CN103159656B - 一种骨化三醇的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种先将骨化三醇粗品溶解后，再加入甲酸甲酯析晶制备骨化三醇的方法。该方法克服了现有纯化方法所制备的骨化三醇精制品含有大量结晶溶剂化物，难干燥、易降解的问题，且本方法操作简单，条件温和，能够很好的适用于工业化生产。

Description

一种骨化三醇的制备方法

技术领域

本发明属于药物化学合成领域，具体涉及一种骨化三醇的制备方法。

背景技术

骨化三醇，又称钙三醇、二羟胆钙化醇，化学名： 9,10-开环胆甾-5Z,7E,10(19)-三烯-1α,3β,25-三醇。结构式为：

骨化三醇是人体内维生素D₃的活性形式，能促进肠道对钙的吸收，并且调节骨质的钙化，主要用于治疗绝经后和老年性骨质疏松、慢性肾功能衰竭病人的肾性骨营养不良症、术后甲状腺功能低下、特发性或假性甲状腺功能低下、维生素D依赖性佝偻病等。骨化三醇由瑞士罗氏公司开发，1978年8月通过FDA批准，以商品名“Rocaltrol” 在美国上市。1999年，我国批准进口。由于骨化三醇合成工艺难度大，门槛高，2003年～2006年期间，有多家国内企业申报注册骨化三醇原料和制剂，均未获批准，目前国内企业仅有青岛正大海尔制药有限公司一家生产的骨化三醇胶丸获准上市。

目前报道的骨化三醇的合成方法较多。JP75-23827公开了一种以胆甾-1，5,7-三烯-3β-醇为起始原料，经过与三唑啉加成、开环等步骤最后得到骨化三醇的方法；Herbert E. Paaren等人在Direct C( 1) Hydroxylation of Vitamin D3 and Related Compounds（J. Org. Chem. 1980,45. 3253-3258）公开了一种以维生素D₃为起始原料合成骨化三醇的方法；陈阳生、翟翠云等（《中国新药杂志》2005年第14卷第1期，70）公开了以维生素D2为起始原料，与液态二氧化硫、硅烷化试剂依次反应，得到的中间体经过氧化、开环、加成、还原、光转化、脱保护等共计8步反应得到骨化三醇的合成路线。陈阳生、翟翠云等还公开了用乙酸乙酯-正戊烷重结晶得到较纯的骨化三醇的方法。但本发明申请人在试验中发现该方法虽然能够得到纯度较高的骨化三醇，但由于乙酸乙酯与骨化三醇结合形成了结晶溶剂化物，导致结晶、过滤后得到的10g骨化三醇精制品的湿品被惰性气体鼓风干燥或真空干燥20小时以上，仍含有结晶溶剂化物，其溶剂残留量达4.1%，大大超过了《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》对药品中乙酸乙酯的残留量不得超过0.5%的质量要求。另外由于骨化三醇性质不稳定，为了除去残留的溶剂，需要长时间的真空干燥或惰性气体鼓风干燥，由于骨化三醇产品在空气中极易降解，故对真空干燥时的操作和真空度要求极高，需要极其谨慎的操作，否则产品在长时间的干燥过程中很容易出现降解现象，因此利用该法纯化骨化三醇，很难制备出质量合格的骨化三醇。

孙伟燕在中国专利申请号CN1221736A中公开了用氯仿、正己烷和甲醇以层析法纯化骨化三醇的方法。该方法用到了毒性很大的氯仿和正己烷，这两种溶剂都是明确限制使用的高毒性溶剂，尤其是氯仿，《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》要求其残留限度不能超过0.006%，因此该法不适用于药品的生产。

青岛正大海尔制药有限公司在中国专利申请号CN101607931A中公开了联合应用中高压液相色谱法分离纯化骨化三醇的方法，但该方法存在对设备要求高，操作复杂，洗脱体积大等问题，不适合大规模工业化生产，同时该方法也不能解决中高压液相色谱法分离纯化后的骨化三醇产品由于仍然形成结晶溶剂化物，难以纯化的问题。

