CN103127200A - 青橄榄提取物在制备防治牙周炎的药品、食品或日用品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了青橄榄提取物在制备防治牙周炎的药品、食品或日用品中的应用。实验证明青橄榄提取物对诱发牙周炎的牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌和具核梭杆菌具有明显的抑菌作用，能减少上述菌的生物膜形成量，从而对牙周炎具有显著的防治作用。特别是制备成各种药物剂型或各种适于使用的食品及日用品可以方便对牙周炎进行防治。

Description

青橄榄提取物在制备防治牙周炎的药品、食品或日用品中的应用

技术领域

本发明涉及一种防治牙周炎的植物提取物，特别涉及青橄榄植物提取物在防治牙周炎的食品、药品和口腔制剂领域中的应用。

背景技术

本发明涉及的植物提取物来自我国盛产的青橄榄的植物提取物。青橄榄树Canariumalbum(Lour.)Raeusch.是我国南方部分地区种植的一种经济果树，其成熟干燥的果实为卵圆形，呈青色，又名青果、青子、白榄、青橄等，其有效活性成分为橄榄多酚类物质，有清热、利咽、生津、解毒、免疫调节、降血压、降血脂、清除自由基等功能，用于治疗咽喉肿痛、咳嗽、烦渴、鱼蟹中毒等^[1,2]，其产量巨大，营养价值丰富。青橄榄有很强的抑菌作用^[3,4]，袁剑刚^[3]等采用MTT法和培养板连续稀释法研究了橄榄对几种常见细菌、霉菌和酵母菌的抑制效应，结果表明，橄榄对食品生产、加工和贮藏中常见的腐败菌——大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、酿酒酵母、土星汉逊酵母、黑曲霉、娄地青霉、枯青霉、黑跟霉、黄曲霉等均有较为明显的抑制作用，可作为天然食品防腐剂，并初步鉴定黄酮类物质及没食子酸可能是其抑菌防腐的主要药效成分。青橄榄叶是青橄榄树的干燥叶子。其化学成分主要为三萜和酚酸类，目前对青橄榄叶抑菌活性研究较少，有论文利用白色念珠菌、铜绿假单胞杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐药白色念珠菌、酿酒酵母及金黄色葡萄球菌测定青橄榄叶总提取物及大孔树脂不同极性洗脱产物的体外抑菌活性^[5]。但至今未见青橄榄提取物抑制口腔厌氧菌的报道。

牙龈卟啉单胞菌是革兰氏阴性、厌氧和无动力的不解糖杆菌，是牙周病尤其成人牙周炎病变区最主要的优势菌，是公认的牙周炎主要病原菌[6]。因此抗厌氧菌和抑制厌氧菌生物膜形成是防治牙周炎的策略之一^[7]。

参考文献：

[1]国家药典委员会,中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社,2005:250.

[2]南京中医药大学,中药大辞典(第二版)[M].上海:上海科学技术出版社，2006,3667.

[3]杜玉虹,崔承彬,李文欣,等.方橄抗癌活性成分的研究--酚酸类细胞周期抑制剂[J].中国药物化学杂志，2003,13(6):320-323.

[4]袁剑刚,刘昕,汤展球.橄榄的抑菌效应及其药效成分的初步研究[J].食品科学，2001,22(3)：82-84

[5]臧红新，延慧君，段姚尧等.青橄榄叶提取物体外抑菌活性研究[J].武警医学院学报，2011:20（12）：935-937.

[6]毛松.牙龈卟啉单胞菌诱发牙周炎病理机制的研究[M].中国医科大学博士学位论文，2002.

[7]周学东,肖晓蓉.口腔微生物学[M].成都:四川大学出版社，2002:363-386.

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种青橄榄提取物在制备防治牙周炎的药品、食品或日用品中的应用。

本发明的技术方案概述如下：

青橄榄提取物在制备防治牙周炎的药品、食品或日用品中的应用。

所述青橄榄提取物为青橄榄的枝、叶或果实的提取物。

所述的青橄榄提取物是用下述方法制成：以1质量份数的青橄榄的枝、叶或果实为原料，用3-12质量份数的水或3-12质量份数的体积浓度为10%-99.9%的乙醇水溶液进行回流提取,提取1-4次，每次提取1-5小时，过滤,滤液减压浓缩，得糖度为20-40的浓缩物，干燥得到青橄榄提取物。

所述药物的剂型为硬胶囊剂、软胶囊剂、散剂、颗粒剂、片剂、丸剂、蜜膏剂、口服液、酒剂、喷雾剂、注射剂或茶剂。

所述食品的类别为口香糖、口含片、口胶和胶姆糖。

所述日用品的类别为牙膏、牙粉、嗽口水、口腔清新喷雾剂。

本发明的优点：

实验证明青橄榄提取物对诱发牙周炎的牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌和具核梭杆菌具有明显的抑菌作用，能减少上述菌的生物膜形成量，从而对牙周炎具有显著的防治作用。特别是制备成各种药物剂型或各种适于使用的食品及日用品可以方便对牙周炎进行防治。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

