CN103083559A - 一种治疗脑梗塞急性期、恢复早期中药组合物新的制备方法及用途 - Google Patents
一种治疗脑梗塞急性期、恢复早期中药组合物新的制备方法及用途 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及中药技术领域,具体涉及一种治疗脑梗塞急性期、恢复早期中药组合物新的制备方法及用途。本发明在中国专利CN200310114532.X原处方的基础上,对生产工艺进行改进,其中水蛭进行超微粉碎,丹参全部进行CO2超临界萃取,这种工艺有效保存了药材中的药效成分。通过临床研究对比,工艺改进后的产品在中风病(脑血栓)上临床疗效明显优于原工艺产品疗效。而且本发明制备的中药组合物具有抗氧化、清除自由基的作用,对防止脑神经元损伤有积极作用,经药效学研究,本发明产品对老年痴呆(AD)有疗效。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域,具体涉及一种治疗脑梗塞急性期、恢复早期中药组合物新的制备方法及用途。
背景技术
中国专利CN200310114532.X公开了一种治疗脑梗塞急性期、恢复早期中药组合物及其制备方法,本专利由我公司于2003年申报,并于2006年获得发明专利证书,我公司应用此专利技术生产的天丹通络胶囊,在临床使用中具有良好的效果,但是其中的丹参采用部分或者全部用乙醇提取,并以提取物的形式入药,实践证明,丹参的药效成分溶出不佳;同时水蛭是通过水提取,以提取物的形式入药。水蛭的药效成分主要是水蛭素,水蛭素是由65个氨基与3个二硫键组成的多肽,高温下(80 ℃以上)分子中二硫键容易断裂,分子结构极不稳定,在80 ℃下只能稳定存在15 min。以目前的提取工艺,水蛭的药效成分不能有效保存。此外该专利说明书中仅仅记载了其用途为治疗脑血栓,具体功能与主治:活血通络,熄风化痰。用于脑梗塞急性期、恢复早期,属中医中经络风痰瘀血痹阻脉络者,主治半身不遂、口舌歪斜、偏身麻木、语言蹇塞等。而且目前所公开的其他文献中也均未记载该中药组合物的其他用途。
发明内容
针对上述缺陷,本发明提供一种治疗脑梗塞急性期、恢复早期中药组合物新的制备方法及用途,其制备的中药组合物在治疗脑血栓上有更好的疗效,并且能够作为制备治疗老年痴呆药物的应用。
本发明是通过以下技术方案实现的:所述的中药组合物的活性成分由以下重量百分比的原料组成:川芎12-14%、豨莶草12-14%、丹参12-14%、水蛭3-5%、天麻12-14%、槐花7-9%、石菖蒲7-9%、人工牛黄0.3-0.5%、黄芪15-17%、牛膝7-9%;具体制备步骤如下:
(1)、将水蛭粉碎为超微粉,超微粉粒度范围5-45μm;超微粉碎可以破坏组织细胞壁,所以药效成分在体内也有很好的溶出,从而使产品疗效大大提高;
(2)、将丹参粉碎后依次用乙醇和纯化水进行CO2超临界萃取,保持萃取压力为25Mpa-35 Mpa、萃取温度为60-70℃,分别收集萃取物(主要为丹参酮类活性物质和总丹酚酸纯化物);
(3)、川芎、石菖蒲用水蒸气蒸馏提取挥发油,并分离出药渣和水溶液;
(4)、将步骤(3)的药渣与豨莶草、牛膝、槐花、黄芪、天麻加水煎煮,煎液滤过后与所述步骤(3)的水溶液混合后,浓缩至相对密度为1.15~1.18;然后加入乙醇使含醇量达70%,静置后滤过,然后滤液浓缩得到稠膏状提取物;
(5)、向步骤(4)的稠膏状提取物中加入所述步骤(1)制得的超微粉、步骤(2)制得的萃取物、人工牛黄细粉以及适量淀粉,然后真空干燥、粉碎,最后加入所述步骤(3)制得的挥发油,混匀制得细颗粒。
上述制备方法还进一步改进为:所述步骤(2)中的丹参粉粒度不小于50目;所述乙醇为体积分数95%的乙醇,所述乙醇和纯化水CO2超临界萃取的时间均为4小时、用量均为丹参粉重量的4倍;所述步骤(4)中煎煮过程具体为:煎煮三次,每次加水6-8倍,每次2小时;所述静至时间为24小时;所述稠膏状提取物的相对密度为1.25-1.30;所述步骤(4)中的浓缩温度低于70℃。
