CN103190449B - 一种枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂，采用如下方法制备：（1）将枯草芽孢杆菌接种于液体培养基中进行活化培养至对数生长期，制得活化菌体；（2）将活化菌体接种于液体发酵培养基中，发酵培养，制得微生物发酵液；（3）将微生物发酵液经喷雾干燥，制得微生物消毒剂。本发明所述的枯草芽孢杆菌微生物空气消毒剂首次做为喷雾剂应用于畜禽养殖场中，利用其生长优势及代谢产物，对致病菌产生拮抗、抑制或杀灭作用，从而达到消毒净化养殖环境的目的。

Description

一种枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂

技术领域

本发明涉及一种枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂，属于微生物技术领域。

背景技术

在全球范围内，由病原菌导致的畜禽病害是造成养殖业损失的主要原因之一。而且现代化规模化饲养的畜禽多在封闭的圈舍内饲养，其排泄物、分泌物所含的病原菌造成畜禽舍空气质量的下降，诱发畜禽群发性疾病的频发，半个世纪以来，人们主要采用化学消毒剂对这类病害进行防治，并取得了显著的效果。然而很多化学消毒剂都具有高毒、高残留、难降解等特性，随着这些化学消毒剂长期不合理的使用，环境污染日趋严重，生态平衡遭到破坏；人及牲畜的健康也受到了极大的威胁。此外，由于耐药病菌及害虫的不断出现，化学消毒剂的防治效率逐渐下降。使用量和使用频率的不断增加，使化学消毒剂的残留量逐渐递增，对人畜安全构成了更大的危害。

近年来，随着各种禽畜类流感疫情的出现，逐渐出现了禽畜类流感病毒变异后向人类传播的趋势。通过对禽畜圈舍、排泄物等进行消毒，虽然可以减少传播的途径，但一类最容易传播的途径--空气传播，目前仍然没有教好的灭菌预防途径。

目前，枯草芽孢杆菌被广泛用于饲料添加剂的生产中，主要通过饲喂使其在畜禽体内萌发繁殖，枯草芽孢杆菌可以迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值，间接抑制其它致病菌生长，同时其可以产生一些消化酶对畜禽产生益生作用，达到增重及提高饲料转化率的目的。

此外，枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。但由于这些活性物质含量低，不便提取使用，因此，目前未有枯草芽孢杆菌单独作为微生物空气消毒剂的报道。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂。该消毒剂含有的枯草芽孢杆菌活菌数高，且抗逆性强，在畜禽场使用过程中效果稳定。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂，采用如下方法制备：

（1）将枯草芽孢杆菌接种于液体培养基中进行活化培养至对数生长期，制得活化菌体；

（2）将步骤（1）制得的活化菌体按体积百分比3～5％接种于液体发酵培养基中，在28～38℃下，发酵培养24～48小时，制得微生物发酵液；

上述微生物发酵液的pH值为5.0～8.5，菌体总量达到20亿/克以上。

（3）将步骤（2）制得的微生物发酵液在进风温度120～170℃，出风温度70～100℃条件下，喷雾干燥，制得含菌量≥200亿/克的微生物消毒剂。

根据本发明优选的，所述步骤（1）中的枯草芽孢杆菌为购自中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC），保藏编号为1.1413的枯草芽孢杆菌。

根据本发明优选的，所述步骤（1）中的液体培养基组分如下，均为重量百分比：

酵母膏0.5～1%，蛋白胨0.7～1%，氯化钠0.5～1.2%，pH7.0～7.2。

根据本发明优选的，所述步骤（1）中的活化培养条件为：将斜面保存的菌种接种于液体培养基中，35～38℃，180转/分振荡培养12～18小时，即为活化菌体；

根据本发明优选的，所述步骤（2）中液体发酵培养基组分如下，均为重量百分比：

氯化钠0.5～1.2%，蛋白胨0.7～1%，酵母膏0.5～1%，葡萄糖1～1.5%，碳酸铵0.3～0.5%，水余量，pH7.0～7.2。

上述枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂在畜禽场空气消毒中的应用。

上述应用，步骤如下：

将微生物空气消毒剂按质量比1:（200～600）的比例与水混合均匀，按照每平方米5～10毫升喷施量，喷施于温度为28～33℃的畜禽养殖棚内，经消毒8～12小时，即可。

有益效果

1.本发明所述的畜禽场用微生物空气消毒剂采用枯草芽孢杆菌，该菌为需氧菌，对营养要求低，生长繁殖快，喷雾到环境后可快速生长，并代谢产生多种抗菌物质及各种酶类等，从而达到将致病菌杀灭及抑制的作用。并且其具有对人畜安全，环境污染少，防治对象针对性强等特点，并且无副作用，效果好，因而可以减少使用目前国内外一直采用的化学消毒剂。

2.本发明通过将枯草芽孢杆菌喷雾干燥后，制成芽孢数量200亿/克以上的干粉制剂，从而确保微生物活力稳定；解决了枯草芽孢杆菌菌体易在运输、贮存及使用中失去活性，效果降低的问题，并且使用方便，消毒效果理想。

3.本发明所述的枯草芽孢杆菌微生物空气消毒剂首次做为喷雾剂应用于畜禽养殖场中，利用其生长优势及代谢产物，对致病菌产生拮抗、抑制或杀灭作用，从而达到消毒净化养殖环境的目的，可以显著预防空气传播类禽畜病菌的传播扩散。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步阐述，但本发明所保护范围不限于此。