青橄榄提取物的制备步骤是：以青橄榄的枝、叶或果实为原料，用水或乙醇水溶液进行回流提取,过滤,滤液减压浓缩，得浓缩物，干燥得到青橄榄提取物。

实施例1-14青橄榄提取物的制备参数见表1。

表1

实施例15青橄榄提取物体外抑制诱发牙周炎的牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌和具核梭杆菌试验

牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis）ATCC33277、购于北京北纳创联生物技术研究院。

中间普氏菌(Prevotella intermedia)ATCC25611购于北京北纳创联生物技术研究院。

和具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)ATCC10953购于北京北纳创联生物技术研究院。

试验方法：将牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis ATCC33277）、中间普氏菌(Prevotella intermedia ATCC25611)和具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum ATCC10953)分别从-80℃冰箱中取出，常规复苏，接种于BHI琼脂培养基，37℃厌氧培养（80％N₂、10％H₂、10％CO₂）48h，挑取单菌落转种于BHI液体培养基，37℃厌氧培养48h。涂片检查为纯培养后，采用麦氏比浊仪将菌悬液浓度调至1.8×10⁸CFU·mL^-1，备用。采用二倍稀释法，将连续倍比稀释的青橄榄提取物（每孔10μL）加入含三种不同菌种的BHI液体培养基（每孔190μL）的聚乙烯96孔板。空白对照组为含有菌种的BHI液体培养基（每孔200μL），阴性对照组为无水乙醇（每孔10μL）加入含有菌种的BHI液体培养基（每孔190μL）的聚乙烯96孔板。37℃厌氧培养48h，肉眼观察。同一浓度水平重复6次。

试验结果：青橄榄各种提取物对口腔致牙周炎细菌具有显著的抑制作用，具有很好的应用开发前景。结果见表2。

表2不同青橄榄提取物体外抑菌活性结果

实施例16不同浓度的青橄榄提取物对牙龈卟啉单胞菌生物膜形成量的影响

试验方法：本实验采用实施例10制备的植物提取物进行下列试验。空白对照组为牙龈卟啉单胞菌ATCC33277菌悬液（每孔200μL）。阴性对照组为无水乙醇（每孔10μL）加入含牙龈卟啉单胞菌ATCC33277菌悬液（每孔190μL）的聚乙烯96孔板。实验组为将1/4MIC、1/2MIC、MIC、2MIC青橄榄提取物（每孔10μL）加入含牙龈卟啉单胞菌ATCC33277菌悬液（每孔190μL）的聚乙烯96孔板。一式3份，同一浓度水平重复4次。37℃厌氧培养48h。微量移液器吸出孔内菌悬液，PBS液轻轻洗孔3次以去除浮游细菌，加入新鲜BHI液体培养基（每孔200μL），充分混匀，使用全波长扫描式多功能读数仪，测量波长为600nm下的光密度值，以反映生物膜的形成量。

试验结果如表3所示，青橄榄提取物的1/4MIC组较空白对照组和阴性对照组小，即牙龈卟啉单胞菌生物膜量减少，而1/2MIC组、MIC组和2MIC组明显抑制牙龈卟啉单胞菌生物膜的产生，并呈现量效依赖关系，说明青橄榄提取物能够有效抑制诱发牙周炎的牙龈卟啉单胞菌生物膜的发生，从而对牙周炎具有显著的防治作用。

表3

经实验证明，实施例1-实施例9，实施例11-实施例14所制备的青橄榄提取物与实施例10的作用相似能够有效抑制诱发牙周炎的牙龈卟啉单胞菌生物膜的发生，从而对牙周炎具有显著的防治作用。

经实验证明，实施例1-实施例14制备的青橄榄提取物也能够有效抑制诱发牙周炎的中间普氏菌和具核梭杆菌生物膜的发生，从而对牙周炎具有显著的防治作用。

按常规方法将青橄榄提取物制备成硬胶囊剂、软胶囊剂、散剂、颗粒剂、片剂、丸剂、蜜膏剂、口服液、酒剂、喷雾剂、注射剂或茶剂等药物剂型；或制备成适于使用的口香糖、口含片、口胶和胶姆糖；或适于使用的牙膏、牙粉、嗽口水、口腔清新喷雾剂对牙周炎进行预防治疗。

Claims (6)

1.青橄榄提取物在制备防治牙周炎的药品、食品或日用品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述青橄榄提取物为青橄榄的枝、叶或果实的提取物。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述的青橄榄提取物是用下述方法制成：以1质量份数的青橄榄的枝、叶或果实为原料，用3-12质量份数的水或3-12质量份数的体积浓度为10%-99.9%的乙醇水溶液进行回流提取,提取1-4次，每次提取1-5小时，过滤,滤液减压浓缩，得糖度为20-40的浓缩物，干燥得到青橄榄提取物。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述药物的剂型为硬胶囊剂、软胶囊剂、散剂、颗粒剂、片剂、丸剂、蜜膏剂、口服液、酒剂、喷雾剂、注射剂或茶剂。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述食品的类别为口香糖、口含片、口胶和胶姆糖。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述日用品的类别为牙膏、牙粉、嗽口水、口腔清新喷雾剂。