上述制备方法制得的中药组合物在制备用于治疗脑血栓病药物中的应用。
上述制备方法制得的中药组合物在制备用于治疗老年痴呆病药物中的应用。
本发明的有益效果在于:
(1)本发明中药组合物的制备方法中,对水蛭进行超微粉碎,超微粉碎可以破坏组织细胞壁,使得药效成分在体内溶出更快更多,从而使药品起效更快,疗效更好;且超微粉碎不经过长时间高温处理,有效减少了水蛭主要有效成分水蛭素的降解损失,使得本品的有效成分含量更高,从而提高了本发明中药组合物的疗效。
(2)本发明中药组合物的制备方法中,丹参全部进行CO2超临界萃取,使得丹参的提取率更高,且CO2超临界萃取温度低,不经过高温处理,有效避免了高温提取过程中丹参中对热不稳定的有效成分如丹参酮的损失,从而使得本发明中药组合物有效成分含量更高,质量更好,疗效更好。
(3)临床对比研究实验结果表明,工艺改进后的产品在脑血栓(中风病)上临床疗效明显优于原工艺产品疗效。
(4)动物药效学实验结果表明,本发明制备的中药组合物具有抗氧化、清除自由基、增强记忆能力的作用,对防止脑神经元损伤有积极作用,因此,本专利产品对老年痴呆(AD)有疗效。
具体实施方式
以下通过具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
按照以下重量比分别称取下列组合物:川芎12%、豨莶草14%、丹参13%、水蛭3%、天麻14%、槐花9%、石菖蒲9%、人工牛黄0.3%、黄芪17%、牛膝8.7%。
按照以下步骤制备中药组合物:
(1)、将干品水蛭先用普通粉碎机粉碎成初级粉,再用超微粉碎设备将初级粉粉碎成超微粉,超微粉粒度范围5-45μm;
(2)、将丹参粉碎后(过50-60 目筛)依次用其质量4倍的乙醇(95%)和纯化水分别进行CO2超临界萃取以获得丹参酮类活性物质和总丹酚酸纯化物,保持萃取压力均为25Mpa-35 Mpa、萃取温度均为60-70℃,萃取时间均为4小时,分别收集萃取物;
(3)、川芎、石菖蒲用水蒸气蒸馏提取挥发油,并分离出药渣和水溶液;
(4)、将步骤(3)的药渣与豨莶草、牛膝、槐花、黄芪、天麻加水煎煮三次,每次2小时,煎液滤过后合并滤液,并与步骤(3)的水溶液混合后,在50℃减压浓缩至相对密度为1.15~1.18;然后加入乙醇使含醇量达70%,静置24小时后滤过,然后滤液在50℃减压浓缩得到相对密度为1.25-1.30稠膏状提取物;
(5)、向步骤(4)的稠膏状提取物中加入所述步骤(1)制得的超微粉、步骤(2)制得的萃取物、人工牛黄细粉以及适量淀粉,然后真空干燥、粉碎,最后加入所述步骤(3)制得的挥发油,混匀制得细颗粒。
实施例2
按照以下重量比分别称取下列组合物:川芎14%、莶草14%、丹参14%、水蛭5%、天麻14%、槐花9%、石菖蒲7.5%、人工牛黄0.5%、黄芪15%、牛膝7%。制备步骤同实施例1。
实施例3
按照以下重量比分别称取下列组合物:川芎14%、莶草12.5%、丹参14%、水蛭5%、天麻12%、槐花7%、石菖蒲9%、人工牛黄0.5%、黄芪17%、牛膝9%。制备步骤同实施例1。
将实施例1-3制备的中药组合物等比例混合后,制成胶囊,每粒0.4克,进行临床试验:
一、中风病(脑血栓)临床试验
病例选择标准
中风病诊断标准:参照《中药新药治疗中风病的临床研究指导原则》所定标准:中风症见半身不遂,口舌歪斜,神识昏蒙,舌强言謇或不语,偏身麻木,符合中经络(无神识昏蒙)者。瘀血痹阻脉络证辨证标准:参照《中药新药治疗中风病的临床研究指导原则》:主症:(1)半身不遂,(2)舌质紫或暗或有瘀斑,(3)脉细弦或细涩;次症:(1)口舌歪斜,(2)言语謇涩或不语,(3)偏身麻木,(4)或头晕目眩。
病例排除标准
①短暂性脑缺血发作。②经检查证实由脑肿瘤、脑外伤、脑寄生虫病、代谢障碍、风湿性心脏病、冠心病及其他心脏病合并房颤引起脑血栓者。③70岁以上,妊娠或哺乳期妇女,对本药过敏者。④合并有肝、肾、造血系统和内分泌系统等严重原发性疾病、精神病患者。⑤未按规定用药,无法判定疗效或资料不全等影响疗效。
治疗方法