目前未见有任何文献公开了能在骨化三醇的精制过程中不形成结晶溶剂化物或能完全去除结晶溶剂的纯化方法。骨化三醇对光，热，空气敏感，在较高温度下易降解，极容易与溶剂形成难以干燥去除的结晶溶剂。现有文献公开报道的制备、分离纯化骨化三醇的方法（比如重结晶法、色谱法、层析法等），所得骨化三醇精制品均含有结晶溶剂化物，难以制备出质量合格的骨化三醇产品。

发明内容

本发明需要解决的技术问题之一是解决骨化三醇分离纯化过程中易出现溶剂化物、难干燥、易降解的问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种能够制备出高纯度的不含结晶溶剂的骨化三醇的纯化方法，且该方法操作简单，条件温和，能够很好的适用于工业化生产。

为了实现上述目的，本发明提供了一种利用甲酸甲酯获得骨化三醇精品的纯化方法，使用该方法得到的骨化三醇产品不含结晶溶剂化物，易于干燥，且操作简单方便，对设备无特殊要求，非常适合制药行业工业化生产。

本发明一方面提供了一种骨化三醇的制备方法，该步骤包含先将骨化三醇产品溶解后，再加入甲酸甲酯析晶，其中甲酸甲酯的体积为溶解骨化三醇的溶剂的体积的4倍及以上，甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比优选为4:1～40:1，更优选为10:1～30:1。

所述的溶解骨化三醇产品的溶剂为醇类，优选为甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇，更优选为甲醇或乙醇，最优选为乙醇。所述的溶解骨化三醇产品的溶剂还可以为含醇溶液，优选为含甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇的溶液，所述的含醇溶液中还可以含有醚、酯或酮溶剂之一或两种以上，且含醇溶液中醇类溶剂的体积百分比为10%及以上。所述的醚、酯或酮优选为沸点低于100℃的溶剂；其中所述醚优选为乙醚或甲基叔丁基醚，所述酯优选为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，所述酮优选为丙酮。

本发明还提供了更具体的制备骨化三醇的步骤，如下：

将骨化三醇产品溶解于醇类或醇类与醚、酯、酮等溶剂的混合溶剂中，其中醇类占除甲酸甲酯外的混合溶剂的体积的10%及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯的体积为溶解骨化三醇的溶剂的体积的4倍及以上，甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比优选为4:1～40:1，更优选为10:1～30:1。

    本发明提供了当上述醇类优选为甲醇、乙醇、异丙醇或上述醇类与醚、酯、酮等溶剂的混合溶剂时，制备骨化三醇的具体步骤，如下：

将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇、异丙醇或上述醇类与醚、酯、酮等溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点小于100℃，醇类占除甲酸甲酯外的混合溶剂的体积的10%及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯的体积为溶解骨化三醇的溶剂的体积的4倍及以上，甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比优选为4:1～40:1，更优选为10:1～30:1。

本发明还提供了当上述醇类为更优选的甲醇、乙醇或上述醇类与醚、酯、酮等溶剂的混合溶剂时，制备骨化三醇的具体步骤，如下：

在10℃～50℃的温度下，将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇或上述醇类与醚、酯、酮等溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点小于100℃，醇类占除甲酸甲酯外的混合溶剂的体积的10%及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；甲酸甲酯与除甲酸甲酯外的溶剂的体积比为4:1～40:1，优选为10:1～30:1。

本发明进一步提供了当用甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂来溶解骨化三醇粗品，制备骨化三醇精制品的具体步骤，如下：

在10℃～50℃的温度下，将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂中，其中甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂的体积：骨化三醇粗品的质量=0.3:1～2：1，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与除甲酸甲酯外的溶剂的体积比为4:1～40:1，优选为10:1～30:1。

