留在瓶壁上的液面痕迹，即便西林瓶中的冻干品因各种原因例如碰撞等原因而呈粉末状，通常仍然可以保留原有的液面痕迹)，据此痕迹亦可估计出该冷冻干燥组合物在冷冻干燥之前的水溶液体积。因此，虽然本发明提供的是一种基本无水的冷冻干燥粉针剂，然而根据该粉针剂仍然可以大致估计出其在配制时，至少在冷冻干燥开始之前的药液体积，根据该估计出的体积以及西林瓶中的干燥终产物的重量，亦可计算到在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中的固形物的含量。因此，根据本发明第一方面的冻干粉针剂，其在配制时的药液的固形物含量是为3～20%(w/v)，优选3～15%(w/v)，再更优选3～10%。

术语“固形物含量”是指固体物质(例如本发明活性化合物及所用的全部赋形剂，重量/克)加入到溶剂(例如注射用水)中，溶解后得到一个溶液，所述固体物质的重量除以终溶液体积的百分数(重量/体积百分数，例如g/100ml)。

在本发明中，符号%，根据其所使用的语境，可以具有本领域技术人员容易理解的含义。例如在提及固形物含量时，该符号表示重量/体积的百分数(w/v，例如g/100ml)；又例如在提及冷冻干燥粉针剂中的“水含量”时，例如水含量在8%以下，此时该符号%表示重量/重量的百分数(w/w，g/100g)。一般而言，在固体分散在液体中时，%表示重量/体积百分数；在固体分散在固体中或者液体分散在固体中(例如粉针的含水量)时，%表示重量/重量百分数。在其它情况下，如无另外说明，符号%表示重量/重量百分数。

在配制本发明的药液时，本领域技术人员公知，可使用例如约0.45um的微孔滤膜进行粗滤过滤，在将药液灌装到西林瓶中之前，可以使用例如约0.22um的微孔滤膜进行精滤过滤以除菌，必要时可以过滤多次。

根据本发明的冻干粉针剂，其为冷冻干燥粉针剂。在一个实施方案中，该冷冻干燥粉针剂为单剂量制剂(例如西林瓶装的粉针剂)，每一单位剂量中活性化合物的量(其在本发明中如未另外说明，均折算成以生长抑素计)可以例如但不限于约0.25mg、约0.5mg、约0.75mg、约1mg、约2mg、约3mg、约5mg、约10mg。

根据本发明的冻干粉针剂，其用注射用水复溶，通常而言复溶时间在30秒内，优选在20秒内，更优选在15秒内。

根据本发明的冻干粉针剂，其用水制成每1ml中含活性化合物0.5mg的溶液并根据中国药典2005年版二部附录VI H项下的方法测定，该溶液的pH值为4.5～6.5。在一个实施方案中，pH值为5.0～6.0。

本发明提供的冻干粉针剂可以在在2～8℃以下干燥处保存至少24个月，可以满足一般的冷冻干燥粉针剂的贮藏要求。特别地，本发明提供的冻干粉针剂可以在室温干燥处保存至少24个月，可以满足一般的冷冻干燥粉针剂的贮藏要求。

