CN103039258A - 一种长白山杜鹃花属植物速生方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种植物生长方法，即一种长白山杜鹃花属植物速生方法。其步骤如下：（1）选择苗高3.0～3.5cm和主干直径为1.0mm的长白山杜鹃花属植物小苗；（2）将小苗栽植到草炭土、腐熟松针、阔叶、蛭石、牛粪和复合肥，比例为4:2:2:1:1:0.5的混合基质的营养钵中，置于小拱棚内用塑料薄膜封严后，控制光照时数为9～15h·d^-1、光照强度为600～1300lx和温度为25-30℃，每隔7～22d追施营养液1次，45d后长白山杜鹃花属植物小苗平均生长率达142.4%以上，苗干直径平均达1.89-3.20mm。为杜鹃花的推广应用提供技术支持。

Description

一种长白山杜鹃花属植物速生方法

技术领域　

本发明涉及一种植物生长方法，即一种长白山杜鹃花属植物速生方法。 

背景技术

在现有技术中，长白山杜鹃花属植物共有9个种，均为吉林省重点保护植物，其中牛皮杜鹃和苞叶杜鹃为我国国家三级保护的珍贵稀有植物，短果杜鹃为长白山区珍贵稀有植物。其中，牛皮杜鹃、毛毡杜鹃、照白杜鹃和小叶杜鹃是常绿灌木，短果杜鹃为常绿小乔木，兴安杜鹃为半常绿灌木。牛皮杜鹃、苞叶杜鹃和毛毡杜鹃分布海拔达2500米高，属高山杜鹃。牛皮杜鹃、大字杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、迎红杜鹃和兴安杜鹃全株挥发油含量较高，为精油和药用植物。这9种杜鹃均可通过引种驯化为园林绿化植物，具有重要的社会、经济和生态价值。

以上9种杜鹃对水土保持和维持生态平衡起重要作用，是杜鹃花育种的种质资源。但其在我国分布甚狭，仅在长白山有较大种群分布，其它地区仅为零星分布，由于人们乱采乱挖，野生资源遭到极大威胁。这9种杜鹃花种子细小，萌发率低，萌发后形成的小苗成活率极低；扦插繁殖需要大量的野生杜鹃枝条，对野生资源破坏极大，且生根率和移栽成活率极低；而利用组织培养技术进行繁殖，具有年产试管苗量大，速度快等优点，但仍存在生长极其缓慢等问题，这就导致推广应用受到一定的限制。

发明内容

本发明的目的是针对上述不足而提供一种适合长白山杜鹃花属植物幼苗迅速生长和缩短大苗成苗周期的长白山杜鹃花属植物速生方法。

本发明的技术解决方案是：一种长白山杜鹃花属植物速生方法，其步骤如下：

（1）选择苗高3.0～3.5 cm和主干直径为1.0 mm的长白山杜鹃花属植物小苗；

（2）将小苗栽植到经菌液腐熟的草炭土、腐熟松针、阔叶、蛭石、牛粪和农用复合肥(如市售三元复合肥)，比例为4:2:2:1:1:0.5的混合基质的营养钵中，置于小拱棚内用塑料薄膜封严后，控制光照时数为9～15 h·d^-1、光照强度为600～1300 lx和温度为25-30 ℃，每隔7～22 d追施营养液1次；所述的营养液配方及含量为，1000 mL培养基含量：大量元素：375 mg·L^-1NH₄NO₃，180 mg·L^-1KNO₃，320 mg·L^-1CaCl₂·2H₂O，245 mg·L^-1MgSO₄·7H₂O，436 mg·L^-1KH₂PO₄；铁盐：18.4 mg·L^-1FeSO₄·7H₂O，24.9 mg·L^-1Na₂·EDTA·2H₂O；微量元素：12.4 mg·L^-1MnSO₄·4H₂O，7.2 mg·L^-1ZnSO₄·7H₂O，5.7 mg·L^-1H₃BO₃，0.025 mg·L^-1CuSO₄·5H₂O，0.05 mg·L^-1Na₂MO₄·2H₂O，调节pH为5.4～5.6。45 d后长白山杜鹃花属植物小苗平均生长率达142.4%以上，苗干直径平均达1.89 -3.20 mm。