治疗组服用按本发明制备方法制得的中药组合物,对照组服用按原制备方法(CN200310114532.X记载的制备方法)制得的中药组合物。两组均每天服药3次,每次5粒,两组观察时间,均以30 d为1疗程,1-3 疗程结束评定疗效。
疗效判定标准
中医诊断疗效标准: 参照1986 年中华全国中医学会内科学会修订的《中风病中医诊断疗效评定标准》。疗效满分28分,起点分最高不超过18分,其疗效评定方法:[(治疗前积分-治疗后积分)÷治疗前积分]×100%,以百分数表示。痊愈:积分≥85%,神经系统症状和体征基本消失,生活完全自理,病情恢复程度达85%以上;显效:积分≥50%,神经系统症状和体征大部分消失,可独立步行,生活部分自理,病情恢复程度达50%-85%;有效:积分≥20%,症状和体征部分消失,扶持可下床站立,生活不能自理,病情恢复程度达20%- 50%;无效积分< 20%,病情无明显改善或恶化者。
临床疗效比较
经Ridi 分析,治疗组明显优于对照组( P < 0. 05) 。
表1 中风两组临床疗效比较例(%)
组别 | n | 痊愈 | 显效 | 有效 | 无效 | 有效率 |
治疗组 | 165 | 58( 35.2) | 55( 33.3) | 36( 21. 8) | 16( 9. 7) | 149( 90.3) |
对照组 | 70 | 19( 27. 2) | 23( 32. 4) | 17( 24. 2) | 11( 22. 9) | 59( 83. 7) |
表2 中风病治疗前后主要症状变化比较例(%)
表3 中风病治疗前后血脂变化比较(x±s)
CT 的改善情况及分析
治疗组165例治疗前后作CT对照检查者112例,治疗后复查好转者88 例,其中完全吸收26例,有效率为87. 5%。对照组治疗前后CT检查者58例,复查好转者43例,其中完全吸收8例,有效率77. 0%。经χ2检验,两组间有明显差异( P<0. 05),治疗组对CT 改善情况明显优于对照组。
心电图改善
治疗组治疗前心电图有不同程度缺血改变者50例,对照组28例,治疗后治疗组心电图显效16例,有效18例,总有效率68. 0%。对照组显效3例,有效5例,总有效率为25. 3%,治疗组疗效明显优于对照组( P<0. 01) 。
二、老年痴呆药效学研究
取雄性健康Wistar大白鼠155只,随机分成6组:空白组、假损伤组、模型组、中药组合物低剂量组 (0.5g/Kg.d;日服成人5倍量)、高剂量组 (1.5g/Kg.d;日服成人15倍量)、中药对照健脑胶囊组 (2.4g/Kg.d)。
实验结果如下:
大鼠空间探索试验结果(X±s)
组别 | 例数(n) | 剂量(g/kg) | 潜伏期(S) | 过台次数(次) | tl/t总(%) |
空白 | 10 | —— | 11.07±2.52 | 4.51±2.23 | 32.57±4.96 |
假损伤 | 12 | —— | 13.62±4.10 | 3.24±1.90 | 29.77±6.03 |
模型 | 10 | —— | 33.13±7.12## | 1.73±1.04# | 15.99±4.23## |
低剂量组 | 12 | 0.5 | 22.85±3.92** | 3.07±1.82* | 25.84±6.07** |
高剂量组 | 11 | 1.0 | 22.02±3.25** | 2.93±1.30* | 24.76±5.97** |
中药对照 | 10 | 2.4 | 24.77±5.73** | 3.51±1.39** | 27.32±5.73** |
#与空白组、假损伤组比较p<0.05;##与空白组、假损伤组比较p<0.01;*与模型组比较 p<0.05;**与模型组比较p<0.01。
大鼠血清中SOD、MDA和轻自由基的含量(X±s,n=8)
组别 | 剂量(g/kg) | SOD(U/ml) | MDA(nmol/ml) | 轻自由基(U/ml) |
空白 | —— | 171.33±5.26 | 3.05±1.08 | 906.63±79.26 |
假损伤 | —— | 168.92±5.86 | 3.34±1.07 | 853.39±67.10 |