本发明所得冻干粉针剂特别是冷冻干燥粉针剂通常为白色或类白色的冻干块状物或其碎块或其粉末，无臭、味苦，易溶于水。

生长抑素是是人工合成的环状十四氨基酸肽，其与天然的生长抑素在化学结构和作用方面完全相同。静脉注射本品可抑制生长激素、甲状腺刺激激素、胰岛素和胰高血糖素的分泌，并抑制胃酸的分泌。它还影响胃肠道的吸收、动力、内脏血流和营养功能。生理方面，生长抑素主要存在于下丘脑和胃肠道。生长抑素可抑制胃泌素和胃酸及胃蛋白酶的分泌，从而治疗消化道出血。而且，生长抑素可以明显减少内脏器官的血流量，而又不引起体循环动脉血压的显著变化，因而在治疗食道静脉曲张出血方面有临床价值。生长抑素可减少胰腺的内分泌和外分泌，从而可有效预防和治疗胰腺手术后并发症。生长抑素可以抑制胰高血糖素的分泌，因此可有效治疗糖尿病酮症酸中毒。生长抑素可抑制上消化道的内分泌和外分泌功能，减少内脏的血流循环。生长抑素的药理作用表现在如下方面：对胃肠道血流的影响：抑制五肽促胃酸激素引起的胃酸分泌；抑制胃蛋白酶的分泌；抑制胃泌激素的分泌；生长抑素在250μg/h剂量下大约能减少内脏血流循环28%。预防胰腺术后的并发症和抑制胰腺及小肠上部术后漏管的严重分泌：抑制胰腺的外分泌；生长抑素通过抑制胰高血糖索和胰岛素的分泌，从而影响血糖水平。产生胰高血糖素的A细胞对生长抑素的敏感性是产生胰岛素的B细胞的4倍，因此胰岛素分泌受到抑制后，血糖会上升。对于肝硬化患者，用药后肝清除功能有所下降，生长抑素对肝循环也有副作用。生长抑素促进ADH的分泌，导致尿量减少，尿液的重量摩尔渗透压浓度增加。临床上将生长抑素用于下列适应症：严重急性食道静脉曲张出血；严重急性胃或十二指肠溃疡出血，或并发急性糜烂性胃炎或出血性胃炎；胰、胆和肠瘘的辅助治疗；胰腺术后并发症的预防和治疗；糖尿病酮症酸中毒的辅助治疗。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。以下实施例进一步说明本发明，而不是限制本发明。在下面的例子中，使用的pH调节剂(在本发明中亦即酸碱调节剂)，如无另外说明，是1M氢氧化钠溶液或者1M盐酸溶液，其用量是使制备粉针剂时，使冷冻干燥前所配制的溶液的pH值调节至某一规定值或范围。下文制备步骤为了举例的目的，并基于各举例的可比较性而作了某些具体描述，本领域技术人员根据已有知识完全可以从中概括得到本发明制备冻干粉针剂的方法。在下面配液制备各种组合物中，如未另外说明，每批的总配液量为1000ml，分装到玻璃瓶中时每瓶含生长抑素为0.75mg；在列明配方时，均以每瓶含生长抑素以0.75mg的量阐明。下面试验中使用的麦芽糖醇是市售的，其符合欧洲药典标准，即欧洲药典5.0版收载的“MALTITOL”品种。

测定方法：

各种样品(包括本发明粉针剂)的含量测定可照以下方法进行(在本文可称为【HPLC法A】)：

【HPLC法A】

【含量测定】照高效液相色谱法(附录V D)测定；

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸溶液(取磷酸11ml，加水800ml，用三乙胺调pH值至2.3，用水稀释至1000ml)-乙腈(75：25)为流动相；流速为每分钟1.5ml；检测波长为215nm；理论板数按生长抑素峰计算应不低于1500；

测定法：取本品5瓶，分别加水适量，使内容物溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，5瓶全量混合，摇匀，作为供试品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取生长抑素对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得；原料药也可类似地测定。

各种样品(包括本发明粉针剂)的有关物质可照以下方法进行(在本文可称为【HPLC法B】)：

【HPLC法B】

照高效液相色谱法(附录V D)测定；

取本品内容物，加水溶解并制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取2ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸溶液(取磷酸11ml，加水800ml，用三乙胺调pH值至2.3，用水稀释至1000ml)为流动相A；乙腈为流动相B；流速为每分钟1.5ml；检测波长为215nm；按下表进行梯度洗脱；理论板数按生长抑素峰计算应不低于1500；

时间(min)	流动相A	流动相B
			0	79％	21％
18	60％	40％
			20	60％	40％
21	79％	21％
			26	79％	21％

取对照溶液50μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰高约为满量程的20％；精密量取供试品溶液和对照溶液各50μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。一般而言(例如中国药典2010年版二部同品种项下规定)，供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，除溶剂峰外，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的一半(1.0％)；各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(2.0％)。

化堂稳定性考察方法：

本方法可以用于考察本发明各种产品模拟长期贮藏条件下的稳定性特别是化学稳定性。具体方法为：将制得的冷冻干燥粉针剂在30℃下放置6个月，测定试样中生长抑素的含量[30℃6月，可称为高温平均含量，mg/瓶，测定10瓶的平均值]相对于该试样在5℃下处理相应时间时生长抑素的含量[5℃6月，可称为低温平均含量，mg/瓶，测定10瓶的平均值]的百分数，可简称为残余含量(％)，计算式如下：