长白山杜鹃花属植物为牛皮杜鹃小苗；步骤（2）中控制光照时数为13～14 h·d^-1、光照强度为600～800 lx和温度为28 ℃，每隔20～22 d追施营养液1次，45 d后牛皮杜鹃苗平均生长率达142.4%，苗干直径平均达2.67 mm。

长白山杜鹃花属植物为短果杜鹃小苗；步骤（2）中光照时数为11～12 h·d^-1、营养液追施间隔时间为15～17 d、光照强度为800～900 lx和温度为30 ℃，45 d后小苗的平均生长率达169.1%以上，苗干直径平均可达3.20 mm。

长白山杜鹃花属植物为照白杜鹃小苗；步骤（2）中光照时数为12～15 h·d^-1、营养液追施间隔时间为10～13 d、光照强度为1000～1100 lx和温度为27 ℃，45 d后小苗的平均生长率达178.5%以上，苗干直径平均可达2.90 mm。

长白山杜鹃花属植物为小叶杜鹃小苗；步骤（2）中光照时数为14 h·d^-1、营养液追施间隔时间为7～10 d、光照强度为1100～1200 lx和温度为26 ℃，45 d后小苗的平均生长率达153.8%以上，苗干直径平均可达2.50 mm。

长白山杜鹃花属植物为大字杜鹃小苗；步骤（2）中光照时数为10～12 h·d^-1、营养液追施间隔时间为7 d、光照强度为1000～1100 lx和温度为29 ℃，45 d后小苗的平均生长率达204.7%以上，苗干直径平均可达3.20 mm。

长白山杜鹃花属植物为兴安杜鹃小苗，步骤（2）中光照时数为10 h·d^-1、营养液追施间隔时间为10 d、光照强度为1000～1200 lx和温度为25 ℃，45 d后小苗的平均生长率达227.5%以上，苗干直径平均可达2.96 mm。

长白山杜鹃花属植物为迎红杜鹃小苗，步骤（2）中光照时数为9～11 h·d^-1、营养液追施间隔时间为15 d、光照强度为1200～1300 lx和温度为26 ℃，45 d后小苗的平均生长率达218.0%以上，苗干直径平均可达2.91 mm。

长白山杜鹃花属植物为毛毡杜鹃小苗，步骤（2）中光照时数为11～12 h·d^-1、营养液追施间隔时间为10～14 d、光照强度为700～900 lx和温度为28 ℃，45 d后小苗的平均生长率达102.3%以上，苗干直径平均可达1.89 mm。

长白山杜鹃花属植物为苞叶杜鹃小苗，步骤（2）中光照时数为10～12 h·d^-1、营养液追施间隔时间为7～10 d、光照强度为800～900 lx和温度为26 ℃，45 d后小苗的平均生长率达145.9%以上，苗干直径平均可达2.13 mm。 

本发明的优点是：1、本发明利用杜鹃花生长发育过程中所必需的营养成分、基质及酸碱度、温度、湿度、光照时数和光照强度等主要因素的筛选，确定杜鹃花快速生长的最佳条件。为杜鹃花幼苗的迅速生长和缩短大苗成苗周期，为杜鹃花的推广应用提供技术支持。2、当种苗扩繁到需要数量后，小植株经炼苗移栽， 9种杜鹃花小植株成活率可达到85.3%～88.5%。

下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。 

具体实施方式

1 材料

    以牛皮杜鹃(Rhododendron chrysanthum Pall.)、短果杜鹃(Rhododendron brachycarpum D. Don)、照白杜鹃(Rhododendron micranthum Turcz.)、小叶杜鹃(Rhododendron parvifolium Adams.)、大字杜鹃(Rhododendron schlippenbachii Maxim.)、兴安杜鹃(Rhododendron dauricum L.)、迎红杜鹃(Rhododendron mucronulatum Turcz.)、毛毡杜鹃(Rhododendron confertissimum Nakai)和苞叶杜鹃(Rhododendron redowskianum Maxim.)等长白山9个品种杜鹃花组培苗（已驯化炼苗）为材料，苗高为3.0～3.5 cm，叶片数为3～5片，苗主干直径1.0 mm。

