CN103003304B - 结直肠癌和胃肠癌的预防 - Google Patents

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Abstract

本公开提供了用于预防具有癌前期的腺瘤性息肉的动物，包括人类中的胃肠癌和/或结直肠癌的方法和组合物。本公开提供了包含适合本公开的方法中使用的抗-PG抗体的组合物。本公开也提供了用于监测在具有癌前期的息肉的受试者中的抗-PG治疗的功效的方法和组合物。

Description

结直肠癌和胃肠癌的预防
对相关申请的参考
本申请要求在2010年3月24日提交的临时申请号61/317,245的35U.S.C.§119(e)之下的优先权，所述临时申请的内容完整并入本文作为参考。
对序列表、表或者计算机程序的参考
序列表随同本文同时提交。
发明领域
本公开涉及通过将包含对前胃泌素特异的抗体的组合物施用于受试者在易于患腺瘤性息肉的受试者中预防结直肠癌和/或胃肠癌的方法。
背景技术
胃肠癌，包括结直肠癌(“CRC”)，所述胃肠癌每年影响成千上万的个体并且仅在美国每年出现上万的CRC-相关的死亡。参见，Rustgi,2010,“Thegeneticsofhereditarycoloncancer,”Genes&Development21:2525-2538。CRC可以以不同的方式产生，所述方式中的一种是腺瘤性息肉转化成恶性肿瘤。如对于具有家族性腺瘤性息肉(“FAP”)的个体的情况，腺瘤性息肉是可以遗传的，或者它可以是散发的。具有FAP或者散发的腺瘤性息肉的个体携带与小肠、结肠和/或直肠中形成的腺瘤性息肉相关的腺瘤性结肠息肉病(“APC”)肿瘤抑制基因的突变。这些息肉又可以发展成结直肠癌和胃肠癌。在散发的腺瘤性息肉（一种引起CRC的许多病例的非遗传的病症）的情况下，体细胞中的APC基因被突变。具有散发的腺瘤性息肉的个体发展成良性息肉，所述良性息肉的亚群随后可以转化成恶性癌。
FAP占总的CRC病例的约1%并且影响每13000个人中的一个。FAP患者中的APC的突变与形成遍及结肠的数百到数千的小腺瘤性息肉相关。息肉进展成恶性肿瘤实际上是不可避免的。平均起来，没有进行预防治疗时，具有FAP的个体到39岁发展成CRC。预防性治疗是护理标准并且涉及根治性手术，其包括一般在25岁之前除去结肠，或结肠和直肠。虽然预防与不治疗相比是优选的，但是在年轻患者中进行的结肠的外科切除术（结肠切除术）严重地影响了生活质量。此外，仅外科切除术对于保持患者无癌可能是不够的：进行了结肠切除术的患者具有在上胃肠道发展成息肉和癌的高风险。非常需要延长具有FAP的个体和具有散发的腺瘤性息肉的个体的无癌生命的有效的预防性治疗，尤其非外科的治疗。
概述
本公开提供了用于在易患腺瘤性息肉的动物，包括人中预防胃肠癌，包括CRC的方法和组合物。如下文所述，本申请给出了相信以明显能中和PG的生物学活性结合前胃泌素(“PG”)的治疗方案，其可用于具有在上胃肠道发展成CRC或者癌的增加的可能性，但是还没有发展成CRC或者癌的受试者。本申请中描述的多种发明部分地基于申请人发现在FAP的小鼠模型中抗-PG抗体防止了胃肠道肿瘤的发生。尽管不是意在受任一操作理论约束，但是认为结合PG并干扰其与在机体内的其他蛋白质的相互作用防止了腺瘤性息肉发展成恶性肿瘤。
因此，在一个方面，本公开提供了在易患腺瘤性息肉的受试者中通过施用包含抗-PG抗体的组合物预防胃肠癌，包括CRC的方法。一般，所述方法包括将有效量的抗-PG抗体施用于需要的受试者。可以根据本领域已知的基于抗体的治疗方案，以有效剂量，即有效地预防或者延迟胃肠癌，包括CRC的量，将抗-PG抗体和其组合物施用于受试者。
用于预防抗-PG治疗的合适的受试者是易患腺瘤性息肉的那些个体，其包括具有CRC家族史的受试者，具有FAP的个体和以前发现过和/或除去过腺瘤性息肉的那些个体。通常，合适的受试者具有APC基因中的一种或者多种突变，导致FAP或者散发的腺瘤性息肉。合适的受试者也包括以前进行了结肠切除术的个体和处在发展成上胃肠道中的息肉和癌的增加的风险中的个体。
本公开的抗-PG抗体包括能结合PG的抗体。可以将能结合PG的任一抗体用于本公开的方法中，所述抗体包括但不限于多克隆和单克隆抗-PG抗体。优选地，抗-PG抗体是对待治疗的物种的PG特异的。例如，将抗-人PG(抗-hPG)抗体施用于人类受试者。合适的抗-PG抗体的结合亲和力可以是从至少约5000nM至至少约0.001nM之间，或者更高，或之间的任一值。
可以将本文描述的抗-PG抗体与其他的治疗组合使用或者辅助其他的治疗使用以预防或者延迟胃肠癌，包括CRC。其他的治疗的非限制实例包括外科切除术、化学疗法、抗体疗法、放射疗法和用本文描述的第二种试剂进行的治疗。抗-PG抗体可以与另一种治疗同时被施用，或者在另一种治疗之前一段时间或者之后被施用。
除了抗-PG抗体之外，适合用于本公开的方法中的组合物可以包含，可药用的载体、赋形剂和/或稀释剂。可以配制用于本文描述的多种施用途径的组合物，其包括适合经选择的途径的载体、赋形剂和/或稀释剂。为了在人和动物中治疗，可以使用任一合适的施用途径，如注射和本领域已知的用于基于抗体的临床产品的任何其他的施用途径施用包含抗-PG抗体的组合物。为治疗目的，可以以单位剂量包装组合物以便于使用。
如本文所示，尽管具有多发性腺瘤性息肉的患者具有升高的血清PG水平，然而已经除去息肉的患者具有低的或者检测不到的血清PG水平。这种发现提供了有力的新工具来诊断和监测散发的或者家族性的腺瘤性息肉的病程和它的疗程。
因此，在另一方面，本公开提供了在易患腺瘤性息肉的患者中监测抗-PG治疗的功效的方法。一般，该方法包括在抗-PG治疗的疗程期间或者之后，测量来自接受抗-PG治疗的个体的血液（血清、血浆或者全血）样品中的PG浓度或者水平，并且将测量的PG水平与PG的基线水平（例如，在治疗开始时个体中的PG水平）比较，其中低于PG的基线水平的测量的PG水平，指示具有治疗功效，并且高于PG的基线水平的测量的PG水平指示缺少功效。在一些实施方案中，该方法进一步包括通过，例如内窥镜检查评估受试者中息肉的数目和大小。
在又一个方面，本公开提供了选择需要内窥镜检查或者抗-PG治疗的个体的方法。该方法用于在易患腺瘤性息肉的患者中实施。一般，通过下述实施该方法，测量来自个体的血液样品中的PG水平，并且将测量的PG水平与基线水平比较，其中测定的PG水平比基线水平高指示需要内窥镜检查。在一些实施方案中，高于基线的PG水平指示需要抗-PG治疗。可以从来自处在较早时间点的个体的一个或者多个样品获得基线，或者基线可以基于在具有与个体相似的特征的群体中测量的PG水平。
附图简述
图1提供了人前胃泌素原(SEQIDNO:100)的氨基酸序列（其中在信号肽序列上加下划线），成熟的人前胃泌素(SEQIDNO:20)和前胃泌素加工的某些产物，包括G34(SEQIDNO:102)，G34-Gly(SEQIDNO:103)，G17(SEQIDNO:104)，G17-Gly(SEQIDNO:105)和CTFP(SEQIDNO:106)的氨基酸序列。
图2提供了某些示例性的小鼠抗-hPG单克隆抗体的可变轻链和可变重链的多核苷酸和氨基酸序列。在每种情况中，以粗体－加下划线的文本显示三个CDRs。具体地：
图2A提供了小鼠抗-hPGMAb3的VH链的多肽序列(SEQIDNO:12)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:16)；
图2B提供了小鼠抗-hPGMAb3的VL链的多肽序列(SEQIDNO:13)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:17)；
图2C提供了小鼠抗-hPGMAb4的VH链的多肽序列(SEQIDNO:14)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:18)；
图2D提供了小鼠抗-hPGMAb4的VL链的多肽序列(SEQIDNO:15)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:19)；
图2E提供了小鼠抗-hPGMAb8的VH链的多肽序列(SEQIDNO:59)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:67)；
图2F提供了小鼠抗-hPGMAb8的VL链的多肽序列(SEQIDNO:63)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:71)；
图2G提供了小鼠抗-hPGMAb13的VH链的多肽序列(SEQIDNO:60)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:68)；
图2H提供了小鼠抗-hPGMAb13的VL链的多肽序列(SEQIDNO:64)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:72)；
图2I提供了小鼠抗-hPGMAb16的VH链的多肽序列(SEQIDNO:61)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:69)；
图2J提供了小鼠抗-hPGMAb16的VL链的多肽序列(SEQIDNO:65)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:73)；
图2K提供了小鼠抗-hPGMAb19的VH链的多肽序列(SEQIDNO:62)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:70)；和
图2L提供了小鼠抗-hPGMAb19的VL链的多肽序列(SEQIDNO:66)和编码所述多肽的多核苷酸序列(SEQIDNO:74)。
图3提供了本文描述的经选择的抗-hPG的单克隆抗体的人源化的可变重链和轻链的计划的多肽序列。在每种情况下，以粗体－加下划线的文本显示三种CDRs。具体地：
图3A提供了人源化的MAb3的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:21)；
图3B提供了人源化的MAb3的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:22)；
图3C提供了人源化的MAb4的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:23)；
图3D提供了人源化的MAb4的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:24)；
图3E提供了人源化的MAb8(a)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:75)；
图3F提供了人源化的MAb8(a)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:76)；
图3G提供了人源化的MAb8(b)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:77)；
图3H提供了人源化的MAb8(b)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:78)；
图3I提供了人源化的MAb8(c)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:79)；
图3J提供了人源化的MAb8(c)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:76)；
图3K提供了人源化的MAb13(a)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:80)；
图3L提供了人源化的MAb13(a)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:81)；
图3M提供了人源化的MAb13(b)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:82)；
图3N提供了人源化的MAb13(b)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:83)；