本发明还提供了当用甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂来溶解骨化三醇粗品，制备骨化三醇精制品的具体步骤，如下：

在20℃～40℃的温度下，将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂中，其中甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂的体积：骨化三醇粗品的质量=0.8：1～1.2：1，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与除甲酸甲酯外的溶剂的体积比为10:1～30:1。

本申请发明人先按照陈阳生等提供工艺，以维生素D2为起始原料，与液态二氧化硫、硅烷化试剂依次反应，得到的中间体再经过氧化、开环、加成、还原、光转化、脱保护的合成路线，制备得到骨化三醇粗品，纯度为95%~98%，为去除其中反式骨化三醇杂质，尝试用丙酮、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、乙醚等多种常用溶剂来重结晶骨化三醇，但是发现甲基叔丁基醚和乙醚对骨化三醇的溶解度随温度变化差异不大，不适合作重结晶溶剂，而用乙酸乙酯重结晶，不能有效的去除反式骨化三醇杂质，以纯度为95%的骨化三醇粗品为例，需要多次反复精制2-3次以上，才能得到纯度大于98%的骨化三醇精制品。而丙酮对去除反式骨化三醇的效果较好，仅需重结晶1-2次，即可得到纯度大于99%的骨化三醇精制品，但是利用丙酮重结晶得到的骨化三醇精制品在室温下真空干燥20小时后检测骨化三醇产品，其丙酮残留量为4.5%，远远超过《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》中对原料药中丙酮残留量不得超过0.5%的要求。利用乙酸乙酯重结晶得到的骨化三醇精制品在被真空干燥20小时后，检测其产品中乙酸乙酯溶剂的残留量为4.2%，也远远超过《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》对原料药中乙酸乙酯残留量不得超过0.5%的要求。且发明人发现由于骨化三醇产品在空气中易降解，故对真空干燥时的操作和真空度要求极高，需要极其谨慎的操作，否则产品在长时间的干燥过程中很容易出现降解现象。

本申请发明人又按照现有技术，以乙酸乙酯和正戊烷作为重结晶溶剂纯化骨化三醇粗品，过滤后得到的骨化三醇精制品在25℃，惰性气体鼓风干燥或真空干燥20小时以上，检测发现其产品中乙酸乙酯的残留量为4.1%，仍然远远超过《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》对原料药中乙酸乙酯残留量的标准，且部分产品在长时间干燥过程中已降解。本申请发明人将利用上述方法获得的干燥后骨化三醇产品进行进一步的检测分析，发现其热重分析图显示其产品中乙酸乙酯、丙酮与骨化三醇产品已分别形成了结晶溶剂化物。

为了解决纯化后的骨化三醇产品与溶剂形成结晶溶剂化物，极难以干燥去除的问题，本申请发明人进行了大量的试验摸索，发现大部分溶剂均极易与骨化三醇生成结晶溶剂化物，且该溶剂化物很难去除。本申请发明人尝试将骨化三醇产品先溶解于对骨化三醇溶解性极好的甲醇或乙醇中，再加入二氯甲烷、正己烷、环己烷、正戊烷、正庚烷、甲基叔丁基醚、异丙醚等不良溶剂后，析出固体很少，收率低于5%，且在干燥过程中仍形成结晶溶剂化物，导致难以干燥。

本发明申请人又尝试以甲醇和丙酮、乙酸乙酯或乙腈的混合溶剂来溶解骨化三醇产品，再加入大量正己烷、正戊烷或正庚烷等不良溶剂进行分散，但不仅重结晶所得到的骨化三醇收率低，低于10%，且在干燥过程中也形成结晶溶剂化物，极难干燥除去。

