CN103012516A

CN103012516A - 一种甜菊糖的制备方法

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Publication number: CN103012516A
Application number: CN2012105786257A
Authority: CN
Inventors: 周作人
Original assignee: WUXI KINGBOON STEVIA INTERNATIONAL TRADE CO Ltd
Current assignee: WUXI KINGBOON STEVIA INTERNATIONAL TRADE CO Ltd
Priority date: 2012-12-27
Filing date: 2012-12-27
Publication date: 2013-04-03
Anticipated expiration: 2032-12-27
Also published as: CN103012516B

Abstract

本发明提出了一种甜菊糖的制备方法，包括用水浸泡甜叶菊叶以获得浸泡液；将浸泡液进行粗滤、超滤获得超滤液；将超滤液通入纳微保护柱，纳微保护柱内的填料为高分子有机孔隙树脂；用第一乙醇对纳微保护柱内的糖苷进行醇解获得第一解析液，第一乙醇的质量浓度为18～65%；将第一解析液脱醇后通入纳米分离柱，纳米分离柱内的填料为高分子有机多孔填料；用第二乙醇对纳米分离柱内的糖苷醇解获得第一解析液，并对第一解析液进行分段截取，第二乙醇的质量浓度为88～93%；将第二解析液脱醇，并进行醇回收；对经脱醇后的溶液蒸发浓缩、灭菌、精密过滤、搅拌、干燥。采用本发明可获得高标准甜菊糖，并简化制程节约成本。

Description

一种甜菊糖的制备方法

技术领域

本发明涉及植物中活性成分的提取技术领域，尤其涉及一种甜菊糖的制备方法。

背景技术

目前已经发现的，并得到世界确认的甜菊糖苷有11个，具体如表1所示：

中文名称	英文名称	简写
			甜菊糖苷	Stevio side	STV/Ste/St
莱鲍迪苷A	Rebaudioside A	Reb A/RA/A3
			莱鲍迪苷B	Rebaudioside B	Reb B/RB
莱鲍迪苷C	Rebaudioside C	Reb C/RC
			莱鲍迪苷D	Rebaudioside D	Reb D/RD
莱鲍迪苷E	Rebaudioside E	Reb E/RE
			莱鲍迪苷F	Rebaudioside F	Reb F/RF
杜尔可苷A	Dulcoside A	DA
			杜尔可苷B	Dulcoside B	DB
甜菊醇双糖苷	Steriolbioside	SBio

表1

中国甜菊糖的国家标准：在表1中，大分子糖苷有甜菊糖苷（STV）、莱鲍迪苷A（RA）、莱鲍迪苷C（RC）、莱鲍迪苷D（RD）、杜尔可苷A（DA），它们的含量总和为90%（用TSG来表示）即TSG90产品。

欧盟对甜菊糖的标准：要求为大分子糖苷的总含量为95%。即TSG95

美国对甜菊糖的标准：要求糖苷中的莱鲍迪苷A（RA）的含量为95~97%，即Reba95~97。

甜菊糖现有的提取工艺是由树脂法来完成的,其工艺流程如下:常压浸泡→管道过滤→絮凝→板框压滤→复滤→吸附→解析→活性碳醇相脱色→脱盐→树脂脱色→脱醇→醇回收→蒸发浓缩→活性碳水相脱色→板框过滤→灭菌→精密过滤→均质搅拌→干燥得到TSG90产品(从投料到得到TSG90产品共计20步环节)。而要达到欧盟TSG95标准，则需要建立结晶生产线，以TSG90为原料通过一步结晶体才能达到TSG95标准，其结晶工艺流程如下：TSG90分析配料（加甲醇水溶液→加热、搅拌结晶→出料→离心分离→洗涤→加热溶解→板框过滤→遁环蒸发（脱除甲醇）→甲醇冷冻回收→浓缩液活性碳脱色→板框精密过滤→灭菌→均质→干燥得到TSG95产品。（从配料到干燥得到TSG95产品共计14步）所以用传统法生产TSG95产品，共计需要20+14=34步。

用结晶法获得TSG95产品，需要2吨TSG90为原料，获得一吨TSG95产品，并回收0.6吨TSG85产品。TSG85产品也称母液糖，由于其优良的糖苷已经提取掉，所以难以销售。其提取成本如表2所示：