2 方法

2.1 基质配制

将1.1中规格的组培苗移栽到12×12 cm的营养钵中，基质成分为草炭土、腐熟松针、阔叶、蛭石、牛粪和农用复合肥（比例为4:2:2:1:1:0.5），拌均并置于适当大小的土坑中灌透水后，用直径为5 cm的尖头木棒在混合基质上钻孔（孔的密度为20个/m²左右，深度与基质厚度相同），再用菌液灌满孔后用塑料封严（菌液:含有Phialocephala fortinii，Pezizilla ericace，Oidiodendron maius，Meliniomyces variabilis，Cryptosporiopsis ercae，Acaulospora lacunosa  6种杜鹃花类菌根真菌，6个菌种用量各50mL/1000mL。其它成份1000mL中含有KH₂PO₄380 mg，MgSO₄·7H₂O149 mg，维生素C26 mg，泛酸钙67 mg，烟酸1.4 mg，蛋白胨3.0 g，葡萄糖16.5 g，琼脂粉8.5 g，1.5%脱氧胆酸钠溶液4 mL和0.05 mg吲哚乙酸），保持温度为25～35 ℃，相对湿度80%以上，30天后翻动1次，40天时再翻动1次，60天后可起出混合基质，装钵前拌入适量河砂，调节pH至5.4～6.0后即可移植杜鹃花小苗。

2.2 营养液、湿度、温度和光照等主要因素对杜鹃花快速生长的影响

将2.1中营养钵（已栽植杜鹃花苗）置于高1.4 m，宽1.3 m，长13 m的小拱棚中，每棚放置1000钵苗。其中沿棚长方向，在棚中间等距放置20个直径15 cm，高为30 cm的塑料容器，并在容器中装入2/3体积的水，用于保湿，湿度基本可保持在80%左右。小拱棚以透性强的无滴塑料膜密封，封膜前追施1次营养液。

基本营养液配方及含量（1000 mL培养基含量）为：大量元素：375 mg·L^-1NH₄NO₃，180 mg·L^-1KNO₃，320 mg·L^-1CaCl₂·2H₂O，245 mg·L^-1MgSO₄·7H₂O，436 mg·L^-1KH₂PO₄；铁盐：18.4 mg·L^-1FeSO₄·7H₂O，24.9 mg·L^-1Na₂·EDTA·2H₂O；微量元素：12.4 mg·L^-1MnSO₄·4H₂O，7.2 mg·L^-1ZnSO₄·7H₂O，5.7 mg·L^-1H₃BO₃，0.025 mg·L^-1CuSO₄·5H₂O，0.05 mg·L^-1Na₂MO₄·2H₂O，调节pH为5.4～5.6。

将以上组分配制于1000 mL的容器中作为母液。生产应用时，将1000 mL母液与自制的菌液200 mL混合后稀释至20 L，每15～20 d追施1次。考察的主要影响因素和控制为：光照时数5～10 h·d^-1、营养液追施间隔时间为15～20 d、光照强度1000～1500 lx和温度10～20 ℃。

为提高杜鹃花苗生长率和生长速度，通过均匀设计法设计实验，选用U₁₂(12⁴)均匀表，每个处理50钵杜鹃花苗，重复3次取平均值，45 d后测量杜鹃花小苗的生长高度，计算生长率并进行统计分析，进而筛选影响杜鹃花快速生长的光照时数(LH)、营养液追施间隔时间(I)、光照强度(LI)和温度(T)的最佳组合。杜鹃花平均生长率=(总高度平均值－小苗的原高度平均值)/原高度平均值×100%