图3O提供了人源化的MAb16(a)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:84)；
图3P提供了人源化的MAb16(a)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:85)；
图3Q提供了人源化的MAb16(b)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:86)；
图3R提供了人源化的MAb16(b)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:87)；
图3S提供了人源化的MAb16(c)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:88)；
图3T提供了人源化的MAb16(c)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:89)；
图3U提供了人源化的MAb19(a)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:90)；
图3V提供了人源化的MAb19(a)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:91)；
图3W提供了人源化的MAb19(b)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:92)；
图3X提供了人源化的MAb19(b)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:93)；
图3Y提供了人源化的MAb19(c)的VH链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:94)；和
图3Z提供了人源化的MAb19(c)的VL链的计划的氨基酸序列(SEQIDNO:95)。
发明详述
家族性的和散发的腺瘤性息肉中的癌
家族性腺瘤性息肉(FAP)是稀少的遗传病症，其与APC基因的一个等位基因上的生殖细胞突变相关。已经对具有FAP的受试者中的APC基因的多种突变作图，许多突变导致截短的蛋白质。参见，例如Rustgi,2010,“Thegeneticsofhereditarycoloncancer,”Genes&Development21:2525-2538;Groves等人,2002,“Duodenalcancerinpatientswithfamilialadenomatouspolyposis(FAP):resultsofa10yearprospectivestudy,”Gut50:636-641。APC中的这些突变与不同严重程度的FAP相关。
FAP的特征为受影响的个体在非常年轻时在肠和结肠中出现多发腺瘤（息肉）。这些息肉的亚群转化成结直肠癌(CRC)，并且FAP来源的CRC的病例代表了总的CRC病例的大约1%。有CRC家族史的个体通常在非常小的年龄经历了基因测试以检测APC基因中突变的存在。发现具有此类突变的个体中的标准的追踪是开始进行结肠镜检查，在发现息肉的地方进行息肉切除术，并且如果息肉太多难以通过内窥镜检查除去，那么部分地或者全部地切除结肠（结肠切除术）。具有FAP的大部分个体将到25岁时经历结肠切除术。
很大比例的散发的腺瘤性息肉也包含APC基因中的突变。参见，Rutsgi,2010,“Thegeneticsofhereditarycoloncancer,”Genes&Development21:2525-2538。在缺失CRC的任何家族史的情况下，通常通过结肠镜检查诊查存在症状如直肠出血的个体。发现具有大量息肉的个体或者在切除术之后息肉复发的个体通常也将进行遗传上的测试。如果发现了APC基因中的突变，结肠切除术是推荐的治疗。
即使在结肠切除术之后，易患腺瘤性息肉的个体仍具有在他们的胃肠道的未切除的部分中发展成腺瘤性息肉的增加的风险。接着这些个体定期地进行内窥镜检查和对上胃肠道中的腺瘤病的评估。根据Spigelman分类法划分个体的阶段，所述分类法依赖于四种参数来评估腺瘤病的程度或者严重性：息肉的数目、息肉的大小、息肉的组织学和息肉发育异常（生长异常）的程度。参见，Spigelman等人,1989,“UppergastrointestinalcancerinpatientswithFamilialAdenomatousPolyposis,”Lancet2:783-785。对于十二指肠息肉病，Spigelman分类法基于四种参数将个体归类到五个阶段，阶段0至IV的一个中，如表1所示。
阶段I:1-4分;阶段II:5-6分;阶段III:7-8分;阶段IV:9-12分。
具有FAP的114个个体的十年的研究揭示Spigelman阶段IV患者具有发展成十二指肠癌的36.4%的风险，相比，归类到阶段0至III中的患者具有0%至2.4%的风险。参见，Groves等人，2002,“Duodenalcancerinpatientswithfamilialadenomatouspolyposis(FAP):resultsofa10yearprospectivestudy,”Gut50:636-641。
以前已经显示具有CRC的约70%的患者具有升高的PG水平。如下面的实施例中显示，申请人现在已经发现在具有FAP的还没有发展成CRC的个体中，以及在显示出散发的腺瘤性息肉的约20%的患者中，可以提高PG的血液水平。虽然不是意在受任何操作理论约束，但是认为PG是息肉转变成恶性肿瘤的机制的一部分。如在FAP，APCΔ14的小鼠模型中证明的，认为抗-PG的抗体结合PG干扰了这种转变。用抗-PG的抗体进行的预防性治疗给出了避免或者延迟大手术、显著地提高生活质量的可能性。
预防的方法
本公开提供了在易患腺瘤性息肉的患者中预防胃肠癌，包括CRC的方法。一般，该方法包括将能有效地提供治疗益处的一种或者多种抗-PG抗体的量施用于这种患者。在后面的章节中详细地描述了一般的抗-PG抗体和本方法中使用的具体的抗-PG抗体。
用于预防的“受试者”或者“患者”优选地是哺乳动物如非灵长类（例如，奶牛、猪、马、猫、狗、大鼠等）或者灵长类（例如猴或者人）。施用的抗-PG抗体应当是对待治疗的动物种类特异的。为治疗人类受试者，抗-PG抗体应当特异地结合人前胃泌素（本文称作“抗-hPG抗体”，在下面详细描述）。
受试者或者患者可以是人，如成年患者或者儿科患者。合适的受试者是易患腺瘤性息肉，并且因此具有发展成CRC或者胃肠癌的增加的可能性的个体，其包括具有CRC家族史的个体，已经检测到了或者除去了腺瘤性息肉的个体，具有FAP的个体，已经进行了结肠切除术以除去息肉的个体，和具有APC基因中的突变的个体。
可以将抗-PG治疗与一种或者多种其他的治疗组合施用或者辅助其他的治疗施用以预防或者延迟胃肠癌，包括CRC。其他的治疗包括但不限于化学疗法治疗、放射疗法、外科切除术、抗体疗法和用本文描述的第二种试剂的治疗。本文提供的组合治疗涉及将至少两种治疗施用于患者，第一种治疗是用至少一种抗-PG抗体进行的抗-PG治疗，并且第二种治疗是用治疗性或者预防性试剂或者程序治疗。
可以将抗-PG治疗与外科手术，如外科切除术组合。可以与胃肠道的受影响的部分的外科切除术组合,将抗-PG抗体施用于发现具有，或者易患癌前期息肉的受试者，如具有家族性腺瘤性息肉的个体。可以同时启动抗-PG治疗与外科切除术，或者在外科切除术之前或者之后启动抗-PG治疗。
也可以将抗-PG治疗与放射疗法组合。放射疗法是使用来自x-射线、γ射线、中子、质子和其他来源的高能辐射杀死癌细胞和缩小肿瘤。放射可以来自机体之外的机器（外线束放射疗法），或者可以来自放置于机体的癌细胞附近的放射性物质（内照射治疗或近距离放射疗法）。全身放射治疗使用放射性物质，如在整个机体中的血液到组织中行进的经放射标记的单克隆抗体。放射治疗也可以被称作辐射和放射疗法。其他的放射治疗包括三维适形放射治疗(3D-CRT)和调强放射治疗(IMRT)。其他的放射治疗也是可能的。
当将抗-PG抗体的治疗与第二种试剂组合时，第二种试剂可以是化学治疗剂。化学疗法是使用杀死（细胞毒性的或者杀细胞的）癌细胞或者阻止癌细胞的生长（细胞生长抑制的）小分子药物。化学治疗剂包括但不限于，毒素，也称作细胞毒素或者细胞毒性剂，其包括对细胞的生存力有害的任何试剂，含有化学治疗化合物的试剂和脂质体或者其他囊泡。合适的化学治疗剂的实例包括但不限于1-去氢睾酮、5-氟尿嘧啶氨烯咪胺、6-巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤、放线菌素D、阿霉素、阿地白介素、烷化剂、别嘌醇钠、六甲蜜胺、阿米斯丁、阿那曲唑、安曲霉素(AMC)、抗有丝分裂剂、顺二氯二胺铂(II)(DDP)（顺铂）、二氨二氯铂、蒽环类、抗生素、抗代谢药、天冬酰胺酶、活的BCG（膀胱内的）、倍他米松磷酸钠和醋酸倍他米松、比卡鲁胺、硫酸博来霉素、白消安、calciumleucouorin、卡奇霉素、卡培他滨、卡铂、罗氮芥(CCNU)、卡莫司汀(BSNU)、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、秋水仙碱、共轭雌激素类、环磷酰胺、Cyclothosphamide、阿糖胞苷、细胞松弛素B、环磷酰胺、达卡巴嗪、放线菌素D、更生霉素（以前的放线菌素）、盐酸柔红霉素、柠檬酸柔红霉素、地尼白介素2、右雷佐生、二溴甘露醇、二羟基炭疽菌素二酮、多西他赛、甲磺酸多拉司琼、盐酸阿霉素、屈大麻酚、大肠杆菌天冬酰胺酶、依米丁、红细胞生成素-α、欧文氏菌属L-天冬酰胺酶、酯化雌激素、雌二醇、雌氮芥磷酸钠、溴化乙锭、炔雌醇、羟乙磷酸、依托泊苷citrororum因子、磷酸依托泊苷、非格司亭、氟尿苷、氟康唑、磷酸氟达拉滨、氟尿嘧啶、氟尿嘧啶、氟他胺、亚叶酸、盐酸吉西他滨、糖皮质激素、醋酸高锡林、短杆菌肽D、盐酸格拉司琼、羟基脲、盐酸伊达比星、异环磷酰胺、干扰素α-2b、盐酸伊立替康、来曲唑、亚叶酸钙、醋酸亮丙瑞林、盐酸左旋咪唑、利多卡因、罗氮芥、美登醇、盐酸氮芥、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、盐酸美法仑、巯嘌呤、美司钠、氨甲喋呤、甲睾酮、光辉霉素、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、奥曲肽醋酸盐、盐酸昂丹司琼、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸二钠、喷司他丁、盐酸毛果芸香碱、霉菌素（plimycin）、聚苯丙生20和卡莫司汀植入物、卟吩姆钠、普鲁卡因、盐酸丙卡巴肼、普萘洛尔、利妥希玛、沙格司亭、链脲霉素、他莫昔芬、泰素、喃氟啶、替尼泊苷、tenoposide、睾内脂、丁卡因、噻替派、苯丁酸氮芥、硫鸟嘌呤、噻替派、盐酸拓扑特肯、枸橼酸托瑞米芬、司徒曼布、维甲酸、戊柔比星、硫酸长春碱、硫酸长春新碱和酒石酸长春瑞滨。
也可以将抗-PG抗体与化学治疗剂的组合一起施用。化学治疗剂的示例性的组合包括5-氟尿嘧啶(5FU)与甲酰四氢叶酸（亚叶酸或者LV)组合；卡培他滨与尿嘧啶(UFT)以及甲酰四氢叶酸组合；喃氟啶与尿嘧啶(UFT)以及甲酰四氢叶酸组合；奥沙利铂与5FU组合，或者与卡培他滨组合；伊立替康与卡培他滨组合，丝裂霉素C与5FU，伊立替康或者卡培他滨组合。本文公开的化学治疗剂的其他组合也是可能的。
可以将用于患有CRC的患者的化学治疗剂的标准给药方案用于本公开的方法中。已知在相关的领域中，在临床试验中已经标准化了使用不同的化学治疗剂的组合进行的用于结直肠癌的化学疗法方案。此类方案通常通过首字母缩写已知并且包括5FUMayo、5FURoswellPark、LVFU2、FOLFOX、FOLFOX4、FOLFOX6、bFOL、FUFOX、FOLFIRI、IFL、XELOX、CAPOX、XELIRI、CAPIRI、FOLFOXIRI。参见，例如Chau,I.等人,2009,Br.J.,Cancer100:1704-19,和Field,K.等人,2007,WorldJ.Gastroenterol.13:3806-15，所述文献都被并入本文作为参考。