名称	消耗量	单价	金额
				甜菊干叶	10T	12000元/T	120000元
新鲜水	300T	2.84元/T	852元
				纯水	563T	4.5元/T	2533.5元
电力	8570.9度	1.2元度	10284.5元
				三氯化铁	360Kg/天	0.65元/Kg	234元
石灰	720Kg/天	0.4元/Kg	288元
				液碱	4.92T/天	650元/T	3198元
大号滤布	0.27套	2000元/套	540元
				中号滤布	0.14/套	1000元/套	140元
小号滤布	0.3套	800元/套	240元

小号滤布	摊薄成本		80元
				活性炭	0.76T	9800元/T	7448元
大张滤纸	90张/天	0.9元/天	81元
				38%HCL溶液	4T	300元/T	1200元
32%H_aOH溶液	8T	650元/T	5200元
				树脂摊薄成本	吨耗		1853元
树脂再生成本	树脂再生成本		1402元
				第一乙醇损耗	0.666T	5800元/T	3862元
工资支出/吨			8006元
				固定资产折旧费	31675130元	20年摊派	5279元
锅炉燃煤	11.52T/T	600元	6912元
				污水处理	650T/T	1.6元/T	406元
合计			180039元

表2传统树脂法提取1吨TSG90成本分析

吸附树脂使用周期一般会3天需要再生。脱盐、脱色树脂再生周期一般为一周。而树脂再生需要用氢氧化钠溶液、盐酸溶液，所以需要配酸、配碱，引成了酸、碱污水的排放。由于传统树脂法工艺中所用的树脂，使用周期短，需要频繁用氢氧化钠、盐酸溶液进行再生，所以污染了环境，虽然污水可以治理，但是盐酸的处理是比较有难度的。

并且，传统树脂法生产中，甜菊糖苷与絮凝剂（三氯化铁、石灰）、第一乙醇、活性碳、高分子吸附树脂、脱盐树脂、脱色树脂等物质接触，虽然甜菊糖苷来自天然植物，但是在提取过程种与诸多化学物质接触，甜菊糖苷存在着被污染的风险。

由于传统树脂法工艺流程长，所以从投入甜叶菊原料到得到产品TSG90耗时需要30个小时，因此决定了它的提取成本，每吨甜菊糖（原料甜菊叶不计）的综合提取成本需要60000-65000元。由于综合提取成本高，所以决定了产品的销售价格高。目前1吨TSG90普通甜菊糖的销售价格约22万元一吨。

由于欧盟对中国产的TSG90甜菊糖并不认可，欧盟需要的甜菊糖品质是TSG95。可是树脂法的工艺只能得到TSG90的品质，不符合欧盟对产品的要求。而目前生产TSG90产品，是用TSG90甜菊糖为原料进行一次结晶得到TSG95产品，其提取率是2：1，即需要用2吨TSG90产品结晶得到1吨TSG95产品，收率是50%，并且在母液中产生了0.6吨的TSG80母液糖,TSG80糖是国外市场所不需要的。所以，目前通过结晶法生产得到的TSG95产品需要50万元/吨（因为2吨TSG90的原料就是44万元，再要加上结晶成本）。

美国FDA对甜菊糖产品认可的标准要求是Reba＞95~97。而目前的Reba＞95~97产品是通过重结晶工艺得到的。重结晶得到1吨Reba＞95~97，需要TSG90原料3吨，并得到1.2吨的TSG80的母液糖，其提取率是33%。由此，该工艺所产生的成本：3吨TSG90甜菊糖需要28×3=84万元。要重结晶得到Reba＞95~97产品，并不是所有TSG90都能结晶得到的，它对TSG90产品中的Reba苷含量有要求必须大于50%，所以此类TSG90甜菊糖需要28万元/吨。此重结晶工艺的成本决定了Reba＞95~97产品的卖价在100-120万元/吨，因此造成由于价高而有价无市。