本发明申请人通过大量的试验研究，最后惊异地发现，骨化三醇虽然不溶于甲酸甲酯，但先将骨化三醇产品溶解后，再加入大量甲酸甲酯析晶，其中甲酸甲酯的体积为溶解骨化三醇的溶剂的体积的4倍及以上时，可以得到不含结晶溶剂的骨化三醇精制品。当甲酸甲酯的加入量小于4倍体积的溶解骨化三醇粗品所用的溶剂的体积量时，骨化三醇精制品的收率将低于20%。当加入溶解骨化三醇产品所用的溶剂的体积的10倍以上的甲酸甲酯，析晶，收率可达65%-85%。充分考虑到物料成本，甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比优选为4:1～40:1，更优选为10:1～30:1。

但是充分的考虑到物料成本的问题，甲酸甲酯的加入量优选为溶解骨化三醇的溶剂量的体积的4～40倍，更优选为溶解骨化三醇的溶剂量的体积的10～30倍。

本发明申请人发现，溶解骨化三醇的溶剂，可以是醇溶剂，如甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇等，先以醇溶剂溶解骨化三醇粗品，再加入上述溶解骨化三醇产品所用的醇类的体积的4倍以上的甲酸甲酯，析晶，不仅能制备得到纯度高达99%以上，收率50%以上的骨化三醇精制品，同时不会有结晶溶剂化物产生，易于干燥并获得骨化三醇精品，该精品中溶剂残留量符合《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》的要求，且能大大缩短干燥过程，有效地避免或降低骨化三醇产品降解的风险。

本申请发明人还发现由于醇类，尤其是甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇等对骨化三醇有极好的溶解度，当醇类与醚、酯、酮等溶剂形成混合溶剂，特别是醇类占除甲酸甲酯外的混合溶剂的体积的10%及以上时，即能完全溶解骨化三醇产品，再加入溶解骨化三醇溶液体积的4倍以上的甲酸甲酯，析晶，也能够获得纯度高达99%以上，收率在50%以上的骨化三醇，且干燥后检测其溶剂残留量，完全符合《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》对原料药中溶剂残留量的要求。如果选择沸点低于100℃的醚、酯或酮与醇类形成混合溶剂溶解骨化三醇，尤其是优选醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮时，且醇类占除甲酸甲酯外的混合溶剂的体积的10%及以上时，干燥时间将更加短。

本申请发明人发现由于甲醇、乙醇、异丙醇较其他的醇类对骨化三醇的溶解性更好，溶解每克骨化三醇仅需异丙醇1ml-2ml或0.5ml-1ml的甲醇或乙醇。醇的用量对整个析晶体系有着较大影响。醇类用量越大，析晶所需要加入的甲酸甲酯体积就越大，收率就越低，且因为析晶体系体积太大，不利于操作和成本控制。因此优选的醇类为甲醇、乙醇或异丙醇。由于甲醇和乙醇较其他醇类还具有相对较低的沸点，保证了后续的干燥更容易进行，因此更优选的醇类为甲醇或乙醇。由于乙醇的毒性最小，因此最优选的醇类为乙醇。

本发明申请人通过实验还获知，以醇类做溶剂时，在10℃～50℃的温度下，骨化三醇溶解极迅速，故优选的醇类溶解骨化三醇的温度为10℃～50℃，更优选的温度为20℃～40℃。

附图说明

图1: 以对比例1重结晶骨化三醇并真空干燥20小时后的热重分析图。

图2：以对比例2重结晶骨化三醇，真空干燥前的热重分析图。

图3：以对比例3重结晶骨化三醇，真空干燥4小时后的热重分析图。

图4：以对比例4重结晶骨化三醇，真空干燥5小时后的热重分析图。

对比实施例：

对比例1

将骨化三醇粗品（HPLC纯度：98.5%）约12.0g，在25℃下，用120ml丙酮搅拌至溶解，降温至-10℃~-20℃，析晶20小时，过滤，得到的晶体真空干燥20小时，得骨化三醇9.7g，收率81.4%，纯度(HPLC)：99.3% ，丙酮残留量（GC）：4.5% 。