也可以将抗-PG抗体与其他的抗体组合使用，所述抗体包括但不限于，直接地或者间接地杀死癌细胞、减缓或者阻止癌细胞生长的单克隆抗体。此类抗体可以通过多种不同的机制起作用。例如，某些抗体可以标记癌细胞用于通过患者的免疫系统经抗体-依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)或者其他的机制攻击。相信结合B细胞上发现的CD20抗原的利妥昔单抗和结合17-1A抗原的依决洛单抗以这种方式起作用。其他的抗体结合癌细胞存活和/或生长需要的抗原，并且改变或者抑制所述抗原的功能。相信很多抗体以这种方式起作用，所述抗体包括，例如都结合EGF受体(EGFR)的西妥昔单抗和panitumumab和结合生长因子VEGF的贝伐单抗其他的机制也是可能的，并且特定的抗体可能能够通过一种或者以上的作用机制起作用。然而，可以将其他的抗体缀合到放射性的或者化学毒性的部分上并且将它们靶向癌细胞，所述癌细胞优先地表达所述抗体特异识别的抗原。
也可以将抗-PG抗体与非类固醇类消炎药(“NSAIDs”)组合施用。例如，塞来考昔，或者4-[5-(4-甲基苯基)-3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯磺酰胺，是一种已经显示减少了FAP患者中的腺瘤性息肉的NSAID。
可以将抗-PG抗体和第二种试剂同时，连续地或者分别地施用。如本文使用的，例如在相同的患者就诊期间，如果在同一天将抗-PG抗体和第二种试剂施用于患者，那么认为它们被连续地施用。连续施用可以相距1、2、3、4、5、6、7或者8小时发生。相反，如果不在同一天将抗-PG抗体和第二种试剂施用于患者，那么认为它们被分别地施用，例如可以以1天、2天或者3天、一周、2周或者以数月的间隔施用抗-PG抗体和第二种试剂。在本公开的方法中，本公开的抗-PG抗体的施用可以先于或者后于第二种试剂的施用。
作为非限制性实例，可以将抗-PG抗体和第二种试剂同时施用一段时间，紧接着第二段时间内交替施用抗-PG抗体和第二种试剂。
药物组合物和试剂盒
可以将用于本公开的方法中的抗-PG抗体配制到组合物中。任选地，该组合物可以包含一种或者以上的额外的试剂，如上文描述的第二种试剂。通常作为无菌的药物组合物的部分提供该组合物，所述药物组合物将通常包括可药用的载体。这种组合物可以是任何合适的形式（取决于将它施用于个体的所希望的方法）。
可以通过多种途径将抗-PG抗体施用于个体，所述途径为例如经口地、经皮肤地、皮下地、鼻内地、静脉内地、肌内地、眼内地、局部地、鞘内地和脑室内地施用。在任一给定的情况下施用的最适合途径将取决于特定的抗体，受试者，和疾病的性质和严重性以及受试者的身体状况。可以将抗体配制成水溶液并且通过皮下注射施用。在本公开中使用的可药用的载体可以采取多种形式，其取决于例如待治疗的病症或者施用的途径。
药物组合物可以以单位剂量形式方便地存在，所述单位剂量形式的每一剂量含有抗-PG抗体的预定的量。这种单位的每一单位剂量可以含有例如5mg至5g，例如10mg至1g，或者20至50mg的抗-PG抗体。药物组合物可以包含能结合一种以上PG表位的抗-PG抗体。备选地，药物组合物可以包含抗-PG抗体的组合，每种抗体能结合不同的PG表位。
可以通过混合具有所希望程度的纯度的抗体与本领域通常使用的任选的可药用载体，赋形剂或者稳定剂（本文全部称作“载体”），即缓冲剂、稳定剂、防腐剂、等渗剂、非离子型去污剂、抗氧化剂和其他的多种添加剂，将本公开的药物组合物制备成用于贮存的冻干的制剂或者水溶液。参见，例如，Remington’sPharmaceuticalSciences,16thedition(Osol,ed.1980)。此类添加剂在使用的剂量和浓度下必须是对接受者无害的。
缓冲剂帮助维持pH在近似生理条件的范围内。它们可以以从约2mM至约50mM的浓度存在。本公开中使用的合适的缓冲剂包括有机酸和无机酸以及它们的盐，如柠檬酸盐缓冲液（例如，柠檬酸单钠-柠檬酸二钠混合物，柠檬酸-柠檬酸三钠混合物，柠檬酸-柠檬酸单钠混合物等）、琥珀酸盐缓冲液（例如，琥珀酸-琥珀酸单钠混合物，琥珀酸-氢氧化钠混合物，琥珀酸-琥珀酸二钠混合物等）、酒石酸盐缓冲液（例如酒石酸-酒石酸钠混合物，酒石酸-酒石酸钾混合物，酒石酸-氢氧化钠混合物等）、延胡索酸盐缓冲液（例如，延胡索酸-延胡索酸单钠混合物，延胡索酸-延胡索酸二钠混合物，延胡索酸单钠-延胡索酸二钠混合物等）、葡糖酸盐缓冲液（例如，葡糖酸-葡糖酸纳混合物，葡糖酸-氢氧化钠混合物，葡糖酸-葡糖酸钾混合物等）、草酸盐缓冲液（例如，草酸-草酸钠混合物，草酸-氢氧化钠混合物，草酸-草酸钾混合物等）、乳酸盐缓冲液（例如，乳酸-乳酸钠混合物，乳酸-氢氧化纳混合物，乳酸-乳酸钾混合物等）和乙酸盐缓冲液（例如，乙酸-乙酸钠混合物，乙酸-氢氧化钠混合物等）。此外，可以使用磷酸盐缓冲液，组氨酸缓冲液和三甲胺盐如Tris。
可以加入防腐剂以减缓微生物生长，并且可以以0.2%-1%(w/v)的量加入防腐剂。本公开中使用的合适的防腐剂包括苯酚、苯甲醇、间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、十八基二甲基苄基氯化铵、苯扎铵的卤化物（例如，氯化物、溴化物和碘化物）、氯化六甲双铵，和对羟基苯甲酸烷基酯，如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯、儿茶酚、间苯二酚、环己醇以及3-戊醇。可以加入有时被称作“稳定剂”的等渗剂以确保本公开的液体组合物的等渗性，并且所述等渗剂包括多羟基糖醇，例如三羟基或者更高羟基的糖醇，如甘油、赤藓糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨醇和甘露醇。稳定剂指的是一大类的赋形剂，其在功能上可以是填充剂或者是溶解治疗剂或者有助于防止变性或者附着到容器壁上的添加剂。典型的稳定剂可以是多羟基糖醇（上文列举的）；氨基酸如精氨酸、赖氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、丙氨酸、鸟氨酸、L-亮氨酸、2-苯丙氨酸、谷氨酸、苏氨酸等，有机糖或者糖醇，如乳糖、海藻糖、水苏糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、核糖醇、肌糖醇（myoinisitol）、半乳糖醇、甘油等，包括环多醇如肌醇；聚乙二醇；氨基酸聚合物；含有硫的还原剂，如尿素、谷胱甘肽、硫辛酸、巯基乙酸钠、硫代甘油、α-硫代甘油和硫代硫酸纳；低分子量多肽（10个或者更少残基的肽）；蛋白质如人血清白蛋白、牛血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮的单糖，如木糖、甘露糖、果糖、葡萄糖；二糖如乳糖、麦芽糖、蔗糖，和三糖如棉子糖以及多糖，如葡聚糖。稳定剂可以以每一份活性蛋白质0.1至10,000倍重量存在。
可以加入非离子型表面活性剂或者去垢剂（也称作“润湿剂”）以帮助溶解治疗剂以及保护治疗蛋白质免于搅拌诱导的聚集，所述表面活性剂或者去垢剂也允许待暴露的制剂剪切表面受压迫而不会引起蛋白质的变性。合适的非离子型表面活性剂包括聚山梨醇酯(20,80等)、polyoxamers(184,188等)、Pluronic多元醇、聚氧乙烯山梨聚糖单醚( 等)。可以以约0.05mg/ml至约1.0mg/ml，例如约0.07mg/ml至约0.2mg/ml存在非离子型表面活性剂。
额外的混杂赋形剂包括填充剂（例如淀粉）、螯合剂（例如EDTA)、抗氧化剂（例如，抗坏血酸、甲硫氨酸、维生素E）和共溶剂。
抗-PG抗体可以单独被施用，作为一种或者以上的抗-PG抗体的混合物被施用，与用于预防CRC的其他试剂混合或者组合被施用，或者辅助治疗CRC。上文提供了合适的组合和辅助治疗的实例。
本公开包含药物试剂盒，其含有本公开的抗-PG抗体（包括抗体缀合物）。该药物试剂盒是包含抗-PG抗体组合物（例如，以冻干的形式或者作为水溶液）和以下物质中的一种或者多种的包装：
第二种试剂，例如如上文描述的那些；
用于施用抗-PG抗体组合物的装置，例如笔、针和/或注射器；和
药用级的水或者缓冲液来重悬抗体，如果抗体是冻干的形式的话。
可以分别包装抗-PG抗体的各个单位剂量，并且该试剂盒可以含有一个或者多个单位剂量（例如，两个单位剂量、三个单位剂量、四个单位剂量、五个单位剂量、八个单位剂量、十个单位剂量或者更多）。在具体的实施方案中，将一个或者多个单位剂量各自放置于注射器或者笔中。
有效剂量和治疗方案
将本公开的抗-PG抗体以足够或者有效地提供治疗益处的量施用于受试者。在预防胃肠癌，包括CRC的背景下，如果在易患腺瘤性息肉的受试者中实现了以下效果中的一种或者多种，那么可以推断具有治疗益处：受试者中的息肉数目和/或尺寸减少或者不增加；缺少恶性肿瘤，包括在受试者具有或者以前具有息肉时；血浆或者血清PG水平降低或者不升高；根据Spigelman的分类法，从息肉的较晚的晚期消退到息肉的较早的晚期（例如，从阶段IV消退至阶段III，从阶段III消退至阶段II，从阶段II消退至阶段I)；缺少从Spigelman阶段IV的息肉至胃肠癌的进展。可以以有效剂量将包含抗-PG抗体的药物组合物施用于个体（例如，人类受试者）。
虽然完全预防胃肠癌是所希望的，但是其对于存在治疗益处不是需要的。实际上，由于患有FAP的大部分患者到25岁时需要大的外科手术，所以减缓疾病的进展以便可以延迟外科手术改进了生活质量。此外，在胃肠癌，如CRC发病中的任何延迟提供了治疗益处。
在一些背景下，根据本领域技术人员的知识，治疗益处可以与一种或者以上的替代端点相关。通过实例并且不作为限制，可以随着时间测量受试者中的血浆和/或血清PG浓度，具有PG水平的降低，或者低于阈值水平的水平，例如低于约50pM、40pM、30pM、20pM、10pM或5pM的水平指示治疗益处。
使用内镜技术，如结肠镜检查，以及本领域技术人员已知的其他方法可以测量息肉大小和数目。
尽管结合全部游离的PG可能是所希望的，但是其对实现治疗效果不是需要的。游离的PG指的是可用于被抗-PG抗体结合的PG。在一定程度上，降低全身的，特别是体液中的，或者别处的息肉中的或者附近的游离PG浓度至更有限的程度也可以是有效的。其中通过施用抗-PG抗体组合物可以降低游离的PG浓度的示例性的组织和体液包括，但不限于从患者中除去的息肉或者肿瘤样品、腹水、来自胸腔积液的液体、脑脊液、淋巴液、血液、血浆、血清和其他的组织。使用ELISA技术或者本领域技术人员熟悉的其他技术可以定量这些组织或体液中的一种或者多种中的PG浓度。
根据本领域技术人员的知识，可以滴定患者中的抗-PG抗体的剂量以便在施用之后在预定的时间将目的组织或者体液中的游离PG浓度降低至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或者100%、或者约5%-10%、约10%-15%、约15%-20%、约20%-25%、约25%-30%、约30%-35%、约35%-40%、约40%-45%、约45%-50%、约50%-55%、约55%-60%、约60%-65%、约65%-70%、约70%-75%、约75%-80%、约80%-85%、约85%-90%、或者约90%-95%，或者游离的PG浓度的百分数的降低在前述值的任一值之间。
施用的抗-PG抗体的量将取决于多种因素，包括受试者中发现的腺瘤性息肉的数目和大小，施用的形式、途径和位点，治疗方案（例如，是否使用第二种治疗剂），待治疗的特定受试者的年龄和身体状况，患者对抗-PG抗体的敏感度。本领域的技术人员可以很容易地确定合适的剂量。最终，医师将确定待使用的合适的剂量。可以通常适当地重复这种剂量。根据正常的临床实践，如果发生了副作用，那么可以改变或者减少剂量的量和/或频率。通过使用本领域技术人员已知的常规技术监测治疗进展可以确定合适的剂量和治疗方案。
最初可以从体外测定估计有效剂量。例如，可以配制在动物中使用的起始剂量以实现抗-PG抗体的循环血液或者血清浓度，其位于或者高于体外测量的抗体对前胃泌素的亲和力。考虑特定抗体的生物利用率，计算实现这种循环血液或者血清浓度的剂量在本领域的技术人员的能力之内。为了指导，读者参考了Fingl&Woodbury,“GeneralPrinciples”inGoodmanandGilman’sThePharmaceuticalBasisofTherapeutics，Chapter1,latestedition，PagamononPress，并且在此引用该参考。
从体内数据，如动物模型可以估计起始剂量。本领域已知用于测试化合物延迟或者防止胃肠道的肿瘤，包括CRC肿瘤发展的功效的动物模型。此外，在下面的实施例描述了FAP的动物模型。一般的技术人员可以常规地修改这种信息以确定适合人施用的剂量。