有鉴于此，如何设计一种甜菊糖的制备方法以简化工序降低成本，并能减少环境污染，是业内人士亟需解决的问题。

发明内容

针对现有技术中，利用树脂吸附时需要树脂再生，其中的酸碱排放对环境产生较大污染，并且制备工艺繁琐、成本较高等缺陷，本发明提供了一种甜菊糖的制备方法。

根据本发明的一个方面，提供了一种甜菊糖的制备方法，其中，包括：

a.用水浸泡甜叶菊叶以获得浸泡液；

b.将所述浸泡液依次进行粗滤、超滤获得超滤液，所述粗滤中滤孔的直径为2～5μm，所述超滤中过滤孔径为0.05～1μm；

c.将所述超滤液通入纳微保护柱，以去除杂质及小分子糖苷，所述纳微保护柱内的填料为高分子有机孔隙树脂；

d.用第一乙醇对所述纳微保护柱内的糖苷进行醇解获得第一解析液，所述第一乙醇的质量浓度为18～65%；

e.将所述第一解析液脱醇后通入纳米分离柱，其中，所述纳米分离柱内的填料为高分子有机多孔填料；

f.用第二乙醇对所述纳米分离柱内的糖苷醇解获得第二解析液，并对所述第二解析液进行分段截取，所述第二乙醇的质量浓度为88～93%；

g.将所述第二解析液脱醇，并进行醇回收；以及

h.对经脱醇后的溶液蒸发浓缩、灭菌、精密过滤、搅拌、干燥。

优选地，所述纳米分离柱内的填料的空隙为100～500nm。

优选地，所述步骤e与所述步骤g中，通过纳滤膜进行脱醇。

优选地，所述步骤h中，采用真空减压浓缩，所述真空减压浓缩的真空度为0.08～0.09MPa，温度为38～45℃。

优选地，所述步骤b中，通过纤维滤膜进行超滤。

优选地，所述步骤a中，浸泡为加压浸泡，所述加压浸泡的压力为0.1～0.2MPa。

优选地，所述步骤d中，依次递增所述第一乙醇的质量浓度，所述第一乙醇的质量浓度分三个范围递增：大于等于18%且小于20%、大于等于20%且小于50%、大于等于50%且小于等于65%。

优选地，所述步骤c与所述步骤d之间还包括步骤i：用压缩空气挤干所述纳微保护柱的水分。

优选地，所述步骤a中，所述水与所述甜叶菊的重量比为2:1。

优选地，所述步骤a中，浸泡次数为两次。

本发明的优点是：将经过过滤的滤液依次通过纳微保护柱及纳米分离柱，并利用第一乙醇及第二乙醇分别对纳微保护柱及纳米分离柱内的糖苷进行醇解，从而可以获得高纯度的糖苷。另外，避免了树脂吸附后需要树脂再生的过程，降低了树脂再生过中所需要的酸碱对环境的污染，并且在简化了整个制备工序，大大节约了成本。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1示出了依据本发明的甜菊糖的制备方法的流程图。

图2～24示出了依据本发明的一个实施例中纳米分离法检测图谱。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

图1示出了依据本发明的甜菊糖的制备方法的流程图。参照图1，甜菊糖的制备方法具体包括以下步骤：

步骤a：用水浸泡甜叶菊叶以获得浸泡液。首先，以甜叶菊干叶为原料，加水进行浸泡，其中，水与甜叶菊干叶的重量比为2:1，重复浸泡两次，每次2h，将两次浸泡获得的浸泡液合并。该浸泡为加压浸泡，压力为0.1~0.2MPa。

步骤b：将浸泡液依次进行粗滤、超滤获得超滤液。然后，将上述浸泡液进行粗滤，去除较粗的杂质及悬浮物以获得粗滤液，粗滤中滤孔的直径为2~5μm，例如3μm，接着将粗滤液通过纤维滤膜进行超滤，以获得超滤液，纤维滤膜的过滤孔径为0.05～1μm，例如0.07μm。

步骤c：将超滤液通入纳微保护柱。接下来，将超滤液通入到纳微保护柱内，纳微保护柱的填料会去除超滤液中的杂质及部分小分子糖苷，而吸附其中含有的大分子糖苷。其中，纳微保护柱内的填料为高分子有机孔隙树脂。