对比例2

将骨化三醇粗品（HPLC纯度：98.5%）约12.0g，在25℃下，用120ml乙酸乙酯搅拌至溶解，加入正戊烷600ml，10℃下搅拌析晶4小时，得到的晶体真空干燥20小时，得骨化三醇9.5g，收率79.2%，纯度(HPLC)：99.2%，乙酸乙酯残留量(GC)：4.1%；

对比例3（本发明方法）

将骨化三醇粗品（HPLC纯度：98.5%）约12.0g，在10℃下，用12ml乙醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯360ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥4小时，得骨化三醇9.1g，收率76.0%，纯度(HPLC)：99.3%  乙醇残留量(GC)：0.1%; 甲酸甲酯残留量(GC):0.1%

对比例4（本发明方法）

将骨化三醇粗品（HPLC纯度：98.5%）约12.0g，在10℃下，用12ml甲醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯360ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇9.4g，收率78.0%，纯度(HPLC)：99.3%，甲醇残留量：(GC)：0.04% ，甲酸甲酯残留量：0.1%

由上述对比实施例和图1-4可知：

由对比例1和图1可见，由于丙酮的沸点较低，仅为56℃，且常温下极易挥发，而以丙酮重结晶后得到的骨化三醇产品在被真空干燥了20小时后，由热重分析图可见，当温度升高到94℃-98℃之间时，产品仍出现4.6%的失重，以气相色谱（GC） 检测发现，产品中丙酮含量为4.5%。

由对比例2和图2可见，以乙酸乙酯重结晶后得到的骨化三醇湿品做热重分析发现，乙酸乙酯的沸点为77℃，而当温度升高到53.87℃附近时，产品出现3.59%的失重，而当骨化三醇产品被加热到93.12℃，仍出现4.219%的失重。而当将乙酸乙酯重结晶后所得的骨化三醇产品常温真空干燥20小时后，乙酸乙酯的残留量以气相色谱仪检测为4.1%。

由对比例3和图3可见，以乙醇和甲酸甲酯重结晶后得到的骨化三醇产品在被真空干燥4小时后，再做热重分析图时发现，当温度升高到200℃，仍无明显失重现象产生。在产品被真空干燥4小时后，以气相色谱检测，乙醇的溶剂残留量为0.1%，甲酸甲酯的残留量为0.1%。

由对比例4和图4可见，以甲醇和甲酸甲酯重结晶后得到的骨化三醇产品在被真空干燥5小时后，再做热重分析图时发现，当温度升高到200℃，仍无明显失重现象产生。在产品被真空干燥5小时后，以气相色谱检测，甲醇的溶剂残留量为0.04%，甲酸甲酯的残留量为0.1%。

由上述4个对比例可见，乙酸乙酯、丙酮等溶剂与骨化三醇产品形成了极难脱去的结晶溶剂化物，导致长时间真空干燥后，骨化三醇产品的溶剂残留量远远超过三类溶剂的溶剂残留限量0.5%，而以甲醇和甲酸甲酯或乙醇和甲酸甲酯重结晶骨化三醇后，未形成难以干燥和脱去的结晶溶剂化物，在真空干燥4-5小时后，溶剂残留量均远远低于三类溶剂的溶剂残留限量。

具体实施方式：

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。但这些实施例仅限于说明本发明而不是对本发明的保护范围的进一步限定。

实施例1

在10℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用12ml乙醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯360ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥4小时，得骨化三醇9.1g，收率76.0%，纯度(HPLC)：99.3%，乙醇残留量（GC）：0.1%， 甲酸甲酯残留量：0.1%

实施例2

在50℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.0%）约12.0g，用3.6ml乙醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯14.4ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇8.5 g，收率71.0%，纯度(HPLC)：99.4%，乙醇残留量（GC）：0.08%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.06%

实施例3

在20℃下，将骨化三醇产（纯度：98.2%）品约12.0g，用24ml乙醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯960ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇7.4g，收率62.0%，纯度(HPLC)：99.6%，乙醇残留量（GC）： 0.12%，甲酸甲酯残留量（GC）：0.15%