在具体的实施方案中，通过治疗之前的几天至几周测量几次个体的血清或者血浆PG浓度，并且计算将饱和的抗-PG抗体的量（即，将足够结合全部PG的量），可以确定用于个体受试者的静脉内剂量。技术人员将理解，实现对PG的给定的血清或者血浆浓度饱和需要的任一特定抗体的量将部分地取决于特定抗体的亲和常数。已知用于计算目的特异抗-PG抗体的饱和量的方法。
为确保饱和，可以施用大于计算的饱和量的量，例如可以施用比计算的饱和量大至少2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍或者甚至10-倍的量。如本领域已知的，对于除了静脉内以外的施用模型，可以基于药物代谢动力学和生物利用率调整该量。
每单次（例如快速浓注）施用，多次施用或者连续（例如灌输）施用，本公开的抗-PG抗体的有效剂量可以从约0.001至约75mg/kg，或者每单次施用，多次施用或者连续施用实现0.01-5000μg/ml的血清浓度，或者其中施用的任何有效范围或者值取决于待治疗的病症，施用的途径以及受试者的年龄、体重和状况。在某些实施方案中，每次剂量可以从约0.1mg/kg至约0.5mg/kg；约0.25mg/kg至约0.75mg/kg；约0.5mg/kg至约1mg/kg；约1mg/kg至约2mg/kg；约1.5mg/kg至约2.5mg/kg；约2mg/kg至约3mg/kg；约2.5mg/kg至约3.5mg/kg；约3mg/kg至约4mg/kg；约3.5mg/kg至约4.5mg/kg；约4mg/kg至约5mg/kg；约5mg/kg至约7mg/kg；约6mg/kg至约8mg/kg；约7mg/kg至约9mg/kg；约8mg/kg至约10mg/kg；约10mg/kg至约15mg/kg；约12.5mg/kg至约17.5mg/kg；约15mg/kg至约20mg/kg；约17.5mg/kg至约22.5mg/kg；约20mg/kg至约25mg/kg；约22.5mg/kg至约27.5mg/kg；约25mg/kg至约30mg/kg；约30mg/kg至约40mg/kg；约35mg/kg至约45mg/kg；约40mg/kg至约50mg/kg；约45mg/kg至约55mg/kg；约50mg/kg至约60mg/kg；约55mg/kg至约65mg/kg；约60mg/kg至约70mg/kg；约65mg/kg至约75mg/kg。其他的剂量范围也是可能的。
施用的量、频率和持续时间将取决于多种因素，如患者的年龄、体重和疾病状况。在检测到了和/或除去了癌前期的腺瘤性息肉的受试者和诊断有FAP且已经显示了息肉的受试者中需要抗-PG治疗。在具有FAP的人中，息肉一般在第二十年开始出现。可以在具有FAP的受试者中检测到了息肉时或者之前启动抗-PG治疗。对于具有散发的腺瘤性息肉的受试者，可以在检测到了息肉时启动抗-PG治疗。也可以在已经除去了至少一个息肉的受试者中启动抗-PG治疗，因为所述受试者是处在发展成更多的息肉和胃肠癌，包括CRC的增加的风险中。
用于施用的治疗方案可以持续2周至无限期。任选地，该治疗方案提供了重复施用，例如每日一次，每日两次，每两天、每三天、每五天、每一周、每两周或每个月一次。可以以相同的剂量或者以不同的剂量重复施用。可以重复施用一次、两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次、十次或者以上。可以将抗-PG抗体的有效量作为单次剂量或者在治疗方案的疗程中施用。对于易患腺瘤性息肉的患者，抗-PG治疗的持续时间优选地是长的，例如数年的疗程，但可以较短，例如一至数月或者至一年。
筛选用于追踪或者治疗的患者的方法，和监测患者以确定治疗效果的方法
尽管不希望受任何特定的操作理论约束，但相信PG的升高的水平与腺瘤性息肉从良性转化至恶性相关。如在下面的实施例6中显示的，具有多发性息肉的受试者具有升高的PG水平，而没有息肉的受试者具有血清PG的低的或者检测不到的水平。基于这种观察，可以将PG的血浆和/或血清水平用于鉴定用于追踪或者治疗的患者，以及用于监测在经历治疗的患者中预防的有效性。
在具有FAP或者散发的腺瘤性息肉史的个体中监测PG水平用于鉴定接着有必要进行结肠镜检查的受试者，以及需要抗-PG治疗的患者。用于易患腺瘤性息肉的个体的标准护理是每3至5年的间隔进行内窥镜检查。测试之间的这种间隔可以意味着，在某些个体中，在进行追踪内窥镜检查时已经发展成了很多息肉或者已经开始有癌了。容易以更频繁的间隔进行PG水平的简单血液测试并且其可以鉴定这些个体，所述个体应当尽早经历内窥镜检查（例如结肠镜检查）或者是抗-PG治疗的候选者。
可以监测诊断有FAP的个体或者以前已经检测到了息肉的个体以测定体液中，如全血，血浆或者血清中相对于适合的基线的PG水平，或者浓度。因此，测量来自个体的样品中的PG水平并且然后与基线PG水平比较。
当具有FAP或者散发的腺瘤性息肉史的受试者中的PG水平相对于受试者以前的测量结果不变或者等于与受试者比较的相关群体的基线水平时，受试者被评分为不需要进一步的追踪。相反，当PG浓度高于基线，或者在一段时间中在受试者中可见升高时，受试者是进一步追踪，包括例如结肠镜检查的候选者和抗-PG治疗的候选者。
为监测治疗功效的目的，可以在特定的时间点测量接受抗-PG治疗的患者中的血液、血浆或者血清PG水平，并且基于测量的水平是否高于或者低于基线PG水平将所述测量的PG水平用作治疗是否有效的指标。医疗服务人员可以使用这种信息来确定是否继续施用抗-PG抗体或者调整治疗。如上文描述的，可以将这些方法单独使用或者与其他的治疗组合使用，用于监测抗-PG治疗。
在本方法的一些实施方案中，可以测量接受抗-PG抗体治疗的患者的一种或者多种体液，如全血、血浆、血清中的PG水平并且然后将其与基线水平比较。浓度随着时间降低和/或在特定的时间点低于阈值的测量水平指示具有功效。浓度随着时间升高和/或高于基线的PG水平指示缺少治疗功效。通常，PG水平是样品中的PG浓度，以摩尔量（M）或者摩尔/升(mol/liter)表示。
基线水平可以是单一数值或者数值范围。基线可以基于取自患者的一次或者多次的测量结果或者基于来自个体群体的样品中的PG的测量结果。在本方法的一些实施方案中，基线是在一个或者多个间隔，例如在抗-PG治疗启动之前，在治疗的疗程期间，或者已经终止治疗之后从相同患者取得的PG水平。在一些实施方案中，基线可以是具有与经历监测的那些个体相似的特征的个体群体的平均PG水平。这种特征可以包括，但不必要限制于性别、年龄、APC基因中突变的位置、Spigelman分类法中的阶段、手术史、抗-PG治疗或者其他的治疗。在一些实施方案中，基线是特定的PG水平，如约50pM，约40pM，约30pM，约20pM，约10pM，约5pM，约2pM，约1pM，或者甚至更低。在一些实施方案中，基线是一个范围。
使用本领域技术人员熟悉的技术如，但不限制于RIA和ELISA可以测量PG水平。在具体的实施方案中，使用夹层ELISA可以测量PG水平，所述夹层ELISA具有靶向前胃泌素的N-末端的一种抗-PG抗体和靶向前胃泌素的C-末端的第二种抗-PG抗体。在后面的章节中描述了用于这种夹层测定的示例性N-末端和C-末端抗-PG抗体。在这种测定中，准备一种表面，如96孔板的孔以结合已知量的第一种“捕获”的N-末端或C-末端抗-PG抗体。测试样品应用到该表面上之后是温育期。然后洗涤表面并且应用含有第二种“检测”的抗-PG抗体的溶液，其中检测抗体结合PG的不同表位（例如，如果捕获抗体是C-末端抗-PG抗体，将N-末端抗-PG抗体用作检测抗体，反之亦然）。然后直接地（例如，如果检测抗体被结合到可检测的标记上）或者间接地（通过与检测抗-PG抗体结合的经标记的第二抗体）测量PG水平。为了这种测定，必须使用过量的抗体以便结合和定量全部PG。在实施例1中提供了用于测量血浆和/或血清PG水平的具体的夹层测定法。
可以以不同间隔进行多次测量，并且然后作图以确定是否存在一种趋势。在非限制性的实例中，当患者接受了抗-PG抗体，可以以每周、每月、或者每年的间隔测定PG水平。其他的间隔也是可能的。
在涉及使用抗-PG抗体进行的一轮治疗的实施方案中，在疗程期间也可以进行一次或者多次测量以便可以估计抗体对PG水平的效应。在其他的这种实施方案中，当取样期间在患者中存在剩余的抗-PG抗体，由于抗体隔离了PG，该数据可以显示PG水平的降低，随着这种效应减退，接着PG水平升高，如果治疗是有效的，随后PG水平下降。在另一个实施方案中，在估计已经从患者中清除了抗-PG抗体以便这种抗体对PG的结合不影响PG浓度测量的准确性之后可以进行治疗后的测量。
因为进食通常增加胃泌素的合成和分泌，它也可以引起血液PG水平的瞬间升高，其可以干扰被监测的患者中的PG水平的准确测量。为避免这种效应，特别地当将要测定血液样品中的PG浓度时，可以从禁食之后的患者中取得样品。
抗-PG抗体
本文公开的方法中使用的抗体是在胃泌素基因的其他产物中特异地结合前胃泌素的那些抗体。参考图1，人胃泌素基因被翻译成101个氨基酸的多肽，称作前胃泌素原，其含有信号序列（下划线），信号序列被切割，产生人前胃泌素，一种80个氨基酸的多肽。依次地，前胃泌素被切割以产生在序列中相应于前胃泌素残基38至71的序列的一种34个氨基酸的产物，然后所述34个氨基酸的产物在它的羧基末端用甘氨酸残基延伸，产生甘氨酸延伸的G34(“G34-Gly”)。这种切割的副产物是6个氨基酸的肽，称作C末端侧翼肽或者CTFP，其在序列中对应于前胃泌素的残基75到80。然后G34-Gly被进一步切割以产生在序列中对应于前胃泌素的残基55到71的17个残基的多肽，并且被称作G17-Gly。除去G34-Gly和G17-Gly的C-末端甘氨酸，接着C-末端酰胺化，分别产生G34和G17，它们都被C-末端酰胺化。
如本文使用，如果抗体与全长的前胃泌素结合，但是根本不结合CTFP、酰胺化胃泌素或者甘氨酸延伸的胃泌素，那么所述抗体对hPG是“高度特异的”或者“高度特异地结合”hPG，并且如果抗体显示与hPG结合比与CTFP以及胃泌素基因其他的产物结合至少强约5-倍（如在标准结合测定法中测量），那么其是“对hPG特异”或者“特异地与hPG结合”。在实施例2中提供了可以用于评估特定的抗-hPG抗体的特异性的具体的ELISA测定法。
这种高度特异的和/或特异的抗-hPG抗体（本文指的是“抗hPG的抗体”）可以是多克隆的(“抗-hPGPAbs”)或者单克隆的(“抗-hPGMAbs”)，尽管对于治疗应用和某些情况下，诊断或者其他的体外应用，单克隆抗体是优选的。
抗-hPG抗体结合的表位不是关键的。有用的抗-hPG抗体可以结合hPG的N-末端区域，hPG的C-末端区域或者hPG的不同区域。近来，已经发现，至少对单克隆的抗-hPG抗体，用于产生抗-hPG抗体的抗原的选择是重要的(见，在2010年10月15日提交的国际申请号PCT/EP2010/006329和在2010年10月15日提交的美国申请号12/906,041，将所述国际申请和美国申请的公开以及其具体公开的抗-hPG抗体并入本文作为参考；在下文中其分别指的是’329和’041申请)。如在’329和’041申请中公开的，不是来自hPG的所有抗原都刺激产生在生理条件下特异地结合hPG的单克隆抗体。事实上，已经用于成功产生多克隆抗-hPG抗体的某些抗原，如全长重组的hPG(见,例如,Singh的WO08/076454)和相应于hPG的C-端的最后十个氨基酸的肽(见Hollande等人的WO07/135542)未能产生单克隆抗体。注意的是在’329和’041申请中，已经鉴定了在hPG序列中抗原性N-末端和C-末端的序列，其可以用于产生特异结合hPG的单克隆抗体。有趣的是，抗原序列不必限制于对hPG独特的hPG序列区。具有与胃泌素基因的其他产物，例如G17、G34和CTFP共有序列区的肽抗原产生了不仅结合hPG，还特异地结合hPG的单克隆抗体。
使用具有相应于hPG的N-末端区域的序列的肽抗原可获得的抗-hPG抗体和/或与hPG的N-末端区域结合的抗-hPG抗体在本文称作“N-末端抗-PG抗体”。可以用于构建适合获得特异地针对hPG的多克隆和单克隆抗体的免疫原的具体的示例性hPG抗原区域相应于hPG的残基1至14：WKPRSQQPDAPLG(SEQIDNO:25)。在下面的表2A和实施例部分中提供了可用于获得N-末端抗-hPG抗体的示例性免疫原，以及用这些示例性免疫原获得的N-末端抗-hPG单克隆抗体的CDR、VH以及VL序列：