其中，高温平均含量(mg/瓶)和低温平均含量(mg/瓶)是样品经【HPLC法A】测定得到的每瓶中生长抑素的含量(10瓶的均值)。

此外，还照【HPLC法B】测定试样中的有关物质，即测定它们的最大单一杂质含量、总杂质含量。对于每一试样，分别计算最大单一杂质含量增加百分数(％，可简称为“最大单杂增量”)、以及总杂质含量增加百分数(％，可简称为“总杂增量”)，二者计算式如下：

在计算最大单杂增量时，以高温显示的最大单杂为准计，尽管该最大单杂在低温样品中显示并不是最大杂质。

制备例1、制备包含生长抑素的粉针剂

配方：

生长抑素	0.75mg，
		甘露醇	50mg,
麦芽糖醇	5mg，
		pH调节剂	至pH5.5，
注射用水	适量，加至1ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和辅料(pH调节剂除外)，置于不锈钢桶中，加入处方量约80%的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.1%(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值(该规定值是冷冻干燥所得干粉用注射用水稀释成含活性成分0.5mg/ml的溶液所测定的pH值的值，下同)，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装药液1ml灌装于4ml西林瓶中(在以下各例子中，引用本制备例方法时，如未另外说明，灌装药液量为包含0.75mg活性化合物的药液体积；在其它例子中如果灌装药液体积明显增加或者明显减小，可以根据经验适当调整西林瓶的体积)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线A进行冷冻干燥，至水分低于3%；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。在本发明中制备例1的样品可简称为Ex1；其它制备例的样品亦可类似表示。

补充制备例1：参考以上制备例1的方法，不同的是将其中的麦芽糖醇的量进行调整，分别为0mg、0.1mg、0.25mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2.5mg、5mg、7.5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、50mg，得到的粉针剂编号分别为Ex100、Ex101、Ex102、Ex103、Ex104、Ex105、Ex106、Ex107、Ex108、Ex109、Ex110、Ex111、Ex112、Ex113、Ex114。对于固形物含量大于10%的情况，适量增加水使固形物的含量为10%。

补充制备例2：参考以上制备例1的方法，不同的是将其中的甘露醇的量进行调整，分别为0mg、5mg、10mg、25mg、75mg、100mg、150mg、200mg，得到的粉针剂编号分别为Ex120、Ex121、Ex122、Ex123、Ex124、Ex125、Ex126、Ex127。对于固形物含量大于10%的情况，适量增加水使固形物的含量为10%。

补充制备例3：参考以上制备例1的方法，不同的是将其中的甘露醇替换为乳糖25mg、乳糖75mg、右旋糖苷250mg、右旋糖苷75mg、甘氨酸25mg、甘氨酸75mg、氯化钠25mg、氯化钠75mg，得到的粉针剂编号分别为Ex131、Ex132、Ex133、Ex134、Ex135、Ex136、Ex137、Ex138。

补充制备例4：参考以上制备例1的方法，不同的是将其中的麦芽糖醇替换为乳糖25mg、乳糖75mg、右旋糖苷250mg、右旋糖苷75mg、甘氨酸25mg、甘氨酸75mg、氯化钠25mg、氯化钠75mg，得到的粉针剂编号分别为Ex141、Ex142、Ex143、Ex144、Ex145、Ex146、Ex147、Ex148。

现有技术制品1：照CN1415378A(中国专利申请号02138477.0，南京长澳)说明书2-3页记载的具体实施方式一处方和制法来制备(每瓶分装的活性成分按生长抑素计为0.25mg)，得到的粉针剂编号CN378A1。

现有技术制品2：照CN1415378A(中国专利申请号02138477.0，南京长澳)说明书3-4页记载的具体实施方式二处方和制法来制备(每瓶分装的活性成分按生长抑素计为3mg)，得到的粉针剂编号CN378A2。

现有技术制品3：照CN1559396A(中国专利申请号200410008108.1，宁夏沙赛)说明书3-4页记载的实施例1处方和制法来制备(每瓶分装的活性成分按生长抑素计为0.25mg)，得到的粉针剂编号CN396A1。

现有技术制品4：照CN1559396A(中国专利申请号200410008108.1，宁夏沙赛)说明书4-5页记载的实施例3处方和制法来制备(每瓶分装的活性成分按生长抑素计为0.25mg)，得到的粉针剂编号CN396A3。

现有技术制品5：照CN100336557C(中国专利号ZL200510102990.0，双鹭)说明书10页记载的实施例1处方和制法来制备，得到水溶液型的注射剂，编号CN557C1。