实施例4

在40℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用6ml乙醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯60ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇7.8g，收率65.0%，纯度(HPLC)：99.5%，乙醇残留量(GC)：0.08%, 甲酸甲酯残留量(GC)：0.09%

实施例5

在30℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用14.4ml乙醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯288ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇9.0 g，收率75.2%，纯度(HPLC)：99.4%，乙醇残留量(GC)：0.1%, 甲酸甲酯残留量：0.13%

实施例6

在10℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用12ml甲醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯360ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇9.4g，收率78.0%，纯度(HPLC)：99.3%，甲醇残留量(GC)：0.04%，甲酸甲酯残留量(GC)：0.1%

实施例7

在50℃下，将骨化三醇产品（纯度：99.3%）约12.0g，用3.6ml甲醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯14.4ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇8.3g，收率69.0%，纯度(HPLC)：99.5%，甲醇残留量（GC）：0.06% 甲酸甲酯残留量：0.12%

实施例8

在20℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.9%）约12.0g，用24ml甲醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯960ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇7.8g，收率65.0%，纯度(HPLC)：99.4%，甲醇残留量（GC）： 0.1%,甲酸甲酯残留量(GC)：0.2%

实施例9

在40℃下，将骨化三醇产品（纯度：99.1%）约12.0g，用6ml甲醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯60ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇8.9g，收率74.0%，纯度(HPLC)：99.3%，甲醇残留量（GC）：0.07% ，甲酸甲酯残留量（GC）：0.1%

实施例10

将骨化三醇产品（纯度：98.0%）约12.0g，在30℃下，用14.4ml甲醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯288ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇9.0 g，收率75.2%，纯度(HPLC)：99.2%，甲醇残留量（GC）：0.14%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.18%

实施例11

在10℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用5ml甲醇和7ml乙醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯360ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇9.4g，收率78.0%，纯度(HPLC)：99.3%，乙醇残留量（GC）：0.06%甲醇残留量（GC）： 0.03%，甲酸甲酯残留量（GC）：015%

实施例12

在50℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.0%）约12.0g，用1.6ml甲醇和2ml乙醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯14.4ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇8.4 g，收率70.0%，纯度(HPLC)：99.4%，乙醇残留量（GC）：0.02%，甲醇残留量（GC）：0.04%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.08%

实施例13

在20℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.0%）约12.0g，用13ml甲醇和11ml乙醇搅拌至溶解，再缓慢加入甲酸甲酯960ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇7.6g，收率63.0%，纯度(HPLC)：99.6%，乙醇残留量（GC）：0.1%，甲醇残留量（GC）：0.04%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.06%

实施例14

在40℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.2%）约12.0g，用3ml甲醇和3ml乙醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯60ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇9.0g，收率75.0%，纯度(HPLC)：99.2%，乙醇残留量（GC）： 0.02%，甲醇残留量（GC）：0.04%，甲酸甲酯残留量（GC）：0.11%

实施例15

在30℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.2%）约12.0g，用7.4ml甲醇和7ml乙醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯288ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥4小时，得骨化三醇9 .1g，收率75.8%，纯度(HPLC)：99.3%，乙醇残留量（GC）：0.05%， 甲醇残留量（GC）：0.08%，甲酸甲酯残留量（GC）：0.18%

实施例16

在50℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.1%）约12.0g，用12ml异丙醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯48.8ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇7.4g，收率62.0%，纯度(HPLC)：99.4%，异丙醇残留量（GC）：0.18%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.12%

实施例17

在40℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.7%）约12.0g，用20ml异丙醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯48.8ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇8g，收率67.0%，纯度(HPLC)：99.3%，异丙醇残留量（GC）：0.14%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.16%

实施例18

在30℃下，将骨化三醇产品（纯度：99.0%）约12.0g，用6.5ml异丙醇和58.5ml乙醚搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯2600ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇7.8g，收率65.0%，纯度(HPLC)：99.2%，异丙醇残留量（GC）：0.12%，乙醚残留量：0.43%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.21%