使用具有相应于hPG的C-末端区域的序列的肽抗原可获得的和/或与hPG的C-末端区域结合的抗-hPG抗体在本文称作“C-末端抗-hPG抗体”。可以用于构建可用于获得多克隆和单克隆C-末端抗-hPG抗体的免疫原的具体的示例性hPG抗原区域相应于hPG的残基55至80：QGPWLEEEEEAYGWMDFGRRSAEDEN(SEQIDNO:27)。在下面的表2B和实施例部分中提供了包括可用于获得C-末端抗-hPG抗体的该抗原的示例性免疫原，以及用这些示例性免疫原获得的C-末端抗-hPG单克隆抗体的CDR和VH以及VL序列。
分别使用在Laune等人.(2002)J.Immunol.Methods267:53–70和Laune(1997)J.Biol.Chem.272:30937–30944(也见,’329申请的实施例6)中描述的SPOT技术和丙氨酸扫描对在表2A和2B中提供的示例性的抗-hPG的单克隆抗体MAb1-MAb23结合的具体表位作图。
在SPOT技术中，产生了跨越推测表位的15个氨基酸肽并且将其点样到硝酸纤维素膜上，然后用测试抗体探测硝酸纤维素膜以确定抗体识别的最小表位序列。使用丙氨酸扫描确定在表位中对抗体结合关键的残基。将推测的表位中的每个残基一个接一个地突变成丙氨酸，并且然后用测试抗体探测含有丙氨酸的肽。
对于N-末端抗-hPG单克隆抗体MAbs1-4和15-20，表位包含至少以下序列：DAPLG(SEQIDNO:28)、PDAPLG(SEQIDNO:29)、PRSQQPD(SEQIDNO:30)、WKPRSQQPD(SEQIDNO:31)或者WKPRSQQPDAPLG(SEQIDNO:32)，如下表3A所示。
对于C-末端抗-hPG单克隆抗体MAbs5-7,9-12,14和21-23，表位包含至少以下序列：FGRR(SEQIDNO:33)、MDFGR(SEQIDNO:34)、AEDEN(SEQIDNO:35)和GWMDFGRR(SEQIDNO:36)，如下表3B所示。
表位作图实验显示抗-hPG的MAb2和MAb4结合相同的表位；抗-hPG的MAb1和MAb3结合近似相同的表位；MAb17、MAb18、MAb19和MAb20结合近似相同的表位；MAb15和MAb16结合近似相同的表位;抗-hPG的MAb5、MAb6、MAb7、MAb9和MAb12结合相同的表位，并且其与抗-hPGMAb10结合相同的表位;并且抗-hPGMAb11和MAb14结合近似相同的表位。
在本文描述的方法和试剂盒中有用的N-末端抗-PG抗体的具体的实施方案包括与表位结合的抗体，所述表位包括hPG的残基10至14(SEQIDNO:28)、hPG的残基9至14(SEQIDNO:29)、hPG的残基4至10(SEQIDNO:30)、hPG的残基2至10(SEQIDNO:31)或者hPG的残基2至14(SEQIDNO:32)。
在本文描述的方法和试剂盒中有用的C-末端抗-PG抗体的具体的实施方案包括与表位结合的抗体，所述表位包括hPG的残基71至74(SEQIDNO:33)、hPG的残基69至73(SEQIDNO:34)、hPG的残基76至80(SEQIDNO:35)或者hPG的残基67至74(SEQIDNO:36)。
除了在表2A&2B中提供的那些抗体之外，在竞争结合测定中可以鉴定在本文公开的方法和试剂盒中有用的N-末端和C-末端抗-PG抗体，所述竞争结合测定使用示例性的MAbs1-23或者用与N-或者C-末端表位结合的其他参考抗体，在后面的章节中将更具体地描述所述竞争结合测定。
如在‘329和‘041申请中也报导了，不是全部抗-hPG抗体，甚至显示出对hPG的高度特异性和亲和力的那些抗体，可以中和hPG的生物学活性。例如，尽管抗-hPGMAb14用约6pM的KD结合hPG，但是在体外测定中抗-hPGMAb14不能抑制结直肠癌细胞的生长，然而其他的抗-hPG单克隆抗体显示了显著的抑制活性（参见，例如‘329申请的实施例7）。虽然特异结合hPG的非中和性和中和性抗体对于本文描述的多种诊断和监测方法都是有用的，但是用于治疗方法的抗-hPG抗体应当显示中和活性。
本文使用的“中和性抗-hPG抗体”是一种抗-hPG抗体，与用非特异的抗体处理的对照样品相比，在用所述抗-hPG抗体处理的测试样品中的活的LS174T数目产生了统计学上显著地减少。在实施例3中描述了用于评估任一特定的抗-hPG抗体中和hPG的能力的具体测定法。尽管期望显示出中和活性的较低水平的抗-hPG抗体，例如在这种测定法中统计学上显著地减少了40%、30%、20%、15%或者甚至10%的活细胞的数目的抗-hPG抗体提供治疗益处，但是相信在这种测定法中显示出减少了至少约50%的活细胞数目的那些抗-hPG抗体在预防胃肠癌，包括CRC的方法中是尤其有用的。
因此，在一些实施方案中，例如治疗的实施方案中，有用的抗-hPG抗体是中和性的。如‘329和‘041申请公开的，抗-hPG单克隆抗体的能力不是表位依赖的，因为在用具有APC基因突变的结直肠癌细胞进行的测定法中，N-末端和C-末端抗-hPG单克隆抗体都显示出中和活性。因此，在一些具体的实施方案中，中和性抗-hPG抗体是N-末端中和性抗-hPG抗体。在其他的实施方案中，中和性的抗-hPG抗体是C-末端中和性抗-hPG抗体。
任一特异的抗hPG抗体的亲和力不是关键的。但是，对于一些用途，显示出至少约1μM的亲和力的抗体可以是优选的。为了治疗用途，至少约90nM、80nM、70nM、60nM、50nM、40nM、30nM、20nM、15nM、10nM、7nM、6nM、5nM、4nM、3nM、2nM、1nM、0.1nM、0.01nM或者更高的亲和力是所希望的。如下面的表4中提到的，表2A&2B中的经鉴定的抗-hPG单克隆抗体的测量的亲和力是从10-6至10-12M：
具有尤其适合于特定希望的应用的亲和力的抗-PG的单克隆抗体，可以很容易地选自这些抗体，或者使用多种免疫原、本文描述的抗-hPG抗体的互补决定区（CDR）序列、可变重链（VH）和可变轻（VL）链序列产生或者设计。使用本领域已知或者本文描述的技术，例如ELISA、等温滴定量热法(ITC)、BIAcore或者荧光极化测定法可以测定任何特定的抗-PG单克隆抗体的亲和力。在实施例4提供了具体的测定法。
如表2A&2B提到的，已经鉴定了几种N-末端和C-末端单克隆抗-hPG抗体。除了MAb14以外，这些抗体全部对hPG是特异的，并且在用结直肠癌细胞进行的测试中，全部显示出中和活性。2010年10月6日依据布达佩斯条约将用于获得抗体的一些杂交瘤保藏在国立微生物保藏中心(CNCM)中。在表2A&2B中提供了产生抗-hPG的MAbs1–23的杂交瘤的指定名称和这些经保藏的杂交瘤的保藏登记号。此外，对于几种抗体，已经确定了它们的可变重链(VH)、可变重链(VL)、VL互补决定区(CDRs)和VHCDRs的氨基酸序列。在表2A&2B中也提供了这些氨基酸序列和本公开全文中的用于引用它们的缩写命名。简要地，此处将小鼠重链和轻链可变结构域称作mVH和mVL，接着是相应的单克隆抗体的编号，例如mVH.3和mVL.3分别用于抗-hPGMAb3的可变轻链和可变重链。相似地，此处将人重链和轻链可变结构域称作hVH和hVL，接着是相应的单克隆抗体的编号。三个可变重链CDRs和三个可变轻链CDRs在此分别被称作VHCDR1、2或3，和VLCDR1、2或3，接着是具体的抗-hPG的单克隆抗体的编号。例如，MAb3的VHCDR1表示为VHCDR1.3，并且MAb3的VLCDR1表示为VLCDR1.3。MAb3的VHCDR2示为VHCDR2.3，并且MAb3的VLCDR2表示为VLCDR2.3。
预期结合近似相同表位的抗-hPG单克隆抗体的相应CDRs和/或VH以及VL链可以被互换以产生在本文描述的方法和试剂盒中有用的新的抗-hPG单克隆抗体。例如，如上文提到的，示例性抗-hPG的单克隆抗体MAb5和MAb6结合相同的表位。可以设计抗-hPG的单克隆抗体，其在它的VL链中，包括这两种抗体的VLCDRs的多种组合，和/或在它的VH链中包括这两种抗体的VHCDRs的多种组合。作为阐述多种可能组合的一个具体的非限制实例，在它的VL链中，这种抗体可以包括MAb5的CDRs1和2(分别是VLCDR1.5和VLCDR2.5)和MAb6的CDRs3(VLCDR3.6)，并且在它的VH链中，包括MAb6的CDRs1(VHCDR1.6)以及MAb5的CDRs2和3(分别是VHCDR2.5和VHCDR3.5)。使用常规方法可以获得已经被保藏的杂交瘤产生的抗体的CDRs的氨基酸序列（也称作高变区）。
本领域已知，取决于背景和本领域已知的多种定义，划定抗体高变区的氨基酸位置/边界可以不同。可以将在可变结构域中的一些位置看作杂合高变位置，因为在一套标准下，可以认为这些位置在高变区内，然而在一套不同的标准下，认为这些位置在高变区之外。在延伸的高变区中也可以发现这些位置中的一种或者多种。本文所述的抗-PG抗体可以在这些杂合高变位置含有修饰。每种天然重链和轻链的可变结构域包含四种主要采用β-折叠构型通过三个CDR连接的四个FR区，所述CDR形成环连接，并且在一些情况下形成β-折叠结构的部分。每条链中的CDRs通过FR区以FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4的顺序很接近地结合在一起，并且所述CDRs与来自其他链的CDRs一起有助于形成抗体的靶标结合位点(见Kabat等人,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,NationalInstituteofHealth,Bethesda,Md.1987)。除非另外指出，根据Kabat等人的免疫球蛋白氨基酸残基编号系统进行本文使用的免疫球蛋白氨基酸残基的编号。
参考表2A，在本文描述的方法和试剂盒中有用的N-末端抗-hPG抗体的具体的实施方案包括，但不限于以下抗体：
(a)抗体，其具有在序列中相应于MAb1、MAb2、MAb3、MAb4、MAb15、MAb16、MAb17、MAb18、MAb19或MAb20的VLCDRs的VLCDRs，和在序列中相应于MAb1、MAb2、MAb3、MAb4、MAb15、MAb16、MAb17、MAb18、MAb19或MAb20的VHCDRs的VHCDRs；
(b)抗体，其具有在序列中相应于MAb1、MAb2、MAb3、MAb4、MAb15、MAb16、MAb17、MAb18、MAb19或MAb20的VLCDRs和VHCDRs的VLCDRs和VHCDRs；
(c)抗体，其中:
(i)VLCDR1选自QSIVHSNGNTY(“VLCDR1.3”;SEQIDNO:4)、QSLVHSSGVTY(“VLCDR1.4”;SEQIDNO:10)、QSLLDSDGKTY(“VLCDR1.16”;SEQIDNO:50)和SQHRTYT(“VLCDR1.19”;SEQIDNO:51);
(ii)VLCDR2选自KVS(“VLCDR2.3”或“VLCDR2.4”;SEQIDNO:5))、LVS(“VLCDR2.16”;SEQIDNO:53)和VKKDGSH(“VLCDR2.19”;SEQIDNO:54);
(iii)VLCDR3选自FQGSHVPFT(“VLCDR3.3”;SEQIDNO:6)、SQSTHVPPT(“VLCDR3.4”;SEQIDNO:11)、WQGTHSPYT(“VLCDR3.16”;SEQIDNO:57)和GVGDAIKGQSVFV(“VLCDR3.19”;SEQIDNO:58);
(iv)VHCDR1选自GYIFTSYW(“VHCDR1.3”;SEQIDNO:1)、GYTFSSSW(“VHCDR1.4”;SEQIDNO:7)、GYTFTSYY(“VHCDR1.16”;SEQIDNO:39)和GYSITSDYA(“VHCDR1.19”;SEQIDNO:40);
(v)VHCDR2选自FYPGNSDS(“VHCDR2.3”;SEQIDNO:2)、FLPGSGST(“VHCDR2.4”;SEQIDNO:8)、INPSNGGT(“VHCDR2.16”;SEQIDNO:43)和ISFSGYT(“VHCDR2.19”;SEQIDNO:44);并且
(vi)VHCDR3选自TRRDSPQY(“VHCDR3.3”;SEQIDNO:3)、ATDGNYDWFAY(“VHCDR3.4”SEQIDNO:9)、TRGGYYPFDY(“VHCDR3.16”;SEQIDNO:47)和AREVNYGDSYHFDY(“VHCDR3.19”;SEQIDNO:48);