稳定性考察方法：照本文化学稳定性考察方法测定以上制备例1以及其补充制备例、现有技术制品制备的试样在30℃下放置6个月后的化学稳定性，特别是测定它们的残余含量(%)、最大单杂增量(%)和总杂增量(%)。

溶解性测定方法：分别取制备例1以及其补充制备例、现有技术制品制备的各试样粉针剂，揭开瓶盖塑料顶，用注射器从瓶塞穿刺注入注射用水(用量约为相应样品冷冻干燥前溶液体积的3倍)，用秒表记录复溶时间，每批样品测试5次，取平均值。

结果：

Ex100、Ex101、Ex102、Ex103、Ex104各试样的残余含量(%)均在88～92%范围内，最大单杂增量(%)均在188～353%范围内，总杂增量(%)均在248～387%范围内，显示麦芽糖醇含量较低的粉针稳定性不理想，活性成分含量降低明显，而最大单一杂质以及总杂质含量增加明显。例如Ex102残余含量(%)90%、最大单杂增量(%)236%，总杂增量(%)350%。

Ex1、Ex105、Ex106、Ex107、Ex108、Ex109、Ex110、Ex111、Ex112、Ex113、Ex114各试样的残余含量(%)均在97～101%范围内，最大单杂增量(%)均在28～47%范围内，总杂增量(%)均在35～57%范围内，显示添加麦芽糖醇适量的粉针稳定性非常理想。Ex1、Ex105、Ex106、Ex107、Ex108、Ex109的复溶时间(2ml生理盐水)均在10秒以下，显示优良的溶解效果；但Ex110、Ex111、Ex112、Ex113、Ex114显示溶解较慢，复溶时间(2ml生理盐水)均在25～50秒范围内，表明麦芽糖醇量过多时对复溶性能有不利影响。例如Ex107残余含量(%)99%、最大单杂增量(%)36%，总杂增量(%)46%。

Ex120、Ex121两个不用或少用甘露醇的试样，残余含量(%)均在88～91%范围内，最大单杂增量(%)均在174～275%范围内，总杂增量(%)均在266～297%范围内，显示甘露醇含量较低的粉针稳定性不理想。Ex122、Ex123、Ex124、Ex125、Ex126、Ex127残余含量(%)均在97～99%范围内，最大单杂增量(%)均在34～39%范围内，总杂增量(%)均在46～53%范围内，显示甘露醇含量较高的粉针具有良好稳定性。Ex122、Ex123、Ex124、Ex125的复溶时间(2ml生理盐水)均在11秒以下，但Ex126、Ex127的复溶时间(2ml生理盐水)均在35～45秒范围内。例如Ex125残余含量(%)98%、最大单杂增量(%)34%，总杂增量(%)50%。

Ex131、Ex132、Ex133、Ex134、Ex135、Ex136、Ex137、Ex138未用甘露醇而改用其它常规冻干粉针辅料，残余含量(%)均在87～90%范围内，最大单杂增量(%)均在193～270%范围内，总杂增量(%)均在285～375%范围内，显示改用其它辅料的粉针稳定性不理想。例如Ex135残余含量(%)88%、最大单杂增量(%)264%，总杂增量(%)320%。

Ex141、Ex142、Ex143、Ex144、Ex145、Ex146、Ex147、Ex148未用麦芽糖醇而改用其它常规冻干粉针辅料，残余含量(%)均在83～85%范围内，最大单杂增量(%)均在313～470%范围内，总杂增量(%)均在453～575%范围内，显示改用其它辅料的粉针稳定性不理想。例如Ex141残余含量(%)84%、最大单杂增量(%)344%，总杂增量(%)490%。

CN378A1、CN378A2、CN396A1、CN396A3、CN557C1残余含量(%)均在72～88%范围内，最大单杂增量(%)均在305～460%范围内，总杂增量(%)均在430～550%范围内，显示未使用本发明辅料组合的粉针稳定性不理想。例如CN378A1残余含量(%)81%、最大单杂增量(%)357%，总杂增量(%)510%。