3 影响牛皮杜鹃生长的主要因素最佳组合筛选结果

表1  影响杜鹃花生长主要因素的U₁₂(12⁴)试验设计与结果

数据(表1)经均匀设计软件分析处理后可得回归方程为Y=8.64＋2.86X ₁＋4.04X ₂－0.0245X ₃＋0.662X ₄，显著性水平α＝0.05，复相关系数R＝0.9752，剩余标准差S＝2.2800，检验值F _t ＝33.93﹥临界值F _(0.05,4,7)＝4.120，回归方程具有显著性。光照时数、营养液追施间隔时间、光照强度和温度均对牛皮杜鹃的快速生长具有显著影响，说明光照时数、营养液追施间隔时间、光照强度和温度均是影响牛皮杜鹃快速生长不可缺少的主要因素。通过计算光照时数、营养液追施间隔时间、光照强度和温度对生根的贡献值和贡献率可知，U ₁＝196，U ₁/U＝27.9%；U ₂＝283，U ₂/U＝40.2%；U ₃＝144，U ₃/U＝20.5%；U ₄＝30.4，U ₄/U＝4.32%，说明4个因素对牛皮杜鹃快速生长的贡献顺序为：营养液追施间隔时间>光照时数>光照强度>温度，又因光照时数、营养液追施间隔时间和温度与生长率呈正相关，而光照强度与生长率呈负相关。所以，猜测光照时数、营养液追施间隔时间和温度分别高于10 h·d^-1、20 d和20 ℃，光照强度低于1000 lx时，牛皮杜鹃苗的生长率可能更高。为验证推测，又以光照时数为10、11、12、13、14和15 h·d^-1，营养液追施间隔时间为20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30 d，温度为20、22、24、26、28和30 ℃，光照强度为1000、900、800、700、600和500 lx开展11个水平的验证试验，重复3次。通过45 d结果发现，光照时数为(13～14 h·d^-1)、营养液追施间隔时间为(20～22 d)、光照强度为(600～800 lx)和温度为28 ℃时，牛皮杜鹃小苗的生长率最高，平均生长率达142.4%以上，均高于表1所列12个处理的生长率。此时，苗干直径平均可达2.67 mm。

因此，通过筛选确定牛皮杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：选择苗高和主干直径为3.0～3.5 cm和1.0 mm的牛皮杜鹃小苗，将小苗栽植到经菌液腐熟的草炭土、腐熟松针、阔叶、蛭石、牛粪和农用复合肥（比例为4:2:2:1:1:0.5）混合基质的12×12 cm的营养钵中，按2.2中的方法置于小拱棚内用塑料薄膜封严后，控制光照时数为13～14 h·d^-1、光照强度为600～800 lx和温度为28 ℃，每隔20～22 d追施营养液1次，45 d后牛皮杜鹃苗平均生长率达142.4%，苗干直径平均达2.67 mm。

同理，影响长白山其它种杜鹃花生长的主要因素最佳组合筛选结果如下：

短果杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：光照时数为(11～12 h·d^-1)、营养液追施间隔时间为(15～17 d)、光照强度为(800～900 lx)和温度为30 ℃，45 d后小苗的平均生长率达169.1%以上，苗干直径平均可达3.20 mm。

照白杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：光照时数为(12～15 h·d^-1)、营养液追施间隔时间为(10～13 d)、光照强度为(1000～1100 lx)和温度为27 ℃，45 d后小苗的平均生长率达178.5%以上，苗干直径平均可达2.90 mm。

小叶杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：光照时数为14 h·d^-1、营养液追施间隔时间为(7～10 d)、光照强度为(1100～1200 lx)和温度为26 ℃，45 d后小苗的平均生长率达153.8%以上，苗干直径平均可达2.50 mm。

大字杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：光照时数为(10～12 h·d^-1)、营养液追施间隔时间为7 d、光照强度为(1000～1100 lx)和温度为29 ℃，45 d后小苗的平均生长率达204.7%以上，苗干直径平均可达3.20 mm。

兴安杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：光照时数为10 h·d^-1、营养液追施间隔时间为10 d、光照强度为(1000～1200 lx)和温度为25 ℃，45 d后小苗的平均生长率达227.5%以上，苗干直径平均可达2.96 mm。

迎红杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：光照时数为(9～11 h·d^-1)、营养液追施间隔时间为15 d、光照强度为(1200～1300 lx)和温度为26 ℃，45 d后小苗的平均生长率达218.0%以上，苗干直径平均可达2.91 mm。