步骤d：用第一乙醇对纳微保护柱内的糖苷进行醇解。接着，利用质量浓度为18～65%的第一乙醇对纳微保护柱内的糖苷进行解析，解析后获得第一解析液，在此解析过程中，第一乙醇与纳微保护柱的体积比为2:1，并且在整个解析的过程中，第一乙醇的质量浓度在不断递增，具体地，当以质量浓度为大于等于18%且小于20%的第一乙醇解析获得的第一解析液中不含有大分子糖苷STV、RC、RA；当将第一乙醇的质量浓度增加至大于等于20%且小于50%时，获得的第一解析液中，同时含有大分子糖苷STV、RC、RA；继续增加第一乙醇的浓度至大于等于50%且小于等于65%时，获得的第一解析液中只含有大分子糖苷RA。

步骤e.将第一解析液脱醇后通入纳米分离柱。然后，利用纳滤膜除去第一解析液中含有的乙醇，先利用压缩空气挤干纳米分离柱内的水分，再将脱醇后的糖水溶液通入纳米分离柱内，纳米分离柱是有机多孔凝胶，其内的填料为高分子有机多孔填料，且该填料的空隙为100～500nm，例如300nm。

步骤f.用第二乙醇对纳米分离柱内的糖苷醇解。继续向纳米分离柱内通入质量浓度为88～93%的第二乙醇，第二乙醇对纳米分离柱内的糖苷进行解析，解析后获得第二解析液，对第二解析液进行分段截取，每5分钟截取一次。

步骤g.将第二解析液脱醇，并进行醇回收。同样利用纳滤膜将第二解析液中的乙醇除去，被除去的乙醇可以进入回收塔提浓，遁环使用。

步骤h.对经脱醇后的溶液蒸发浓缩、灭菌、精密过滤、搅拌、干燥。最后，对脱醇后的溶液进行蒸发浓缩，蒸发浓缩采用的是真空减压浓缩，真空减压浓缩的真空度为0.08～0.09MPa，温度为38～45℃，再对蒸发浓缩后的糖苷溶液进行灭菌、精密过滤、搅拌，干燥后得到高标准的甜菊糖。

步骤i：用压缩空气挤干纳微保护柱的水分。在步骤c与步骤d之间还可以用压缩空气挤干纳微保护柱内的水分。

本方法与传统树脂法制备甜菊糖的生产成本比较如下表所示。

表3本方法与传统树脂法生产成本对比表

从表3中看以看出，在原料成本相同的情况下，提取成本一吨可以节约26522元。但是得到的产品完全是不一样的。

成本名称	数量	单价	金额	税前利润
					甜菊干叶	10吨	12000元/t	120000元
综合提取成本			60039元
					工厂成本合计			180039元/t
销售价格与毛利			220000元/t	39961元/t

表4传统树脂法生产TSG90成本汇总

成本名称	数量	单价	金额	税前利润
					TSG90甜菊	2T	180039元/T	360078元
一步结晶成本		40000元/T	40000元
					工厂成本合计			400078元/T
销售价格与毛利			450000元/T	49922元/T

表5一步结晶法生产TSG95的成本汇总

本方法与传统树脂法的价格优势比较：

1.如果同样按甜菊干叶为原料，一步生产得产品，则方法的成本比树脂法的成本直降26522元/T，则本方法生产的TSG95产品，按树脂法生产的TSG90产品的价格销售，可以多盈余26522元。

2.如果本方法得到的TSG90产品，定价250000元，则每吨的税前利润可达250000-153517=96483元/T，而以此价格销售，那么传统树脂法加结晶法所生产的产品，将退出市场机制。