制备例2、本发明粉针剂

处方和制法参照制备例1，不同的仅是将其中的甘露醇用量改为10mg(并添加10mg乳糖)、100mg，得到二个批号的粉针，编号分别记为Ex21、Ex22。

处方和制法参照制备例1，不同的仅是将其中的麦芽糖醇用量改为1mg(并添加10mg右旋糖苷)、10mg，得到二个批号的粉针，编号分别记为Ex23、Ex24。

处方和制法参照制备例1，不同的仅是将其中的pH调节为5.0和6.0，得到二个批号的粉针，编号分别记为Ex25、Ex26。

处方和制法参照制备例1，不同的仅是将其中注射用水的量调整使得步骤(2)所得滤液的固形物含量为3%、10%，得到二个批号的粉针，编号分别记为Ex27、Ex28。

处方和制法参照制备例1，不同的仅是将其中的生长抑用量改为0.25mg、3mg，得到二个批号的粉针，编号分别记为Ex29、Ex20。

测定Ex20至Ex29这些试样的在30℃下放置6个月后的化学稳定性，结果残余含量均在98～100%范围内，最大单杂增量(%)均在30～55%范围内，总杂增量(%)均在45～65%范围内。全部试样的复溶时间均在4～12秒的范围内，外观均呈结实、完整的圆饼状，无裂块、喷瓶等异常情况。

长期稳定性试验：

取本发明粉针试样：Ex1、Ex105、Ex106、Ex107、Ex108、Ex109、Ex122、Ex123、Ex124、Ex125、Ex20、Ex21、Ex22、Ex23、Ex24、Ex25、Ex26、Ex27、Ex28、Ex29。使这些样品在10±2℃条件下放置3年，参考上文化学稳定性考察方法，不同的是其中的“低温”结果以0月的结果代替。结果显示，本发明上述粉针试样在0月和36月时均符合2010年版中国药典二部收载的“注射用生长抑素”规定的质量标准。例如，这些样品在36月后，酸度均在5.0～6.0范围内，最大的单一杂质均小于0.35%(标准规定应小于1.0%)，总杂质均小于0.63%(标准规定应小于2.0%)，表明这些试样在长期放置3年后仍然具有良好的稳定性。例如Ex1放置3年后残余含量(%，与0月相比)为98.5%，最大的单一杂质为0.21%，总杂质为0.35%，其它指标均符合药典标准中的规定。

Claims (10)

1.一种冻干粉针剂，其中包含生长抑素和甘露醇。

2.根据权利要求1的冻干粉针剂，其中还包含麦芽糖醇。

3.根据权利要求1至2的冻干粉针剂，其中包含的物料以每0.75重量份的生长抑素计，甘露醇的量为5～200重量份、例如10-150重量份、例如10-100重量份。

4.根据权利要求1至3的冻干粉针剂，其中包含的物料以每0.75重量份的生长抑素计，麦芽糖醇的量为1～20重量份、例如1-15重量份、例如1-10重量份。

5.根据权利要求1至4的冻干粉针剂，其中包含生长抑素、甘露醇和麦芽糖醇。

6.根据权利要求1至5的冻干粉针剂，其中包含生长抑素、甘露醇和麦芽糖醇，以每0.75重量份的生长抑素计，甘露醇的量为5～200重量份、例如10-150重量份、例如10-100重量份，麦芽糖醇的量为1～20重量份、例如1-15重量份、例如1-10重量份。

7.根据权利要求1至6的冻干粉针剂，其中还包含酸碱调节剂；或者，所述的酸碱调节剂的用量调节该冻干粉针剂在冷冻干燥前的溶液pH值在4.5～6.5范围内的量，例如是pH值在5.0～6.0范围内的量；或者，所述冻干粉针剂用注射用水溶解成含生长抑素0.5mg/ml浓度的溶液时该溶液的pH值在4.5～6.5范围内的量，例如是pH值在5.0～6.0范围内的量。

8.根据权利要求1至7的冻干粉针剂，其基本上是按包括如下的步骤制备的：

(a)称取处方量的生长抑素和任选的甘露醇、任选的麦芽糖醇，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至每1ml溶液中含有的生长抑素量为0.1～20mg，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸碱调节剂调节至4.5～6.5，例如至5.0～6.0；

(c)将药液除菌过滤，灌装于玻璃瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，密封，即得。

9.根据权利要求1至8的冻干粉针剂，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量为3～20%(w/v)，优选3～15%(w/v)，再更优选3～10%。

10.制备权利要求1至9冻干粉针剂的方法，其基本上包括以下步骤：

(a)称取处方量的生长抑素和任选的甘露醇、任选的麦芽糖醇，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至每1ml溶液中含有的生长抑素量为0.1～20mg(特别是0.1～10mg)，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸碱调节剂调节至4.5～6.5，例如至5.0～6.0；

(c)将药液除菌过滤，灌装于玻璃瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，密封，即得。