毛毡杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：光照时数为(11～12 h·d^-1)、营养液追施间隔时间为(10～14 d)、光照强度为(700～900 lx)和温度为28 ℃，45 d后小苗的平均生长率达102.3%以上，苗干直径平均可达1.89 mm。

苞叶杜鹃小苗快速生长的最佳条件为：光照时数为(10～12 h·d^-1)、营养液追施间隔时间为(7～10 d)、光照强度为(800～900 lx)和温度为26 ℃，45 d后小苗的平均生长率达145.9%以上，苗干直径平均可达2.13 mm。

以牛皮杜鹃一步成苗开展的实验为例：

1  材料与方法

1.1 材料及处理

10月下旬，于长白山国家级自然保护区采牛皮杜鹃枝条，并将枝条用塑料袋包好后放入冰柜内低温休眠，温度控制在-10～-5 ℃，60 d后取出并将顶芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其侧芽萌发生长。待侧芽萌发长至2.50 cm时，将鲜嫩的侧芽剪下，去除嫩叶及叶柄，用75%乙醇（体积分数）涮洗60 s，移至饱和次氯酸钠溶液中浸泡8 min，无菌水冲洗10次，无菌滤纸吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸钠毒伤的组织后切割成1叶1段作为外植体备用。

1.2 牛皮杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长、高频植株再生和炼苗

培养基成分和含量：87 mg·L^-1(NH₄)₂SO₄，375 mg·L^-1NH₄NO₃，180 mg·L^-1KNO₃，320 mg·L^-1CaCl₂·2H₂O，245 mg·L^-1MgSO₄·7H₂O，436 mg·L^-1KH₂PO₄；18.4 mg·L^-1FeSO₄·7H₂O，24.9 mg·L^-1Na₂·EDTA·2H₂O；12.4 mg·L^-1MnSO₄·4H₂O，7.2 mg·L^-1ZnSO₄·7H₂O，5.7 mg·L^-1H₃BO₃，0.32 mg·L^-1KI，0.05 mg·L^-1Na₂MO₄·2H₂O；0.3 mg·L^-1盐酸硫胺素(VB₁)，0.25 mg·L^-1烟酸，75 mg·L^-1肌醇，0.25 mg·L^-1甘氨酸。培养基中附加激动素KT(0.03～0.010 mg·L^-1)、吲哚丁酸IBA(0.10～0.45 mg·L^-1)、萘乙酸NAA(0.06～0.13 mg·L^-1)和赤霉素GA₃(1.40～2.60 mg·L^-1)，琼脂粉7.8 g·L^-1，添加蔗糖10.0 g·L^-1，调节pH值至5.6，牛皮杜鹃嫩茎段在光照周期9 h·d^-1、光照强度1000 lx和温度(23±2) ℃条件下培养。为提高牛皮杜鹃嫩茎段生根的速度及生根率和腋芽萌发生长速度及长度，通过均匀设计法设计实验，选用U₁₃(13⁴)均匀表，每个处理接种10个嫩茎段，重复3次，筛选牛皮杜鹃茎段生根和腋芽萌发生长的激动素、吲哚丁酸、萘乙酸和赤霉素最佳浓度配比。茎段培养35 d统计生根率和腋芽萌发后生长长度。生根率=(生根的茎段数/接种的茎段总数)×100%，茎段腋芽长度为1个培养周期过程中，茎段腋芽萌发生长后的长度（不包括原茎段长度）。

待茎段生根和腋芽萌发生长至3.50 cm，腋芽发出6～8个叶时，在超净工作台上打开培养瓶，将腋芽留1叶剪下苗干，再将苗干切割成1叶1段后，再次将小茎段转接到茎段生根和腋芽萌发生长培养基中，计算出每瓶中每个茎段生根和腋芽萌发生长的平均增殖倍数和周期。