实施例1中的枯草芽孢杆菌为购自中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC），保藏编号为1.1413的枯草芽孢杆菌。

实施例1

一种枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂，采用如下方法制备：

（1）将枯草芽孢杆菌接种于液体培养基中进行活化培养，35～38℃，180转/分振荡培养12～18小时，制得活化菌体；

所述液体培养基组分如下，均为质量百分比：酵母膏0.5%，蛋白胨1%，氯化钠1%，pH7.0。

（2）将步骤（1）制得的活化菌体按体积百分比5%接种于液体发酵培养基中，在28下，发酵培养48小时，制得微生物发酵液；上述微生物发酵液的pH值为7.8，菌体总量达到21亿/克。

所述液体发酵培养基组分如下，均为重量百分比：

氯化钠0.5%，蛋白胨1%，酵母膏0.5%，葡萄糖1%，碳酸铵0.3%，水余量，pH7.0～7.2，水余量，pH自然。

（3）将步骤（2）制得的微生物发酵液在进风温度170℃，出风温度80℃条件下，喷雾干燥，制得含菌量为200亿/克的微生物消毒剂。

实施例2

一种枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂，采用如下方法制备：

（1）将枯草芽孢杆菌接种于液体培养基中进行活化培养，35～38℃，180转/分振荡培养12～18小时，制得活化菌体；

所述液体培养基组分如下，均为质量百分比：酵母膏0.5%，蛋白胨1%，氯化钠1%，pH7.0。

（2）将步骤（1）制得的活化菌体按体积百分比5%接种于液体发酵培养基中，在28下，发酵培养48小时，制得微生物发酵液；上述微生物发酵液的pH值为7.8，菌体总量达到23亿/克。

所述液体发酵培养基组分如下，均为重量百分比：

氯化钠0.7%，蛋白胨0.8%，酵母膏1%，葡萄糖1.2%，碳酸铵0.5%，水余量，pH自然。

（3）将步骤（2）制得的微生物发酵液在进风温度160℃，出风温度65℃条件下，喷雾干燥，制得含菌量为200亿/克的微生物消毒剂。

实施例3

取实施例1和实施例2制得的微生物空气消毒剂，按质量比1:500的比例与水混合均匀，按照每平方米5毫升的喷施量，喷施于温度为28～32的℃畜禽养殖棚内（进鸡前消毒）。

在雏鸡进棚前，先在棚内不同位置（四个角落及中间位置）分别放置不同菌的5个平皿，5分钟后盖好，取出，然后对棚内进行喷施消毒剂，待8小时后再以同样方式放入不同平皿，5分钟后取出，放入37℃恒温培养箱培养24小时，分别计数消毒前与消毒后菌数。计算抑菌率，结果如下：鸡金黄色葡萄球菌51%、鸡大肠杆菌45%、鸡白痢沙门氏菌63%、禽多杀性巴氏杆菌57%。

实施例4

取实施例1和实施例2制得的微生物空气消毒剂，按质量比1:200的比例与水混合均匀，按照每平方米5毫升的喷施量，喷施于温度为25～30℃猪舍内。

在断奶仔猪进猪舍前，随机选取25个猪舍，先在每个猪舍内不同位置（四个角落及中间位置）分别放置不同菌的5个平皿，5分钟后盖好，取出，然后对猪舍内进行喷施消毒剂，待12小时后再以同样方式放入不同平皿，5分钟后取出，放入37℃恒温培养箱培养24小时，分别计数消毒前与消毒后菌数。计算抑菌率，结果如下：胸膜肺炎放线杆菌48%、猪多杀性巴杆菌62%、猪大肠杆菌55%、猪链球菌47%、猪副嗜血杆菌49%。

Claims (2)

1.枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂在畜禽场空气消毒中的应用，其特征在于，步骤如下：

将微生物空气消毒剂按质量比1:（200～600）的比例与水混合均匀，按照每平方米5～10毫升喷施量，喷施于温度为28～33℃的畜禽养殖棚内，经消毒8～12小时，即可；

所述的枯草芽孢杆菌畜禽场用微生物空气消毒剂，采用如下方法制备：

（1）将枯草芽孢杆菌接种于液体培养基中进行活化培养至对数生长期，制得活化菌体；

    （2）将步骤（1）制得的活化菌体按体积百分比3～5％接种于液体发酵培养基中，在28～38℃下，发酵培养24～48小时，制得微生物发酵液；

    （3）将步骤（2）制得的微生物发酵液在进风温度120～170℃，出风温度70～100℃条件下，喷雾干燥，制得含菌量≥200亿/克的微生物消毒剂；

所述步骤（1）中的枯草芽孢杆菌为购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为1.1413的枯草芽孢杆菌。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤（1）中的液体培养基组分如下，均为重量百分比：

酵母膏0.5～1%，蛋白胨0.7～1%，氯化钠0.5～1.2%，pH7.0～7.2。

3. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤（1）中的活化培养条件为：将斜面保存的菌种接种于液体培养基中，35～38℃，180转/分振荡培养12～18小时，即为活化菌体。

4. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤（2）中液体发酵培养基组分如下，均为重量百分比：

氯化钠0.5～1.2%，蛋白胨0.7～1%，酵母膏0.5～1%，葡萄糖1～1.5%，碳酸铵0.3～0.5%，水余量，pH7.0～7.2。