模型 | —— | 142.04±7.74## | 10.63±3.33## | 547.82±113.78## |
低剂量组 | 0.5 | 159.3±11.11** | 7.59±2.21* | 667.39±134.6* |
高剂量组 | 1.0 | 156.04±9.23** | 7.45±2.04* | 720.16±119.5* |
中药对照 | 2.4 | 159.4±8.84** | 6.14±2.41** | 742.75±145.41* |
#与空白组、假损伤组比较p<0.05;##与空白组、假损伤组比较p<0.01;*与模型组比较 p<0.05;**与模型组比较p<0.01。
AD大鼠脑组织β-APP、Aβl-40阳性神经元的数量(X±s,n=10)
##与空白组、假损伤组比较p<0.01;*与模型组比较 p<0.05;**与模型组比较p<0.01。
各组大鼠在Moriss 水迷宫实验中的检测结果
组别 | 动物数(n) | 造模前(s) | 治疗后(s) |
空白 | 10 | 5.58±0.37 | 5.61±0.36 |
模型 | 10 | 5.60±0.33 | 11.16±0.54* |
低剂量组 | 10 | 5.62±0.45 | 10.12±0.43# |
高剂量组 | 10 | 5.51±0.41 | 7.62±0.62## |
中剂量组 | 10 | 5.52±0.32 | 7.31±0.39** |
与正常组相比,*P < 0.01;与模型组相比, #P < 0.05, ##P < 0. 01;治疗组组间比较, ** P < 0.01)
通过以上药效学试验表明:本发明中的中药组合物具有抗氧化、清除自由基的作用,对防止脑神经元损伤有积极作用,同时还能有效增强大鼠空间探索能力等,因此本中药组合物对老年痴呆(AD)有明显疗效。
Claims (4)
1.一种治疗脑梗塞急性期、恢复早期中药组合物新的制备方法,所述的中药组合物的活性成分由以下重量百分比的原料组成:川芎12-14%、豨莶草12-14%、丹参12-14%、水蛭3-5%、天麻12-14%、槐花7-9%、石菖蒲7-9%、人工牛黄0.3-0.5%、黄芪15-17%、牛膝7-9%;其特征在于,具体制备步骤如下:
(1)、将水蛭超微碎粉至粒度范围5-45μm,得水蛭细粉;
(2)、将丹参粉碎后依次用乙醇和纯化水进行CO2超临界萃取,保萃取压力为25Mpa-35 Mpa、萃取温度为60-70℃,分别收集萃取物;
(3)、川芎、石菖蒲用水蒸气蒸馏提取挥发油,并分离出药渣和水溶液;
(4)、将步骤(3)的药渣与豨莶草、牛膝、槐花、黄芪、天麻加水煎煮,煎液滤过后与所述步骤(3)的水溶液混合后,浓缩至相对密度为1.15~1.18;然后加入乙醇使含醇量达70%,静置后滤过,然后滤液浓缩得到相对密度为1.25-1.30稠膏状提取物;
(5)、向步骤(4)的稠膏状提取物中加入所述步骤(1)制得的超微粉、步骤(2)制得的萃取物、人工牛黄细粉以及适量淀粉,然后真空干燥、粉碎,最后加入所述步骤(3)制得的挥发油,混匀制得细颗粒,即得本发明中药组合物的有效成分。
2.根据权利要求1所述的治疗脑梗塞急性期、恢复早期中药组合物新的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的丹参粉粒度不小于50目;所述乙醇为体积分数95%的乙醇,所述乙醇和纯化水CO2超临界萃取的时间均为4小时、用量均为丹参粉重量的4倍;所述步骤(4)中煎煮过程具体为:煎煮三次,每次加水6-8倍,每次2小时;所述静置时间为24小时;所述步骤(4)中的浓缩温度低于70℃。
3.权利要求1或2所述制备方法制得的中药组合物在制备用于治疗脑血栓病药物中的应用。
4.权利要求1或2所述制备方法制得的中药组合物在制备用于治疗老年痴呆病药物中的应用。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20130508 |