当牛皮杜鹃试管苗增殖到需要的数量且小植株长至2.00～2.50 cm时，将小植株从培养瓶中取出，放在杀毒矾溶液（浓度为2 mg·L^-1）中洗净根上的琼脂，将小植株栽植到经多菌灵（150倍液）消毒过的草炭土、腐烂松针和河砂 (2: 3: 1)的混合基质中，覆盖透光性能好的无滴塑料薄膜进行保湿保温，控制温度为(18±2) ℃，保持相对湿度在70%～75%之间，13 h·d^-1的自然光照，湿度过高或中午温度升高时，将薄膜打开小口进行换气通风，湿度降低时，可在早上喷洒适量清水。

2  结果与分析

2.1 KT、IBA、NAA和GA₃浓度交叉配比对牛皮杜鹃茎段生根的影响

数据(表2)经均匀设计软件分析处理后可得回归方程为Y=81.8＋221X ₁－17.5X ₂－111X ₃，显著性水平α＝0.05，复相关系数R＝0.9536，剩余标准差S＝2.0600，检验值F _t ＝30.12﹥临界值F _(0.05,3,9)＝3.863，回归方程具有显著性，激动素、吲哚丁酸和萘乙酸对茎段的生根影响具有显著性，赤霉素对茎段的生根影响不显著。通过计算激动素、吲哚丁酸和萘乙酸对生根的贡献值和贡献率可知，U ₁＝256，U ₁/U＝66.4%；U ₂＝29.5，U ₂/U＝7.66%；U ₃＝48.7，U ₃/U＝12.6%，但从贡献率数值来看，激动素远大于吲哚丁酸和萘乙酸对茎段生根的影响，吲哚丁酸和萘乙酸差距不大，说明吲哚丁酸和萘乙酸均在牛皮杜鹃茎段生根起不可缺少的重要作用。因激动素与生根率呈正相关，而吲哚丁酸和萘乙酸与生根率呈负相关。猜测质量浓度高于0.10 mg·L^-1的激动素，吲哚丁酸和萘乙酸质量浓度分别低于0.10 mg·L^-1和0.06 mg·L^-1时，生根率可能更高。为验证此猜测的可能性，又以激动素为0.10、0.11、0.12、0.13、0.14和0.15 mg·L^-1，吲哚丁酸质量浓度为0.10、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01和0.00 mg·L^-1，萘乙酸质量浓度为0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01和0.00 mg·L^-1开展11个水平的验证试验，重复3次。具体操作按1.1和1.2方法，结果发现，激动素质量浓度为(0.12～0.14 mg·L^-1)、吲哚丁酸质量浓度为(0.03～0.08 mg·L^-1) 和萘乙酸质量浓度为(0.02～0.05 mg·L^-1)时，牛皮杜鹃嫩茎段生根率最高，平均生根率达99.9%。均高于表2所列13个处理的生根率。

表2  牛皮杜鹃嫩茎段生根和腋芽萌发生长激素筛选的U₁₃(13⁴)试验设计与结果

2.2 KT、IBA、NAA和GA₃浓度交叉配比对牛皮杜鹃茎段腋芽萌发生长的影响

数据(表2)经均匀设计软件分析处理后可得回归方程为Y=－0.270＋13.7X ₁-－1.27X ₂－0.729X ₄，显著性水平α＝0.05，复相关系数R＝0.8996，剩余标准差S＝0.1860，检验值F _t ＝12.73﹥临界值F _(0.05,3,9)＝3.863，回归方程具有显著性，激动素、吲哚丁酸和赤霉素对牛皮杜鹃嫩茎段腋芽萌发生长的影响具有显著性，萘乙酸茎段腋芽萌发生长的影响不显著。同理，计算激动素、吲哚丁酸和赤霉素对茎段腋芽萌发生长的贡献值和贡献率可知，U ₁＝0.947，U ₁/U＝71.5%；U ₂＝0.193，U ₂/U＝14.5%；U ₄＝0.779，U ₄/U＝58.8%，说明激动素大于赤霉素，且远大于吲哚丁酸对茎段腋芽萌发生长的贡献，而吲哚丁酸又是牛皮杜鹃茎段腋芽萌发生长不可缺少的重要因素，因激动素和赤霉素与茎段腋芽萌发生长呈正相关，而吲哚丁酸与茎段腋芽萌发生长呈负相关。由此推测，激动素和赤霉素的质量浓度分别高于0.10 mg·L^-1和2.60 mg·L^-1，以及低于0.10 mg·L^-1的吲哚丁酸可能茎段腋芽萌发生长更好。为验证推测，又以激动素为0.10、0.11、0.12、0.13、0.14和0.15 mg·L^-1，吲哚丁酸质量浓度为0.10、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01和0.00 mg·L^-1，赤霉素为2.60、2.70、2.80、2.90和3.00 mg·L^-1开展11个水平的验证试验，重复3次。结果发现，经过35 d的培养，激动素质量浓度在0.13～0.15 mg·L^-1、吲哚丁酸质量浓度在0.05～0.09 mg·L^-1和赤霉素质量浓度在2.70～2.90 mg·L^-1范围内，牛皮杜鹃茎段腋芽萌发生长均较好，腋芽萌发后的平均生长长度为3.06 cm，比表2所列13个处理的腋芽长度均大。