(d)抗体，其具有在序列中相应于MAb1、MAb2、MAb3、MAb4、MAb15、MAb16、MAb17、MAb18、MAb19或MAb20的VL的VL和在序列中相应于MAb1、MAb2、MAb3、MAb4、MAb15、MAb16、MAb17、MAb18、MAb19或MAb20的VH的VH；并且
(e)抗体，其具有在序列中相应于MAb1、MAb2、MAb3、MAb4、MAb15、MAb16、MAb17、MAb18、MAb19或MAb20的VL和VH的VL和VH的抗体。
参考表2B,在本文描述的方法和试剂盒中有用的C-末端抗-hPG抗体的具体的实施方案包括，但不限于以下抗体：
(a)抗体，具有在序列中相应于MAb5、MAb6、MAb7、MAb8、MAb9、MAb10、MAb11、MAb12、MAb13、MAb14、MAb21、MAb22或MAb23的VLCDRs的VLCDRs，和在序列中相应于MAb5、MAb6、MAb7、MAb8、MAb9、MAb10、MAb11、MAb12、MAb13、MAb14、MAb21、MAb22或MAb23的VHCDRs的VHCDRs；
(b)抗体，其具有在序列中相应于MAb5、MAb6、MAb7、MAb8、MAb9、MAb10、MAb11、MAb12、MAb13、MAb14、MAb21、MAb22或MAb23的VL和VHCDRs的VLCDRs和VHCDRs;
(c)抗体，其中：
(i)VLCDR1选自KSLRHTKGITF(“VLCDR1.8”;SEQIDNO:49)和QSLLDSDGKTY(“VLCDR1.13”;SEQIDNO:50);
(ii)VLCDR2选自QMS(“VLCDR2.8”;SEQIDNO:52)和LVS(“VLCDR2.13”;SEQIDNO:53);
(iii)VLCDR3选自AQNLELPLT(“VLCDR3.8”;SEQIDNO:55)和WQGTHFPQT(“VLCDR3.13”;SEQIDNO:56);
(iv)VHCDR1选自GFTFTTYA(“VHCDR1.8”;SEQIDNO:37)和GFIFSSYG(“VHCDR1.13”;SEQIDNO:38);
(v)VHCDR2选自ISSGGTYT(“VHCDR2.8”;SEQIDNO:41)和INTFGDRT(“VHCDR2.13”;SEQIDNO:42);并且
(vi)VHCDR3选自ATQGNYSLDF(“VHCDR3.8”;SEQIDNO:45)和ARGTGTY(“VHCDR3.13”;SEQIDNO:46);
(d)抗体，其具有在序列中相应于MAb5、MAb6、MAb7、MAb8、MAb9、MAb10、MAb11、MAb12、MAb13、MAb14、MAb21、MAb22或MAb23的VL的VL和在序列中相应于MAb5、MAb6、MAb7、MAb8、MAb9、MAb10、MAb11、MAb12、MAb13、MAb14、MAb21、MAb22或MAb23的VH的VH；和
(e)抗体，其具有在序列中相应于MAb5、MAb6、MAb7、MAb8、MAb9、MAb10、MAb11、MAb12、MAb13、MAb14、MAb21、MAb22或MAb23的VL和VH的VL和VH。
技术人员将理解，用于诊断方法的抗-hPG抗体可以是任何来源的，所述来源包括例如哺乳动物（例如、人、灵长类、啮齿类动物、山羊或兔）、非哺乳动物、或自然界中的嵌合体（来自超过一个物种）。适合在动物，包括人中治疗应用的抗体优选地来源于预期被治疗的相同物种，或者已经经修饰或者设计成非免疫原性的物种或者已经降低了在待治疗的动物中的免疫原性的物种。在下面详细讨论了用于在人中的治疗应用的抗-hPG抗体的具体类别是人源化抗体类。用于本文描述的方法和试剂盒的抗-hPG抗体也可以是或者来源于任一同种型，包括，例如IgA(例如，IgA1或IgA2)，IgD，IgE，IgG(例如，IgG1，IgG2，IgG3或IgG4)或IgM。为治疗应用设计的抗-hPG抗体优选地是IgG型。
在一些实施方案中，用于本文描述的治疗方法的抗-hPG抗体是人源化的。一般，人源化的抗体包含至少一种，并且通常两种可变结构域的基本上全部，在所述可变结构域中，相应于非人的免疫球蛋白的那些全部或者基本上全部的CDR区以及全部或者基本上全部的构架区是人免疫球蛋白共有序列的那些序列，并且可以称作“CDR-移植”。人源化的抗体也可以包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，通常包含人免疫球蛋白共有序列的那些序列。在本领域也已知用于人源化抗体的方法，包括设计人源化抗体的方法。见，例如Lefranc等人(2003)Dev.Comp.Immunol.27:55-77;Lefranc等人(2009)Nucl.AcidsRes.37:D1006-1012;Lefranc(2008)Mol.Biotechnol.40:101-111;Riechmann等人(1988)Nature332:323-7;Queen等人的美国专利号5,530,101,5,585,089,5,693,761,5,693,762和6,180,370;EP239400;PCT公开WO91/09967;美国专利号5,225,539;EP592106;EP519596;Padlan(1991)Mol.Immunol.28:489-498;Studnicka等人(1994)Prot.Eng.7:805-814;Roguska等人(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.91:969-973;以及美国专利号5,565,332，特此将这些公开整体并入本文作为参考。
使用这些已知的方法可以获得抗体的人源化形式，所述抗体具有相应于非人抗-hPG抗体的CDRs的CDR序列，其包括但不限于例如在表2A中提供的多种N-末端抗-hPG单克隆抗体和表2B中提供的多种C-末端抗-hPG单克隆抗体。在表2A和2B中提供了选择的抗-hPG抗体的人源化的VL和VH链的计划的序列。人源化抗体的具体实例包括抗体，其包含：
(a)本文公开的任意三个CDRs和任意三个VHCDRs；
(b)包含相应于SEQIDNO:21的氨基酸序列的重链可变区和包含相应于SEQIDNO:22的氨基酸序列的轻链可变区；
(c)包含相应于SEQIDNO:23的氨基酸序列的重链可变区和包含相应于SEQIDNO:24的氨基酸序列的轻链可变区；
(d)包含选自由SEQIDNO:75、77和79组成的组的氨基酸序列的重链可变区和包含选自由SEQIDNO:76和78组成的组的氨基酸序列的轻链可变区；
(e)包含选自由SEQIDNO:80和82组成的组的氨基酸序列的重链可变区和包含选自由SEQIDNO:81和83组成的组的氨基酸序列的轻链可变区；
(f)包含选自由SEQIDNO:84、86和88组成的组的氨基酸序列的重链可变区和包含选自由SEQIDNO:85、87和89组成的组的氨基酸序列的轻链可变区；以及；
(g)包含选自由SEQIDNO:90、92和94组成的组的氨基酸序列的重链可变区和包含选自由SEQIDNO:91、93和95组成的组的氨基酸序列的轻链可变区。
如技术人员将认识到，使用本文描述的多种抗原和免疫原并且评估它们与目的参考抗体竞争结合hPG的能力可以容易获得具有特定的结合性质，如能结合特定的目的表位的抗-hPG抗体。在这种竞争测定中，可以利用本文描述的任一抗-hPG抗体作为参考抗体。在实施例5中提供了用于评估抗体与生物素化的参考抗-hPG的目的抗体竞争结合hPG的能力的具体测定法。
在参考抗-hPG抗体和任一测试抗体(不考虑种类或者同种型)之间进行抗体竞争研究中，可以首先用可检测的标记来直接标记（例如放射性同位素或者荧光团）或间接标记（例如生物素（通过结合荧光标记的链酶亲和素检测）或者酶（通过酶反应检测））参考抗体以实现随后的鉴定。在这种情况下，将标记的参考抗-hPG抗体（固定的或者增加的浓度）与已知量的hPG温育，形成经标记的hPG-抗-hPG抗体复合物。然后将未标记的抗体加入到复合物中。测量经复合标记的强度。如果测试抗体通过结合重叠表位与经标记的参考抗-hPG抗体竞争结合hPG，那么相对于在缺失测试抗体的情况下进行的对照实验，复合标记的强度将降低。
已知用于进行结合竞争测定的多种方法，并且其可以被改进以产生与上文和实施例5中描述的测定可比较的结果。
如果测试抗体在竞争结合测定中减少了参考抗-PG抗体与hPG的结合，并且特别在实施例5中的竞争结合测定中，测试抗体的浓度在0.01至100μg/mL(例如0.01μg/mL、0.08μg/mL、0.4μg/mL、2μg/mL、10μg/mL、50μg/mL或100μg/mL或者在所述的范围内的其他浓度)的范围内，所述结合减少至少50%，那么认为测试抗体与参考的抗-hPG抗体竞争结合hPG，并且因此认为所述测试抗体与参考抗-hPG抗体结合hPG的近似相同的或者重叠的表位，尽管可以期望更高水平的减少，例如60%、70%、80%、90%甚至100%的减少。
技术人员将理解在一些背景下，例如诊断和监测背景下，标记抗-PG抗体是所希望的。这种标记用于检测和定量。本领域已知合适的标记，并且其可以是“直接的”（因为所述标记是直接可观察到的或者可检测到的（例如，荧光基团或者放射性同位素））或者是“间接的”（因为所述标记与其他事物相互作用产生可观察到的或者可检测到的信号（例如，酶作用于底物产生可检测到的信号或者结合分子，如结合经标记的链霉抗生物素蛋白分子的生物素））。多种标记系统以及用其标记抗体的方法是本领域已知的，并且被本文考虑使用。
尽管已经用全长的抗体示例本文描述的方法中使用的多种抗-hPG抗体，技术人员将理解也可以使用从全长的抗体或者结合片段设计或者来源的结合片段或者替代抗体。合适的片段，替代物等包括但不限于Fab’、F(ab’)2、Fab、Fv、vIgG、scFv片段和替代抗体（surrobodies）。除非特别指出，预期本文使用的术语“抗体”包括抗体和“抗体-样”的替代分子的全部形式，所述替代分子包括单链抗体、替代抗体和结合片段。本文将具有天然产生的抗体的典型结构的抗体称作“天然抗体”。
产生抗-PG抗体的方法
使用标准的已知方法可获得用于本文描述的方法中的抗-PG抗体。为表达用于本文描述的方法中的抗-PG抗体，将编码部分或者全长轻链和重链的DNA插入到表达载体中以便将该基因有效地连接到转录和翻译控制序列上。在这种背景下，术语“有效地连接”意指将抗体基因连接到载体中以便载体中的转录和翻译控制序列发挥它们预期的调节抗体基因转录和翻译的功能。经选择的表达载体和表达控制序列与使用的表达宿主细胞相容。可将抗体轻链基因和抗体重链基因插入到分别的载体中，或者更典型地，将两种基因都插入到相同的表达载体中。
通过标准方法（例如，连接抗体基因片段和载体上的互补限制酶切位点，或者如果不存在限制酶切位点，那么使用平端连接）将抗体基因插入到表达载体中。插入抗-PG抗体轻链或者重链序列之前，表达载体可以已经携带了抗体恒定区序列。例如，将抗-PG抗体VH和VL序列转换至全长的抗体基因的一种方法是将所述VH和VL序列分别插入到已经编码了重链恒定区和轻链恒定区的表达载体中，以便将VH区段有效地连接到载体中的CH区段，并且将VL区段有效地连接到载体中的CL区段。额外地或者备选地，该重组表达载体可以编码促进抗体链从宿主细胞分泌的信号肽。可将抗体链基因克隆到载体中以便将信号肽在框内连接到抗体链基因的氨基端。信号肽可以是免疫球蛋白信号肽或者异源的信号肽（即，来自非免疫球蛋白的信号肽）。
除了抗体链基因之外，本公开的重组表达载体携带了控制抗体链基因在宿主细胞中表达的调节序列。术语“调节序列”意指包括启动子、增强子和控制抗体链基因的转录或者翻译的其他表达控制元件（例如，多腺苷酸化信号）。例如，在Goeddel,GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology185(AcademicPress,SanDiego,CA,1990)中描述了这种调节序列。本领域的技术人员将理解包括调节序列的选择的表达载体的设计可能取决于这些因素，如待转化的宿主细胞的选择、所希望的蛋白质的表达水平等。用于哺乳动物宿主细胞的表达的合适的调节序列包括指导哺乳动物细胞中蛋白质表达的高水平的病毒元件，如来源于巨细胞病毒(CMV)（如CMV启动子/增强子）、猿猴病毒40(SV40)（如SV40启动子/增强子）、腺病毒（例如腺病毒主要晚期启动子(AdMLP))和多瘤的启动子和/或增强子。为进一步描述病毒调节元件和其序列，参见例如，Stinski的美国专利号5,168,062，Bell等人的美国专利号4,510,245和Schaffner等人的美国专利号4,968,615。