实施例1

通过计量，投入甜菊干叶500kg，以5000kg的清水在常温下，在0.2MPa的压力下进行浸泡2次，每次2h，将两次浸泡的浸泡液进行合并，使合并后的浸泡液通过滤网至管道过滤器进行粗滤，粗滤时滤孔的直径为3μm，浸泡液经过粗滤后得粗滤液，然后通过纤维滤膜将粗滤液进行超滤，以获得超滤液，纤维滤膜的过滤孔径为0.07μm。继续将超滤液通入纳微保护柱以进一步去除杂质及部分小分子糖苷，纳微保护柱内的填料为高分子有机孔隙树脂，甜菊糖苷被树脂所吸附，而废水直接排出。其中，纳微保护柱内的填料为高分子有机孔隙树脂。接着，向纳微保护柱内注入质量浓度为18%的第一乙醇进行解析，获得的第一解析液中此时不含有大分子糖苷STV、RC、RA，只含有小分子糖苷，先行收集小分子量糖苷；然后用质量浓度为65%的第一乙醇进行解析，此时大分子量糖苷STV、RC、RA排出，另行收集，由于已经去除了部份小分子糖苷，此时收集得到的溶液中，其含苷量已经达到92%，比传统工艺提高了2~3个百分点。纳微保护柱起到了去除有机废渣、拆分部份小分子量糖苷的作用，减轻了后续纳米分离柱的负荷。在此解析过程中，第一乙醇与纳微保护柱的体积比为2:1。利用纳滤膜将收集到的第一解析液脱醇，然后通入纳米分离柱，在通入纳米分离柱之前，可以先利用压缩空气挤干纳米分离柱内的水分，再将脱醇后的糖水溶液通入纳米分离柱内，纳米分离柱是有机多孔凝胶，其内的填料为高分子有机多孔填料，且该填料的空隙为300nm。

向纳米分离柱内注入质量浓度为88%的第二乙醇进行解析，解析后获得第二解析液，对第二解析液进行分段截取，每5分钟截取一次。表6示出了本实施例中纳米分离中各个时间段的糖苷含量。收集：100mL定量（从第一瓶490ml到最后一瓶500mL）结合表6参照图2～24，此时从图谱上可以看到，图2是12.5min～17.5min的图谱，从图上可以看出，该时间区间内无峰；图3～6分别示出了17.5min、22.5min、27.5min、32.5min的图谱，从图中可以看出在该段时间区间内显示的是杂质峰。图7示出的是在37.5min时的图谱，此时开始出现峰值，总糖苷中，STV苷的重量占96.25%,RC苷的重量占3.74%,而未见Reba苷。图8示出的是在42.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占79.18%,RC苷的重量占18.84%,Reba苷的重量占1.97%。图9示出的是在47.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占58.50%,RC苷的重量占20.68%,Reba苷的重量占19.33%。图10示出的是在52.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占35.79%,RC苷的重量占17.86%,Reba苷的重量占44.34%。图11示出的是在57.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占18.94%,RC苷的重量占14.25%,Reba苷的重量占64.63%。图12示出的是在62.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占7.07%,RC苷的重量占9.03%,Reba苷的重量占81.63%。图13示出的是在67.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占4.06%,RC苷的重量占4.20%,Reba苷的重量占89.98%。以上从上样12.5min开始,至67.5min止,共计耗用55min,共收集得到490ml的产品。此时RA峰已经达到89.98%,即开始另行收集。下面第二乙醇的质量浓度增加至93%。图14示出的是在72.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占2.04%,RC苷的重量占1.95%,Reba苷的重量占94.99%。图15示出的是在77.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占0.78%,RC苷的重量占0.72%,Reba苷的重量占97.69%。图16示出的是在82.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占0.37%,RC苷的重量占0.28%,Reba苷的重量占98.94%。图17示出的是在87.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占0.27%,RC苷的重量占0.49%,Reba苷的重量占99.02%。图18示出的是在92.5min时的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占0.51%,RC苷的重量占0.29%,Reba苷的重量占98.90%。图19～23示出的分别是在97.5min、102.5min、107.5min、112.5min、117.5min时的图谱，此时总糖苷中，只有Reba苷。图24示出的总糖苷合并浓缩后检测到的图谱，此时总糖苷中，STV苷的重量占5.25%,RC苷的重量占7.61%,Reba苷的重量占86.6%。

表6

至42.5min，RA苷出现,而含量只有1.97.再过25min，则图谱显示RA苷的峰值已经基本处于高位,这时检测得到的数据,显示糖液中RA苷含量已经达到89.98%;再过5min,则RA苷已经达到94.99%，符合需要的高含量Reba产品的要求,当图谱显示RA苷的含量达到90%时,应该切换第二乙醇进入纳米分离柱的质量浓度至93%,可以完全彻底的把纳米分离柱内的糖苷全部解析出来。最后将第二解析液脱醇，并对脱醇后的溶液进行真空减压浓缩，其真空度为0.08MPa，温度为41℃，再对蒸发浓缩后的糖苷溶液进行灭菌、精密过滤、搅拌，干燥后得到高标准的甜菊糖。