由以上实验结果可知，由于影响牛皮杜鹃嫩茎段生根的因素和含量范围是培养基、激动素质量浓度为(0.12～0.14 mg·L^-1)、吲哚丁酸质量浓度为(0.03～0.08 mg·L^-1)和萘乙酸质量浓度为(0.02～0.05 mg·L^-1)；而茎段腋芽萌发生长的的主要影响因素和含量范围为培养基、激动素(0.13～0.15 mg·L^-1)、吲哚丁酸质量浓度为(0.05～0.09 mg·L^-1) 和赤霉素质量浓度为(2.70～2.90 mg·L^-1)。

因此，可以确定牛皮杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基为：培养基＋KT(0.13～0.14 mg·L^-1)＋IBA(0.05～0.08 mg·L^-1)＋NAA(0.02～0.05 mg·L^-1)＋GA₃(2.70～2.90 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.9%，腋芽萌发后的平均生长长度为3.06 cm。

同理，可得其它8种杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基分别如下：

短果杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是：培养基＋KT(0.09～0.12 mg·L^-1)＋IBA(0.03～0.07 mg·L^-1)＋NAA(0.04～0.06 mg·L^-1)＋GA₃(2.80～3.00 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.7%，腋芽萌发后的平均生长长度为3.17 cm。

照白杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是：培养基＋KT(0.17～0.25 mg·L^-1)＋IAA(0.20～0.25 mg·L^-1)＋NAA(0.02～0.05 mg·L^-1)＋GA₃(2.30～2.60 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.4%，腋芽萌发后的平均生长长度为3.22 cm。

小叶杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是：培养基＋KT(0.08～0.12 mg·L^-1)＋IBA(0.15～0.20 mg·L^-1)＋NAA(0.03～0.05 mg·L^-1)＋GA₃(2.00～2.30 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.5%，腋芽萌发后的平均生长长度为2.96 cm。

大字杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是：培养基＋KT(0.07～0.10 mg·L^-1)＋IAA(0.20～0.25 mg·L^-1)＋NAA(0.01～0.03 mg·L^-1)＋GA₃(2.20～2.50 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.9%，腋芽萌发后的平均生长长度为2.87 cm。

兴安杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是：培养基＋KT(0.04～0.07 mg·L^-1)＋NAA(0.02～0.04 mg·L^-1)＋GA₃(1.00～1.50 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.5%，腋芽萌发后的平均生长长度为3.30 cm。

迎红杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是：培养基＋KT(0.03～0.06 mg·L^-1)＋NAA(0.03～0.07 mg·L^-1)＋GA₃(0.09～1.30 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.0%，腋芽萌发后的平均生长长度为3.37 cm。

毛毡杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是：培养基＋KT(0.08～0.12 mg·L^-1)＋IAA(0.12～0.15 mg·L^-1)＋NAA(0.05～0.07 mg·L^-1)＋GA₃(1.80～2.00 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.6%，腋芽萌发后的平均生长长度为2.80 cm。

苞叶杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是：培养基＋KT(0.17～0.20 mg·L^-1)＋IAA(0.14～0.18 mg·L^-1)＋GA₃(1.30～1.80 mg·L^-1)。嫩茎段平均生根率99.8%，腋芽萌发后的平均生长长度为2.77 cm。