除了抗体链基因和调节序列之外，重组表达载体可以携带额外的序列，如调节载体在宿主细胞中复制的序列（例如复制起点）和选择标记基因。选择标记基因有助于筛选已经引入了载体的宿主细胞（参见，例如Axel等人的美国专利号4,399,216,4,634,665和5,179,017）。例如，通常选择标记基因赋予了已经引入了载体的宿主细胞对药物，如G418、嘌呤霉素、杀稻瘟素、潮霉素或氨甲喋呤的抗性。合适的选择标记基因包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因（用于用氨甲喋呤筛选/扩增的DHFR-宿主细胞中）和neo基因（用于G418筛选）。为表达轻链和重链，通过标准技术将编码重链和轻链的表达载体转染到宿主细胞中。术语“转染”的多种形式意指包括通常用于将外源DNA引入到原核或真核宿主细胞的多种技术，例如电穿孔、脂转染、磷酸钙沉淀，DEAE-葡聚糖转染等。
有可能在原核或者真核宿主细胞中表达本文描述的抗体。在某些实施方案中，为了经适当折叠的和具有免疫活性的抗体的最优的分泌，在真核细胞，如哺乳动物宿主细胞中进行抗体的表达。用于表达本公开的重组抗体的示例性的哺乳动物宿主细胞包括中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）（包括在Urlaub&Chasin,1980,Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:4216-4220中描述的DHFR-CHO细胞，例如在Kaufman&Sharp,1982,Mol.Biol.159:601-621描述的，所述DHFR-CHO细胞使用DHFR选择标记）、NS0骨髓瘤细胞、COS细胞、293细胞和SP2/0细胞。当将编码抗体基因的重组表达载体引入到哺乳动物宿主细胞中，通过培养宿主细胞一段时间产生的抗体足够允许抗体在宿主细胞中的表达或者抗体分泌到宿主细胞生长的培养基中。使用标准的蛋白质纯化方法可以从培养基中回收抗体。宿主细胞也可以用于产生完整抗体的部分，如Fab片段或者scFv分子。理解在上述方法上的变化是在本公开的范围内。例如，可以希望用编码本文描述的抗-PG抗体的轻链或者重链（但不是两条链）的DNA转染宿主细胞。
也可以使用重组DNA技术以除去编码对结合PG不是必需的轻链和重链的DNA的部分或者全部。由这种截短的DNA分子表达的分子在本文描述的方法中也是有用的。
为重组表达抗-PG抗体，可以用两种表达载体共转染宿主细胞，其中第一种载体编码重链来源的多肽，并且第二种载体编码轻链来源的多肽。通常，这两种载体都含有各自的选择标记。备选地，可以使用编码重链和轻链两种多肽的单个载体。
也可以通过化学合成（例如，通过SolidPhasePeptideSynthesis,2nded.,1984ThePierceChemicalCo.,Rockford,Ill.中描述的方法）产生抗-PG抗体。使用无细胞平台（参见，例如Chuetal.,2001,BiochemiaNo.2(RocheMolecularBiologicals))也可以产生变异的抗体。
一旦已经通过重组表达或者合成方法产生了抗-PG抗体，其可以通过本领域已知的用于纯化免疫球蛋白分子的任意方法，例如通过层析（例如，离子交换、亲和、在蛋白A或蛋白G筛选之后特别地通过对PG的亲和层析、以及大小柱层析），离心，不同的溶解度被纯化，或者通过用于纯化蛋白质的任何其他的标准技术被纯化。进一步地，可以将抗-PG抗体或者其结合片段融合到本文描述的或者本领域另外已知的异源多肽序列上以促进纯化。
实施例
实施例1：血浆或者血清PG水平的定量
使用以下的测定法可以方便地测定PG的血浆和/或血清水平。用0.5和10μg/mL之间的C-末端抗-hPG抗体，例如兔的C-末端抗-hPG多克隆抗体或者本文描述的C-末端抗-hPG抗体包被96孔微量滴定板，然后温育过夜。然后在PBS-Tween(0.05%)中洗涤板三次并用PBS-Tween(0.05%)中的2%(w/v)脱脂奶粉封闭板。在合适的稀释液(例如，PBS-Tween0.05%)中分别制备测试样品，对照样品（空白或者PG-阴性的血浆或者血清样品）以及在约5pM(0.5x10-11M)和约0.1nM(1x10-10M)之间的hPG参考标准品（在PG-阴性的血浆或者血清中稀释的冻干的hPG）。在包被的板上在37°C下温育样品2至4小时，或备选地在21°C下温育样品12至16小时。温育后，用PBS-Tween(0.05%)洗涤板三次并将其与0.001至0.1μg/mL之间的N-末端抗-hPG抗体，例如多克隆的N-末端抗-hPG抗体或者如本文描述的N-末端抗-hPG单克隆抗体一起在21°C下温育30分钟，所述N-末端抗-hPG抗体偶联到辣根过氧化物酶(HRP)上(Nakane等人.,1974,J.Histochem.Cytochem.22(12):1084–1091)。然后在PBS-Tween(0.05%)中洗涤板三次并且加入HRP底物在21°C下保持15分钟。通过加入100μL0.5M的硫酸终止反应并且在405nm进行光密度测量。通过与标准曲线比较确定测试样品的hPG水平，所述标准曲线由来自hPG参考标准品的测量构建。
实施例2:用于评估抗-hPG抗体特异性的ELISA测定
使用以下的ELISA测定可以方便地测定抗-hPG抗体的特异性。用磷酸缓冲盐水(PBS)中的适当浓度的测试多肽(例如25和50ng重组人PG,以及50和250ngCTFP或者其他的胃泌素来源的基因产物)在4°C温育96孔板过夜，之后用洗涤溶液(PBS和0.1%Tween-20)洗涤孔三次，然后每孔用100μL封闭溶液(PBS,0.1%Tween-20,0.1%牛血清白蛋白或者酪蛋白水解物)在22°C下温育2小时。封闭后，洗涤孔三次，并且加入待测定的抗体（测试抗体）。将PBS和0.1%Tween-20中的100μL测试抗体(0.3至1ng/mL)加入每孔中。然后将板在22°C温育2小时，之后丢弃测试抗体溶液，并且在洗涤步骤(3X100μL洗涤溶液,如上面提到的)之后用含有第二抗体的封闭溶液代替，所述第二抗体是偶联到辣根过氧化物酶的山羊抗小鼠IgG(Fc)抗体。用第二抗体温育1小时之后，将100μL底物溶液(例如可从sigma-AldrichCo得到的FASTOPD,或者邻苯二胺二盐酸盐，根据制造商的说明制备)加入到每孔中并且在22°C下在黑暗中温育20分钟。通过加入50μL4N的硫酸终止反应并且通过测量在492nm处的光密度(O.D.)确定被催化的底物量。底物转化与结合抗原的一级（测试）抗体的量是成比例的。一式两份进行实验并且将OD测量值作为抗原浓度的函数作图。如果对于hPG，测量的O.D.在0.2和1.5之间，并且使用CTFP或者任何其他胃泌素基因来源的肽，没有高于背景的统计学上显著的信号，那么将测试抗体评分为对PG特异的，其中所述背景是来自只含有PBS的对照孔的平均信号。
实施例3：用于评估抗-hPG抗体的中和活性的测定法
可以如下进行用于评估特异的抗-hPG抗体是否是中和性的具体的测试。以每孔约50,000个细胞将LS174T细胞接种到6孔板的6个孔中。然后用约5μg/mL的抗体浓度的测试抗-hPG抗体或者对照抗体，以12小时的间隔处理细胞48小时。在这种测定中，使用双尾Mann-Whitney检验（当p<0.05时，认为差异是显著的），与对照的非特异的抗体处理的细胞数目相比，如果用测试抗体处理的细胞数目显示了在存活细胞数目上的至少10%的统计学上显著的减少，那么定义测试抗体是中和性的。将总细胞数目校正为处理期开始时（称作T0）的细胞数目。
实施例4：评估抗-hPG抗体亲和力的测定法
使用Proteon技术(BioRad),根据Nahshol等人.(2008)AnalyticalBiochemistry383:52–60(将其整体并入本文作为参考)可以测量抗-hPG抗体的亲和力常数。简要地，对于鼠抗-PG抗体，首先将抗小鼠IgG抗体(50μg/mL)包被在传感器芯片上，以确保在抗体注射后芯片检测的信号落入在10,000到11,500个响应单位(RU)之间。然后注射目的鼠抗-hPG抗体(测试抗体)（通常是30μg/mL的浓度）。如果测试抗体充分地结合，将观察到至少500RU的额外信号。然后通过注射不同浓度的hPG，例如200nM,100nM,50nM,25nM和12.5nM的hPG，并且检测缔合水平获得测试抗体和hPG之间结合的时程。通常，在单个实验中可获得几个通道来并行地测试多种抗体，使得可能以不同浓度的hPG并行地测定单个测试抗体的结合。应该用对hPG非特异的鼠单克隆抗体注射一个通道作为非特异结合的对照，并且应该仅用稀释缓冲液注射另一个通道作为背景信号的基线。一般，在用非特异的鼠抗体注射的通道中检测不到结合。在此设定中显示高水平缔合的抗体（其可以导致被hPG捕获的单克隆抗体的饱和）可以对较低的hPG浓度(50nM、25nM、12.5nM、6.25nM和3.125nM)进行测试，允许更精确的测量。
以解离常数(kd)和缔合常数(ka)之间的比例计算亲和常数(KD)。通过分析基于结合测量的实验曲线和理论图谱之间的统计学相关的相似性可以验证实验值。
使用抗-hPG测试抗体的来源物种特异的IgG可以以相似的方式评估非鼠抗-hPG抗体的亲和常数。
实施例5：用于评估与参考抗-hPG抗体竞争结合的测定法
可以按照以下进行特异性测定，所述测定用于评估目的抗体（测试抗体）是否与生物素化的参考抗-hPG抗体竞争结合hPG。用捕获抗-hPG抗体（识别-hPG的N-末端或者C-末端区域的单克隆或者多克隆抗体，所述N-末端或者C-末端区域与生物素化的参考抗-hPG抗体识别的表位不同）以选自1–10μg/mL范围的浓度4°C下包被96-孔板过夜(0.1至1μg/每孔)。用封闭缓冲液(PBS中的0.1%Tween-20,0.1%BSA)在22°C封闭2小时后，以10pM至1nM(10至1000pg/每孔)之间的浓度加入重组hPG并且在22°C下温育2小时。之后，将生物素化的参考抗-hPG抗体（或者含有生物素化的参考抗-hPG抗体的混合物）和增加浓度的未标记的测试抗体一起加入，并且在22°C下温育1小时。在洗涤以去除未结合的抗体后，通过将混合物与50ng/mL的链酶亲和素-HRP一起在22°C下温育1小时，接着在22°C下与辣根过氧化物酶的化学发光底物温育5分钟，并且在发光计中进行相对光单位(RLU)的定量，进行结合的经标记参考抗-hPG抗体的检测。一式两份进行测定。
与参考抗-hPG抗体竞争结合的抗体抑制参考抗体与hPG的结合。通过观察的RLUs的降低证实，与参考抗体结合基本相同的表位或者具有重叠表位的抗体明显地减少了结合的参考抗-hPG抗体的量（例如，减少至少50%）。
从通过将标记的参考抗体与重组hPG（无测试抗体）温育进行的对照试验获得了高的对照值。从通过将标记的参考抗体与重组hPG且在过量浓度的未标记的参考抗体的存在下温育（这样未标记的参考抗体与标记的抗体竞争结合hPG）进行的对照试验获得了低的对照值。然后通过在增加浓度的未标记的测试抗体的存在下，将经标记的参考抗体与重组hPG温育确定测试抗体与参考抗-hPG抗体竞争的能力。
在测试测定中，在测试抗体的存在下，观察的RLUs的显著降低表明测试抗体与参考抗-hPG抗体识别基本相同的表位。
结合的抑制可以表示为抑制常数或者Ki，其根据以下的公式计算：
Ki=IC50/[1+(参照抗-hPGAb浓度/KD 参照抗-hPGAb)]
其中“IC50”是导致在参考抗体的结合中50%的减少的测试抗体浓度，并且KD 参照抗-hPGAb是参考抗-hPG抗体的解离常数，其是所述抗体对hPG的亲和力的一种度量。在本文描述的的测定条件下，与参考抗-hPG抗体竞争的有用的测试抗体（例如，本文所述的一种抗-hPG抗体）通常将具有从10pM至100nM的Kis值。
实施例6：检测来自具有家族性腺瘤性息肉的患者的样品中的血清PG
这个实施例显示升高的血清PG水平可以与具有FAP的个体中息肉的存在相关。
方法
如实施例1中描述的定量来自具有家族性腺瘤性息肉的6个患者的样品中的血清PG水平。从具有以下特征的患者获得血清样品：
●两个个体（A和B），都大于55岁，以前经历了结肠切除术，通过内窥镜检查被常规监测，其中自从外科手术之后，所述A和B中已经检测不到息肉。
●一个个体（C），30岁，以前已经经历了结肠切除术并且接着进行了外科手术以除去另外的息肉。该个体在收集血液样品之前几个月进行了外科手术。