实施例19

在40℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用6ml 异丙醇和1ml乙醚搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯28ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥4小时，得骨化三醇7.3g，收率61.0%，纯度(HPLC)：99.4%，异丙醇残留量：0.12%，乙醚残留量（GC）：0.12%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.18%

实施例20

在25℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.4%）约12.0g，用10ml 异丙醇和3ml乙酸乙酯搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯130ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇8.9g，收率74.0%，纯度(HPLC)：99.4%，异丙醇残留量（GC）：0.2%， 乙酸乙酯残留量（GC）：0.04%，甲酸甲酯残留量（GC）：0.14%

实施例21

在30℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.7%）约12.0g，用12ml 异丙醇和2ml丁酮搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯420ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇8.9g，收率74.0%，纯度(HPLC)：99.4%，异丙醇残留量（GC）： 0.12%，丁酮残留量（GC）：0.14%，甲酸甲酯残留量（GC）：0.23%

实施例22

在40℃下，将骨化三醇产品（纯度：99.2%）约12.0g，用3.7ml甲醇和33.3ml丙酮搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯148ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥4小时，得骨化三醇9.0g，收率75.0%，纯度(HPLC)：99.3%，甲醇残留量（GC）： 0.04%，丙酮残留量：0.31%，甲酸甲酯残留量：0.23%

实施例23

在40℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用3.7ml乙醇和33.3ml甲基叔丁基醚搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯148ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇8.8g，收率73.0%，纯度(HPLC)：99.1%，乙醇残留量（GC）： 0.21%，甲基叔丁基醚残留量（GC）：0.38%，甲酸甲酯残留量：0.24%

实施例24

在50℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用6ml甲醇和50ml乙酸乙酯搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯560ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇7.2g，收率60.0%，纯度(HPLC)：99.5%，甲醇残留量（GC）： 0.08%，乙酸乙酯残留量（GC）：0.21%，甲酸甲酯残留量（GC）：0.14%

实施例25

在10℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.6%）约12.0g，用20ml正丙醇和200ml甲酸乙酯搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯8800ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥4小时，得骨化三醇8.3g，收率69.0%，纯度(HPLC)：99.3%，正丙醇残留量(GC)：0.3%， 甲酸乙酯残留量（GC）:0.12%，甲酸甲酯残留量（GC）：0.24%

实施例26

在20℃下，将骨化三醇产品（纯度：99.4%）约12.0g，用15ml正丙醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯60ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥5小时，得骨化三醇6.5g，收率54.0%，纯度(HPLC)：99.6%，正丙醇残留量（GC）：0.41%， 甲酸甲酯残留量,0.14%

实施例27

在50℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g， 用20ml正丁醇搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯200ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇7.1g，收率59.0%，纯度(HPLC)：99.4%，正丁醇残留量（GC）：0.14%， 甲酸甲酯残留量（GC）：0.21%

实施例28

在30℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用5.8ml甲醇和20ml乙酸甲酯 搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯774ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇9.0g，收率75.0%，纯度(HPLC)：99.2%，甲醇残留量（GC）： 0.12%，乙酸甲酯残留量（GC）：0.32%，甲酸甲酯残留量（GC）：0.22%

实施例29

在25℃下，将骨化三醇产品（纯度：98.5%）约12.0g，用6ml乙醇和54ml甲基异丁基甲酮搅拌至溶解，缓慢加入甲酸甲酯2400ml，搅拌约4小时，过滤，得到的晶体真空干燥6小时，得骨化三醇7.8g，收率65%，纯度(HPLC)：99.4%，乙醇残留量（GC）：0.13%，甲基异丁基甲酮残留量（GC）:0.38%, 甲酸甲酯残留量(GC)：0.21%。

Claims (20)