2.3  9种杜鹃高频植株再生体系建立

按1.2方法，9种杜鹃平均按每瓶接种12个茎段，平均28天为1个周期，每个茎段在1个培养周期内平均可平均切割成7段计算，每年有n个周期（9种杜鹃每年均为12个周期）进行扩繁，年生产杜鹃种苗数为：∑年产试管苗=12×7ⁿ株，可见本发明可以满足长白山9种杜鹃花工厂化育苗的需要。 

2.4  9种杜鹃小植株的炼苗和移栽

根据1.2中的方法，当种苗扩繁到需要数量后，均选取3.00 cm以上的健壮小植株进行炼苗移栽，经统计计算，9种杜鹃花小植株成活率可达到85.3%～88.5%。

Claims (10)

1.一种长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于步骤如下：

（1）选择苗高3.0～3.5 cm和主干直径为1.0 mm的长白山杜鹃花属植物小苗；

（2）将小苗栽植到经菌液腐熟的草炭土、腐熟松针、阔叶、蛭石、牛粪和农用复合肥，比例为4:2:2:1:1:0.5的混合基质的营养钵中，置于小拱棚内用塑料薄膜封严后，控制光照时数为9～15 h·d^-1、光照强度为600～1300 lx和温度为25-30 ℃，每隔7～22 d追施营养液1次；所述的营养液配方及含量为，1000 mL培养基含量：大量元素：375 mg·L^-1NH₄NO₃，180 mg·L^-1KNO₃，320 mg·L^-1CaCl₂·2H₂O，245 mg·L^-1MgSO₄·7H₂O，436 mg·L^-1KH₂PO₄；铁盐：18.4 mg·L^-1FeSO₄·7H₂O，24.9 mg·L^-1Na₂·EDTA·2H₂O；微量元素：12.4 mg·L^-1MnSO₄·4H₂O，7.2 mg·L^-1ZnSO₄·7H₂O，5.7 mg·L^-1H₃BO₃，0.025 mg·L^-1CuSO₄·5H₂O，0.05 mg·L^-1Na₂MO₄·2H₂O，调节pH为5.4～5.6。

2.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为牛皮杜鹃小苗；步骤（2）中控制光照时数为13～14 h·d^-1、光照强度为600～800 lx和温度为28 ℃，每隔20～22 d追施营养液1次。

3.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为短果杜鹃小苗；步骤（2）中光照时数为11～12 h·d^-1、营养液追施间隔时间为15～17 d、光照强度为800～900 lx和温度为30 ℃。

4.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为照白杜鹃小苗；步骤（2）中光照时数为12～15 h·d^-1、营养液追施间隔时间为10～13 d、光照强度为1000～1100 lx和温度为27 ℃。

5.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为小叶杜鹃小苗；步骤（2）中光照时数为14 h·d^-1、营养液追施间隔时间为7～10 d、光照强度为1100～1200 lx和温度为26 ℃。

6.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为大字杜鹃小苗；步骤（2）中光照时数为10～12 h·d^-1、营养液追施间隔时间为7 d、光照强度为1000～1100 lx和温度为29 ℃。

7.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为兴安杜鹃小苗，步骤（2）中光照时数为10 h·d^-1、营养液追施间隔时间为10 d、光照强度为1000～1200 lx和温度为25 ℃。

8.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为迎红杜鹃小苗，步骤（2）中光照时数为9～11 h·d^-1、营养液追施间隔时间为15 d、光照强度为1200～1300 lx和温度为26 ℃。

9.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为毛毡杜鹃小苗，步骤（2）中光照时数为11～12 h·d^-1、营养液追施间隔时间为10～14 d、光照强度为700～900 lx和温度为28 ℃。

10.按照权利要求1所述的长白山杜鹃花属植物速生方法，其特征在于长白山杜鹃花属植物为苞叶杜鹃小苗，步骤（2）中光照时数为10～12 h·d^-1、营养液追施间隔时间为7～10 d、光照强度为800～900 lx和温度为26 ℃。