甜菊糖是多达11个糖苷所组成的混合物，不同的糖苷与高分子有机多孔凝胶填料所吸附的作用强弱是不同的，即利用它们的分配系数不同而实现分离。凝胶色谱，固定相是多孔凝胶，流动相先后流出的糖苷含量也是不同的。分别收集到不同的容器中。

纳微保护柱的工作原理如下：超滤液通过泵注入纳微保护柱，用压缩空气挤干水分，然后用泵注入不同质量浓度梯度的第一乙醇，小分子量的糖苷可以排出一部份，使柱内的糖苷增加了纯度，当随着第一乙醇的浓度增加，大分子量的糖苷就解析出来了，纳微保护柱的作用是去除杂质：蛋白质，纤维素，果胶，色素等，同时解析时也去除了部份小分子量的糖苷，纳微保护柱的作用是去除杂质：蛋白质，纤维素，果胶，色素，同时解析时也去除了部份小分子量的糖苷，解析收集得到的大分子量糖苷的纯度比传统树脂解析液来得高。

从纳微保护柱内解析的第一解析液，必须先脱醇，因为进入纳米分离柱后，所用第二乙醇的质量浓度与原来注入纳微保护柱内的不同，利用第一乙醇对纳微保护柱内的溶液进行解析的目标是实现TSG90的制备，去除小分子糖苷后的糖苷溶液，再进入纳米分离柱后，还能去除一部份小分子糖苷就得到TG95了，而美国的FDA标准是要求Reba单苷的含量达到大于95%以上。利用第二乙醇对进入纳米分离柱内的溶液进行解析，每隔5分钟收集一次样，可以从每个收集到的样的数据发现，开始只有STV苷与RC苷，到了一定的时间段，Reba苷才开始出现，到后来越来越多，而其它苷就越来越少，最后全部是Reba苷了，从图2～24与表6可以看出，可以放大设定收集Reba苷的时间与纯度，这样就能在工业化大生产上按照数据进行确定收集时间，得到的必定是高纯度的Reba产品，因为表6最后一格显示的Reba苷的平均含量是80%以上，所以如果想得到更高的纯度，只要向后靠，延长收集的时间段就能解决Reba苷含量达不到美国标准的问题4。收集得到500ml产品的平均含量测得RA为86.6%，实验分析说明:通过纳米分离开始用质量浓度为88%的第二乙醇,甜菊糖溶液注入纳米分离柱通过纳米分离,各糖苷分别在各区间段析出,再后剩下的基本都是RA苷纯品。如果要得到RA苷含量达到95%以上的纯品,最佳收集时间段应该在72.5min开始，可以确保产品RA达到95%以上。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。

Claims

1.一种甜菊糖的制备方法，其特征在于，包括：

a.用水浸泡甜叶菊叶以获得浸泡液；

g.将所述第二解析液脱醇，并进行醇回收；以及

2.如权利要求1所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述纳米分离柱内的填料的空隙为100～500nm。

3.如权利要求1所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述步骤e与所述步骤g中，通过纳滤膜进行脱醇。

4.如权利要求1所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述步骤h中，采用真空减压浓缩，所述真空减压浓缩的真空度为0.08～0.09MPa，温度为38～45℃。

5.如权利要求1所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述步骤b中，通过纤维滤膜进行超滤。

6.如权利要求1所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述步骤a中，浸泡为加压浸泡，所述加压浸泡的压力为0.1～0.2MPa。

7.如权利要求1至6任一项所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述步骤d中，依次递增所述第一乙醇的质量浓度，所述第一乙醇的质量浓度分三个范围递增：大于等于18%且小于20%、大于等于20%且小于50%、大于等于50%且小于等于65%。

8.如权利要求1至6任一项所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述步骤c与所述步骤d之间还包括步骤i：用压缩空气挤干所述纳微保护柱的水分。

9.如权利要求1至6任一项所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述步骤a中，所述水与所述甜叶菊的重量比为2:1。

10.如权利要求1至6任一项所述的甜菊糖的制备方法，其特征在于，所述步骤a中，浸泡次数为两次。