1.一种骨化三醇的制备方法，其特征在于该步骤包含先将骨化三醇产品溶解后，再加入甲酸甲酯析晶，且甲酸甲酯的体积为溶解骨化三醇的溶剂的体积的4倍及以上。

2.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于甲酸甲酯的体积与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为4:1～40:1。

3.根据权利要求2所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于甲酸甲酯的体积与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为10:1～30:1。

4.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于所述的溶解骨化三醇产品的溶剂为醇类。

5.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于所述的溶解骨化三醇产品的溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇。

6.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于所述的溶解骨化三醇产品的溶剂为甲醇或乙醇。

7.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于所述的溶解骨化三醇产品的溶剂为乙醇。

8.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于所述的溶解骨化三醇产品的溶剂为含醇溶液，所述的含醇溶液中还含有醚、酯或酮溶剂之一或两种以上，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，且含醇溶液中醇类溶剂的体积百分比为10%及以上。

9.根据权利要求8所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于所述的溶解骨化三醇产品的溶剂为含甲醇、乙醇、异丙醇的溶液，所述的含醇溶液中还含有醚、酯或酮溶剂之一或两种以上，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，且含醇溶液中醇类溶剂的体积百分比为10%及以上。

10.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

将骨化三醇产品溶解于醇类或醇类与醚、酯、酮溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，且其中醇类占溶解骨化三醇的溶剂的体积的10％及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯的体积为溶解骨化三醇的溶剂的体积的4倍及以上。

11.根据权利要求10所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

将骨化三醇产品溶解于醇类或醇类与醚、酯、酮溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，且其中醇类占溶解骨化三醇的溶剂的体积的10％及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为4:1～40:1。

12.根据权利要求10所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

将骨化三醇产品溶解于醇类或醇类与醚、酯、酮溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，且其中醇类占溶解骨化三醇的溶剂的体积的10％及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为10:1～30:1。

13.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇、异丙醇或这些醇类与醚、酯、酮溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，其中醇类占溶解骨化三醇的溶剂的体积的10％及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯的体积为溶解骨化三醇的溶剂的体积的4倍及以上。

14.根据权利要求13所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇、异丙醇或这些醇类与醚、酯、酮溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，其中醇类占溶解骨化三醇的溶剂的体积的10％及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中，甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为4:1～40:1。

15.根据权利要求13所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇、异丙醇或这些醇类与醚、酯、酮溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，其中醇类占溶解骨化三醇的溶剂的体积的10％及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中，甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为10:1～30:1。

16.根据权利要求1所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

在10℃～50℃的温度下，将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇或这些醇类与醚、酯、酮溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，其中醇类占溶解骨化三醇的溶剂的体积的10％及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为4:1～40:1。

17.根据权利要求16所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

在10℃～50℃的温度下，将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇或这些醇类与醚、酯、酮溶剂的混合溶剂中，其中醚、酯、酮的沸点低于100℃，醚为乙醚或甲基叔丁基醚，酯为乙酸乙酯、甲酸乙酯或乙酸甲酯，酮为丙酮，其中醇类占溶解骨化三醇的溶剂的体积的10％及以上，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为10:1～30:1。

18.根据权利要求16所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

在10℃～50℃的温度下，将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂中，其中甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂的体积：骨化三醇粗品的质量=0.3ml:1g～2ml：1g，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为4:1～40:1。

19.根据权利要求18所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于步骤如下：

在10℃～50℃的温度下，将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂中，其中甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂的体积：骨化三醇粗品的质量=0.3ml:1g～2ml：1g，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为10:1～30:1。

20.根据权利要求18所述的骨化三醇的制备方法，其特征在于纯化步骤如下：

在20℃～40℃的温度下，将骨化三醇产品溶解于甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂中，其中甲醇、乙醇或甲醇和乙醇的混合溶剂的体积：骨化三醇粗品的质量=0.8ml:1g～1.2ml：1g，再加入甲酸甲酯，析晶，过滤晶体，干燥；其中甲酸甲酯与溶解骨化三醇的溶剂的体积比为10:1～30:1。