●一个个体(D)，27岁，以前已经经历了结肠切除术，该个体在收集血液样品时在小肠中存在多发性息肉（但是没有癌）。
●一个个体（E），52岁，以前已经经历了结肠切除术，该个体在收集血液样品时在直肠中存在多发性息肉。
●一个个体（F），10岁，该个体在收集血液样品时存在多发性结直肠息肉。
结果
将下面的表5显示的结果表示为平均PG浓度±标准差(pM):
结果表明在取样时具有大量息肉的个体中PG水平尤其升高了。相比较，已经经历了外科手术的患者展示了PG的非常低的或者检测不到的水平。
实施例7：检测来自具有癌前期的散发的腺瘤性息肉的患者的样品中的血清PG
这个实施例阐明了具有散发的腺瘤性息肉的超过25%的个体具有升高的血清PG水平。
方法
测量了两种不同的样品集中的PG水平：与在具有FAP的受试者中发现的数目相似，从具有多发性腺瘤性息肉的25个个体获得了第一套样品，并且第二套样品来自收集了来自从45岁至65岁的104个个体的血浆库。使用如在上文的实施例1中描述的ELISA测定法定量血浆前胃泌素水平。
结果
具有被研究的腺瘤性息肉的23%(12/52)的受试者具有高于50pM的前胃泌素水平。相比较，来自血液库组中的16.3%(17/104)的受试者具有高于50pM的前胃泌素水平。保存了样品的个体的医疗史是未知的。健康个体具有PG的低水平，通常不超过50pM。参见，例如Siddheshwar等人.,2001,“Plasmalevelsofprogastrinbutnotamidatedgastrinorglycineextendedgastrinareelevatedinpatientswithcolorectalcarcinoma,”Gut48:47-52。认为高于50pM的水平指示潜在的病理。
几乎四分之一的个体（其中发现了息肉）也具有升高的PG水平。这与如下观察一致：约20%的散发的腺瘤性息肉发展成恶性肿瘤，认为这种转化伴随着升高的PG水平。因此，在腺瘤性息肉的存在下升高的PG水平可以作为在鉴定适合于进一步的追踪或者适合于预防性的抗-PG治疗的患者中有用的度量。
在来自血浆库的样品方面，有可能具有高于50pM的PG水平的保存的样品的部分或者全部来自具有引起升高的PG水平的潜在的病症的个体。使用经适当筛选的对照样品将有可能显示具有散发的腺瘤性息肉的个体的百分比和不具有息肉但具有高于50pM的PG水平的那些个体的百分比之间的较大差别。
实施例8：抗-PG组合物防止了FAP的小鼠模型中的肿瘤的发展
这个实施例阐明了抗-hPG抗体防止体内形成肿瘤的能力。
方法
用抗-hPG抗体处理了转基因小鼠，其携带了相似于具有家族性腺瘤性息肉(FAP)的个体中发现的腺瘤性结肠息肉病(APC)基因的等位基因中的突变。当通过“杂合性丢失”(LOH)机制失去了第二（野生型）APC等位基因时，被称作APCΔ14小鼠的这些小鼠在它们的肠中自发地产生肿瘤(Colnotetal.,2004,“Colorectalcancersinanewmousemodeloffamilialadenomatouspolyposis:influenceofgeneticandenvironmentalmodifiers,”LabInvestigation84:1619-1630)。在约2个月龄时，可以发现最先被检测的肿瘤，并且到3.5个月，肿瘤的数目一般是约15-20。已经显示这些肿瘤产生前胃泌素。
用对照多克隆抗体-兔抗人IgG抗血清(JacksonImmunoResearch(参考文献号.309-005-0089)--或者针对在Hollande等人WO07/135542中描述的(1)N-末端肽和（2）C-末端肽产生的抗-PG多克隆抗体以9mg/kg的剂量通过腹膜内注射处理4个月龄的APCΔ14小鼠连续六周，每周两次。每周一次称重小鼠。在六周的处理方案结束时，对小鼠的肠照相，计数了肿瘤的总数目。在处理组和对照组中有六只小鼠。基因分型鉴定来自对照组的两只小鼠没有携带预期的杂合的APC突变，并且所述两只小鼠被排除在实验之外。
结果
在下面的表6中显示了结果。用对照抗体处理的小鼠显示出总共125个肿瘤，平均每只小鼠31.25个肿瘤。经抗-PG处理的小鼠具有总共46个肿瘤，或者平均每只小鼠7.6个肿瘤。这种差别是统计学上显著的(Mann-Whitney测试，P=0.0095)。
结果表明在用抗-前胃泌素抗体处理的6只动物中的四只中发现的肿瘤数目低于在3.5月龄的APCΔ14小鼠中通常发现的15至20个肿瘤的平均数目。参见，下表6。这些数据表明用抗-前胃泌素抗体处理防止了在这些动物中发展成新肿瘤。
在本申请中引用的全部公开、专利、专利申请和其他的文献对于所有目的以相同程度以其整体并入本文作为参考，如同说明将每种单独的公开、专利、专利申请和其他的文献分别为了所有目的并入本文作为参考一样。
尽管已经说明和描述了多种具体的实施方案，但是将理解可以进行多种改变而不背离本发明的精神和范围。

Claims (11)

1.一定量的抗-hPG单克隆抗体在生产用于预防易患腺瘤性息肉的人类受试者中的胃肠癌的药物中的用途，
其中所述抗-hPG单克隆抗体包含
a.重链可变区，其中CDR1由VHCDR1.8的氨基酸序列SEQIDNO:37组成，CDR2由VHCDR2.8的氨基酸序列SEQIDNO:41组成，CDR3由VHCDR3.8的氨基酸序列SEQIDNO:45组成，和轻链可变区，其中CDR1由VLCDR1.8的氨基酸序列SEQIDNO:49组成，CDR2由VLCDR2.8的氨基酸序列SEQIDNO:52组成，CDR3由VLCDR3.8的氨基酸序列SEQIDNO:55组成；
b.重链可变区，其中CDR1由VHCDR1.13的氨基酸序列SEQIDNO:38组成，CDR2由VHCDR2.13的氨基酸序列SEQIDNO:42组成，CDR3由VHCDR3.13的氨基酸序列SEQIDNO:46组成，和轻链可变区，其中CDR1由VLCDR1.13的氨基酸序列SEQIDNO:50组成，CDR2由VLCDR2.13的氨基酸序列SEQIDNO:53组成，CDR3由VLCDR3.13的氨基酸序列SEQIDNO:56组成；
c.重链可变区，其中CDR1由VHCDR1.3的氨基酸序列SEQIDNO:1组成，CDR2由VHCDR2.3的氨基酸序列SEQIDNO:2组成，CDR3由VHCDR3.3的氨基酸序列SEQIDNO:3组成，和轻链可变区，其中CDR1由VLCDR1.3的氨基酸序列SEQIDNO:4组成，CDR2由VLCDR2.3的氨基酸序列SEQIDNO:5组成，CDR3由VLCDR3.3的氨基酸序列SEQIDNO:6组成；
d.重链可变区，其中CDR1由VHCDR1.4的氨基酸序列SEQIDNO:7组成，CDR2由VHCDR2.4的氨基酸序列SEQIDNO:8组成，CDR3由VHCDR3.4的氨基酸序列SEQIDNO:9组成，和轻链可变区，其中CDR1由VLCDR1.4的氨基酸序列SEQIDNO:10组成，CDR2由VLCDR2.4的氨基酸序列SEQIDNO:5组成，CDR3由VLCDR3.4的氨基酸序列SEQIDNO:11组成；
e.重链可变区，其中CDR1由VHCDR1.16的氨基酸序列SEQIDNO:39组成，CDR2由VHCDR2.16的氨基酸序列SEQIDNO:43组成，CDR3由VHCDR3.16的氨基酸序列SEQIDNO:47组成，和轻链可变区，其中CDR1由VLCDR1.16的氨基酸序列SEQIDNO:50组成，CDR2由VLCDR2.16的氨基酸序列SEQIDNO:53组成，CDR3由VLCDR3.16的氨基酸序列SEQIDNO:57组成；或
f.重链可变区，其中CDR1由VHCDR1.19的氨基酸序列SEQIDNO:40组成，CDR2由VHCDR2.19的氨基酸序列SEQIDNO:44组成，CDR3由VHCDR3.19的氨基酸序列SEQIDNO:48组成，和轻链可变区，其中CDR1由VLCDR1.19的氨基酸序列SEQIDNO:51组成，CDR2由VLCDR2.19的氨基酸序列SEQIDNO:54组成，CDR3由VLCDR3.19的氨基酸序列SEQIDNO:58组成。
2.权利要求1的用途，其中所述抗-hPG单克隆抗体包含：
a.由SEQIDNO:59组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:63组成的轻链可变区序列；
b.由SEQIDNO:60组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:64组成的轻链可变区序列；
c.由SEQIDNO:12组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:13组成的轻链可变区序列；
d.由SEQIDNO:61组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:65组成的轻链可变区序列；或
e.由SEQIDNO:62组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:66组成的轻链可变区序列。
3.权利要求1的用途，其中所述抗-hPG单克隆抗体与参考抗体竞争结合hPG，所述参考抗体选自：
a.单克隆抗体，其由SEQIDNO:59组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:63组成的轻链可变区序列；
b.单克隆抗体，其由SEQIDNO:60组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:64组成的轻链可变区序列；
c.单克隆抗体，其由SEQIDNO:12组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:13组成的轻链可变区序列；
d.单克隆抗体，其由SEQIDNO:61组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:65组成的轻链可变区序列；和
e.单克隆抗体，其由SEQIDNO:62组成的重链可变区序列和由SEQIDNO:66组成的轻链可变区序列。
4.权利要求1的用途，其中所述抗-hPG单克隆抗体是人源化的抗－hPG单克隆抗体。
5.权利要求4的用途，其中所述人源化的抗-hPG单克隆抗体包含VH和VL链，所述VH和VL链的序列选自下面的VH和VL序列组：
(i)如SEQIDNO:75所示的hVH8a和如SEQIDNO:76所示的hVL8a；
(ii)如SEQIDNO:77所示的hVH8b和如SEQIDNO:78所示的hVL8b；
(iii)如SEQIDNO:79所示的hVH8c和如SEQIDNO:76所示的hVL8c；
(iv)如SEQIDNO:80所示的hVH13a和如SEQIDNO:81所示的hVL13a；
(v)如SEQIDNO:82所示的hVH13b和如SEQIDNO:83所示的hVL13b；
(vi)如SEQIDNO:21所示的hVH3和如SEQIDNO:22所示的hVL3；
(vii)如SEQIDNO:23所示的hVH4和如SEQIDNO:24所示的hVL4；
(viii)如SEQIDNO:84所示的hVH16a和如SEQIDNO:85所示的hVL16a；
(ix)如SEQIDNO:86所示的hVH16b和如SEQIDNO:87所示的hVL16b；
(x)如SEQIDNO:88所示的hVH16c和如SEQIDNO:89所示的hVL16c；
(xi)如SEQIDNO:90所示的hVH19a和如SEQIDNO:91所示的hVL19a；
(xii)如SEQIDNO:92所示的hVH19b和如SEQIDNO:93所示的hVL19b；和
(xiii)如SEQIDNO:94所示的hVH19c和如SEQIDNO:95所示的hVL19c。
6.权利要求1－3任一项的用途，其中所述受试者具有与腺瘤性息肉相关的APC基因中的突变。
7.权利要求1－3任一项的用途，其中所述受试者具有家族性腺瘤性息肉。
8.权利要求1－3任一项的用途，其中所述受试者具有散发的腺瘤性息肉。
9.权利要求1－3任一项的用途，其中所述抗-hPG单克隆抗体被施用以辅助包含腺瘤性息肉的组织的外科切除术。
10.权利要求1－3任一项的用途，其中所述抗-hPG单克隆抗体被施用以辅助化学疗法。
11.权利要求1－3任一项的用途，其中所述抗-hPG单克隆抗体被施用以辅助用非甾体抗炎药进行的治疗。
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